子分类：
| 序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开（公告）号 | 公开（公告）日 | 发明人 |
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| 81 | 一种匙吻鲟心脏细胞系的构建方法 | CN201610922222.8 | 2016-10-21 | CN106479959A | 2017-03-08 | 刘娟娟; 杜合军; 刘雪清; 饶军; 姜华; 汪成燕; 高勇; 陈磊 |
| 本发明属于细胞培养技术领域，涉及一种匙吻鲟心脏组织细胞系的构建方法所述方法具体步骤为：选取健康的匙吻鲟，将漂洗过的心脏组织，除去心耳，用杜氏磷酸盐缓冲液清洗数次，消化，然后加入过量的完全培养液终止消化，过滤，将滤液离心，弃上清液，用完全培养液悬浮沉淀细胞，培养。本发明构建的匙吻鲟心脏细胞系增殖速度快，可以连续传代，并可超低温冻存和复苏，既可为鲟鱼类种质资源保存的相关研究奠定技术基础，又可作为鲟鱼病毒病体外研究的理想材料。 | ||||||
| 82 | 过氧化氢诱导的猪脾细胞氧化应激模型的建立方法 | CN201610901262.4 | 2016-10-17 | CN106479958A | 2017-03-08 | 胡庭俊; 郝祝兵; 李春节; 韦英益; 尹丹; 杨剑; 谭红连 |
| 本发明公开了一种过氧化氢诱导的猪脾细胞氧化应激模型的建立方法，采用过氧化氢体外诱导处理猪脾细胞，过氧化氢浓度为50-450μM。与现有技术相比，本发明首次使用猪脾细胞作为过氧化氢诱导氧化应激模型的造模细胞，通过考察细胞死亡率和细胞内ROS水平确定了H2O2溶液的最佳使用浓度和细胞孵育时间，操作容易、成本较低，可帮助初次进行猪脾细胞制备和氧化应激模型的研究人员比较顺利的完成猪脾细胞的制备和氧化应激模型的建立。 | ||||||
| 83 | 分离细胞的微流体装置 | CN201580021793.8 | 2015-05-01 | CN106459863A | 2017-02-22 | E.迪法布里齐奥; G.佩罗兹齐洛; F.帕尔德奥; P.坎德洛罗 |
| 用于分离细胞的装置和方法包括允许细胞从第一室传送到第二室的膜。 | ||||||
| 84 | 脂肪组织的处理方法及间充质干细胞、处理后单个脂肪细胞和细胞外基质 | CN201610798006.7 | 2016-08-31 | CN106399234A | 2017-02-15 | 肖锷; 刘筱箐 |
| 本发明提供一种脂肪组织的处理方法及间充质干细胞、处理后单个脂肪细胞和细胞外基质，所述处理方法包括以下步骤：破碎步骤：将脂肪组织进行机械破碎，得到肉糜状的脂肪组织；消化步骤：采用消化剂对肉糜状的脂肪组织进行消化处理，从所述肉糜状的脂肪组织中释放出细胞，得到间充质干细胞、细胞外基质和/或处理后单个脂肪细胞；其中，所述消化剂含有注射用胶原酶，优选地，所述消化剂中还包括尿激酶。本发明的脂肪组织的处理方法，操作时间短，处理的效率高。进一步地，由于制备过程使用的是CFDA已经批准的临床使用的药物，因此处理过程中不会引入热原、内毒素、异种动物血清等有害物质，可以为以后的临床应用提供安全保障。 | ||||||
| 85 | 一种免疫磁珠及其制备方法 | CN201610787087.0 | 2016-08-31 | CN106366198A | 2017-02-01 | 蔡红东; 刘关; 陈昌岳; 张祥林 |
| 本发明提供了一种免疫磁珠及其制备方法，包括磁性微球部分和生物配基部分，所述免疫磁珠的结构式为：A-NH-N＝CH-B，其中A表示磁性微球，B表示生物配基，或者A表示生物配基，B表示磁性微球。本发明的免疫磁珠性质稳定，而且磁性好，磁性微球与生物配基进行化学偶联，反应具有高度特异性，避免了内部交联，偶联效率高。同时，本发明的制备方法简单，反应条件温和，使生物配基可以保留生物活性。本发明原料简单易得，成本低，工艺步骤简单，具有很强的实用性。 | ||||||
| 86 | 一种促进人羊膜间充质干细胞向软骨细胞分化的方法及应用 | CN201610941208.2 | 2016-11-02 | CN106282101A | 2017-01-04 | 肖建辉; 张清芳; 刘如明 |
