一种华紫珠组培苗瓶外生根方法
专利汇可以提供一种华紫珠组培苗瓶外生根方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种华紫珠组培苗瓶外生根方法，包括以下步骤：（1） 植物 组织消毒处理；（2）组培苗培养；（3）组培苗瓶外扦插；（4）扦插后管理。本发明建立了有效的华紫珠组培苗瓶外生根技术，该技术无需经过组培瓶内生根程序，生根和驯化同时进行，25~30d 幼苗 基部长出大量根系，2个月后得到健壮的生根苗。本发明育苗周期短，生根率大于90%，移栽成活率大于95%，能够降低生产成本并且节省组培空间，对于华紫珠组培产业化 水 平提升具有重要意义。，下面是一种华紫珠组培苗瓶外生根方法专利的具体信息内容。
1.一种华紫珠组培苗瓶外生根方法，包括如下步骤：
（1）植物组织消毒处理：选取生长健壮、无病虫害的华紫珠的嫩茎作为外植体进行消毒处理；
（2）组培苗培养：在超净工作台上和无菌条件下，将步骤（1）中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位，剪成1 2 cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中，然后~
将其置于普通日光灯为光源的环境下，光照强度为1500 2000 Lx，每日光照时间为16 h，温~
度20±2 ℃，相对湿度60 65 %，在该培养基中可以获得健壮的增殖苗，20 d后长成6 8 cm~ ~
的健壮无菌组培苗可进入下一步骤；所述诱导培养基为：每升WPM培养基 + 0.1 mg 萘乙酸+ 0.8 mg 6-苄基腺嘌呤+ 30 g蔗糖 + 6 g卡拉胶，pH值为5.8；
（3）组培苗瓶外扦插：将步骤（2）中株高达6 8 cm且叶片展开的组培苗开瓶培养2 d进~
行炼苗，取出组培苗，洗净，按单株剪下，每株剪成3 4 cm带芽茎段待扦插；扦插前蘸取生根~
水，扦插深度以1 1.5 cm，其中扦插的基质选用泥炭；所述生根水为：每升水溶液中含800~ ~
1000 mg吲哚乙酸；
（4）扦插后管理：扦插完毕后浇透水，在幼苗上方用保鲜膜覆盖包裹，培养1 2周后撤去~
保鲜膜，每隔三天浇一次水，每两周喷一次叶面肥，每月喷一次杀菌剂，25 30 d幼苗基部会~
长出大量根系，2个月后得到健壮的华紫珠苗，并移栽至营养钵内进行种植。
2.根据权利要求1所述的方法，WPM培养基由常量元素、微量元素、铁盐和有机成分组成。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（3）中生根水采用吲哚乙酸，浓度为800
1000 ppm，蘸取时间为3 5秒，浸泡组培苗基部1 2 cm。
~ ~ ~
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（1）中消毒步骤为：将所选取的外植体剪切成10 cm长的带芽茎段，经洗洁精消毒10 min，再用1 %的次氯酸钠消毒10 min，最后用无菌水冲洗5次。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（3）中的泥炭用800倍多菌灵处理消毒；
800倍的多菌灵为：取浓度50 %的多菌灵1 g用800 mL的水稀释所得。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（4）培养温度控制在20 25 ℃，湿度保~
持85 %以上，光强为1500 2000 Lx，光照时间为16 h/d。
~
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（4）中叶面肥为花朵朵和班博尔两种不同的交替使用，杀菌剂为0.1 %的多菌灵和百菌清混合药剂。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（4）中定期浇水、施叶面肥、杀菌剂即每隔三天浇一次水，每两周喷一次叶面肥，每月喷一次杀菌剂。
9.根据权利要求2所述的WPM培养基，其特征在于:
所述的常量元素为：NH4NO3 200 mg/L、Ca(NO3)2·4H2O 278 mg/L、CaCl2·2H2O 48mg/L、MgSO4·7H2O 185 mg/L、KH2PO4 85 mg/L、K2SO4 495 mg/L；
所述的微量元素为：MnSO4·H2O 22.3 mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6 mg/L、H3BO3 6.2 mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25 mg/L、CuSO4·5H2O 0.0250 mg/L、CoCl2.6 H2O0.025 mg/L；
