在本申请中所有引用的出版物、或被引证以说明发明背景的同等 来源物的内容为公开的目的引入本申请中。
G蛋白偶联受体代表在哺乳动物特别是人体内的许多生物化学的 和病理生化过程中起重要作用的细胞膜相关受体的超家族。所有 GPCR’s由7个通过三个细胞内和三个细胞外环连接在一起并含细胞外 氨基末端和细胞内羧基末端的疏水性跨膜α螺旋状功能域构成。一种 或多种异源三聚体G蛋白与它们的细胞信号转导有关。各种生理刺激 如光过敏、味道和气味以及诸如代谢、繁殖和发育的基本过程由它们 介导和控制。存在外源性和内源性配体的GPCR’s。肽类激素、生物胺、 氨基酸、核苷酸、脂质、Ca2+，以及光量子，尤其被确定为配体；此外 一种配体可激活不同的受体。
根据最近的研究，已经在人的G蛋白偶联受体(GPCR’s)与内源性 配体的基因组中鉴定了367个序列，D.K.Vassilatis等，PNAS 100(8)，4903-4908(2003)。在这些序列中，284个属于A类，50个 属于B类，17个属于C类，11个属于F/S类。属于A类的实例是铃蟾 素、多巴胺和LHRH的受体，属于B类的实例是VIP和降钙素受体。许 多GPCR’s的天然配体至今未知。
由于它们的功能，GPCR’s适合作为药物的靶点用于治疗和预防许 多病症。据推测目前已知的活性成分的靶点中约5 0％是GPCR’s[Y. Fang等，DDT 8(16)，755-761(2003)]。因此，GPCR’s在病理过程例 如疼痛(阿片受体)、哮喘(β2-肾上腺素能受体)、偏头痛(5-羟色胺 5-HT1B/1D受体)、癌症(LHRH受体)、心血管病症(血管紧张素受体)、 代谢失调(GHS受体)或抑郁症(5-羟色胺5-HT1a受体)中起重要作用， K.L.Pierce等，Nat.Rev.Mol.Cell Biol.3，639-650(2002)。
关于GPCR’s的一般信息见http://www.gpcr.org。
本发明描述了一般性地改善其性质的GPCR新配体、本发明提供的 尤其作为LHRH受体拮抗剂起作用的化合物。
这类受体的天然配体，肽类激素LHRH，在下丘脑的细胞中合成并 由下丘脑的神经元以脉冲的形式释放到(Ementia mediana)的毛细管 丛内。在脑下垂体的前叶中，LHRH与促性腺细胞的LHRH受体结合并 刺激某些三聚体G蛋白，它能引发分支的信号转导级联。启始是磷脂 酶C、A2和/或D的激活。这会导致第二信使二酰基甘油和IP3的供应 增加，之后是从细胞内池的Ca2+流动和各种下级蛋白激酶的激活。最 后，产生刺激和促性腺激素FSH和LH的瞬间定义的脉冲释放。这两个 激素经循环分别输送至靶器官睾丸和卵巢。在那里它们刺激相应的性 激素的产生和释放。在相反方向上存在所形成的性激素的浓度的复杂 反馈机理再度调节LH和FSH的释放。
在雄性生物体中，LH与睾丸间质细胞的膜受体结合并刺激睾酮的 生物合成。FSH经特异性受体作用于睾丸支持细胞并帮助精子的产生。 在雌性生物体中，LH与卵泡膜细胞的LH受体结合并激活雄激素合成 酶的形成。FSH经其FSH受体刺激某些卵泡阶段的卵巢粒层细胞的增 生。所形成的雄激素在邻近的卵巢粒层细胞中转化为雌激素雌酮和雌 二醇。
许多以良性或恶性组织增生为特征的病症依赖于性激素如睾酮或 雌二醇的刺激。这型病症中典型的病症是男性中的前列腺癌和良性前 列腺增生(BPH)以及女性中的子宫内膜异位症、子宫纤维瘤或子宫肌 瘤、性早熟、多毛症和多囊卵巢综合征和乳腺癌、子宫癌、子宫内膜 癌、子宫颈癌和卵巢癌。
自从1971年Schally等Science173，1036-1038(1971)的发现 以来，已经合成和试验了3000种以上的天然LHRH合成类似物。肽激 动剂如曲普瑞林和亮丙瑞林已经多年成功用于妇科学病症和癌的治疗 中。然而，激动剂的缺点通常是它们在使用初期相刺激LHRH受体并因 而由于性激素水平的开始增加导致副作用。只是在由过度刺激引起的 LHRH受体下调以后超拮抗剂才表现它们的作用。这导致性激素水平完 全下降因而导致具有所有临床症状的药理学阉割。该缺点与不可能通 过剂量靶向调节性激素的水平有关。因此，不促使性激素水平的完全 降低至阉割水平的疾病例如良性组织增生，用激动剂对患者治疗不是 最佳的。
这已经导致了肽LHRH-受体-拮抗剂的研制，其中例如西曲瑞克 (Cetrotide_)已经成功地用于在雌性不孕的治疗范围内控制卵巢的刺 激。这类拮抗剂立即和剂量依赖性地抑制LHRH受体，从而导致睾酮或 雌二醇和孕酮的血浆水平直接降低。然而，这类肽拮抗剂多少不如激 动剂有效因而必须给较高的剂量。
对LHRH激动剂和拮抗剂的临床应用和潜力R.P.Millar等在 British Med.Bull.56，761-772(2000)中和R.E.Felberbaum等， Mol.Cell.Bndocrinology 166，9-14(2000)和F.Haviv等在 Integration of Pharmaceutical Discover and Development：Case Studies，Chapter 7，ed.Borchardt等，Plenum Press，New York(1998) 中作了综述。除治疗恶性和良性肿瘤疾病之外，还可能的应用是在体 外受精的范围内受控的卵巢刺激、节育(避孕)、和防护不希望有的放 疗或化疗的副作用、治疗HIV感染(AIDS)和神经病学或神经变性疾病 障碍如阿尔茨海默病。特异性LHRH受体不仅在脑下垂体细胞中发现， 而且在各种肿瘤例如乳房和卵巢肿瘤的细胞中发现。这些受体可介导 LHRH受体拮抗剂对肿瘤的直接抗增殖作用。
肽LHRH受体激动剂和拮抗剂大多是十肽，其生物利用度不足以口 服给药。它们通常以注射溶液或贮库制剂的形式皮下或肌内给药。这 种应用对患者不便，会遇到顺应性。此外，十肽的合成复杂且昂贵。
因此寻找除具有高活性外还具有改善的代谢稳定性且可口服给药 的非肽LHRH受体拮抗剂是有意义的。
先有技术
与肽LHRH受体激动剂和拮抗剂相比，至今还没有非肽化合物被批 准和在临床上用于任何可能的适应症。目前在LHRH受体激动剂和拮抗 剂的领域内研制的状态在Y.-F.Zhu等，Expert Opin.Therap. Patents 14(2)，187-199(2004)，Y.-F.Zhu等，Ann.Rep.Med.Chem. (39)，99-110(2004)，F.C.Tucci等，Curr.Opin.Drug Discovery & Development 7(6)，832-847(2004)，R.E.Armer，Curr.Med.Chem. 11，3017-3028(2004)和M.V.Chengalvala等，Curr.Med.Chem. -Anti-Cancer Agents，3，399-410(2003)的综述中作了描述。在 首先提及的出版物中包含所出版的描述低分子量LHRH受体拮抗剂合 成和应用的专利说明书的综合目录。
非肽LHRH受体拮抗剂的首要实例有4-氧代噻吩并[2，3-b]吡啶结 构，其由N.Cho等在J.Med.Chem.41，4190-4195(1998)中作 了描述。尽管这些化合物例如T-98475具有高受体亲和性，但其水溶 性极差且生物利用度低。以该先导结构为基础，许多进一步的研制已 经开展，可提及的实例是国际申请WO 95/28405、WO 96/24597、WO 97/14697和WO 97/41126的公布。作为可口服的LHRH受体拮抗剂噻 吩并[2，3-d]嘧啶-2，4-二酮的合成由S.Sasaki等，在J.Med.Chem. 46，113-124(2003)中作了描述。
新的1-芳基甲基-5-芳基-6-甲基尿嘧啶由Z.Guo等，在J.Med. Chem.47，1259-1271(2004)中作了描述。作为有效的非肽LHRH受 体拮抗剂N-[(杂)芳基甲基]苯磺酰胺的制备公开于WO 03/078398。 专利申请WO 02/11732描述了LHRH受体拮抗剂三环吡咯烷。LHRH受 体拮抗剂取代的吡啶-4-酮公开于WO 03/13528，取代的1，3，5-三嗪 -2，4，6-三酮公开于WO 03/11839。
具有LHRH受体拮抗活性的红霉素A衍生物的合成和生物学活性由 J.T.Randolph等，在J.Med.Chem.47(5)，1085-1097(2004)中 作了描述。在阉割的大鼠模型中，所选择的衍生物在LH水平上显示出 口服活性。
例如非肽LHRH拮抗剂喹啉衍生物公开于WO 97/14682。取代的2- 芳基吲哚类衍生物作为LHRH受体拮抗剂尤其描述于WO 97/21435、WO 97/21703、WO 98/55116、WO 98/55470、WO 98/55479、WO 99/21553、 WO 00/04013。相应地取代的氮杂-2-芳基吲哚类作为LHRH受体拮抗剂 尤其在WO 99/51231、WO 99/51596、WO 00/53178和WO 00/53602中 要求保护。没有公开有利的生物学或生物物理学数据。
专利EP 0679642 B1描述了作为LHRH受体拮抗剂的稠合杂环化 合物。然而，四氢咔唑的基本结构不是其中所描述的发明的主题。
1，2，3，4-四氢咔唑羧酸作为前列腺素拮抗剂描述于专利EP 0239 306 B1。LHRH受体拮抗效应既没有描述也不相关。美国专利3,970,757 公开了作为抗胃酸分泌剂的四氢咔唑衍生物。然而，这类结构的LHRH 受体拮抗效应既没有描述也不相关。EP 603432 B1或US 5,708,187 描述了作为5-HT1激动剂尤其用于治疗偏头痛的四氢咔唑衍生物。然 而，LHRH受体拮抗效应既没有描述也不相关。WO 2005/033099 A2描 述了作为二肽基肽酶IV抑制剂的四氢咔唑衍生物。然而，LHRH受体 拮抗效应既没有描述也不相关。LHRH受体拮抗效应没有被提及，所公 开的结构不同于本发明化合物。D.J.Davies等在J.Med.Chem.41， 451-467(1998)中描述了具有褪黑激素激动或拮抗效应的四氢咔唑 衍生物。然而，LHRH受体拮抗效应既没有描述也不相关。四氢咔唑衍 生物由S.J.Shuttleworth等在Bioorg.Med.Chem.Lett.14， 3037-3042(2004)中作了描述，作为神经介素B受体的部分激动剂。 然而，LHRH受体拮抗效应既没有描述也不相关。R.Millet等在 Letters in Peptide Science 6，221-233(1999)中描述了作为NK1/NK2 配体的四氢咔唑衍生物。所公开的结构不同于本发明化合物。而且， LHRH受体拮抗效应既没有描述也不相关。3-氨基-3′-羧基四氢咔唑类 的固相合成描述于Koppitz等，THL 46(6)，911-914(2005)。LHRH 受体拮抗效应既没有描述也不相关。
例如作为具有良好的受体亲和性的肽模拟物的LHRH受体拮抗剂 四氢咔唑衍生物公开于WO 03/051837(DE 101 64 564 A1)。然而，这 类化合物的物理化学和代谢性质使得它们不适合于口服剂型的最佳方 式。
许多出版物提供了神经激肽拮抗剂研制状态的综述。G.Giardina 等，IDrugs 6(8)，758-772(2003)提供了目前专利文献的综述。V. Leroy等，Expert Opinion on Investigational Drugs 9(4)，735-746 (2000)，和C.Swain等，Annual Reports in Medicinal Chemistry 34，51-60(1999)描述了关于神经激肽受体拮抗剂的研制状态，而 R.M.Navari等，Cancer Investigation22(4)569-576(2004)描述 了临床研究结果，其中NK1受体拮抗剂用于控制化疗诱发的呕吐。R.G. Hill等在Pain，523-530(2003)中描述了作为有潜力的镇痛药的神 经激肽受体拮抗剂，而A.von Sprecher等在IDrugs 1(1)，73-91(1998) 中描述了作为有潜力的活性成分用于治疗炎症和类风湿性关节炎的神 经激肽受体拮抗剂。R.Millet等在Letters in Peptide Science 6， 221-233(1999)中描述了作为NK1/NK2配体的四氢咔唑衍生物。所公开 的结构不同于本发明化合物。
发明目的
本发明的目的是提供具有改善的口服生物利用度和改善的代谢稳 定性且可用于在哺乳动物尤其人中治疗由GPCR’s介导的病症的新化合 物。优选新化合物通过LHRH受体的拮抗性抑制显示其生物作用。新化 合物适合于以口服制剂在可为使用所接受的剂量下达到预期效果且是 剂量依赖性的。为此必须能够在哺乳动物或人中使用该新化合物作为 药物中的药理学活性成分。
本发明的目的通过提供以下新的、改善的通式(I)的四氢咔唑衍生 物以令人惊奇的方式实现。
发明详述
本发明的第一方面涉及通式(I)的新四氢咔唑化合物：

其中：
X1为S或O，
X2和X3彼此独立地为O或孪位(geminally)连接的H2，
R1和R2彼此独立地选自-H、芳基、烷基和芳基烷基，其中在烷 基和/或芳基上任选地被最多3个独立地选自-Hal、-CN和-O-烷基的 取代基取代，其中R1和R2尤其各自为氢原子，
R3为烷基、芳基烷基或杂芳烷基，其任选地被最多3个取代基取代， 其中所述的取代基独立地选自-Hal，-CN，-CO-O-R12，-CO-NR12R12′，-OH， -O-R13，-O-CO-R13，-O-SO2-OR12，-O-SO2-R12，-SO2-OR12，-SO-R12， -O-PO(OR12)(OR12′)，-O-PO(NR12R12′)2，-O-CO-O-R13，-O-CO-NR12R12′， -O-CS-NR12R12′，-S-R12，-NR12R12′，-NH-CO-R13，-NH-SO2-R12， -NH-CO-O-R13，-NH-CO-NHR12，-NH-C(NH)-NH2，
R4、R5、R6和R7彼此独立地选自H，-Hal，-CN，-CONH2，-COOH， -CF3，-O-烷基，-OCF3，-NO2，和烷基、芳基烷基及杂芳烷基；
R9为氢原子、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基或杂芳烷基，优选 氢原子；
R10为氢原子或基团-R11，-CO-R11，-CO-OR11， -CO-NHR11，-C(NH)-NHR11，-SO2-R11，或-SO2-NHR11；
R11为烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基或杂芳烷基，其任选地被 一个或多个独立地选自-Hal，-CN，-烷基，-CF3，-OCF3，-OH，-O-烷 基和-O-(CH2CH2-O)n-CH3的取代基取代；
R8为-C1-C6-烷基-芳基或-C1-C6-烷基-杂芳基，其中芳基或杂芳基 被最多三个、即被至少一个、两个或三个取代基、优选被一个取代基 取代，其中所述取代基独立地选自-O-(CH2CH2-O)n-CH3， -O-CO-R12，-O-CO-(CH2CH2-O)n-CH3，-O-SO2-OR12，-O-SO2-R12， -O-PO(OR12)(OR12′)，-O-PO(NR12R12′)2，-O-CO-OR13， -O-CO-NR12R12′，和-O-CS-NR12R12′，或，
然而，其中至少
(i)X1为S，或
(ii)R10不是H，且R11为芳基烷基或杂芳烷基，其在芳基或杂芳 基上被一个或多个取代基、优选被一个、两个或三个取代基取代，其 中所述取代基独立地选自Hal，-CN，-烷基，-CF3，-OCF3，-OH，-O- 烷基和-O-(CH2CH2-O)n-CH3，
R8也设定为对于R3所指出的含义；
R12和R12′彼此独立地为H或烷基、芳基烷基、芳基、杂芳烷基 或杂芳基，且优选为氢，
R13选自烷基、芳基烷基、芳基、杂芳烷基和杂芳基基团，或为 基团-(CH2CH2-O)n-CH3，且
n为1-10、优选1-6的整数。
用于通式(I)化合物的说明所表示的术语，除非在说明书或权利要 求书中另外指明，总是有以下含义：
术语“取代”指相应的基团有一个或多个取代基。在基团有多个 取代基以及指定选择多种取代基的情况下，取代基彼此独立地选择而 不必相同。术语“未取代”指相应的基团没有取代基。术语“任选地 取代的”指相应的基团是未取代的或被一个或多个取代基取代。术语 “被最多3个取代基取代”指相应的基团被一个或者两个或三个取代 基取代。
术语“卤原子”或“卤素取代基”(Hal-)指一个、适当时指多个 氟(F、氟代)、溴(Br、溴代)、氯(Cl、氯)或碘(I、碘代)原子。描述 为“二卤”、“三卤”和“全卤”分别指两个、三个和四个取代基， 其中每个取代基可独立地选自氟、氯、溴和碘。“卤素”优选指氟或 氯原子。
术语“烷基”对于本发明而言包括非环的饱和或部分不饱和的含 C1-C12碳原子的烃，其可以是直链或支链。术语“烷基”优选表示1-8、 特别优选1-6个碳原子的烷基链。适宜的烷基的实例是甲基、乙基、 正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、叔戊基、2-或 3-甲基戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十一基、 正十二烷基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基和辛二烯基。术语“烷 基”同样表示饱和或部分不饱和环烷基，优选选自环(C3-C8)烷基。适 宜的环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、 环庚基、环辛基、环己烯基、环戊烯基、环辛二烯基等。此外，术语 “烷基”包括环烷基烷基，优选环(C3-C8)烷基-(C1-C4)烷基。其实例 是环丙基甲基、环己基甲基、环戊基乙基、环己烯基乙基。因此，术 语C1-C4-烷基至少包括下列基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、丙 烯基、环丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、环丁基、环丙基甲基和丁 烯基。作为C1-C4-烷基特别优选异丙基、仲丁基和环丙基甲基。
这类烷基可以是未取代的或也可任选地被一或多取代，其中取代 基可以相同或不同和在烷基的每个或多个期望的和可能的位置上连 接。就一或多卤素取代的烷基而言，优选用氟和/或氯原子取代。这类 基团是的实例是氟甲基、三氟甲基和五氟乙基。
“芳基”指含3-14、优选5-14个碳原子的芳烃系统，其也可以 进一步与饱和的、(部分)不饱和的或芳香的环系统稠合。“芳基”的 实例尤其为苯基、萘基和蒽基、以及茚满基、茚基或1，2，3，4-四氢萘 基；对于本发明而言特别优选苯基。这类芳基可以是未取代的或也可 任选地被一或多取代，其中取代基可以相同或不同和在芳基的每个或 多个期望的和可能的位置上连接。