| 本发明涉及一种促进人羊膜间充质干细胞向软骨细胞分化的方法，该方法为在人羊膜间充质干细胞中添加诱导组合物，所述诱导组合物包括0.01～2g/L透明质酸和0～100mg/L抗坏血酸。本发明与常规诱导方法相比，可显著提高人羊膜间充质干细胞向软骨细胞分化，糖胺聚糖和II型胶原蛋白表达呈强阳性，Col2α1、ACAN和Sox9等软骨形成相关基因和蛋白的表达亦明显上调，能明显提高人羊膜间充质干细胞向软骨细胞分化的效率。本发明中诱导组合物可用于人间充质干细胞向软骨细胞分化中以及在软骨损伤疾病中。 | ||||||
| 87 | 一种鹅等级前卵泡颗粒细胞的分离方法 | CN201610653135.7 | 2016-08-10 | CN106282091A | 2017-01-04 | 孙永峰; 武惠岩; 胡静涛; 隋玉健; 杨辉; 柳俭强; 王子遒; 路洪涛; 刘畅 |
| 本发明公开了一种鹅等级前卵泡颗粒细胞的分离方法，包括以下步骤：取产蛋高峰期鹅，处死，清理腹部羽毛后进行酒精消毒，打开腹腔，取出整个卵巢，将取得的卵泡预冷并去血污，漂洗后转移到无菌间；剥离干净卵泡外膜、结缔组织及血管网；将剥离后的卵泡放入新的平皿中，用手术刀在卵泡表面划出切口，将颗粒细胞膜层取出，漂洗干净后剪碎，置于离心管中加培养液，用移液枪反复吹打使其分离；消化；消化结束，加入含血清的培养基终止消化；过滤，收集滤液；沉淀室温离心；弃上清，接种，静置培养。本发明所分离出的颗粒细胞形态，大小均一，呈圆形或椭圆形，且结构完整，边缘分明，坏死细胞数量较少，所分离的颗粒细胞处于健康状态。 | ||||||
| 88 | 一种提高鸡胚孵化期骨骼肌卫星细胞增殖活性的方法 | CN201610633774.7 | 2016-08-04 | CN106259162A | 2017-01-04 | 陈耀星; 王子旭; 曹静; 王瑶; 白欣洁; 杨秀娟; 王团结; 董玉兰 |
| 本发明属于鸡胚孵化场环境光照技术领域，具体涉及一种提高鸡胚孵化期骨骼肌卫星细胞增殖活性的方法。具体为：于鸡胚孵化期采用不同颜色的光照进行孵化。所述不同颜色的光照为白色、红色、绿色和蓝色，优选为绿色。孵化温度保持在37±0.5℃，湿度保持在50％-60％。光照制度为24h全光照，光照强度为15lx。本发明通过提高鸡胚孵化期骨骼肌卫星细胞增殖活性，有效提高了肉鸡出壳时的体重，以及出壳后骨骼肌抗氧化水平，改善了肉品质。 | ||||||
| 89 | 一种恶性腹水来源的TIL细胞的分离培养方法 | CN201610633803.X | 2016-08-04 | CN106244538A | 2016-12-21 | 武宁; 谢志明 |
| 本发明涉及一种恶性腹水来源的TIL细胞的分离培养方法，利用PD-1、LAG-3和TIM-3中的至少一种作为分离TIL细胞中肿瘤特异性T淋巴细胞的标记，并结合免疫磁珠技术将肿瘤特异性T淋巴细胞从TIL细胞群中分离出来，再经过体外高效扩增，获得高肿瘤杀伤活性的肿瘤特异性TIL细胞。本发明使肿瘤特异性TIL细胞的分离培养操作流程更简单，明显缩短分离培养时间，成本低，便于推广使用，另外分离得到的肿瘤特异性TIL细胞的肿瘤杀伤活性更强。 | ||||||
| 90 | 高效获取脂肪间充质干细胞的培养方法 | CN201610605996.8 | 2016-07-29 | CN106222134A | 2016-12-14 | 王晶; 李亚平; 谷广其; 邱丽媛; 赵进军; 何文丽 |
| 本发明涉及一种高效获取脂肪间充质干细胞的培养方法，为解决现有技术获得细胞活率低问题，包括以下步骤脂肪间充质干细胞的分离：脂肪组织用D.Hanks冲洗，并检测确保无污染，加入数倍体积的I型胶原酶和trypLETM消化酶溶液混合物，进行37℃、旋转振荡消化数十分钟后停止酶解；离心弃去上清液；并用筛网过滤，得脂肪间充质干细胞悬液；脂肪间充质干细胞的培养：将上述步骤获得的脂肪间充质干细胞悬液接种到培养瓶无血培养基中，进行原代细胞培养，培养期间多次倒置相差显微镜观察，并更换新鲜培养基；细胞培养到80-90％融合时，用trypLETM消化后扩展接种到新培养瓶中培养，经过数次传代，得到纯化的间充质干细胞。具有消化更充分，细胞得率更高，保护间充质干细胞不受损伤，高活率的优点。 | ||||||
