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序号 专利名 申请号 申请日 公开(公告)号 公开(公告)日 发明人
781 BCR-ABL融合基因(P210bcr/abl)mRNA荧光定量RT-PCR检测试剂 CN200510037779.5 2005-02-01 CN1324146C 2007-07-04 程民; 魏海明; 田志刚; 耿燕
发明涉及一种BCR-ABL融合基因(P210bcr/ablmRNA)荧光定量RT-PCR检测试剂盒,该试剂盒包含总RNA提取液(细胞裂解液I、细胞裂解液II、RNA洗涤缓冲液I、RNA洗涤缓冲液II和无RNA酶的),反转录反应液,dNTP混合物,逆转录酶,PCR反应液,探针,阳性标准品,对照品。本发明通过对新鲜抗凝外周血提取总RNA,并通过逆转录mRNA样品得到cDNA,再结合实时荧光定量PCR检测技术,可准确定量检测标本中P210bcr/abl的mRNA的表达量。本发明所提供的试剂盒可用于临床及科研中检测慢性粒细胞性白血病患者的外周血中P210bcr/ablmRNA的表达,为慢性粒细胞性白血病的早期诊断、复发、治疗方案的确定及预后的判断提供重要的参考依据。
782 甲胎蛋白(AFP)mRNA荧光定量RT-PCR检测试剂 CN200510037778.0 2005-02-01 CN1712547A 2005-12-28 魏海明; 田志刚; 程民; 王宗贵
发明涉及一种甲胎蛋白(AFP)mRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒,该试剂盒包含总RNA提取液(细胞裂解液I、细胞裂解液II、RNA洗涤缓冲液I、RNA洗涤缓冲液II和无RNA酶的),反转录反应液,dNTP混合物,逆转录酶,PCR反应液,探针,阳性标准品,对照品。本发明通过对新鲜抗凝外周血提取总RNA,并通过逆转录mRNA样品得到cDNA,再结合实时荧光定量PCR检测技术,可准确定量检测标本中AFP的mRNA的表达量。本发明所提供的试剂盒可用于临床及科研中检测肿瘤患者的外周血、骨髓、淋巴结及癌组织中AFP mRNA的表达,为原发性肝癌的早期诊断、转移、复发、治疗方案的确定及预后的判断提供重要的参考依据。
783 一种基于荧光检测的PET解酶活性高通量测定方法及应用 CN202210182387.1 2022-02-25 CN114636682A 2022-06-17 李盛英; 徐子萍; 刘琨; 马莉; 陈月星
发明涉及酶活性测定技术领域,具体涉及一种基于荧光检测的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)解酶活性高通量测定方法及其应用。一种基于荧光检测的PET水解酶活性高通量测定方法,(1)将PET水解酶与荧光蛋白融合表达,在反应前测定细胞裂解液中荧光值,以确定酶的浓度;(2)制备PET‑FDL膜;(3)将细胞裂解液与PET‑FDL膜在甘酸缓冲液中于反应;反应结束后,测定产物中荧光值,以确定产物浓度;(4)计算产物中的荧光值与反应前细胞裂解液中荧光值的比值,即为PET水解酶的比酶活。本发明提供的基于荧光检测的PET水解酶活性高通量测定方法及应用,通量高,成本低廉,操作方便,为筛选高效的PET塑料降解酶提供了新方法,具有广阔的应用前景。
784 一种同时检测人血液嗜性粒细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的试剂盒及检测方法和应用 CN202310164588.3 2023-02-25 CN118425504A 2024-08-02 王君灵; 秦秉玉
发明涉及流式细胞仪检测技术领域,具体公开了一种同时检测人血液嗜性粒细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的试剂盒及检测方法和应用,包括以下组分:死细胞染料、FcR阻断剂、荧光标记的抗人CD193和CD63抗体、红细胞裂解液、洗涤缓冲液。检测时,首先在全血中加入死细胞染料和FcR阻断剂,然后荧光抗体染色、裂解红细胞后即可用流式细胞仪同时检测嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的比例、数量及其脱颗粒平。本发明的试剂盒及检测方法可简单、快速、同时分析人血液嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的比例、数量及其脱颗粒水平。