“杂芳基”指5元、6元或7元环芳基，其包含至少1个、适当 时也包含2个、3个、4个或5个杂原子，优选氮、氧和/或硫，其中 杂原子相同或不同。N原子数优选为0-3，而氧和硫原子数为0和1。 术语“杂芳基”还包括其中杂环是双或多环系统中的部分的系统，杂 芳基可通过杂芳基中任何期望的和可能的环成员与通式(I)化合物进 行连接。“杂芳基”的实例尤其包括吡咯基、噻吩基、呋喃基、咪唑 基、噻唑基异噻唑基、_唑基、异_唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、 吡嗪基、吲哚基、喹啉基和异喹啉基。这类杂杂芳基可以是未取代的 或也可任选地被一或多取代，其中取代基可以相同或不同和在杂芳基 的每一个或多个期望的和可能的位置上连接。
“芳基烷基”或“杂芳烷基”指其中芳基或杂芳基经C1-C8-烷基 与通式(I)化合物连接的基团，其中烷基、芳基和杂芳基的含义定义如 上。优选的“芳基烷基”为苯基-C1-C4-烷基，优选苄基或苯乙基。
“环系”指3至14、优选5或6至14个环原子的一或多环体系， 其中环原子可以仅仅是碳原子。然而，环系也可以包含1、2、3、4 或5个杂原子，尤其是氮、氧和/或硫。环系可以是饱和的、单或多 不饱和的或完全或部分芳香的，在环系由至少环构成的情况下环可以 稠合连接或螺连接或其它连接。
如上对通式(I)的所述，本发明化合物由于它们具有至少一个不对 称中心，因而可以以其外消旋体的形式、以纯对映异构体和/或非对映 体的形式或以这些对映异构体和/或非对映体的混合物的形式存在。该 混合物可具有任何期望的立体异构体的混合比。
优选的通式(I)化合物是那些其中在被-NH-CX3-和-CX2-NH-取代 的碳原子上为R构型的化合物，即具有以下通式(I-a)的化合物：

特别优选的通式(I)化合物是那些在被-NH-CX3-和-CX2-NH-取代 的碳原子上为R构型、在被-CX3-NH-、-R8和-NR9R10取代的碳原子上 为S构型以及在被-NH-CX2-、-R3和-CX1-NR1R2取代的碳原子上同样 为S构型的化合物，即在这些立体中心上相应氨基酸为天然S构型的 化合物。这些化合物具有以下的通式(I-b)：

在可能的情况下，本发明化合物可以是互变异构体形式。
因此，例如，具有一个或多个不对称现象中心和以外消旋物或以 非对映体混合物的形式存在的本发明的通式(I)化合物可通过本来已 知的方法分离成它们的光学纯异构体，即对映异构体或非对映异构体。 本发明化合物或其结构单元(氨基酸)的分离可通过在手性或非手性相 上柱分离或通过从任选地光学活性的溶剂中重结晶或利用光学活性的 酸或碱或通过用光学活性的试剂例如光学活性的醇衍生化、随后消除 该基团来进行。
本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物，如果它们含足够碱性的基团 例如仲胺或叔胺，则可用无机和有机酸转化为盐。本发明的通式(I， Ia和Ib)化合物的可药用盐优选与盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺 酸、对甲苯磺酸、碳酸、甲酸、乙酸、磺基乙酸、三氟乙酸、草酸、 丙二酸、马来酸、琥珀酸、酒石酸、外消旋酸、苹果酸、双羟萘酸、 扁桃酸、富马酸、乳酸、枸橼酸、牛磺胆酸、谷氨酸或天冬氨酸形成。 所形成的盐尤其为盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐，磷酸盐、甲磺酸盐、 甲苯磺酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、甲酸盐、乙酸盐、磺基醋酸盐、 triflates、乙二酸盐、丙二酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、 苹果酸盐、双羟萘酸盐、扁桃酸盐、富马酸盐、乳酸盐、枸橼酸盐和 谷氨酸盐。此外由本发明化合物形成的盐的化学计量可以是整数或非 整数倍数的化学计量。
本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物，如果它们含足够酸性的基团 例如羧基、磺酸基、磷酸基或酚基，则可用无机和有机碱转化为其生 理学耐受的盐。适宜的无机碱的实例是氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化 钙，有机碱的实例是乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、环己胺、二苄基 乙二胺和赖氨酸。此外由本发明化合物形成的盐的化学计量可以是整 数或非整数倍数的化学计量。
本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物以其溶剂合物、尤其是水合物 的形式存在同样是可能的，例如其可通过从溶剂或从水溶液中结晶而 获得。此外一个、两个、三个或任何数目的溶剂或水分子与本发明化 合物结合得到溶剂合物和水合物是可能的。
众所周知化学物质形成以不同的有序态存在的固体，称为多晶型 (polymorphic forms)或变体(modifications)。多晶型物的各种 变体物的理特性可能相差很大。本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物可 以各种多晶型存在，此外某些变体可能是亚稳的。通式(I，Ia和Ib) 化合物的所有这些多晶型将被认为属于本发明。
本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物以任何需要的前药例如酯、碳 酸盐或磷酸盐的形式存在同样是可能的，在这些情况下实际生物活性 形式只有通过代谢释放。
众所周知化学物质在体内转化为代谢物，适当时其同样可以引起 期望的生物学效应-在一些情况下甚至为更显著的形式。
关于硫代酰胺(X1＝S)，例如已知(Casarett & Doull′s “Toxicology，the Basic Science of Poisons”，Chapter 6： Biotransformation of Xenobiotics，C.D.Klaassen Ed.， McGraw-Hill 2001；D.M.Clayton，Biochem.Soc.Trans.，1978， 6(1)，94-96)它们也可以代谢为硫代酰胺-S-氧化物。这类物质还可 以通过由相应的硫代酰胺通过用过氧化氢(H2O2)氧化合成而获得(J.R. Cashman等，J.Org.Chem.，1982，47(24)，4645-4650)。因此， 化合物68例如氧化成(R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰 基氨基]-3-甲基戊酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸 -((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰-丁基)-酰胺-S-氧化物，化合物76氧化 成(R)-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)-乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-8-三氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸-((S)-2-甲基-1-硫 代氨甲酰丁基)-酰胺-S-氧化物。
通式(I，Ia和Ib)相应的代谢物，尤其是X1＝-S+-O-的代谢物， 将被认为属于本发明。
在这一点上还应注意到术语“受体配体”或“配体”对于本发明 而言是用来指以任何方式与受体(本发明中受体为GPCR受体，优选 LHRH受体)结合并在该受体上引发激活、抑制和/或另外的想得到的效 果的每个化合物。因此术语“配体”包括激动剂、拮抗剂、部分激动 剂/拮抗剂及其它在受体上产生类似于激动剂、拮抗剂或部分激动剂/ 拮抗剂的效果的配体。本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物优选为LHRH 受体(GnRH受体)的拮抗剂。
对于本发明而言优选的式(I，Ia和Ib)化合物为那些化合物：其 中X1为S原子或S+-O-，优选S原子，且R8为烷基、芳基烷基或杂芳 烷基，其中这类基团任选地被最多3个取代基取代，所述取代基独立 地选自-Hal，-CN，-CO-O-R12，-CO-NR12R12′，-OH，-O-R13，-O-CO-R13， -O-SO2-OR12，-O-SO2-R12，-SO2-OR12，-SO-R12，-O-PO(OR12)(OR12′)， -O-PO(NR12R12′)2，-O-CO-O-R13，-O-CO-NR12R12′，-O-CS-NR12R12′， -S-R12，-NR12R12′，-NH-CO-R13，-NH-SO2-R12， -NH-CO-O-R13，-NH-CO-NHR12，-NH-C(NH)-NH2，其中R12、R12′和R13 具有如上所述的含义。
对于本发明而言更优选的式(I，Ia和Ib)化合物是那些化合物： 其中
R10为基团-R11，-CO-R11，-CO-OR11，-CO-NHR11， -C(NH)-NHR11，-SO2-R11，或-SO2NHR11，
R11为芳基烷基或杂芳烷基，其在芳基或杂芳基上被一个或多个 独立地选自Hal，-CN，-烷基，-CF3，-OCF3，-OH，-O-烷基 和-O-(CH2CH2-O)n-CH3的取代基取代，且
R8为烷基、芳基烷基或杂芳烷基，其任选地被最多3个取代基取 代，其中所述的取代基独立地选自-Hal，-CN，-CO-O-R12， -CO-NR12R12′，-OH，-O-R13，-O-CO-R13，-O-SO2-OR12，-SO2-OR12， -O-SO2-R12，-SO-R12，-O-PO(OR12)(OR12′)，-O-PO(NR12R12′)2， -O-CO-O-R13，-O-CO-NR12R12′，-O-CS-NR12R12′，-S-R12，-NR12R12′， -NH-CO-R13，-NH-SO2-R12，-NH-CO-O-R13，-NH-CO-NHR12， -NH-C(NH)-NH2，其中R12，R12′和R13具有如上所述的含义。
对于本发明而言更优选的式(I，Ia和Ib)化合物是那些化合物： 其中R8为-C1-C6-烷基-芳基或-C1-C6-烷基杂芳基，其中芳基或杂芳基 被一个至三个、优选被一个取代基取代，其中所述取代基独立地选自 -O-(CH2CH2-O)n-CH3，-O-CO-(CH2CH2-O)n-CH3，-O-SO2-OR12，-O-SO2-R12， -O-PO(OR12)(OR12′)，-O-PO(NR12R12′)2，-O-CO-OR13，-O-CO-NR12R12′ 和-O-CS-NR12R12′，其中R12、R12′和R13具有如上所述的含义。
在本发明优选的变体中，基团R4、R5、R6和R7中至少一个、优 选两个、优选R5和R7，不是氢原子。基团R5和R7尤其彼此独立地 选自-H，-Hal，-CN，-CF3，-O-烷基和-OCF3，且优选为-H，-Hal或-CF3。 特别优选的化合物是那些化合物：其中R4和R6各自为氢原子，R5为 -H或-Hal，且R7独立于R5，为-Hal或-CF3。
对于本发明而言更优选的式(I，Ia和Ib)化合物是其中X2和X3 各自为O的那些化合物。
在本发明优选的变体中，R3为C1-C6-烷基，优选为C1-C4-烷基。
对于本发明而言优选的化合物是其中R1，R2，R9以及若存在R12 和R12′，各自为氢原子的那些化合物。
更优选的通式(I，Ia和Ib)化合物是其中R13为苯基-C1-C4-烷基 或基团-(CH2CH2-O)n-CH3的那些化合物。
在优选的式(I，Ia和Ib)化合物中，R10的含义为-CO-R11、 -CO-OR11或-R11，其中R11具有如上所述的含义。
更优选的通式(I，Ia和Ib)化合物是那些化合物：其中R11为苯 基-C1-C4-烷基，优选苄基或苯乙基，其在苯基上任选地被一个至三个、 优选一个或两个独立地选自-Hal，-C1-C4-烷基，-CF3，-OCF3，-OH， -O-C1-C4-烷基和-O-(CH2CH2-O)n-CH3的取代基取代。
对于本发明而言特别感兴趣的通式(I，Ia和Ib)化合物是那些化 合物：其中
X1为O，S或S+-O-，
X2和X3各自为O，
R1和R2各自为氢原子，
R3为C1-C6-烷基，优选C1-C4-烷基，
R4和R6各自为氢原子，
R5为氢原子或Hal，
R7为Hal或-CF3，
R9为氢原子，
R10为基团-CO-R11或-CO-OR11或基团R11，
R11为苯基-C1-C4-烷基，优选苄基或苯乙基，其在苯基上任选地 被一个至三个、优选一个或两个独立地选自-Hal，-C1-C4-烷基，-CF3， -OCF3，-OH，-O-C1-C4-烷基和-O-(CH2CH2-O)n-CH3的取代基取代，且
R8为苯基-C1-C4-烷基，优选苄基或苯乙基，其在苯基上任选地被 选自-O-(CH2CH2-O)n-CH3，-O-CO-(CH2CH2-O)n-CH3和-O-PO(OR12)(OR12′)， -O-CO-OR13的取代基取代，或，
然而，其中至少
(i)X1为S，或
(ii)R11为苯基-C1-C4-烷基，优选苄基或苯乙基，其在苯基上任 选地被至少一个上述的取代基即独立地选自-Hal，-C1-C4-烷基， -CF3，-OCF3，-OH，-O-C1-C4-烷基和-O-(CH2CH2-O)n-CH3的取代基取 代。
R8也可为C1-C6-烷基，优选C1-C4-烷基或苯基-C1-C4-烷基，优选苄 基或苯乙基，该基团任选地被选自-OH、-O-R13和-NR12R12′的取代基 取代；
R12、R12′彼此独立地为H或C1-C4-烷基、苄基或苯乙基，优选H；
R13选自C1-C4-烷基、苯基-C1-C4-烷基和苯基、或基团 -(CH2CH2-O)n-CH3，优选为苄基或苯乙基，且
n为1-6、优选1-4的整数。
更优选的本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物是其中基团X1为硫原 子的那些化合物。
尤其，以下的通式(I)、或(I-a)或(I-b)化合物，将被认为是特别 优选的化合物：
化合物：其中X1为S或S+-O-，优选S，R3和R8各自为C1-C4-烷 基，R4和R6各自为氢原子，R5和R7各自为Hal，或者R5为氢原子 而R7为基团-CF3，R10为基团-CO-R11，R11为苄基或苯乙基，其中在 苯基上被一个或两个独立地选自-Hal，-OCF3和-OCH3的取代基取代。
化合物：其中X1为O，R3为C1-C4-烷基，R4和R6各自为氢原子， R5和R7各自为Hal，或者R5为氢原子而R7为基团-CF3，R10为基团 -CO-R11或-CO-OR11或基团R11，R11为苄基或苯乙基，其中在苯基上 被一个或两个Hal原子取代，R8为C1-C4-烷基、苄基或苯乙基，其中 苯基任选地被-OH取代。
化合物：其中X1为S或S+-O-，优选S，R3为C1-C4-烷基，R4和 R6各自为氢原子，R5和R7各自为Hal，R10为基团-CO-OR11，R11为 苄基或苯乙基，其中适当时在苯基上被一个或两个Hal原子取代，R8 为C1-C4-烷基、苄基或苯乙基，其中苯基任选地被-OH取代。
化合物：其中X1为O或S或S+-O-，优选O或S，R3为C1-C4-烷基， R4和R6各自为氢原子，R5和R7各自为Hal，或者R5为氢原子而R7 为基团-CF3，R10为基团-CO-R11或-CO-OR11，R11为苄基或苯乙基， 其中适当时在苯基上被一个或两个Hal原子取代，且R8为苄基或苯乙 基，其中在苯基上被-O-PO(OH)2基团取代。
最优选的通式(I)化合物为下列：
4-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丙基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丙基} 氨基甲酸酯(1)，
4-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丙基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(2)，
4-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(3)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基 丁基)酰胺(4)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(3-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基 丁基)酰胺(5)，
2-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(6)，
苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基 氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨 基甲酸酯(7)，
苄基4-{(S)-3-苯甲氧羰基氨基-3-[(R)-3-(S)-1-氨甲酰基-2- 甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基]丙基}苯基碳酸酯(8)，
苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-(4-膦酰氧 苯基)乙基]氨基甲酸酯(9)，
苄基[(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基 氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-羟苯基)丙 基]氨基甲酸酯(10)，
苄基[(S)-1-[(R)-3-((S)-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-膦酰氧 苯基)丙基]氨基甲酸酯(11)，
苄基[(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基 氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-膦酰氧苯基) 丙基]氨基甲酸酯(12)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫代氨甲 酰丁基)酰胺(13)，
(R)-6，8-二氯-3-[(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-4-(4-羟 苯基)丁酰基氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1- 硫代氨甲酰基-丁基)酰胺(14)，
