一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法专利检索-全细胞疫苗疫苗疗法专利检索查询-专利查询网

一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法

阅读：1020发布：2020-09-16

专利汇可以提供一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，包括以下步骤：S1、材料准备；S2、复方杜桑溶液对细胞安全浓度的测定；S3、复方杜桑溶液对PEDV增殖的抑制作用测定；S4、复方杜桑溶液对PEDV感染仔猪的防治试验；S5、复方杜桑溶液对PEDV传播途径的阻断试验；S6、复方杜桑溶液对PEDV传播途径阻断的临床推广，涉及猪流行性腹泻病毒研究技术领域。该复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，不同规模的猪场进行推广应用，效果良好，研究结果表明，所构建的“母猪产前免疫PED 疫苗配合产后使用复方杜桑溶液消毒乳头 ”模式，可以有效阻断猪场PEDV的大面积感染和发病，为猪腹泻性疫病的综合防控工作探索出一条行之有效的技术思路。，下面是一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、材料准备：通过专业试验人员对试验需要的材料进行购买，并对购买的材料进行检测，标记合格；
S2、复方杜桑溶液对细胞安全浓度的测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别做10个梯度倍比稀释，分别接入已铺满单层Vero细胞的细胞板，每个浓度做两个重复，作用观察时间为25分钟～30分钟，同时设立原液和空白对照；
S3、复方杜桑溶液对PEDV增殖的抑制作用测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别稀释成32倍、64倍、128倍、256倍、512倍和1024倍后，与JS12株病毒培养液等剂量混匀，使其药物终浓度分别为64倍、128倍、256倍、512倍、1024倍和2048倍，室温作用30分钟～40分钟，再接种Vero细胞，孵育1小时～1.2小时，3d后观察并筛选最佳抑制浓度，同时设立空白对照；
S4、复方杜桑溶液对PEDV感染仔猪的防治试验：将复方杜桑溶液作64倍稀释，JS12株病-3
毒培养液作10 稀释后备用，将50头1～3日龄健康仔猪随机分为5组，隔离饲养；
S5、复方杜桑溶液对PEDV传播途径的阻断试验：选择1个正在发生PED疫情的规模化猪场，筛选待产母猪100头，随机分为10组，每组10头，各组每日的乳头消毒次数分别为12次、
10次、8次、6次、5次、4次、3次、2次、1次和0次；同时筛选10头设立为二氯异氰脲酸盐对照组，消毒次数为5～7次/日，各试验组均于分娩后首日应用复方杜桑溶液进行乳头擦拭消毒，持续7d，同时筛选最佳消毒次数，并于每次消毒30min、60min和120min后，随机选择母猪乳头用细胞培养液冲洗，用于PEDV的分离和鉴定，再筛选待产母猪35～45头，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均于产前40d、20d各免疫1次，分娩后再按筛选的最佳消毒次数进行乳头消毒，持续7d；
S6、复方杜桑溶液对PEDV传播途径阻断的临床推广：随机选择规模化猪场、中小型猪场和养猪专业户各3个，每个猪场选择20头待产母猪，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均为产前40、20d各免疫1次，在其发生PED疫情时开展试验，分娩后按筛选的最佳消毒次数使用复方杜桑溶液进行乳头消毒，共持续7d。
2.根据权利要求1所述的一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，其特征在于：在S1中，专业试验人员购买试验材料自制复方杜桑溶液；二氯异氰脲酸盐消毒剂为江苏省某生物有限公司产品；猪传染性胃肠炎（TGE）-PED二联灭活疫苗由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供；50头1～3日龄新生仔猪由泰州市某种猪场提供，经检测PED抗体为阴性；100头临产母猪由泰州市某正在发生PED疫情的猪场提供；随机选择规模化猪场、中小型猪场和养猪专业户各3个，每个猪场选择20头待产母猪备用，在其发生PED疫情时开展试验；
PEDV JS12株由江苏省农业科学院兽医研究所分离、鉴定并保存；Vero细胞、细胞培养和PEDV RT-PCR检测的相关试剂均由江苏省农业科学院兽医研究所提供；PED抗原快速检测卡购自BIONOTE公司。
3.根据权利要求1所述的一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，其特征在于：在S2中，稀释10个稀释度为稀释2倍、4倍、8倍、16倍、32倍到1024倍等10个稀释度。
4.根据权利要求1所述的一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，其特征在于：在S5中，将筛选待产母猪100头，随机分为10组，每组10头，各组每日的乳头消毒次数分别为12次、10次、8次、6次、5次、4次、3次、2次、1次和0次。

