本发明涉及嘧啶衍生物，或其药学上可接受的盐或其体内可水 解的酯，它们具有细胞周期抑制活性，因此其抗细胞增殖(如抗癌)活 性是有用的，因而可用于治疗人或动物体的方法中。本发明还涉及 制备所述嘧啶衍生物的方法、含有所述嘧啶衍生物的药物组合物以 及所述嘧啶衍生物在制备用于在温血动物(如人)中产生抗细胞增殖作 用的药物中的用途。

一族称作细胞周期蛋白的胞内蛋白在细胞周期中起着重要的作 用。细胞周期蛋白的合成和降解受到严格控制，而使它们的表达水 平在细胞周期中波动。细胞周期蛋白结合到依赖细胞周期蛋白的丝 氨酸/苏氨酸激酶(CDKs)上，并且这种结合对于在细胞中的CDK(例 如CDK1、CDK2、CDK4和/或CDK6)活性是必需的。尽管还很少了 解这些因子各自如何结合以调节CDK活性的确切细节，然而这两者 之间的平衡决定细胞是否将通过细胞周期进化。

最新的癌基因和肿瘤抑制基因研究已确定对进入细胞周期的调 节是肿瘤有丝分裂发生的关键控制点。此外，CDKs似乎是在多种癌 基因传递信号途径的下游。因细胞周期蛋白的正调节和/或内源性抑 制剂的缺失而失去对CDK活性的调节似乎是有丝分裂发生的信号传 递途径和肿瘤细胞增殖之间的重要的关键。

因此，已经认识到细胞周期激酶的抑制剂，特别是CDK2、CDK4 和/或CDK6(分别在S-期、Gl-S和Gl-S期运作)的抑制剂，应该具有 作为细胞增殖(例如哺乳动物癌细胞生长)的选择性抑制剂的价值。

本发明基于如下发现：某些嘧啶化合物具有惊人地抑制对 CDK2、CDK4和CDK6显示出有选择性的细胞周期激酶的作用，因 此具有抗细胞增殖的特性。期望这些特性具有治疗与异常细胞周期 和细胞增殖相关的疾病的价值，所述疾病例如癌症(实体肿瘤和白血 病)、成纤维细胞增殖和分化紊乱、牛皮癣，类风湿性关节炎，Kaposi 氏肉瘤、血管瘤，急性和慢性肾病、粉瘤、动脉粥样硬化，动脉再狭 窄、自身免疫疾病、急性和慢性炎症、骨疾病和视网膜血管增殖的 眼疾病。

因此，本发明提供了式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐或 其体内可水解的酯：

其中：

A环为式(IA)或(IB)：

其中X1、X2、X3和X4中的一个或多个为氮，而其余的为CR5， 其中R5的值可相同或不同；

R1为卤基、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、 羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔 基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、 C1-6烷酰基氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰 基、C1-6烷基S(O)a，其中a为0-2，N-(C1-6烷基)氨磺酰基或N，N(C1-6烷 基)2氨磺酰基；其中R1可任选在碳上被一个或多个R6取代；

R2和R5彼此独立选自氢、卤基、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、 三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、 C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6烷酰氧基、N-(C1-6 烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷酰基氨基、N-(C1-6烷基)氨基 甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a为0-2，C1-6 烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基、苯基、 杂环基、苯硫基或(杂环基)硫代；其中R2或R5中的任一个可任选在碳 上被一个或多个R7取代；其中如果所述杂环含有-NH-部分，则该氮 原子可任选被选自R8的基团取代；

n为0-2，其中R1可相同或不同；

R3为卤基、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯 基、氨磺酰基C2-6链烯基或C2-6炔基；

p为0-4；其中R3可相同或不同；

R4为A-E-基团；其中

A选自C1-6烷基、苯基、杂环基、C3-8环烷基、苯基C1-6烷基、(杂 环基)C1-6烷基或C3-8环烷基C1-6烷基；其中A可任选在碳上被一个或多 个R9取代；其中如果所述杂环含有-NH-部分，则该氮原子可任选被 选自R10的基团取代；

E为直接的键或-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-N(Ra)C(O)-、 -C(O)N(Ra)-、-N(Ra)-、-S(O)a-、-SO2N(Ra)-或-N(Ra)SO2-；其中Ra为 氢或任选被一个或多个R11取代的C1-6烷基，a为0-2；

R9独立选自氧代基、卤基、硝基、氰基、羟基、三氟甲基、三 氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C1-6烷基、 C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6烷酰氧基、N-(C1-6 烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷酰基氨基、N-(C1-6烷基)氨基 甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基、C1-6烷基S(O)a，其中a为0-2，C1-6 烷氧基羰基、C1-6烷氧基羰基氨基、苄氧基羰基氨基、N-(C1-6烷基)氨 磺酰基和N，N-(C1-6烷基)2氨磺酰基；其中R9可任选在碳上被一个或多 个R12取代；

q是0-2；其中R4可以相同或不同；并且其中p+q≤5；

R6、R7、R11和R12独立选自卤基、硝基、氰基、羟基、三氟甲氧 基、三氟甲基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、甲基、 乙基、甲氧基、乙氧基、乙酰基、乙酰氧基、甲氨基、乙氨基、二 甲氨基、二乙氨基、N-甲基-N-乙氨基、乙酰氨基、N-甲基氨基甲酰 基、N-乙基氨基甲酰基、N，N-二甲基氨基甲酰基、N，N二乙基氨基甲 酰基、N-甲基-N-乙基氨基甲酰基、甲硫基、乙硫基、甲基亚磺酰基、 乙基亚磺酰基、甲磺酰基、乙磺酰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、N- 甲基氨磺酰基、N-乙基氨磺酰基、N，N-二甲基氨磺酰基、N，N-二乙基 氨磺酰基或N-甲基-N-乙基氨磺酰基；和

R8和R10独立选自C1-4烷基、C1-4烷酰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4 烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-4烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-4烷基) 氨基甲酰基、苄基、苄氧基羰基、苯甲酰基和苯基磺酰基。

在本发明的另一方面，提供如上定义的式(I)化合物，但是其中 A选自C1-6烷基、苯基、杂环基、C3-8环烷基、苯基C1-6烷基、(杂环 基)C1-6烷基或C3-8环烷基C1-6烷基；其中A可任选在碳上被一个或多 个R9取代；其中如果所述杂环含有-NH-部分，则该氮原子可任选被 选自R10的基团取代。

本发明另一方面提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其 体内可水解的酯在制备用于在温血动物中产生细胞周期抑制的药物 中的用途。本发明再一方面中，所述温血动物为人。

本发明另一方面提供一种用于在温血动物中产生细胞周期抑制 的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接 受的盐或其体内可水解的酯，以及药学上可接受的稀释剂或载体。 在本发明的再一方面中，所述温血动物为人。

本发明另一方面提供式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐或 其体内可水解的酯在制备用于治疗癌症的药物中的用途。

本发明另一方面提供式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐或 其体内可水解的酯在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途：

(i)白血病、乳腺、肺、结肠、直肠、胃、前列腺、膀胱、胰腺 和卵巢的癌症；

(ii)淋巴的恶性肿瘤和在肝、肾中的实体瘤；

(iii)外阴和皮肤的肿瘤。

本发明另一方面提供式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐或 其体内可水解的酯在制备用于治疗纤维增生和分化紊乱、牛皮癣、 类风湿性关节炎、Kaposi氏肉瘤、血管瘤、急性和慢性肾病、粉瘤、 动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫性疾病、急性和慢性炎症、 骨疾病和伴有视网膜血管增生的眼疾病的药物中的用途。

在本说明书中，术语“烷基”包括直链和支链烷基，但当提到 单个烷基，如“丙基”时，则仅是专指其直链构型。例如，“C1-6烷 基”包括C1-4烷基、C1-3烷基、丙基、异丙基和叔丁基。但是，当提 到单个烷基，如‘丙基’时，则仅是专指其直链构型，而当提到单 个支链烷基，如‘异丙基’时，则仅是专指其支链构型。同样的规 定适用于其它基团，例如“苯基C1-6烷基”包括苯基C1-4烷基、苄基、 1-苯基乙基和2-苯基乙基。术语“卤基”包括氟基、氯基、溴基和碘 基。

当任选的取代基选自“一种或多种”基团时，应理解该定义包 括所有选自指定基团中的一种的取代基或所有选自所指定基团中的 两种或多种的取代基。

“杂环基”是饱和、部分饱和或不饱和的、含有4-12个原子的 单或双环，其中至少一个原子选自氮、硫或氧，所述杂环可为(除非 另有声明)碳或氮连接的，其中-CH2-基团可任选被-C(O)-置换，并且 环上的硫原子可任选被氧化形成S-氧化物。术语“杂环基”合适的 例子有吗啉代、哌啶基、吡啶基、吡喃基、吡咯基、异噻唑基、吲 哚基、喹啉基、噻吩基、1，3-苯并二氧杂环戊烯基、噻二唑基、哌嗪 基、噻唑烷基、吡咯烷基、硫代吗啉代、吡咯啉基、高哌嗪基、3，5- 二氧杂哌啶基、四氢吡喃基、咪唑基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、 异唑基、4-吡啶酮、1-异喹诺酮、2-吡咯烷酮和4-噻唑烷酮。术语 “杂环基”的其它合适的例子有吗啉代、哌啶基、吡啶基、吡喃基、 吡咯基、吡唑基、异噻唑基、吲哚基、喹啉基、噻吩基、1，3-苯并二 氧杂环戊烯基、噻二唑基、哌嗪基、噻唑烷基、吡咯烷基、硫代吗 啉代、吡咯啉基、高哌嗪基、3，5-二氧杂哌啶基、四氢吡喃基、咪唑 基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、异唑基、4-吡啶酮、1-异喹诺酮、 2-吡咯烷酮和4-噻唑烷酮，特别是吗啉代、吡唑基和吡咯烷基。优选 “杂环基”为饱和、部分饱和或不饱和的、含有5或6个原子的单 或双环，其中至少一个原子选自氮、硫或氧，所述杂环基可为(除非 另有声明)碳或氮连接的，-CH2-基团可任选被-C(O)-置换，并且环上 的硫原子可任选被氧化形成S-氧化物。

“C1-6烷酰氧基”的例子为乙酰氧基。“C1-6烷氧基羰基”的例 子包括甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丁氧基羰基和叔丁氧基羰基。 “C1-6烷氧基”的例子包括甲氧基、乙氧基和丙氧基。“C1-6烷酰氨 基”的例子包括甲酰胺基、乙酰胺基和丙酰氨基。“C1-6烷基S(O)a， 其中a为0-2”的例子包括甲硫基、乙硫基、甲基亚硫酰基、乙基亚 硫酰基、甲磺酰基和乙磺酰基。“C1-6烷酰基”的例子包括丙酰基和 乙酰基。“N-(C1-6烷基)氨基”的例子包括甲氨基和乙氨基。“N，N-(C1-6 烷基)2氨基”的例子包括二-N-甲氨基、二-(N-乙基)氨基和N-乙基-N- 甲氨基。“C2-6链烯基”的例子有乙烯基、烯丙基和1-丙烯基。“C2-6 炔基”的例子有乙炔基、1-丙炔基和2-丙炔基。“N-(C1-6烷基)氨磺 酰基”的例子有N-(甲基)氨磺酰基和N-(乙基)氨磺酰基。“N-(C1-6烷 基)2氨磺酰基”的例子有N，N-(二甲基)氨磺酰基和N-(甲基)-N-(乙基) 氨磺酰基。“N-(C1-6烷基)氨基甲酰基”的例子有甲氨基羰基和乙氨 基羰基。“N，N-(C1-6烷基)2氨基甲酰基”的例子有二甲氨基羰基和甲 基乙基氨基羰基。“C3-8环烷基”的例子有环丙基、环丁基、环丙基 和环己基。“(杂环基)C1-6烷基”的例子包括吡啶基甲基、3-吗啉代 丙基和2-嘧啶-2-基乙基。“(杂环基)硫代”的实例包括吡啶基硫代、 3-吗啉子基硫代(morpholinothio)和2-嘧啶-2-基硫代。“C3-8环烷基C1-6 烷基”的例子有环丙基乙基、环丁基甲基、2-环丙基丙基和环己基乙 基。“苯基C1-6烷基”的实例为苯乙基、苄基和2-苯丙基。

本发明化合物的适合的药学上可接受盐为如具有足够碱性的本 发明化合物的酸加成盐，例如与如无机或有机酸的酸加成盐，其中 酸的例子有如氢氯酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、柠檬酸或 马来酸。另外，具有足够酸性的本发明的化合物的适合的药学上可 接受盐是碱金属盐(例如钠或钾盐)，碱土金属盐(例如钙或镁盐)，铵 盐或与能提供生理学上可接受的阳离子的有机碱所成的盐，例如与 甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、吗啉或三-(2-羟乙基)胺形成的盐。

含有羧基或羟基的式(I)化合物的体内可水解的酯是例如药学上 可接受的酯，该酯在人或动物体内被水解生成母体酸或醇。羧基的 适合的药学上可接受的酯包括C1-6烷氧基甲酯，例如甲氧基甲基酯； C1-6烷酰氧基甲酯，例如新戊酰氧基甲酯，2-苯并[c]呋喃酮基酯；C3-8 环烷氧基羰基氧基C1-6烷基酯，例如1-环己基羰基氧基乙酯；1，3- 二氧戊烯-2-酮基(1，3-dioxolen-2-onyl)甲酯，例如5-甲基-1，3-二氧戊烯 -2-酮基甲酯；和C1-6烷氧基羰基氧基乙酯，例如1-甲氧基羰基氧基 乙酯；这些酯可以在本发明化合物中的任何羧基上形成。

含有羟基的式(I)化合物的体内可水解的酯包括无机酯(例如磷酸 酯)、α-酰氧基烷基醚和有关的化合物，所述酯在体内水解而得到母 体羟基。α-酰氧基烷基醚的例子包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙 酰氧基-甲氧基。与羟基形成体内可水解酯的基团选自烷酰基、苯甲 酰基、苯乙酰基和取代的苯甲酰基和苯乙酰基、烷氧基羰基(得到碳 酸烷基酯)、二烷基氨基甲酰基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲 酰基(得到氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。在苯甲酰 基上的取代基的例子包括吗啉代和哌嗪基，它们通过亚甲基从环上 的氮原子连接到苯甲酰基环的3-或4-位上。

一些式(I)的化合物可具有手性中心和/或几何异构中心(E-和Z-异 构体)，应理解本发明包括所有这些具有CDK抑制活性的旋光异构 体、非对映异构体和几何异构体。

本发明涉及具有CDK抑制活性的式(I)的化合物的任何和所有的 互变异构体形式。特别是有专业知识的读者将能理解，当R4为氢时， 如式(I)中所示的咪唑环可以互变异构。