单(4-{(S)-3-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁 基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-[2-(2-氟苯 基)乙酰基氨基]-丙基}苯基磷酸酯(15)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[3-(4-氟苯基)丙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基 丙基)酰胺(16)，
(S)-5-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丙基氨甲酰基)-6，8-二 氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-5-[3-(4-氟苯基)丙酰基 氨基]戊基铵三氟醋酸盐(17)，
(S)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[3-(2-羟苯基)丙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基 丁基)酰胺(18)，
苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基}-2-[4-(2-{2-[2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)苯基]乙 基}氨基甲酸酯(19)，
(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-{3-[2-(2-{2-[2-(2-甲氧乙氧基)乙氧 基]乙氧基}乙氧基)苯基]丙酰基氨基}-3-甲基戊酰基氨基)-2，3，4，9- 四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺(20)，
(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-甲氧乙氧基)乙氧 基]乙氧基}乙氧基)-苯基]乙酰基氨基}-3-甲基戊酰基氨 基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基) 酰胺(21)，
(R)-6，8-二氯-3-[(S)-2-[3-(2-氟苯基)丙酰基氨基]-4-(4-羟 苯基)丁酰基氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基 -2-甲基丁基)酰胺(22)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[3-(2-氟苯基)丙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基 丁基)酰胺(23)，
苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基 氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基]-3-[4-(2-{2-[2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)苯基]丙 基}氨基甲酸酯(24)，
苄基{(S)-1-[(R)-8-氯-6-氟-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁 基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(25)，
3-甲苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(26)，
2，6-二氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨 甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(27)，
3，5-二氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨 甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(28)，
3，5-二氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨 甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(29)，
3-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(30)，
2-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(31)，
3-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(32)，
3，5-二氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨 甲酰基)-8-氯-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基 丁基}氨基甲酸酯(33)，
3-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-8-氯-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(34)，
2-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-8-氯-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(35)，
3-氟苄基[(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-羟苯基) 丙基]氨基甲酸酯(37)，
2-氟苄基[(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-羟苯基) 丙基]氨基甲酸酯(38)，
2-(2-氟苯基)乙基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁 基氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲 基丁基}氨基甲酸酯(40)，
2-氟苄基{(S)-1-[(R)-8-氯-6-氟-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲 酰丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(41)，
3-氟苄基{(S)-1-[(R)-8-氯-6-氟-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲 酰丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(42)，
2-氟苄基[(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰 丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-羟苯基) 丙基]氨基甲酸酯(43)，
3-氟苄基[(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰 丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-羟苯基) 丙基]氨基甲酸酯(45)，
3-甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(47)，
4-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基) 氨基甲酸酯(48)，
2-甲苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(49)，
2，3-二甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基 氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基 丁基}氨基甲酸酯(50)，
2-甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(51)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙氨基]-3-甲基戊酰基 氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基) 酰胺(52)，
2-三氟甲苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲 酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(53)，
3-三氟甲苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲 酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(54)，
3-三氟甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨 甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(55)，
2-三氟甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨 甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(56)，
4-氟苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰 丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(57)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(4-氟苯基)乙氨基]-3-甲基戊酰基 氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基) 酰胺(58)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲 基戊酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2- 甲基丁基)酰胺(59)，
4-氟苄基{(S)-1-[(R)-8-氯-6-氟-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲 酰丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(60)，
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(3-氟苯基)乙氨基]-3-甲基戊酰基 氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基) 酰胺(61)，
(R)-8-氯-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫 代氨甲酰丁基)酰胺(62)，
(R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(4-氟苯基)乙氨基]-3-甲基戊酰 基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁 基)酰胺(63)，
4-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-8-氯-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(64)，
(R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(4-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基 戊酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫代氨 甲酰丁基)酰胺(65)，
(R)-8-氯-3-{(S)-2-[2-(2，4-二氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫 代氨甲酰丁基)酰胺(66)，
(R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(4-氟苯基)乙氨基]-3-甲基戊酰 基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰 丁基)酰胺(67)，
(R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基 戊酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫代氨 甲酰丁基)酰胺(68)，
(R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基 戊酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲 基丁基)酰胺(69)，
(R)-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-8-三氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-环丙基-1- 硫代氨甲酰乙基)酰胺(70)，
(R)-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-8-三氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-环丙基-1- 硫代氨甲酰乙基)酰胺(71)，
(R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基 戊酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-环丙基-1-硫代 氨甲酰乙基)酰胺(72)，
(R)-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-8-三氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫 代氨甲酰丁基)酰胺(73)，
(R)-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-8-三氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基 -2-甲基丁基)酰胺(74)，
(R)-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-8-三氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基 -2-甲基丁基)酰胺(75)，
(R)-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-8-三氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫 代氨甲酰丁基)酰胺(76)，
(R)-8-氯-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-环丙基-1- 硫代氨甲酰乙基)酰胺(77)。
而且非常特别优选上述化合物4、7、11、12、13、14、15、30、 31、34、37、45、48、52、58、59、60、61、62、63、64、65、66、 67、68、69、70、71、72、73、74、75和76。
如上定义的通式(I，Ia和Ib)的本发明的新四氢咔唑衍生物为 GPCR配体。因此，前述的本发明的化合物适合于治疗和预防由GPCR 介导的病理状态、和可受该受体的调节影响从而治疗的病理状态。本 发明化合物可特别用于抑制(即作为拮抗剂)LHRH受体或神经激肽族 的受体，特别是NK1和/或NK2受体，因而适合于例如治疗良性和恶性 肿瘤疾病，适合于治疗和预防恶心和呕吐，例如由于emetogenic化疗 引起的恶心和呕吐，适合于治疗疼痛、炎症和风湿病和关节炎病症， 适合于男性节育，适合于激素治疗，适合于激素代替治疗以及适合于 女性低生育或不孕。
在男性节育中，本发明化合物导致精子生成减少。优选与雄激素， 例如睾酮或睾酮衍生物，例如睾酮酯联合给药。例如在这种情况下睾 酮衍生物可通过注射例如肌内贮库(depot)注射给药。
本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物也可以用于雌性的激素治疗中， 例如用于治疗良性激素-依赖性的病症如子宫内膜异位症、子宫纤维 瘤、子宫肌瘤(子宫平滑肌瘤)、子宫内膜增生、痛经、以及功能障碍 性子宫出血(月经过多、子宫不规则出血)中，适当时与其它激素例如 雌激素或/和孕酮组合。特别优选的是本发明的LHRH受体拮抗剂和组 织选择性的部分雌激素激动剂如raloxifene_的组合。
本发明的化合物也可以用于激素代替治疗中，例如用于治疗热潮 红。
此外可使用本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物控制女性生育力， 例如通过切断控制刺激排卵(“COS＝受控的卵巢刺激”)的内源性激 素周期，和在辅助的繁殖技术如试管受精(“IVF”)范围内治疗不孕。
另一方面，本发明的通式(I，Ia和Ib)的新化合物也适合于女性 避孕。因此，本发明的LHRH受体拮抗剂可在女性周期的第1至15天 与雌激素一起给药，优选雌激素的剂量极低。在摄取周期的第16至 21天，将孕激素加入到雌激素和LHRH受体拮抗剂的组合中。LHRH受 体拮抗剂可在整个周期期间连续给药。用这种方法实现减少激素剂量 从而减少非生理激素水平的副作用是可能的。另外在患多囊卵巢综合 征和雄激素依赖性病症如痤疮、皮脂溢和多毛症的女性中取得有利的 效果也是可能的。与先前的给药方法相比改善的周期控制也是可能发 生的。
其它适应症是良性前列腺增生(BPH)、在化疗期间生殖腺的保护、 童年早期的发育障碍例如性早熟、HIV感染AIDS以及神经病学或神经 变性病症的治疗、ARC(AIDS相关复合症)、卡波西肉瘤、源于脑和/或 神经系统和/或脑膜的肿瘤(参见WO 99/01764)、痴呆和阿尔茨海默病。
