一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物及其制剂的制备方法
技术领域
[0001] 本
发明属于兽用中药制药技术领域，具体公开了一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物及其制剂的制备方法。
背景技术
[0002] 黄芩为常用中药，是唇形科
植物黄芩的干燥根，含有黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷和汉黄芩素等。药理研究表明黄芩素有抑菌抗炎、降压利尿、清除超
氧自由基、抑制脂肪酶等药理作用，黄芩苷的结构为黄芩素7位连接一个
葡萄糖醛酸苷，相关研究表明(郑守军，孙锦玉，吴悠，等.Al(Ⅲ)-木犀草素和黄芩素配合物的合成、表征及抗氧化活性[J].四川大学学报：工程科学版，2016，48(1)：215；连林旺.黄芩素-钌(Ⅲ)配合物的合成、表征及体外
生物活性研究[D].临汾：山西师范大学，2015：32-33)，一些微量金属本身有一定的生理活性，若将黄芩素或黄芩苷转化为金属配合物，则可能增强其疗效，甚至产生新的药理作用，如增加其清除自由基能
力，
预防手术后
炎症感染。目前，非
专利文献和专利文献中有少量关于黄芩素金属络合物的公开报道，但均存在一定不足：
[0003] 胡功政、管倩等于2017年在公开号CN107721962A、名称为“一种黄芩素
铝络合物及其制剂的制备方法”的专利
申请中将黄芩素加入
水中，边搅拌边滴加
碱溶液，至溶液pH值为6.5～7；边搅拌边滴加饱和含铝化合物溶液，直至不再产生絮状物时停止添加；静置过夜，弃去上清，并用抗
氧化剂水溶液反复洗涤沉淀物后，干燥，即得黄芩素铝络合物。但该方法利用黄芩素和含铝化合物制备黄芩素铝络合物，目前《中国药典》仅录入了黄芩提取物标准，并未建立黄芩素的相关标准，故直接采用黄芩素入药能否通过药物审批进入实际应用环节存在很大不确定性，且此反应过程更像是化学合成，同时应用到碱
试剂，含铝化合物，抗氧化剂，对环保造成一定压力，生产工艺复杂，不利于工业化生产。
[0004] 卞毓平于2015年在公开号CN106176935A、名称为“一种黄芩素铝胶囊及其制备方法”的专利申请中取黄芩粗粉1000g，加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60℃相对
密度为1.05，加
乙醇使含醇量的体积百分比达75％，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，缓缓加入饱和明矾水溶液，使成沉淀，滤过，沉淀用水洗涤至无
硫酸根为止，干燥，
粉碎，制粒，装胶膏，即得黄芩素铝胶囊。该方法虽然直接用生药材进行提取，但整个过程历经提取，浓缩，醇沉，浓缩，过程繁琐，能耗高，不利于工业化生产。
[0005] 郑守军等于2016年在文献《Al(Ⅲ)-木犀草素和黄芩素配合物的合成、表征及抗氧化活性》中将称取木犀草素/黄芩素(0.5mol)于带有磁力搅拌和
温度计的三口圆底烧瓶中，加入无水乙醇，在30℃下加热搅拌使其完全溶解。待溶液的
颜色转为浅黄色时，加入固体
硝酸铝112.6mg(0.3mol)至烧瓶中。此时溶液颜色迅速变为深黄色。反应结束后，将反应液在室温下静置5d直至大部分
溶剂挥发，有亮绿色的沉淀析出。过滤，
滤饼用无水乙醇至少洗涤3次以除去未参与反应的木犀草素/黄芩素和硝酸铝，然后放入
真空干燥箱中烘干至恒重，得到深黄色粉末。不仅过程较为繁琐，且由于产生大量硝酸气体，多次挥发溶剂。不利于工业化大生产和环保。
[0006] 邓毅于2007年在硕士论文中《黄芩苷、黄芩素、麦冬多糖铬配合物的研究》中称取黄芩素135mg(0.5mol)于100ml三口烧瓶中，加入25ml无水乙醇，搅拌溶解。加热回流0.5h后，再加入无水
醋酸钠40mg(0.5mmol)和六水合三氯化铬70mg(0.25mol)，反应液继续搅拌回流4h。待反应液冷却至室温后抽滤，沉淀物用热的无水乙醇、去离子水洗涤三次以上，除去未反应的黄芩素和三氯化铬，于60℃下烘干至恒重。该方法需首先通过层析柱法制备高纯度黄芩素，再进行黄芩素和金属的络合反应，仅在实验室完成，过程繁琐，难以放大生产投入实际应用。
[0007] 连林旺于2015年在硕士论文中《黄芩素-钌(III)配合物的合成、表征及体外生物活性研究》中称取一定量干燥至恒重的黄芩素，加入已脱气的无水乙醇中，加热搅拌至黄芩素完全溶解。称取RuCl3标准品溶于已脱气的无水乙醇中，将两溶液混合，定容至100mL，缓慢滴加0.1mol/L的
氨水，用pH计调至pH＝8～9左右，反应液在40℃加热回流，氩气保护下充分反应四小时，产生沉淀，陈化两小时，离心去上清液。将沉淀用无水乙醇反复洗三次，把剩余反应物洗去；再用乙酸乙酯和丙