还应理解一些式(I)的化合物可以以溶剂化以及非溶剂化形式存 在，例如以水合形式存在。应理解本发明包括所有这些具有CDK抑 制活性的溶剂化形式。

优选的可变基团如下。可在前述或以下描述的任何定义、权利 要求书或实施方案的适当地方使用这些值。

在本发明的一个方面，优选A环为式(IA)的基团。

在本发明的另一个方面，优选A环为式(IB)的基团。

优选X1、X2、X3和X4中的一个为氮，而其余的为CR5，其中R5 可相同或不同。

在本发明的一个方面，优选X1为氮，而其余的为CR5，其中R5 可相同或不同。

在本发明的另一个方面，优选X2为氮，而其余的为CR5，其中 R5可相同或不同。

在本发明的又一个方面，优选X3为氮，而其余的为CR5，其中 R5可相同或不同。

在本发明的再一个方面，优选X4为氮，而其余的为CR5，其中 R5可相同或不同。

优选R1为卤基或C1-6烷基S(O)a，其中a为0；其中R1可任选在 碳上被一个或多个R6取代；其中R6为羟基。

更优选R1为溴基或2-羟基乙硫基。

特别是R1为溴基或2-羟基乙硫基，且n是0-1。

优选R2为氢。

在本发明的另一个方面，优选R2选自氢、C1-6烷基或N，N(C1-6 烷基)2氨基。

在本发明的又一个方面，更优选R2选自氢、甲基、乙基或N，N- 二甲氨基。

优选R5为氢。

在本发明的另一个方面，优选R5选自氢、C1-6烷基或C1-6烷氧 基；其中R5可任选在碳上被一个或多个R7取代，其中R7选自卤基。

在本发明的再一个方面，更优选R5选自氢、甲基、甲氧基或2，2，2- 三氟乙氧基。

在本发明的另一方面，优选n为2，其中R1可以相同或不同。

在本发明的一个方面，优选n为1。

在本发明的另一个方面，优选n为0。

优选R3为氨磺酰基。

在本发明的另一个方面，优选R3为氨磺酰基或卤基。

在本发明的又一个方面，更优选R3为氨磺酰基或氟代基。

优选p为0或1。

优选R4为A-E-基团；其中

A选自C1-6烷基；其中A可任选在碳上被一个或多个R9取代；

E为-N(Ra)C(O)-、-S(O)a-、-SO2N(Ra)-或-N(Ra)SO2-；其中Ra为氢 或C1-6烷基，a为0-2；

R9独立选自C1-6烷氧基和N，N-(C1-6烷基)2氨基。

更优选R4为A-E-基团；其中

A选自甲基、乙基或丙基；其中A可任选在碳上被一个或多个R9 取代；

E为-S(O)a-或-NHSO2-；

R9独立选自甲氧基和N，N-二甲基氨基。

优选R4为N-(2-二甲基氨基乙基)氨磺酰基、N-(2-甲氧基乙基)氨 磺酰基、N-甲基氨磺酰基和N-(3-二甲基氨基丙基)氨磺酰基。

在本发明的另一方面，优选R4为A-E-基团；其中

A选自C1-6烷基、C3-8环烷基、(杂环基)C1-6烷基或C3-8环烷基C1-6烷 基；其中A可任选在碳上被一个或多个R9取代；

E为-N(Ra)SO2-；其中Ra为氢或C1-6烷基；

R9独立选自羟基、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、 N，N-(C1-6烷基)2氨基或C1-6烷基S(O)a，其中a为0。

在本发明的另一方面，更优选R4为A-E-基团；其中

A选自甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、环丙基、环丁基、 吗啉代乙基、吡咯烷-1-基乙基、吡唑-1-基乙基或环丙基甲基；其中 A可任选在碳上被一个或多个R9取代；

E为-N(Ra)SO2-；其中Ra为氢或甲基；

R9独立选自羟基、甲基、乙烯基、乙炔基、甲氧基、乙氧基、 丙氧基、N，N-二甲基氨基或甲硫基。

在本发明的另一方面，R4特别为N-甲基氨磺酰基、N-环丙基甲 基氨磺酰基、N-乙基氨磺酰基、N-丙基氨磺酰基、N-烯丙基氨磺酰 基、N-2-丙炔基氨磺酰基、N-环丁基氨磺酰基、N-叔丁基氨磺酰基、 N-环丙基氨磺酰基、N-(2-二甲基氨基乙基)氨磺酰基、N-(2-甲氧基乙 基)氨磺酰基、N-(2-吡唑-1-基乙基)氨磺酰基、N-甲基-N-(2-甲氧基乙 基)氨磺酰基、N-(1-环丙基乙基)氨磺酰基、N-(3-二甲基氨基丙基)氨 磺酰基、N-(3-甲氧基丙基)氨磺酰基、N-(3-羟基-2-羟甲基丙-2-基)氨 磺酰基、N-(1，3-二羟基丙-2-基)氨磺酰基、N-(3-吗啉代-2-甲基丙-2-基) 氨磺酰基、N-(1，3-二甲氧基丙-2-基)氨磺酰基、N-(1，3-二乙氧基丙-2- 基)氨磺酰基、N-(1-甲氧基丙-2-基)氨磺酰基、N-(1-乙氧基丙-2-基)氨 磺酰基、N-(1-羟基丙-2-基)氨磺酰基、N-(3-甲硫基-2-甲基丙-2-基)氨 磺酰基、N-(3-吡咯烷-1-基-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基、N-(3-甲氧基-2- 甲基丙-2-基)氨磺酰基、N-(2-甲氧基-2-甲基丙基)氨磺酰基、N-(1-丙 氧基丙-2-基)氨磺酰基或N-(3-羟基-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基。

优选q为0或1。

优选p+q为1或2。

更优选p+q为1。

特别优选p+q为1，基团R3或R4位于苯胺的对位。

在本发明的另一个方面，优选p+q为0、1或2；其中R3可以相同 或不同，R4可以相同或不同。

因此，在本发明的另一个方面，提供式(I)的化合物(如上所述)， 或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，其中：

A环为式(IA)的基团：

X1、X2、X3和X4中的一个为氮，而其余的为CH；

n为0；

R2为氢；

R3为氨磺酰基；

p为0或1；

R4为N-(2-二甲基氨基乙基)氨磺酰基、N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰 基、N-甲基氨磺酰基或N-(3-二甲基氨基丙基)氨磺酰基；

q为0或1。

p+q为1，基团R3或R4位于苯胺的对位。

因此，在本发明的另一个方面，提供式(I)的化合物(如上所述)， 或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，其中：

A环为式(IA)的基团(如上所述)，

其中X1、X2、X3和X4中的一个为氮，而其余的为CR5；其中R5 可以相同或不同；

n为0；

R2选自氢、C1-6烷基或N，N-(C1-6烷基)2氨基；

R5选自氢、C1-6烷基或C1-6烷氧基；其中R5可任选在碳上被一或 多个R7取代；其中R7选自卤代；

R3为氨磺酰基或卤代；

p为0或1；

R4为A-E-基团；其中

A选自C1-6烷基、C3-8环烷基、(杂环基)C1-6烷基或C3-8环烷基C1-6烷 基；其中A可任选在碳上被一个或多个R9取代；

E为-N(Ra)SO2-；其中Ra为氢或C1-6烷基；

R9独立选自羟基、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、 N，N-(C1-6烷基)2氨基或C1-6烷基S(O)a，其中a为0；

q是0或1；

p+q为0、1或2；其中R3可以相同或不同，R4可以相同或不同。

因此，在本发明的另一个方面，提供式(I)的化合物(如上所述)， 或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，其中：

A环为式(IA)的基团(如上所述)，

其中X1、X2、X3和X4中的一个为氮，而其余的为CR5；其中R5 可以相同或不同；

n为0；

R2选自氢、甲基、乙基或N，N-二甲氨基；

R5选自氢、甲基、甲氧基或2，2，2-三氟乙氧基；

R3为氨磺酰基或氟代基；

p为0或1；

R4为N-甲基氨磺酰基、N-环丙基甲基氨磺酰基、N-乙基氨磺酰 基、N-丙基氨磺酰基、N-烯丙基氨磺酰基、N-2-丙炔基氨磺酰基、N- 环丁基氨磺酰基、N-叔丁基氨磺酰基、N-环丙基氨磺酰基、N-(2-二 甲基氨基乙基)氨磺酰基、N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基、N-(2-吡唑-1- 基乙基)氨磺酰基、N-甲基-N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基、N-(1-环丙基 乙基)氨磺酰基、N-(3-二甲基氨基丙基)氨磺酰基、N-(3-甲氧基丙基) 氨磺酰基、N-(3-羟基-2-羟甲基丙-2-基)氨磺酰基、N-(1，3-二羟基丙-2- 基)氨磺酰基、N-(3-吗啉代-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基、N-(1，3-二甲氧 基丙-2-基)氨磺酰基、N-(1，3-二乙氧基丙-2-基)氨磺酰基、N-(1-甲氧 基丙-2-基)氨磺酰基、N-(1-乙氧基丙-2-基)氨磺酰基、N-(1-羟基丙-2- 基)氨磺酰基、N-(3-甲硫基-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基、N-(3-吡咯烷-1- 基-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基、N-(3-甲氧基-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基、 N-(2-甲氧基-2-甲基丙基)氨磺酰基、N-(1-丙氧基丙-2-基)氨磺酰基或 N-(3-羟基-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基。

q是0或1；

p+q为0、1或2；其中R3可以相同或不同，R4可以相同或不同。

在本发明的又一方面，本发明优选的化合物为实施例中的任一 种化合物或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯。

在本发明的再一方面，本发明优选的化合物为实施例7、27、29、 39、41、42、46、63、64或66中任一个化合物或其药学上可接受的 盐或其体内可水解的酯。

本发明的优先方面涉及式(I)的化合物或其药学上可接受盐。

本发明的另一方面提供了一种制备式(I)的化合物或其药学上可 接受的盐或其体内可水解的酯的方法，所述方法包括(其中可变基团 如式(I)中的定义，另有声明除外)：

a)使式(II)的嘧啶：

式中L为可置换的基团，与式(III)的胺反应：

b)使式(IV)的嘧啶：

与式(V)化合物反应：

其中M和Q之一为可置换的基团X，而另一个为金属试剂Y；或

c)使式(VI)的化合物：

与式(VII)的化合物反应：

式中R5为C1-6烷基，R6为氢或R1；

d)使式(VIII)的氨基化合物：

与式(IX)化合物反应：

式中E为可置换的基团；

并且随后如果需要：

i)将式(I)的化合物转化成另一种式(I)的化合物；

ii)除去任何保护基团；

iii)形成药学上可接受的盐或在体内可水解的酯。

L是可置换的基团，对于L适合的例子有例如卤基、甲硫基或 磺酰氧基，例如氯基、溴基、甲磺酰氧基或甲苯-4-磺酰氧基。

E是可置换的基团，对于E适合的例子有例如卤基，例如氯基、 溴基、碘基或三氟甲磺酰氧基。

合适的可置换的基团X为，例如卤基或磺酰基，例如溴基、碘 基或三氟甲磺酰基。

合适的金属基团Y为，例如，铜、锂、有机硼试剂，如-B(OH)2、 -B(OPri)2、-B(Et)2，或有机锡化合物如SnBu3，有机硅化合物，如 Si(Me)F2，有机锆化合物，如ErCl3，有机铝化合物如AlEt2，有机镁 化合物如Mgbr，有机锌化合物如ZnCl或有机汞化合物如HgBr。

上述反应的具体反应条件如下。

a)可使式(II)的嘧啶和式(III)的胺一起在以下条件下反应：

i)在适合的溶剂，如酮(如丙酮)或醇(如乙醇或丁醇)或芳烃(如甲 苯或N-甲基吡咯烷)存在下，任选在适合的酸，如无机酸(如盐酸或硫 酸)或者有机酸(如乙酸或甲酸)(或适合的路易斯酸)存在下，在0℃至 回流的温度，优选回流的温度下；或

ii)在标准Buchwald条件下(例如参见J.Am.Chem.Soc.，118， 7215；J.Am.Chem.Soc.，119，8451；J.Org.Chem.，62，1568和6066)， 例如在乙酸钯存在下，在合适的溶剂例如芳族溶剂例如甲苯、苯或 二甲苯中，采用合适的碱例如无机碱(例如碳酸铯)或有机碱(例如叔- 丁醇钾)，在合适的配体例如2，2’-双(二苯基膦基)-1，1’-联萘存在下， 在25-80℃的温度范围内。

可按照下面的流程制备式(II)的嘧啶：

其中M和Q之一为如上定义的可置换的基团X，而另一个为如上定 义的金属试剂Y。

交叉偶合条件为本领域所熟知。合适的条件包括，例如，在下 文b)中描述的那些条件。

当A环为式(IA)基团且L为甲硫基时，式(II)化合物也可根据下 面的流程制备：

K为合适的离去基团(例如C1-6烷酰基氧基)，R5和R6如上所定 义，Q为合适的离去基团(例如C1-6烷氧基)。

当A环为式(IB)基团且L为甲硫基时，式(II)化合物也可根据下 面的流程制备：

其中R5和R6如上所定义。

可以对式(IIg)或(III)的化合物进行进一步的修饰，以得到式(IIn) 的化合物：

本领域技术人员应该理解，通过本领域已知的标准官能团修饰 反应，可以对式(IIn)化合物进行进一步的修饰，以得到式(II)化合物， 其中L为其它的离去基团，例如氯基、溴基、甲苯磺酰基和甲磺酰 基。

式(IIa)、(IIb)、(IIc)、(IId)、(IIi)和(IIj)的化合物是商业可得的化 合物，或它们在文献中是已知的，或它们可通过本领域已知的标准 方法制备。

b)式(IV)化合物和式(V)化合物可以在标准偶合条件下一起反应。 这些条件的实例是在催化剂，例如，金属催化剂如四(三苯膦)钯(O)、 氯化钯(II)、溴化钯(II)、氯化镍(II)、溴化镍(II)或双(三苯膦)氯化镍(II) 的存在下，在合适的惰性溶剂或稀释剂，例如四氢呋喃、1，4-二氧六 环、1，2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯、甲醇或乙醇存在下进行。 反应优选在合适的碱，例如碳酸钠或碳酸钾、吡啶、4-二甲基氨基吡 啶、三乙胺或吗啉的存在下，一般在例如10-250℃，优选在60-120 ℃的温度范围内进行。

