专利汇可以提供一种基于偏振效应的等离子手性纳米金二聚体的制备方法及其应用专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且一种基于偏振效应的等离子 手性 纳米金二聚体的制备方法及其应用,属于材料化学技术领域。本 发明 通过手性纳米金二聚体的表面修饰、与光敏分子偶联、与靶向 抗体 偶联制备得到基于偏振效应的等离子手性纳米金二聚体;然后检测其在不同偏振光下对细胞的杀灭效果及在不同偏振光下对活体 肿瘤 的 治疗 效果。本发明提供了基于偏振效应的等离子手性纳米金二聚体的制备方法,利用不同的激发光照射,可以为选择性的 光动 力 治疗 提供有力的平台,能够在临床医学和 生物 技术中发挥重要的作用。,下面是一种基于偏振效应的等离子手性纳米金二聚体的制备方法及其应用专利的具体信息内容。
1.一种基于偏振效应的等离子手性纳米金二聚体的制备方法,其特征在于步骤为:
(1)手性纳米金二聚体的表面修饰:将纳米金二聚体与带有巯基的氨基聚乙二醇NH2-PEG-SH 5000和带有巯基不带氨基的聚乙二醇PEG-SH 5000混匀,12h后得到表面修饰有氨基的纳米金二聚体Au dimer-NH2;
(2)手性纳米金二聚体与光敏分子偶联:将表面修饰有氨基的纳米金二聚体Au dimer-NH2通过碳二亚胺EDC和琥珀酰亚胺NHS与光敏分子原卟啉PpIX反应,得到表面修饰有光敏分子的纳米金二聚体Au dimer-PpIX;
(3)手性纳米金二聚体与靶向抗体偶联:将步骤(2)得到的纳米金二聚体Au dimer-PpIX与细胞表皮生长因子受体抗体Anti-EGFR结合,得到Anti-EGFR-Au dimer-PpIX。
2.根据权利要求1所述基于偏振效应的等离子手性纳米金二聚体的制备方法,其特征在于具体步骤如下:
(1)手性纳米金二聚体的表面修饰:取50mL 5nM 已经组装好的粒径20nm金纳米粒子以
8000rpm的速度离心10min,并重悬在5mL 0.01M pH7.4的磷酸盐缓冲液PBS中;按NH2-PEG-SH:PEG-SH:Au为1000:100:1的摩尔浓度比同时向5mL重悬的纳米金二聚体溶胶中加入NH2-PEG-SH和PEG-SH;室温震荡12h后,8000rpm离心10min,去除上清液,沉淀重悬于pH7.4的PBS溶液中,反复离心重悬3次,得到表面修饰有氨基的纳米金二聚体Au dimer-NH2;
(2)手性纳米金二聚体与光敏分子偶联:将步骤(1)得到的表面修饰有氨基的纳米金二聚体Au dimer-NH2 8000rpm离心10min,沉淀重悬于pH9.7的碳酸盐缓冲液CBS中;将2mg PpIX溶解于二甲基亚砜DMSO与pH4.7的PBS混合溶液中,DMSO:PBS体积比为1:100;按PpIX:
EDC:NHS为1:100:100的摩尔比,将EDC和NHS加入到PpIX溶液中,震荡反应2h之后,8000rpm离心10min,沉淀重悬于pH4.7的PBS溶液中;将此溶液按Au:PpIX为1:500的摩尔比滴加至氨基修饰的纳米金二聚体Au dimer-NH2溶胶中,震荡反应2h,得到Au dimer-PpIX二聚体;
(3)手性纳米金二聚体与靶向抗体偶联:将靶向抗体Anti-EGFR用CBS稀释成1mg/mL,并按摩尔比为Au dimer-PpIX: Anti-EGFR为1:100加入到步骤(2)中的Au dimer-PpIX二聚体溶液中,继续震荡反应2h,8000rpm离心10min,沉淀重悬于pH7.4的PBS溶液中,反复离心重悬3次,得到Anti-EGFR -Au dimer-PpIX二聚体。
3.根据权利要求1所述方法制备所得的基于偏振效应的等离子手性纳米金二聚体,其特征在于其应用如下:将基于偏振效应的等离子手性纳米金二聚体Anti-EGFR-Au dimer-PpIX 8000rpm离心10min,沉淀重悬于细胞培养液中,使Anti-EGFR-Au dimer-PpIX的终浓度为5nM;将细胞接种于6孔培养板中,使每孔中的细胞数量为104个,培养24h后去掉培养液;向每孔中加入重悬于细胞培养液的Anti-EGFR-Au dimer-PpIX二聚体各500μL,继续培养24h后,将细胞培养液去除,并用pH 7.4的PBS溶液洗涤3遍,最后加入200μL新鲜的培养基;分别用532nm的左旋、532nm的右旋和532nm的普通光对不同的培养孔照射30min,用MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒对其进行检测。
其应用
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