序号 专利名 申请号 申请日 公开(公告)号 公开(公告)日 发明人
1 基于高通量测序均一化多靶标文库构建的方法及试剂 CN201710893784.9 2017-09-28 CN107513570A 2017-12-26 孙虎林
发明涉及高通量测序均一化多靶标文库构建的方法及试剂盒。通过以嵌套式基因特异性引物,在初阶PCR阶段富集靶标,在二阶PCR阶段使用通用引物扩增反应体系内的所有靶标,使靶标能够均一化扩增,降低因PCR引物扩增效率的差异导致的产量差异。
2 一种大量组织、细胞样本mRNA的分子条形码标记、文库构建、测序的方法 CN201710472582.7 2017-06-20 CN107502607A 2017-12-22 欧阳宏伟; 吴兵兵; 李余; 潘宗友; 安晟锐; 刘怡孝; 邹晓晖
发明涉及一种大量组织、细胞样本mRNA的分子条形码标记、文库构建、测序的方法。能够精准地将提取的每个样本mRNA都标记上独特的分子条形码,并通过高效的逆转录、合成第二条链将每个样本的mRNA转换成带有独特分子条形码标签的双链DNA,随后通过优化的文库构建方法,可将大量标记了分子条形码的样本混合后,实现高通量样本文库构建及二代测序检测。
3 适用于单细胞基因组甲基化测序的文库建立方法及其应用 CN201710864047.6 2017-09-22 CN107488725A 2017-12-19 王芳; 李静; 陈昌岳; 张祥林; 胡秋萍; 任一; 路远; 黄克非; 闫丽
发明涉及分子生物学技术领域,具体公开了一种适用于单细胞基因组甲基化测序的文库建立方法及其应用。本发明提供的适用于单细胞基因组甲基化测序的文库建立方法包括如下步骤:(1)对样本的基因组DNA进行重亚硫酸盐转化;(2)对步骤(1)中转化后的基因组DNA进行线性扩增;(3)对步骤(2)中线性扩增的扩增子进行指数扩增,所述指数扩增的扩增子用作测序文库。所述文库建立方法的样本基因组DNA起始量可低至pg级,采用所述方法建立的文库进行测序,可对全基因组的绝大多数胞嘧啶进行检测,可以覆盖到全基因组的绝大多数区域。
4 有助于选择被特定免疫球蛋白基因重组病毒感染的细胞的融合蛋白 CN201380033060.7 2013-04-26 CN104520444B 2017-12-12 E·S·史密斯; T·潘迪纳; L·A·克罗伊; M·帕里斯; M·佐德勒; A·莫克萨; R·柯克
发明涉及在真核细胞中表达免疫球蛋白分子的高效方法。本发明进一步涉及生产用于在真核细胞中表达的免疫球蛋白重链和轻链文库的方法,特别是使用三分子重组方法。本发明进一步提供了选择和筛选抗原特异性免疫球蛋白分子及其抗原特异性片段的方法。本发明还提供了用于生产、筛选和选择抗原特异性免疫球蛋白分子的试剂盒。最后,本发明提供了通过本文中提供的方法产生的免疫球蛋白分子及其抗原特异性片段。
5 离子浓度依赖性结合分子文库 CN201710312293.0 2012-09-28 CN107287660A 2017-10-24 井川智之; 石井慎也; 舩木美步; 广庭奈绪香; 清水骏
发明公开了主要由互相之间序列不同的多个抗原结合分子构成的文库,所述抗原结合分子的抗原结合结构域中包含至少一个下述基酸残基,所述氨基酸残基使得抗原结合分子针对抗原的结合活性根据离子浓度的条件而变化。此外,本发明还公开了包含多个编码所述抗原结合分子的多核苷酸分子的组合物、包含多个含有所述多核苷酸分子的载体的组合物、所述抗原结合分子的选择方法、所述多核苷酸分子的分离方法、所述抗原结合分子的制造方法、包含所述抗原结合分子的医药组合物。
6 一种检测遗传性聋基因的建库试剂盒和应用 CN201710552357.4 2017-07-07 CN107287314A 2017-10-24 邹婧; 李全; 侯强; 张春杨; 谭宏东
