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一种灵芝母种培养基及其制备方法

阅读：0发布：2020-09-20

专利汇可以提供一种灵芝母种培养基及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明涉及真菌培养基制备领域，特别公开了一种灵芝母种培养基及其制备方法。该灵芝母种培养基，其特征为，由以下原料制成：高粱米蒸煮水 1000mL，葡萄糖 20‑40g、蛋白胨2‑4g、磷酸二氢钾 2‑4g、硫酸镁2‑4g、琼脂15‑25g。本发明制备简单，培养基扩培的灵芝母种生长速度快，长势旺盛，转接染菌率低，相同条件下后期获得灵芝产品的质量优于普通母种培养基扩培的灵芝。，下面是一种灵芝母种培养基及其制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种灵芝母种培养基，其特征为，由以下原料制成：高粱米蒸煮水1000mL，葡萄糖20-
40g、蛋白胨2-4g、磷酸二氢钾2-4g、硫酸镁2-4g、琼脂15-25g。
2.根据权利要求1所述的灵芝母种培养基，其特征为，由以下原料制成：高粱米蒸煮水
1000mL，葡萄糖30g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁3g、琼脂20g。
3.根据权利要求1所述的灵芝母种培养基的制备方法，其特征为，包括如下步骤：（1）高粱米加水和生石灰浸泡，之后冲洗后转入蒸锅中，加水蒸煮，再经过滤、冲洗得到高粱米蒸煮水；（2）取高粱米蒸煮水1000mL，加入葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁和琼脂，搅拌、加热，待琼脂溶化后补水至1000mL，并调节pH值；（3）将配制好的培养基分装于试管中，牛皮纸包扎后放入灭菌锅灭菌，摆斜面，冷却后记得母种培养基试管斜面。
4.根据权利要求1所述的灵芝母种培养基的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，高粱米
500g加水至没过表面2cm，加入生石灰，混匀后浸泡24h，之后用自来水将高粱米洗净，转入蒸锅中，加水至没过表面，文火蒸煮15-25min，蒸煮结束，用孔眼小于米粒大小的滤网过滤，再用温水冲洗并过滤，合并滤液，得到高粱米蒸煮水1000mL。
5.根据权利要求1所述的灵芝母种培养基的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，蒸煮后的高粱米过滤后，用50-60℃的温水200-500mL冲洗并过滤，两次所得滤液合并。
6.根据权利要求1所述的灵芝母种培养基的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，配制好的培养基趁热分装于试管中，装液量不超过试管高度的1/3，分装时严防培养基粘附试管口，分装完毕后硅胶塞密封、牛皮纸包扎，于121℃下灭菌20min或于105℃下灭菌30min，摆斜面，即得。

说明书全文

一种灵芝母种培养基及其制备方法

[0001] （一）技术领域本发明涉及真菌培养基制备领域，特别涉及一种灵芝母种培养基及其制备方法。

[0002] （二）背景技术灵芝（Ganoderma lucidum）是一种食、药兼用的真菌，含有灵芝多糖、三萜、灵芝酸、多肽、氨基酸等多种功能性组分，在我国已有2000多年的药用历史，具有固本扶正、抗肿瘤、益肝、提高机体免疫力等诸多功效，市场需求量巨大。近些年来观赏性灵芝的发展，进一步促进了灵芝人工培养行业的发展。

[0003] 通常情况下，灵芝的大规模人工培养需经过母种培养、原种培养、栽培种培养以及出芝培养等几个过程。在灵芝的扩培中，采用强壮的菌丝体进行转接是获得高产的保证。其中，灵芝母种菌丝体的生长速度及生长势对灵芝的生产效率及后期产品质量有很大影响。而培养基是影响灵芝菌丝体生长状态最重要因素之一，因此选择一种高效的灵芝母种培养基，具有较大的现实意义。

[0004] （三）发明内容本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种制备简单、生产成本低、培养效率高的灵芝母种培养基及其制备方法。

[0005] 本发明是通过如下技术方案实现的：一种灵芝母种培养基，其特征为，由以下原料制成：高粱米蒸煮水1000mL，葡萄糖20-
40g、蛋白胨2-4g、磷酸二氢钾2-4g、硫酸镁2-4g、琼脂15-25g。