式(IV)化合物可根据下面的流程制备：

式(V)化合物是商业可得的化合物，或它们在文献中是已知的， 或它们可通过本领域已知的标准方法制备。

c)在100-200℃，优选在150-170℃的温度范围内，在合适的溶剂如 N-甲基吡咯烷酮或丁醇中，使式(VI)化合物和式(VII)化合物一起反 应。该反应优选在合适的碱，例如甲醇钠或碳酸钾的存在下进行。

式(VI)和(VII)化合物是商业可得的化合物，或它们在文献中是已 知的，或它们可通过本领域已知的标准方法制备，或可以通过与在 上文对(IIf)和(IIk)所述的类似的方法制备式(VII)化合物。

d)式(VIII)的氨基化合物和式(IX)化合物可以在标准的Buchwald条 件下，例如在上述(ii)的方法中描述的条件下一起进行反应。

式(VIII)化合物如上所述制备。

式(IX)化合物是商业可得的化合物，或它们在文献中是已知的， 或它们可通过本领域已知的标准方法制备。

应理解在本发明化合物中，一些不同的环取代基可通过标准芳 族取代反应导入，或在以上所提到的方法之前或紧跟其后通过常规 官能基团修饰产生，这些方法包括在本发明的方法的范围内。这些 反应和修饰包括，例如通过芳族取代反应的取代基的导入、取代基 的还原、取代基的烷基化和取代基的氧化。这些方法的试剂和反应 条件是化学领域中众所周知的。芳族取代反应的具体例子包括使用 浓硝酸导入硝基；使用例如酰卤和路易斯酸(例如三氯化铝)在Friedel Crafts条件下导入酰基；用烷基卤和路易斯酸(例如三氯化铝)在Friedel Crafts条件下导入烷基；和卤基的导入。修饰的具体例子包括通过例 如用镍催化剂的催化氢化反应或在盐酸存在下加热下用铁处理，将 硝基还原为氨基；将烷硫基氧化为烷基亚硫酰基或烷基磺酰基。

还应理解，在本文所提到的一些反应中，保护化合物中任何敏 感的基团是必需/所要求的。必需或所要求保护的情况和适合的保护 方法是本领域技术人员已知的。可根据标准操作规程使用常规的保 护基团(例子可参见T.W.Green，Protective Groups in Organic Synthesis(有机合成中的基团保护)，John Wiley and Sons，1991)。因此， 如果反应物包括例如氨基、羧基或羟基等基团，在本文所提到的一 些反应中就可能需要保护这些基团。

对于氨基或烷基氨基的适合的保护基是例如酰基(例如烷酰基， 如乙酰基)，烷氧基羰基(例如甲氧基羰基、乙氧基羰基或叔-丁氧基 羰基)、芳基甲氧基羰基(例如苄氧基羰基)，或芳酰基(例如苯甲酰基)。 对于以上保护基的脱保护条件必须根据所选择的保护基而定。因此， 例如，酰基(如烷酰基或烷氧基羰基或芳酰基)可以例如通过用适合的 碱如碱金属氢氧化物(例如氢氧化锂或钠)水解除去。或者，酰基(例 如叔-丁氧基羰基)可以例如通过用适合的酸如盐酸、硫酸、磷酸或三 氟乙酸处理除去，芳基甲氧基羰基(例如苄氧基羰基)可以例如通过经 催化剂如披钯碳的氢化除去，或通过用路易斯酸例如三(三氟乙酸)硼 处理除去。伯氨基的其它适合的保护基是例如邻苯二甲酰基，该基 团可以用烷基胺例如二甲氨基丙胺或用肼处理除去。

对于羟基的适合保护基是例如酰基例如烷酰基(如乙酰基)，芳酰 基(例如苯甲酰基)或芳基甲基(例如苄基)。对于以上保护基的脱保护 条件必需根据所选择的保护基而改变。因此，例如酰基(如烷酰基或 芳酰基)可以例如通过用适合的碱例如碱金属氢氧化物(如氢氧化锂或 钠)水解除去。或者，芳基甲基(例如苄基)可通过经催化剂例如披钯 碳的氢化除去。

对于羧基适合的保护基是例如酯化基团，例如甲基或乙基，这 些基团可以通过用碱例如氢氧化钠水解除去；或例如叔-丁基，该基 团可以通过用酸例如有机酸如三氟乙酸处理除去；或例如苄基，该 基团可以例如通过催化剂(例如披钯碳)的氢化除去。

所述保护基可以在合成的任何方便的阶段，用化学领域众所周 知的常规技术除去。

如上文所述，本发明中定义的化合物具有抗细胞增殖活性，例 如抗癌活性，确信该活性是由该化合物的CDK抑制活性所导致的。 这些特性可以例如用以下提出的方法评估：

测定

使用以下缩写：

HEPES是N-[2-羟乙基]哌嗪-N’-[2-乙磺酸]

DTT是二硫苏糖醇

PMSF是苯基甲磺酰氟

在96孔格式板中，采用用于测定[γ-33-P]-腺苷三磷酸结合进入 试验底物(GST-成视网膜细胞瘤蛋白；GST-Rb)的闪烁亲近测定法 (SPA-得自Amersham)，在体外激酶测试中试验所述化合物。在每一 孔中放置待测试的化合物(在DMSO和水中稀释到适合的浓度)，并 在对照孔中放置作为抑制剂对照的roscovitine或放置作为阳性对照的 DMSO。

将在25μl温育缓冲液中稀释的大约0.2μl的CDK2/细胞周期蛋 白E部分纯化的酶(其量根据酶的活性而定)加入到每个孔中，然后加 入20μl的GST-Rb/ATP/ATP33的混合物(含有0.5μg GST-Rb和0.2μM ATP和0.14μCi[γ-33-P]-腺苷三磷酸的温育缓冲液)，将得到的混合物 轻轻振荡，然后在室温下温育60分钟。

然后向每一孔中加入150μl含有20pM/孔的抗-谷胱甘肽转移酶、 兔IgG(得自Molecular Probes)、61mM EDTA和含有0.05％叠氮化 钠的50mM HEPES pH7.5的终止溶液(0.8mg/孔的蛋白A-PVT SPA 珠粒(Amersham))。

用Topseal-S平板密封物将该板密封，放置2小时，然后以 2500rpm、1124xg的速度旋转5分钟。在Topcount上对该平板的每 孔读数30秒。

用于稀释酶和底物混合物的温育缓冲液含有50mM HEPES pH 7.5、10mM MnCl2、1mM DTT、100μM钒酸钠、100μMNaF、10mM 甘油磷酸钠、BSA(终浓度为1mg/ml)。

测试底物

在该测定中，只使用与GST标记物融合的部分成视网膜细胞瘤 蛋白(Science，1987年3月，13；235(4794)：1394-1399；Lee W.H.， Bookstein R.，Hong F.，Young L.J.，Shew J.Y.，Lee E.Y.)。进行成视网 膜细胞瘤基因编码的氨基酸379-928(由成视网膜细胞瘤质粒ATCC pLRbRNL获得)的PCR，并将该序列克隆进入pGEX 2T融合载体中 (Smith D.B.和Johnson，K.S.Gene 67，31(1988)；它含有用于诱导型表 达的tac启动子，用于任何大肠杆菌宿主中的内lac Iq基因和用于扩 增氨基酸792-928的凝血酶裂解的编码区(由Pharmacia Biotech得 到)。将该序列再克隆进入pGEX 2T中。

用标准诱导型表达技术，将如此得到的成视网膜细胞瘤792-928 序列表达到大肠杆菌(BL 21(DE3)pLysS细胞)中，并如下进行纯化。

将大肠杆菌(E.coli)糊状物再悬浮在10ml/g的NETN缓冲液(50 mM Tris pH7.5，120mM NaCl，1mM EDTA，0.5％v/v NP-40，1mM PMSF，1μg/ml亮抑酶肽，1μg/ml抑酶肽和1μl/ml抑胃酶肽)中，并对 每100ml匀浆超声处理2×45秒。离心后，将上清液上样到10ml 谷胱甘肽琼脂糖柱(Pharmacia Biotech，Herts，UK)上，并用NETN缓 冲液冲洗。用激酶缓冲液(50 mM HEPES pH7.5，10mM MgCl2，1mM DTT，1mM PMSF，1μg/ml亮抑酶肽，1μg/ml抑酶肽和1μl/ml抑胃酶肽) 洗涤后，将该蛋白用50mM溶于激酶缓冲液中的还原谷胱甘肽洗脱。 收集含有GST-Rb(792-927)的流分，并向激酶缓冲液中透析过夜。通 过十二烷基硫酸钠(SDS)PAGE(聚丙烯酰胺凝胶)，用8-16％Tris-甘 氨酸凝胶(Novex，San Diego，USA)分析最终产物。

CDK2和细胞周期蛋白E

通过使用海拉细胞和活化的T细胞mRNA作为模板逆转录 PCR，离析CDK2和细胞周期蛋白E的可读框，并克隆到昆虫表达 载体pVL1393(由Invitrogen 1995目录号：V1392-20得到)中。然后将 CDK2和细胞周期蛋白E二重表达[用标准病毒Baculogold共感染技 术]在昆虫SF21细胞体系中(从Fall Army Worm卵巢组织中衍生的秋 粘虫细胞，可购买得到)。

细胞周期蛋白E/CDK2的制备实例

以下实例提供在对于细胞周期蛋白E和CDK2的各个病毒已二 重感染MOI3的SF21细胞(在TC100+10％FBS(TCS)+0.2％Pluronic 中)中制备细胞周期蛋白E/CDK2的细节。

使用在滚瓶培养基中生长至2.33×106个细胞/ml的SF21细胞， 以0.2×10E6细胞/ml接种到10×500ml滚瓶中。将该滚瓶在28℃下 的滚动设备上温育。

3天(72小时)后，对细胞计数，并测得两瓶的平均数是1.86×10E6 细胞/ml(99％成活率)。然后以每种病毒一个MOI3的量，将培养基 用二重病毒感染。

将病毒混合在一起，然后加入到培养基中，并将培养基放回到28 ℃的滚动设备上。

感染两天(48小时)后，收获到5升培养物。收获的总细胞数是1.58 ×10E6细胞/ml(99％成活率)。将细胞以每批250ml的量，在Heraeus Omnifuge 2.0RS中，在4℃下，以2500rpm旋转30分钟。弃去上清 液。

Cdk2和细胞周期蛋白E的部分共纯化

将Sf21细胞重新悬浮于溶胞缓冲液(50mM Tris pH8.2、10mM 氯化镁、1mM DTT、10mM磷酸甘油酯、0.1mM原钒酸钠、0.1mM氟 化钠、1mM PMSF、1μg/ml亮抑酶肽和1μg/ml抑蛋白酶肽)中，然后 在10ml Dounce匀化器中匀化2分钟。离心后，将上清液上样到Poros HQ/M 1.4/100阴离子交换柱(PE Biosystems，Hertford，UK)上。以0- 1M NaCl梯度液(在无蛋白酶抑制剂的溶胞缓冲液中进行)开始，用20 倍柱体积量，将CDK2和细胞周期蛋白E共同洗脱。使用抗CDK2 和抗细胞周期蛋白E的抗体(Santa Cruz Biotechnology，California， US)，通过蛋白质印迹来检测共同洗脱情况。

通过上述类似方法，可设计用于评价CDK4和CDK6抑制作用 的测定方法。可将CDK2(EMBL登记号：X62071)与细胞周期蛋白A 或细胞周期蛋白E(参见EMBL登记号：M73812)一起使用，这类试 验更多细节包括在PCT国际公布号WO 99/21845中的有关生物化学 和生物学评价部分中，该文献通过引用结合到本文中来。

虽然式(I)化合物的药理特性随结构改变而变化，但通常在IC50 浓度或在250μM至1nM剂量范围内可证明式(I)化合物所具有的活 性。

可通过标准技术，例如通过测量细胞生长抑制作用和评估细胞 毒性，评估本发明的化合物的体内活性。

细胞生长的抑制作用可通过用Sulforhodamine B(SRB)染色细胞 测量，该荧光染料可使蛋白染色，因此得到孔中蛋白(即细胞)的估计 量(参见Boyd，M.R.(1989)NCI临床前抗肿瘤药发明筛选的状况，Prin. Prac Oncol 10：1-12)。因此，以下提供细胞生长抑制作用测量方法的 细节：

将细胞平铺在96孔板中100ml容量的适宜培养基中；所述培养 基是用于MCF-7、SK-UT-1B和SK-UT-1的Dulbecco’s改良Eagle 培养基。将所述细胞附着过夜，然后加入以不同浓度溶于最大浓度 为1％DMSO(v/v)中的抑制剂化合物。测定对照板，得到给药前细胞 的数值。将细胞在37℃下(5％CO2)温育三天。

三天以后，将TCA加入到所述板中，使最后浓度为16％(v/v)。 然后将所述板在4℃下温育1小时，弃去上清液，然后在自来水中洗 涤该板。干燥后，在37℃下，用30分钟加入100ml SRB染料(0.4％SRB 在1％乙酸中的溶液)。除去过量的SRB，用1％乙酸洗涤该板。将结 合蛋白的SRB溶解于10mM Tris pH7.5中，并在室温下振荡30分 钟。在540nm处读取ODS，并从抑制剂浓度对吸光度的半对数曲线 图中，确定引起50％生长抑制作用的抑制剂浓度。降低所述光密度 至低于实验开始平铺细胞时得到的光密度的化合物浓度值为毒性 值。

当进行SRB测定时，本发明化合物的典型IC50值在1mM至1nM 范围内。

本发明另一方面提供含有如上文所定义的式(I)的衍生物，或其 药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，并结合药学上可接受的稀 释剂或载体的药物组合物。

所述组合物可以是适合用于口服给药的形式，例如片剂或胶囊， 用于胃肠外注射(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或输注)的无菌溶 液、悬浮液或乳液，用于局部给药的软膏或乳膏，或用于直肠给药 的栓剂。

一般来说，可以通过常规方法，用常规赋形剂制备以上组合物。

通常将式(I)的化合物以每平方米动物体表面积5-5000mg，即大 约0.1-100mg/kg范围内的单位剂量给予温血动物，此为通常提供的 治疗有效剂量。单位剂量形式(例如片剂或胶囊)通常含有例如1-250 mg活性成分。优选使用的日剂量在1-50mg/kg范围内。然而日剂量 必需根据所治疗宿主的情况、特定的给药途径和所治疗疾病的严重 程度而变化。因此，最佳剂量可由治疗任何具体病人的医师来决定。