发明涉及一种检测遗传性聋基因的建库试剂盒和应用,所述试剂盒包括用于扩增遗传性耳聋基因的扩增引物组;所述扩增引物组包括根据GJB2、GJB3、SLC26A4基因和12s rRNA基因的突变位点的多态性设计的引物。本发明采用多重PCR技术,单次反应可检测20个以上耳聋基因突变位点;配合采用“双标签”系统,使每个样品的DNA扩增产物上均带有两套独立的标签序列,因此可将所有样品的扩增产物混合后同时测序,实现高通量检测,从而大幅降低了单个样品的检测成本。
7 一种用于染色异常检测的文库构建方法及试剂 CN201710650277.2 2017-08-01 CN107217310A 2017-09-29 洪燕; 白金蕾; 玄兆伶; 李大为; 梁峻彬; 陈重建
发明提供一种用于染色异常检测的文库构建方法,通过对反应体系及反应条件的优化,实现了对、脐血等少量样本的文库构建,缩短患者在临床染色体异常检测的等待时间。
8 一种DNA编码分子库及化合物筛选方法 CN201610871861.6 2016-09-30 CN107130299A 2017-09-05 李笑宇
发明公开了一种DNA编码分子库及化合物筛选方法。一种DNA编码分子库,其引入一具有8~12个基的短链DNA,所述短链DNA一端具有光交联基团。使用本发明的DNA编码分子库的筛选方法,使得蛋白质靶点不需纯化和固载,并且能够直接应用于膜蛋白、蛋白质复合体、活细胞、病理组织等其它方法无法应用的药物靶点。
9 肿瘤放射治疗毒性基因突变文库的构建方法 CN201710339037.0 2017-05-15 CN107119331A 2017-09-01 辇伟奇; 唐万燕; 李丽仙; 王颖; 翁克贵; 张娜; 刘兴明; 何永鹏
发明公开了一种肿瘤放射治疗毒性基因突变文库的构建方法,其特征在于:覆盖人类肿瘤放射治疗毒性相关42个基因上总共61种遗传性变异位点。本发明的构建方法针对多个靶序列进行单管,快速完成文库的构建,整个文库构建过程仅需要2~3小时,手动时间仅仅需要45分钟即可,可以十分有效的解决目前对于临床上患者接受肿瘤放射治疗前预测是否会发生较大毒副作用,而需要对多基因、多靶点检测这一难点,且成本低廉。
10 一种检测猪细小病毒的基因芯片的制备方法及使用方法 CN201710287489.9 2017-04-27 CN107119330A 2017-09-01 李文刚; 吴凤笋; 刘玲玲; 吕玉金; 李明亮; 赵迪; 刘胜利; 陈志港; 郭敏
发明公开了一种检测猪细小病毒的基因芯片的制备方法及使用方法,设计并合成引物和探针,用TE buffer溶解合成好的探针,用基因芯片点样仪在基基片上接触式点样,制备用于检测猪细小病毒的基因芯片。使用时,提取待测的猪细小病毒基因组DNA,采用不对称PCR制备杂交用PCR产物,与制备好的基因芯片杂交,经洗涤与干燥后,将基因芯片置于激光共聚焦扫描仪上扫描,分析结果。本发明操作简便易行,省去了已点样芯片的化处理和预杂交步骤,杂交只需1小时,大大节省了时间,达到了快速检测的目的,采用5μm/L的探针浓度就可以达到较高的信号强度,降低了检测成本,可用于大规模检测。
11 一种提高基因低频突变检测灵敏度的扩增子文库构建方法 CN201710382858.2 2017-05-26 CN107058310A 2017-08-18 易建明; 屈武斌; 蔡万世; 王瑞超; 杭兴宜
发明涉及一种用于扩增子文库扩增和富集时使用的多重上游发卡结构引物及使用所述多重上游发卡结构引物提高基因低频突变检测灵敏度的扩增子文库构建方法,所述引物从3’端至5’端包括:与目标区域序列互补配对的特异性序列A1;发卡结构的稳定序列A2;与5’端A7序列的反向互补序列A3;发卡结构的去稳定序列A4;条码序列A5;接头序列A6;5’端序列A7;A3和A7互补配对,形成所述多重上游发卡结构引物的茎结构;A4、A5和A6形成所述多重上游发卡结构引物的环部分。
