稳定的抗体组合物
阅读：797发布：2020-05-18
专利汇可以提供稳定的抗体组合物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供基于选自半氟化烷 烃 的液体载体的 抗体 的新型组合物。使用这些载体提供抗体及其衍 生物 的改善的 稳定性 和储存寿命。所述组合物可用于局部 给药 或肠胃外注射。，下面是稳定的抗体组合物专利的具体信息内容。
1.一种包含抗原结合的多肽或蛋白质以及液体载体的组合物，其中所述液体载体包含下式的半氟化烷烃
RFRH
其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团；并且其中所述抗原结合的多肽或蛋白质掺入所述组合物中从而形成分散体或悬浮液。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述抗原结合的多肽或蛋白质选自单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段、包含抗体片段的融合蛋白、抗体-药物偶联物、或它们的任何组合。
3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述抗体片段为抗原结合片段(Fab)、单链可变片段(scFv)、单域抗体、微抗体、或双价抗体。
4.根据权利要求2所述的组合物，其中所述单克隆抗体为嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。
5.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述抗原结合的多肽或蛋白质具有至少90kDa的分子量。
6.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述半氟化烷烃选自F4H5、F4H6、F4H8、F6H4、F6H6、F6H8和F6H10。
7.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其有效地不含水。
8.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物在介于RT至40℃之间的温度下储存6个月期间保留其初始抗原结合活性的至少85％。
9.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述抗原结合的多肽或蛋白质的浓度为至少0.5mg/mL。
10.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其用作药物。
11.根据权利要求10所述的组合物，其用作药物，其中所述药物用于通过皮下给药、真皮给药、肌肉给药或局部区域注射来胃肠外给药。
12.一种稳定抗原结合的多肽或蛋白质的方法，其包括将所述抗原结合的多肽或蛋白质与液体载体混合，从而形成悬浮液或分散体的步骤，所述液体载体包含下式的半氟化烷烃
RFRH
其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述抗原结合的多肽或蛋白质在介于RT至40℃之间的温度下储存6个月期间保留其初始抗原结合活性的至少85％。
14.根据权利要求10所述的组合物，其用作药物，其中所述药物用于治疗癌症或自身免疫性疾病。
15.根据权利要求1所述的组合物，其中所述抗原结合的多肽或蛋白质为血管生成抑制剂、抗增殖剂或TNF抑制剂。
稳定的抗体组合物
技术领域
背景技术
[0003] 与抗体制剂和输送相关联的主要挑战之一是维持抗体治疗的稳定性和形式，尤其是对于长期储存和运输而言。抗体，与其它类型的基于蛋白质的治疗相同，容易受到应力条件下物理和化学不稳定性的影响，应力条件诸如来自冻融或运输期间的温度变化、暴露于光、氧气或化学品/溶剂、剪切应力和pH应力。
[0004] 它们可经历变性(例如，丧失三级和/或二级结构)或相互作用以形成聚集体。虽然抗体聚集体可以液体和固体状态出现，但其在液体制剂中，尤其是在高浓度抗体下尤其是有问题的。抗体在相对高剂量下通常是治疗有效的。因此在药物制剂中通常期望高抗体浓度，以使剂量体积最小化并使给药更患者友好(例如，皮下注射而不是静脉滴注、减少注射次数)。
[0005] 实际上，聚集可导致活性抗体治疗失效，从而导致不可靠和无效的给药。更重要的是，聚集还可表现出毒性并触发不可取或严重的免疫反应。导致阻碍流动的大颗粒沉积的聚集对于任一种胃肠外应用均是不可取的。
[0006] 经由化学途径(诸如氧化、脱酰胺、异构化、二硫键形成和其它不可逆交联反应)的抗体改性和降解还可随时间推移进行并导致抗体失活，以及触发聚集。这些反应，连同聚集，常常在升高的温度下加快；因此冷藏几乎经常是必要条件。在许多这些化学反应中，水也诸如在酰胺键的水解裂解中起到重要作用，如作为中介物或作为反应中间体。因此，诸如通过冻干或冷冻干燥排除水以形成固态粉末制剂可以是针对制备抗体治疗的稳定制剂的有效措施。
[0007] 市售的治疗性抗体或抗体衍生物/片段的制剂中的一些基于冻干粉末制剂，所述制剂需要由受过训练的医疗或医护专业人员在即将给药之前在无菌条件下用水性介质重组。例如，奥马佐单抗(例如 由Genentech出售)可作为在一次性使用小瓶中的冻干粉末获得。
[0008] 然而，在实际给药之前，作为额外步骤的冻干抗体在无菌水性介质中的重组携带了不正确的处理(例如，振摇)或给药以及污染的风险。如果水性介质的pH和温度未达最佳标准，允许再水合的时间太短或在溶解步骤期间过于剧烈地振摇小瓶，则重组步骤本身可触发聚集。浪费的趋势也更高，因为不能在推荐时间阶段内适当溶解冻干抗体产品常常需要丢弃样品。