酮洗涤数次至清洗液颜色不在变化，将终产物于真空干燥箱中40℃干燥24小时。该方法中采用的氨水对环保造成很大压力，充稀有气体等过程都难以放大生产，且过程成本及设备投入高。
发明内容
[0008] 胶体矿物，即由以水为分散媒、以固相为分散相的水胶凝体而形成的非晶质或超显微的隐晶质矿物，如中药矿石，胶体粒子因为具有很大的
比表面积，导致其能够
吸附阴离子或者阳离子，从而减弱或者消除胶体表面的电荷，达到聚沉目的。本文利用胶体矿物的聚沉这一特性，和化学结构上具有邻三酚羟基的黄芩素、黄芩苷进行络合反应而使其以金属络合物形式聚沉。
[0009] 针对
现有技术中存在的不足，本发明提供了一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物及其制剂的制备方法，解决了现有制备方法中有机试剂的耗费大及能耗高的问题。本发明中采用的原料都是中药材的组合进行反应，解决了化学合成类方法设备要求高，工艺繁琐，中药和化药一起制备不易通过审批等问题。本发明的制备方法简便易行，利于工业化生产。
[0010] 一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物的制备方法，步骤如下：
[0011] (1)将黄芩饮片投入乙醇溶液中50-70℃温浸至少2次，每次1.5小时，合并温浸液，减压浓缩至乙醇含量测量为零，得浓缩液A，保温备用；
[0012] (2)取矿石类中药，用10％～80％倍黄芩饮片重量纯化水煎煮至少两次，每次0.5小时，得煎煮液B；
[0013] (3)将煎煮液B和浓缩液A按照一定比例混合，过滤，取沉淀，用纯化水洗涤沉淀至少3次后，制得黄芩素金属络合物。
[0014] 优选的，所述步骤(1)中，乙醇溶液为40(v/v)％-80(v/v)％的乙醇溶液；保温温度范围为30-80℃，优选为50-70℃。
[0015] 优选的，所述步骤(1)中，每次温浸用所加乙醇溶液的重量是黄芩饮片的8倍。
[0016] 优选的，所述步骤(2)中，所述矿石类中药选自胆矾、白矾、皂矾、炉甘石、赭石和赤石脂中的一种或两种以上，矿石中药总重量为黄芩饮片重量的1％～8％。
[0017] 更优选的，所述矿石类中药为炉甘石。
[0018] 更优选的，所述矿石类中药组合为以下任一组合：胆矾和白帆、皂矾和炉甘石、赭石和赤石脂、胆矾和炉甘石，所述组合中两种矿石的重量比例优选为1:1，矿石类中药总重量为黄芩饮片重量的8％，每次煎煮所用纯化水为黄芩饮片重量的80％。
[0019] 优选的，所述步骤(3)中，煎煮液B和浓缩液A的重量比例为1:10～1:100。
[0020] 进一步，将上述制备方法制备的黄芩素金属络合物制成制剂，包括以下步骤：
[0021] 取经干燥后的黄芩素金属络合物与辅料分别粉碎，过筛，混合，干燥，即得黄芩素金属络合物
固体制剂。
[0022] 进一步，所述固体制剂中黄芩素金属络合物占制剂总重量的40％-60％。
[0023] 进一步，所述辅料选自乳糖、
蔗糖、黄原胶、羧甲基
纤维素钠、
淀粉、糊精、羟丙基-β环糊精中的至少一种。
[0024] 与现有技术相比，本发明的优点和有益效果在于：
[0025] 本发明以中药黄芩饮片和矿石类中药为原料，公开了一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物及其制剂的方法。本发明采用矿石聚沉法提取，相比于传统的水回流提取乙醇沉淀法或酸碱析出法，大大降低了有机试剂的耗费及能耗，节省了生产周期及成本，且利于保护环境，还解决了现有的中药和化药组合不易通过审批的问题以及酶法提取不易于工业化生产的问题，并且制得的黄芩素金属络合物含量高。
[0026] 综合以上结果，本发明为纯中药组合，工艺简便易行，绿色环保，利于工业化生产。
附图说明
[0027] 图1为黄芩苷对照品的HLPC图。
[0028] 图2为
实施例1制备的黄芩素金属络合物的HLPC图。
[0029] 图3为实施例2制备的黄芩素金属络合物的HLPC图。
[0030] 图4为实施例3制备的黄芩素金属络合物的HLPC图。
[0031] 图5为实施例4制备的黄芩素金属络合物的HLPC图。
[0032] 图6为实施例5制备的黄芩素金属络合物的HLPC图。
[0033] 图7为实施例4步骤(3)制备的黄芩素金属络合物制剂外观图，其他实施例所得产品外观也与此相似，不一一罗列。
具体实施方式
[0034] 下面
申请人结合具体实施例来对本发明的技术方案做进一步的详细阐述。
[0035] 以下实施例中所用黄芩饮片购自襄阳市神农永康药业有限公司，药材基源为山西省晋城市陵川县，道地产区。
[0036] 实施例1一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物的制备方法，步骤如下：