说明书全文

一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法

技术领域

[0001] 本发明涉及猪流行性腹泻病毒研究技术领域，具体为一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法。

背景技术

[0002] 猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起猪的一种以水样腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要临床特征的肠道传染病。1978年英国、比利时首次发现该病，随后各主要养猪国家相继报道，国内于1984年证实存在,多年来一直严重影响我国养猪业的健康发展。2010年11月至今，以PEDV为主要致病因素的新生仔猪急性腹泻疫情在全国范围内大暴发，发病率和死亡率均高达90%以上，目前仍尚无有效的防控药物，抗生素治疗仅能减缓继发感染。已有研究表明，当前PEDV新流行毒株较疫苗毒株CV777相比已发生较大变异，使得现有商品化疫苗的免疫保护效果均不理想，同时新流行毒株却又难以分离、驯化并加以应用。因此，以消毒为核心的生物安全措施是防控动物传染病的最主要措施之一，而选择理想的消毒剂至关重要。当前在养猪生产中应用最为普遍的是醛类、含碘类、过氧化物类和表面活性剂类等化学消毒剂，它们产生作用迅速，消毒谱广，对病原微生物的杀灭作用很强，但都不同程度地存在环境污染、药物残留、具有毒性和刺激性等副作用，并不能完全满足疫病防控中的消毒需要。与此同时一些以中药消毒剂为代表的新型环保消毒剂的研究逐渐展开和深入。复方杜桑溶液是一种纯天然植物消毒剂，由杜仲、桑叶、大黄、艾叶、山银花、苦参、垂花香薷等多味中药按一定的比例混合提取、加工精制而成，具有免疫增强、杀灭病原、清新辟秽和解毒消疮的功效，可用于动物体、环境及饮水消毒。本研究拟选用复方杜桑溶液对PEDV传播途径的阻断效果进行探讨，以期为有效防控PED提供一种优秀的消毒剂。

发明内容

[0003] （一）解决的技术问题针对现有技术的不足，本发明提供了一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，解决了常规消毒药存在不同程度的环境污染、药物残留、具有药物毒性和刺激性等副作用，不能完全满足疫病防控中消毒需要的问题。

[0004] （二）技术方案为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，包括以下步骤：
S1、材料准备：通过专业试验人员对试验需要的材料进行购买，并对购买的材料进行检测，标记合格；
S2、复方杜桑溶液对细胞安全浓度的测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别做10个梯度倍比稀释，分别接入已铺满单层Vero细胞的细胞板，每个浓度做两个重复，作用观察时间为25分钟～30分钟，同时设立原液和空白对照；
S3、复方杜桑溶液对PEDV增殖的抑制作用测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别稀释成32倍、64倍、128倍、256倍、512倍和1024倍后，与JS12株病毒培养液等剂量混匀，使其药物终浓度分别为64倍、128倍、256倍、512倍、1024倍和2048倍，室温作用30分钟～40分钟，再接种Vero细胞，孵育1小时～1.2小时，3d后观察并筛选最佳抑制浓度，同时设立空白对照；
S4、复方杜桑溶液对PEDV感染仔猪的防治试验：将复方杜桑溶液作64倍稀释，JS12株病毒培养液作10-3稀释后备用，将50头1～3日龄健康仔猪随机分为5组，隔离饲养；
S5、复方杜桑溶液对PEDV传播途径的阻断试验：选择1个正在发生PED疫情的规模化猪场，筛选待产母猪100头，随机分组并进行消毒处理，同时筛选10头设立为二氯异氰脲酸盐对照组，消毒次数为5～7次/日，各试验组均于分娩后首日应用复方杜桑溶液进行乳头擦拭消毒，持续7d，同时筛选最佳消毒次数，并于每次消毒30min、60min和120min后，随机选择母猪乳头用细胞培养液冲洗，用于PEDV的分离和鉴定，再筛选待产母猪35～45头，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均于产前40d、20d各免疫1次，分娩后再按筛选的最佳消毒次数进行乳头消毒，持续7d；
S6、复方杜桑溶液对PEDV传播途径阻断的临床推广：随机选择规模化猪场、中小型猪场和养猪专业户各3个，每个猪场选择20头待产母猪，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均为产前40、20d各免疫1次，在其发生PED疫情时开展试验，分娩后按筛选的最佳消毒次数使用复方杜桑溶液进行乳头消毒，共持续7d。

