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序号 专利名 申请号 申请日 公开(公告)号 公开(公告)日 发明人
801 一种改进的Trizol提取DNA方法 CN201811143794.1 2018-09-29 CN109295047A 2019-02-01 柏锦程; 张振
发明专利公布了一种改进的Trizol提取DNA方法,所需试剂和材料包括:磁珠、Trizol、氯仿、纯乙醇、氢化钠溶液、裂解缓冲液、清洗缓冲液、解吸缓冲液,所需设备包括:EP管、真空干燥箱、磁分离架、震荡机、离心机,DNA提取方法包括:去除相、DNA吸附磁珠、DNA解吸磁珠。本发明对传统Trizol法进行改进,改进后的Trizol法与普通Trizol法相比,操作简便、提取DNA纯度高、节约时间、提取浓度大,一种操作简便、节约时间、提取效率高、提取质量好、提取量大、提取范围广的改进的Trizol提取DNA方法。
802 一种能够提取细胞基因组超长片段试剂盒及其使用方法 CN202410347527.5 2024-03-26 CN118222563A 2024-06-21 谢丹; 李洋
发明提供了一种能够提取细胞基因组超长片段试剂盒及其使用方法,以玻璃珠作为DNA吸附珠,针对性调整裂解液和缓冲溶液的成分和浓度,在高pH和高盐缓冲液中,玻璃表面的可带有负电荷,而DNA分子的磷酸基团也带有负电荷。高盐环境下的阳离子就会以盐桥的方式将二者联接在一起,使得DNA吸附于珠子表面;当缓冲液中的盐浓度较低时,离子强度减小,离子强度的减小减弱了DNA与珠子表面之间的静电吸引。因此,在低盐浓度下,吸附在珠子表面的DNA相对较容易被洗脱。采用此试剂盒提取细胞基因组,能够保证基因组DNA的完整性和高纯度性,减少机械损伤。
803 一种生物素化的染色质免疫共沉淀方法及试剂 CN201710685116.7 2017-08-11 CN107488713A 2017-12-19 胡嘏; 陈忠; 李龙承; 吴焕磊; 李森茂
发明公开了一种生物素化的染色质免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,包括如下成分:蛋白A+G琼脂糖/鲑鱼精DNA;甘酸溶液;染色质免疫共沉淀稀释缓冲液;洗涤缓冲液;0.5M EDTA;5M NaCl;1M三羟甲基氨基甲烷,pH6.5;SDS裂解缓冲液;生物素抗体;RNA酶抑制剂。本发明的有益效果:通过对传统的免疫共沉淀方法进行改进,从而得到靶向DNA-RNA复合物,进而可以研究和验证RNA与DNA之间的相互作用,本发明的另一方面还提供了相应的生物素化的染色质免疫共沉淀试剂盒,方便科学研究者使用。
804 检测同型半胱酸代谢相关SNP位点的试剂盒及其扩增方法和检测方法 CN201110447797.6 2011-12-28 CN103184269A 2013-07-03 韩俊领; 杜宏伟; 周毓玲; 崔丽娟
发明公开了一种利用多重PCR技术结合SNP敏感性分子开关技术检测同型半胱酸代谢相关SNP位点的检测试剂盒及其扩增方法和检测方法。所述试剂盒对同型半胱氨酸代谢相关的四个SNP位点进行分型,包括:MTHFR基因rs1801133 SNP位点、MTR基因rs1805087 SNP位点、MTRR基因rs1801394SNP位点和CBS基因rs5742905 SNP位点。所述试剂盒包含野生型2×扩增缓冲液、突变型2×扩增缓冲液、聚合酶、细胞裂解液和甘油,两种缓冲液中分别含有对应SNP野生型和突变型表型的序列特异性引物和内参引物,可在两个多重PCR反应中完成对上述四个SNP位点的分型,从而了解受试者同型半胱氨酸代谢能和叶酸、VB12和VB6需求。
