821 |
一种黑痣菌子囊果提取基因组DNA的方法 |
CN201610065875.9 |
2016-01-29 |
CN105586334B |
2019-05-17 |
李晓玲; 李成云; 刘林; 杨静; 鄢进陆; 彭莞云; 杨亚琼; 刘立娜; 王慧; 王一; 王春梅; 杨雅婷 |
本发明公开了一种黑痣菌子囊果提取基因组DNA的方法,与现有技术相比,本发明直接以黑痣菌子囊果为材料,进行DNA提取的方法。在进行DNA提取前,采用裂解液缓冲液处理2次,利用低温下DNA溶解度低的原理去除过多的胶质和多糖,最后加入提取液裂解细胞膜,进行DNA的提取,提取过程中加苯酚‑氯仿‑异戊醇进行抽提去除多余的蛋白。本方法适用于含有胶质和多糖、蛋白等含量高的较高的真菌材料,此类杂质存在和含量对所抽提到的DNA的产量和质量均无明显的影响,为黑痣菌的后续分子研究提供了保证,具有推广使用的价值。 |
822 |
用于蛋白质组学研究的山羊乳乳脂肪球膜蛋白的提取方法 |
CN201810163762.1 |
2018-02-27 |
CN108299552A |
2018-07-20 |
郭明若; 孙玉雪; 王翠娜 |
本发明的用于蛋白质组学研究的山羊乳乳脂肪球膜蛋白的提取方法,属于乳脂肪球膜蛋白提取的技术领域。首先向山羊乳样品中加入蔗糖,高速离心后获得粗分离的乳脂肪,将粗提的乳脂肪先后用磷酸钾盐缓冲溶液和超纯水洗涤,再用裂解液裂解,最后用预冷丙酮溶液进行提纯,得到乳脂肪球膜蛋白样品。本发明的方法可以有效降低低含量酪蛋白组分的影响,所提取的乳脂肪球膜蛋白提取率更高稳定性更强,在山羊乳乳脂肪球膜蛋白质组学研究方面有较好的推广应用前景和经济价值。 |
823 |
一种使用磁珠从血清或血浆样品中分离游离核酸的方法 |
CN201410151876.6 |
2014-04-16 |
CN103952397A |
2014-07-30 |
韩典霖; 俞萍; 李晓晨; 孙克非 |
本发明涉及一种使用磁珠从血清或血浆样品中分离游离核酸的方法,属于核酸纯化领域。首先向在无核酸酶离心管中加入血清/血浆样本、裂解缓冲液、蛋白酶K和磁珠悬浮液,充分混匀后进行裂解,并使核酸吸附到磁珠表面,在外加磁场的作用下进行纯化,经过漂洗步骤去除蛋白、多糖和盐等杂质,最后加入无核酸酶的水洗脱,得到游离核酸溶液。本发明方法具有简单快速、稳定高效和价格便宜的特点,所纯化游离核酸完整、纯度高,可直接用于后续实验。 |
824 |
一种高温碱性蛋白酶及其制备方法 |
CN201310268933.4 |
2013-06-28 |
CN103436511A |
2013-12-11 |
曾润颖; 徐辉 |
一种高温碱性蛋白酶及其制备方法,涉及蛋白酶。提供一种高温碱性蛋白酶Fppro1及制备方法,以及高温碱性蛋白酶基因Fppro1。高温碱性蛋白酶Fppro1的生产菌株为太平洋火色杆菌Flammeovirga Pacifica H2。制备时,克隆高温碱性蛋白酶基因Fppro1,将其插入表达载体,构建携带高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体;将高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,选取阳性克隆于培养基中培养;离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞,重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中,将裂解后的悬液离心,收集上清液,再与Ni-NTA Agarose混匀,纯化。 |
825 |
一种浓缩缓冲清洗液 |
CN202311305037.0 |
2023-10-10 |
CN119309891A |
2025-01-14 |
吴兴业; 黄亦炜; 于美 |
本发明公开了一种浓缩缓冲清洗液,原料主要包括:磷酸氢二钠,磷酸二氢钠,吐温‑20,丙二醇,氯化钠,三羟甲基氨基甲烷(Tris)和纯水,且该浓缩缓冲清洗液的pH值范围为pH 8.9~9.1。本发明采用独特的裂解和结合缓冲体系,能够兼容多种组织学、细胞学样本等各种类型。高(pH值)抗原缓冲清洗液Buffer能兼容多种组织学、细胞学样本类型,包括新鲜组织或冷冻的细胞、胸腹水、组织渗出液等,在蛋白酶K的协同作用下,使多种组织学、细胞学样本中的游离核酸与核酸结合蛋白迅速彻底分离;随后吸附结合缓冲液提供的高盐条件使分离出来的游离核酸与抗体高效结合,并防止变性蛋白和脂质等杂质堵塞机器的探针。 |