最后，如上定义的本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物也可用于治 疗恶性激素-依赖性肿瘤疾病如绝经前的乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、 子宫癌、子宫颈癌和子宫内膜癌，因为它们能抑制内源性性甾体激素， 此外是也适合于治疗和预防恶心和呕吐，例如由emetogenic化疗引起 的恶心和呕吐，或用于治疗疼痛、炎症和风湿病和关节炎的病症。
如上定义的本发明通式(I，Ia和Ib)的新化合物作为GPCR配体、 尤其是LHRH受体拮抗剂或神经激肽族的受体拮抗剂，用于给药于哺乳 动物尤其是人以治疗前述的病症，以及为了兽医学目的例如用于家养 和生产的动物也用于野兽中是适宜的。
给药可以以已知的方式进行，例如口服或非口服，尤其是局部、 直肠、阴道内、鼻内给药或通过注射或植入给药。优选口服给药。
将本发明的通式(I，Ia和Ib)的新化合物变为可以给药适当时可 与可药用载体或稀释剂混合的形式。例如适宜的赋形剂和载体描述于 Ullman′s Encyclopedia of Technical Chemistry，Vol.4，(1953)， 1-39；Journal of Pharmaceutical Sciences，Vol.52(1963)，918 et seq.；H.v.Czetsch-Lindenwald，“Hilfsstoffefür Pharmazie and angrenzende Gebiete”；Pharm.Ind.2，1961，72 et seq.；Dr. H.P.Fiedler，“Lexikon der Hilfsstoffefür Pharmazie，Kosmetik and angrenzende Gebiete”，Cantor KG，Aulendorf in Württemberg， 1971。
口服给药可以固体形式如片剂、囊剂、胶囊、锭剂、颗粒或粉末， 也可以可饮用的溶液形式进行。如上定义的本发明的通式(I，Ia和Ib) 的新化合物为了口服给药可与已知的和通常使用的、生理学耐受的赋 形剂和载体结合，其中所述赋形剂和载体例如为阿拉伯胶、滑石粉、 淀粉、糖例如甘露醇、甲基纤维素、乳糖、明胶、表面活性剂、硬脂 酸镁、环糊精、水溶液或非水溶液载体、稀释剂、分散剂、乳化剂、 润滑剂、防腐剂和调味剂(例如必要的油)。本发明化合物也可分散于 微粒例如纳米颗粒组合物中。
非口服给药可例如通过静脉注射、皮下注射、肌肉注射无菌水溶 液或油溶液、混悬液或乳液、通过植入物或通过软膏、乳膏或栓剂进 行。适当时也可以缓释形式给药。植入物可包含惰性物质例如可生物 降解的聚合物或合成的硅树脂例如硅橡胶。阴道内给药是可能的，例 如通过阴道环给药。子宫内给药是可能的，例如通过隔膜 (Diaphragmen)或其它适宜的宫内避孕器给药。另外可提供经皮给药， 尤其通过适于该用途的制剂和/或适宜的工具例如贴剂给药。
如上述的说明，本发明的通式(I，Ia和Ib)的新化合物也可与其 它活性药物成分组合。为了联合治疗的目的可同时或分开将活性成分 给药到个体，尤其通过相同的途径(例如口服)或通过单独的途径(例如 口服和以注射形式)给药。它们可以等同的或不同的量以单位剂量存在 和给药。适当时也可使用特定的给药方案。也可用这种方法将多种本 发明的通式(I，Ia和Ib)的新化合物彼此组合。
剂量可根据适应症的类型、病症的严重程度、给药的方式、受治 疗对象的年龄、性别、体重和敏感性在较宽的范围内变化。确定该组 合的药物组合物的“药理学有效量”在技术人员的能力范围之内。给 药可以单一剂量或多个单独的剂量进行。
例如，适宜的单位剂量为每kg患者的体重0.001mg到100mg 的活性成分，即至少一种本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物和其它活 性成分(适当时)。
因此本发明的其它方面包括如上所述的药物组合物，其包含一种 或多种如上定义的本发明的通式(I，Ia和Ib)的新化合物，适当时包 含可药用载体和/或赋形剂。优选和特别优选的药物组合物是那些：其 包含作为优选或特别优选的上述本发明的通式(I，Ia和Ib)新化合物 中的至少一种，尤其是以上具体提及的1至77中的至少一种，在此处 非常特别优选化合物4、7、11、12、13、14、15、30、31、34、37、 45、48、52、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、 70、71、72、73、74、75和76。在本发明的药物组合物中，除如上定 义的通式(I，Ia和Ib)化合物中至少一种之外，还可存在以上已详述 的其它活性药物成分。
在本发明的药物组合物中，如上定义的本发明的新化合物(I)中的 至少一种以药理学有效量存在，优选以单位剂量例如前述的单位剂量 存在，特别和优选以使得口服给药可能的给药形式存在。
其它方面本发明还提供用作药物的如上定义的通式(I，Ia和Ib) 化合物。如以上已经说明的，通式(I，Ia和Ib)化合物起GPCR配体的 作用，尤其起LHRH受体拮抗剂的作用，因而特别适于作为药物使用。 优选地提供用作药物的本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物用于给药以 治疗或缓解前述的内科适应症或用于避孕。
用作药物的如上定义的本发明优选的通式(I，Ia和Ib)四氢咔唑 化合物依次是以上已经提及的作为优选的和特别优选的化合物，特别 是具体提及的优选的本发明的1-77化合物，(除非已包括在其中)实 施例中提到的本发明的化合物。
关于包含本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物的药物组合物，和关 于本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物作为药物的用途，可参考已经说 明的与本发明的通式(I，Ia和Ib)的新化合物本身的用途有关的、在 可能的应用和给药方面的内容。
另一方面，本发明还提供如上定义的本发明通式(I，Ia和Ib)中 的至少一种四氢咔唑化合物用于制备治疗GPCR介导的疾病的药物的 用途，其中GPCR受体优选是LHRH受体本发明化合物优选起LHRH受体 拮抗剂的作用。
因此，在其它方面，本发明还提供如上定义的本发明通式(I，Ia 和Ib)中的至少一种化合物或相应的药物组合物用于制备起LHRH受体 拮抗剂作用的药物的用途，优选用于治疗良性和恶性肿瘤疾病，用于 男性节育，用于激素治疗，用于激素代替治疗，用于在试管受精(IVF) 的范围内受控的卵巢刺激，用于治疗和/或控制女性低生育和不生育以 及用于女性避孕。在这方面激素治疗尤其包括子宫内膜异位症、子宫 平滑肌瘤、子宫纤维瘤和良性前列腺增生(BPH)的治疗。关于有关本发 明此方面的其它适应症和这些适应症的说明，可参考以上关于本发明 第一方面的说明，即本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物本身以及那里 给出的说明。
本发明化合物不仅适于治疗所述的病症，而且同样适于预防和缓 解(例如通过抑制症状)这些病症或疾病。
在其它方面本发明还提供本发明的化合物(I)用于制备治疗良性 和恶性肿瘤疾病的药物和用于激素治疗的用途。关于此用途本发明优 选和特别优选的化合物是一开始就已经提及的如上定义的作为本发明 通式(I，Ia和Ib)中本身优选或特别优选的化合物。非常特别优选的 化合物还是化合物1-77，其在上文具体提及。
本发明也提供制备用于治疗GPCR介导的病症的药物的方法，该方 法的特征包括使用本发明通式(I，Ia和Ib)中的至少一种化合物或使 用相应的药物组合物。以上给出的关于本发明优选和特别优选的化合 物和关于可通过使用本发明化合物制备的药物组合物治疗、预防或减 轻的特定的病症的说明，在本发明的此方面也将被引用。
此外，本发明提供男性节育或女性避孕的方法，其包括将对男性 节育或女性避孕有效量的本发明通式(I，Ia和Ib)中的至少一种化合 物，适当时与其它活性成分组合，给药于对象，优选哺乳动物特别优 选人。以上关于与本发明优选和特别优选的化合物有关的本发明的其 它方面以及与剂量、给药等有关的说明在此处同样适用。
在其它方面，本发明涉及治疗GPCR介导的病症的方法。该方法包 括将如上定义的本发明的至少一种化合物(I)，在这种治疗必要的情况 下，以药学有效量给药于哺乳动物尤其给药于人。如以上关于本发明 的新化合物(I)和本发明的药物组合物的已经作出的说明，根据个体病 例的具体需要确定药学有效量属于技术人员的专业知识。优选的给药 形式是口服给药。如以上已经说明的，本发明还提供本发明的一种或 多种化合物(I)与至少一种另外的活性成分组合的给药形式。所给出的 关于涉及优选和特别优选的化合物和可治疗、减轻或预防的具体病症 的本发明上述方面的说明也适用于本文中提及的治疗方法。在此方面 特别优选的化合物也是化合物1-77。
此外，本发明也涉及抑制患者体内GPCR、尤其LHRH受体或神经 激肽族的受体的方法，包括将药学有效量的如上定义的通式(I，Ia和 Ib)中的至少一种化合物，适当时与如上定义的另外的活性成分组合， 给药于需要这种治疗的患者(哺乳动物尤其是人)。本发明的通式(I， Ia和Ib)中的优选和特别优选的化合物同样与上述的关于本发明的另 一方面优选和特别优选的化合物相同，特别是化合物1-77。以上关于 可通过给予本发明的化合物、优选通过其LHRH受体拮抗效应来治疗的 病症的说明，也适用于本文中描述的本发明的治疗方法。
如上定义的本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物例如可用下列方法 制备：
首先，可通过制备以下画的四氢咔唑中心结构来合成本发明化合 物

其中该任选地被保护的四氢咔唑结构已包含取代基R4-R7，适当 时以前体或被保护的形式存在。
例如，该四氢咔唑中心结构可通过本来已知的费歇尔吲哚合成法 获得。为此，将适当取代的环己酮衍生物(适当时拥有保护基)与特 定的需要的苯肼衍生物(同样是被适当地取代且适当时拥有保护基) 缩合(例如Britten & Lockwood，J.Chem.Soc.Perkin Trans.I 1974，1824或Maki等，Chem.Pharm.Bull.1973，21，240中描述 的)。环己烷结构在4，4′位上被基团-COOH和-NH2取代或适当时被其 (被保护的)前体取代。苯肼结构适当时被基团R4-R7取地代。无市售 的苯肼衍生物可通过技术人员已知的方法来制备。适当时由环己酮衍 生物与苯肼衍生物缩合产生的位置异构物可通过色谱法例如HPLC分 离。
基团R10R9NCHR8CX3NH-和R1R2NCX1CHR3NHCX2-原则上可通过技术人员 已知的方法根据其性质以多种方法引入和修饰，例如在WO 03/051837 中通过实施例和概括性说明所指出的方法。
合成本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物的另一方法如下：
首先通过偶合三个适宜的氨基酸来制备基本的三肽结构，第一氨 基酸AA1包含侧链基团R3，第三氨基酸AA3包含侧链基团R8或R8的前 体，而“中间”氨基酸AA2为3-氨基-2，3，4，9-四氢-1-H-咔唑-3-羧酸 (缩写成Thc)。该基本的Thc结构可根据所需的本发明的最终化合物 相应地被基团R4-R7(适当时以其前体或被保护的形式)取代。肽的 偶合可通过技术人员已知的方法进行，例如在固相或液相中进行。然 后可进行取代模式的改变，如特定基团的“脱保护”。
以下流程图用于说明氨基酸的偶合例如在固相偶合：

其中R*为-CO-O-苄基(即Z)或任何保护基，例如Fmoc，其中R8* 为-C1-C6-烷基芳基或-C1-C6-烷基杂芳基，其中芳基或杂芳基被最多三 个、优选被一个OH基团取代，或者R8*还可以具有R3的含义-相应于 对于R8给出的定义。
下面详述用于固相和液相合成以及用于具体的实施例1-77的该 方法。
本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物的一般合成方法
本发明的式(I，Ia和Ib)化合物通过在溶液中或者完全或部分在 固相的常规合成法来合成。
方法1A LHRH肽模拟物的固相合成
实施例中详述的化合物的具体合成利用半自动的SP 650合成装置 (得自Labortec)在固相进行。标准程序如下面的表1所示：
表1：SP 650合成装置(得自Labortec)的程序
 步骤 功能 溶剂/试剂  时间，  以分钟为单位  重复  1 洗 DMF  2  2  2 消除 20％哌啶+1％DBU  5  3  3 洗 DMF  2  2  4 洗 2-丙醇  2  1  5 洗 DMF  2  2  6 洗 2-丙醇  2  1
  7   洗   DMF   2   2   8   停止   9   加成   Fmoc-AA+HOBt+DIC   10   略过(überspringen)   11   偶合   120-300   1   12   洗   DMF   2   1   13   洗   2-丙醇   2   1   14   洗   DMF   2   1   15   洗   2-丙醇   2   1   16   洗   DMF   2   1   17   洗   2-丙醇   2   1   18   终止
在这种情况下Fmoc保护基的消除用在DMF中的20％哌啶和1％DBU 进行5分钟。该步骤总共进行三次，每次5分钟。
使用DMF和2-丙醇作为洗涤液。
第一Fmoc-氨基酸的偶合用在DCM和DMF(v/v＝1∶1)中的HOBt 和DIC进行。
其它Fmoc-氨基酸的偶合在DIPEA的存在下用HATU和HOAt(0.5M 在DMF中的溶液)。
方法1Aa第一氨基酸AA1的偶合(Fmoc-AA1-树脂的合成)
按照合成装置程序预先处理1mmol的Fmoc-树脂[与氨甲基取代 的聚苯乙烯树脂(200-400目；0.55mmol/g)结合的Fmoc-2，4-二甲氧 -4′-(羧甲基氧)-二苯甲基胺]，消除Fmoc保护基，加入1mmol的 Fmoc-氨基酸AA1(Fmoc-NH-CHR3-COOH)、2mmol在DCM和DMF(v/v＝1∶1) 中的HOBt和3mmol的DIC，在室温下振摇3小时然后按照程序洗涤。
方法1Ab第二氨基酸AA2的偶合(Fmoc-AA2-AA1-树脂的合成)
按照程序预先处理1mmol的Fmoc-AA1-树脂，加入2mmol的Fmoc- 氨基酸AA2(Fmoc-Thc-OH)、2mmol的HATU、2mmol的HOAt(0.5M在 DMF中的溶液)和5mmol的DIPEA并在室温下振摇4-6小时。在反应 过程中检测pH并通过加DIPEA将pH调至8-9。偶合完毕，按照程序 进行洗涤步骤。
方法1Ac第三氨基酸AA3的偶合(Z-AA3-AA2-AA1-树脂的合成)
按照程序预先处理1mmol的Fmoc-AA2-AA1-树脂，加入2mmol的 Z-氨基酸Z-AA3(苄基-O-CO-NH-CHR8*-COOH)、2mmol的HATU、2mmol 的HOAt(0.5M在DMF中的溶液)和5mmol的DIPEA并在室温下振摇4-6 小时。在反应过程中检测pH并通过加DIPEA将pH调至8-9。偶合完 毕，按照程序进行洗涤步骤。
方法1Ad第三氨基酸AA3的偶合(Fmoc-AA3-AA2-AA1-树脂的合成)
按照程序预先处理1mmol的Fmoc-AA2-AA1-树脂，加入2mmol的 Fmoc-氨基酸AA3(Fmoc-NH-CHR8*-COOH)、2mmol的HATU、2mmol的 HOAt(0.5M在DMF中的溶液)和5mmol的DIPEA并在室温下振摇4-6 小时。在反应过程中检测pH并通过加DIPEA将pH调至8-9。偶合完 毕，按照程序进行洗涤步骤。
方法1Ae Fmoc-AA3-AA2-AA1-树脂的改性：引入末端Z残基(与Z-Cl 反应)
按照程序预先处理1mmol的Fmoc-AA3-AA2-AA1-树脂，将2mmol Z- 氯化物、4mmol的DIPEA和催化量的DMAP振摇3小时然后按照程序 进行洗涤步骤。
方法1Af末端残基R10的引入，其中R10为-CO-R11-与R11-COOH 反应
按照程序预先处理1mmol的Fmoc-AA3-AA2-AA1-树脂，将3mmol 的羧酸R11-COOH、3mmol的HOBt和4mmol的DIC振摇3小时然后 按照程序进行洗涤步骤。
方法1Ag末端残基R10的引入，其中R10为-CO-OR11，适当时将 R8*修饰为R8-与R-OSu反应
按照程序预先处理1mmol的Fmoc-AA3-AA2-AA1-树脂，将3mmol 的R-OSu、5mmol的DIPEA和催化量的DMAP振摇3小时然后按照程 序进行洗涤步骤。如果R8*有游离的OH基团，则金额将该OH基团转化 为-O-CO-O-R13，在这样情况下R11和R13为相同的基团。
方法1Ah末端基团R10的引入，其中R10为-R11-与R10-碘化物 (R10-I)反应
按照程序预先处理1mmol的Fmoc-AA3-AA2-AA1-树脂，将1mmol 的R10-I、3mmol的碳酸氢钠振摇3小时然后按照程序进行洗涤。
方法1Ba在hTyr的OH基团上引入磷酸残基，例如在侧链R8*中
用DCM洗涤1mmol的R10-AA3-AA2-AA1-树脂二次，将其悬浮于DCM， 加入2mmol的磷酸双(二甲酰胺)氯化物、2mmol的DMAP和3mmol 的DBU或DIPEA并在室温下振摇4-6小时，然后按照程序洗涤。
方法1Bb Fmoc-Tyr-(PO(OBzl)-OH)-OH的引入
按照程序预先处理1mmol的Fmoc-AA2-AA1-树脂，加入2mmol的 Fmoc-Tyr(PO(OBzl)-OH)-OH、2mmol的HATU、2mmol的HOAt(0.5M 在DMF中的溶液)和5mmol的DIPEA并在室温下振摇3小时。在反应 过程中检测pH并通过加DIPEA将pH调至8-9。偶合完毕，按照程序 进行洗涤步骤。
方法2硫代酰胺的固相合成
例如，该合成基于H.Takuta等J.Org.Chem.1989，54，4812 and Majer等Biochem & Biophys.Res.Commun.1988，150，1017。
通过方法1Aa进行第一次偶合。
用Lawesson氏试剂以下述方法进行羧酰胺至硫代酰胺的转化：将 1mmol的Fmoc-AA-树脂和2-4mmol的Lawesson氏试剂在20ml的 无水甲苯中于90-100℃的浴温搅拌7小时，抽吸滤出树脂并用DCM在 漏斗上洗涤5次和用热MeOH洗涤。
随后通过方法1Ab-g和1B进行第二和第三氨基酸的偶合。
方法3A从树脂上消除羧酰胺
在消除之前将肽-树脂以最高40℃的温度在真空中干燥。典型地， 每克肽使用10-15ml的消除溶液。
为此将1mmol的肽-树脂在0.5ml的水和15ml的TFA的混合物 中于40℃的浴温搅拌2小时。抽吸滤出树脂并用少量TFA洗涤，将所 得TFA溶液在隔膜泵(diaphragm pump)真空下浓缩。