[0005] 优选的，在S1中，专业试验人员购买的试验材料为复方杜桑溶液自制；二氯异氰脲酸盐消毒剂为江苏省某生物有限公司产品；猪传染性胃肠炎（TGE）-PED二联灭活疫苗由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供；50头1～3日龄新生仔猪由泰州市某种猪场提供，经检测PED抗体为阴性；100头临产母猪由泰州市某正在发生PED疫情的猪场提供；随机选择规模化猪场、中小型猪场和养猪专业户各3个，每个猪场选择20头待产母猪备用，在其发生PED疫情时开展试验；PEDV JS12株由江苏省农业科学院兽医研究所分离、鉴定并保存；Vero细胞、细胞培养和PEDV RT-PCR检测的相关试剂均由江苏省农业科学院兽医研究所提供；PED抗原快速检测卡购自BIONOTE公司。

[0006] 优选的，在S2中，稀释10个稀释度为稀释2倍、4倍、8倍、16倍、32倍到1024倍等10个稀释度。

[0007] 优选的，在S5中，将筛选待产母猪100头，随机分为10组，每组10头，各组每日的乳头消毒次数分别为12次、10次、8次、6次、5次、4次、3次、2次、1次和0次。

[0008] （三）有益效果本发明提供了一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法。具备以下有益效果：
该复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，通过选用复方杜桑溶液，开展了对Vero细胞安全浓度的测定、对PEDV增殖抑制作用的测定、对PEDV感染仔猪的防治试验和对PEDV传播途径的阻断试验。结果显示，将复方杜桑溶液作64倍稀释时对vero细胞生长没有明显影响，作64～128倍稀释时可明显抑制PEDV增殖；对初生仔猪灌服复方杜桑溶液无法阻止PEDV的感染和发病；每昼夜应用复方杜桑溶液擦拭消毒乳头6次，同时配合及时清除粪便和产床喷雾消毒，可使猪流行性腹泻（PED）发病率控制至30%以内；母猪产前免疫2次猪传染性胃肠炎猪流行性腹泻（TGE）-PED二联灭活疫苗，产后7d内使用复方杜桑溶液进行乳头消毒，PED发病率仅为3%，并在不同规模的猪场进行推广应用，效果良好，研究结果表明，所构建的“母猪产前免疫PED疫苗配合产后使用复方杜桑溶液消毒乳头” 模式，可以有效阻断猪场PEDV的大面积感染和发病，为猪腹泻性疫病的综合防控工作探索出一条行之有效的技术思路。
附图说明

[0009] 图1为本发明仔猪分组及试验图；图2为本发明母猪分组及试验图；
图3为本发明不同规模猪场的试验分组及试验图。

具体实施方式

[0010] 下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0011] 实施例一本发明实施例提供一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，包括以下步骤：
S1、材料准备：通过专业试验人员对试验需要的材料进行购买，并对购买的材料进行检测，标记合格；
S2、复方杜桑溶液对细胞安全浓度的测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别做10个梯度倍比稀释，分别接入已铺满单层Vero细胞的细胞板，每个浓度做两个重复，作用观察时间为25分钟，同时设立原液和空白对照；
S3、复方杜桑溶液对PEDV增殖的抑制作用测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别稀释成32倍、64倍、128倍、256倍、512倍和1024倍后，与JS12株病毒培养液等剂量混匀，使其药物终浓度分别为64倍、128倍、256倍、512倍、1024倍和2048倍，室温作用30分钟，再接种Vero细胞，孵育1小时，3d后观察并筛选最佳抑制浓度，同时设立空白对照；
S4、复方杜桑溶液对PEDV感染仔猪的防治试验：将复方杜桑溶液作64倍稀释，JS12株病毒培养液作10-3稀释后备用，将50头1日龄健康仔猪随机分为5组，隔离饲养；
S5、复方杜桑溶液对PEDV传播途径的阻断试验：选择1个正在发生PED疫情的规模化猪场，筛选待产母猪100头，随机分组并进行消毒处理，同时筛选10头设立为二氯异氰脲酸盐对照组，消毒次数为5次/日，各试验组均于分娩后首日应用复方杜桑溶液进行乳头擦拭消毒，持续7d，同时筛选最佳消毒次数，并于每次消毒30min后，随机选择母猪乳头用细胞培养液冲洗，用于PEDV的分离和鉴定，再筛选待产母猪35头，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均于产前40d、20d各免疫1次，分娩后再按筛选的最佳消毒次数进行乳头消毒，持续7d；
S6、复方杜桑溶液对PEDV传播途径阻断的临床推广：随机选择规模化猪场、中小型猪场和养猪专业户各3个，每个猪场选择20头待产母猪，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均为产前40、20d各免疫1次，在其发生PED疫情时开展试验，分娩后按筛选的最佳消毒次数使用复方杜桑溶液进行乳头消毒，共持续7d。