[0009] 应当注意，冻干工艺步骤本身可引发聚集和/或降解。常常将附加的稳定赋形剂诸如糖类或多元醇连同其它赋形剂诸如填充剂一起加入预冻干组合物中。也可要求在冻干之后添加其它赋形剂以便支持较长的抗体储存寿命，从而增加最终制剂中的组分数。
[0010] 由于对于给药而言容易制备，所以即用型液体制剂通常是使用者优选的。如果稳定，则液体制剂对于药品制造商而言也具有吸引力，这是由于避免了冻干，所述冻干在药物开发和常规制造两者期间均是费时且昂贵的。实际上，抗体或抗体衍生物的许多市售制剂是基于水的溶液。在含水制剂的情况下，鉴于促进或降低各种降解化学反应的可能性，介质的pH可对抗体的稳定性具有显著影响。因此，常常需要优化的缓冲体系连同其它制剂赋形剂，诸如抗氧化剂自由基清除剂、表面活性剂和其它抗聚集添加剂、或防腐剂以便向抗体提供稳定性并抵消可在含水环境中储存期间随时间推移而出现的各种可能的降解过程。
[0011] 还已知对冻干和水溶液的可供选择的制剂选项，诸如使用非水性液体作为载体。例如，WO2012/121754描述了非水性高浓度悬浮液制剂，其包含疏水性载体诸如芝麻油，和降粘剂诸如油酸乙酯，以及抗-TNFα抗体。这些组合物要求添加完全混溶于载体中的降粘剂，以便使油载体更适用于注射。通常，脂质和油的肠胃外使用可在注射部位处造成疼痛和其它不可取的副作用。这些类型的化合物还可减慢治疗剂的释放，并且在优选快速或立即生物利用时，是不理想的。
[0012] 全氟化合物也已经被描述为诸如蛋白质和肽之类生物活性试剂的可能的非水性液体载体。例如，US6458376描述了对于眼科应用(例如，局部施用的滴眼剂)所建议的组合物，其中包括寡肽和蛋白质生长因子的治疗/诊断化合物悬浮于全氟化碳或氟化硅油中或在至少一种表面活性剂存在下悬浮。然而，没有提及包含抗体或抗体片段和衍生物的此类组合物。
[0013] US6730328描述了热稳定制剂，其中将非水性、疏水、非反应性载体(诸如矿物油、全氟萘烷、甲氧氟烷、全氟三丁胺和十四烷)用于包含蛋白质、蛋白质化合物和核酸的悬浮液组合物。提出用于胃肠外、透皮、粘膜、口腔和肠内给药方法的制剂，及其用于经由可植入装置长期连续给药和输送的用途。然而，未公开抗体或抗体片段或衍生物在此类载体中的悬浮液的具体实例，也不具有关于此类组合物在升高的温度下超过三个月时间点的稳定性的任何教导。也未展示这些类型的组合物的实际组织相容性。
[0014] WO 2011/073134公开了环孢素，分子量为1202.31的环状多肽的半氟化烷烃溶液，其任选在助溶剂诸如乙烷存在下。虽然以任选替代方式提及了悬浮液和乳液，但没有具体公开此类组合物，或任何包含千道尔顿范围内的高分子量蛋白质物质，诸如抗体或抗体片段或衍生物的组合物。
[0015] 因此本发明的主题是提出新型抗体组合物，其克服了与本领域当前已知的制剂相关联的任何限制和缺点。
发明内容
[0016] 在第一方面，本发明提出抗原结合的多肽或蛋白质和液体载体的新型组合物，所述液体载体包含式RFRH的半氟化烷烃，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团。抗原结合的多肽或蛋白质掺入组合物中从而形成分散体或悬浮液。
[0017] 在另一方面，抗原结合的多肽或蛋白质可选自单克隆抗体、抗体片段、多克隆抗体、包含抗体片段的融合蛋白、或抗体-药物偶联物。
[0018] 在另一方面，本发明提供用于治疗、预防或诊断有需要的患者的疾病或病症的方法，所述方法包括给药组合物的步骤，所述组合物包含抗原结合的多肽或蛋白质，以及液体载体，所述液体载体包含式RFRH的半氟化烷烃，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团，并且其中抗原结合的多肽或蛋白质掺入组合物中从而形成分散体或悬浮液。
[0019] 在另一个实施方式中，本发明提供稳定抗原结合的多肽或蛋白质的方法，所述方法包括将抗原结合的多肽或蛋白质与液体载体混合以形成分散体或悬浮液的步骤，所述液体载体包含式RFRH的半氟化烷烃，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团。
具体实施方式
[0020] 在第一方面，本发明提供组合物，所述组合物包含抗原结合的多肽或蛋白质以及液体载体，所述液体载体包含式RFRH的半氟化烷烃，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团。另外，抗原结合的多肽或蛋白质掺入组合物中从而形成分散体或悬浮液；即抗原结合的多肽或蛋白质分散或悬浮于液体载体中。
[0021] 从药物角度来看，半氟化烷烃提供了多种优点。它们基本上是非毒性的并且发现在局部或胃肠外给药时被各种类型的人或动物组织很好地耐受。此外，它们是化学惰性的并且通常与药物制剂中的活性或非活性成分相容。它们还能够溶解大范围的化合物，诸如小分子活性成分和许多常用的药学上可接受的赋形剂，这可能是由于它们固有的两亲性。另外，半氟化烷烃在充当不溶或难溶化合物(诸如抗原结合蛋白质或多肽)的载体时，形成具有非常有用的物理或药物特性的分散体或悬浮液，即具有很少的或不具有形成固体的不可分散的沉淀物的趋势。
[0022] 本发明人已经发现半氟化烷烃作为液体载体存在于包含抗原结合的蛋白质或多肽的组合物中具有对这些组分的显著的稳定效应。具体地讲，包含作为液体载体的半氟化烷烃的组合物能够基本上防止或抑制其在室温和甚至在较高的温度诸如40℃下在相当长的时间段内聚集并减少化学降解，但不丧失生物活性。
[0023] 还发现抗原结合蛋白质在半氟化烷烃中的分散体或悬浮液表现出显著的物理稳定性程度。漂浮或沉淀的发生缓慢进行，留出足够的时间用于在将具有分散体或悬浮液的容器(例如小瓶)温和振摇或涡旋之后取出剂量。半氟化烷烃中的抗原结合蛋白质颗粒呈现出在很大程度上保留其原始粒度分布，并且容易再分散；差再分散性的聚集体看起来未形成。重要的是，从精度和重复性来看，这提供了更高的给药精度水平。
