子分类：
| 序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开（公告）号 | 公开（公告）日 | 发明人 |
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| 61 | 获得间充质干细胞的方法 | CN200580012239.X | 2005-04-04 | CN1961069A | 2007-05-09 | 亚历山大·S·台普利亚申 |
| 本发明涉及细胞生物学领域。详细地说，涉及从人类组织中获得间充质干细胞。本发明可能用于多种疾病的治疗。由于本发明，将有可能从人类组织中获得具有高均质性细胞悬液的间充质干细胞，因为用于从人类组织中获得间充质干细胞的方法包括将所述组织进行破碎并且用胶原酶在Dulbecco改进Eagle培养基中的溶液进行酶处理，利用裂解溶液除去红细胞，随后过滤所制得的悬液；使用脂肪组织或蜕膜或羊膜或绒毛膜胎盘基质作为人类组织，并先后利用包括100μm和10μm孔径的滤器进行过滤。在脂肪组织、胎盘蜕膜或羊膜的酶处理中使用I型胶原酶，而在绒毛膜胎盘基质的酶处理中使用IV型胶原酶。 | ||||||
| 62 | 血管化增强的移植构造物 | CN03815472.2 | 2003-05-01 | CN1684589A | 2005-10-19 | S·F·巴戴拉克 |
| 提供一种用于修复患病或受损组织的组织移植构造物。所述组织移植构造物包括选自膀胱粘膜下层和胃粘膜下层，及其提取物和水解产物的基质组分，加入的内皮细胞，以及可增强血管－样结构在移植构造物中形成开始的至少一种附加的预选的外源性细胞群。预选的细胞群可以是未－角化或角化的上皮细胞群或选自成纤维细胞、平滑肌细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、多－潜能祖细胞、周细胞、成骨细胞、和任何其它适宜细胞类型的中胚层来源的细胞群，优选以所修复组织为基础选择的细胞群。还提供了用于增强这些组织移植构造物的体内血管化和用于制备这些移植构造物的方法。 | ||||||
| 63 | 制备假胰岛的方法 | CN03806740.4 | 2003-03-21 | CN1643134A | 2005-07-20 | Y·梁; J·朱; L·斯维特; J·N·利文斯顿 |
| 本发明涉及制备假胰岛的方法。另外，本发明还涉及通过施用按照本发明的方法识别的化合物来治疗糖尿病和糖尿病相关病症的方法。 | ||||||
| 64 | 出生前诊断法 | CN98804908.2 | 1998-03-03 | CN1260046A | 2000-07-12 | 安·伯切尔; 罗伯特·休姆 |
| 公开了一种鉴定在包含母体血细胞和胚胎或胎儿红细胞或两者的样品中的胚胎或胎儿红细胞的方法;该方法包括确定哪个细胞或哪些细胞包含或表达成人肝成分。一种从包含母体血细胞和胚胎或胎儿红细胞或两者的样品中分离胚胎或胎儿红细胞的方法,该方法包括分离包含或表达成人肝的成分的细胞。一种确定胎儿异常的方法,该方法包括根据上面的方法鉴定或分离胚胎或胎儿细胞,并分析所述胚胎或早期胎儿细胞的所述异常。用于确定细胞是否包含或表达成人肝脏成分的装置在鉴定或分离胚胎或胎儿红细胞中的用途。 | ||||||
| 65 | 一种大鼠施旺细胞的分离及培养方法 | CN201610298585.9 | 2016-05-03 | CN107338221A | 2017-11-10 | 何刚; 张亚洲; 蒋敏; 齐来俊 |
| 本发明提供了一种大鼠施旺细胞的分离及培养方法，包括以下步骤：(1)组织处理器械消毒；(2)选取2～3周的雄性SD大鼠，断颈处死，用眼科剪剪去大鼠腿部被毛，截取坐骨神经，将组织放入预冷无菌含双抗的PBS液中洗涤数次除去血渍和外膜；(3)剪碎组织，并用预热的II型胶原酶和IV型胶原酶消化；(4)终止消化，离心，弃上清，加培养基重悬；(5)组织块贴壁法接种到6孔培养板培养；(6)孵育1～2h，置于37℃、5％CO2环境中培养；(7)细胞传代纯化；(8)细胞形态学观察与鉴定。本发明提供的一种大鼠施旺细胞的分离及培养方法，简单易操作，稳定，高效，获得的施旺细胞活力高，可用于建立体外实验模型细胞，满足大鼠施旺细胞实验的要求。 | ||||||