本发明的又一方面提供如上所定义的式(I)的化合物，或其药学 上可接受的盐或其体内可水解的酯，通过疗法在人或动物治疗方法 中的用途。

我们已发现本发明所定义的化合物，或其药学上可接受的盐或 其体内可水解的酯是有效的细胞周期抑制剂(抗细胞增殖剂)，该特性 被认为是由它们的CDK抑制特性所致。因此，期望本发明的化合物 可用于治疗通过CDK酶单独或部分介导的疾病或医学症状，即可在 需要这种治疗的温血动物中用所述化合物产生CDK抑制效果。因此， 本发明的化合物提供以抑制CDK酶为特征的治疗恶性肿瘤细胞增殖 的方法，即该化合物可用于产生通过CDKS抑制作用单独或部分介 导的抗增殖效果。期望这些本发明的化合物具有广泛的抗癌特性， 这是因为CDKS与许多常见人类癌症例如白血病和乳腺、肺、结肠、 直肠、胃、前列腺、膀胱、胰腺和卵巢等癌症有关。因此期望本发 明的化合物对这些癌症具有抗癌活性。另一方面，期望本发明的化 合物将具有抗各种白血病、淋巴的恶性肿瘤和在组织例如肝、肾、 前列腺和胰腺中的实体瘤(例如癌)和肉瘤的活性。特别期望本发明的 这些化合物有助于减缓原发性和复发性实体瘤例如结肠、乳腺、前 列腺、肺和皮肤等癌症的生长。更特别期望本发明的这类化合物或 其药学上可接受的盐或体内其可水解的酯可抑制这些原发性和复发 性的、与CDKS有关的实体瘤的生长，尤其是那些主要依赖于CDKS 而生长和扩散的肿瘤，包括例如一些结肠、乳腺、前列腺、肺、外 阴和皮肤肿瘤。

另外期望本发明的化合物在更大范围的其它疾病中具有对抗其 它细胞增殖疾病的活性，所述其它疾病包括白血病、纤维增生和分 化紊乱、牛皮癣、类风湿性关节炎、Kaposi氏肉瘤、血管瘤、急性 和慢性肾病、粉瘤、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫性疾病、 急性和慢性炎症、骨疾病和伴有视网膜血管增生的眼疾病。

因此，根据本发明的这个方面，提供一种如上文中所定义的式(I) 的化合物或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯作为药物的周 途；如上文中所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其体 内可水解的酯，在制备用于在温血动物(如人体)中产生细胞周期抑制 (抗细胞增殖)效应的药物中的用途。尤其是，通过CDK2、CDK4和/ 或CDK6，尤其是CDK2的抑制作用，阻止进入或通过S期而产生 细胞周期抑制作用。

根据本发明的另一个特征，提供一种如上文中所定义的式(I)的 化合物或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，在制备用于治 疗以下疾病的药物中的用途，所述疾病包括疾病(实体肿瘤和白血 病)、成纤维细胞增殖和分化紊乱、牛皮癣，类风湿性关节炎，Kaposi 氏肉瘤、血管瘤，急性和慢性肾病、粉瘤、动脉粥样硬化，动脉再 狭窄、自身免疫疾病、急性和慢性炎症、骨疾病和视网膜血管增生 的眼疾病，特别是癌症。

根据本发明的这个方面的另一特征，提供一种在需要此治疗的 温血动物(例如人体)中产生细胞周期抑制(抗细胞增殖)效应的方法， 该方法包括给予所述动物有效量的如以上所定义的化合物。特别是， 通过CDK2、CDK4和/或CDK6，尤其是CDK2抑制作用，阻止进 入或通过S期而产生抑制作用。

根据本发明的这个方面的再一特征，提供一种在需要此治疗的 温血动物(例如人体)中治疗癌症(实体肿瘤和白血病)、成纤维细胞增 殖和分化紊乱、牛皮癣，类风湿性关节炎，Kaposi氏肉瘤、血管瘤， 急性和慢性肾病、粉瘤、动脉粥样硬化，动脉再狭窄、自身免疫疾 病、急性和慢性炎症、骨疾病和视网膜血管增生的眼疾病的方法， 所述方法包括给予所述动物有效量的如上所定义的式(I)的化合物， 或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯。

特别是本发明提供一种在需要此治疗的温血动物(例如人体)中治 疗癌症的方法，该方法包括给予所述动物有效量的如以上所定义的 式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯。

本发明的另一方面提供了一种用于在温血动物(如人)中产生细胞 周期抑制(抗细胞增殖)作用的药物组合物，其包含如上定义的式(I)的 化合物或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，以及药学上可 接受的稀释剂或载体。

本发明的另一方面提供了一种用于在温血动物(如人)中治疗癌症 (实体肿瘤和白血病)、成纤维细胞增殖和分化紊乱、牛皮癣，类风湿 性关节炎，Kaposi氏肉瘤、血管瘤，急性和慢性肾病、粉瘤、动脉 粥样硬化，动脉再狭窄、自身免疫疾病、急性和慢性炎症、骨疾病 和视网膜血管增生的眼疾病的药物组合物，其包含如上定义的式(I) 的化合物或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，以及药学上 可接受的稀释剂或载体。

本发明的另一方面提供了一种用于在温血动物(如人)中治疗癌症 的药物组合物，所述药物组合物包含如上定义的式(I)的化合物或其 药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，以及药学上可接受的稀释 剂或载体的。

本发明的又一方面提供了一种用于在温血动物(如人)中产生细胞 周期抑制(抗细胞增殖)作用的如上定义的式(I)的化合物或其药学上可 接受的盐或其体内可水解的酯。

本发明的再一方面提供了一种用于在温血动物(如人)中治疗癌症 (实体肿瘤和白血病)、成纤维细胞增殖和分化紊乱、牛皮癣，类风湿 性关节炎，Kaposi氏肉瘤、血管瘤，急性和慢性肾病、粉瘤、动脉 粥样硬化，动脉再狭窄、自身免疫疾病、急性和慢性炎症、骨疾病 和视网膜血管增生的眼疾病的如上定义的式(I)的化合物或其药学上 可接受的盐或其体内可水解的酯。

本发明的又一方面提供了一种用于在温血动物(如人)中治疗癌症 的如上定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其体内可水解 的酯。

通过对必需的S-期引发的活性(如CDK2引发)的抑制来阻止细 胞进入DNA合成还可用于保护机体正常细胞不受周期特异性药物的 毒害。对CDK2或4的抑制作用将阻止进入到正常细胞的细胞周期 中，这可限制在S-期、G2或有丝分裂中起作用的周期特异性药物的 毒性。这种保护作用能防止通常伴随使用这些药物而引起的脱发。

因此，本发明再一方面提供了用作细胞保护药物的如上定义的 式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯。

因此，在本发明的又一方面提供了用于防止由于采用药物治疗 恶性疾病引起的脱发的如上定义的式(I)的化合物或其药学上可接受 的盐或其体内可水解的酯。

已知引起脱发的治疗恶性疾病的药物的实例包括烷化剂，如异 环磷酰胺和环磷酰胺；抗代谢药物，如甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、吉西 他滨和阿糖胞苷；长春花碱类及类似物，如长春新碱、长春碱、长 春他辛和长春瑞滨；紫杉烷类，如紫杉醇和多西他赛；异构酶I抑制 剂，如伊立替康和托泊替康；胞毒抗生素，如多柔比星、柔红霉素、 米托蒽醌、放线菌素D和丝裂霉素；以及其它的药物，如依托泊苷 和维A酸。

本发明的另一方面中，可将所述式(I)的化合物或其药学上可接 受的盐或其体内可水解的酯与一种或多种上述药物联合给药。在这 种情况下，式(I)的化合物可通过全身或非全身方式给药。特别是式(I) 的化合物可通过非全身方式给药，例如局部给药。

因此，本发明又一方面提供了一种防止温血动物(如人)在采用药 物治疗一种或多种恶性疾病过程中引起的脱发的方法，所述方法包 括给予所述动物有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐或 其体内可水解的酯。

本发明再一方面提供了一种防止温血动物(如人)在采用药物治疗 一种或多种恶性疾病过程中引起的脱发的方法，所述方法包括在给 予所述动物有效量的所述治疗药物的同时、随后或单独给予有效量 的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯。

根据本发明的另一方面，提供了一种用于防止在采用药物治疗 恶性疾病而引起的脱发的药物组合物，所述组合物包括式(I)的化合 物或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，以及所述治疗药物， 并结合药学上可接受的稀释剂或载体。

根据本发明的又一方面，提供了一种包括式(I)的化合物，或其 药学上可接受的盐或其体内可水解的酯，以及已知会引起脱发的用 于治疗恶性疾病的药物的试剂盒。

本发明再一方面提供一种试剂盒，所述试剂盒包括：

a)式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯， 为第一单位剂型；

b)已知会引起脱发的用于治疗恶性疾病的药物，为第二单位剂 型；和

c)用于包装所述第一和第二剂型的容器。

本发明另一方面提供了式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐 或其体内可水解的酯在治疗用于防止由于采用药物治疗恶性疾病期 间而引起的脱发的药物中的用途。

本发明的又一方面提供了一种对脱发的联合治疗方法，所述方 法包括在向温血动物(如人)给予有效量的用于治疗恶疾病的药物的 同时、随后或单独给予其有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接 受的盐或其体内可水解的酯，任选同时给予药学上可接受的稀释剂 或载体。

如以上所述，周于治疗或预防性治疗特定的细胞增殖疾病所需 的剂量大小必须根据所治疗的宿主、给药途径和所治疗疾病的严重 程度而改变。估算的单位剂量范围是例如1-100mg/kg，优选1-50 mg/kg。

可将以上定义的CDK抑制活性作为单一疗法使用或可包括在除 本发明的化合物外的一种或多种其它物质和/或疗法中。这种联合疗 法可通过将各治疗组分以同时、连续或分别给药的方式完成。在肿 瘤治疗学领域，通常使用不同形式的联合疗法治疗每个癌症患者。 在肿瘤治疗学中，除以上定义的细胞周期抑制疗法外，所述联合疗 法的其它组成部分可以是：外科手术、放射疗法或化学疗法。所述 化学疗法可包括三种主要治疗剂类型：

(i)通过与以上所定义的机制相同或不同的机制发挥作用的其它 细胞周期抑制剂；

(ii)细胞生长抑制剂，例如抗雌激素(例如他莫昔芬、托瑞米芬、 雷洛昔芬、屈洛昔芬、iodoxyfene)、孕激素(例如乙酸甲地孕酮)、芳 香酶抑制剂(例如阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑、伏氯唑(vorazole)、 依西美坦)、抗孕激素类、抗雄激素物质(例如氟他胺、尼鲁米特、比 卡鲁胺、醋酸环丙孕酮)、LHRH激动剂和拮抗剂(例如乙酸戈合瑞林、 luprolide)、睾酮5α-二氢还原酶抑制剂(例如非那雄胺)、抗-侵袭剂(例 如金属蛋白酶抑制剂(如马立马司他(marimastat))和尿激酶纤溶酶激活 物受体功能抑制剂)和生长因子功能抑制剂(这些生长因子包括例如血 小板衍化的生长因子和肝细胞生长因子，这些抑制剂包括生长因子 抗体、生长因子受体抗体、酪氨酸激酶抑制剂和丝氨酸/苏氨酸激酶 抑制剂)；和

(iii)如在肿瘤治疗学中使用的抗增殖/抗肿瘤药物及其组合物， 例如抗代谢产物(例如抗叶酸剂，如甲氨蝶呤、氟嘧啶(如5-氟尿嘧啶)、 嘌呤和腺苷类似物、胞嘌呤阿糖胞苷)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类抗 生素，如多柔比星、柔红霉素、表柔比星和伊达比星、丝裂霉素-C、 放线菌素D、普卡霉素)；铂衍生物(例如顺铂、卡铂)；烷化剂(例如 氮芥、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、环磷酰胺、异环磷酰胺、亚 硝基脲、塞替派)；抗有丝分裂剂(例如长春花生物碱(如长春新碱)和 taxoids(如紫杉醇、taxotere))；拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素， 如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、托泊替康)。根据本发明这一方面， 提供包含如上文定义的式(I)的化合物和如上文定义用于癌症联合疗 法的其它抗肿瘤物质的药用产品。

除了用作治疗药物外，式(I)的化合物和它们药学上可接受的盐 也可以作为新的药理研究工具，作为寻找新治疗剂部分，用于评估 在实验动物(例如猫、狗、免、猴、大鼠和小鼠)中细胞周期活性抑制 剂的作用的体外和体内试验系统的开发和标准化中。

在此所述的本发明化合物的其它和优选的实施方案也适用于以 上其它的药物组合物、步骤、方法、用途和药物制备特征中。

实施例

现在，通过以下非限定实施例对本发明作出举例说明，除非另 有说明，否则其中：

(i)温度单位为摄氏度(℃)；在室温或环境温度中，即是18-25℃ 温度范围内进行操作；

(ii)有机溶液采用无水硫酸镁干燥；溶剂的蒸发采用旋转式蒸发 器，在减压(600-4000Pa；4.5-30mmHg)及外浴温度最高可达60℃下 实施；

(iii)层析法是指采用硅胶的快速层析法；薄层层析法(TLC)在硅 胶板上实施；其中氨基isolute柱表示为该柱含有10g 40微米粒径的 NH2 SPE吸附剂，所述吸附剂装在一60ml的一次性注射器中，并由 一个多孔圆盘负载，所述柱购自IST，Mid Glamorgan，UK，商标名为 “Isolute NH2”，“Isolute”；

(iv)通常，反应过程通过TLC监测，反应时间仅仅是作为举例 说明之用；

(v)终产物具有满意的质子核磁共振(NMR)谱和/或质谱的数 据；

(vi)收率仅为说明之用，不一定是那些通过努力加工处理所得 到的量；如果要求更多的量，可重复进行制备；

(vii)除非另有说明，否则当给出时，NMR数据为主要的特征质 子的δ值的形式，以相对于作为内标的四甲基硅烷(TMS)的百万分之 几(ppm)表示，在300MHz下，使用全氘二甲亚砜(DMSO-d6)作为溶 剂测定；

(viii)所用化学符号具有它们通常的含义；使用SI单位和符号；

(ix)溶剂比率单位为体积比(v/v)；和

(x)质谱采用70电子伏特的电子能、在化学电离(CD方式下、 使用直接暴露探针进行测量；其中所述电离通过电子轰击(EI)、快原 子轰击(FAB)或电喷雾(ESP)实施；给出m/z的值；通常只是报导表 明母体质量的离子；