[0024] 相反，在其它化学惰性载体中的悬浮液或分散体趋于不稳定，导致形成致密且再分散性差的聚集体，并且使得精确给药具有挑战性，或在一些情况下不可能，诸如导致通常用于皮下注射的细规格针堵塞。聚集的蛋白质颗粒还存在引发不良免疫反应的高风险。
[0025] 取决于分散相和连续相的相对密度，不稳定的悬浮液或分散体趋于通过分散相的漂浮，或通过其沉淀而快速分离。此类行为通常通过快速形成致密且再分散性差的聚集体来完成。如果不是不可能，快速漂浮或沉淀也使得精确和可重复的给药具有挑战性。例如，如果振摇之后可注射或眼部悬浮液快速沉降，并且如果振摇之后不立即从充满的容器中取出第一剂量，则取出的剂量会包含低于预期数的药物颗粒(或如果容器保持倒置，则将分配大于预期剂量)。然后，稍后从相同容器中取出的剂量也将包含太高或太低的药物剂量每体积。旨在将再分散性差的聚集体再分散的抗原结合多肽和蛋白质的剧烈振摇也会进一步引发其进一步的聚集和变质。
[0027] 半氟化烷烃是直链或支化的烷烃，其氢原子中的一些被氟取代。在用于本发明的半氟化烷烃(SFA)中，存在一个直链非氟化烃片段和一个直链全氟化烃片段。这些化合物因此符合通式F(CF2)n(CH2)mH。根据本发明，n选自4至12的范围，并且m选自4至8的范围。
[0028] 经常用于半氟化烷烃的命名法将全氟化烃片段命名为RF，并且将非氟化片段命名为RH。另选地，化合物可分别称为FnHm和FnHm，其中F是指全氟化烃片段，H指示非氟化片段，并且n和m限定各个片段中的碳原子数。例如F3H3用于全氟丙基丙烷，F(CF2)3(CH2)3H。另外，这种命名法通常用于具有直链片段的化合物。因此，除非另外指明，否则应当设想F3H3是指1-全氟丙基丙烷，而不是2-全氟丙基丙烷、1-全氟异丙基丙烷或2全氟异丙基丙烷。
[0029] 优选的半氟化烷烃具体包括化合物F4H5、F4H6、F4H8、F6H4、F6H6、F6H8和F6H10。特别优选用于进行本发明的是F4H5、F4H6、F6H6和F6H8。在另一个特别优选的实施方式中，本发明的组合物包括F6H8。
[0030] 任选地，组合物可包含多于一个SFA。例如，为了实现特定目标特性诸如一定密度或粘度，将SFA混合会是有用的。如果使用SFA的混合物，则还优选混合物包含下列物质中的至少一种：F4H5、F4H6、F6H4、F6H6、F6H8和F6H10，并且特别是下列物质中的一种：F4H5、F4H6、F6H6和F6H8。在另一个实施方式中，混合物包含选自下列物质的至少两个成员：F4H5、F4H6、F6H4、F6H6、F6H8和F6H10，并且具体地讲选自下列物质的至少两个成员：F4H5、F6H6和F6H8。
[0031] 液体SFA是化学和生理惰性、无色且稳定的。它们的典型密度在1.1至1.7g/cm3的范围内，并且其表面张力可以低至19mN/m。RFRH型的SFA不溶于水而且在一定程度上是两亲的，其中亲脂性增加与非氟化片段的大小增加相关。
[0032] RFRH型的液体SFA在商业上用于视网膜的展开和重新应用，用于长期填塞作为玻璃体替代物(H.Meinert等人，European Journal of Ophthalmology，第10(3)卷，第189-197页，2000年)，以及作为玻璃体-视网膜手术后的残余硅油的洗出溶液。在实验上，它们也被用作血液替代物(H.Meinert等人，Biomaterials，Artificial Cells，and Immobilization Biotechnology，第21(5)卷，第583-95页，1993年)。这些应用已经将SFA构造成生理上良好耐受的化合物。在另一方面，截至今天SFA未在批准的药物产品中用作赋形剂。
[0033] 本发明的组合物包含抗原结合的多肽或蛋白质。多肽和蛋白质通常表示具有彼此由肽键连接的氨基酸单元的聚合物。因为常用于区分多肽和蛋白质的尺寸界限在一定程度上是任意的，所以用于这些分子的两种表述在本发明的上下文中不应当被理解为是相互排斥的：多肽可也可被称为蛋白质，反之亦然。通常，术语“多肽”仅是指单个聚合物链，然而，表述“蛋白质”还可是指通过非共价键彼此连接的两个或多个多肽链。
[0034] 更具体地，并且如本发明上下文中所使用的，抗原结合的多肽或蛋白质是指呈其单体或聚合物形式的全长或整个抗体(也被称为免疫球蛋白)，和衍生自全长抗体的能够特异性结合到抗原的任何片段、链、结构域或任何改性物。抗原结合的多肽或蛋白质可属于IgG、IgA、IgD、IgE或IgM免疫球蛋白同型或类中的任一种。包含能够特异性结合到抗原的抗体片段的融合蛋白和抗体-药物偶联物也在如本文所用的抗原结合的多肽或蛋白质的定义内。
[0035] 全长抗体是Y型糖蛋白，其包含具有Fc(可结晶片段)结构域和Fab(抗原结合片段)结构域的通式。这些在结构上由经由二硫键互连以形成Y型结构的两个重(H)链和两个轻(L)链多肽结构组成。每种类型的链包含可变区(V)和恒定区(C)；重链包含可变链区(VH)和各种恒定区(例如，CH1、CH2等)并且轻链包含可变链区(VL)和恒定区(CL)。V区还可表征为另外的亚结构域/区，即框架(FR)区，其包含更保守的氨基酸残基，和高变(HV)或互补决定区(CDR)，从氨基酸氨基的角度来看其包含可变性增加的区域。链的可变区决定抗体的结合特异性并且形成抗体的抗原结合Fab结构域。
[0036] 在本发明的优选实施方式中，组合物包含抗原结合的多肽或蛋白质，其中抗原结合多肽或蛋白质选自单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段、包含抗体片段的融合蛋白、抗体-药物偶联物、或它们的任何组合。
