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一种扶正愈瘤饮抗肿瘤的方法

阅读:1022发布:2020-06-04

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1.一种扶正愈瘤饮抗肿瘤的方法,昆明种小鼠右腋皮下注射S180瘤株复制移植性实体瘤模型后,扶正愈瘤饮(扶正愈瘤饮由海、蛤蚧、生蛭、熟地、紫河车、何首乌、制半夏、黄芪等10多种药物组成)剂量(中药剂量12.4 g/kg),顺铂(剂量为8μg/d),顺珀+剂量中药,连续给药10d;观察抑瘤率及生命延长率;取培养的卵巢癌细胞株SKOV3,加药培养48h后。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征是:扶正愈瘤饮(扶正愈瘤饮由海马、蛤蚧、生水蛭、熟地、紫河车、何首乌、制半夏、黄芪等10多种药物组成)剂量(中药剂量12.4 g/kg),顺铂(剂量为8μg/d),顺珀+剂量中药,连续给药10d;观察抑瘤率及生命延长率;取培养的卵巢癌细胞株SKOV3,加药培养48h后。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征是:连续给药10d;观察抑瘤率及生命延长率;取培养的卵巢癌细胞株SKOV3,加药培养48h后。

说明书全文

一种扶正愈瘤饮抗肿瘤的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种扶正愈瘤饮抗肿瘤的方法,具体地说是以一种扶正愈瘤饮抗肿瘤的方法。

背景技术

[0002] 目前公知的卵巢癌的治疗效果有了明显提高,肿瘤治疗观念也在变化。不仅注重致病因素,更注重机体反应性,这种新的治疗观念为中医药抗瘤研究提供了机遇。

发明内容

[0003] 材料和方法 1、动物和分组;雌性昆明种小鼠153只,体质量(21±2)g,鼠龄8周。全部实验室饲养24h后,以S180瘤株0.2mL小鼠右腋皮下注射,复制移植性实体瘤的荷瘤鼠。第1部分45只,随机分为6组;第2部分108只,随机分为6组,每组18只。两部分均设模型组,扶正愈瘤饮低、高剂量组(中药低、高剂量组),顺铂组,顺铂+低剂量中药组,顺铂+高剂量中药组,除顺铂腹腔给药外,其他均灌胃给药,连续10d。第1部分灌胃10d结束后处死取材进行抗肿瘤实验;第2部分灌胃10d结束后不处死,继续饲养用于生命延长试验。
2、扶正愈瘤饮的制备 扶正愈瘤饮由海、蛤蚧、生蛭、熟地、紫河车、何首乌、制半夏、黄芪等10多种药物组成。按处方比例称取中药材,由黑龙江中医药大学第一附属医院制剂室煎制,按人鼠体质量比换算后,低剂量、高剂量扶正愈瘤饮分别以2.4、12.4g/kg剂量灌胃。
3、主要试剂 RPMI-1640培养液、四甲基偶氮唑盐(MTT)试剂盒、刀豆素A(ConA)、脂多糖(LPS)均为Sigma公司产品;酶联免疫吸附(ELISA)法试剂盒为Lifekey公司产品。
4、检测指标;瘤质量及抑瘤率;将第1部分小鼠处死后剥离瘤组织称质量,计算各组瘤质量均值,按下列公式计算抑瘤率:p抑瘤=[(m模型组-m给药组)/m给药组]×100%。生命延长率;第2部分给药结束后常规饲养,观察小鼠一般情况和存活时间,按以下公式计算生命延长率:p生命延长=[t存活,给药组-t存活,模型组)/t存活,给药组]×100%。细胞凋亡检测;取出培养的卵巢癌细胞株SKOV3(购于中国科学院上海细胞生物所细胞库),以2.0×105个/mL的密度接种于96个孔板,每孔1.0mL,随机分为4组:模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、顺铂组,顺铂的浓度为20μg/mL,培养24h后更换含各组药物的培养基,培养48h后采用ELISA法测定450nm处的吸光度(D)值,凋亡细胞越多,D值越高。细胞凋亡情况用富集系数(enrichmentfactor,IEF)表示:IEF=(D实验组-D本底)/D阴性对照组。其中本底指细胞裂解液,阴性对照由试剂盒提供。将培养细胞制成单细胞悬液,取100μL细胞悬液,加入4.0μL染液,轻轻打匀后,取细胞悬液1滴滴在洁净的玻片上,加盖玻片后立即置荧光显微镜下观察。
计数200个细胞,计算细胞凋亡率:p凋亡=(n凋亡细胞/n总细胞)×100% 。统计学处理;采用SPSS 11.0软件包进行。
[0004] 结果:各给药组均可不同程度抑制荷瘤鼠的肿瘤生长,其中顺珀组与顺珀+中药组均可显著性降低瘤体质量(P<0.05或P<0.01),各中药组及中药与顺铂合用组均可显著性增加体质量(P<0.05或P<0.01)。中药与顺铂合用组均可增加荷瘤鼠存活时间(P<0.05),提高生命延长率。低、高剂量中药组均可诱导SKOV3细胞凋亡(P<0.05)。
[0005] 发明目的:卵巢癌的治疗效果有了明显提高,肿瘤治疗观念也在变化。不仅注重致病因素,更注重机体的反应性。这种新的治疗观念为中医药抗瘤研究提供了机遇。扶正愈瘤饮是临床经验用方,辅助恶性肿瘤手术、放化疗,使病人治疗期间的耐受性提高,生活质量明显改善。本发明通过动物模型观察扶正愈瘤饮的抗肿瘤作用。
[0006] 技术方案:取昆明种小鼠右腋皮下注射S180瘤株复制移植性实体瘤模型后,将荷瘤鼠随机分为6组,即模型组,扶正愈瘤饮(扶正愈瘤饮由海马、蛤蚧、生水蛭、熟地、紫河车、何首乌、制半夏、黄芪等10多种药物组成)低、高剂量组(中药低、高剂量组,剂量分别为2.4、12.4 g/kg),顺铂组(剂量为8μg/d),顺珀+低、高剂量中药组,连续给药10d;观察各组抑瘤率及生命延长率。取培养的卵巢癌细胞株SKOV3随机分为4组,即模型组,中药高、低剂量组及顺铂组,加药培养48h后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞凋亡情况。
[0007] 发明有益效果:扶正愈瘤饮的抗肿瘤作用与其能诱导肿瘤细胞凋亡有关,与化疗药顺珀合用具有一定的协同增效作用。
[0008] 最佳实施方式:运用药物治疗。
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