(xi)除非另有声明，否则对含有不对称取代的碳和/或硫原子的 化合物不作拆分；

(xii)当所描述的合成类似于前面实施例所描述的合成时，所用 的量与在前面实施例中所用量的毫摩尔比率等当；

(xvi)使用以下缩写：

DMF       N，N-二甲基甲酰胺；

DMFDMA    N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙酰基；

DMSO      二甲亚砜；

THF       四氢呋喃。

实施例1

2-(4-氨磺酰基苯胺基)-4-(咪唑并[1，2a]吡嗪-3-基)嘧啶

在氮气下，将亚硫酰氯(4ml)和DMF(5μl)先后加入到2-(4-磺酰 基苯胺基)-4-(咪唑并[1，2a]吡嗪-3-基)嘧啶(方法4；75mg，0.204mmol)， 于室温下将该混合物搅拌48小时。通过蒸发除去挥发物，在氮气下， 将氨的甲醇溶液(6ml的7M溶液)直接加入到该残留物中，于室温下 该混合物搅拌1小时。通过蒸发除去挥发物，残留物经制备性HPLC (在Gilson，1″C18柱上，用梯度洗脱液0.01％TFA缓冲的乙腈/水 5％-50％洗脱10分钟，然后50％-95％洗脱3.5分钟)纯化。合并含有 产物的部分，冷冻干燥，得到标题化合物(17mg，23％)，为白色固体。 NMR：7.20(s，2H)，7.60(d，1H)，7.72(d，2H)，7.95(d，2H)，8.18(d，1H)， 8.62(d，1H)，8.85(s，1H)，9.28(s，1H)，10.01(s，1H)，10.20(s，1H)；m/z： 368[MH]+。

实施例2

2-(4-{N-[2-(二甲基氨基)乙基]氨磺酰基}苯胺基)-4-(咪唑并[1，2a]吡嗪- 3-基)嘧啶

将2-(4-磺酰基苯胺基)-4-(咪唑并[1，2a]吡嗪-3-基)嘧啶(方法4； 67mg，0.181mmol)溶于乙腈(1ml)和环丁砜(1ml)中，然后在氮气下搅 拌。加入磷酰氯(67μt，0.724mmol)和N，N-二甲基乙酰胺(10μl)。将该 反应化合物加热回流30分钟，使之冷却，通过蒸发除去挥发物。将 生成的溶液置于氮气下，缓慢加入三乙胺(252μl，1.81mmol)和1，1-二 甲基乙二胺(40μl，0.362mmol)的甲醇(2ml)的无水溶液。将该混合物 于室温下放置30分钟，然后加入二氯甲烷(15ml)和水(15ml)。分离水 层，通过小心加入2M氢氧化钠水溶液调节至pH9。生成的沉淀经 过滤收集，用水(2×15ml)和乙醚(3×15ml)洗涤，经五氧化二磷干燥16 小时，得到标题化合物(16mg，20％).NMR：2.1(s，6H)，2.3(t，2H)，2.8(t， 2H)，7.3(br s，1H)，7.5(d，1H)，7.75(d，2H)，7.95(d，2H)，8.2(d，1H)，8.6 (d，1H)，8.8(s，1H)，9.3(s，1H)，9.95(d，1H)，10.2(s，1H)；m/z：440 [MH]+。

实施例3

2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基]苯胺基)-4-(咪唑并[1，2a]吡嗪-3-基) 嘧啶

将亚硫酰氯(6ml)和DMF(10μl)加入到2-(4-磺酰基苯胺基)-4-(咪 唑并[1，2a]吡嗪-3-基)嘧啶(方法4；110mg，0.299mmol)中，于室温下将 该混合物搅拌12小时。通过蒸发除去挥发物，将残留物在氮气下放 置。顺次直接加入无水吡啶(7ml)和2-甲氧基乙胺(26μl，0.299mmol)， 于室温下搅拌该混合物3小时。通过蒸发除去挥发物，残留物经柱 层析纯化，用二氯甲烷/甲醇(100∶0极性逐渐增大至95∶5)洗脱，得 到标题化合物(6mg，5％)，为白色固体。NMR：2.9(t，2H)，3.2(s，3H)，3.4 (t，2H)，7.5(t，1H)，7.7(d，1H) 7.8(d，2H) 7.95(d，2H)，8.2(d，1H)，8.6(d， 1H)，8.9(s，1H)，9-3(s，1H)，10.0(d，1H)10.2(s，1H)；m/z：426[MH]+。

实施例4

2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2a]嘧啶-3-基) 嘧啶

使2-[4-磺酰基苯胺基]-4-(咪唑并[1，2a]嘧啶-3-基)嘧啶(方法8； 180mg，0.49mmol)溶于乙腈(1ml)和环丁砜(1ml)中，然后在氮气下搅 拌。加入磷酰氯(136μl，1.46mmol)和N，N二甲基乙酰胺(1.8μl)，于室 温下搅拌该反应混合物4小时，然后加热回流30分钟，使之冷却， 通过蒸发除去挥发物。生成的溶液置于氮气下，加入2-甲氧基乙胺 (85μl，0.978mmol)、三乙胺(204ml，1.47mmol)的甲醇(5ml)溶液，于室 温下搅拌该混合物1小时。生成的固体经过滤收集，用乙醚(3×20ml) 洗涤，干燥得到标题化合物(89mg，43％).NMR：2.9(dd，1H)，3.08(m， 2H)，3.18(s，3H)，3.3(t，2H)，7.56(d，1H)7.77(d，2H)7.98(d，2H)，8.6 (d，1H)，8.86(dd，1H)，8.98(s，1H)，10.3(s，1H)10.54(s，1H)；m/z：426 [MH]+。

实施例5

2-(4-氨磺酰基苯胺基)-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶

将2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶(实施例10；100mg， 0.347mmol)溶于亚硫酰氯(2.0ml)中，搅拌该溶液并冷却至0℃。加入 氯代磺酸(92μl，1.39mmol)，将该反应物于0℃搅拌30分钟，然后于 室温下搅拌1小时，最后于80℃加热90分钟。使该混合物冷却，通 过蒸发除去挥发物。  将2M氨的甲醇溶液(6.0ml)加入到在烧瓶中的 残留物中，于室温下搅拌该混合物1小时。通过蒸发除去挥发物， 将蒸馏水加入到该混合物中，将该残留物搅拌30分钟。经过滤收集 沉淀，用水洗涤，干燥。粗产物用含有微量甲醇的二氯甲烷研磨，过 滤收集，用二氯甲烷/甲醇洗涤，干燥得到标题化合物(81mg，64％)， 为白色固体。NMR：7.1(s，2H)，7.45(d，1H)，7.8(d，2H)，8.03(m，3H)， 8.32(d，1H)，8.64(m，2H)，8.8(d，1H)；10.05(s，1H)；m/z：368[MH]+

实施例6

2-[4-(N-甲基氨磺酰基)苯胺基]-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶

通过在实施例5中描述的方法，处理2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶(实施例10；100mg，0.347mmol)，得到粗品磺酰氯，将 其用2.0M甲胺的甲醇(6.0ml)溶液处理，按在实施例5中所述对反应 物进行后处理，得到标题化合物(78mg，59％)，为白色固体。NMR：2.4 (d，3H)，7.16(q，1H)，7.45(dd，1H)，7.75(d，2H)，8.07(m，3H)，8.33(d， 1H)，8.67(m，2H)，8.8(d，1H)；10.11(s，1H)；m/z：380[M-H]

实施例7

2-{N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基) 嘧啶

通过在实施例5中描述的方法，处理2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶(实施例10；100mg，0.347mmol)，得到粗品磺酰氯，将 其用2-甲氧基乙胺(0.452ml)的甲醇(1.0ml)溶液处理，按在实施例5 中所述对反应物进行后处理，得到标题化合物(39mg，26％)，为白色 固体。NMR(DMSO d6+d4乙酸)：2.87(t，2H)，3.15(s，3H)，3.27(t，2H)， 7.4(dd，1H)，7.74(d，2H)，8.05(m，3H)，8.3(d，1H)，8.64(m，2H)，8.76 (d，1H).m/z：424[M-H]

实施例8

2-[4-(N-(3-二甲基氨基丙基)氨磺酰基)苯胺基]-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶

通过在实施例5中描述的方法，处理2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶(实施例10；100mg，0.347mmol)，得到粗品磺酰氯，将 其用3-二甲基氨基丙胺(87μl)、二甲基乙胺(2.16ml)的甲醇(4.0ml)溶 液处理，将生成的悬浮液于室温下搅拌90分钟。蒸发除去挥发物，将 蒸馏水加入到该残留物中，将该混合物搅拌30分钟。生成的沉淀经 过滤收集，用蒸馏水洗涤，干燥。使溶于DMF中的粗产物在用甲醇 预平衡的10g氨基恒流柱上纯化。用甲醇洗脱该产物，用乙醚/乙酸 乙酯研磨纯产物，过滤收集，用乙醚洗涤，干燥得到标题化合物(53mg， 26％)，为白色固体。NMR：1.48(m，2H)，2.03(s，6H)，2.13(t，2H)，2.75(t， 2H)，7.33(s，1H)，7.45(dd，1H)，7.73(d，2H)，8.07(m，3H)，8.33(d，1H)， 8.65(s，1H)，8.68(d，1H)，8.8(d，1H)， 10.11(s，1H)；m/z：451[M-H]-。

实施例9

2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2a]吡嗪-3-基)嘧啶

使3-(3-二甲基氨基丙-2-烯-1-酰基)咪唑并[1，2a]吡嗪(方法3； 400mg，1.85mmol)、苯基胍碳酸氢盐(365mg，1.85mmol)和甲醇钠 (199mg，3.7mmol)溶于无水二甲基乙酰胺(15ml)中，在氮气下，将该 混合物于160℃加热2小时。使反应混合物冷却，加入乙酸(212μl， 3.7mmol)，将该混合物小心地倾入到冰-水(40ml)中。使冰熔化，水 溶液用二氯甲烷(2×20ml)提取。合并提取物，干燥，通过蒸发除去 溶剂，得到标题化合物(392mg，72％)，为棕色固体。NMR：7.0(t，1H)， 7.35(t，2H)，7.48(d，1H)，7.75(d，2H)，8.1(d，1H)，8.52(d，1H)，8.88(s， 1H)，9.21(s，1H)，9.86(s，1H)，9.98(d，1H)；m/z：299[MH]+。

实施例10

2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶

在氮气下，使3-(3-二甲基氨基丙-2-烯-1-酰基)咪唑并[1，2b]哒嗪 (方法17；600mg，2.78mmol)、苯基胍碳酸氢盐(603mg，3.06mmol)和甲 醇钠(300mg，5.56mmol)悬浮于无水二甲基乙酰胺(25ml)中，搅拌该混 合物，于160℃加热2小时。然后于室温下搅拌该反应物20小时， 然后再加入苯基胍碳酸氢盐(273mg)和甲醇钠(150mg)，将该反应物于 160℃搅拌2小时。使反应物冷却至室温，加入乙酸(0.5ml)，通过蒸 发除去挥发物。将水加入到该残留物中，搅拌生成的悬浮液30分钟。 过滤收集产物，用水洗涤，干燥得到标题化合物(705mg，88％)，为棕 色固体。NMR：6.96(t，1H)，7.33(m，2H)，7.42(dd，1H)，7.85(d，2H)， 7.97(d，1H)，8.30(d，1H)，8.55(s，1H)，8.61(d，1H)，8.77(d，1H)，9.63(s， 1H).m/z：289[MH]+。

实施例11

2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2a]嘧啶-3-基)嘧啶

按实施例9中所述，处理3-(3-二甲基氨基丙-2-烯-1-酰基)咪唑并 [1，2a]嘧啶(方法7；450mg，2.08mmol)，得到粗产物，用乙醚研磨得到 标题化合物，为异构体混合物中的主要成分(70％)，2-苯胺基-4-(咪唑 并[1，2a]嘧啶-2-基)嘧啶(392mg，65％)。NMR：7.0(t，1H)，7.26(dd，1H)， 7.34(t，2H)，7.73(d，2H)，8.46(d，1H)，8.69(dd，1H)，8.76(s，1H)，9.67 (s，1H)，10.38(d，1H)。

实施例12

2-(2-氟代苯胺基)-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶

将3-(3-二甲基氨基丙-2-烯-1-酰基)咪唑并[1，2b]哒嗪(方法17，1.0g， 4.63mmol)、2-氟代苯基胍碳酸氢盐(方法25；1.1g，5.09mmol)和甲醇钠 (550mg，10.2mmol)悬浮于DMA(42ml)中，搅拌该混合物，并于140 ℃加热5.5小时。使该混合物冷却至室温，然后加入乙酸(0.33ml)， 通过蒸发除去挥发物。该残留物用水研磨，过滤收集产物，用水洗涤， 干燥，得到标题化合物(406mg，29％)，为棕色固体。NMR：7.13(m，1H)， 7.2(m，2H)，7.4(dd，1H)，7.93(m，2H)，8.8(d，1H)，8.43(s，1H)，8.58(d， 1H)，8.77(d，1H)，9.05(s，1H)；m/z：307[MH]+。

实施例13

2-苯胺基-4-(2-甲基咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶

将3-(3-二甲基氨基丙-2-烯-1-酰基)-2-甲基咪唑并[1，2b]哒嗪(方法 1 8；1.5g，6.52mmol)、苯基胍碳酸氢盐(1.41g，7.17mmol)和甲醇钠 (704mg，13.04mmol)悬浮于二甲基乙酰胺(62ml)中，搅拌该混合物， 并于160℃加热2.5小时。使该混合物冷却，再加入苯基胍碳酸氢盐 (642mg，3.25mmol)和甲醇钠(352mg，6.52mmol)，于160℃将反应混合 物再加热2小时。使该混合物冷却至室温，加入乙酸(1.16ml)，通过 蒸发除去挥发物。用水研磨，过滤收集沉淀的固体，用水洗涤，干燥， 从甲醇中重结晶，得到标题化合物(785mg，40％)，为淡黄色固体。NMR： 2.77(s，3H)，6.95(t，1H)，7.27(t，2H)，7.35(dd，1H)，7.76(d，2H)，7.83(d， 1H)，8.15(d，1H)，8.58(d，1H)，8.65(d，1H)，9.5(s，IH))；m/z：303 [MH]+。

