| 序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开（公告）号 | 公开（公告）日 | 发明人 |
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| 41 | 降低了高表达基因来源的cDNA克隆含有率的cDNA文库的制备方法 | CN200980132279.6 | 2009-08-25 | CN102124106A | 2011-07-13 | 大床国世; 杉山雅英; 加藤诚志 |
| 本发明提供一种有效地制备降低了高表达基因来源的cDNA克隆含有率的cDNA文库的方法。在使用具有寡脱氧胸苷酸的双链DNA引物、并且以mRNA为模板的cDNA文库的制备方法中，通过使具有结合到高表达的目的基因的mRNA、且阻止由逆转录酶而引起的cDNA延伸反应的特性的探针共存，从而降低cDNA文库中高表达基因来源的cDNA克隆的比例。 | ||||||
| 42 | 通过突变CDR和/或FR位点提供改进的免疫球蛋白序列 | CN200880105407.3 | 2008-07-03 | CN101802009A | 2010-08-11 | 约斯特·亚历山大·科尔克曼 |
| 本发明涉及提供改进的氨基酸序列的方法和技术，所述改进的氨基酸序列可以用作单抗原结合结构域。特别地，本发明涉及用于提供可以用作单抗原结合结构域的改进的氨基酸序列的方法和技术，所述单抗原结合结构域包括至少一种免疫球蛋白序列或基本由至少一种免疫球蛋白序列组成。更加具体地，本文提供的氨基酸序列可以包括至少一种可变结构域序列或其适合的片段或基本由其组成，如至少一种轻链可变结构域序列(例如，VL-序列)或其适合的片段，或至少一种重链可变结构域序列(例如，VH-序列或VHH序列)或其适合的片段。 | ||||||
| 43 | 改良的用于二硫键形成的方法 | CN200880101913.5 | 2008-08-21 | CN101772574A | 2010-07-07 | 乔瑟夫·普拉斯勒; 伊温妮·斯塔克 |
| 本发明涉及分子间二硫键的形成方法，包括这些方法中使用的(多)肽/蛋白质、核酸、载体、宿主细胞和噬菌体。此外，本发明涉及该方法用于改良(多)肽/蛋白质在噬菌体颗粒的表面上的展示的用途。 | ||||||
| 44 | PCR高通量构建siRNA全位点分子库制备方法 | CN200710024217.6 | 2007-07-23 | CN100570022C | 2009-12-16 | 朱远源 |
| 本发明公开了一种PCR高通量构建siRNA全位点分子库制备方法，包括环状磷酸接头-1连接、单引物PCR扩增、III型限制性内切酶消化、粘性补平、与环状磷酸接头-2连接、双引物PCR扩增、FokI消化、克隆到表达载体等步骤。本发明解决了以III型限制性内切酶介导的PCR高通量构建siRNA全位点分子库制备方法，由此产生的siRNA功能片断可控性的分布在19-23bp，这样可完全模仿体内自然的siRNA分子长度多样性，适用于RNAi基因治疗最佳靶点的筛选，克服了目前其它siRNA分子库构建方法存在的瓶颈和盲点。 | ||||||
| 45 | 通过随机片段化和重装配进行的DNA诱变 | CN95191679.3 | 1995-02-17 | CN1145641A | 1997-03-19 | 威利姆·P·C·斯泰莫; 安德利亚斯·克拉默瑞 |
| 描述了随机片段化后重装配DNA的方法，及其在体外、或体内用于核酸序列突变的应用。具体地讲，描述了生产编码突变蛋白质的核酸片段或多聚核苷酸的方法。本发明也涉及突变、杂合和选择的循环的方法，该方法使蛋白质在体内或体外发生定向分子进化。 | ||||||
| 46 | 具有自身抗体或类似抗自身抗体的抗体的化合物及其制备方法 | CN201610192471.6 | 2016-03-30 | CN107286239A | 2017-10-24 | 陈思锋; 薛蓉; 应天雷 |