785 一种中性粒细胞基质片的制备方法 CN202311853090.4 2023-12-29 CN117802041A 2024-04-02 张婉萍; 程航
发明涉及一种中性粒细胞的提取方法,包括:一种中性粒细胞的提取方法,包括:获取全血样本;加入红细胞沉降缓冲液,以沉淀全血样本中的红细胞;获得沉淀红细胞后的上清液;加入红细胞裂解液,裂解所述上清液中的残余红细胞;以及获得中性粒细胞。本发明提供的中性粒细胞提取工艺,解决了现有提取中性粒细胞的技术弊端。该方法工艺相对简单,提高了中性粒细胞数量,同时细胞形态更完整,具有快速、高效且成本低廉的特性,提高疾病诊断的检测特异性,应用前景广阔。
786 一种λ噬菌体蛋白外壳的制备方法 CN202311079753.1 2023-08-25 CN117164675A 2023-12-05 曹明明; 郝小江; 邸迎彤; 汤林方; 吉火伍来; 赵子康; 陈媛; 史沛东; 梅萃璇
发明公开了一种λ噬菌体蛋白外壳的制备方法,包括如下步骤:(1)分别将菌株DSM 5251和DSM 5252接种至液体培养基中震荡培养,当OD600=0.1~0.3时将培养物移至45‑48℃热处理15~20分钟,热处理结束后将培养物在38~39℃条件下震荡培养,取样监测;(2)培养结束后,将菌株DSM 5251和DSM 5252培养物单独或等体积混合后离心,收集菌体沉淀;(3)将收集的菌体沉淀用裂解液重悬后低温保存;所述裂解液为含有溶菌酶的Tris‑HCl缓冲液。本发明的方法大大降低了对专用设备的要求,提高了蛋白外壳的收率。
787 乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质及其制备方法和用途 CN202110562151.6 2021-05-21 CN113151177B 2023-11-03 谭秋雯; 吕青; 徐莉; 张俊慧; 解慧琪
发明公开了一种乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质及其制备方法和用途,属于生物医学工程领域。本发明的方法步骤如下:1)冻乳腺或乳腺癌组织,切成膜片状;2)用液氮反复冻融2~4次;3)在裂解液中静置或摇动12~24h后,洗去裂解液;4)用核酸酶去除残存细胞核成分,流冲洗,缓冲液漂洗;5)冻干,包装消毒。本发明的方法去细胞效果好,多细胞外基质纤维伤害小。本发明的乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质可诱导癌细胞的上皮间质转化,基于该原理可制备癌细胞上皮间质转化的细胞模型,应用前景良好。
788 用于制备样本的系统 CN201780059631.2 2017-09-29 CN109789408B 2021-09-28 M·伊姆舍尔; T·H·埃弗斯; M·J·奥弗戴克; T·范吉耶赛尔; S·J·H·图能
提供了一种装置,其包括用于接收患者样本的接收室、第一试剂储存器和第二试剂储存器。接收室可被配置成用于接收样本收集元件的至少一个端部,患者的样本由该样本收集元件收集。第一试剂储存器通常可被配置成容置液体试剂,该液体试剂可包括裂解剂,即该液体可以是一种裂解缓冲液。同样,第二试剂储存器通常可被配置成容置可包括磁性颗粒的干燥试剂。该装置还可包括以下两种致动器中的至少一种:第一致动器,其用于将第一试剂从第一试剂储存器供应到样本;以及第二致动器,其用于将第二试剂从第二试剂储存器供应到所获得的混合物。
789 一种基于生物代谢活动合成CdS量子点的方法 CN201510283300.X 2015-05-28 CN104911215A 2015-09-16 戚鹏; 张盾
发明涉及到纳米颗粒的合成,具体为一种基于生物代谢过程合成CdS量子点颗粒的方法。具体,将经富集培养后的SRB细菌加入到含有Cd2+离子的培养基中培养2-4天,即可在液体培养基中制得CdS量子点颗粒;将所得在液体培养基中制得CdS量子点颗粒分散至含强或K蛋白酶裂解液的缓冲液中裂解,即得到纯净CdS量子点颗粒。本发明借助环境中常见硫酸盐还原菌独特的代谢过程合成CdS量子点颗粒具有清洁、环境友好、反应条件温和可控等优点。
790 一种葛根的丝孢酵母发酵物及其制备方法和应用 CN202410121731.5 2024-01-29 CN118064506A 2024-05-24 宋昀翰; 王华林