实施例14-19

通过与在实施例13中所述类似的方法，分别制备下列化合物。

Ex 化合物 NMR M/z 14 1 2-苯胺基-4-(2-乙基咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 1.27(t，3H)，3.27(q，2H)，6.93(t， 1H)，7.27(m，2H)，7.36(dd，1H)， 7.73(m，3H)，8.17(d，1H)，8.57(d， 1H)，8.65(d，1H)，9.48(s，1H) 317 [MH]+ 15 2 2-苯胺基-4-(2-二甲基氨基咪唑 并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 2.98(s，6H)，6.93(t，1H)，7.25(m， 3H)，7.57(d，1H)，7.9(m，3H)，8.45 (d，1H)，8.52(d，1H)，9.55(s，1H) 332 [MH]+ 16 2-苯胺基-4-(5甲氧基咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 4.1(s，3H)，6.95(t，1H)，7.08(d， 1H)，7.32(t，2H)，7.82(d，2H)， 8.0 (d，2H)，8.18(d，1H)，8.40(s，1H)， 8.60(d，1H)，9.60(s，1H) 319 [MH]+ 17 2-苯胺基-4-(5-(2，2，2-三氟乙氧 基)咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 5.18(q，2H)，6.95(t，1H)，7.22(d， 1H)，7.32(t，2H)，7.82(d，2H)，7.92 (d，1H)，8.26(d，1H)，8.42(s，1H)， 8.61(d，1H)，9.6(s，1H) 387 [MH]+ 18 2-苯胺基-4-(6，7-二甲基咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 2.39(s，3H)，2.58(s，3H)，6.95(t， 1H)，7.34(t，2H)，7.88(d，2H)，7.92 (d，1H)，8.45(s，1H)，8.58(m，2H)， 9.58(s，1H) 317 [MH]+ 19 2-苯胺基-4-(6-甲基咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 2.45(s，3H)，6.96(t，1H)，7.32(t， 2H)，7.87(d，2H)，7.92(d，1H)， 8.08(s，1H)，8.48(s，1H)，8.58 (d，1H)，9.48(s，1H) 303 [MH]+

1经层析纯化，用二氯甲烷/甲醇(98.5∶1.5)洗脱NMR：；m/z：。

2经层析纯化，用二氯甲烷/甲醇(98. 2)洗脱

实施例20

2-{2-氟代-4-[N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪 -3-基)嘧啶

将氯代磺酸(109μl，1.64mmol)加入到搅拌的、冷却至0℃的2-(2- 氟代苯胺基)-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶(实施例12；130mg， 0.41mmol)的亚硫酰氯(2.6ml)溶液中。将该反应物于0℃搅拌5分钟， 然后于90℃加热80分钟，使之冷却，通过蒸发除去挥发物。将2-甲 氧基乙胺(0.75ml，8.58mmol)的甲醇(2.0ml)溶液加入到该残留物中， 于室温下搅拌该混合物20小时。通过蒸发除去挥发物，将水加入到 该残留物中，将该混合物搅拌30分钟。生成的沉淀经过滤收集，用 水洗涤，干燥得到标题化合物(217mg，86％)，为白色固体。NMR：2.94 (t，2H)，3.17(s，3H)，3.28(t，2H)，7.43(dd，1H)，7.65(dd，3H)，8.06(d， 1H)，8.32(d，1H)，8.41(t，1H)，8.55(s，1H)，8.66(d，1H)，8.78(d，1H)， 9.45(s，1H)；m/z：444[MH]+。

实施例21

2-(2-氟代-4-氨磺酰基苯胺基)-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-)嘧啶

通过实施例20的方法，处理2-(2-氟代苯胺基)-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶(实施例12；175mg，0.572mmol)，并使之与2.0M氨的 甲醇溶液(4.3ml)反应，得到标题化合物(112mg，51％)，为白色固体。 NMR：7.33(s，2H)，7.45(dd，1H)，7.67(m，2H)，8.07(d，1H)，8.33(m， 2H)，8.53(s，1H)，8.66(d，1H)，8.8(d，1H)，9.45(s，1H)；m/z：386 [MH]+。

实施例22-26

通过与在实施例21中所述类似的方法，制备下列化合物。

Ex 化合物 NMR  M/z 22 1 2-(4-氨磺酰基苯胺基)-4-(2-甲基 咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 2.82(s，3H)，7.13(s，2H)，7.37(dd， 1H)，7.73(d，2H)，7.9(d，1H)，7.97 (d，2H)，8.16(d，1H)，8.65(m，2H)， 9.97(s，1H) 380 [M-H] - 23 2 2-(4-氨磺酰基苯胺基)-4-(2-乙基 咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 1.30(t，3H)，3.27(q，2H)，7.13(s， 2H)，7.38(dd，1H)，7.73(d，2H)， 7.87(d，1H)，7.95(d，2H)，8.2(d， 1H)，8.65(m，2H)，9.97(s，1H) 396 [MH]+ 24 3 2-(4-氨磺酰基苯胺基)-4-(5-甲氧 基咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 4.19(s，3H)，7.09(d，1H)，7.13(s， 2H)，7.78(d，2H)，8.0(d，2H)，8.06 (d，1H)，8.2(d，1H)，8.43(s，1H)， 8.68(d，1H) 398 [MH]+ 25 4 2-(4-氨磺酰基苯胺基)-4-(5- 2，2，2-三氟乙氧基)咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 5.2(q，2H)，7.15(s，2H)，7.24(d， 1H)，7.78(d，2H)，7.98(d，2H)， 8.02(d，1H)，8.3(d，1H)，8.5(s， 1H)，8.7(d，1H)，10.04(s，1H) 466 [MH]+ 26 2-(4-氨磺酰基苯胺基)-4-(6，7-二 甲基咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 2.38(s，3H)，2.47(s，3H)，7.12(s， 2H)，7.78(d，2H)，7.97(d，1H)，8.0 (d，2H)，8.5(s，1H)，8.6(s，1H)， 8.65(d，1H)，10.02(s，1H) 396 [MH]+

1在胺Isolute柱上层析纯化，用甲醇/二氯甲烷(1∶1)洗脱

2通过用二氯甲烷/甲醇研磨纯化

3经硅胶层析纯化，用二氯甲烷/甲醇(99∶1)-(80∶20)(极性逐渐增加) 洗脱

4经在10g氨基Isolute柱上层析纯化，用二氯甲烷/甲醇(1∶1)洗脱

实施例27-38

通过与在实施例20中所述类似的方法，制备下列化合物。

Ex 化合物 NMR M/z 27 2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)氨 磺酰基]苯胺基}-4-(2-甲基 咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧 啶 (DMSOd6/CD3CO2D)∶2.8(s，3H)，2.87 (t，2H)，3.15(s，3H)，3.3(t，2H)，7.36(dd， 1H)，7.7(d，2H)，7.92(d，1H)，7.98(d， 2H)，8.15(d，1H)，8.64(m，2H)，9.97(s， 1H) 438 [M- H]- 28 2-{4-[N-(3-二甲基氨基丙 基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(2- 甲基咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 1.47(m，2H)，2.03(s，6H)，2.13(t，2H)， 2.73(t，2H)，2.8(s，3H)，7.36(m，2H)， 7.67(d，2H)，7.92(d，1H)，8.0(d，2H)， 8.17(d，1H)，8.67(m，2H)，10.0(s，1H) 465 [M-H] 29 2-[4-(N-甲基氨磺酰基)苯胺 基]-4-(2-甲基咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 2.4(d，3H)，2.8(s，3H)，7.17(q，1H)，7.37 (dd，1H)，7.67(d，2H)，7.9(d，1H)，8.0(d， 2H)，8.16(d，1H)，8.65(m，2H)，10.0(s， 1H) 394 [M- H]- 30 2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)氨 磺酰基]苯胺基}-4-(2-乙基 咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧 啶 1.32(t，3H)，2.87(t，2H)，3.15(s，3H)， 3.27(m，4H)，7.38(dd，1H)，7.45(s，1H)， 7.7(d，2H)，7.88(d，1H)，7.98(d，2H)，8.2 (d，1H)，8.65(d，2H)，10.0(s，1H) 453 [MH]+ 31 2-[4-(N-甲基氨磺酰基)苯胺 基]-4-(2-乙基咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 1.33(t，3H)，2.38(d，3H)，3.25(q，2H)， 7.2(q，1H)，7.38(dd，1H)，7.68(d，2H)， 7.9(d，1H)，7.98(d，2H)，8.2(d，1H)，8.63 (m，2H)，9.97(s，1H) 410 [MH]+ 32 1 2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)氨 磺酰基]苯胺基}-4-(2-二甲 基氨基咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 2.85(t，2H)，2.97(s，6H)，3.17(m，5H)， 7.3(dd，1H)，7.45(t，1H)，7.68(m，3H)， 7.97(dd，1H)，8.1(d，2H)，8.49(dd，3H)， 8.58(d，1H)，10.08(s，1H) 469 [MH]+

33 2 2-{4-[N-(2-二甲基氨基乙 基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(5- 甲氧基咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 2.23(s，6H)，2.82(t，2H)，3.0(m，2H)， 4.08(s，3H)，7.08(d，1H)，7.58(br s，1H)， 7.98(d，2H)，8.06(d，2H)，8.1(d，1H)， 8.44(s，1H)，8.68(d，1H)，10.12(s，1H) 469 [MH]+ 34 2-[4-(N-甲基氨磺酰基)苯胺 基]-4-(5-甲氧基咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 2.41(d，3H)，4.08(s，3H)，7.08(d，1H)， 7.2(m，1H)，7.73(d，2H)，8.04(d，2H)， 8.08(d，1H)，8.19(d，1H)，8.45(s，1H)， 8.64(d，1H)，10.07(brs，1H) 412 [MH]+ 35 3 2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)氨 磺酰基]苯胺基}4-(5-甲氧 基咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基) 嘧啶 2.9(t，2H)，3.18(s，3H)，3.28(m，2H)4.1 (s，3H)，7.12(d，1h)，7.43(t，1H)，7.76(d， 2H)，8.04(d，2h)，8.1(d，1H)，8.2(d，1H)， 8.43(s，1H)，8.68(d，1H)，10.07(s，1H) 456 [MH]+ 36 2-{4-[N-(3甲氧基丙基)氨 磺酰基]苯胺基}-4-(5-甲氧 基咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基) 嘧啶 1.6(五重峰，2H)，2.78(q，2H)，3.17(s，3H)， 3.25(t，2H)，4.08(s，3H)，7.08(d，1H)， 7.32(t，1H)，7.75(d，2H)，8.02(d，2H)， 8.08(d，1H)，8.19(d，1h)，8.46(s，1H)， 8.66(d，1H)，10.07(s，1H) 470 [MH]+ 37 4 2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)氨 磺酰基]苯胺基}-4-(6，7-二 甲基咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 2.37(s，3H)，2.56(s，3H)，2.9(t，2H)，3.16 (s，3h)，3.31(t，2H)，7.35(t，1H)，7.75(d， 2H)，8.01(d，1H)，8.05(d，2H)，8.52(s， 1H)，8.48(s，1H)，8.64(d，1H)，9.9(s，1H) 454 [MH]+ 38 5 2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)氨 磺酰基]苯胺基}-4-(6-甲基 咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧 啶 2.49(s，3H)，2.92(q，2H)，3.19(s，3H)， 334(q，2H)，7.47(t，1H)，7.78(d，2H)， 8.04(d，1H)，8.09(d，2H)，8.14(s，1H)， 8.6(s，1H)，8.69(d，1H)，8.74(d，1H)， 10.1(s，1H) 440 [MH]+ 39 6 2-{4-[N-(2-乙氧基乙基)氨 磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 1.04(t，3H)，2.90(q，2H)，3.35(m，4H)， 7.44(m，2H)，7.76(d，2H)，8.08(m，3H)， 8.36(d，1H)，8.66(s，1H)，8.70(d，1H)， 8.80(d，1H)，10.11(s，1H) 440 [MH]+

1经Hypersil BDS C18 21X100mm柱反相层析纯化，用乙腈/水/三氟 乙酸(10∶90∶0.1)-(90∶10∶0.1)(极性降低)洗脱

2用甲醇/乙醚/二氯甲烷研磨

3经硅胶层析纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)，然后用二氯甲烷/2M氨 的甲醇溶液(95∶5)洗脱

4用甲醇研磨

5经硅胶层析纯化，用二氯甲烷/甲醇(97∶3)洗脱

6用甲醇进一步研磨纯化

实施例40

2-{4-[N-(1-甲基环丙-1-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基) 嘧啶

将氯代磺酸(0.22ml，3.3mmol)加入到2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2b]哒 嗪-3-基)嘧啶(实施例10；300mg，1.04mmol)的冷却至5℃的亚硫酰氯 (6ml)溶液中。将该混合物于5℃搅拌30分钟，然后于室温下搅拌1.5 小时，然后加热回流1.5小时。加入1-氨基-1-甲基环丙烷(方法48；2ml) 的异丙醇(10ml)和二甲基乙胺(3ml)溶液，于室温下搅拌该混合物18 小时。蒸发溶剂，残留物经硅胶层析纯化，用二氯甲烷/异己烷(1∶1)(极 性逐渐增大至)二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脱。纯化的产物用乙醚/甲醇研 磨，得到标题化合物(89mg，21％)。NMR：0.16-0.19(m，2H)，0.40-0.44 (m，2H)，0.92(s，3H)，7.25(dd，1H)，7.55-7.60(m，3H)，7.86-7.90(m，3H)， 8.15(d，1H)，8.48(s，1H)，8.53(d，1H)，8.62(d，1H)，9.95(s，1H)；m/z： 422[MH]+。

实施例41-57

通过与在实施例40中所述类似的方法，制备下列化合物。

Ex 化合物 NMR M/z 41 2-{4-[N-(3甲氧基丙基) 氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪 唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧 啶 1.58(quin，2H)，2.78(q，2H)，3.14(s，3H)， 3.22-3.25(m，2H)，7.32(t，1H)，7.44(dd， 1H)，7.75(d，2H)，8.05(s，1H)，8.16(d，2H)， 8.34(s，1H)，8.63(s，1H)，8.68(d，1H)，8.8 (d，1H)，10.12(s，1H) 440 [MH]+ 42 2-[4-(N-丙基氨磺酰基)苯 胺基]-4-(咪唑并[1，2b]哒 嗪-3-基)嘧啶 0.79(t，3H)，1.38(q，2H)，2.69(q，2H)，7.32 (t，2H)，7.45(dd，1H)，7.75(d，2H)，8.04(s， 1H)，8.09(d，2H)，8.34(d，1H)，8.63(s，2H)， 8.68(d，1H)，8.80(d，1H)，10.11(s，1H) 410 [MH]+ 43 2-[4-(N-乙基氨磺酰基)苯 胺基]-4-(咪唑并[1，2b]哒 嗪-3-基)嘧啶 0.96(t，3H)，2.78(q，2H)，7.30(t，1H)，7.43 (dd，1H)，7.75(d，2H)，8.05(s，1H)，8.08(d， 2H)，8.35(d，1H)，8.64(s，1H)，8.69(d，1H)， 8.80(d，1H)，10.11(s，1H) 396 [MH]+ 44 2-[4-(N-烯丙基氨磺酰基) 苯胺基]-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 3.40(t，2H)，5.01(d，1H)，5.15(d，1H)，5.61- 5.70(m，1H)，7.45(dd，1H)，7.56(t，1H)，7.78 (d，2H)，8.04(s，1H)，8.07(d，2H)，8.35(d， 1H)，8.64(s，1H)，8.70(d，2H)，8.80(d，1H)， 10.12(s，1H) 408 [MH]+ 45 2-[4-(N-炔丙基氨磺酰基) 苯胺基]-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 3.64(s，2H)，7.44(dd，1H)，7.78(d，2H)，8.08 (m，3H)，8.34(d，1H)，8.70(d，1H)，8.80(d， 1H)，10.13(s，1H) 406 [MH]+ 46 2-{4-[N-(2-(1-吡唑基)乙 基)氨磺酰基]苯胺基}-4- (咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基) 嘧啶 3.11(q，2H)，4.15(t，2H)，6.20(s，1H)，7.39 (s，1H)，7.44(dd，1H)，7.59(t，1H)，7.65(s， 1H)，7.74(s，2H)，8.08(s，1H)，8.09(d，2H)， 8.32(d，1H)，8.64(s，1H)，8.69(d，1H)，8.80 (d，1H)，10.13(s，1H) 462 [MH]+