所述的铁盐为： Na2·EDTA 37.3 mg/L、FeSO4·7H2O 27.8 mg/L；
所述的有机成分为：肌醇100 mg/L、甘氨酸2 mg/L、盐酸硫胺素1 mg/L、盐酸吡哆醇0.5 mg/L、烟酸0.5 mg/L。
10.根据权利要求3所述的方法：将800 1000 mg吲哚乙酸用少量乙醇溶解后，用清水定~
容至1 L。
一种华紫珠组培苗瓶外生根方法
技术领域
背景技术
6）、乌饭树（江苏林业科技, 2018, (2):29-33.）、花榈木（种子, 2018, 37(11):141-
145.）、澳洲茶树（西部林业科学, 2018, 47(2):86-90）、沙棘（经济林研究, 2018(3):182-
186.）、黑木相思（森林与环境学报, 2019, 39(1):21-26）等，但未见华紫珠瓶外生根技术的报道。
发明内容
（2）组培苗培养：在超净工作台上和无菌条件下，将步骤（1）中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位后，剪成1 2 cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中，然~
后将其置于普通日光灯为光源的环境下，光照强度为1500 2000 Lx，每日光照时间为16 h，~
温度20 ± 2 ℃，相对湿度60 65 %，在该培养基中可以获得健壮的增殖苗，20 d后长成6 8 ~ ~
cm的健壮无菌试管苗可进入下一步骤；
（3）组培苗瓶外扦插：将步骤（2）中株高达6 8 cm且叶片展开的组培苗开瓶培养2 d进~
行炼苗即从组培室中移至炼苗室，在自然光条件下先放置2 d，后将瓶盖每天打开2次，上午下午各1次，每次打开时间为1 h，持续2 d；将完成炼苗的组培苗从瓶中取出，洗净，按单株剪下，每株剪成3 4 cm带芽茎段待扦插；扦插前蘸取生根水，扦插深度以1 1.5 cm，其中扦~ ~
插的基质选用泥炭；
（4）扦插后管理：扦插完毕后浇透水，在幼苗上方用保鲜膜覆盖包裹，培养1 2周后撤去~
保鲜膜，每隔三天浇一次水，每两周喷一次叶面肥，每月喷一次杀菌剂。25 30 d幼苗基部会~
长出大量根系，2个月后得到健壮的华紫珠苗，并移栽至营养钵内进行种植。
作为优选，步骤（3）中生根水采用吲哚乙酸，浓度为800 1000 ppm，蘸取时间为3 5 s，~ ~
浸泡组培苗基部1 2 cm。每升生根剂溶液的配制方法：将800 1000 mg吲哚乙酸用少量乙醇~ ~
溶解，用清水定容至1 L；
作为优选，步骤（3）中扦插容器选用塑料育苗盘，基质占育苗盘3/4体积。
1、本发明与常规的组织培养方法相比，省去了瓶内生根环节，育苗周期缩短1个月以上，操作简便，实用性强；
2、本发明中生根和驯化同时进行，生根率大于90 %，根系发达，幼苗生长健壮，移栽成活率大于95 %，成苗一致性好；
3、本发明中的瓶外生根技术能够降低生产成本40 %左右，节省组培空间50 %以上，对于华紫珠组培产业化水平提升具有重要意义。
具体实施方式
1. 一种华紫珠组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，包括如下步骤：
WPM培养基的配置：
常量元素的组分和其对应的使用浓度如下：NH4NO3 200 mg/L、Ca(NO3)2·4H2O 278 mg/L、CaCl2·2H2O 48mg/L、MgSO4·7H2O 185 mg/L、KH2PO4 85 mg/L、K2SO4 495 mg/L；
微量元素的组分和其对应的使用浓度如下：硫酸锰（MnSO4·H2O）22.3 mg/L、硫酸锌（ZnSO4·7H2O）8.6 mg/L、硼酸（H3BO3）6.2 mg/L、钼酸钠（Na2MoO4·2H2O）0.25 mg/L、硫酸铜（CuSO4·5H2O）0.025 mg/L、氯化钴 （CoCl2.6H2O）0.025 mg/L；
铁盐的组分和其对应的使用浓度如下：乙二胺四乙酸二钠（Na2·EDTA ）37.3 mg/L、硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）27.8 mg/L；
有机成分的组分和其对应的浓度如下：肌醇100 mg/L、甘氨酸（Gly）2 mg/L、盐酸硫胺素（VB1）1 mg/L、盐酸吡哆醇（VB6）0.5 mg/L、烟酸（VPP）0.5 mg/L。
将配置好的培养基注入玻璃瓶中，经高温高压消毒20分钟，待用，其中，温度为120 125 ~
℃，压力为1.1 KG/CM2。
移栽基质的准备：
将泥炭和珍珠岩按照体积比2:1装入塑料育苗盘育中，浇透水备用，基质每立方用20 g
50 %多菌灵可湿性粉剂进行消毒杀菌；
华紫珠组组培苗瓶外生根方法，按以下步骤进行：
（1）植物组织消毒处理：选取生长健壮、无病虫害的华紫珠的嫩茎作为外植体，然后将所选取的外植体剪切成10 cm长的带芽茎段，经洗洁精消毒10 min，再用1 %的次氯酸钠消毒10 min，最后用无菌水冲洗5次；