[0006] 各原料的优选配比为：高粱米蒸煮水1000mL，葡萄糖30g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁3g、琼脂20g。

[0007] 上述灵芝母种培养基的制备方法，包括如下步骤：（1）高粱米加水和生石灰浸泡，之后冲洗后转入蒸锅中，加水蒸煮，再经过滤、冲洗得到高粱米蒸煮水；
（2）取高粱米蒸煮水1000mL，加入葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁和琼脂，搅拌、加热，待琼脂溶化后补水至1000mL，并调节pH值；
（3）将配制好的培养基分装于试管中，牛皮纸包扎后放入灭菌锅灭菌，摆斜面，冷却后记得母种培养基试管斜面。

[0008] 其更优技术方案为：步骤（1）中，高粱米500g加水至没过表面2cm，加入生石灰，混匀后浸泡24h，之后用自来水将高粱米洗净，转入蒸锅中，加水至没过表面，文火蒸煮15-25min至米粒膨胀饱满，但不破裂，蒸煮结束，用孔眼小于米粒大小的滤网过滤，再用温水冲洗并过滤，合并滤液，得到高粱米蒸煮水1000mL。

[0009] 步骤（1）中，蒸煮后的高粱米过滤后，用50-60℃的温水200-500mL冲洗并过滤，两次所得滤液合并。高龄米在蒸锅过程中采用文火蒸煮至膨胀饱满，不得使高粱米破裂。

[0010] 步骤（3）中，配制好的培养基趁热分装于试管中，装液量不超过试管（20×200 mm）高度的1/3，分装时严防培养基粘附试管口，分装完毕后硅胶塞密封、牛皮纸包扎，于121℃下灭菌20min或于105℃下灭菌30min，摆斜面，即得。

[0011] 其中，本发明中的术语解释如下：母种：灵芝培养过程试管菌种，又称一级种子；
原种：灵芝培养过程扩培菌种，一般在玻璃瓶中培养，又称二级种子；
培养基：灵芝生长的营养基质。

[0012] 本发明制备简单，培养基扩培的灵芝母种生长速度快，长势旺盛，转接染菌率低；除此之外，母种采用的高粱米蒸煮也为原种培养基的废弃物，降低生产成本及污染物的排放，较显著的提高了灵芝生产的效率和质量。

[0013] （四）具体实施方式发明人采用本发明制备的母种培养基分别对泰山紫芝、韩芝、鹿角芝及野生灵芝进行了母种培养，部分实例如下：
实施例1：
一种灵芝母种培养基，包括：高粱米蒸煮水1000mL、葡萄糖30g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾
3g、硫酸镁3g，琼脂20g。

[0014] 培养基制备过程：高粱米的浸泡：高粱米500g加水至没过表面约2cm，加入生石灰5g，混匀后浸泡24h。

[0015] 高粱米的蒸煮：将高粱米洗净、滤水，转入蒸锅中，加水至没过表面，文火蒸煮20min至高粱米膨胀饱满，高粱米粒不得破裂。

[0016] 高粱米滤液的获取：蒸煮结束，用孔眼小于米粒大小的滤网过滤，并用温水400mL冲洗高粱米，所得滤液合并。

[0017] 培养基的混合：取高粱米蒸煮液1000mL，加入葡萄糖30g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁3g，琼脂20g，搅拌、加热，待琼脂溶化后补水至1000mL。

[0018] 培养基的分装：培养基趁热分装于试管（20×200 mm）中，装液量不超过试管高度的1/3，分装时严防培养基粘附试管口，分装完毕，用硅胶塞密封，牛皮纸包扎。

[0019] 培养基的灭菌及斜面制作：将包扎的试管置于121℃下灭菌20min，摆斜面，斜面长度控制在9±0.2cm，即得母种试管斜面。

[0020] 接入泰山紫芝，12天即可长满菌丝，比对照样（马铃薯培养基即PDA培养基）提前2天，菌丝洁白、紧实。

[0021] 将此斜面母种（5×5 mm）转接入棉籽壳原种培养基（棉籽壳88%、米糠10%、蔗糖1%、石膏粉（CaSO4·2H2O）1%，水分含量58%）后，菌丝长满时间比对照样（PDA斜面母种转接棉籽壳原种培养基）菌丝的平均时间缩短2天，染菌率下降90%。