将油状粗制品用制备型HPLC纯化-参见方法4。
方法3B从树脂上消除硫代酰胺
在消除之前将肽-树脂于最高40℃的温度在真空中干燥。一般每 克肽使用10-15ml的裂解溶液。
在硫代酰胺的消除中加入EDT作为清除剂(scavenger)是必要的。
将1mmol的肽-树脂在0.5ml的水/0.5ml的EDT/15ml的TFA 的混合物中于40-50℃的浴温搅拌2-3小时。抽吸滤出树脂并用少量 TFA洗涤，将所得TFA溶液在隔膜泵(diaphragm pump)真空下浓缩。 将粗制品用制备型HPLC纯化-参见方法4。
方法3C从树脂上消除羧酰胺同时水解磷酸双(二甲酰胺)残基
与方法3A类似。
为了完全水解，在2h的反应时间之后再加入1ml的水并在40 ℃继续搅拌60min。然后抽吸滤出树脂并用少量TFA洗涤，最后将TFA 溶液在隔膜泵(diaphragm pump)真空下浓缩。将粗制品用制备型HPLC 纯化-参见方法4。
方法3D从树脂上消除硫代酰胺同时水解磷酸双(二甲酰胺)残基 与方法3B类似。
为了完全水解，在2-3h的反应时间之后再加入1ml的水并在 40℃下继续搅拌60min。然后抽吸滤出树脂并用少量TFA洗涤，最后 将TFA溶液在隔膜泵(diaphragm pump)真空下浓缩。将粗制品用制 备型HPLC纯化-参见方法4。
方法4通过半制备型HPLC纯化粗制品
分析和半制备型HPLC系统得自Shimadzu；柱子250-50， LiChros pher_100，RP18(12μm)得自Merck；流速60ml/min。
洗脱剂：A＝970ml的水+30ml的ACN+1ml的TFA
B＝300ml的水+700ml的ACN+1ml的TFA
UV线检测器220nm。
所有的产物通过梯度洗脱分离。
将粗制品溶于洗脱剂B(对于低溶解度的产物加入DMF)并在柱子 上分批纯化(例如将500mg的粗制品溶解于15ml的B中，作为一份 分离)。在这种情况下的分离条件取决于肽序列和性质以及杂质的量， 在分析柱上预先用实验确定。
典型的梯度是：在30分钟内60％B-100％B。
如果粗制品是非对映体的混合物，则用这种方法将它们分离。
分离的级分通过分析型HPLC检测。在旋转蒸发器中除去ACN和 TFA，将剩余的高浓度水溶液冻干。
方法5苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲 酰丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基-氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯(7)的液相合成
方法5A叔丁基((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)氨基甲酸酯的合成 (Boc-Ile-NH2)
将10mmol的(S)-H-Ile-NH2盐酸盐与20mmol的碳酸钠水溶液 混合。在室温下将11mmol的Boc2O在二_烷中的溶液缓慢滴加至该 水溶液中，并将反应混合物在室温下再搅拌60分钟。然后抽吸滤出沉 淀出的该粗制品，将其悬浮于中水并通过滴加20％浓度的盐酸调至酸 性pH。将粗制品再次抽吸滤出，用水洗涤并在真空中经P4O10于50℃ 干燥。
产率85％，m.p.167(文献报道值166)
方法5B叔丁基((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基)-氨基甲酸酯 (Boc-Ile硫代酰胺)的合成
例如，该合成基于H.Takuta等J.Org.Chem1989，54，4812 and Majer等Biochem & Biophys.Res.Commun.1988，150，1017。
将10mmol的(S)-Boc-IIe-NH2悬浮悬浮于50ml的THF中，加 入6mmol的Lawesson氏试剂，并将混合物在室温下搅拌20h。该混 悬液变为透明溶液。最后将反应溶液在隔膜泵真空下浓缩。
粗制品用柱层析纯化(DCM+乙酸乙酯＝9∶1)
产率88.9％，m.p.131℃(文献报道值132℃)
方法5C(S)-2-氨基-3-甲基戊酰胺(H-Ile硫代酰胺)的合成
将10mmol的(S)-Boc-Ile硫代酰胺在40ml的DCM和10ml的 TFA中在室温下搅拌4h。最后将反应溶液在隔膜泵真空下浓缩，并将 所得残留物与50ml的水混合，用浓氨溶液调至pH 8，最后用乙酸乙 酯萃取5次。合并的有机萃取液用饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干 燥并过滤，然后将滤液在隔膜泵真空下浓缩。
产率87.5％(黄色固体)
方法5D(R/S)-3-((S)-2-苯甲氧羰基氨基-3-甲基戊酰基氨 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸 (Z-(S)-Ile-(R/S)-(6，8-Cl)-Thc-OH)的合成
将10mmol的(R/S)-H-(6，8-Cl)-Thc、12mmol的(S)-Z-Ile-OSu、 30mmol的DIPEA和一药勺尖的DMAP加入50ml的DMF中并在80℃的 浴温下搅拌4小时。然后反应混合物在隔膜泵真空下浓缩，并将残留 物与水混合，用稀盐酸酸化并用乙酸乙酯萃取。然后有机萃取液用饱 和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并过滤，然后将滤液在隔膜泵真空 下浓缩。
产量11.9g的非对映体混合物(1∶1混合物)
方法5E苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨 甲酰-丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基 丁基}氨基甲酸酯(7)((S)-Z-Ile-(R)-(6，8-Cl)-Thc-(S)-Ile硫代酰 胺)的合成
将3mmol的Z-Ile-(R/S)(6，8-Cl)-Thc-OH、3mmol的H-(S)-Ile 硫代酰胺、3mmol的HATU和15mmol的DIPEA在5ml的DMF中于最 高100℃的温度和最大150瓦的功率微波加热3分钟。将反应溶液用 洗脱剂B稀释并在制备型HPLC柱上分2份分离(参见方法4)。
非对映体1的产率＝19％的HPLC纯98.5％(化合物7)
非对映体2的产率＝17.7％的HPLC纯95％
方法6在溶液中C-末端取代的酰胺的示例性合成-
(S)-2-{[(R/S)-3-((S)-2-苯甲氧羰基氨基-3-甲基戊酰基氨 基)-6，8二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羰基]氨基}-3-甲基戊酸 ((S)-Z-Ile-(R/S)-(6，8-Cl)-Thc-(S)-Ile-OH)+R1-NH-R2
将1mmol的(S)-Z-Ile-(R/S)-(6，8-Cl)-Thc-(S)-Ile-OH(*) 悬浮于5ml的DMF中，加入1.1mmol的R1-NH-R2、1.2mmol的PyBOP 和3mmol的NMM，并将混合物在室温下搅拌16h。将反应混合物在隔 膜泵真空下浓缩并用制备型HPLC纯化(参见方法4)。在此处得到得到 产物是(S)-Z-Ile-(R/S)-(6，8-Cl)-Thc-(S)-Ile-NR1R2。
(*)(S)-Z-Ile-(R/S)-(6，8-Cl)-Thc-(S)-Ile-OH的合成可用2- 氯三苯甲基氯化物-树脂(1.37mmol/g-Alexis Biochemicals 120-002-0000)在固相进行。第一偶合在DCM中在DIPEA的存在下进行， 第二和第三偶合与方法1Ab+1Ac-1Ag类似。消除按照方法3A进行， 纯化按照方法4进行。
方法7 Lawesson氏试剂与R10-AA3-AA2-AA1-NH2反应，当AA2为Thc- 结构单元时含C-末端酰胺官能团的序列硫杂化的另一方法
将1mmol的R10-AA3-AA2-AA1-NH2溶于40ml的无水甲苯中，在 室温下加入1mmol的lawesson氏试剂，将混悬液在80℃的浴温下搅 拌3-4h，并将反应混合物在隔膜泵真空下浓缩。和方法4类似将残 留物用制备型HPLC分离。
方法8通过Mitsunobu反应制备烷基芳基醚
烷基芳基醚由相应的OH化合物与PPh3核仁DEAD加成 (Mitsunobu等，J.Am.Chem.Soc.1972，94，679)。
将本发明的制备一般模式再次总结如下，指明了合适的操作步骤 和方法：
a)首先将Fmoc-保护的AA1通过方法1Aa与树脂偶合

b)适当时在第二步中通过方法2转化为硫代酰胺

c)将由步骤a或b得到的产物，在消除保护基之后与带保护基的 氨基酸2、适当取代的Thc衍生物通过方法1Ab反应：

d)然后由步骤c得到的产物，在消除保护基之后，与第三个带保 护基的AA反应：

其中R*＝Z＝-CO-O-苄基(在方法1Ac中)或R*＝Fmoc(在方法 1Ad中)，R8*为-C1-C6-烷基-芳基或-C1-C6-烷基-杂芳基，其中芳基或 杂芳基被最多三个、优选被一个OH基团取代，或R8*也可按照对R8-给 出的定义具有与R3相同的含义。
e)在R*＝Fmoc的情况下，先将在步骤d中得到的产物脱保护然 后使未端游离氨基反应以引入基团R10：

根据R10的性质，使用不同的方法：
(i)对于R10＝-CO-R11采用方法1Af；与R11-COOH反应
(ii)对于R10＝-CO-OR11采用方法1Ag；与R11-OSu反应；在 这种情况下如果R8*含游离的OH基团，将此OH基团转化为-O-CO-O-R13 同样是可能的，此时R11和R13为相同的基团
(iii)对于R10＝-R11采用方法1Ah；与R10-碘化物(R10-I)反 应
f)在任选的步骤f中适当时也可将R8*转化为R8，例如通过以下 步骤：
(i)通过按照方法1Ba步骤中的OH基团的转化将磷酸基团引入 R8中；或
(ii)通过按照方法1Ae在步骤中的OH基团的转化将-CO-O-苄 基(Z)引入R8中；
g)然后将三肽通过方法3A、3B、3C或3D之一从树脂上清除，并 通过方法4纯化。
h)如果R8或R11的进一步修饰也是必要的，这类修饰可立刻进 行，例如按照方法8的步骤由相应的OH化合物引入烷基醚。
在实施例1-15和16-77中提到的本发明化合物通过如上定义的方 法1-8按照下面的详述来制备。本发明化合物的分析表征通过1H-NMR 光谱和/或质谱进行。
所用的化学品和溶剂购自普通的供应商(Acros，Avocado， Aldrich，Bachem，Fluka，Lancaster Maybridge Merck，Sigma， TCI等)或者通过技术人员已知的方法合成。
对于以下描述的示例性的实施方案，手性结构单元通常以对映体 纯的形式使用。就四氢咔唑前体而言，使用外消旋结构单元。最终产 物用半制备型HPLC纯化并以纯非对映体的形式表征。
本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物，特别是化合物1-77，采用 AutoNom2000软件(ISISTM/Draw 2.5；MDL)命名。
本发明将通过以下实施例详细说明，不过不只限于这些实施例。
使用的略语表：
e.g.      例如
DBU       1，8-二氮双环[5.4.0]十一碳-7-烯
HOBt      1-羟基苯并三唑
Fmoc      9-fluoroenyl甲氧羰基
Boc       叔丁氧羰基
Z         苄氧羰基
Z-Cl      苄氧羰基氯化物
Boc2O     二叔丁基碳酸二酯(dicarbonate)
Bzl       苄基
AA        氨基酸
EDT       1，2-乙二硫醇
DEAD      二乙基偶氮二羧化物
DIC       N，N′-二异丙基碳二亚胺
DCC       N，N′-二环己基碳二亚胺
HATU      N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三
          唑-1-基)脲六氟磷酸盐
HOAt      1-羟基-7-氮杂苯并三唑
PyBop     (苯并三唑-1-基氧)三吡咯啉鏻六氟磷酸盐
OSu       N-羟基琥珀酰亚胺基
DIPEA     二异丙基乙胺
DMAP      N，N′-二甲氨基吡啶
DBU       1，8-二氮双环[5.4.0]十一碳-7-烯
NMM               N-甲基吗啉
TFA               三氟乙酸
DCM               氯甲烷
DMF               N，N′-二甲基甲酰胺
DMA               N，N′-二甲基乙酰胺
ACN               乙腈
THF               四氢呋喃
Me                甲基
MeOH              甲醇
Lawesson氏试剂    2，4-双(4-甲氧苯基)-1，3-二硫
                  -2，4-diphosphetane 2，4-二硫化物
Thc               3-氨基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸
Ala               丙氨酸(基)
Val               缬氨酸(基)
Ile               异亮氨酸(基)
Leu               亮氨酸(基)
Gln               谷氨酰胺(基)
Asn               天门冬酰胺(基)
Tyr               酪氨酸(基)
HTyr              同型酪氨酸(基)
Arg               精氨酸(基)
Lys               赖氨酸(基)
RT                室温
m.p.              熔点
ml                毫升
min               分钟
h                 小时
ELISA             酶联免疫吸附测定
HEPES             N-(2-羟乙基)哌嗪-N′-2-乙磺酸
DMEM           Dulbecco氏改进的Eagle培养基
RIA            放射免疫测定
LHRH           促黄体素释放激素
LH             促黄体生成激素
NK1            神经激肽1
NK2            神经激肽2
实施例
I.本发明化合物的合成
实施例1：
4-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丙基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丙基} 氨基甲酸酯(1)
0.275g的1从3mmol的树脂、Fmoc-Val-OH(AA1和AA3)、 Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和4-氯苄基2，5-二氧杂吡咯啉基-1- 基碳酸酯开始通过一般方法1Aa、b、d、g、3A和4获得。
产量：0.275g(理论产率为14.44％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，500MHz)：
δ＝11.33(s，1H)；7.40-7.02(m，10H)；4.94(d，1H)；4.75 (d，1H)；4.15(dd，1H)；3.87(dd，1H)；3.02(d，1H)；2.87(d， 1H)；2.82-2.68(m，2H)；2.12(m，1H)；1.95(m，1H)；1.87(m， 1H)；0.88-0.72(m，12H)ppm
ESI-MS：实测值：664.1(M+H+)/计算值：663g/mol
实施例2：
4-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(2)
0.190g的2从2.5mmol的树脂、Fmoc-Val-OH(AA1)、 Fmoc-Ile-OH(AA3)、Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和4-氯苄基2，5- 二氧杂吡咯啉基-1-基碳酸酯开始通过一般方法1Aa、b、d、g、3A和 4获得。
产量：0.190g(理论产率为10.64％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，500MHz)：
δ＝11.33(s，1H)；7.38-7.03(m，9H)；4.94(d，1H)；4.7(d， 1H)；4.15(dd，1H)；3.87(dd，1H)；2.98(d，1H)；2.88(d，1H)； 2.78-2.55(m，3H)；2.1(m，1H)；1.95(m，1H)；1.62(m，1H)； 1.33(m，1H)；1.03(m，1H)；0.75(m，12H)ppm
ESI-MS：实测值：678.2(M+H+)/计算值：677g/mol
实施例3：
4-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(3)
0.155g的3从2.5mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1和AA3)、 Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和4-氯苄基2，5-二氧杂吡咯啉基-1- 基碳酸酯开始通过一般方法1Aa、b、d、g、3A和4获得。
产量：0.155g(理论产率为8.85％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，500MHz)：
δ＝11.3 5(s，1H，吲哚NH)；7.4-7.03(3m，4H，3H，3H)； 4.96，4.7(2d，2H，C5H6-C H2)；4.18(dd，1H)；3.89(dd，1H)； 2.98，2.88(2d，2H，CH2)；2.77，2.71，2.62，2.12(4m，4H， C H2-C H2)；1.82(m，1H)；1.64(m，1H)；1.45-1.3(m，2H)；1.05 (m，2H)；0.84(d，3H，CH3)；0.82(d，3H，CH3)；0.79(t，3H， CH3)；0.73(t，3H，CH3)ppm
ESI-MS：实测值：692.2(M+H+)/计算值：691g/mol
实施例4：
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基 丁基)酰胺(4)
0.995g的4获得从7.0mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1和从AA3)、 Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和2-氟苯基乙酸开始通过一般方法 1Aa、b、d、f、3A和4获得。