805 检测华法林个体化用药相关SNP位点的试剂盒及其多重PCR扩增方法和检测方法 CN201110211124.0 2011-07-27 CN102251043A 2011-11-23 韩俊领; 杜宏伟; 周毓玲; 崔丽娟
发明公开了一种利用多重PCR技术结合SNP敏感性分子开关技术检测华法林个体化用药相关SNP位点的检测试剂盒及其检测方法。所述试剂盒对华法林用药相关的四个SNP位点进行分型,包括:VKORC1基因上的rs9934438 SNP位点、CYP2C9基因上的rs1799853和rs1057910 SNP位点及CYP4F2基因上的rs2108622 SNP位点。试剂盒包含野生型2×扩增缓冲液、突变型2×扩增缓冲液、聚合酶、细胞裂解液和甘油,两种缓冲液中分别含有对应SNP野生型和突变型表型的序列特异性引物和内参引物,可在两个多重PCR反应中完成对上述四个SNP位点的分型,从而达到对华法林合理用药提供分子生物学依据。
806 一种稳定性强的同型半胱酸(HCY)检测试剂 CN201610871111.9 2016-10-06 CN106248666A 2016-12-21 甘宜梧; 罗维晓; 谭柏清; 李静; 陆盼
发明涉及一种稳定性强的双试剂液态的同型半胱酸(HCY)检测试剂,试剂R1中主含缓冲液、NADH、LDH、丝氨酸、防腐剂、TCEP(三氯乙基磷酸酯)、保护剂、表面活性剂乙二胺四乙酸二钠、底物稳定剂;试剂2中主要包含缓冲液、防腐剂、保护剂、表面活性剂、CBS (胱硫醚-β- 合成酶)、CBL (胱硫醚 -β-裂解酶)。本发明优先选择效果好的缓冲液,使用高效的防腐剂,并在R2中使用三种不同的保护剂,协同保护试剂中酶类的活性,从而较好的保证了试剂的稳定性,尤其是热稳定性,方便临床的推广和使用。
807 检测同型半胱酸代谢相关SNP位点的试剂盒及其扩增方法和检测方法 CN201110447797.6 2011-12-28 CN103184269B 2015-10-07 韩俊领; 杜宏伟; 周毓玲; 崔丽娟
发明公开了一种利用多重PCR技术结合SNP敏感性分子开关技术检测同型半胱酸代谢相关SNP位点的检测试剂盒及其扩增方法和检测方法。所述试剂盒对同型半胱氨酸代谢相关的四个SNP位点进行分型,包括:MTHFR基因rs1801133 SNP位点、MTR基因rs1805087 SNP位点、MTRR基因rs1801394SNP位点和CBS基因rs5742905 SNP位点。所述试剂盒包含野生型2×扩增缓冲液、突变型2×扩增缓冲液、聚合酶、细胞裂解液和甘油,两种缓冲液中分别含有对应SNP野生型和突变型表型的序列特异性引物和内参引物,可在两个多重PCR反应中完成对上述四个SNP位点的分型,从而了解受试者同型半胱氨酸代谢能和叶酸、VB12和VB6需求。
808 一种柑橘溃疡病菌的DNA浴沉淀提取方法 CN201210196969.1 2012-06-15 CN102703436A 2012-10-03 易龙; 陶珍珍; 卢占军
发明一种柑橘溃疡病菌的DNA浴沉淀提取方法。本发明方法将新鲜菌体加入洗涤缓冲液洗涤、再经裂解缓冲液水浴,抽提缓冲液及饱和酚、氯仿、异戊醇混合溶液抽提,乙醇洗涤沉淀后,晾干加入灭菌ddH2O溶解沉淀,在﹣20℃保存即可。本发明能够快速有效地提取到柑橘溃疡病菌的模板DNA,简捷快速。本法不需要特别的仪器,实验成本相对较低。使用本发明方法制备的DNA样品能够满足PCR方法对柑橘溃疡病菌进行分子诊断的需要。因此本发明建立了用水浴法快速抽提柑橘溃疡病菌的模板DNA的方法,为应用PCR技术进行早期诊断和预知检测提供基础和技术储备。
809 核酸提取试剂试剂盒及其应用,以及核酸提取方法 CN202211012812.9 2022-08-23 CN116042600A 2023-05-02 杨启文; 盖伟; 杨帆; 宋翠丹