12 用于诊断活动性结核的方法和试剂 CN201710032710.6 2017-01-18 CN106990252A 2017-07-28 葛胜祥; 刘永亮; 陈梦媛; 张军; 夏宁邵
发明属于分子生物学、免疫学以及疾病诊断领域。具体而言,本发明涉及,用于诊断受试者是否患有活动性结核的方法,用于判断一种疗法对活动性结核的治疗效果的方法,以及用于筛选能够治疗活动性结核的候选药物的方法。本发明还涉及含有特异性刺激原和检测IL‑6平的试剂试剂盒
13 一种用于检测副猪嗜血杆菌的基因芯片的制备及使用方法 CN201710288214.7 2017-04-27 CN106868597A 2017-06-20 李文刚; 吴凤笋; 刘玲玲; 吕玉金; 赵迪; 樊淑华; 刘胜利; 陈志港; 郭敏; 李明亮
发明公开了一种用于检测副猪嗜血杆菌的基因芯片的制备及使用方法,包括以下步骤:(1)设计特异性引物和探针:以副猪嗜血杆菌的infB基因序列为靶序列,设计特异性引物和探针,副猪嗜血杆菌上游引物基因序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,副猪嗜血杆菌下游引物基因序列如序列表中SEQ ID NO:2所示,所述的探针基因序列如序列表中SEQ ID NO:3所示;(2)合成上述特异性引物和探针;(3)基因芯片的制备:用TE Buffer溶解合成探针,在基化基片上接触式点样,点样完毕后将基因芯片干燥。本发明操作简便易行,省去了已点样基因芯片的化处理和预杂交步骤,杂交只需2h,大大节省了时间,达到了快速检测的目的,可用于大规模检测。
14 DNA原位合成半导体芯片及其控制方法 CN201510844308.9 2015-11-26 CN106799196A 2017-06-06 童艳铮; 徐峰
发明公开了一种用于DNA原位合成的半导体芯片,包括反应区、控制单元、基板和引脚,所述反应区包括有机多聚层和由至少一个铂电极构成的电极阵列,所述电极阵列为行列排列,所述控制单元控制行线和列线,所述行线通过开关器件连接于所述铂电极,所述列线连接于所述开关器件并控制所述开关器件的通断,将所述铂电极置于高电位;还公开了一种基于上述芯片的控制方法,通过控制铂电极的电位实现DNA的原位合成。本发明提供的用于DNA原位合成的半导体芯片及其控制方法可结合计算机技术实现DNA的精确、稳定的原位合成,大大降低生产成本。
15 用于检测血浆ctDNA中基因变异的试剂 CN201710067026.1 2017-02-07 CN106755505A 2017-05-31 王晓雯; 荆瑞琳; 张萌萌; 玄兆伶; 李大为; 梁峻彬; 陈重建
发明提供一种用于检测血浆ctDNA中基因变异的试剂盒,该试剂盒包括用于基因捕获的探针,所述用于捕获的探针包括针对SNV区域设计的探针、针对CNV区域设计的探针、针对FUSION区域设计的探针,公共引物如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列引物,以及标签引物如SEQ ID NO:2~SEQ ID NO:5所示核苷酸序列引物。根据本发明,在血浆ctDNA基因变异的检测方法中,能够同时稳定的检出基因SNV、CNV以及FUSION。
16 一种沟叶结缕草全长cDNA文库构建的方法 CN201611144264.X 2016-12-13 CN106754876A 2017-05-31 宗俊勤; 陈煜; 刘建秀; 陈静波; 李丹丹; 张兵
发明属于分子生物学领域,它涉及一种沟叶结缕草全长cDNA文库构建的方法。方法如下:提取盐胁迫处理下的沟叶结缕草总RNA,mRNA纯化,反转录成第一链cDNA,经过乙醇沉淀、RNA消化、乙醇沉淀获得高质量的第一链cDNA;富集带5’帽子结构的第一链cDNA及连接5’接头;cDNA第二链合成、分级分离与收集;BP重组到pDONR/Zeo入载体;电转化大肠杆菌DH10B感受态细胞中,构建了pDONR/Zeo‑cDNA文库。本发明为后续表达文库构建及优异基因开发提供基础,同时为其它植物文库构建提供技术参考。
