技术领域
[0001] 本
发明属于医药领域,涉及一种生物碱用于逆转肺癌顺铂耐药性的用途。
背景技术
[0002] 肺癌是呼吸系统最常见的
恶性肿瘤,其发病率及死亡率均居恶性肿瘤之首,且具有逐年上升趋势。从临床
角度出发,结合肿瘤细胞的
组织学及生物学特征,一般将肺癌分为两类:小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)及非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),其中约85%的肺癌为NSCLC。NSCLC易出现区域淋巴结转移及血源性散播,患者
预后较差,5年生存率不足15%。
[0003] 顺铂(DDP)是肺癌术后的一线
化疗药物,天然性与获得性耐药限制了以顺铂为
基础的联合化疗疗效。因此,有必要开发逆转肺癌顺铂耐药性的药物。
发明内容
[0004] 本发明旨在克服
现有技术不足,提供一种生物碱用于逆转肺癌顺铂耐药性的用途。
[0005] 本发明上述目的通过如下技术方案实现:
[0006] 如下结构的生物碱在制备逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物中的应用:
[0007] 其中,R为-CH3或-CH2CH2CH3。
[0008] 一种逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物制剂,以上述生物碱为活性成分,还含有药学上可以接受的辅料。
[0009] 如下结构的生物碱在制备逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物中的应用:
[0010] 其中,R为
[0011] 一种逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物制剂,以上述生物碱为活性成分,还含有药学上可以接受的辅料。
[0012] 如下结构的生物碱在制备逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物中的应用:
[0013] 其中,R为
[0014] 一种逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物制剂,以上述生物碱为活性成分,还含有药学上可以接受的辅料。
[0015] 如下结构的生物碱在制备逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物中的应用:
[0016] 其中,R为
[0017] 一种逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物制剂,以上述生物碱为活性成分,还含有药学上可以接受的辅料。
[0018] 如下结构的生物碱在制备逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物中的应用:
[0019] 其中,R为
[0020] 一种逆转肺癌患者顺铂耐药性的药物制剂,以上述生物碱为活性成分,还含有药学上可以接受的辅料。
[0021] 有益效果:
[0022] 本发明发现,化合物TA-1、TA-2、TB-1、TB-2、TB-3、TC-1、TD-1、TE-1、TE-2可以有效逆转肺癌细胞对顺铂的耐药性,其中TC-1、TD-1不仅仅能逆转耐药性,还能够增强肺癌细胞对顺铂的敏感性。化合物TB-4不具备这种作用。
附图说明
[0023] 图1为顺铂对各组细胞半数抑制浓度IC50值。
具体实施方式
[0024] 下面结合附图和
实施例具体介绍本发明实质性内容,但不能以此限定本发明的保护范围。
[0025] 一、实验材料
[0026] 研究测试的生物碱按常规方法和文献方法制备,根据化学结构分为五大类,具体化学结构和编号如下表所示。
[0027]
[0028] 肺癌细胞株H460购自ATCC,DMEM培养基、胎
牛血清购自GIBCO公司。
[0029] 二、实验方法
[0030] 1、细胞培养
[0031] 人肺癌细胞株H460常规复苏后,用含10%FBS、50U/ml
链霉素、50U/ml青霉素及4mmol/L L-谷
氨酰胺的DMEM培养基,在37℃、5%CO2条件下培养,每2~3d换液。
[0032] 2、构建顺铂耐药株H460/DDP
[0033] 用顺铂持续
接触浓度递增诱导法建立的人肺癌顺铂耐药细胞株H460/DDP。
[0034] 具体方法如下:用顺铂浓度为0.1μg/ml的DMEM培养对数生长期的H460细胞,4周后将细胞消化传代并用正常全培培养,待细胞贴壁后,将顺铂浓度提高至0.2μg/ml,继续培养4周并消化传代;再依次将顺铂浓度提高至0.5、1.0、2.0μg/ml,连续培养5个月,获得肺癌顺铂耐药株H460/DDP。
[0036] 给药组:取对数生长期的H460/DDP细胞,以1000个/孔接种于96孔板中,37℃、5%CO2
培养箱中培养。待细胞贴壁后,分别加入含有5μM TA-1、TA-2、TB-1、TB-2、TB-3、TB-4、TC-1、TD-1、TE-1或TE-2(DMSO为溶媒)的完全培养基培养;
[0037] H460/DDP组:H460/DDP细胞,仅加入等量溶媒DMSO,不加药,其他同给药组;
[0038] H460组:H460细胞,仅加入等量溶媒DMSO,不加药,其他同给药组。
[0039] 4、各组细胞对顺铂敏感性的测定
[0040] 各组细胞培养48h后,弃去旧培养基,加入梯度浓度的顺铂,每个浓度设置3个复孔,37℃、5%CO2培养箱中培养48h后,弃旧培养基,加入含10%CCK-8的新鲜培养基,37℃孵育3h,测450nm处光
密度值,计算半数抑制浓度IC50。
[0042] 采用SPSS 17.0进行统计学分析,数据采用均值±标准差表示,采用Student’s t检验进行两组间比较,P<0.05为差异有统计学意义。
[0043] 三、实验结果
[0044] 顺铂对各组细胞半数抑制浓度IC50值如表1和图1所示。与H460组相比,H460/DDP组肺癌细胞的IC50值显著升高(P<0.05),说明H460/DDP肺癌细胞对顺铂产生了明显的耐药性;与H460/DDP组相比,TA-1、TA-2、TB-1、TB-2、TB-3、TC-1、TD-1、TE-1、TE-2组肺癌细胞的IC50值显著降低(P<0.05),说明TA-1、TA-2、TB-1、TB-2、TB-3、TC-1、TD-1、TE-1、TE-2孵育增强了H460/DDP肺癌细胞对顺铂的敏感性(P<0.05)。
[0045] 化合物TB-4作用不明显(P>0.05)。
[0046] 表1顺铂对各组细胞半数抑制浓度IC50值
[0047]组别 IC50值(μg/ml) 组别 IC50值(μg/ml)
H460组 14.21±1.25 TB-3给药组 20.06±1.19
H460/DDP组 52.85±1.63 TB-4给药组 48.72±1.55
TA-1给药组 21.07±1.47 TC-1给药组 7.61±0.93
TA-2给药组 23.42±1.38 TD-1给药组 7.33±0.88
TB-1给药组 18.95±1.10 TE-1给药组 15.62±1.27
TB-2给药组 17.18±1.08 TE-2给药组 9.24±0.96
[0048] 上述实验结果表明,化合物TA-1、TA-2、TB-1、TB-2、TB-3、TC-1、TD-1、TE-1、TE-2可以有效逆转肺癌细胞对顺铂的耐药性,其中TC-1、TD-1不仅仅能逆转耐药性,还能够增强肺癌细胞对顺铂的敏感性。化合物TB-4不具备这种作用。
[0049] 上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容,但不可以将本发明的保护范围局限于上述的具体实施例。