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一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂

阅读：676发布：2020-05-16

专利汇可以提供一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，属于血液分析技术领域，解决现有技术不能同时测定人全血中白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白等问题。溶血剂为含有阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和血红蛋白稳定剂的缓冲溶液，其中，阳离子表面活性剂的浓度为0.1g/L～50g/L，非离子表面性剂的浓度为0.5g/L～100g/L，血红蛋白稳定剂的浓度为0.1g/L‑50g/L，缓冲溶液的pH值为1.8～4.8。本发明简化了溶血剂的组分，在无需加热装置的情况下，溶血时间仅需10‑18s，即可完成对嗜碱性粒细胞和白细胞进行分类计数以及血红蛋白的测定，操作简单、快速，具有高度的准确性。，下面是一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其特征在于，其为含有阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和血红蛋白稳定剂的缓冲溶液，其中，阳离子表面活性剂的浓度为0.1g/L～50g/L，非离子表面性剂的浓度为0.5g/L～100g/L，血红蛋白稳定剂的浓度为0.1g/L-50g/L，缓冲溶液的pH值为1.8～4.8。
2.根据权利要求1所述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其特征在于，缓冲溶液选自酒石酸/酒石酸钠缓冲体系、柠檬酸/柠檬酸钠缓冲体系、柠檬酸/柠檬酸钾缓冲体系、甘氨酸/盐酸缓冲体系、邻苯二甲酸/盐酸缓冲体系、磷酸氢二钠/盐酸缓冲体系、磷酸氢二钠/柠檬酸缓冲体系或柠檬酸/氢氧化钠/盐酸缓冲体系中的一种。
3.根据权利要求1所述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其特征在于，阳离子表面活性剂为季铵盐型表面活性剂。
4.根据权利要求3所述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其特征在于，阳离子表面活性剂选自十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十六烷基二甲基乙基氯化铵或十六烷基二甲基乙基溴化铵中的一种。
5.根据权利要求1所述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其特征在于，非离子表面活性剂选自聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯油基醚、聚氧乙烯单硬脂酸酯或聚氧乙烯烷基芳基醚中的一种。
6.根据权利要求1所述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其特征在于，血红蛋白稳定剂选自小子分醇类。
7.根据权利要求6所述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其特征在于，血红蛋白稳定剂为异丙醇或苯氧乙醇。
8.根据权利要求1-7任一项所述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其特征在于，其使用方法为：待测全血样本与所述溶血剂以体积比1：500-10：500混合反应10-18s，然后采用鞘流技术通过光学检测器，检测白细胞大小和内部结构，获得嗜碱性粒细胞和其他白细胞数量，同时通过比色法测量血红蛋白的浓度。

说明书全文

一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶

血剂

技术领域

[0001] 本发明涉及一种溶血剂，尤其涉及一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，属于血液分析技术领域。

背景技术

[0002] 嗜碱性粒细胞是在人全血中占比例最少的一种粒细胞，健康人血液中占白细胞总数的0％～1％，在临床上，出现骨髓增生性疾病、慢性粒细胞性白血病、感染、某些食物过敏等疾病时，嗜碱性粒细胞的数量会出现明显的变化，因此在人全血检测中嗜碱性粒细胞的准确分类计数对这些疾病的正确诊断有直接指导意义。

[0003] 目前，对于人全血检测中嗜碱性粒细胞准确分类和计数的方法主要包括阻抗法和光学法。采用这两种方法测定时，均不能同时对血红蛋白进行测定，如CN1113241C公开了一种在酸性介质中用聚环氧乙烷型非离子表面活性剂及一种阳离子表面活性剂对嗜碱性粒细胞进行测定的方法，该方法的检测系统为激光散射法，不能同时进行血红蛋白测定。再如US5196346 公开了一种试剂，通过保护嗜碱性粒细胞用电阻抗法测定嗜碱性粒细胞，但这种试剂不能测量血红蛋白，且对使用温度要求高，溶血速度慢，使用上不够简便。此外，采用阻抗法测定时，大血小板及疟原虫会对白细胞和嗜碱性粒细胞计数及分类产生影响。又如US3874852和US3854914描述了一种同样类型的氰化试剂，但这种试剂的主要缺点是含有氰化物，且不能对血液样本中的白细胞亚群进行分类和计数。US5242832也描述了一种相似的白细胞分类试剂，但这种试剂不能用于鉴别嗜碱性粒细胞而只能分析淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。因此，在对人全血中白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白同时进行测定时，需要同时使用两种以上的试剂，如 SYSMEX XS-800i血球仪配套使用的多种溶血素，试剂组分多，且操作复杂。

发明内容

[0004] 本发明针对现有的技术问题，提供一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，克服了现有技术中的不足，避免了阻抗法测定时大血小板及疟原虫对白细胞和嗜碱性粒细胞计数及分类的影响，通过一种试剂即可用于光学法完成全血样本中的白细胞计数和嗜碱性粒细胞计数，同时溶解红细胞进行血红蛋白测定。