[0037] 在本发明的特别优选的实施方式中，组合物包含选自单克隆抗体(mAb)的抗原结合的多肽或蛋白质。单克隆抗体是指得自特定朝向抗原上的单表位或结合位点的同质抗体群的抗体。单克隆抗体可使用本领域已知的抗体工程技术，诸如经由杂交瘤或重组DNA法来制备。
[0038] 另外，在抗原结合多肽和蛋白质的范围内，单克隆抗体是抗体片段。如本文所定义的，抗体片段包括其可与抗原相互作用或特异性结合的抗体的任何区域、链、结构域或其任何结构或偶联物，并且相对于结合能力可以是一价、二价或甚至多价的。此类抗体片段可由本领域已知的方法制成，这些方法例如，全长天然抗体的分解(例如，通过蛋白水解)、蛋白质合成、基因工程/DNA重组过程、化学交联或它们的任何组合。抗体片段通常衍生自在全长抗体的可变V区中起主要作用的各种结构域或区域的组合。
[0039] 在本发明的一个实施方式中，组合物包含选自抗体片段的抗原结合的多肽或蛋白质，其中所述抗体片段为抗原结合片段(Fab)、单链可变片段(scFv)、单域抗体、微抗体、双价抗体。
[0040] 特别优选的抗体片段为抗原结合结构域片段(Fab，也称为Fab’)或包含由二硫键连接的两个Fab片段的Fab二聚体。Fab的实例为阿昔单抗、赛妥珠单抗、digifab、和雷珠单抗。优选的Fab为赛妥珠单抗(也称为聚乙二醇化赛妥珠单抗)，其是与聚乙二醇偶联的重组人源化抗体Fab’片段。赛妥珠单抗具有91kDa的分子量并且针对肿瘤坏死因子α(TNFα)。
[0041] 在本发明的另一个实施方式中，组合物可包含单链可变片段(scFv)，诸如包含由其接头或复杂的多聚/多价结构接合的重(VH)和轻(VL)链可变结构域的那些，例如双价抗体(二价二聚体)、三价抗体(三价三聚体)、或四价抗体(四价四聚体)。多聚抗体片段还可以为多特异性的，例如双特异性双价抗体可包含两个片段，其各自具有对不同抗原的特异性。另外优选的抗体片段包括单域抗体(daBs)，诸如包含能够特异性结合到抗原的单个VH或VL结构域的那些。也在本发明范围内的抗体片段包括scFv-CH二聚体结构，即微抗体。
[0042] 根据另一个实施方式，组合物包含具有选自有下列的分子量的抗原结合的多肽或蛋白质：至少10KDa、至少15kDa、至少35kDa、至少50kDa、至少70kDa、或至少90kDa。还优选具有至少100kDa，诸如100-150kDa，或甚至高于150kDa的分子量的抗原结合的多肽或蛋白质。特别优选的是分子量在70kDa至160kDa范围内的抗原结合的多肽或蛋白质。
[0043] 在本发明的另一个实施方式中，抗原结合的多肽或蛋白质可选自包含抗体片段的融合蛋白。抗体片段可融合到另一种生物活性蛋白或多肽片段，例如，多肽毒素、酶、细胞因子、膜蛋白等。包含抗体片段的融合蛋白的实例包括依那西普和阿塞西普。依那西普是分子量为150kDa的重组人蛋白，其包含融合到IgG1的Fc部分的75kDa的肿瘤坏死因子受体(TNFR)的配位结合部分。
[0044] 在本发明的另一个实施方式中，抗原结合的多肽或蛋白质可选自抗体-药物偶联物，其中所述抗原结合的多肽或蛋白质例如经由接头或化学交联而与小分子药物或放射性标记组分(如放射性核素)共价连接。抗体-药物偶联物的实例包括妥珠单抗奥唑米星(gemtuzumab ozogamicin)、brentuximab vedotin、90Y-标记的替伊莫单抗、131I-标记的托西莫单抗、99mTc-标记的阿西莫单抗。如本文所使用的，术语抗体-药物偶联物还可以是指例如通过PEG化(例如，聚乙二醇化赛妥珠单抗，人源化TNF抑制剂单克隆抗体的聚乙二醇化Fab’片段)或脂质化而实质上化学改性的抗原结合的多肽或蛋白质。
[0045] 如本文所理解的，抗原结合多肽和蛋白质可以是嵌合的、人源化或人的。嵌合单克隆抗体例如是指包含重或轻链的结构域或区域的杂交单克隆抗体，其源自来自多于一个物种的抗体序列，例如来自鼠和人抗体序列的抗体序列。人源化单克隆抗体是指结构上主要源自人抗体序列的那些，通常具有至少85-95％源自人的序列的贡献，然而术语人单克隆抗体是指仅源自人胚系抗体序列的那些。在优选的实施方式中，组合物包含选自单克隆抗体的抗原结合的多肽或蛋白质，其中所述单克隆抗体为嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。
[0046] 在另一个实施方式中，组合物可包含多克隆抗体、或能够识别抗原的多于一个表位的抗体的异质混合物。
[0047] 在优选的实施方式中，抗原结合的多肽或蛋白质为治疗或诊断化合物或疫苗。如本文所用，治疗化合物是可用于预防疾病或病症、缓解疾病或病症的任何症状、改善任何疾病或病症、延缓疾病或病症的发展等的化合物。诊断化合物可用于确定生物体的状态，或用于诊断疾病、病症、症状、或患者表型。治疗化合物必须给药于患者，然而诊断试剂可根据具体情况体内或体外使用。为避免疑义，将治疗或诊断化合物以治疗或诊断有效量掺入本发明的组合物中。
[0048] 在特别优选的实施方式中，本发明的组合物包含单克隆抗体或抗体片段，其是治疗有效的或可给药用于治疗疾病或病症，诸如自身免疫性疾病或炎性疾病、神经障碍、或癌症。用于治疗癌症的示例性单克隆抗体或抗体片段包括阿仑单抗(alemtuzumab)、贝伐单抗(bevacizumab)、西妥昔单抗(cetuximab)、吉妥珠单抗(gemtuzumab)、易普利姆玛(ipilimumab)、替伊莫(ibritumomab)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、奥法木单抗(ofatumumab)、帕尼单抗(panitumumab)、利妥昔单抗(rituximab)、托西莫单(tositumomab)、和曲妥珠单抗(trastuzumab)。用于治疗自身免疫性或炎性疾病的示例性单克隆抗体或抗体片段包括阿达木单抗、阿仑单抗、贝利单抗、briakinumab、康纳单抗、依库珠单抗、依帕珠单抗、依法珠单抗、戈利木单抗、英利昔单抗、美泊利单抗、那他珠单抗、奥法木单抗、ocrelizumab、otelixizumab、奥马珠单抗、瑞利珠单抗、利妥昔单抗、teplizumab、托珠单抗、优斯它单抗和维多珠单抗。可给药用于治疗、预防或诊断疾病或病症的单克隆抗体或抗体片段的其它实例包括巴利昔单抗、达利珠单抗、地诺单抗、依库珠单抗、帕利珠单抗和莫维珠单抗。