| 本发明属于生物医学技术领域，涉及自身抗原及自身抗体的特异性结合物制备的新方法。具体涉及自身抗体及其类似物的制备、用自身抗体或者其类似物作为抗原制备获得抗自身抗体的抗体及其类似物方法以及抗人胰岛素自身抗体和抗胰岛素自身抗体的抗体及其类似物的制备方法。本发明提供了一类制备克隆化自身抗体或者抗自身抗体的抗体的肽类化合物的制备方法及所制备的自身抗体的特异性结合物与自身抗体结合能力的效果评定。免疫试验证明本发明制备的自身抗体或者抗自身抗体的抗体的特异性结合物具有单克隆抗体的理化特征，并且抗自身抗体的抗体的特异性结合物可以有效地结合自身抗体。 | ||||||
| 47 | 一种定量高通量测序文库的制备方法及其配套试剂盒 | CN201710552185.0 | 2017-07-07 | CN107217052A | 2017-09-29 | 李鑫辉; 王琪; 邵志峰 |
| 本发明提供了一种定量高通量测序文库的制备方法及其配套试剂盒，具体地，本发明提供了一种衔接子，所述衔接子具有式I或II所示的结构：各式中，S1为任选地引导部(N)m，N为A、T、G、C中任一碱基，m为1‑150的正整数；pS1为磷酸化的S1；S2为茎部1，具有SEQ ID NO.:1所示的核苷酸序列；S3为环部，其中含有至少一个碱基U；S4为茎部2，具有SEQ ID NO.:2所示的核苷酸序列；S2与S4完全互补或部分互补；S5为无或与引导部S1互补的延伸部；S6为无或含有至少一个碱基T的结合部；若S5为无，则S6为无；“─”为化学键。5'‑S1─S2─S3─S4─S5─S6‑3' (I)5'‑pS1─S2─S3─S4─S5─S6‑3' (II)。 | ||||||
| 48 | 一种基于Crispr/cas9的捕获基因组目标序列的方法及其在高通量测序中的应用 | CN201710589991.5 | 2017-07-19 | CN107190008A | 2017-09-22 | 郭良让; 王德华; 张佩琢 |
| 本发明公开了一种基于Crispr/cas9的捕获基因组目标序列的方法及其在高通量测序中的应用。本发明提供了一种基于Crispr/cas9系统从基因组DNA中捕获目标基因序列的方法：1)、根据目标基因序列设计合成多个gRNA；2)将用所述多个gRNA和所述cas9酶对所述基因组DNA进行切割反应，得到含有多个100‑300bp的片段化产物的切割产物；3)捕获所述切割产物中的目标基因序列的多个100‑300bp的片段化产物。本发明通过基于CRISPR基因编辑捕获靶序列，可用于高通量测序，适用于有家族遗传史的特定人群的筛查和大众体检市场等。 | ||||||
| 49 | 一种BRCA1/2基因检测文库的构建方法和试剂盒 | CN201710221219.8 | 2017-04-06 | CN106987905A | 2017-07-28 | 李红梅; 叶明芝; 李世勇; 苏孟媛 |
| 本发明公开了一种BRCA1/2基因检测文库的构建方法和试剂盒，该方法包括：在DNA片段化及末端修复反应体系中，在打断酶、末端修复酶的作用下，将均一化的DNA样本片段化并末端修复；在DNA连接酶的作用下，将上一步所得的产物与接头序列连接；以上一步所得的接头连接产物为模板，在DNA聚合酶的作用下，使用接头序列的引物进行PCR扩增；使用包含BRCA1/2基因的探针序列与上一步的产物进行杂交以捕获含有BRCA1/2基因的DNA片段，并洗脱以获取杂交捕获产物；在连接酶的作用下，使杂交捕获产物的单链实现环化，得到BRCA1/2基因检测文库。本发明的建库步骤简便快速，有效降低成本，减少工作量，变异类型全面、准确、通量高。 | ||||||
| 50 | 构建的一个南极乔治王岛土壤宏基因组文库 | CN201510947454.4 | 2015-12-17 | CN106894094A | 2017-06-27 | 李静; 官颖颖; 王晶晶 |
| 本发明涉及土壤微生物和分子生物学等领域，尤其是从南极乔治王岛土壤中分离纯化出土壤微生物大约40kb的大片段DNA，连接到合适的载体中构建宏基因组文库。该文库中包含有南极乔治王岛土壤中原核和真核微生物各种染色体内部基因信息。本发明针对南极土壤中蕴含的丰富基因资源，利用现代分子生物技术方法从南极土壤中分离微生物大片段DNA并连接到宏基因组载体当中，在未培养的状态下直接获得了南极土壤生态环境中各种微生物资源。该文库可用于筛选各种不同南极土壤微生物资源基因等。 | ||||||
| 51 | 一种适用于高通量测序中PCR‑Sort‑PCR文库富集方法 | CN201710232989.2 | 2017-04-11 | CN106868002A | 2017-06-20 | 曹振龙; 邢红兵; 刘少卿; 彭德镇 |