产量：0.995g(理论产率为19.64％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHZ)：
δ＝11.35(s，1H，吲哚NH)；8.12(s，1H)；7.82(d，1H)；7.40 (s，1H)；7.29-7.23(m，2H)；7.20-7.13(m，3H)；7.12-7.06(m， 3H)；4.12(m，2H)；3.47，3.21(2d，2H，CH2)；2.99，2.94(2d， 2H，CH2)；2.79，2.68(2m，2H，CH2)；2.59(m，1H)；2.12(m， 1H)；1.62(m，2H)；1.33(m，2H)；1.01(m，2H)；0.80-0.71(4m， 12H，4CH3)ppm
ESI-MS：实测值：660.3(M+H+)/计算值：659.251g/mol
实施例5：
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(3-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基 丁基)酰胺(5)
0.185g的5获得从3.0mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1和AA3)、 Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和3-氟苯基乙酸开始通过一般方法 1Aa、b、d、f、3A和4获得。
产量：0.185g(理论产率为11％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，500MHz)：
δ＝11.2(s，1H，吲哚NH)；8.17(d，1H，N H)；8.07(s，1H， NH)；7.36(s，1H)；7.35-7.22(m，2H)；7.12-7.0(m，6H)； 4.12-4.07(m，2H)；3.55，3.45(2d，2H，C6H5F-C H2)；3.4，3.0 (2d，2H，CH2，Thc)；2.85(m，1H)；2.75-2.68(m，1H)；2.35-2.28 (m，1H)；2.1-2.0(m，1H)；1.65(m，1H)；1.45(m，1H)；1.32(m， 1H)；1.15-1.0(m，2H)；0.82-0.7(m，7H)；0.5-0.4(d，t，6H， CH3)ppm.
ESI-MS：实测值：660.3(M+H+)/计算值：659g/mol
实施例6：
2-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基} 氨基甲酸酯(6)
0.255g的6从3.0mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1和AA3)、 Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和2-氯苄基2，5-二氧杂吡咯啉基-1- 基碳酸酯开始通过一般方法1Aa、b、d、g、3A和4获得。
产量：0.255g(理论产率为14.72％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，500MHz)：
δ＝11.35(s，1H，吲哚NH)；7.75(s，1H，NH)；7.4(d，1H， NH)；7.35-7.2(m，6H)；7.1-7.05(m，2H)；5.05，4.82(2d，2H， C5H6-C H2)；4.18(dd，1H)；3.9(dd，1H)；2.98，2.88(2d，2H，CH2)； 2.8，2.72，2.62，2.12(4m，4H，C H2-C H2)；1.75(m，1H)；1.62 (m，1H)；1.45-1.25(m，2H)；1.05(m，2H)；0.68(m，12H，CH3) ppm.
ESI-MS：实测值：692.2(M+H+)/计算值：691g/mol
实施例7：
苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基 氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基-2-甲基丁基}氨 基甲酸酯(7)
0.126g的7从5.0mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1)、Z-Ile-OH(AA3) 和Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和开始通过一般方法1Aa、2、1Ab、 c、3B和4获得。
产量：0.126g(理论产率为3.38％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.38(s，1H，吲哚NH)；9.71，9.32(2s，2H，CS-N H2)；7.73 (s，1H)；7.36(s，1H)；7.30-7.11(3m，8H)；4.96，4.69(2d， 2H，C5H6-C H2)；4.46(dd，1H)；3.89(dd，1H)；2.98，2.88(2d， 2H，CH2)；2.77，2.71，2.62，2.12(4m，4H，C H2-C H2)；1.77(m， 1H)；1.64(m，1H)；1.50(m，1H)；1.34(m，1H)；1.04(m，2H)； 0.84(d，3H，CH3)；0.82(d，3H，CH3)；0.79(t，3H，CH3)；0.73(t， 3H，CH3)ppm
ESI-MS：实测值：674.2(M+H+)/计算值：673g/mol
如上说明，化合物7还可通过方法5(A-E)在液相中合成。
实施例8：
苄基4-{(S)-3-苯甲氧羰基氨基-3-[(R)-3-(S)-1-氨甲酰基-2- 甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基]丙基}苯基碳酸酯(8)
0.125g的8从3.5mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1)、 Fmoc-hTyr-OH(AA3)、Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和苄基氯碳酸酯 开始通过一般方法1Aa、b、d、e、3A和4获得。
产量：0.125g(理论产率为3.92％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.41(s，1H，吲哚NH)；7.77(s，1H，NH)；7.54(d，1H)； 7.48-7.29(m，10H)；7.22-7.05(3m，9H)；5.25(s，2H，OCOOC H2-C6H5)； 4.96，4.68(2d，2H，C6H5-C H2-OCON)；4.18(dd，1H)；3.92(dt， 1H)；3.00，2.92(2d，2H，CH2)；2.74(m，2H)；2.60(m，2H)；2，46 (m，1H)；2.08(m，1H)；1.79-170(m，3H)；1.37(m，1H)；1.01(m， 1H)；0.83(d，3H，CH-C H3)；0.73(t，3H，CH2-C H3)ppm
ESI-MS：实测值：856.1(M+H+)/计算值：855g/mol
实施例9：
苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-(4-膦酰氧 苯基)乙基]氨基甲酸酯(9)
0.112g的9从1.3mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1)、Z-Tyr-OH(AA3) 和Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)开始通过一般方法1Aa、b、c、1Ba、 3C和4获得。
产量：0.112g(理论产率为9.98％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.39(s，1H，吲哚NH)；7.98(s，1H)；7.45(d，1H)；7.42 (s，1H)；7.37(s，1H)；7.32-7.28(m，3H)；7.17-7.12(m，6H)； 7.10(m，1H)；7.02(d，2H)；4.90，4.73(2d，2H，C6H5-C H2)；4.26 (m，1H)；4.19(m，1H)；2.94(m，2H)；2.83(m，1H)；2.73(m， 1H)；2.63(m，2H)；2.20(m，1H)；2.06(m，1H)；1.73(m，1H)； 1.41(m，1H)；1.05(m，1H)；0.84(d，3H，CH-C H3)；0.79(t，3H， CH2-C H3)ppm
ESI-MS：实测值：788.2(M+H+)/计算值：787g/mol
实施例10：
苄基[(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基 氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-羟苯基)丙 基]氨基甲酸酯(10)
0.45g的10从4.4mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1)、 Fmoc-hTyr-OH(AA3)、Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和苄基氯碳酸酯 开始通过一般方法1Aa、2、1Ab、d、e、3B和4获得。
产量：0.45g(理论产率为19.47％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.41(s，1H，吲哚NH)；9.71(s，1H，CS-N H-CH)；9.28， 9.12(2s，CS-N H2)；7.67(s，1H)；7.41(d，2H)；7.37(s，1H)； 7.32-7.28(m，4H)；7.17-7.15(m，3H)；6.83(d，2H)；6.61(d， 2H)；4.96，4.65(2d，2H，C6H5-C H2)；4.44(dd，1H)；3.89(dd， 1H)；3.02，2.88(2d，2H，CH2)；2.76(m，2H)；2.62(m，1H)；2.46 (m，1H)；2.35(m，1H)；2.09(m，1H)；1.79-1.74(m，3H)；1.48 (m，1H)；1.02(m，1H)；0.83(d，3H，CH-C H3)；0.74(t，3H，CH2-C H3) ppm
ESI-MS：实测值：738.1(M+H+)/计算值：737g/mol
实施例11：
苄基[(S)-1-[(R)-3-((S)-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-膦酰氧 苯基)丙基]氨基甲酸酯(11)
1.511g的11从10.0mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1)、 Z-Tyr-OH(AA3)和Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)开始通过一般方法 1Aa、b、c、1Ba、3C和4获得。
产量：1.511g(理论产率为18.37％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.39(s，1H，吲哚NH)；7.75(s，1H)；7.49(d，1H)；7.42 (s，1H)；7.35-7.30(m，4H)；7.21-7.16(m，3H)；7.14  (d，1H)； 7.11(s，1H)；7.02(m，4H)；4.96，4.69(2d，2H，C6H5-C H2)；4.18 (dd，1H)；3.92(dt，1H)；3.00，2.94(2d，2H，CH2)；2.75(m， 2H)；2.56(m，1H)；2.43(m，2H)；2.09(m，1H)；1.75(m，3H)； 1.38(m，1H)；1.05(m，1H)；0.83(d，3H，CH-C H3)；0.75(t，3H， CH2-C H3)ppm
ESI-MS：实测值：802.0(M+H+)/计算值：801g/mol
实施例12：
苄基[(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基 氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-膦酰氧苯基) 丙基]氨基甲酸酯(12)
0.079g的12从10.0mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1)、 Fmoc-hTyr-OH(AA3)、Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和苄基氯碳酸酯 开始通过一般方法1Aa、2、1Ab、d、e、1Ba、3D和4获得。
产量：0.079g(理论产率为0.96％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.41(s，1H，吲哚NH)；9.70，9.29(2s，2 H，CS-N H2)；7.73 (s，1H)；7.44(d，1H)；7.37(s，1H)；7.33-7.27(m，4H)；7.20-7.14 (m，3H)；7.07-7.03(m，4H)；4.96，4.66(2d，2H，C6H5-C H2)；4.44 (dd，1H)；3.92(dt，1H)；3.01，2.91(2d，2H，CH2)；2.74(m， 2H)；2.59(m，2H)；2.44(m，2H)；2.09(m，H)；1.79(m，2H)；1.48 (m，1H)；1.03(m，1H)；0.83(d，3H，CH-C H3)；0.75(t，3H，CH2-C H3) ppm
ESI-MS：实测值：818.1(M+H+)/计算值：817g/mol
实施例13：
(R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊 酰基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫代氨甲 酰丁基)酰胺(13)
0.437g的13获得从4.00mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1和AA3)、 Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和2-氟苯基乙酸开始通过一般方法 1Aa 2、1Ab、d、f、3B和4获得。
产量：0.437g(理论产率为15.61％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.37(s，1H，吲哚NH)；9.69，9.21(2s，2H，CS-N H2)；8.06 (d，1H)；7.82(s，1H)；7.37(s，1H)；7.29-7.23(m，2H)；7.17 (m，2H)；7.09(m，2H)；4.46(dd，1H)；4.15(dt，1H)；3.45， 3.18(2d，2H，CH2)；2.97，2.89(2d，2H，CH2)；2.77(m，1H)；2.68 (m，1H)；2.56(m，1H)；2.12(m，1H)；1.71-1.59(m，2H)；1.44 (m，1H)；1.35(m，1H)；1.02(m，2H)；0.81(d，3H，CH-C H3)；0.78-0.75 (m，6H，2CH3)；0.73(t，3H，CH2-C H3)ppm
ESI-MS：实测值：676.2(M+H+)/计算值：675g/mol
实施例14：
(R)-6，8-二氯-3-[(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-4-(4-羟 苯基)丁酰基氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基-1- 硫代氨甲酰丁基)酰胺(14)
0.632g的14从4.5mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1)、 Fmoc-hTyr-OH(AA3)、Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和2-氟苯基乙酸 开始通过一般方法1Aa、2、1Ab、d、f、3B和4获得。
产量：0.632g(理论产率为17.61％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.37(s，1H，吲哚NH)；9.67，9.14(2s，2H，CS-N H2)；9.13 (br.s，1H，0H)；8.29(d，1H)；7.84(s，1H)；7.38(s，1H)；7.31 (d，1H)；7.26(m，1H)；7.21-7.08(2m，4H)；6.79(d，2H)；6.60 (d，2H)；4.4(dd，1H)；4.13(d，1H)；3.45，3.22(2d，2H，CH2)； 2.99，2.96(2d，2H，CH2)；2.76-2.72(m，2H)；2.58(m，1H)；2.42 (m，1H)；2.33(m，1H)；2.09(m，1H)；1.75(m，2H)；1.65(m， 1H)；1.42(m，1H)；0.99(m，1H)；0.79(d，3H，CH2-C H3)；0.73(t， 3H，CH2-C H3)ppm
ESI-MS：实测值：740.2(M+H+)/计算值：739g/mol
实施例15：
单-(4-{(S)3-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁 基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-[2-(2-氟苯 基)乙酰基氨基]丙基}磷酸苯酯(15)
0.129g的15从3.3mmol的树脂、Fmoc-Ile-OH(AA1)、 Fmoc-hTyr-OH(AA3)、Fmoc-(6，8-二氯)-Thc-OH(AA2)和2-氟苯基乙酸 开始通过一般方法1Aa、2、1Ab、d、f、1Ba、3D和4获得。
产量：0.129g(理论产率为4.6％)
1H-NMR(DMSO-d6，300K，600MHz)：
δ＝11.38(s，1H，吲哚NH)；9.7，9.15(2s，2H，CS-N H2)；8.32 (d，1H)；7.9(s，1H)；7.38(s，1H)；7.33-7.0(m，11H)；4.42 (dd，1H)；4.17(d，1H)；3.47，3.22(2d，2H，CH2)；2.99，2.96 (2d，2H，CH2)；2.77-2.67(m，2H)；2.6-2.35(m，2H)；2.1(m， 1H)；1.8(m，2H)；1.65(m，1H)；1.43(m，1H)；0.99(m，1H)；0.79 (d，3H，CH2-C H3)；0.73(t，3H，CH2-C H3)ppm.