发明涉及生物技术领域,尤其涉及核酸提取试剂试剂盒及其应用,以及核酸提取方法。本发明提供了核酸提取试剂,包括:抗凝剂、CSB、LMP、红细胞裂解液、白细胞裂解液、溶菌酶、蛋白酶K、RNase、溶胶酶和透析缓冲液。本发明提供了一种针对血流感染病原菌的长短片段共提取试剂或试剂盒,该试剂或试剂盒的效果可以达到:短至100bp左右的cfDNA,直到长至大于2Mb的病原菌gDNA在同一提取管中共同提取,实现了长度跨度极大的长短片段共同提取,比现有只能分相提取的方案节省一半的时间及样本量,且因操作简便而可减少污染的可能。
810 一种黑痣菌子囊果提取基因组DNA的方法 CN201610065875.9 2016-01-29 CN105586334A 2016-05-18 李晓玲; 李成云; 刘林; 杨静; 鄢进陆; 彭莞云; 杨亚琼; 刘立娜; 王慧; 王一; 王春梅; 杨雅婷
发明公开了一种黑痣菌子囊果提取基因组DNA的方法,与现有技术相比,本发明直接以黑痣菌子囊果为材料,进行DNA提取的方法。在进行DNA提取前,采用裂解液缓冲液处理2次,利用低温下DNA溶解度低的原理去除过多的胶质和多糖,最后加入提取液裂解细胞膜,进行DNA的提取,提取过程中加苯酚-氯仿-异戊醇进行抽提去除多余的蛋白。本方法适用于含有胶质和多糖、蛋白等含量高的较高的真菌材料,此类杂质存在和含量对所抽提到的DNA的产量和质量均无明显的影响,为黑痣菌的后续分子研究提供了保证,具有推广使用的价值。
811 一种高温性蛋白酶及其制备方法 CN201310268933.4 2013-06-28 CN103436511B 2015-03-04 曾润颖; 徐辉
一种高温性蛋白酶及其制备方法,涉及蛋白酶。提供一种高温碱性蛋白酶Fppro1及制备方法,以及高温碱性蛋白酶基因Fppro1。高温碱性蛋白酶Fppro1的生产菌株为太平洋火色杆菌Flammeovirga Pacifica H2。制备时,克隆高温碱性蛋白酶基因Fppro1,将其插入表达载体,构建携带高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体;将高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,选取阳性克隆于培养基中培养;离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞,重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中,将裂解后的悬液离心,收集上清液,再与Ni-NTA Agarose混匀,纯化。
812 用于mRNA扩增的改进的裂解和逆转录 CN200980130405.4 2009-07-30 CN102112631A 2011-06-29 M.库比斯塔; L.斯特雷姆博姆; N.佐里克
发明涉及进行用于扩增靶RNA的RT-PCR的方法,该方法包括以下步骤:(i)在细胞培养容器中培养贴壁细胞群,(ii)在所述样品容器中用包含0.05M-1M离液剂的裂解缓冲液裂解推测含有所述靶RNA的所述贴壁细胞群,(iii)在所述样品容器中加入进行逆转录反应所必需的试剂,使得所述离液剂在所述样品容器中以约10-60mM的浓度存在,并且逆转录所述靶RNA,和(iv)通过使所述样品进行多个循环的热循环流程,扩增所述第一链cDNA。
813 一种烷基型硫酸酯酶及其制备方法 CN201010274512.9 2010-09-07 CN101942427A 2011-01-12 阮灵伟; 徐洵; 龙梦娴