| 66 | 一种外泌体快速分离和纯化的试剂盒 | CN201610259316.1 | 2016-04-25 | CN107304413A | 2017-10-31 | 高博; 谢胜华; 宣之胜; 孙伟 |
| 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种外泌体快速分离和纯化的试剂盒，包括溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和纯化柱，共四部分组成，此外还公开了试剂盒的具体使用方法。本发明的试剂盒设计合理，与现有超速离心方法相比不需要反复离心处理，操作方便且节约时间和试剂成本。 | ||||||
| 67 | 一种NK细胞的制备方法 | CN201710729875.9 | 2017-08-23 | CN107267456A | 2017-10-20 | 赵明; 张锴; 宋志兵; 刘肖琳 |
| 本发明公开了一种NK细胞的制备方法，其包括：1)将血液样本和等体积的淋巴细胞分离液加入分离培养罐中进行离心分离以获得单个核细胞；2)对上述单个核细胞进行分选以纯化NK细胞；3)在分离培养罐中对NK细胞进行诱导培养；4)于分离培养罐内对NK细胞进行扩增培养；5)获得NK细胞终产品，进行洗涤和包装。该NK细胞的制备方法中，利用分离培养罐制备NK细胞，相比于现有技术中利用培养皿体外培养NK细胞的方式，其步骤规范，更便于实现NK细胞的大规模生产。 | ||||||
| 68 | 一种高效的人颊脂体脂肪干细胞的制备方法 | CN201710128469.7 | 2017-03-06 | CN107034181A | 2017-08-11 | 韦玉军; 陆宝石; 李航; 苏军; 吴远航 |
| 本发明公开了一种高效的人颊脂体脂肪干细胞的制备方法，具体步骤为：获得的颊脂体组织；把人颊脂体组织剪碎成1mm3的小块；消化；吹打上述细胞悬液4‑5次；采用PBS溶液重悬细胞；对细胞滤液计数；每1×107个细胞加50μL CD31磁珠；用BD IMag™Buffer把体系调整到1‑8×107个/ml细胞；上清细胞为CD31‑细胞；将上清液离心5min；将细胞置于培养箱中，用10mlDMEM培养基进行培养；细胞融合度达到80%以上后，吸干培养液；向培养瓶内加入胰蛋白酶‑EDTA溶液；采用高糖DMEM培养基洗3次；用DMEM培养基进行培养；细胞传至3代即可用于分化成神经细胞、软骨细胞、脂肪细胞等组织，或细胞移植，或传代至4代、5代进行冷冻保存。本发明具有细胞得率高、成本低等优点。 | ||||||
| 69 | 一种自体脂肪间充质干细胞定向分化为黑色素细胞的方法 | CN201710169785.9 | 2017-03-21 | CN106978386A | 2017-07-25 | 韦玉军; 陆宝石; 李航; 吴远航; 苏军 |
| 本发明公开了一种自体脂肪间充质干细胞定向分化为黑色素细胞的方法，具体步骤为：黑色素细胞条件培养基制备；脂肪间充质干细胞的制备；黑色素细胞定向分化，所述的人表皮黑色素细胞株和黑素细胞完全培养基均购自上海拜沃生物公司，所述的脂肪组织的体积为20cm3，所述的DMEM培养基中含10%（v/v）FBS和40U/ml硫酸庆大霉素。本发明具有分化效率高、易于取得等优点。 | ||||||
| 70 | 一种高效的人皮肤组织多能干细胞的制备方法 | CN201710176129.1 | 2017-03-23 | CN106884004A | 2017-06-23 | 韦玉军; 陆宝石; 李航; 吴远航; 苏军 |