[0012] 实施例二本发明实施例提供一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，包括以下步骤：
S1、材料准备：通过专业试验人员对试验需要的材料进行购买，并对购买的材料进行检测，标记合格；
S2、复方杜桑溶液对细胞安全浓度的测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别做10个梯度倍比稀释，分别接入已铺满单层Vero细胞的细胞板，每个浓度做两个重复，作用观察时间为28分钟，同时设立原液和空白对照；
S3、复方杜桑溶液对PEDV增殖的抑制作用测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别稀释成32倍、64倍、128倍、256倍、512倍和1024倍后，与JS12株病毒培养液等剂量混匀，使其药物终浓度分别为64倍、128倍、256倍、512倍、1024倍和2048倍，室温作用35分钟，再接种Vero细胞，孵育1.1小时，3d后观察并筛选最佳抑制浓度，同时设立空白对照；
S4、复方杜桑溶液对PEDV感染仔猪的防治试验：将复方杜桑溶液作64倍稀释，JS12株病毒培养液作10-3稀释后备用，将50头2日龄健康仔猪随机分为5组，隔离饲养；
S5、复方杜桑溶液对PEDV传播途径的阻断试验：选择1个正在发生PED疫情的规模化猪场，筛选待产母猪100头，随机分组并进行消毒处理，同时筛选10头设立为二氯异氰脲酸盐对照组，消毒次数为6次/日，各试验组均于分娩后首日应用复方杜桑溶液进行乳头擦拭消毒，持续7d，同时筛选最佳消毒次数，并于每次消毒60min后，随机选择母猪乳头用细胞培养液冲洗，用于PEDV的分离和鉴定，再筛选待产母猪50头，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均于产前40d、20d各免疫1次，分娩后再按筛选的最佳消毒次数进行乳头消毒，持续7d；
S6、复方杜桑溶液对PEDV传播途径阻断的临床推广：随机选择规模化猪场、中小型猪场和养猪专业户各3个，每个猪场选择20头待产母猪，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均为产前40、20d各免疫1次，在其发生PED疫情时开展试验，分娩后按筛选的最佳消毒次数使用复方杜桑溶液进行乳头消毒，共持续7d。

[0013] 实施例三本发明实施例提供一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法，包括以下步骤：
S1、材料准备：通过专业试验人员对试验需要的材料进行购买，并对购买的材料进行检测，标记合格；
S2、复方杜桑溶液对细胞安全浓度的测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别做10个梯度倍比稀释，分别接入已铺满单层Vero细胞的细胞板，每个浓度做两个重复，作用观察时间为30分钟，同时设立原液和空白对照；
S3、复方杜桑溶液对PEDV增殖的抑制作用测定：将复方杜桑溶液用DMEM分别稀释成32倍、64倍、128倍、256倍、512倍和1024倍后，与JS12株病毒培养液等剂量混匀，使其药物终浓度分别为64倍、128倍、256倍、512倍、1024倍和2048倍，室温作用40分钟，再接种Vero细胞，孵育1.2小时，3d后观察并筛选最佳抑制浓度，同时设立空白对照；
S4、复方杜桑溶液对PEDV感染仔猪的防治试验：将复方杜桑溶液作64倍稀释，JS12株病毒培养液作10-3稀释后备用，将50头3日龄健康仔猪随机分为5组，隔离饲养；
S5、复方杜桑溶液对PEDV传播途径的阻断试验：选择1个正在发生PED疫情的规模化猪场，筛选待产母猪100头，随机分组并进行消毒处理，同时筛选10头设立为二氯异氰脲酸盐对照组，消毒次数为7次/日，各试验组均于分娩后首日应用复方杜桑溶液进行乳头擦拭消毒，持续7d，同时筛选最佳消毒次数，并于每次消毒120min后，随机选择母猪乳头用细胞培养液冲洗，用于PEDV的分离和鉴定，再筛选待产母猪45头，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均于产前40d、20d各免疫1次，分娩后再按筛选的最佳消毒次数进行乳头消毒，持续7d；
S6、复方杜桑溶液对PEDV传播途径阻断的临床推广：随机选择规模化猪场、中小型猪场和养猪专业户各3个，每个猪场选择20头待产母猪，隔离饲养，TGE-PED二联灭活疫苗均为产前40、20d各免疫1次，在其发生PED疫情时开展试验，分娩后按筛选的最佳消毒次数使用复方杜桑溶液进行乳头消毒，共持续7d。