[0022] 实施例2：一种灵芝母种培养基，包括：高粱米蒸煮水1000mL、葡萄糖30g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾
3g、硫酸镁3g，琼脂20g。

[0023] 培养基制备过程：高粱米的浸泡：高粱米500g加水至没过表面约2cm，加入生石灰5g，混匀后浸泡24h。

[0024] 高粱米的蒸煮：将高粱米洗净、滤水，转入蒸锅中，加水至没过表面，文火蒸煮20min至米粒膨胀饱满，高粱米粒不得破裂。

[0025] 高粱米滤液的获取：蒸煮结束，用孔眼小于米粒大小的滤网过滤，并用温水200mL冲洗高粱米，所得滤液合并。

[0026] 培养基的混合：取高粱米蒸煮液1000mL，加入葡萄糖20g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁3g，琼脂30g，搅拌、加热，待琼脂溶化后补水至1000mL。

[0027] 培养基的分装：培养基趁热分装于试管（20×200mm）中，装液量不超过试管高度的1/3，分装时严防培养基粘附试管口，分装完毕，用硅胶塞密封，牛皮纸包扎。

[0028] 培养基的灭菌及斜面制作：将包扎的试管置于105℃下灭菌30min，摆斜面，斜面长度控制在9±0.2cm，即得母种试管斜面。

[0029] 接入韩芝，10天即可长满菌丝，比对照样（马铃薯培养基）提前4天，菌丝洁白、紧实。

[0030] 将此斜面母种（5×5 mm）转接入棉籽壳原种培养基（棉籽壳88%、米糠10%、蔗糖1%、石膏粉（CaSO4·2H2O）1%，水分含量58%）后，菌丝长满时间比对照样（PDA斜面母种转接棉籽壳原种培养基）菌丝的平均时间缩短4天，染菌率下降99%。

[0031] 实施例3：一种灵芝母种培养基，包括：高粱米蒸煮水1000mL、葡萄糖30g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾
3g、硫酸镁3g，琼脂20g。

[0032] 培养基制备过程：高粱米的浸泡：高粱米500g加水至没过表面约2cm，加入生石灰5g，混匀后浸泡24h。

[0033] 高粱米的蒸煮：将高粱米洗净、滤水，转入蒸锅中，加水至没过表面，文火蒸煮20min，高粱米粒不得破裂。

[0034] 高粱米滤液的获取：蒸煮结束，用孔眼小于米粒大小的滤网过滤，并用温水300mL冲洗高粱米，所得滤液合并。

[0035] 培养基的混合：取高粱米蒸煮液1000mL，加入葡萄糖30g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁3g，琼脂20g，搅拌、加热，待琼脂溶化后补水至1000mL。

[0036] 培养基的分装：培养基趁热分装于试管（20×200mm）中，装液量不超过试管高度的1/3，分装时严防培养基粘附试管口，分装完毕，用硅胶塞密封，牛皮纸包扎。

[0037] 培养基的灭菌及斜面制作：将包扎的试管置于121℃下灭菌20min，摆斜面，斜面长度控制在9±0.2cm，即得母种试管斜面。

[0038] 接入泰山野生灵芝，11天即可长满菌丝，比对照样（马铃薯培养基）提前3天，菌丝洁白、紧实。

[0039] 将此斜面母种（5×5mm）转接入棉籽壳原种培养基（棉籽壳88%、米糠10%、蔗糖1%、石膏粉（CaSO4·2H2O）1%，水分含量58%）后，菌丝长满时间比对照样（PDA斜面母种转接棉籽壳原种培养基）菌丝的平均时间缩短3天，染菌率下降80%。

[0040] 上述说明并非对本发明的限制，本发明不限于上述实例。在本发明的实质范围内，所作出的简单变化、改型或等比例的替换，也应属于本发明的保护范围。

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