[0005] 为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

[0006] 一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其为含有阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和血红蛋白稳定剂的缓冲溶液，其中，阳离子表面活性剂的浓度为0.1g/L～50g/L，非离子表面性剂的浓度为0.5g/L～100g/L，血红蛋白稳定剂的浓度为0.1g/L-50g/L，缓冲溶液的 pH值为1.8～4.8。

[0007] 优选地，上述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，缓冲溶液选自酒石酸/酒石酸钠缓冲体系、柠檬酸/柠檬酸钾缓冲体系、甘氨酸/盐酸缓冲体系、邻苯二甲酸/盐酸缓冲体系、磷酸氢二钠/盐酸缓冲体系、磷酸氢二钠/柠檬酸缓冲体系或柠檬酸/氢氧化钠/盐酸缓冲体系中的一种。

[0008] 优选地，上述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，阳离子表面活性剂选自季铵盐型表面活性剂。

[0009] 进一步地优选为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十六烷基二甲基乙基氯化铵或十六烷基二甲基乙基溴化铵中的一种。

[0010] 优选地，上述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，非离子表面活性剂选自聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯油基醚、聚氧乙烯单硬脂酸酯或聚氧乙烯烷基芳基醚中的一种。

[0011] 优选地，上述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，血红蛋白稳定剂选自小子分醇类。

[0012] 优选地，上述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，血红蛋白稳定剂异丙醇或苯氧乙醇。

[0013] 本发明还提供了上述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂的使用方法，具体为：待测全血样本与所述溶血剂以体积比1： 500-10：500混合反应10-18s，然后采用鞘流技术通过光学检测器，检测白细胞大小和内部结构，获得嗜碱性粒细胞和其他白细胞数量，同时通过比色法测量血红蛋白的浓度。

[0014] 与现有技术相比，本发明的有益效果为：

[0015] 本发明采用易获取的原料制备出适合对嗜碱性粒细胞和其他白细胞进行分类计数并可同时进行血红蛋白测定的新型无氰化物溶血剂，简化了溶血剂的组分，在无需加热装置的情况下，溶血时间仅需10-18s，采用一种试剂即可通过光学法测量仪器对嗜碱性粒细胞和其他白细胞进行分类计数，同时还可通过比色法进行血红蛋白测定，操作简单、快速，检测结果具有高度的准确性，与SYSMEX XS-800i血球仪的对比数据无显著性差异，对疾病的正确诊断有直接指导意义。附图说明

[0016] 为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，还可以根据这些附图获得其他的附图。

[0017] 图1为本发明实施例4提供的采用本发明溶血剂后20份临床血的白细胞计数与SYSMEX XS-800i血球仪光学法测定数据的相关性统计图；

[0018] 图2为本发明实施例4提供的采用本发明溶血剂后20份临床血的血红蛋白测值与SYSMEX XS-800i血球仪光学法测定数据的相关性统计图。

具体实施方式

[0019] 为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面将结合实施例和附图对本发明作进一步的详细介绍。但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点而不是对本发明专利要求的限制。

[0020] 实施例1

[0021] 本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其配方组成如下：

[0022]

[0023] 实施例2

[0024] 本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其配方组成如下：

[0025]

[0026] 实施例3

[0027] 本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其配方组成如下：

[0028]

[0029]

[0030] 实施例4

[0031] 本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其配方组成如下：

[0032]

[0033] 实施例5

[0034] 本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其配方组成如下：

[0035]

[0036] 实施例6

[0037] 本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其配方组成如下：

[0038]

[0039]

[0040] 实施例7

[0041] 本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其配方组成如下：

[0042]

[0043] 实施例8

[0044] 本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂，其配方组成如下：

[0045]

[0046] 实验例

[0047] 取200份临床血，分别采用实施例1-3的溶血剂，将待测全血样本与本发明溶血剂分别以体积比1：500、4：500、10：500稀释后，混合反应 10-18s，然后采用鞘流技术通过光学检测器，检测白细胞大小和内部结构，获得嗜碱性粒细胞和其他白细胞数量，同时通过比色法测量血红蛋白的浓度。

[0048] 将上述200份待测全血样本采用SYSMEX XS-800i血球仪进行检测，对比二者的检测结果，其中20份临床血的检测结果见表1。

[0049] 表1检测结果

[0050]

[0051]

[0052] 由上表可知，采用本发明溶血剂通过光学法检测嗜碱性粒细胞和其他白细胞计数以及同时通过比色法检测的血红蛋白含量各实施例之间无明显差别，与SYSMEX XS-800i对比数据也没有显著差别，具有高度的准确性。

[0053] 采用本发明溶血剂后200份临床血的白细胞计数与SYSMEX XS-800i 血球仪光学法测定数据的相关性统计图见图1，采用本发明溶血剂后200 份临床血的血红蛋白测值与SYSMEX XS-800i血球仪测值的相关性统计图见图2。图1和图2显示，本发明的溶血剂与SYSMEX XS-800i血球仪采用多种溶血剂测试的结果线性关系好，相关系数达到0.99以上。

[0054] 以上对本发明提供的实施例只是优选实施方式，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

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