ESI-MS：实测值：820.0(M+H+)/计算值：819g/mol
关于其它示例性的实施方案的数据编在下表2中：
表2：示例性的实施方案，含合成顺序和MS数据
编 号 AUTONOM名称 合成 方法     ESI-MS     计算值     ESI-MS     实测值     (M+H+) 16 (R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[3-(4-氟苯 基)丙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨 基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸 ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丙基)酰胺 1Aa，b， d，f，3A， 4     659     660.3 17 (S)-5-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2- 甲基丙基氨甲酰基)-6，8-二氯 -2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基]-5-[3-(4-氟苯基)丙酰基氨基]戊 基铵三氟醋酸盐 1Aa，b， d，f，3A， 4     674     675.3 18 (S)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[3-(2-羟苯 基)丙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸 ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b， d，f，3A， 4     671     672.3 19 苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰 基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二氯 -2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基}-2-[4-(2-{2-[2-(2-甲氧乙氧基) 乙氧基]乙氧基}乙氧基)苯基]乙基}氨 基甲酸酯 1Aa，b， d，e，3A， 4，8，4     897     898.3 20 (R)-6，8-二氯-3-((S)-2-{3-[2-(2- {2-[2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基]乙氧 基}乙氧基)-苯基]丙酰基氨基}-3-甲 基-戊酰基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H- 咔唑-3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基 丁基)酰胺 1Aa，b， d，f，3A， 4，8，4     861     862.4 21 (R)-6，8-二氯-3-((S)-2-{2-[2-(2- {2-[2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基]乙氧 基}乙氧基)苯基]乙酰基氨基}-3-甲基 戊酰基氨基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑 -3-羧酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁 基)酰胺 1Aa，b， d，f，3A， 4，8，4     847     848.4 22 (R)-6，8-二氯-3-[(S)-2-[3-(2-氟苯 基)丙酰基氨基]-4-(4-羟苯基)丁酰基 氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧 酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b， d，f，3A， 4     737     738.3
  23   (R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[3-(2-氟苯   基)丙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨   基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b， d，f，3A， 4 673 674.4   24   苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯   -3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨   甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-   基氨甲酰基]-3-[4-(2-{2-[2-(2-甲   氧乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)苯   基]丙基}氨基甲酸酯 1Aa，2， 1Ab，d， g，3B，4， 8，4 928 928.2   25   苄基{(S)-1-[(R)-8-氯-6-氟-3-   ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲   酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基   氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 5(A-E) 657 658.3   26   3-甲苄基{(S)-1-[(R)-3-(S)-1-氨甲   酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二氟   -2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰   基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 671 672.2   27   2，6-二氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)1-   氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-   二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨   甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 693 694.3   28   3，5-二氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-   1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰   基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔   唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基   甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 693 694.4   29   3，5-二氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-   1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰   基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔   唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基   甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 725 726.2   30   3-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨   甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二   氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲   酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 675 676.4   31   2-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨   甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二   氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲   酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 675 676.4
  32   3-氯苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨   甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二   氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲   酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     691     694.3   33   3，5-二氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-   1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-8-   氯-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-   基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     677     678.3   34   3-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨   甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-8-氯   -6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基   氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     659     660.4   35   2-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨   甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-8-氯   -6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基   氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     659     660.4   36   4-[(S)-3-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基   -2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二氯   -2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰   基]-3-(2，6-二氟苄氧羰基氨基)丙   基]苯基2，6-二氟苄基碳酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     927     928.2   37   3-氟苄基[(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨   甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二   氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲   酰基]-3-(4-羟苯基)丙基]氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     739     740.4   38   2-氟苄基[(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨   甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二   氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲   酰基]-3-(4-羟苯基)丙基]氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     739     740.3   39   4-[(S)-3-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基   -2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二氯   -2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰   基]-3-(2-氟苄氧羰基氨基)丙基]苯   基2-氟苄基碳酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     891     892.4  40   2-(2-氟苯基)乙基{(S)-1-[(R)-3-   ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰   基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔   唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基})氨基   甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     689     690.3  41   2-氟苄基{(S)-1-[(R)-8-氯-6-氟-3-   ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲   酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基   氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，2，1Ab， d，g，3A，4     675     676.4
42 3-氟苄基{(S)-1-[(R)-8-氯-6-氟-3- ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲 酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基 氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，2，1Ab， d，g，3A，4 675 676.4 43 2-氟苄基[(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3- ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲 酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基 氨甲酰基]-3-(4-羟苯基)丙基]氨基甲 酸酯 1Aa，2，1Ab， d，g，3A，4 755 756.4 44 4-[(S)-3-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2- 甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲酰 基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨 甲酰基]-3-(2-氟苄氧羰基氨基)丙基] 苯基2-氟苄基碳酸酯 1Aa，2，1Ab， d，g，3A，4 907 908.3 45 3-氟苄基[(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3- ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲 酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基 氨甲酰基]-3-(4-羟苯基)丙基]氨基甲 酸酯 1Aa，2，1Ab， d，g，3A，4 755 756.3 46 4-[(S)-3-[(R)-6，8-二氯-3-((S)-2- 甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲酰 基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨 甲酰基]-3-(3-氟苄氧羰基氨基)丙基] 苯基3-氟苄基碳酸酯 1Aa，2，1Ab， d，g，3A，4 907 908.4 47 3-甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1- 氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8- 二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨 甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 687 688.3 48 4-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨 甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二 氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲 酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 675 676.4 49 2-甲苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨 甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二 氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲 酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 671 672.3 50 2，3-二甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3- ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔 唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基 甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4 717 718.3
51 2-甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1- 氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8- 二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨 甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     687     688.3 52 (R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯 基)乙氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸 ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b，d， h，3A，4     645     646.3 53 2-三氟甲苄基{(S)-1-[(R)-3- ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔 唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基 甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     725     726.4 54 3-三氟甲苄基 {(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨甲酰基-2- 甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二氯 -2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     725     726.4 55 3-三氟甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3- ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔 唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基 甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     741     742.3 56 2-三氟甲氧苄基{(S)-1-[(R)-3- ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔 唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基 甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     741     742.3 57 4-氟苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯-3- ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲 酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基 氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，2，1Ab， d，g，3A，4     691     692.3 58 (R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(4-氟苯 基)乙氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸 ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b，d， h，3A，4     645     647.1 59 (R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(2，6-二 氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨 基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸 ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b，d， f，3A，4     677     678.5
  60   4-氟苄基{(S)-1-[(R)-8-氯-6-氟   -3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨   甲酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-   基氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，2，1Ab， d，g，3A，4     675     676.4   61   (R)-6，8-二氯-3-{(S)-2-[2-(3-氟苯   基)乙氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b，d， h，3A，4     645     646.3   62   (R)-8-氯-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯   基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-   羧酸((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基)   酰胺 1Aa，2，1Ab， d，f，3A，4     677     678.4   63   (R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(4-氟   苯基)乙氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b，d， h，3A，4     629     630.4   64   4-氟苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨   甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-8-氯   -6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基   氨甲酰基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯 1Aa，b，d， g，3A，4     659     660.3   65   (R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(4-氟   苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基)酰胺 1Aa，2，1Ab， d，f，3A，4     659     660.3   66   (R)-8-氯-3-{(S)-2-[2-(2，4-二氟苯   基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-   羧酸((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基)   酰胺 1Aa，2，1Ab， d，f，3A，4     677     678.2   67   (R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(4-氟   苯基)乙氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基)酰胺 1Aa，b，d， h，2，3A，4     645     646.4   68   (R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(2-氟   苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基)酰胺 1Aa，2，1Ab， d，f，3A，4     659     660.4   69   (R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(2-氟   苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺 1Aa，b，d， f，3A，4     643     644.4