[0014] 复方杜桑溶液对Vero细胞安全浓度的测定结果：将不同稀释度的复方杜桑溶液分别与vero细胞作用30min后发现，细胞在原液和2倍稀释时均皱缩、贴到底部，8倍稀释时整块漂落，32倍稀释时有零星变圆、漂起，64倍稀释时为正常状态，与空白对照组相比无明显区别。

[0015] 复方杜桑溶液抑制病毒作用测定结果：不同稀释度的复方杜桑溶液分别与JS12株作用后，经计算测定其蚀斑形成单位（PFU/mL）分别为8.4×104、1.96×105、5.36×105和6.0×105，对照组为6.44×105，数据分析结果表明，64倍和128倍稀释时对病毒有明显的抑制作用，1024倍稀释时抑制作用不明显，2048倍稀释对病毒增殖基本没有影响，从而推断将复方杜桑溶液作64～128倍稀释时，可有效抑制PEDV的增殖。

[0016] 复方杜桑溶液对PEDV感染仔猪的防治试验结果：3组试验猪分别于3h、8h和6h时开始呕吐灰红色液体，均于24h时发生水泻，分别于72h、30h和36h时全部脱水、死亡；二氯异氰脲酸盐组均于6h时出现呕吐，12h时发生腹泻和脱水，24h时全部死亡；空白对照组均于6h时出现呕吐、腹泻和严重脱水，24h时全部死亡。所有试验猪经RT-PCR和PED抗原快速检测卡检测后，均为PEDV阳性，证实通过对初生仔猪灌服复方杜桑溶液和其他消毒剂的措施无法阻止PEDV感染和发病，但先灌服复方杜桑溶液组的病程有所延长。

[0017] 传播途径阻断试验结果试验母猪均于分娩后首日应用复方杜桑溶液进行乳头擦拭消毒试验，共持续7d。结果表明，各组的发病率依次为26.0%、27.3%、28.5%、29.8%、50.2%、58.5%、62.8%、88.5%、94.2%和99.6%，二氯异氰脲酸盐组的发病率为70.3%，表明每日使用复方杜桑溶液进行6次以上乳头消毒时，发病率均维持在30%以内，且差异不显著（P>0.05），随着消毒次数逐步减少，发病率也随之大幅提高，因此，最佳消毒次数筛选为6次/日。各试验组于每次消毒30min和60min后，均未分离到PEDV，消毒120min后，均可分离到PEDV，RT-PCR检测结果全部为阳性。二氯异氰脲酸盐组于每次消毒30min后均未分离到PEDV，60min后均能分离到PEDV，RT-PCR检测结果全部为阳性。免疫疫苗同时配合乳头消毒试验组的发病率最低，为3%，只免疫疫苗未进行乳头消毒试验组为12.4%，未免疫疫苗只进行乳头消毒试验组为29.7%，二氯异氰脲酸盐和空白对照组分别为68.7%和97.8%。

[0018] 临床推广结果:不同规模猪场的各组母猪均于分娩后首日使用复方杜桑溶液进行乳头擦拭消毒试验，持续7d。结果表明，规模化猪场、中小型猪场与养猪专业户免疫疫苗组和未免疫疫苗组的平均发病率分别为8.6%和29.8%、5.8%和27.8%、4.5%和26.5%。