47 2-{4-[N-(1，3-二羟基丙- 2-基)氨磺酰基]苯胺基}- 4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 3.01-3.06(m，1H)，3.25-3.35(m，4H)，4H)，4.55(t， 2H)，7.18(d，1H0，7.49(dd，1H)，7.80(dd， 2H)，8.04(s，1H)，8.09(dd，2H)，8.35(d，1H)， 8.68(s，1H)，8.70（d，1H)，8.80(d，1H)，10.15 (s，1H) 442 [MH]+ 48 2-{4-[N-(1-羟基丙-2-基) 氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪 唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧 啶 0.88(d，3H)，3.05-3.12(m，2H)，3.20-3.38 (m，1H)，4.60(s，1H)，7.24(d，1H)，7.44(dd， 1H)，7.77(d，2H)，8.04-8.08(m，3H)，8.35(d， 1H)，8.64(s，1H)，8.68(d，1H)，8.80(d，1H)， 10.11(s，1H) 49 2-{4-[N-(1-甲氧基丙-2- 基)氨磺酰基]苯胺基}-4- (咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基) 嘧啶 0.90(d，3H)，3.05-3.15(m，1H)，3.15(s，3H)， 3.23-3.25(m，2H)，7.40(d，1H)，7.45(dd， 1H)，7.78(d，2H)，8.04-8.09(m，3H)，8.35(d， 1H)，8.64(s，1H)，8.70(d，1H)，8.80(d，1H)， 10.15(s，1H) 50 2-{4-[N-(2-甲基丙-2-基) 氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪 唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧 啶 1.09(s，9H)，7.22(s，1H)，7.44(dd，1H)，7.78 (d，2H)，8.03(s，1H)，8.08(d，2H)，8.34(d， 1H)，8.64(s，1H)，8.70(d，1H)，8.80(d，1H)， 10.09(s，1H) 422 [MH]+ 51 2-{4-[N-(2-二甲基氨基- 乙基)氨磺酰基]苯胺基}- 4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 2.08(s，6H)，2.28(t，2H)，2.82(t，2H)，7.24 (s，1H)，7.42(dd，1H)，7.79(d，2H)，8.06(s， 1H)，8.10(d，2H)，8.35(d，1H)，8.64(s，1H)， 8.70(d，1H)，8.80(d，1H)，10.11(s，1H) 439 [MH]+ 52 2-[4-(N-环丁基氨磺酰基) 苯胺基]-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 1.42-1.50(m，2H)，1.75(q，2H)，1.88-1.95 (m，2H)，3.56-3.64(m，1H)，7.45(dd，1H)， 7.66-7.78(m，3H)，8.02-8.08(m，3H)，8.35 (d，1H)，8.64(s，1H)，8.70(d，1H)，8.80(d， 1H)，10.11(s，1H) 422 [MH]+

53 2-{4-[N-(1，3-二羟基-2- 甲基丙-2-基)氨磺酰基] 苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶 0.98(s，3H) ，3.25-3.31(m，4H)，4.52(t，2H)， 6.72(s，1H)，7.45(dd，1H)，7.80(d，2H)， 8.02-8.10(m，3H)，8.35(d，1H)，8.64(s，1H)， 8.70(d，1H)，8.80(d，1H)，10.10(s，1H) 456 [MH]+ 54 2-[4-(N-环丙基甲基-氨磺 酰基)苯胺基]-4-(咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 0.01-0.08（m，2H)，0.26-0.30(m，2H)，0.70- 0.79(m，1H)，2.59(t，2H)，7.40(dd，1H)，7.72 (d，2H)，8.0(s，1H)，8.02(d，2H)，8.30(d， 1H)，8.60(s，2H)，8.64(d，1H)，8.78(d，1H)， 10.05(s，1H) 422 [MH]+ 55 2-[4-(N-环丙基-氨磺酰 基)苯胺基]-4-(咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶 0.01-0.08(m，2H)，0.10-0.15(m，2H)，1.72- 1.78 (m，1H)，7.10(dd，1H)，7.30(s，1H)， 7.40(d，1H)，7.70-7.78(m，3H)，8.0(d，1H)， 8.33(s，1H)，8.35(d，1H)，8.46(d，1H)，9.8 (s，1H) 408 [MH]+ 56 2-{4-[N-(2-甲氧基乙基)- N-甲基氨磺酰基]苯胺 基}-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪- 3-基)嘧啶 2.71(s，3H)，3.10(t，2H)，3.22(s，3H)，3.42 (t，2H)，7.42(dd，2H)，7.75(d，2H)，8.08(d， 1H)，8.12(d，2H)，8.32(d，1H)，8.68(s，1H)， 8.70(d，1H)，8.80(d，1H)，10.18(s，1H) 440 [MH]+ 57 2-{4-[N-(1-羟基-2-甲基丙 -2-基)氨磺酰基]苯胺基}- 4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 1.2(s，6H)，3.20(d，2H)，4.75(t，1H)，7.09(s， 1H)，7.49(dd，1H)，7.82(d，2H)，8.05(d，2H)， 8.09(d，1H)，8.38(d，1H)，8.68(s，1H)，8.70 (d，1H)，8.85(d，1H)，10.15(s，1H) 440 [MH]+

实施例58

2-{4-[N-(1-甲氧基-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶

将甲醇钠(96g 1.8mmol)加入到在甲醇(5ml)中的2-{4-[N-(2，2-二甲 基环乙亚胺基(aziridyl))磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧 啶(方法46；150mg，0.36mmol)中，将该混合物于50℃加热1.5小时。 通过蒸发除去溶剂，使该残留物溶于乙酸乙酯/甲醇，用水洗涤，干燥 (硫酸镁)，蒸发除去溶剂。粗产物经反相层析纯化，得到标题化合 物(19mg，12％).MR：1.12(s，6H)，1.88(m，2H)，3.15(s，3H)，7.42(d， 1H)，7.77(dd，2H)，8.0-8.05(m，3H)，8.27(d，1H)，6.25(s，1H)，8.64(d， 1H)，8.74(d，1H)；m/z：454[MH]+。

实施例59

2-{4-[N-(2-甲氧基-2-甲基丙-1-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶

实施例58中所述的层析纯化的第二流分给出标题化合物(10mg， 7％)。NMR：1.09(s，6H)，2.65(d，2H)，3.05(s，3H)，7.25(t，1H)，7.46(dd， 1H)，7.78(d，2H)，8.05-8.10(m，3H)，8.30(d，1H)，8.64(s，1H)，8.，68(d， 1H)，8.80(d，1H)，10.1(s，1H)；m/z：454[MH]+。

实施例60

2-{4-[N-(1-(吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶

将在吡咯烷(4ml)中的2-{4-[N-(2，2-二甲基环乙亚胺基)磺酰基]苯 胺基}-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶(方法46；150mg，0.35mmol)于50 ℃搅拌并加热2小时，然后于室温下搅拌65小时。蒸发挥发物，使 该残留物溶于乙酸乙酯/甲醇中，用水洗涤，干燥(硫酸钠)。蒸发除去 溶剂，将该残留物用乙醚处理，得到标题化合物(96mg，55％).NMR： 1.05(s，6H)，1.58-1.63(m，4H)，2.43(s，2H)，2.53-2.58(m，4H)，6.96(s， 1H)，7.44(dd，1H)，7.79(d，2H)，8.05(d，2H)，8.07(d，1H)，8.36(d，1H)， 8.64(s，1H)，8.69(d，1H)，8.80(d，1H)，10.08(s，1H)；m/z：493[MH]+。

实施例61

2-{4-[N-(1-甲硫基-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶

将2-{4-[N-(2，2-二甲基环乙亚胺基)磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶(方法46；150mg，0.36mmol)和甲基ethiolate钠 (125mg，1.8mmol)在DMF(4ml)中的混合物于80℃加热18小时。通 过蒸发除去溶剂，使该残留物溶于乙酸乙酯/甲醇中，用水洗涤，干燥(硫 酸镁)，蒸发溶剂。该残留物用乙醚研磨，得到标题化合物(90mg， 54％)。NMR：1.15(s，6H)，2.10(s，3H)，2.65(s，2H)，7.40(s，1H)，7.50(dd， 1H)，7.82(d，2H)，8.08-8.1(m，3H)，8.39(d，1H)，8.69(s，1H)，8.73(d， 1H)，8.80(d，1H)，10.15(s，1H)；m/z：470[MH]+。

实施例62

2-{4-[N-(1-吗啉代-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b] 哒嗪-3-基)嘧啶

将2-{4-[N-(2，2-二甲基环乙亚胺基)磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并 [1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶(120mg，0.29mmol)在吗啉(5ml)中加热回流3小 时。蒸发溶剂，使该残留物溶于乙酸乙酯/甲醇中，用水洗涤，干燥(硫 酸镁)，蒸发溶剂。将该残留物用乙醚处理，得到标题化合物(50mg， 35％)。NMR：1.05(s，6H)，2.29(s，2H)，2.43-2.50(m，4H)，3.48-3.52(m， 4H)，7.04(s，1H)，7.43(dd，1H)，7.78(d，2H)，8.02-8.08(m，3H)，8.35(d， 1H)，8.64(s，1H)，8.71(d，1H)，8.80(d，1H)，10.08(s，1H)。

实施例63

2-{4-[N-(1，3-二甲氧基丙-2-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪 -3-基)嘧啶

于5℃下，将氯代磺酸(0.23ml，3.3mmol)加入到2-苯胺基-4-(咪唑 并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶(实施例10；300mg，1.04mmol)的亚硫酰氯(6ml) 溶液中。将该混合物于5℃搅拌30分钟，然后于室温下搅拌1小时， 最后加热回流1.5小时。使该混合物冷却至室温，将1，3-二甲氧基-2- 氨基丙烷(方法57；14mmol)的乙醇(20ml)和二甲基乙胺(1ml)溶液加入 到残留物中，于室温下搅拌该混合物18小时。通过蒸发除去挥发物， 用水研磨该残留物，过滤收集固体产物，然后于60℃真空干燥，得 到标题化合物(322mg，66％)。NMR：3.10(s，6H)，3.21(d，4H)，7.42-7.58 (m，2H)，7.78(d，2H)，8.02-8.08(m，3H)，8.35(d，1H)，8.65-8.70(m，2H)， 8.80(d，1H)，10.09(s，1h)；m/z：470[MH]+。

实施例64-66

通过与在实施例63中所述类似的方法，制备下列化合物。

Ex 化合物 NMR M/z 64 1 2-{4-[N-(1-乙氧基丙-2- 基)氨磺酰基]苯胺基}-4- (咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 0.90(d，3H)，1.05(t，3H)，3.08-3.12(m，1H)， 3.22-3.30(m，4H)，7.39(d，2H)，7.45(dd，1H)， 7.79(d，2H)，8.03-8.09(m，3H)，3.35(d，1H)， 8.64(s，1H)，8.70(d，1H)，8.80(d，1H) 454 [MH]+ 65 2 2-{4-[N-(1-丙氧基丙-2- 基)氨磺酰基]苯胺基}-4- (咪唑并[1，2b]哒嗪-3- 基)嘧啶 0.79(t，3H)，0.94(d，3H)，1.40(q，2H)，3.08- 3.12(m，1H)，3.18-3.20(m，2H)，7.38(d，1H)， 7.43(dd，1H)，7.78(d，2H)，8.03-8.09(m，3H)， 8.36(d，1H)，8.62(s，1H)，8.68(d，1H)，8.81(d， 1H)，10.11(s，1H) 468 [MH]+ 66 3 2-{4-[N-(1，3-二乙氧基 丙-2-基)氨磺酰基]苯胺 基}-4-(咪唑并[1，2b]哒 嗪-3-基)嘧啶 0.99(t，6H)，3.23-3.31(m，9H)，7.42-7.51(m， 2H)，7.78(d，2H)，8.02-8.09(m，3H)，8：34(d， 1H)，8.62(s，1H)，8.70(d，1H)，8.80(d，1H)， 10.08(s，1H) 498 [MH]+

11-乙氧基-2-氨基丙烷(方法54)作为起始原料，经层析纯化，用二氯甲 烷/异己烷(1∶1)极性逐渐增大至二氯甲烷/甲醇(97∶3)洗脱

21-丙氧基-2-氨基丙烷(方法55)作为起始原料，经硅胶层析纯化，用二 氯甲烷/甲醇(100∶0)极性逐渐增大至(95∶5)洗脱

31，3-二乙氧基-2-氨基丙烷(方法56)作为起始原料，经硅胶层析纯化， 用二氯甲烷/异己烷(1∶1)极性逐渐增大至二氯甲烷/甲醇(98.5∶1.5)洗 脱

起始原料的制备

用于以上实施例的起始原料或者是可市售获得的，或者通过标准 方法从已知原料容易地制备。例如，下列反应用于说明，但不限定 上述反应所用的某些起始原料的制备。

方法1

3-(1-羟基乙基)咪唑并[1，2a]吡嗪

在氮气下，将无水中性氧化铝(活度1)(28.5g)加入到搅拌的2-氨 基吡嗪(2.85g，30mmol)的无水二氯甲烷(100ml)溶液中。加入2，3-环氧 丁醇(5.58g，30mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液，将反应混合物搅拌18 小时。过滤反应混合物，用二氯甲烷(100ml)和甲醇/二氯甲烷(1∶1， 100ml)洗涤氧化铝滤饼。合并滤液，通过蒸发除去挥发物(保持浴温 低于40℃)。生成的粗品黄色油状物用二氯甲烷研磨，过滤收集固体， 得到标题化合物(586mg，12％)，为浅橙色固体。NMR1.6(d，3H)，5.18 (五重峰，1H)，5.5(d，1H)，7.7(s，1H)，7.88(d，1H)，8.5(d，1H)，9.0(s， 1H)。