| 91 | 一种小菜蛾胚胎细胞系的培养方法及其应用 | CN201610679203.7 | 2016-08-16 | CN106222128A | 2016-12-14 | 陈学新; 王泽华; 时敏; 邹佳妮 |
| 本发明公开了一种小菜蛾胚胎细胞系的培养方法及其应用，该培养方法包括以下步骤：取小菜蛾胚胎期的蛾卵，消毒处理后，破碎，过筛，获得小菜蛾的胚胎细胞；将所述胚胎细胞置于细胞培养基中，进行原代培养和传代培养，获得所述小菜蛾胚胎细胞系。本发明采用小菜蛾胚胎期的蛾卵进行原代培养和传代培养，获得的小菜蛾胚胎细胞系，能够应用于判断不同药剂对小菜蛾毒性的高低，实现药剂的筛选，简化了现有药剂筛选的步骤，降低了药剂筛选的假阳性率。 | ||||||
| 92 | 一种自体脂肪源干细胞用于美容抗衰的制备方法 | CN201610570757.3 | 2016-07-19 | CN106190967A | 2016-12-07 | 张正亮 |
| 本发明公开一种自体脂肪源干细胞用于美容抗衰的制备方法，包括下述步骤：获取腹部皮下正常脂肪组织，用PBS冲洗，再将脂肪组织剪碎，然后用I型胶原酶消化一点时间；消化后，加入PBS混匀过滤，加入含人自体血清的DMEM培养液，放置在培养箱中培养，间隔一定时间用新鲜培养液进行换液一次，细胞从组织块中生长，为原代自体脂肪源干细胞；当原代细胞达到一定融合度时，再用PBS冲洗，然后加入胰酶和EDTA消化液，待细胞悬浮后，加入人自体血清终止消化，再加入生理盐水；将上述细胞悬液移至离心管中离心，收集脂肪干细胞，调整细胞密度；通过本发明的方法，通过获取的自体脂肪干细胞和自体富含血小板的血浆，在琼脂糖中制备成美容抗衰的含自体脂肪源干细胞。 | ||||||
| 93 | 一种上皮细胞的扩增制备方法 | CN201610569366.X | 2016-07-19 | CN106190952A | 2016-12-07 | 张正亮 |
| 本发明公开了一种上皮细胞的扩增制备方法，按照如下步骤进行：无菌条件下将奶牛乳腺组织块洗涤并剪碎，加入胰酶液消化一定时间，之后将奶牛乳腺组织悬液离心后弃上清液，加入上皮细胞培养液中重悬后过滤，将过滤后的培养液接种培养皿中，置于培养箱中培养；原代培养60-72h后吸去培养液，加入胰蛋白酶-EDTA溶液消化后离心并接种于培养皿中，置于培养箱中进行传代培养。本发明中提出的一种上皮细胞培养液，在培养液中加入IGF-Ⅱ、催乳素、孕酮和亚油酸，IGF-Ⅱ与催乳素可以刺激β-乳球蛋白和β-酪蛋白的表达，孕酮可以促进乳腺组织发育成熟，维持妊娠和泌乳，亚油酸可以诱导乳腺上皮细胞的生物活性，所配置的培养液对上皮细胞的体外培养具有促进作用。 | ||||||
| 94 | 可从机体组织分离的多能干细胞 | CN201080041908.7 | 2010-07-15 | CN102858951B | 2016-12-07 | 出泽真理; 藤吉好则; 锅岛阳一; 若尾昌平 |
| 本发明的目的是提供从机体组织直接获得多能干细胞的方法及由此得到的多能干细胞。本发明涉及可从机体组织分离的SSEA-3(+)多能干细胞。 | ||||||
| 95 | 抑瘤素M在制备促进间充质干细胞体外定向分化为骨细胞的产品中的应用 | CN201610504749.9 | 2016-06-30 | CN106119190A | 2016-11-16 | 孔宁; 李云华; 孙飞 |
| 本发明属于细胞生物技术及骨组织工程技术领域，具体涉及抑瘤素M在间充质干细胞体外成骨分化中的应用。本发明通过实验证明，抑瘤素M在间充质干细胞体外成骨分化中具有可以上调成骨分化标志物ALP、Runx2、OPN和OCN在mRNA、蛋白水平的表达以及钙离子沉积，促进间充质干细胞定向分化为骨细胞的功能。抑瘤素M配合间充质干细胞在制备治疗骨损伤药物中的应用研究为开发制备治疗骨质疏松、骨折、骨缺损、骨创伤等疾病的药物提供物质基础。 | ||||||
| 96 | 一种农作物花培孢子悬浮液制备装置与方法 | CN201610495809.5 | 2016-06-29 | CN106119076A | 2016-11-16 | 安剑石; 林少会; 许建中 |