826 |
一种电化学免疫用DNA甲基化特异性检测方法 |
CN202111123289.2 |
2021-09-24 |
CN113866239A |
2021-12-31 |
郑峻松; 李艳; 刘华敏; 方立超; 朱全敬; 黄辉; 汪莉娜; 朱垂雨; 邓均; 李承红; 刘飞雪; 吴春梅 |
本发明公开了一种电化学免疫用DNA甲基化特异性检测方法,包括步骤一,DNA提取;步骤二,PCR扩增;步骤三,电化学免疫传感器检测;其中上述步骤一中,首先对样品进行预处理,然后取适量样品,加入裂解缓冲液,使样品在55~65℃的环境下静置1.5~2.5h进行裂解分离,然后取裂解分离后的上清液,用混合有机溶剂抽提出DNA,得到含DNA的抽提液;该发明采用电化学免疫传感器对PCR扩增产物进行检测,通过电化学免疫传感器的电流响应绘制电流曲线,通过电流曲线的变化,实现对DNA甲基化特异性检测的目的,该检测方式较为简单、全面,所需样本较少,且该电化学免疫传感器可重复使用,便于重复检测,降低了成本,便于推广使用。 |
827 |
利用超滤进行病毒纯化 |
CN200680011815.3 |
2006-04-11 |
CN101155915A |
2008-04-02 |
M·韦格曼 |
本发明提供了一种纯化病毒的方法,包含通过超滤步骤,其中渗余物含有该病毒,其中在渗透物侧施加的背压为至少在5kPa。本发明也提供了纯化重新腺病毒的方法,该方法主要包括a)培养用上述的重组腺病毒感染的细胞,b)裂解上述的细胞,去除游离核酸,得到含有重组腺病毒的裂解液,c)将裂解液澄清过滤,得到腺病毒制备物,d)将腺病毒制备物进行超滤浓缩,其中所述腺病毒制备物保留在渗余物中,e)将d)步骤得到的腺病毒制备物进行超滤,其中腺病毒在渗余物中,用至少5倍渗滤体积(DFVs)的缓冲液对其进行置换,其中步骤d)和e)中施加于渗透物侧的背压为至少5kPa。 |
828 |
一种用于提取含多糖多酚的植物DNA的裂解液以及试剂盒 |
CN202411832007.X |
2024-12-12 |
CN119331866A |
2025-01-21 |
蒋富凤; 庄梦实; 万强; 曲晓莹; 蔡芷荷; 吴清平; 杨宁; 黄嘉慧; 黄惠书 |
本发明公开了一种用于提取含多糖多酚的植物DNA的裂解液,所述裂解液各组分的含量组成为:50~500mmol/L缓冲液、1~2 mol/L氯化物、2%~5%表面活性剂、10~50 mmol/L金属离子络合物、10~100 mmol/L抗氧化剂。本发明利用纯化柱对DNA的特异性吸附作用,提供了一种快速简便的从各类植物材料中提取高质量、高收率DNA的方法。该方法整个操作过程只有30~40 min,过程简便迅速,为相关植物DNA领域的工作者提供一种参考方式。 |
829 |
一种用于检测毛发中毒品的试剂盒及其检测方法 |
CN202011543524.7 |
2020-12-24 |
CN112748240A |
2021-05-04 |
曹丹; 成舜 |
本发明公开了一种用于检测毛发中毒品的试剂盒,包括裂解液、检测试剂;其中裂解液包括PH在7‑9的10mM PBS缓冲液、20mM DTT以及100ug/mL的蛋白酶K;所述检测试剂包括DNA1‑Met抗原偶联物、DNA2‑Met抗体偶联物、DNA3以及氧化石墨烯结合抗氧化剂;本发明检测方法包括:S1:试剂配制;S2:预处理;S3:反应一;S4:反应二;S5:检测。本发明试剂盒操作简单,针对毛发进行毒品检测,在5分钟左右出检测报告,一次性可检验一种或多种毒品,适合筛选。 |
830 |
一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒及引物探针组 |
CN202010094323.7 |
2020-02-15 |
CN111074007A |
2020-04-28 |
方圆; 宋泽世; 蔡青青; 郏肯特; 田西西 |
本发明公开一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒及引物探针组,试剂盒包括(1)灭活裂解液;(2)恒温扩增体系:反应缓冲液BufferA、醋酸镁BufferB、阴性对照、无核酸酶水、引物探针组和RAA酶。通过裂解液快速灭活并释放病毒核酸,并利用恒温扩增技术,快速富集并扩增目的区域,通过带有修饰基团的探针与带有生物素的产物结合,通过侧向层析技术,利用胶体金显色,快速确认是否存在特异性扩增产物。该试剂盒操作简单,无需专业抽提试剂和检测仪器,摆脱了检测实验室和专业人员的限制,可以在户外无仪器状态下进行快速检测,全流程仅需30min,判读非常方便。 |