申请涉及生物发酵技术领域,公开了一种葛根的丝孢酵母发酵物及其制备方法和应用。本申请制备方法先将葛根粉碎后在酸性缓冲液中进行酶解,破坏葛根纤维成分,离心获得第一沉淀,然后加入到用于酵母培养的培养基中,并接入皮状丝孢酵母进行发酵培养;发酵培养后离心获得第一上清液和第二沉淀;所述第二沉淀进行菌体细胞裂解,裂解过程中或裂解后加入所述第一上清液,离心,获得第二上清液,过滤除菌后获得所述发酵物。本申请通过对葛根酶解后接种皮状丝孢酵母发酵的方式制备出一种用于口腔护理的发酵物,发酵物中含有丰富的黄类、多糖、寡糖以及油脂等功效成分,能够抗化和修复口腔粘膜,特别适用于化学刺激导致的口腔粘膜损伤护理中。
791 基于激光捕获显微切割技术的空间分辨蛋白质组学方法 CN202210710186.4 2022-06-22 CN114965823A 2022-08-30 王慧; 李辰; 顾蕾
发明提供了一种基于激光捕获显微切割技术的空间分辨蛋白质组学方法,即采用激光捕获显微切割的磁珠法痕量分析及质谱分析方法,具体包括通过激光捕获显微切割技术切割福尔林固定石蜡包埋等组织切片的痕量目标组织,并收集至管盖中;加入裂解液完全覆盖痕量目标组织,在恒温浴中原位孵育裂解;裂解得到的蛋白质溶液中加入还原剂和烷基化试剂进行反应;再加入磁珠和乙醇,然后加入缓冲液、蛋白水解酶进行酶解;将肽段溶液进行色谱分离和质谱检测;本发明的空间分辨蛋白质组学方法能够显著降低单个样本所需的起始组织量,显著提升蛋白质提取效率和质谱鉴定能,从而可以与现有主流空间分辨转录组技术的分辨率对接。
792 烈性噬藻体PaV-LD基因组及制备方法和应用 CN201010162329.X 2010-04-27 CN101899450A 2010-12-01 张奇亚; 高恶斌
发明公开了一种烈性噬藻体PaV-LD基因组及制备方法和应用,其步骤:A、噬藻体的培养:烈性噬藻体PaV-LD接种感染指数生长期的浮丝藻,感染裂解后,获取噬藻体PaV-LD裂解的藻液;B、噬藻体纯化:噬藻体PaV-LD裂解的藻液离心去细胞碎片,加核酸酶至其终浓度,室温放置,备用;C、基因组DNA提取:取上述噬藻体PaV-LD悬液,加入蛋白酶K,混匀,离心,室温下晾干;将晾干好的噬藻体PaV-LD基因组DNA溶于TE缓冲液中,保存备用;D、PaV-LD全基因组序列的测定:拼接后获得SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。一种分离的烈性噬藻体PaV-LD全基因组在蓝藻华控制中的应用。制备噬藻体PaV-LD基因组核酸可程序化操作,烈性噬藻体PaV-LD溶藻功能基因产物的大量表达,批量生产。
793 一种血液采集滤纸及其制备方法和应用 CN202310649938.5 2023-06-02 CN116889398A 2023-10-17 常鸣; 许程; 杨一飞; 陈雯烨; 石伟杰; 陈诚文; 褚钱
申请提供一种血液采集滤纸及其制备方法和应用,属于血液采集技术领域。所述滤纸包括以下原料,其质量百分比组成为:滤纸原纸70~90%、细胞裂解剂0.1~1%、核酸稳定剂4~25%和缓冲试剂2~15%。经研究证明采用该血液采集滤纸采集的干血斑内的DNA浓度高、且在温度较高的环境下经过长时间运输也可以保持较高的DNA的浓度。
794 一种用于快速直扩PCR检测的病毒保存液 CN202110678032.7 2021-06-18 CN113278682A 2021-08-20 张珉艳
发明涉及一种用于快速直扩PCR检测的病毒保存液,主要包含以下主要成分:溶液缓冲剂0.02‑2%(w/v);PCR反应增强剂0.01‑0.1%(w/v);表面活性剂0.01‑0.1%(w/v)。本保存液可以有效的裂解病毒粒子,保存病毒核酸片段,抑制核酸酶活性,并且不影响PCR反应,可用于快速直扩PCR检测。
795 一种外泌体及外泌体RNA串联富集鉴定方法 CN202310083048.2 2023-02-08 CN116287112A 2023-06-23 秦伟捷; 张宝英
发明公开了一种外泌体及外泌体RNA串联富集鉴定方法。包括如下步骤:将TiO2微球与生物样本共同孵育以捕获生物样本中的外泌体,清洗去除非特异性吸附,得到表面附着有外泌体的TiO2微球;加入裂解/结合缓冲液,裂解外泌体使其释放内容物,继续孵育,使外泌体释放的RNA结合到TiO2上,清洗去除非特异性吸附,完成生物样本中exoRNA的富集,最后加入洗脱液将exoRNA洗脱下来,离心收集上清液即可。本发明操作简单,耗时短、成本低,相较于其他方法具有明显的优势。从外泌体富集,到exoRNA的释放,再到exoRNA的富集,整个过程仅需30min;同时裂解液中包含多种抑制RNase活性的成分,保证得到高质量exoRNA。