| 本发明公开一种农作物花培孢子悬浮液制备装置与方法，经过消毒灭菌，采用离心的方法提取离体花药，制备得到农作物花培孢子悬浮液。本发明能够快捷分离提取出农作物花药，并且保证分离后农作物花药维持活力且无污染适宜离体培养，不需要人工剪颖，对操作人员的专业性要求降低，提高工作效率，降低人力资源成本，适于大规模获取农作物花药进行单倍体育种，在农作物育种领域具有应用前景。 | ||||||
| 97 | 一种大量人外周血PBMC快速分离方法 | CN201610483118.3 | 2016-06-24 | CN106085954A | 2016-11-09 | 钱鹏; 赵依妮; 许国贞; 刘振云 |
| 本发明公开了一种大量人外周血PBMC快速分离方法，包括如下步骤：将人外周血转入离心管中离心；吸取灰黄层，向其中加入生理盐水稀释；将得到的产物送入含有淋巴细胞分离液的离心管中，其中S2得到的产物位于淋巴细胞分离液上层；离心分离，吸取中间白膜层，洗涤，离心弃上清，得到PBMC。本发明对于大量人外周血PBMC分离，不仅可减少操作步骤，且节约了操作时间、试剂耗材及试剂用量，有利于PBMC的分离和细胞的活率。 | ||||||
| 98 | 一种髓核细胞分离纯化方法 | CN201610371318.X | 2016-05-30 | CN106047801A | 2016-10-26 | 朱艳霞; 周光前 |
| 本发明公开了一种髓核细胞分离纯化方法，包括：冲洗步骤，将获取的椎间盘髓核组织用PBS冲洗干净；剪碎步骤，将所述组织剪碎；消化步骤，加入2倍体积的消化液，消化液是体积比为1：1的0.5％II型胶原酶和0.25％胰蛋白酶混合液，在恒温水浴箱震荡消化设定时长，静置后吸取上清液，加入含体积分数10％FBS的DMEM培养基终止消化，剩余组织加所述消化液继续消化，如此重复多次；收集步骤，将终止消化后的液体离心，离心转速为1000～1500rpm，离心时间为5～10min，去上清，用含体积分数10％FBS的DMEM培养基重悬髓核细胞沉淀。本方法分离纯化过程简单快捷，消化过程温和，消化时间短，所需仪器设备简单；所获得的髓核细胞量大，存活率高，更易于在培养瓶内贴壁、附着、延伸，细胞活性比较强。 | ||||||
| 99 | 一种小鼠甲状腺间充质干细胞及其分离提取方法 | CN201610416547.9 | 2016-06-14 | CN106011057A | 2016-10-12 | 张毅; 倪永青; 郑荣秀; 李雪; 汪李慧; 刘元林; 王洋; 杨焕凤 |
| 本发明公开了属于间充质干细胞分离、鉴定及培养技术领域的一种小鼠甲状腺间充质干细胞及其分离提取方法。解剖4‑5周龄的C57BL/6小鼠并分离出甲状腺组织，获得的甲状腺组织经消化后进行原代培养，然后再进行传代培养，最终获得小鼠甲状腺间充质干细胞。该分离提取方法操作简单、方便实用，包括了培养小鼠甲状腺间充质干细胞的优选培养基和培养条件，建立了稳定的提取组织特异性来源间充质干细胞的方法。采用此方法获得的小鼠甲状腺间充质干细胞符合间充质干细胞的一般鉴定标准及生物学性能，在治疗甲状腺相关疾病中具有广泛的应用前景。 | ||||||
| 100 | 一种高得率人原代软骨细胞制备方法 | CN201610508748.1 | 2016-06-29 | CN106011055A | 2016-10-12 | 许学猛 |
| 本发明属于细胞体外培养领域，具体公开了一种高得率人原代软骨细胞制备方法。所述方法包括以下步骤：获取软骨组织，以眼科剪刀将软骨组织剪碎；加入胰酶消化，吸弃上清液；加入II型胶原酶消化过夜后，过滤，加入培养基终止消化，1000‑1500rpm离心5min，获取软骨细胞沉淀后种植于培养皿中培养，得到高得率人原代软骨细胞。本发明主要在于软骨组织块的剪碎和离心速度上进行改进。本发明通过将离心转速提高至1000‑1500rpm，既不至于破坏软骨细胞，又极大地提高了软骨细胞的得率。与传统的软骨细胞制备方法相比，本发明方法在软骨细胞的得率上提高了约3.55倍，且经实验验证所得软骨细胞有良好的细胞形态。 | ||||||
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