831 |
一种基于信号放大检测HCV病毒载量的方法 |
CN201810303707.8 |
2018-04-03 |
CN108504777A |
2018-09-07 |
张铁汉; 杨根庆; 杨秀珍; 张晓文; 刘燕子 |
本发明属于病毒诊断技术领域,特别涉及一种基于信号放大检测HCV病毒载量的方法,分别设计HCV病毒型别中HCV1b、HCV2a、HCV3a、HCV3b、HCV6b5种型别的特异性引物,检测样品、通用捕获引物和裂解液混合裂解,再加入检测探针缓冲液进行杂交,经放大分子溶液放大后依次加探针标记物和底物,完成捕获杂交后的信号放大,最后用化学发光检测信号获得样品中HCV病毒载量。本发明的敏感性在200-300个HCV病毒拷贝才能检测到,对于临床患者的病毒载量的监测其敏感性是足够的,可有效避免测定结果假阳性的基础上,简便、快速地实现对样品中HCV-RNA准确定量。 |
832 |
一种烷基型硫酸酯酶及其制备方法 |
CN201010274512.9 |
2010-09-07 |
CN101942427B |
2012-10-10 |
阮灵伟; 徐洵; 龙梦娴 |
一种烷基型硫酸酯酶及其制备方法,涉及硫酸酯酶。提供一种烷基型硫酸酯酶SdsA及制备方法,以及烷基型硫酸酯酶基因sdsA。烷基型硫酸酯酶SdsA的生产菌株为假单胞菌株Pseudomonas sp.S9。制备时,克隆烷基型硫酸酯酶基因sdsA,将烷基型硫酸酯酶基因sdsA插入表达载体,构建携带烷基型硫酸酯酶基因sdsA的重组表达载体;将烷基型硫酸酯酶基因sdsA的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,选取阳性克隆于培养基中培养;离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞,重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中,将裂解后的悬液离心,收集上清液,再与Ni-NTA Agarose混匀,纯化。 |
833 |
一种土壤线虫DNA提取方法 |
CN200810011414.9 |
2008-05-15 |
CN101580830A |
2009-11-18 |
梁文举; 李风平; 李琪; 张晓珂 |
本发明涉及动物DNA提取,具体为一种土壤线虫DNA提取方法。采用淘洗-过筛-硫酸镁梯度离心方法将线虫从土壤样品中提取出来,用加热方法将其杀死,得到线虫悬液;然后,在线虫悬液中先加入细胞裂解缓冲液进行冻融处理,再加入蛋白酶进行保温消化;分别采用氯仿、异戊醇抽提DNA和NaAc、异丙醇沉淀DNA,室温下自然干燥,即可得到土壤线虫DNA。本发明采用物理、化学、酶法相结合方法对线虫细胞进行裂解,提高了线虫DNA提取率。成本较低廉,适于土壤线虫群落DNA的提取。 |
834 |
一种血浆游离DNA全自动化提取试剂盒及方法 |
CN202311154509.7 |
2023-09-08 |
CN117286134A |
2023-12-26 |
罗艳芳; 李因来 |
本发明提供了一种血浆游离DNA全自动化提取试剂盒及方法,试剂盒包括:裂解液:1~5M的离液盐,1~5%的表面活性剂,2~20mM的EDTA,0.1~0.5M的钠盐,5~40mM缓冲液,30~50%醇;洗涤液1:2.5~3.5M的离液盐,30~60%醇,10~20mM缓冲液;洗涤液2:70~85%醇;洗脱液:pH 7.5~8.510mM Tris‑HCl。本发明的试剂盒搭配合适的自动化提取系统,可以轻松实现“一步上样,全自动提取”,在1个小时内轻松完成数十个样本的游离DNA提取,达到快速、高通量、标准化提取的效果。 |
835 |
一种多功能缓冲液及其应用 |
CN202011235763.6 |
2020-11-09 |
CN112094888A |
2020-12-18 |
徐根明; 鞠巍; 秦闯华; 潘艺; 赵谦 |
本发明公开了一种多功能缓冲液及其应用。本发明的多功能缓冲液不仅能有效抑制微生物生长,失活待检测病毒、细菌或细胞,而且还能够保护其裂解后释放的核酸,防止被核酸酶降解。更重要的是该含有待检测核酸的缓冲液可以直接用来进行常规QPCR检测或者直接进行RPA、HDA、LAMP等等温扩增检测。不需要核酸抽提,也就减少了可能的核酸损失,提高了检测的灵敏度,简化了检测步骤。多功能缓冲液使整个检测过程可以不再需要开盖加入试剂或转移试剂,这样尽最大可能避免了样本间交叉污染,也避免了对检测人的感染。由于本发明的多功能缓冲液可以常温运输,不需要冷链运输从而降低了运输成本。 |