[0049] 根据本发明的悬浮液或分散体组合物可具体地包含癌症治疗试剂，所述癌症治疗试剂选自抗原结合的多肽或蛋白质，诸如单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段、包含抗体片段的融合蛋白、抗体-药物偶联物、或它们的任何组合，以及液体载体，所述液体载体包含式RFRH的半氟化烷烃，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团。充当血管生成抑制剂或能够抑制肿瘤细胞增殖(抗增殖剂)的抗原结合的多肽或蛋白质是尤其相关的。抗体片段可以为抗原结合片段(Fab)、单链可变片段(scFv)、单域抗体、微抗体、或双价抗体。
[0050] 例如，根据本发明的组合物可包含贝伐单抗和液体载体，其中所述液体载体包含式RFRH的半氟化烷烃，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团；并且其中贝伐单抗以分散体或悬浮液的形式掺入组合物中。还可考虑贝伐单抗的抗原结合片段。贝伐单抗(商品名 )是靶向VEGF-A(血管内皮生长因子A)并充当血管生长抑制剂的人源化鼠抗体。包含贝伐单抗的本发明组合物可用于治疗或预防疾病或病症，诸如结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌、肾或脑(胶质母细胞瘤)癌、以及眼部疾病，如老年性黄斑变性(AMD)。
[0051] 其它组合物可包含以传递途径名Fsn0503和Fsn1006已知的抗体。Fsn1006是能够结合到人EGFR(表皮生长因子受体)配体双调蛋白和HB-EGF(肝素结合表皮生长因子)的双特异性抗体，并且其可用于抑制细胞增殖。Fsn1006是人源化IgG1/κ同种型。已经展示Fsn1006独立于细胞的K-ras突变状态起作用，从而具有优于当前EGFR靶向特性如西妥昔单抗的优点。Fsn0503也是人源化IgG1/κ抗体，其靶向并抑制人组织蛋白酶S的蛋白质水解活性。Fsn0503可用于治疗癌症，和其它血管相关疾病，尤其是涉及组织蛋白酶S介导的细胞外基质重塑的疾病。
[0052] 在另外优选的实施方式中，根据本发明的悬浮液或分散体组合物可包含TNF抑制剂，其选自抗原结合的多肽或蛋白质，诸如单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段、包含抗体片段的融合蛋白、抗体-药物偶联物、或它们的任何组合，以及液体载体，所述液体载体包含式RFRH的半氟化烷烃，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团。示例性THF抑制剂为英利昔单抗、依那西普和赛妥珠单抗及其生物仿制药。本发明的组合物可包含这些TNF抑制剂和液体载体，其中所述液体载体由选自下列项中的半氟化烷烃组成：F4H5、F4H6、F4H8、F6H4、F6H6、F6H8和F6H10。具体地，这些组合物可用于治疗影响胃肠系统的自身免疫性疾病，诸如克罗恩病、溃疡性结肠炎，或者影响关节和皮肤的病症，诸如类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、强直性脊柱炎和斑块状银屑病。
[0053] 在另一个实施方式中，本发明的组合物包含浓度优选为至少0.5mg/mL，诸如0.5-10mg/ml的抗原结合的多肽或蛋白质。在另外优选的实施方式中，浓度为至少1mg/mL、至少
5mg/mL、至少10mg/mL、至少15mg/mL、至少25mg/mL、或至少35mg/mL。
5mg/mL、至少10mg/mL、至少15mg/mL、至少25mg/mL、或至少35mg/mL。
[0054] 在另一个方面，本发明提出稳定抗原结合的多肽或蛋白质的方法，所述方法包括将抗原结合的多肽或蛋白质与包含半氟化烷烃的液体载体混合的步骤。所述半氟化烷烃具有式RFRH，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团。根据所述方法，进行将抗原结合的多肽或蛋白质与液体载体混合从而形成悬浮液或分散体的步骤。这种稳定抗原结合的多肽或蛋白质的方法可用于制备组合物，所述组合物用作诸如治疗、预防或诊断有需要的患者的疾病或病症时的药物。任选地，这种稳定的方法还可用于制备、制造或合成抗原结合的多肽或蛋白质。
[0055] 如本文所用，术语稳定性被定义为维持一段时间内的抗原结合的多肽或蛋白质的化学或物理完整性和/或生物活性。稳定抗原结合的多肽或蛋白质包括防止或延缓抗原结合的多肽或蛋白质从其生物和/或治疗活性形式降解或变质成非活性形式。不稳定性可源于诸如以下情况：聚集、变性、裂解、或化学改性诸如氧化、交联、脱酰胺和与在包含抗原结合的多肽或蛋白质的组合物中起主要作用的其它组分反应。
[0056] 组合物中抗原结合蛋白质或多肽的稳定性可使用本领域已知的方法表征，已知的方法包括但不限于，利用免疫检测技术如ELISA，或者利用测定抗原结合蛋白质或多肽的纯度或物理/化学变化的其它技术(诸如尺寸排阻色谱法、毛细管凝胶电泳、圆二色性、或质谱)测量生物活性诸如抗原结合活性。通过比较经由这些类型的表征方法在初始时间点，诸如在配制或制备组合物(即，如可以为悬浮液或分散体的情况)时获得的测量值，和在稍后的时间点即在给定环境或条件下储存之后获得的那些测量值来测定稳定性。