| 本发明公开一种适用于高通量测序中PCR‑Sort‑PCR文库富集方法，包括以下步骤：(1)文库构建过程中，接头连接产物纯化后，开始首轮PCR反应；(2)在首轮PCR之后，所得核酸进行纯化或者片段分选；(3)以首轮PCR纯化产物或者片段分选产物为模板进行第二轮PCR反应。在高通量测序中，随着该技术的发展，面临的样品问题越来越严重，主要表现在：样品总量越来越少，复杂度越来越大。相对而言，样品量是主要的限制因素。在获得更多样品总量的不可能的基础上，如何顺利完成高通量测序就显得尤为重要，本专利的文库富集技术，在文库构建过程中解决样品总量不足的问题，能够获得文库片段较为集中、产量较高的文库，同时保证了样品的丰度。 | ||||||
| 52 | 一种从胸水中提取cfDNA的方法、试剂盒以及构建的cfDNA文库 | CN201710117869.8 | 2017-03-01 | CN106867996A | 2017-06-20 | 邵阳; 汪笑男; 吴雪; 王富锋; 包华; 刘一川 |
| 本发明涉及一种从胸水样本中提取cfDNA，用于构建高通量测序文库的方法，属于基因检测技术领域。本发明首次成功地从胸水中提取到了cfDNA，经验证可作为高通量测序文库构建的样本来源，并且可以成为血浆cfDNA 的一种有效补充；此外，该方法中通过对胸水样本中cfDNA大小片段分离后，使得胸水样本中的cfDNA纯度更高，使其更适合于DNA文库的构建，更利于后期突变的检出，可以解决常规仅通过血浆提取cfDNA建库的样本单一性和检出率问题。 | ||||||
| 53 | 一种构建多样品全长转录组混合文库的方法 | CN201611088940.6 | 2016-11-30 | CN106754870A | 2017-05-31 | 方涛 |
| 本发明涉及一种构建多样品全长转录组混合文库的方法，其在逆转录过程中使用带有鉴别标签的引物分别对不同样品中的mRNA进行逆转录，合成cDNA，然后将所述来自不同样品中的cDNA混合并进行处理得到所述文库。本发明的方法通过在逆转录引物中加入一段特异的标签序列，使得逆转录产物带上特有的标签，在对不同样品使用带有不同标签序列的引物逆转录以及后续PCR扩增后，都可通过该标签来鉴别逆转录产物和PCR产物初始来自于哪个样品，从而实现混合样品建库。 | ||||||
| 54 | 高效检测样本中的ctDNA的方法 | CN201710034984.9 | 2017-01-17 | CN106544341A | 2017-03-29 | 任军; 耿荷芳; 陆思嘉 |
| 本发明提供了一种高效检测样本中的ctDNA的方法，具体地，本发明的方法可在极低的核酸浓度下，将游离DNA碎片自环化，其中ctDNA因片段较短而有更高的自环化率，随后用特定环化优先扩增或扩增建库方法可获得较高效率的扩增，得到大量的对应于ctDNA的扩增产物，从而获得非常高的检测灵敏度和特异性。 | ||||||
| 55 | 一种用于高通量测序检测的药物基因组SNP变异文库的构建方法及其应用 | CN201610871434.8 | 2016-09-30 | CN106498036A | 2017-03-15 | 陈琰; 郭飞飞 |
| 本发明公开了一种用于高通量测序检测药物基因组SNP变异文库的构建方法，其特征在于：覆盖人类基因VKORC1、UGT1A1、HLA-A、HLA-B、TPMT、NAT1、NAT2、G6PD、F5、F2、IFNL3、APOE、COMT、CYP1A2、CYP2B6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A5、MTFHR、SLCO1B1、DPYD上的总共85遗传性SNP位点。本发明的构建方法针对多个靶序列进行单管，快速完成文库的构建，整个文库构建过程仅需要2～3小时，手动时间仅仅需要15～30分钟即可，结合高通量测序平台可以十分有效的解决目前对于临床上心脑血管疾病中临床样本基础上需要对多基因、多靶点检测这一难点，且成本低廉。 | ||||||
| 56 | 一种用于构建微生物细菌16s rDNA可变区测序文库的扩增子引物及构建方法 | CN201610954147.3 | 2016-11-03 | CN106497926A | 2017-03-15 | 钟嘉泳; 张弓; 赵盼盼; 王旭; 孙黎; 金静洁 |