796 GMP级质粒DNA大规模简化生产方法 CN202211356707.7 2022-11-01 CN115612684A 2023-01-17 郭小凯; 刘东; 王玥琦; 李思远; 朱效英
发明公开一种GMP级质粒DNA大规模简化生产方法,其包括使用氯化处理含质粒DNA的裂解液产生沉淀和料液;分别使用第一过滤器和第二过滤器对所述料液澄清过滤得到上清液。其中所述第一过滤器为深层过滤器,孔径为1μm‑10μm,所述第二过滤器的孔径为0.8μm/0.45μm;使用膜包超滤对所述上清液进行浓缩,并使用缓冲液换液直至上清液pH值与缓冲液的pH值相当;使用阴离子交换层析使质粒DNA与杂质分离。本发明提供更为简单高效的质粒纯化方法,提升质粒产量的同时,降低制备成本。
797 一种三叶青基因组中DNA的提取方法 CN202211172267.X 2022-09-26 CN115595320A 2023-01-13 陈敏敏; 何秋伶; 缪强; 程秋月; 虎霞芳
发明提供了一种三叶青基因组中DNA的提取方法,包括以下步骤:1)取80‑150mg的新鲜样品,迅速倒入液氮研磨成细粉末,立即加入DNA裂解缓冲液,混匀,56℃‑65℃浴0.5‑3小时;其中DNA裂解缓冲液为:1mol/L Tris、2.8mol/LNaCl、0.25mol/LEDTA、β‑巯基乙醇的体积比为5:25:4:1;CTAB与PVP的质量比为1:1;CTAB与1mol/L Tris的质量体积比为1g/5mL;2)加入等体积、体积比为25:24:1的苯酚:氯仿:异戊醇和24:1的三氯甲烷:异戊醇混合液进行抽提;3)加入8mol/L的LiCl溶液沉淀RNA;4)加入提前预冷的异丙醇和3mol/L NaAc溶液;5)加入1mL的75%乙醇洗涤1~2次;6)65℃水浴下加ddH2O,溶解DNA,‑20℃保存待用;本发明的优点在于方法高效稳定,提取的DNA纯度和产率都较高,有效提高了三叶青基因组中DNA提取的质量。
798 微流控PCR芯片及其操作方法 CN201811290166.6 2018-10-31 CN109536364B 2021-07-23 温维佳; 高一博; 宋祺
发明提供了一种微流控PCR芯片及其操作方法,本发明的微流控PCR芯片包括基体,于基体上设有腔体及控制体构成的流体控制结构,还包括构造于基体上的多个腔体,各腔体的顶端开口,并分别与流体控制结构中的各通道一一对应连通,且各腔体中至少包括装有裂解液的裂解液池、装有洗涤缓冲液的洗涤缓冲液池、装有洗脱液的洗脱液池、装有无DNA酶无的DNA酶水池。本发明的微流控PCR芯片在可实现流体抽出、混合及排出功能的基础上,省去了设置单独存储或混合腔体的麻烦,并减少了操作步骤,降低了芯片的复杂度,同时也无需外接大型设备,降低了芯片成本,使得该芯片适宜作为一次性的微流控芯片,而有着很好的实用性。
799 宏基因组DNA的提取方法 CN201610595934.3 2016-07-27 CN106148326A 2016-11-23 李静; 陈昌岳; 张祥林
发明提供了一种宏基因组DNA的提取方法,所述提取方法包括如下步骤:先向待测样品中加入缓冲液液和蛋白酶K得到混合液,对混合液加热使缓冲液和蛋白酶K裂解待测样品中的宿主细胞,然后进一步加热使蛋白酶K失活,再经过击打使生物破壁后,进行DNA提取得到所述宏基因组DNA。本发明先加入裂解液悬浮宿主细胞,然后加入蛋白酶K使宿主细胞的蛋白质降解,DNA游离。由于没有溶菌酶及外作用,细菌微生物能够保持完整形态。在击打使微生物破壁的过程中,一方面细菌微生物被破壁,另一方面宿主DNA被打断成小片段甚至降解,最后按照常规方法提取宏基因组DNA,就可以减少宿主DNA的背景干扰。
800 微流控PCR芯片及其操作方法 CN201811290166.6 2018-10-31 CN109536364A 2019-03-29 温维佳; 高一博; 宋祺
发明提供了一种微流控PCR芯片及其操作方法,本发明的微流控PCR芯片包括基体,于基体上设有腔体及控制体构成的流体控制结构,还包括构造于基体上的多个腔体,各腔体的顶端开口,并分别与流体控制结构中的各通道一一对应连通,且各腔体中至少包括装有裂解液的裂解液池、装有洗涤缓冲液的洗涤缓冲液池、装有洗脱液的洗脱液池、装有无DNA酶无的DNA酶水池。本发明的微流控PCR芯片在可实现流体抽出、混合及排出功能的基础上,省去了设置单独存储或混合腔体的麻烦,并减少了操作步骤,降低了芯片的复杂度,同时也无需外接大型设备,降低了芯片成本,使得该芯片适宜作为一次性的微流控芯片,而有着很好的实用性。
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