（2）组培苗培养：在超净工作台上和无菌条件下，将消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位，留1 2 cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中，然后将其置于普通~
日光灯为光源的环境下，光照强度为1500 2000 Lx，每日光照时间为16小时，温度20±2 ~
℃，相对湿度60 65 %，在该培养基中可以获得健壮的增殖苗。一个周期20天的繁殖倍数为~
3.67倍，20 d后长成6 8 cm的健壮无菌组培苗可进入下一步骤；
~
（3）组培苗瓶外扦插：开瓶炼苗2 d后，取出组培苗，洗净，按单株剪下，每株剪成3 4 cm~
带芽茎段待扦插；扦插前蘸取生根水3 5 s，浸泡组培苗基部1 2 cm，扦插深度以1 1.5 cm，~ ~ ~
扦插过程中不时的喷洒水分，以保障幼苗不枯萎；
（4）扦插后管理：扦插完毕后浇透水，在幼苗上方用保鲜膜覆盖包裹，培养12 d后撤去保鲜膜，每隔三天浇一次水，每两周喷一次叶面肥，每月喷一次杀菌剂。27 d幼苗基部长出大量根系。一个月后统计发现，生根率达92.8％，平均根数12.5条，最长根长7.36 cm，株高
3.05 cm，鲜重0.26 g。2个月后得到健壮的华紫珠苗，并移栽至营养钵内进行种植，移栽成活率96.5%，省去了瓶内生根环节，育苗周期缩短1个月以上。
常量元素的组分和其对应的使用浓度如下：NH4NO3 200 mg/L、Ca(NO3)2·4H2O 278 mg/L、CaCl2·2H2O 48mg/L、MgSO4·7H2O 185 mg/L、KH2PO4 85 mg/L、K2SO4 495 mg/L；
微量元素的组分和其对应的使用浓度如下：硫酸锰（MnSO4·H2O）22.3 mg/L、硫酸锌（ZnSO4·7H2O）8.6 mg/L、硼酸（H3BO3）6.2 mg/L、钼酸钠（Na2MoO4·2H2O）0.25 mg/L、硫酸铜（CuSO4·5H2O）0.025 mg/L、氯化钴 （CoCl2.6 H2O）0.025 mg/L；
铁盐的组分和其对应的使用浓度如下：乙二胺四乙酸二钠（Na2·EDTA ）37.3 mg/L、硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）27.8 mg/L；
有机成分的组分和其对应的浓度如下：肌醇100 mg/L、甘氨酸（Gly）2 mg/L、盐酸硫胺素（VB1）1 mg/L、盐酸吡哆醇（VB6）0.5 mg/L、烟酸（VPP）0.5 mg/L。
将配置好的培养基注入玻璃瓶中，经高温高压消毒20分钟，待用，其中，温度为120 125 ~
℃，压力为1.1 KG/CM2。
移栽基质的准备：
将泥炭装入塑料育苗盘育中，浇透水备用，基质每立方用20 g 50 %多菌灵可湿性粉剂进行消毒杀菌；
华紫珠组组培苗瓶外生根方法，按以下步骤进行：
（1）植物材料消毒：选取生长健壮、无病虫害的华紫珠的嫩茎作为外植体，然后将所选取的外植体剪切成10 cm长的带芽茎段，经洗洁精消毒10分钟，再用1 %的次氯酸钠消毒10分钟，最后用无菌水冲洗5次；
（2）组培苗培养：在超净工作台上和无菌条件下，将消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位，留1 2 cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中，然后将其置于普通~
日光灯为光源的环境下，光照强度为1500 2000 Lx，每日光照时间为16小时，温度20±2 ~
℃，相对湿度60 65 %，在该培养基中可以获得健壮的增殖苗。一个周期20 d的繁殖倍数为~
3.67倍，长成6 8 cm的健壮无菌组培苗可进入下一步骤；
~
（3）组培苗瓶外扦插：开瓶炼苗2 d后，取出组培苗，洗净，按单株剪下，每株剪成3 4 cm~
带芽茎段待扦插；扦插前蘸取生根水3 5 s，浸泡组培苗基部1 2 cm，扦插深度以1 1.5 cm，~ ~ ~
扦插过程中不时的喷洒水分，以保障幼苗不枯萎；
（4）扦插后管理：扦插完毕后浇透水，在幼苗上方用保鲜膜覆盖包裹，培养14 d后撤去保鲜膜，每隔三天浇一次水，每两周喷一次叶面肥，每月喷一次杀菌剂。25 d幼苗基部长出大量根系。一个月后统计发现，生根率达93.2％，平均根数14.1条，最长根长6.29 cm，株高
3.56 cm，鲜重0.42 g。2个月后得到健壮的华紫珠苗，并移栽至营养钵内进行种植，移栽成活率95.7%，省去了瓶内生根环节，育苗周期缩短1个月以上。
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