836 |
人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液及其制备方法和应用 |
CN201711222569.2 |
2017-11-29 |
CN107937391A |
2018-04-20 |
左红伟; 李志甲; 朱凤 |
本发明提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液,包括:1mol/L~8mol/L胍盐、1mM~20mM金属离子螯合剂和pH7.5~8.0的100mM Tris-HCl缓冲溶液,其中,胍盐选自盐酸胍、异硫氰酸胍和硫氰酸胍中的至少一种,金属离子螯合剂选自乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸的水溶性盐中的至少一种。优选地,还包括1%体积~20%体积的表面活性剂,表面活性剂为非离子型去污剂,非离子型去污剂选自Tween-20、Tween-80、Brij-35、NP40和Triton-100中的至少一种。还提供了相关制备方法和应用。本发明的裂解液能够快速高效裂解细胞,充分释放核酸,满足后续核酸检测用量,适于大规模推广应用。 |
837 |
一种PCR管及其应用于靶标核酸分子的检测方法 |
CN202310173522.0 |
2023-02-27 |
CN116445258A |
2023-07-18 |
李刚; 罗昱; 石子轩 |
本发明用于核酸检测技术领域,特别涉及一种PCR管及其应用于靶标核酸分子的检测方法,PCR管包括管体;第一隔离块,设在管体内,第一隔离块上设有第一缺口;第二隔离块,设在管体内,第二隔离块位于第一隔离块下方,第二隔离块上设有第二缺口;细胞裂解液,细胞裂解液中包含磁性纤维素微球;清洗缓冲液,设在第一隔离块与第二隔离块之间;PCR反应试剂。这种PCR管能减少清洗步骤和时间和全封闭核酸扩增检测。一种PCR管应用于靶标核酸分子的检测方法,样品液加至管体;利用磁铁带动磁性纤维素微球进入清洗缓冲液中;利用磁铁带动磁性纤维素微球进入PCR反应试剂中;PCR管放入PCR扩增仪中扩增反应,利用对应荧光探针照射管体,观察PCR反应试剂中是否发射荧光。 |
838 |
一种尿液保存液及其应用 |
CN202411332718.0 |
2024-09-24 |
CN119278929A |
2025-01-10 |
王敬羽; 高一博; 梁智欣; 欧阳任; 毛宇翔; 黄创良 |
本发明涉及一种尿液保存液及其应用。本发明提出的尿液保存液,包括pH缓冲剂、DNA酶抑制剂、RNA酶抑制剂、裂解剂、细胞固定剂、固定辅助剂、漂洗剂、醛基淬灭剂、防腐剂;本发明所述的尿液保存液应用在尿液或体液保存中,将尿液或体液样本与所述尿液保存液按体积比5:1的比例进行混合,室温或冷藏保存。本发明的尿液保存液不仅能够减少尿液保存过程中的核酸降解,还能够在室温下保持尿液中脱落细胞的完整性和形态,以支持后续的细胞学检查。 |
839 |
一种新型的从微载体收获产物的方法 |
CN202310087871.0 |
2023-01-12 |
CN116162602A |
2023-05-26 |
刘宇骁; 金优萍; 王鹤霖; 张明芳; 顾晓旭; 杨琳; 许月英; 孟益锋; 胡秀华; 蒋俊俊 |
本发明涉及一种新型的从微载体收获产物的方法。具体地,本发明提供一种由细胞培养物中收获细胞产物的方法,包括步骤:采用具有100‑1000目的滤网通过切向流模式对含有所述产物的细胞培养物进行缓冲液交换,收获穿过所述滤网的含产物的换出液,所述细胞培养物含有用于所述细胞贴壁的微载体,所述细胞分泌所述产物或所述细胞经裂解以释放所述产物。 |
840 |
一种炭疽菌原生质体的制备方法及遗传转化体系的构建方法 |
CN202310027554.X |
2023-01-09 |
CN115806885A |
2023-03-17 |
吕务云; 蒋鸿; 王玉春; 曹清海; 涂一怡; 吴紫微 |
本发明属于微生物遗传转化技术领域,具体涉及一种炭疽菌原生质体的制备方法及遗传转化体系的构建方法。本发明以磷酸缓冲液溶解崩溃酶和溶壁酶制备成酶解液对炭疽菌菌丝进行裂解制备炭疽菌原生质体,获得的原生质体数量多,质量好,且步骤简便易操作。以此方法获得的炭疽菌原生质体可以快速有效构建得到PEG介导的炭疽菌遗传转化体系,且转化效率较高。 |