[0057] 本发明人已经发现在包含半氟化烷烃的液体载体中的抗原结合蛋白质在25℃下保持稳定至少6个月。更显著地，在40℃的温度下储存相同时间段时，抗原结合蛋白质是同等稳定的。即，包含抗原结合蛋白质的组合物有效保持与其初始抗原结合活性相同或相似的抗原结合活性。
[0058] 在优选的实施方式中，本发明的组合物在25℃下，或在室温下，或在介于室温和40℃之间的温度下储存3个月期间，保持其初始抗原结合活性的至少85％或至少90％，诸如90-95％，或甚至大于95％。在另一个优选的实施方式中，本发明的组合物在25℃下，或在室温(RT)下，或在介于RT和40℃之间的温度下储存6个月期间，保持其初始抗原结合活性的至少85％或至少90％，诸如90-95％，或甚至大于95％。在另一个实施方式中，本发明的组合物在介于RT和40℃之间和50-75％之间的湿度下储存6个月期间，保持其初始抗原结合活性的至少85％。在其它实施方式中，储存时间段可以为4-6周、6-12周、或3-6个月或6-12个月。在另外的实施方式中，储存期间的湿度(RH)可以为至少40％或至少50％，或至少65％或至少
75％。
75％。
[0059] 如所提及的，将抗原结合的多肽或蛋白质掺入组合物中从而形成分散体或悬浮液。换句话讲，抗原结合的多肽或蛋白质分散或悬浮于包含半氟化烷烃的液体载体中。悬浮液是否在抗原结合蛋白质分散于液体载体中时形成取决于例如抗原结合蛋白质的性质，其在载体中的浓度，以及选择的SFA。
[0060] 如本文所使用的，悬浮液可定义为一类分散体，即，具有至少一个连续(或连贯)相和分散于连续相中的至少一个不连续(或内)相的系统。在悬浮液中，分散相处于固态。可用于实施本发明的悬浮液至少在生理温度下为液体，这是指连续相为液体。通常，悬浮液在室温下也为液体。除了悬浮液之外，术语分散体应理解为包括胶态体系，其中抗原结合蛋白质和多肽精细分散于液相中。在一些实施方式中，抗原结合的多肽或蛋白质还至少部分溶剂化。
[0061] 抗原结合的多肽或蛋白质的稳定化悬浮液或分散体经由以下方法制备，所述方法包括将抗原结合的多肽或蛋白质与包含半氟化烷烃的液体载体混合的步骤。所得悬浮液或分散体的稳定性可通过使用诸如本领域所已知的那些方法测量各种物理属性来表征，所述物理属性包括但不限于，例如，悬浮颗粒的再分散性、粒度分布和随时间推移的粒度增长。
[0062] 在一个特定实施方式中，组合物仅包含抗原结合的多肽或蛋白质以及一种或多种SFA，即组合物由抗原结合的多肽或蛋白质以及如上定义的一种或多种SFA组成。在另一个优选的实施方式中，包含抗原结合的多肽或蛋白质以及一种或多种SFA的组合物有效地或基本上不含水，即组合物不包含水，除了可能经由其它固体或液体组分或抗原结合的多肽或蛋白质本身引入的残余水量之外。在其它情况下，包含抗原结合的多肽或蛋白质以及包含半氟化烷烃的液体载体的悬浮液或分散体组合物可以不含水。
[0063] 与现有技术中已知的一些其它悬浮液或分散体相反，本发明的制剂对于其物理稳定性而言，不需要表面活性剂或仅需要少量表面活性剂。这是显著的优点，因为表面活性剂具有刺激性和局部毒性的可能性相当大，尤其是当通过皮下或肌内注射或通过滴注到眼中来给药时。根据一个优选的实施方式，本发明的组合物基本上不含表面活性剂。在另一个实施方式中，如果掺入多于一种表面活性剂，则一种或多种表面活性剂的总量分别不大于约10重量％，具体地不大于约5重量％，或优选不大于约2重量％。在另外优选的实施方式中，所述量分别不大于约1重量％，或不大于约0.5重量％。在该情况下，如本文所述的SFA，虽然由于其化学结构而具有一些两亲性，但不应被理解为是在表面活性剂的范围内，所述化学结构包括氟化或非氟化烷基(或亚烷基)基团，所述基团的特征在于不同程度的亲脂性。
[0064] 不存在或仅少量存在的表面活性剂包括非离子、阳离子、阴离子和两性离子表面活性剂，如通常用作各种类型的药物组合物中的赋形剂，例如作为润湿剂、乳化剂、分散剂、增溶剂等。被认为是潜在可用的表面活性剂的实例包括泰洛沙泊，泊洛沙姆诸如Pluronic F68LF或Lutrol F68、Pluronic L-G2LF和Pluronic L62D，聚山梨醇酯例如聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80，聚氧乙烯蓖麻油衍生物，脱水山梨醇酯，聚氧乙烯硬脂酸酯，卵磷脂，纯化或合成的磷脂，以及它们中的两种或更多种的混合物。
[0065] 本发明的组合物可任选包含非氟化有机液体，例如以便改变液体载体的特性，诸如粘度。此类其它液体可以为选自甘油酯油、液体蜡和液体石蜡中的油，或表现出高度生物相容性的有机溶剂，或多于一种液体赋形剂的混合物。
[0066] 可与一种或多种SFA组合使用的潜在可用的油性赋形剂的实例包括甘油三酯油(即大豆油、橄榄油、芝麻油、棉子油、蓖麻油、甜杏仁油)、矿物油(即凡士林和液体石蜡)、中链甘油三酯(MCT)、油性脂肪酸、肉豆蔻酸异丙酯、油性脂肪醇、山梨醇和脂肪酸的酯、油性蔗糖酯、或在生理上由眼部耐受的任何其它油性物质。
[0067] 潜在可用的有机溶剂的实例包括甘油、丙二醇、聚乙二醇和乙醇。助溶剂的浓度应当优选相对于SFA或SFA混合物的浓度是低的。如果使用有机溶剂诸如乙醇，则可推荐使其保持在低于约5重量％的水平。更优选地，乙醇的含量为约0.1至约2重量％，并且最优选地不大于约1重量％。
[0068] 当然，所述组合物包含其它根据需要或有用的药物赋形剂。潜在有用的赋形剂包括酸、碱、抗氧化剂、稳定剂、增效剂、着色剂、增稠剂、以及(如果在特定的情况下需要的)防腐剂。然而，本发明通常提供配制微生物稳定的非水性组合物的方法。这是由于SFA通常不易于发生微生物污染的事实。因此，其可配制待填充到多用容器中的不含防腐剂的组合物。不含防腐剂的组合物由许多患者更好地耐受并能够降低最终产品的成本。