[0019] 动物传染病的流行必须同时具备传染源、传播途径和易感动物等3个基本环节。PEDV感染后以7日龄内仔猪死亡率最高，随年龄增加逐步降低，应及时淘汰发病仔猪，清除传染源。当前PEDV流行毒株的变异使得商品化疫苗无法产生有效保护，“返饲”具有一定临床效果，但存在严重散毒风险，因此仅依赖疫苗免疫来保护易感猪的策略在较长一段时间内难以实现。将吮乳仔猪寄养给健康母猪或人工哺乳，发病率和死亡率均显著降低，说明通过技术隔离切断其传播途径，可有效降低PED的临床危害。由于PEDV的抵抗力较弱，2%氢氧化钠、1%福尔马林和1%碘仿等传统消毒剂都可将其杀灭，但均具有作用时间短和对皮肤及黏膜有强刺激性等缺点。复方杜桑溶液则是一种纯天然中药消毒剂，具有免疫增强和较强的抗病原体作用，且气味清香，刺激性小、无毒和无腐蚀作用。本试验中，将复方杜桑溶液作
64倍稀释时，对vero细胞的生长没有明显影响，提示对母猪使用时较为安全，64～128倍稀释时，对PEDV有明显的抑制作用，因此建议在猪场进行消毒时，可将复方杜桑溶液作64～
128倍稀释后使用。对初生仔猪灌服复方杜桑溶液和其他消毒剂后，全部发病死亡，证实该措施无法阻止PEDV感染，其原因应为PEDV的感染剂量极低，但先灌服复方杜桑溶液后可使其病程有所延长，也有力的佐证了复方杜桑溶液可抑制PEDV增殖这一结论。

[0020] 母猪乳房的结构特点，使其形成明显的“定期放乳”这一独特泌乳方式，在产后最初几天内，一昼夜放乳次数约为24～25次。PEDV随病猪和带毒猪的粪便排出，主要污染母猪乳头通过“粪一口途径”感染。本试验中发现复方杜桑溶液的消毒时效性为2h内，应为每昼夜消毒12次，但工作量巨大，产房护理人员难以承受。鉴于此，进一步研究发现，每昼夜消毒6次，同时通过及时清除粪便和产床喷雾消毒5～6次，可使PED的发病率控制至30%以内。另外，免疫疫苗同时配合乳头消毒试验组的发病率仅为3%，提示该模式是当前国内猪场有效防控PEDV感染的最有效措施。临床推广试验结果表明，不同规模的猪场应用该模式均可有效阻断PEDV的大面积感染，其中，规模化猪场和中小型猪场平均发病率均略高于养猪专业户，这应与后者多为家庭式猪场，操作者责任心较强，乳头消毒措施实施到位有一定关系。

[0021] 综上所述，本研究所构建的“母猪产前免疫PED疫苗配合产后使用复方杜桑溶液擦拭乳头消毒”模式不仅可以有效阻断PEDV的大面积感染，降低发病风险，提高猪场经济效益，同时有利于我国绿色食品的发展，逐渐杜绝含抗生素和化学消毒剂残留的食品上市销售，并可进一步扩大其技术应用范围，为猪腹泻性疫病的综合防控工作探索出一条行之有效的技术思路。

[0022] 需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下。由语句“包括一个......限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素”。

[0023] 尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

标题	发布/更新时间	阅读量
全细胞疫苗	2020-05-11	789
一种鼠李糖修饰的肿瘤全细胞疫苗	2020-05-11	969
HBx修饰的抗肝癌全细胞疫苗及其制备方法和用途	2020-05-12	923
治疗或预防肿瘤的药物、肿瘤全细胞疫苗及其制备方法和用途	2020-05-12	713
含全细胞百日咳抗原的组合疫苗	2020-05-11	112
一种治疗慢性病的自体全细胞疫苗配方及其制备方法	2020-05-12	456
包括白喉类毒素、破伤风类毒素、全细胞百日咳和乙型肝炎表面抗原的四价联合疫苗及其制备方法	2020-05-13	878
一种全悬浮ST细胞直接培养猪伪狂犬病毒疫苗的方法	2020-05-11	613
马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株的全长基因序列	2020-05-12	288
适应全悬浮无血清培养的MDCK细胞系及其在培养流感病毒、生产流感病毒疫苗中的应用	2020-05-13	402

一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法

一种复方杜桑溶液对猪流行性腹泻病毒试验方法

技术领域

背景技术

发明内容

具体实施方式

该功能需要专业版企业版VIP权限，您可以：