70   (R)-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基   氨基]-3-环丙基戊酰基氨基}-8-三氟   环丙基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧   酸((S)-2-环丙基-1-硫代氨甲酰乙基)   酰胺   1Aa，2，1Ab，   d，f，3A，4     673     674.2 71   (R)-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙   酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨基}-8-三   氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧   酸((S)-2-环丙基-1-硫代氨甲酰乙基)   酰胺   1Aa，2，1Ab，   d，f，3A，4     691     692.3 72   (R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(2-氟   苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰乙基)酰胺   1Aa，2，1Ab，   d，f，3A，4     657     658.2 73   (R)-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙   酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨基}-8-三   氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧   酸((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基)酰   胺   1Aa，2，1Ab，   d，f，3A，4     693     694.3 74   (R)-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙   酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨基}-8-三   氟甲基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧   酸((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺   1Aa，b，d，   f，3A，4     677     678.2 75   (R)-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基   氨基]-3-甲基戊酰基氨基}-8-三氟甲   基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-1-氨甲酰基-2-甲基丁基)酰胺   1Aa，b，d，   f，3A，4     659     660.4 76   (R)-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙酰基   氨基]-3-甲基戊酰基氨基}-8-三氟甲   基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸   ((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基)酰胺   1Aa，2，1Ab，   d，f，3A，4     675     676.4 77   (R)-8-氯-3-{(S)-2-[2-(2，6-二氟苯   基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰基氨   基}-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-   羧酸((S)-2-环丙基-1-硫代氨甲酰乙   基)酰胺   1Aa，2，1Ab，   d，f，3A，4     675     676.3
II.本发明化合物的LHRH拮抗效应的验证
II.1A LHRH受体-配体结合测定(膜制剂)
测定
用由大鼠脑下垂体细胞制得的膜制剂进行异源竞争试验，其中大 鼠脑下垂体细胞能自然强烈地表达LHRH受体。在这种情况下使用的配 体是浓度为0.05nM的[125I][D-Trp6]-LHRH。未作标记的[D-Trp6]-LHRH 以1μM的浓度使用，或试验物质以所需的浓度使用，用于竞争。在4 ℃下温育90分钟之后，通过闪烁测量结合的配体(Halmos等，Proc. Natl.Acad.Sci.USA，1996，93，2398)。
评价
所得结果为在竞争剂的存在下结合配体相对于对照物的特异性结 合比例的百分率比例(参见表3中所选择的化合物的结果)。EC50值通 过竞争曲线的非线性回归分析来计算。
表3：LHRH受体-配体结合测定的试验结果，所选择的物质的EC50 和Ki值
物质     EC50     (M) 7     6.9×10-9 48     8.0×10-9 66     7.2×10-10 67     6.9×10-9 68     1.0×10-9 75     5.9×10-10 76     2.7×10-10
图1-7显示的是所测量的[125I][D-Trp6]-LH-RH和选择的物质(7、 48、66、67、68、75和76)的LHRH受体-配体结合测定的竞争曲线图。
II.1B LHRH受体-配体结合测定(转染的LTK细胞)
材料：
125I-曲普瑞林[125I-(D)-Trp6-GnRH]购自Biotrend(科隆，德国)。 比活度各自为2.13Ci/mmol。
所有其它化学品购自商业的来源，以最高的纯度获得。
细胞培养：
将转染的LTK-细胞(ATCC No.CCL-1.3)在塑料组织培养盘(Nunc， Germany，245×245×20mm)上在含青霉素(100 I.U./ml)、链霉素(0.1 mg/ml)和谷氨酰胺(0.01mol/l)和10％胎牛血清(FCS；Invitrogen Life Technologies，Germany)的DMEM培养基中培养。
试验：
将80％汇合的细胞培养盘用50ml的磷酸缓冲盐水(PBS)洗两次然 后用0.01M EDTA溶液分离。通过在实验室离心机(Kendro，Germany) 中以200×g离心5分钟将细胞沉淀。将细胞沉淀重新悬浮于3ml的 结合介质(DMEM；10mM Hepes；0.5％BSA；0.1％NaN3；1g/l杆菌肽 (新鲜加入，储存100×)；0.1g/l SBTI(新鲜加入，储存1000×) 并通过在Neubauer细胞计数室中锥虫蓝(Trypan blue)染色来测定细 胞计数。将细胞悬液用结合介质调至浓度为5×105细胞/0.05ml。
竞争结合曲线的研究以双份进行。试验物质以10mM DMSO溶液使 用。将它们用结合介质稀释4倍至所使用的终浓度。25μl的该物质 的稀释液与25μl的示踪溶液(125I-曲普瑞林或125I-西曲瑞克)混合。 将该示踪剂浓度调至在100μl的最终反应体积中约50000cpm(以 Cobra II，γ计数器，PE Liefe Science，Germany)。
将200μl的硅酮/液状石蜡混合物(84％：16％)加入650μl锥形管 中(Roth，Germany)。在其上用滴管吸取50μl的细胞悬液，之后用滴 管吸取50μl的试验物质/示踪剂混合物。将管盖上并在培养箱中在垂 直旋转下于37℃温育60分钟。在温育后，将样品在离心机(Kendro Germany)中以900rpm离心随后在液N2中冲击冷冻(shock-frozen)。 截除细胞沉淀的顶端并转入配制的计数杯(Roth，Germany)中。将含剩 余的上清液的锥形管的其余部分同样转入计数杯中。在γ计数器中以 1分钟/样品进行测量。
在与未处理的细胞相比较计算特异性的结合之后、在减去非特异 性的结合(过量的未作标记的配体，1μM)之后通过GraphPad原形推理 系统(Prism)或者通过OMMM软件评价样品。
表4：LHRH受体-配体结合测定的试验结果，所选择的若干示例性 的物质的EC50值
实施例 编号 与r-LHRHR结 合EC50[μM] Autonom名称 1 0.2609 4-氯苄基{1-[3-(氨甲酰基-2-甲基丙基氨甲酰基)-6，8- 二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丙 基}氨基甲酸酯 2 0.2051 4-氯苄基{1-[3-(氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8- 二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯 3 0.0472 4-氯苄基{1-[3-(氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8- 二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯 4 0.0048 6，8-二氯-3-{2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰 基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸(1-氨甲酰基-2- 甲基丁基)酰胺 5 0.09835  6，8-二氯-3-{2-[2-(3-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰 基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸(1-氨甲酰基-2- 甲基丁基)酰胺 6 0.1037 2-氯苄基{1-[3-(1-氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基]-2-甲基丁基}氨基甲酸酯
实施例 编号 与r-LHRHR结 合EC50[μM] Autonom名称 7 0.0079 苄基{1-{6，8-二氯-3-[2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲酰 基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯 8 0.0453 苄基4-{3-苯甲氧羰基氨基-3-[3-(1-氨甲酰基-2-甲基 丁基氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基 氨甲酰基]丙基}苯基碳酸酯 10 0.0075 苄基[1-[6，8-二氯-3-(2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲酰 基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-羟苯 基)丙基]氨基甲酸酯 11 0.01725 苄基[1-[3-(氨甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰基)-6，8-二氯 -2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-膦酰氧苯 基)丙基]氨基甲酸酯 12 0.0392 苄基[1-[6，8-二氯-3-(2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲酰 基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4-膦酰 氧苯基)丙基]氨基甲酸酯 13 0.0024 6，8-二氯-3-{2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰 基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸(2-甲基-1-硫代 氨甲酰丁基)酰胺 14 0.00205 6，8-二氯-3-[2-[2-(2-氟苯基)乙酰基氨基]-4-(4-羟苯 基)丁酰基氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸(2-甲基 -1-硫代氨甲酰基-丁基)酰胺 16 0.62805 6，8-二氯-3-{2-[3-(4-氟苯基)丙酰基氨基]-3-甲基戊酰 基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸(1-氨甲酰基-2- 甲基丙基)酰胺 17 0.5252 5-[3-(1-氨甲酰基-2-甲基丙基氨甲酰基)-6，8-二氯 -2，3，4，9-四氢-1H咔唑-3-基氨甲酰基]-5-[3-(4-氟苯 基)丙酰基氨基]戊基铵三氟醋酸盐 22 0.02465 6，8-二氯-3-[2-[3-(2-氟苯基)丙酰基氨基]-4-(4-羟苯 基)丁酰基氨基]-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸(1-氨甲 酰基-2-甲基丁基)酰胺 23 0.0729 6，8-二氯-3-{2-[3-(2-氟苯基)丙酰基氨基]-3-甲基戊酰 基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-羧酸(1-氨甲酰基-2- 甲基丁基)酰胺 24 0.0135 苄基{1-[6，8-二氯-3-(2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲酰 基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰 基]-3-[4-(2-{2-[2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙 氧基)苯基]丙基}氨基甲酸酯 25 0.0042 苄基{1-[8-氯-6-氟-3-(2-甲基-1-硫代氨甲酰丁基氨甲 酰基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基丁 基}氨基甲酸酯
II.2对LHRH-诱导的体外大鼠脑下垂体细胞分泌LH的抑制
材料
用得自Amersham Pharmacia Biotech的大鼠促黄体生成激素(rLH) 酶免疫测定(EIA)系统ELISA(RPN 2562)测量细胞培养物上清液中的LH 浓度。所有使用的其它化学品购自商业的来源，以最高的纯度获得。
细胞培养
通过断头将雄性Wistar幼鼠(Harlan Winkelmann，Germany)处 死，并切掉脑下垂体然后在Hanks氏缓冲液(HBSS)中用0.3％BSA和 10mM HEPES(pH 7.4)处理。需要20只大鼠的脑下垂体进行一种试验。 从剩余的组织中通过在Hanks氏缓冲液中用10mM HEPES(pH 7.4)、 0.3％BSA、1mg/ml透明质酸酶(VIII型)、1mg/ml大豆胰蛋白酶抑 制剂10μg/ml DNAseI和1mg/ml木瓜蛋白酶于37℃温育30分钟来 分离脑下垂体前叶的细胞。用无菌Pasteur吸管(pipette)分散细胞， 随后通过离心使其沉淀。将细胞以胶原蛋白包被的48孔平皿(Becton Dickinson)中2.5×105细胞/孔的密度在含10％胎牛血清(FCS； Invitrogen Life Technologies，Germany)、10ml/l非必需氨基酸 和10ml/l Pen/Strep(青霉素/链霉素)的DMEM培养基(Invitrogen Life Technologies，Germany)中接种。
测定
在37℃、5％CO2和95％湿度下温育48小时之后更换培养基。培养 基以含LHRH(10nM)的培养基或不含LHRH的培养基和适宜浓度的试验 物质代替。再温育之后，收获细胞上清液并在-20℃下冷冻。通过ELISA 一式三份的测定按照厂家(Amersham Pharmacia Biotech)的说明测定 LH含量。
表5：所选择的物质对LHRH-刺激的大鼠脑下垂体细胞分泌LH的 抑制
    物质     浓度 LH(ng/ml)±SD     ％抑制     4     3.3×10-8M 79.3±5.7     67％     4     3.3×10-9M --     --     7     3.3×10-8M 79.9±15.0     83％     7     3.3×10-9M 194.0±13.2     43％     10     3.3×10-8M 118.7±11.6     39％     10     3.3×10-9M 198.8±4.2     0％
II.3阉割大鼠血浆中LH浓度抑制
材料
用得自Amersham Pharmacia Biotech的大鼠促黄体生成激素(rLH) 酶免疫测定(EIA)系统ELISA(RPN 2562)或LH RIA-AH R002大鼠；得 自Biocode-Hycel，Liége，Belgium的酶免疫测定系统测量细胞培养 物上清液中的LH浓度。所有使用的其它化学品购自商业的来源，以最 高的纯度获得。
动物
在试验开始前10天，将重190-220g的雄性Sprague Dawley大 鼠(Harlan Winkelmann，Germany)用乙醚麻醉并阉割然后插上硅树脂 导管用于持久采血。
测定
在试验开始时，在给予物质之前，采取血样并测定LH水平。然后 将物质以所需浓度口服给药。每组中使用的动物数为8。在预定的时 间，再采取血样。将血液收集在冰冻的肝素化试样管中，并在3000g 下离心10分钟得到血浆。在以ELISA或RIA测量LH浓度以前将血浆 样品在-20℃下储存。通过ELISA或RIA一式两份测定按照厂家 (Amersham Pharmacia Biotech；Biocode-Hycel)的说明测定LH浓度。
评价和统计
由于大鼠个体LH浓度因LH的生理脉冲式分泌而有很大的差异，用物 质处理之前的值以个体LH浓度的平均值表示且相当于100％值。对每 只个体动物的所有其它数据点以与处理之前的LH浓度相比较的相对 浓度来计算。
表6：用在Solutol HS15/1，2-丙二醇(3∶1)中的物质7以100mg/kg 的剂量处理后大鼠血浆中的相对LH浓度
时间 (h) 相对LH浓度(％) (与处理之前的浓度相比较 的平均值±SEM) -4 97.4±15.3 -2 110.8±12.2 0 91.8±19.1 +4 19.6±8.9 +6 10.1±3.2 +24 65.1±13.9 +48 110.6±33.0 +72 268.4±93.0
表7：用在Solutol HS15/1，2-丙二醇(3∶1)中的物质68以19 mg/kg的剂量处理后大鼠血浆中的相对LH浓度
时间 (h) 相对LH浓度(％) (与处理之前的浓度相比较 的平均值±SEM) -24 105.4±12.7 0 95.0±9.3 +4 17.4±3.3 +6 16.0±1.5 +8 12.9±1.0 +12 16.0±2.6 +24 65.7±10.8 +30 78.1±7.7
III.本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物在神经激肽族(NK1和NK2) 受体上的拮抗效应的验证
本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物的受体亲和性(IC50值)依据E. Heuillet等，J.Neurochem.，60：868-876(1993)和D.Aharony等 Mol.Pharmacol，44：356-363(1993)commercially by Cerep(2005 产品目录的Assay 826-1h on page 67 and Assay 826-2h on page 68) 中的描述测量。
  测定     物质     IC50(M)     Ki(M)     nH   NK1(h)   NK2(h)   NK1(h)   NK2(h)     68     68     76     76     1.4E-06     1.6E-06     1.9E-06     1.5E-06     6.4E-07     8.5E-07     8.4E-07     8.1E-07     2.0     3.8     2.3     2.3
图8-11显示的是在以进行的NK1和NK2受体-配体结合测定中测 量的竞争曲线图和所选择的物质(68和76)，对于NK1用[Sar9， Met(O2)11]-SP而对于NK2用[Nle10]-NKA(4-10)。
IV.本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物在水中的饱和溶解度的验 证
按照以下描述测定在水中的饱和溶解度：开始溶解物质，提高样 品的湿度，加入最大量的1％DMSO。用HPLC UV法检测含量。结果汇 总中下面的表8中。
表8：所选择的化合物的水溶性
化合物名称 化合物编号 在水中的饱和溶解度 [μg/ml] 苄基[1-[3-(1-氨甲酰基-2-甲基丁 基氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四 氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4- 膦酰氧苯基)丙基]氨基甲酸酯 11 39.9 苄基{1-{6，8-二氯-3-[2-甲基-1-硫 代氨甲酰丁基氨甲酰基)-2，3，4，9- 四氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲 基丁基}氨基甲酸酯 7 54.6 苄基[1-[3-(1-氨甲酰基-2-甲基-丁 基氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四 氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-(4- 膦酰氧苯基)乙基]氨基甲酸酯 9 150.6 苄基[1-[3-(1-氨甲酰基-2-甲基-丁 基氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四 氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲基 丁基]氨基甲酸酯 WO 03/051837 A2中的 实施例295 ＜0.05 苄基(1-{3-[氨甲酰环己基甲基)甲 氨酰]-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢-1H- 咔唑-3-基氨甲酰基}-2-甲基丁基) 氨基甲酸酯 WO 03/051837 中的 实施例300 A2 0.38 苄基[1-[3-(1-氨甲酰基-2-甲基-丁 基氨甲酰基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四 氢-1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4- 羟苯基)丙基]氨基甲酸酯 WO 03/051837 A2中的 实施例303 0.35
V.本发明的通式(I，Ia和Ib)化合物代谢稳定性的验证
按照以下的描述测定与肝微体(人、大鼠种)有关的代谢稳定性： 将物质以1或10μM的试验浓度与大鼠肝微体或人肝微体一起在加入 NADPH下于37℃温育45分钟。随后用HPLC MS/MS法测量起始化合物 相对于100％的未代谢量。结果汇总在下面的表9中。
表9：所选择的化合物与多种种类的肝微体有关的代谢稳定性
化合物名称 化合物编号 代谢稳定性 (大鼠) [1h，％回收 率] 代谢稳定性 (人) [1h，％回收 率] 苄基{(S)-1-[(R)-6，8-二氯 -3-((S)-2-甲基-1-硫代氨甲酰 丁基氨甲酰基)-2，3，4，9-四氢 -1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲 基丁基}氨基甲酸酯(1μM) 7 78％ 65％ 苄基[(S)-1-[(R)-3-((S)-氨甲 酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢 -1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-3-(4- 膦酰氧苯基)丙基]氨基甲酸酯 (1μM) 11 n.d. 77％ (R)-8-氯-6-氟-3-{(S)-2-[2-(2- 氟苯基)乙酰基氨基]-3-甲基戊酰 基氨基}-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑 -3-羧酸((S)-2-甲基-1-硫代氨甲 酰丁基)酰胺(10μM) 68 80％ 75％ (R)-3-{(S)-2-[2-(2-氟苯基)乙 酰基氨基]-3甲基戊酰基氨 基}-8-三氟甲基-2，3，4，9-四氢 -1H-咔唑-3-羧酸((S)-2-甲基 -1-硫代氨甲酰丁基)酰胺(10 μM) 76 69％ 84％ 苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨 甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-6，8-二氯-2，3，4，9-四氢 -1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲 基丁基]氨基甲酸酯(1μM) WO 03/051837 A2 中的 实施例295 0％ 0％ 苄基{(S)-1-[(R)-3-((S)-1-氨 甲酰基-2-甲基丁基氨甲酰 基)-8-甲氧基-2，3，4，9-四氢 -1H-咔唑-3-基氨甲酰基]-2-甲 基丁基]氨基甲酸酯(1μM) WO 03/051837 A2 中的 实施例294 5％ 0％