| 本发明公开了一种高效的人皮肤组织多能干细胞的制备方法，具体步骤为：包被瓶制备：包被瓶置4℃冰箱中保存备用；皮肤干细胞制备：取脸颊或下巴皮肤组织，去除脂肪组织；组织块置于无菌平皿中，过夜消化；对真皮层小块消化；将上述细胞悬液用过滤器过滤；留用贴壁细胞；培养箱中培养；用吸管反复吹打瓶底，使细胞脱落；将上述细胞按1:3的比例分瓶传代，继续培养，细胞传至2‑5代，即可。本发明具有细胞得率高、分化效率高等优点。 | ||||||
| 71 | 一种胎盘造血干细胞的制备方法 | CN201710111925.7 | 2017-02-28 | CN106834230A | 2017-06-13 | 徐鹏; 章晟 |
| 本发明提供一种胎盘造血干细胞的制备方法，所述制备方法包括胎盘预处理、胎盘血收集、胎盘造血干细胞的提纯，所述制备方法得到的胎盘造血干细胞感染率低，细胞数量多，提取步骤操作简单。 | ||||||
| 72 | 一种中华鳖肺巨噬细胞的原代培养方法 | CN201710054441.3 | 2017-01-22 | CN106701675A | 2017-05-24 | 刘莉; 曹铮; 林锋; 卢淑娟 |
| 本发明公开了一种中华鳖肺巨噬细胞的原代培养方法，包括中华鳖完整肺巨噬细胞的分离及肺巨噬细胞的原代培养两大步骤。本发明操作简单，培养方便，培养成功率高，特别是冲洗离体肺组织，使得肺组织原代细胞分离培养容易方便，为中华鳖病毒研究提供有效的细胞介质。 | ||||||
| 73 | 一种改良原代地鼠肾细胞传代培养方法 | CN201611245716.3 | 2016-12-29 | CN106635960A | 2017-05-10 | 张涛; 戚凤春; 杨宇飞; 张瑞 |
| 本发明公开了一种改良原代地鼠肾细胞传代培养方法，选择活力旺盛且已培养成致密单层的原代地鼠肾细胞进行传代，洗去其上附着的组织块和残留血清，加入0.02% EDTA溶液，将从5~10个转瓶中收集的表层细胞合并备用；在收集表层细胞后的细胞瓶中添加消化液，作用30~60秒后弃去消化液，残留在细胞表面的消化液继续起消化作用，当内壁变得模糊，加生长液，使细胞分散在生长液中制得细胞悬液，将其与前期收集的表层细胞合并，补加适量生长液后分装，恒温培养至细胞长成单层，形成第一代传代细胞；将第一代传代细胞按以上步骤顺序操作，得到第二代传代细胞，依次类推，可得到五代满足疫苗生产的传代细胞。本发明传代方法可明显减缓细胞衰减，达到疫苗生产的要求。 | ||||||
| 74 | 一种高效的PD‑1‑CD8+T细胞的培养方法 | CN201710004365.5 | 2017-01-04 | CN106591232A | 2017-04-26 | 韦玉军; 陆宝石; 李航 |
| 本发明公开了一种高效的PD‑1‑CD8+T细胞的培养方法，具体步骤为：提取TIL细胞；将TIL细胞悬浮液，通过流式细胞分选仪筛选，获得纯化的PD‑1‑CD8+ T细胞；将纯化的PD‑1‑CD8+ T细胞加入到G‑Rex透气瓶中，用完全培养基进行培养，培养一周；快速扩增PD‑1‑CD8+ T细胞。本发明具有有效降低微生物污染率、扩增效率高、细胞毒活性高等优点。 | ||||||
| 75 | 一种原代小鼠胸主动脉血管内皮细胞的分离培养方法 | CN201611152814.2 | 2016-12-14 | CN106591217A | 2017-04-26 | 甘雪琦; 张玲 |
| 本发明提供了一种原代小鼠胸主动脉血管内皮细胞的分离培养方法，解决了现有技术中原代VECs体外培养难度较大，细胞活性较低，产量较少的问题。本发明包括：步骤1、获得小鼠胸主动脉段，对小鼠胸主动脉段进行分离纯化后制成主动脉环；步骤2、用Matrigel基质胶预处理培养容器底部；步骤3、将主动脉环接种到Matrigel基质胶表面，再在培养容器内加入含内皮细胞生长辅助因子和肝素的内皮细胞培养液进行培养；步骤4、培育3～7天后去除主动脉环，继续培育即可。本发明简便易行、经济适用，具有降低杂质细胞污染几率、提高细胞成活率和产量，使VECs具有高活性和高增殖率等优点。 | ||||||