[0069] 本发明的液体悬浮液可通过常规方法制备。原则上，包含活性成分的固体颗粒可分散到包含SFA的液体载体中。另选地，颗粒可通过在可控条件下将活性成分(和任选地，一种或多种固体赋形剂)的(通常为有机的)溶液加入基于SFA的载体中来原位沉淀。
[0070] 固体颗粒可通过冻干或喷雾干燥抗原结合蛋白质或颗粒的溶液来制备。所述溶液可以为水性或非水性的并且还可包含可能有用或需要的药物赋形剂。
[0071] 还可在颗粒与液体载体混合之前或之后调节分散相的粒度。在一个优选的实施方式中，提供已具有经适当选择的粒度的活性成分的颗粒。具有此类选择粒度的粉末可通过结晶工程由相应化合物的合成直接获得，或使用标准设备诸如球磨机、锤磨机、辊磨机、胶体磨、喷磨机等通过传统的研磨或铣削方法在合成之后获得。如果在制备悬浮液之后减小颗粒直径，则可使用超声破碎法以及各种类型的匀浆器，诸如胶体磨或高压匀浆器。
[0072] 本发明还提供用于治疗、预防或诊断有需要的患者的疾病或病症的方法，所述方法包括对患者给药优选呈悬浮液或分散体形式的组合物的步骤，所述组合物包含抗原结合的多肽或蛋白质和液体载体，其中所述液体载体包含半氟化烷烃。根据本发明的悬浮液的优异的物理特性使得这些组合物尤其可用于局部给药于患者的眼部、耳部、鼻部或肺部，或通过注射肠胃外给药。例如，本发明的组合物可通过局部施用或注射而给药于患者的眼部。注射的优选模式包括真皮注射、皮下注射、肌内注射、和局部区域注射。最优选的是皮下和肌肉注射给药途径。
[0073] 实施例
[0074] 实施例1
[0075] 研究经过6个月的时间段，抗ECSCR(内皮细胞特异性趋化性调节器)单克隆抗体(克隆ID 13G11 1A31 A7，由结合到内皮标记ECSCR的杂交瘤细胞表达的鼠IgG/k抗体)在F6H8中在25℃和40℃下的稳定性。
[0076] 将抗ECSCR单克隆抗体的冻干的0.25mg样品(最初储存在-80℃下PBS缓冲液中)重组成在F6H8中浓度为1mg/mL。将重组的样品储存在卷曲玻璃瓶中在25℃/60％RH和40℃/75％RH下。在储存3个月和6个月之后，测定这些样品的结合活性。
[0077] 为用作第一对照，将冻干抗体的其它样品以冻干形式储存在-80℃下。仅在分析之前将这些样品重组于PBS中。第二对照由抗体的PBS溶液的样品组成，其从未冻干，但保持冷藏在4℃下。
[0078] 抗体样品对ECSCR抗原的结合活性使用以下方案由ELISA测定：
[0079] 通过用ECSCR抗原和不相关的阴性抗原涂覆来制备Nunc MaxiSorpTM平底Elisa板。所述抗原以1μg/mL的浓度稀释于涂覆液中，并在4℃下用板温育过夜。然后所述板用200μL的3％封闭液封闭并在RT下在振荡器上温育1-2小时，之后用PBS-Tween 20溶液洗涤三次并吸干。将抗体样品在PBS中稀释至1μg/mL。将100ng或10ng的每个经稀释样品加入涂覆有ECSCR抗原的孔和涂覆有阴性对照抗原的孔中。所述板在振荡器上于RT下温育1h，然后用PBS-Tween 20溶液洗涤并吸干。用在PBS中以1:5000稀释的山羊抗-小鼠IgG-HRP二次抗体偶联物(Biorad，目录编号170-6516)探测抗体等分试样。所述板在振荡器上于RT下温育1h，之后用PBS-Tween 20溶液洗涤三次并吸干。所述板与100μL的TMB(3,3’,5,5’-四甲基联苯胺)在37℃下温育10min，然后加入50μL/孔的1M HCl。用分光光度计测量450nm下的吸光度。
[0080] 比较在初始重组时间点下和对照样品测得的结合活性示出在25℃下或者甚至在40℃的较高温度下储存的F6H8中的抗体的结合活性(由三个样品的平均值测定)在储存经过6个月时间段之后被保持(图1)。所述结合活性可比于对于在-80℃下储存的冻干抗-ECSCR单克隆抗体样品所观察的结合活性(对照1，图1)和对于在4℃下储存于PBS中的从未冻干样品所观察到的结合活性(对照2，图1)。
[0081] 实施例2：
[0082] 研究在25℃、50℃和70℃下经过4周时间的贝伐单抗、Fsn1006和Fsn0503的稳定性。
[0083] 冻干方案：获得上文所列抗体中每一个的储备溶液；Fsn1006和Fsn0503以PBS的溶液形式，贝伐单抗(商品名 )以其商业储存缓冲液形式。将80mg贝伐单抗的等分试样转移到>7000MWCO透析管中并针对3x 2L体积的PBS透析72小时。抗体溶液在PBS中稀释成0.5mg/ml，并且将500μl的每种溶液等分至单独的5ml琥珀色玻璃药用级小瓶中用于冻干。
冻干经过48小时周期来完成。
冻干经过48小时周期来完成。
[0084] 冻干抗体的再悬浮：小心利用涡旋将冻干抗体以0.5mg/mL的浓度悬浮于F4H5、F6H8、50体积％F4H5的F6H8溶液、PBS(137mM NaCl、2.7mM KCl、10mM Na2HPO4、1.8mM KH2PO4，pH＝7.4)中。冻干抗体在PBS中的再悬浮形成溶液，然而利用半氟化烷烃形成悬浮液。在25℃和50℃下将所得的悬浮液和溶液储存在琥珀酸玻璃小瓶中4周(28天)。在23天之后，使50℃样品经受70℃条件。
[0085] 抗体样品的结合活性通过在t＝0(再悬浮之后立即)、t＝2周和t＝4周时进行ELISA测试来测定。作为对照，使用从未再悬浮的抗体样品(储存在-80℃下)和从未冻干的抗体的PBS溶液(储存在4℃下)。
[0086] ELISA方案：对于每种抗体的ELISA测试而言，通过添加100ng/孔的适当抗原的100μl 0.2M碳酸盐缓冲溶液(pH 9.5)用目标抗原涂覆Nunc Maxisorp 96孔板，并将其在37℃下温育1小时。在用包含0.1％tween 20(PBS-T)的PBS洗涤之后，通过添加200μl 4％奶粉的PBS溶液并且在振荡器上在室温下温育2小时来封闭所述板。在进一步洗涤之后，施用抗体样品。将1ml的x0.5PBS加入每个非水性小瓶中。通过温和摇摆5分钟将抗体萃取到溶液中。然后将1μl水层转移到包含999μl PBS的小瓶中(以获得50ng/孔的标称值)。然后以100μl的