一种烷基型硫酸酯酶及其制备方法,涉及硫酸酯酶。提供一种烷基型硫酸酯酶SdsA及制备方法,以及烷基型硫酸酯酶基因sdsA。烷基型硫酸酯酶SdsA的生产菌株为假单胞菌株Pseudomonas sp.S9。制备时,克隆烷基型硫酸酯酶基因sdsA,将烷基型硫酸酯酶基因sdsA插入表达载体,构建携带烷基型硫酸酯酶基因sdsA的重组表达载体;将烷基型硫酸酯酶基因sdsA的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,选取阳性克隆于培养基中培养;离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞,重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中,将裂解后的悬液离心,收集上清液,再与Ni-NTA Agarose混匀,纯化。
814 一种多功能缓冲液及其应用 CN202011235763.6 2020-11-09 CN112094888B 2021-02-02 徐根明; 鞠巍; 秦闯华; 潘艺; 赵谦
发明公开了一种多功能缓冲液及其应用。本发明的多功能缓冲液不仅能有效抑制生物生长,失活待检测病毒、细菌或细胞,而且还能够保护其裂解后释放的核酸,防止被核酸酶降解。更重要的是该含有待检测核酸的缓冲液可以直接用来进行常规QPCR检测或者直接进行RPA、HDA、LAMP等等温扩增检测。不需要核酸抽提,也就减少了可能的核酸损失,提高了检测的灵敏度,简化了检测步骤。多功能缓冲液使整个检测过程可以不再需要开盖加入试剂或转移试剂,这样尽最大可能避免了样本间交叉污染,也避免了对检测人的感染。由于本发明的多功能缓冲液可以常温运输,不需要冷链运输从而降低了运输成本。
815 粪便中脱落细胞核酸提取裂解液及其制备方法和应用 CN201711222569.2 2017-11-29 CN107937391B 2021-07-09 左红伟; 李志甲; 朱凤
发明提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液,包括:1mol/L~8mol/L胍盐、1mM~20mM金属离子螯合剂和pH7.5~8.0的100mM Tris‑HCl缓冲溶液,其中,胍盐选自盐酸胍、异硫氰酸胍和硫氰酸胍中的至少一种,金属离子螯合剂选自乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸的溶性盐中的至少一种。优选地,还包括1%体积~20%体积的表面活性剂,表面活性剂为非离子型去污剂,非离子型去污剂选自Tween‑20、Tween‑80、Brij‑35、NP40和Triton‑100中的至少一种。还提供了相关制备方法和应用。本发明的裂解液能够快速高效裂解细胞,充分释放核酸,满足后续核酸检测用量,适于大规模推广应用。
816 一种利用荧光检测微囊藻细胞DNA损伤的方法 CN201610109195.2 2016-02-26 CN105543399B 2019-07-16 吴振斌; 鲁志营; 刘碧云; 何燕; 贺锋; 周巧红; 徐栋; 张甬元
发明公开一种利用荧光检测微囊藻细胞DNA损伤的方法,其步骤:(a)将待检测样品和对照样品均分别平均分成三小组;(b)去除细胞质鞘:离心收集样品中藻细胞并重悬浮于SE缓冲液中洗涤;(c)细胞裂解:将细胞分别重悬浮于Lysis裂解液,加入蛋白酶K和十二烷基磺酸钠,使细胞裂解;(d)细胞DNA链解旋:改变pH,使T、P和B样品在不同条件下解旋;(e)染色:分别向以上T、P和B样品中加入Hoechest 33258染色;(f)荧光测定:离心后于荧光检测器中检测上清液的荧光强度;(g)结果计算:根据待测样品和对照样品中T、B和P样品的荧光来计算DNA链的断裂平。本方法易于掌握,并且灵敏度高,DNA链上单个断裂位点即可检测到。