| 76 | 一种皮肤间充质干细胞的分离及培养方法 | CN201611261493.X | 2016-12-30 | CN106520691A | 2017-03-22 | 马晓君 |
| 本发明公开了一种皮肤间充质干细胞的分离及培养方法，包括以下步骤：1)皮肤组织的获得；2)消化皮肤组织：向PBS溶剂中加入含有0.02％EDTA的0.05％胰蛋白酶溶液，在37℃消化10-20min,最后，加入含有10％FBS的培养基终止消化；3)皮肤干细胞获得；4)间充质干细胞培养：基础培养基为DMEM/F12,并加入青霉素、链霉素、谷氨酰胺、柠檬酸铁、烟酰胺、bFGF(基础成纤维细胞生长因子)、EGF(表皮细胞生长因子)和B27(抗原)添加剂，形成培养液。该分离及培养方法，分离容易，且能获得活性更高、数量更多的细胞，重现率很高。 | ||||||
| 77 | 一种兔黑色素细胞的体外分离培养方法 | CN201611066353.7 | 2016-11-24 | CN106520671A | 2017-03-22 | 陈阳; 穆琳; 赵博昊; 胡帅帅; 赵斌; 杨乃苏; 王曼曼; 郝晔; 朱杰; 吴信生 |
| 本发明涉及一种原代兔黑色素细胞的分离培养方法，该方法通过酶消化法分离兔黑色素细胞，经M254完全培养基培养后更换M254/HMGS培养基培养至汇合度达到80％～90％，再利用差速消化法去除其他细胞获得纯化的黑色素细胞。大大提高了黑色素细胞的纯度，通过细胞形态观察、L-DOPA染色、半定量、抗S-100免疫细胞化学染色法对培养的细胞进行鉴定，结果显示分离的原代黑色素细胞多呈树突状和细长的梭状，L-DOPA染色呈棕黑色，RT-PCR分析表明分离的细胞表达黑色素细胞的标志基因，S-100染色胞质呈棕色。 | ||||||
| 78 | 一种SD大鼠胰腺导管上皮细胞模型的构建方法 | CN201611038066.5 | 2016-11-23 | CN106520670A | 2017-03-22 | 覃蒙斌; 常仁杰; 梁志海; 唐国都 |
| 本发明公开了一种SD大鼠胰腺导管上皮细胞模型的构建方法，它包括大鼠，其特征在于还包括动物选择及麻醉、大鼠主胰管的外科分离、主胰管化学消化和细胞类型鉴定步骤。该构建方法根据SD大鼠的胰腺解剖结构直接肉眼下分离主胰管，对胰腺导管上皮细胞的分离获得率较高，所得的胰腺导管上皮细胞受到刺激较少，能稳定传代。方法简便易行，成功率高，为胰腺疾病的研究提供了来源丰富可靠的新型细胞模型。 | ||||||
| 79 | 一种何首乌叶原生质体的制备方法 | CN201611120704.8 | 2016-12-08 | CN106520667A | 2017-03-22 | 张俊 |
| 本发明涉及一种何首乌叶原生质体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：何首乌叶片经过质壁分离后切成0．5厘米宽的长条，转入到25％蔗糖溶液中放置8min，在35℃水浴锅中处理何首乌叶片30win，过滤后得到原生质体溶液；本发明所述方法制备的何首乌叶原生质体，活性强，融合效率高，可工业化生产，实用性强。 | ||||||
| 80 | 6种不同脑功能区脑神经干细胞的制备方法 | CN201510924836.5 | 2015-12-14 | CN106479979A | 2017-03-08 | 张晓南; 田增民; 陈虎; 张斌; 侍晓云; 吴芳春 |
| 本发明提供一种6种不同脑功能区脑神经干细胞的制备方法，该制备方法能够稳定地将大脑、小脑、中脑等功能区的神经干细胞从脑组织中分离、纯化并进行扩增，并且能够显著地提高各功能区神经干细胞的存活率，保持细胞的活率。 | ||||||
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