6次重复将100μl的每个样品瓶铺板。所述板在4℃下温育过夜。洗涤之后，在PBS中以1:60,
000稀释施用二次抗体(山羊抗人HRP偶联物)；向每个孔中添加100μl并且将板在振摇下于室温下温育1小时。然后将所述板用3体积的PBS-T洗涤之后用2体积的PBS洗涤。然后施用
100μl的TMB溶液并且所述板在37℃下温育10分钟。通过添加50μl 1M HCl停止反应。读取每个孔在λ＝450nm下的吸光度。
6次重复将100μl的每个样品瓶铺板。所述板在4℃下温育过夜。洗涤之后，在PBS中以1:60,
000稀释施用二次抗体(山羊抗人HRP偶联物)；向每个孔中添加100μl并且将板在振摇下于室温下温育1小时。然后将所述板用3体积的PBS-T洗涤之后用2体积的PBS洗涤。然后施用
100μl的TMB溶液并且所述板在37℃下温育10分钟。通过添加50μl 1M HCl停止反应。读取每个孔在λ＝450nm下的吸光度。
[0087] 表1：贝伐单抗活性(450nm下的平均OD±2SD)
[0088]
[0089] 表2：Fsn1006活性(450nm下的平均OD±2SD)
[0090]
[0091] 表3：Fsn0503活性(450nm下的平均OD±2SD)
[0092]
[0093]
[0094] 在25℃和50℃下4周的时间段期间，包括在50℃样品增加至70℃的储存温度的该时间段的最后5天期间，以悬浮液形式储存在F4H5、F6H8和50体积％F4H5的F6H8溶液中的贝伐单抗、Fsn1006和Fsn0503的活性基本上保持一致。相反，不考虑储存温度，由这些抗体的PBS缓冲溶液展示的结合活性在四周时间段末显著降低。
[0095] 实施例3
[0096] 检查在50℃和80℃之间的温度下，储存在SFA和PBS缓冲液中的贝伐单抗、Fsn1006和Fsn0503的结合活性。
[0097] 小心利用涡旋将冻干抗体贝伐单抗、Fsn1006和Fsn0503(如上文实例2中所制备的)以0.5mg/mL的浓度再悬浮于F4H5、F6H8和PBS中。这些冻干抗体在PBS中的再悬浮形成溶液，然而利用SFA形成悬浮液。
[0098] 在PBS缓冲液萃取和使用如上文实例2中所述的ELISA方法活性分析之前，将所述悬浮液/溶液样品分别在50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃和80℃下保持2h时间段，然后冷却至10℃。每个实验重复进行三次。将在40℃下加热的样品用作对照。
[0099] 发现与样品的含水缓冲液溶液相比，贝伐单抗(图2)、Fsn1006(图3)和Fsn0503(图4)的F4H5和F6H8悬浮液展示对热变性的显著稳定性。在这些半氟化烷烃中配制的抗体的结合活性在50℃和80℃之间保持相当恒定。相反，储存在含水PBS缓冲液中的这些抗体的活性在高于60℃的温度下急剧降低。实施例4
[0100] 研究包含抗原结合的多肽或蛋白质以及液体载体的组合物的稳定性并与不同介质中的制剂进行比较，所述抗原结合的多肽或蛋白质选自英夫利昔单抗(具有人恒定区和鼠可变区的嵌合单克隆抗体，并且分子量为149kDa)，融合蛋白依那西普(分子量为150kDa的重组人蛋白，其包含融合到IgG1的Fc部分的75kDa TNFR(肿瘤坏死因子受体)的配体结合部分)，和赛妥珠单抗(分子量为91kDa的抗体片段，其包括偶联到约40kDa聚乙二醇的重组Fab’)或它们的生物仿制药，所述液体载体包含式RFRH的半氟化烷烃，其中RF为具有4至12个碳原子的直链全氟化烃片段，并且其中RH为具有4至8个碳原子的直链烷基基团(例如F4H5和F6H8)。
[0101] 将所述抗体冻干并再悬浮于半氟化烷烃中。还在其它介质中制备比较悬浮液/溶液。对于这些制剂进行以下稳定性测试：
[0102] 在ICH条件(25和40℃)下的储存稳定性
[0103] 在ICH条件外的温度稳定性，即热变性
[0104] 这些以类似于实施例1-3中所述的方法进行。进行适用于分析这些抗原结合多肽的稳定性的分析方法。在整个上文所列的稳定性实验过程中用于监测抗体活性和效力，以及监测聚集体含量的分析包括诸如类似于上文实例1-3中所述方案的ELISA在内的技术。
[0105] 分析方法利用由抗体悬浮液直接获得的样品来进行，或根据分析技术，对为含水缓冲液萃取物的样品来进行。
[0106] 预计包含抗原结合的多肽或蛋白质的组合物将表现出改善的稳定性和减小的聚集体形成趋势。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 用于肠胃外给药的包含EPA甘油三酯和DHA甘油三酯的组合物 | 2020-05-14 | 527 |
| 用于肠胃外给药的乳液 | 2020-05-11 | 894 |
| 含氟喹诺酮类化合物的药物制剂 | 2020-05-15 | 339 |
| 去铁胺制剂和多晶型物及其制备方法 | 2020-05-16 | 400 |
| 用TCM278对HIV感染进行的长期治疗 | 2020-05-16 | 471 |
| 用于肠胃外给药的药学上稳定的奥沙利铂制剂 | 2020-05-12 | 240 |
| 用于肠胃外给药的药学上稳定的奥沙利铂制剂 | 2020-05-12 | 887 |
| 含有紫杉烷-环糊精复合物的药物组合物、制造方法和使用方法 | 2020-05-16 | 284 |
| 肠胃道外给药的多恩达隆医药组合物 | 2020-05-11 | 346 |
| 肠胃检查装置和肠胃检查系统 | 2020-05-17 | 406 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