817 一种利用荧光检测微囊藻细胞DNA损伤的方法 CN201610109195.2 2016-02-26 CN105543399A 2016-05-04 吴振斌; 鲁志营; 刘碧云; 何燕; 贺锋; 周巧红; 徐栋; 张甬元
发明公开一种利用荧光检测微囊藻细胞DNA损伤的方法,其步骤:(a)将待检测样品和对照样品均分别平均分成三小组;(b)去除细胞质鞘:离心收集样品中藻细胞并重悬浮于SE缓冲液中洗涤;(c)细胞裂解:将细胞分别重悬浮于Lysis裂解液,加入蛋白酶K和十二烷基磺酸钠,使细胞裂解;(d)细胞DNA链解旋:改变pH,使T、P和B样品在不同条件下解旋;(e)染色:分别向以上T、P和B样品中加入Hoechest 33258染色;(f)荧光测定:离心后于荧光检测器中检测上清液的荧光强度;(g)结果计算:根据待测样品和对照样品中T、B和P样品的荧光来计算DNA链的断裂平。本方法易于掌握,并且灵敏度高,DNA链上单个断裂位点即可检测到。
818 利用超滤进行病毒纯化 CN200680011815.3 2006-04-11 CN101155915B 2013-12-04 M·韦格曼
发明提供了一种纯化病毒的方法,包含通过超滤步骤,其中渗余物含有该病毒,其中在渗透物侧施加的背压为至少在5kPa。本发明也提供了纯化重新腺病毒的方法,该方法主要包括a)培养用上述的重组腺病毒感染的细胞,b)裂解上述的细胞,去除游离核酸,得到含有重组腺病毒的裂解液,c)将裂解液澄清过滤,得到腺病毒制备物,d)将腺病毒制备物进行超滤浓缩,其中所述腺病毒制备物保留在渗余物中,e)将d)步骤得到的腺病毒制备物进行超滤,其中腺病毒在渗余物中,用至少5倍渗滤体积(DFVs)的缓冲液对其进行置换,其中步骤d)和e)中施加于渗透物侧的背压为至少5kPa。
819 一种浓缩缓冲清洗液 CN202311305037.0 2023-10-10 CN119309891A 2025-01-14 吴兴业; 黄亦炜; 于美
发明公开了一种浓缩缓冲清洗液,原料主要包括:磷酸氢二钠,磷酸二氢钠,吐温‑20,丙二醇,氯化钠,三羟甲基基甲烷(Tris)和纯,且该浓缩缓冲清洗液的pH值范围为pH 8.9~9.1。本发明采用独特的裂解和结合缓冲体系,能够兼容多种组织学、细胞学样本等各种类型。高(pH值)抗原缓冲清洗液Buffer能兼容多种组织学、细胞学样本类型,包括新鲜组织或冷冻的细胞、胸腹水、组织渗出液等,在蛋白酶K的协同作用下,使多种组织学、细胞学样本中的游离核酸与核酸结合蛋白迅速彻底分离;随后吸附结合缓冲液提供的高盐条件使分离出来的游离核酸与抗体高效结合,并防止变性蛋白和脂质等杂质堵塞机器的探针。
820 一种用于痕量毒品检测的人体毛发裂解液及其应用 CN202211271459.6 2022-10-18 CN115628951A 2023-01-20 蒋维嘉
发明公开了一种用于痕量毒品检测的人体毛发裂解液及其应用,属于毒品检测技术领域,包括以下组分:0.8‑1.5mg/mL蛋白酶,0.5%‑1.2%乙酸,2.6‑7.8mg/mL亚硫酸氢钠,2.9‑4.1mg/mL氯化钠,12.5‑20mg/mL三(2‑羧乙基)膦,0.5‑1.5%异丙醇,0.5‑1.5%聚乙二醇和pH4‑7弱酸性缓冲液,其中,%为体积百分比,本发明通过改变介质环境,降低了毒品分子与蛋白之间的相互作用,促进毒品从角蛋白中释放出来,进入裂解液介质,提高药物的释放量,从而增加后续检测准确度。
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