17 引物组合物、其用途、构建文库和确定核酸序列的方法 CN201611037080.3 2016-11-22 CN106636063A 2017-05-10 曾晓静; 高晓峘; 韩颖鑫; 张印新; 李胜
发明提供引物组合物、其用途、构建文库及确定核酸序列的方法,其中该引物组合物包含:第一引物组,第一引物组包含第一正向引物和第一反向引物,第一正向引物包括目标区域特异性正向引物和第一接头;第一反向引物包括目标区域特异性反向引物、反向文库标签和第二接头;第二引物组,第二引物组包含第二正向引物和第二反向引物,第二正向引物包含第一退火,第二反向引物包含第二退火;第一接头与第二正向引物中的第一退火以及第二接头与第二反向引物中的第二退火相互退火互补,第一接头与第二正向引物以及第二接头与第二反向引物经PCR扩增后的产物包含完整的测序接头。
18 一种单管高通量测序文库的构建方法 CN201510496049.5 2015-08-13 CN105332063B 2017-04-12 陈琰; 郭飞飞
发明公开了一种单管高通量测序文库的构建方法,包括如下步骤:(1)针对若干目的基因分别设计若干对基本扩增引物;(2)设计一对不对称连接探针和一不与人类基因组形成互补的通用引物;(3)将模板、上述若干对基本扩增引物、不对称探针、通用引物置于一含有DNA连接酶和DNA末端修饰酶的PCR反应体系中进行扩增,得扩增产物,该扩增的程序依次包括:预变性、第一阶段扩增和第二阶段扩增;(4)将扩增产物纯化后,即得所述高通量测序文库。本发明的单管高通量测序文库的构建方法针对多个靶序列进行单管,快速完成文库的构建,结合高通量测序平台可以十分有效的解决目前对于临床上肿瘤、遗传病等疾病中在少量的临床样本基础上需要对体细胞多基因、多靶点检测这一难点,且成本低廉。
19 抑郁症生物标志物及其应用 CN201610922665.7 2016-10-18 CN106554998A 2017-04-05 荣晗; 王明帮; 徐丹; 刘铁榜; 赵杰; 刘泱慧; 杨海晨; 张建
发明提供了抑郁症生物标志物,包括糖解梭菌和嗜中温螺旋杆菌,还包括嗜二噬细胞菌、绿色糖单孢菌、猫螺杆菌、瘤胃球菌属、基酸球菌、氨基酸球菌属和发酵型氨基酸球菌;本发明还提供了用于诊断抑郁症的试剂盒,以及预防治疗抑郁症的组合物;本发明进一步提供了筛选易患抑郁症的生物样品的系统,通过此筛选系统,可筛选易患抑郁症的生物样品;本发明更进一步提供了用于诊断抑郁症的生物标志物的筛选方法,通过此方法可筛选出用于诊断抑郁症的生物标志物。
20 一种污处理系统中水/泥样品DNA扩增子测序文库快速构建的引物及快速构建方法 CN201611071680.1 2016-11-29 CN106554958A 2017-04-05 张徐祥; 汤俊英; 任洪强
发明公开了一种污处理系统中水/泥样品DNA扩增子测序文库快速构建的引物及快速构建方法,属于高通量测序领域。本发明的步骤为:一、样品DNA的提取;二、目的片段的扩增;三、扩增产物的纯化;四、扩增产物的质量鉴定;五、扩增产物的混合;六、混合文库的质量鉴定;七、混合文库的准备及测序。本发明公开了一种引物,包括接头序列、索引序列、异质性间隔序列、目的片段扩增序列,使得利用该引物经一步扩增能够快速完成文库的构建,降低了测序成本、大量节省文库构建时间。本发明克服了复杂污水/泥样品中高多样性菌群结构解析难题,满足了基于高通量DNA测序技术应用于污水处理系统中水/泥样品菌群深度解析的技术需求。
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