[0037] (1)将100g黄芩饮片投入800g40(v/v)％乙醇溶液中温浸(60℃)2次(第二次乙醇溶液用量也是800g，下同)，每次1.5小时，合并温浸液，减压浓缩至酒精含量测定计示数为零，得浓缩液A，于60℃保温备用；
[0038] (2)取矿石类中药胆矾和白矾各4g，用纯化水煎煮两次，每次80g纯化水，得煎煮液B；
[0039] (3)将煎煮液B和浓缩液A按照
质量比为1:20混合后，过滤取沉淀，用纯化水洗涤沉淀3次后干燥制得黄芩素金属络合物，质量为19.93g。
[0040] 制得黄芩素金属络合物含量测定图谱见图2，含量以黄芩苷计算，为46.12％，按照黄芩药材黄芩苷含量9.7％计算，提取率为100％*19.93*0.4612/(9.7％*100)＝94.76％，以下实施例的计算方式同。图1为黄芩苷对照品图谱。
[0041] 实施例2一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物的制备方法，步骤如下：
[0042] (1)将100g黄芩饮片投入800g50(v/v)％乙醇溶液中温浸(60℃)2次，每次1.5小时，合并温浸液，减压浓缩至酒精含量测定计示数为零，得浓缩液A，于60℃保温备用；
[0043] (2)取矿石类中药皂矾、炉甘石各4g，煎煮两次，每次80g纯化水，得煎煮液B；
[0044] (3)将煎煮液B和浓缩液A按照质量比为1:30混合后过滤取沉淀，用纯化水洗涤沉淀3次后干燥制得黄芩素金属络合物，质量为19.72g。
[0045] 制得黄芩素金属络合物含量测定图谱见图3，含量以黄芩苷计算，为47.25％，提取率为96.06％。
[0046] 实施例3一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物的制备方法，步骤如下：
[0047] (1)将100g黄芩饮片投入800g50(v/v)％乙醇溶液中温浸(60℃)2次，每次1.5小时，合并温浸液，减压浓缩至酒精含量测定计示数为零，得浓缩液A，于60℃保温备用；
[0048] (2)取炉甘石8g，煎煮两次，每次80g纯化水，得煎煮液B；
[0049] (3)将煎煮液B和浓缩液A按照质量比为1:40混合后过滤取沉淀，用纯化水洗涤沉淀3次后干燥制得黄芩素金属络合物，质量为20.27g。
[0050] 制得黄芩素金属络合物含量测定图谱见图4，含量以黄芩苷计算，为46.46％，提取率为97.09％。
[0051] 实施例4一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物及其制剂的制备方法，步骤如下：
[0052] (1)将100g黄芩饮片投入800g50(v/v)％乙醇溶液中温浸(60℃)2次，每次1.5小时，合并温浸液，减压浓缩至酒精含量测定计示数为零，得浓缩液A，于60℃保温备用；
[0053] (2)取皂矾8g，煎煮两次，每次80g纯化水，得煎煮液B；
[0054] (3)将煎煮液B和浓缩液A按照质量比为1:50混合后过滤取沉淀，用纯化水洗涤沉淀3次后干燥制得黄芩素金属络合物，质量为20.43g。
[0055] 制得黄芩素金属络合物含量测定图谱见图5，含量以黄芩苷计算，为46.74％，提取率为98.44％。
[0056] 将制得的30g黄芩素金属络合物和28g乳糖、2g羧甲基
纤维素钠、0.5g黄原胶分别粉碎，过120目筛，混合，干燥，即得黄芩素金属络合物制剂，外观：黄色粉末。
[0057] 实施例5一种矿石聚沉法制备黄芩素金属络合物制剂的制备方法，步骤如下：
[0058] (1)将100g黄芩饮片投入800g50(v/v)％乙醇溶液中温浸(60℃)2次，每次1.5小时，合并温浸液，减压浓缩至酒精含量测定计示数为零，得浓缩液A，于60℃保温备用；
[0059] (2)取赭石8g，煎煮两次，每次80g纯化水，得煎煮液B；
[0060] (3)将煎煮液B和浓缩液A按照质量比为1:60混合后过滤取沉淀，用纯化水洗涤沉淀3次后干燥制得黄芩素金属络合物，质量为19.98g。
[0061] 制得黄芩素金属络合物含量测定图谱见图6，含量以黄芩苷计算，为47.06％，提取率为96.93％。
[0062] 将制得的20g黄芩素金属络合物和18g乳糖、1g
羧甲基纤维素钠、0.3g黄原胶分别粉碎，过120目筛，混合，干燥，即得黄芩素金属络合物制剂，外观：黄色粉末。
[0063] 实施例1-5中黄芩素金属络合物含量测定色谱条件与系统适用性试验：采用Diamonsil-C18色谱柱(250×4.6mm，5μm)；以乙腈为流动相A，以0.05％
磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测
波长为278nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。
[0064]