| 本发明涉及一种用于构建微生物细菌16s rDNA可变区测序文库的扩增子引物及构建方法，引物由上游引物和下游引物构成，上游引物包括第一接头序列、第一测序引物序列、第一随机碱基序列和上游特异性靶序列引物；下游引物包括第二接头序列、标签序列、第二测序引物序列、第二随机碱基序列和下游特异性靶序列引物。并且采用所述引物可对微生物细菌16s rDNA进行一步法扩增子构建可变区测序文库。本发明增加文库复杂度，保证测序质量，避免了加入PhiX文库浪费测序通量；且本发明扩增效率高，不容易出现二聚体，能够准确快捷、成本低的进行细菌种群的鉴定。 | ||||||
| 57 | 一种高通量测序检测无创亲子鉴定的方法 | CN201610922551.2 | 2016-10-19 | CN106399535A | 2017-02-15 | 吴卫卫; 赵晓芳; 江岩; 朱天媛; 侯正强 |
| 本发明公开一种高通量测序检测无创亲子鉴定的方法，包括以下步骤：提取基因组DNA，包括提取孕妇新鲜血液中的胎儿游离DNA、提取孕妇DNA、提取疑似父亲的DNA；采用含有多个SNP位点的扩增子试剂盒进行PCR扩增，分别对胎儿游离DNA、孕妇DNA、疑似父亲的DNA进行富集；采用文库构建试剂盒对纯化好的多重PCR扩增产物进行文库构建；采用实时荧光定量PCR和Agilent 2100对构建好的文库进行质量控制，为上机测序做准备；测序，采用软件对上机测序结果进行生物信息学分析，鉴定出是否具有亲缘关系。本发明所述方法具有无创性、安全性、通量高、成本低等优点。 | ||||||
| 58 | 一种基于illumina二代测序平台的超快速DNA文库构建试剂盒 | CN201610842957.X | 2016-09-23 | CN106283202A | 2017-01-04 | 蒋国成; 陈旭; 陈刚 |
| 本发明涉及一种基于illumina二代测序平台的DNA文库构建试剂盒，属于体外核酸检测领域。所述试剂盒末端补平与加dA尾一步完成，无中间纯化步骤可直接进行Adapter连接，且只需20分钟完成末端补平及加A反应。与一般建库方法相比，文库构建时间短、产量高且后期磁珠消耗少。另外采用高保真DNA聚合酶进行文库富集，无偏好的PCR扩增，扩大了序列的覆盖区域，可高效制备用于illumina二代测序平台的DNA文库。 | ||||||
| 59 | 人源性抗胰淀素抗体及其制备方法 | CN201610768828.0 | 2016-08-31 | CN106279414A | 2017-01-04 | 朱铁虹; 公倩; 李常颖; 畅继武; 甄云凤 |
| 本发明公开了一种人源性抗胰淀素抗体及其制备方法，属于免疫球蛋白领域。本发明所述抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；重链可变区DNA序列如SEQ ID NO：3所示，轻链可变区DNA序列如SEQ ID NO：4所示；重链基因为IgG1亚类VH3基因家族，轻链基因为Lambda基因家族。本发明通过建立高容量的噬菌体抗菌库筛选出了人源性胰淀素抗体，并且该抗体具有良好的抗原特异性和抗原结合活性，为进一步的生产胰淀素检测试剂盒提供了保障，具有广阔的应用前景。 | ||||||
| 60 | 一种利用自体健康状态时微生物构建以用于菌群移植的菌群库的方法 | CN201610531690.2 | 2016-07-07 | CN106192020A | 2016-12-07 | 刘红; 郝梓凯; 谢倍珍; 赵文颖; 李乐园 |
| 一种利用自体健康状态时微生物构建以用于菌群移植的菌群库的方法，其操作步骤如下：1、储户信息采集及健康状态的确认；2、自体相关部位微生物菌群的采集；3、微生物菌群多样性分析；4、微生物菌群的保存；5、微生物菌群中益生菌的分离保存；6、建库及库的信息化管理。利用自体健康状态时保存的微生物进行移植治疗疾病、保健等，相比移植他人的微生物，具有心理接受性强、无免疫排斥、无伦理争议等优点。健康人自体微生物菌群库的建立为未来个性化精准医疗、保健等提供基础。 | ||||||
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