方法2

3-乙酰基咪唑并[1，2a]吡嗪

使3-(1-羟基乙基)咪唑并[1，2a]吡嗪(方法1；3.87g，23.7mmol)溶于 含有二氧化锰(21.1g，237mmol)的丙酮(30ml)中，于室温下搅拌72小 时。通过硅藻土垫过滤该溶液，用丙酮(4×50ml)洗涤，然后用甲醇(3× 50ml)洗涤。通过蒸发从滤液中除去溶剂。该残留物经柱层析纯化， 用甲醇洗脱/二氯甲烷(0∶100极性逐渐增大至10∶90)洗脱，得到标题 化合物(349mg，10％)，为纯净的白色结晶固体。NMR；2.60(s，1H)，8.22 (d，1H)，8.75(s，1H)，9.35(m，2H)。

方法3

3-(3-二甲基氨基丙-2-烯-1-酰基)咪唑并[1，2a]吡嗪

在氮气下，将3-乙酰基咪唑并[1，2a]吡嗪(方法2；340mg，2.11mmol) 和DMFDMA(20ml)加热回流18小时。使该混合物冷却，蒸发除去 溶剂。该残留物用乙醚研磨，过滤收集，干燥得到标题化合物(406mg， 89％)，为深红色固体。

NMR：2.91(br s，3H)3.15(br s，3H)，5.4(d，1H)，7.75(d，1H)，8.18(d， 1H)，8.6(s，1H)，9.19(s，1H)，9.55(dd，1H)；m/z：218[MH]+。

方法4

2-[4-磺酰基苯胺基]-4-(咪唑并[1，2a]吡嗪-3-基)嘧啶

将2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2a]吡嗪-3-基)嘧啶(实施例9；350mg， 1.22mmol)分批加入到搅拌并用冰浴冷却维持温度＜25℃的浓硫酸 (6ml)中。使反应混合物冷却至室温，搅拌1小时。然后将该混合物 小心倾入到冰-水(150ml)中，使冰熔化。小心地依次加入氢氧化钠颗 粒和1M氢氧化钠水溶液，以将该溶液从pH0.5调节至pH2。于室 温下将该混合物搅拌18小时，过滤收集产生的沉淀，用水洗涤(2× 15ml)，干燥。粗产物用二氯甲烷研磨，再经过滤收集，然后用二氯 甲烷/甲醇(1∶1)研磨，过滤收集，干燥得到标题化合物(191mg，52％)。 NMR：7.54(d，1H)，7.60(d，2H)，7.64(d，2H)，8.15(d，1H)，8.54(d，1H)， 8.81(s，1H)，9.95(br s，1H)；m/z：367[M-H]-。

方法5

3-(1-羟基乙基)咪唑并[1，2a]嘧啶

通过在方法1中描述的方法，处理2-氨基嘧啶(2.85g，30mmol)， 得到粗产物，将其在中性氧化铝(活度3)上经柱层析纯化，用二氯甲 烷/甲醇(100∶0极性逐渐增大至95∶5)洗脱，得到标题化合物(662mg， 14％)。NMR：1.59(d，3H)，5.12(五重峰，1H)，5.39(d，1H)，7.15(dd，1H)， 7.60(s，1H)，8.53(dd，1H)，8.96(dd，1H)；m/z：164[MH]+。

方法6

3-乙酰基咪唑并[1，2a]嘧啶

如方法2中所述，用二氧化锰(3.44g，38.7mmol)处理3-(1-羟基乙 基)咪唑并[1，2a]嘧啶(方法5；630mg，3.87mmol)，但无须层析纯化， 得到标题化合物(379mg，60％)，淡黄色固体。

NMR：2.56(s，3H)，7.29(t，1H)，8.76(s，1H)，8.80(m，1H)，9.78(dd， 1H)。

方法7

3-(3-二甲基氨基丙-2-烯-1-酰基)咪唑并f1 2a]嘧啶

如方法3中所述，处理3-乙酰基咪唑并[1，2a]嘧啶(方法6；370mg， 2.29mmol)，得到标题化合物(479mg，96％)。NMR：2.94(br s，1H），3.15 (br s，3H)，5.83(d，1H)，7.22(dd，1H)，7.70(s，1H)，8.60(s，1H)，8.68(dd， 1H)，8.96(dd，1H)；m/z：217[MH]+。

方法8

2-[4-磺酰基苯胺基]-4-(咪唑并[1，2a]嘧啶-3-基)嘧啶

如方法4中所述，处理2-苯胺基-4-(咪唑并[1，2a]嘧啶-3-基)嘧啶 (70％的带有2苯胺基-4-(咪唑并[1，2a]嘧啶-2-基)嘧啶的异构体混合物) (实施例11；392mg，1.36mmol)，得到标题化合物，为在带有2-[4-磺 酰基苯胺基]-4-(咪唑并[1，2a]嘧啶-2-基)嘧啶的异构体混合物(363mg， 73％)的主要成分(70％)。NMR：7.47(d，1H)，7.45-7.7(m，5H)，8.57(d， 1H)，8.93(dd，1H)，9.02(s，1H)，9.82(s，1H)，10.4(d，1H)。

方法9

5-氯代咪唑并[1，2b]哒嗪

将3-氨基-6-氯代哒嗪(5.0g，38.6mmol)和氯代乙醛(5.9ml 7.9M的 水溶液，46.3mM)在1-丁醇(37ml)中的混合物于120℃加热20小时。 使反应物冷却至室温，过滤收集结晶的固体，用少量1-丁醇和乙醚先 后洗涤。使该固体溶于水(50ml)中，通过小心滴加40％氢氧化钠水溶 液，将该溶液调节至pH10。生成的悬浮液用乙酸乙酯提取。合并有 机提取物，用饱和盐水洗涤，干燥(硫酸钠)，通过蒸发除去挥发物。 该残留物用异己烷研磨，过滤收集，用异己烷洗涤，干燥得到标题化 合物(4.35g，74％)，为浅棕色固体。NMR：7.33(d，1H)，7.83(s，1H)，8.20 (d，1H)，8.32(s，1H)；m/z：154[MH]+。

方法10

咪唑并[1，2b]哒嗪

在氢气气氛下，将5-氯代咪唑并[1，2b]哒嗪(方法9；5.82g，     37.9mmol)、三乙胺(5.28ml，37.9mmol)和5％披钯碳(300mg)在乙酸乙 酯(233ml)中的混合物剧烈搅拌，直至氢气吸收停止。通过硅藻土垫 过滤反应混合物。滤垫用乙酸乙酯洗涤，通过蒸发除去挥发物。用 冰冷的戊烷研磨残留物，过滤收集，用少量冷戊烷洗涤，干燥得到标 题化合物(3.65g，81％)，为白色固体。NMR(CDCl3)：7.03(dd，1H)，7.78 (s，1H)，7.95(m，2H)，8.30(d，1H)；m/z：120[MH]+。

方法11

3-溴代咪唑并[1，2b]哒嗪

将N-溴代琥珀酰亚胺(2.7g，15.1mmol)加入到咪唑并[1，2b]哒嗪 (方法10；1.8g，15.1mmol)的氯仿(15ml)溶液中，将该混合物搅拌并加 热回流20分钟。使反应混合物冷却至室温，加入饱和碳酸钠水溶液 (15ml)，剧烈搅拌该混合物。加入更多的氯仿和水，以溶解沉淀的固 体。分离有机层，干燥(硫酸钠)，蒸发除去溶剂。该残留物从乙醇(50mL) 中重结晶，过滤收集，用冷乙醇洗涤，干燥得到标题化合物(2.61g， 88％)，为灰白色固体。NMR(CDC13)：7.10(dd，1H)，7.80(s，1H)，7.95 (d，1H)，8.47(d，1H)；m/z：198[MH]+。

方法12-13

通过与方法11中所述类似方法，制备以下化合物，但使它们在 室温下反应4小时。

方法 化合物 NMR M/z SM 12 3-溴代-5-甲氧基咪唑并[1，2b] 哒嗪 3.99(s，3H)，6.94(d，1H)， 7.71(s，1H)，8.02(d，1H) 230 [MH]+ 方法 41 131 3-溴代-5-(2，2，2-三氯乙氧基) 咪唑并[1，2b]哒嗪 5.08(q，2H)，7.12(d，H)， 7.8(s，H)，8.16(d，1H) 298 [MH]+ 方法 42

1从乙酸乙酯/异己烷中重结晶

方法14

3-乙酰基咪唑并[1，2b]哒嗪

于-40℃、氮气下，用5分钟将异丙基溴化镁(12.5ml的1M的THF 溶液，12.5mmol)滴加到搅拌的3-溴代咪唑并[1，2b]哒嗪(方法11；1.98g， 10mmol)的无水THF(100ml)溶液中。于-40℃下，将该反应混合物搅 拌105分钟，然后加入无水N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(1.65ml， 16mmol)。于-40℃再搅拌该混合物30分钟，然后使温热至室温，再 搅拌90分钟。加入乙酸(1.26ml)，然后蒸发除去挥发物。使残留物 分配于二氯甲烷(120ml)和水(30ml)之间。分离各层，用二氯甲烷提取 水层。合并有机层，干燥(硫酸钠)，通过蒸发除去挥发物。该残留物 用乙醚和异己烷研磨，过滤收集，用异己烷洗涤，干燥得到标题化 合物(1.25g，78％)，为棕色固体。NMR(CDCl3)：2.75(s，3H)，7.27(dd， 1H)，8.08(d，1H)，8.45(s，1H)，8.62(d，1H)；m/z：162[MH]+。

方法15-16

通过与方法14中所述类似方法，制备以下化合物。

方法 化合物 NMR M/z SM 151 3-乙酰基-5-甲氧基咪唑 并[1，2b]哒嗪 2.64(s，3H)，4.0(s，3H)，7.15(d， 1H)，8.17(d，1H)，8.3(s，1H) 192 [MH]+ 方法 12 162  3-乙酰基-5-(2，2，2-三氯 乙氧基)咪唑并[1，2b]哒 嗪 2.65(s，3H)，5.10(q，2H)，7.30(d， 1H)，8.27(d，1H)，8.37(s，1H) 方法 13

1从乙酸乙酯/异己烷中重结晶

21∶1的产物和5-(2，2，2-三氯乙氧基)咪唑并[1，2b]哒嗪的混合物

方法17

3-(3-二甲基氨基丙-2-烯-1-酰基)咪唑并[1 2b]哒嗪

将3-乙酰基咪唑并[1，2b]哒嗪(方法14；1.25g，7.76mmol)悬浮于 DMFDMA(32ml)中，在氮气下将该混合物于100℃加热42小时。蒸 发除去过量的乙醛缩二甲醇，该残留物用乙醚和异己烷研磨。过滤 收集产物，用异己烷洗涤，干燥得到标题化合物(1.58g，94％)，为棕 色固体。NMR(CDCl3)：3.00(s，3H)，3.17(s，3H)，6.20(d，1H)，7.13(dd， 1H)，7.92(d，1H)，8.03(d，1H)，8.38(s，1H)，8.50(d，1H)；m/z：217 [MH]+。

方法18-24

通过与方法17中所述类似方法，制备以下化合物。

方法 化合物 NMR M/z SM 18 3-(3-二甲基氨基丙-2-烯 -1-酰基)-2-甲基咪唑并 [1，2b]哒嗪 2.58(s，3H)，2.87(s，3H)，2.9(s， 3H)，6.27(d，1H)，7.27(dd，1H)， 7.73(d，1H)，8.05(d，1H)，8.56(d， 1H) 231 [MH]+ 方法 34 19 3-(3-二甲基氨基丙-2-烯 -1-酰基)-2-乙基咪唑并 [1，2b]哒嗪 1.23(t，3H)，2.87(s，3H0，3.0(q， 2h)，3.13(s，3H)，6.23(d，1h)，7.25 (dd，1h)，7.70(d，1H)，8.07(d，1H)， 8.56(d，1H) 245 [MH]+ 方法 35 20 3-(3-二甲基氨基丙-2-烯 -1-酰基)-5-甲氧基咪唑 并[1，2b]哒嗪 2.9(br s，3H)，3.15(br s，3H)，4.02 (s，3H)，6.43(d，1H)，7.0(d，1H)， 7.8(d，1H)，8.03(s，1h)，8.05(d， 1H) 247 [MH]+ 方法 15 21 3-(3-二甲基氨基丙-2-烯 -1-酰基)-5-(2，2，2-(三氯 乙氧基)咪唑并[1，2b]哒 嗪 2.94(br s，3H)，3.18(br s，3H)，5.16 (q，2H)，6.3(d，1H)，7.18(d，1H)， 7.8(d，1H)，8.14(s，1H)，8.29(d， 1H) 315 [MH]+ 方法 16

22 3-(3-二甲基氨基丙-2- 烯-1-酰基)-6，7-二甲基 咪唑并[1，2b]哒嗪 2.35(s，3H)，2.50(s，3h)，2.95(br s，3H)，3.15(br s，3H)，6.25(d，1H)， 7.75(d，1H)，8.20(s，1H)，8.50(s， 1H) 245 [MH]+ 方法 37 23 3-(3-二甲基氨基丙-2- 烯-1-酰基)-6-甲基咪唑 并[1，2b]哒嗪 2.4(s，3H)，2.90(br s，3H)，3.15(br s，3H)，6.2(d，1H)，7.74(d，1H)， 7.97(s，1H)，8.19(s，1H)，8.56(s， 1H) 231 [MH]+ 方法 38 241 3-(3-二甲基氨基丙-2- 烯-1-酰基)-2-二甲基氨 基咪唑并[1，2b]哒嗪 2.96(s，12H)，5.9(d，1H)，7.13(dd， 1H)，7.53(d，1H)，7.8(d，1H)，8.33 (d，1H) 260 [MH]+ 方法 36

1通过类似的方法，但于100℃加热120小时，通过层析纯化产物，用 二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脱

方法25

2-氟代苯基胍碳酸氢盐

将浓盐酸(6ml)的水(4.8ml)溶液加入到2-氟代苯胺(7.94g， 71.2mmol)和氨腈(6.98g，166mmol)的混合物中，将该混合物于115℃ 加热2.5小时。使反应混合物冷却至室温，通过小心加入40％氢氧化 钠水溶液，将该溶液调节至pH13。用乙酸乙酯提取该水溶液，干燥 (硫酸钠)合并的有机提取物，通过蒸发除去挥发物。使粗产物溶于水 (40ml)中，向该溶液中鼓泡通入二氧化碳气体，直至悬浮液的pH维 持恒定(约pH9)。经过滤收集沉淀的固体，用少量水洗涤，干燥得到 标题化合物(11.95g，78％)，为白色固体。NMR：6.83(m，2H)，7.0(m， 2H)；m/z：154[MH]+.

方法26

N，N-二甲基-N′-(6-氯代哒嗪-3-基)乙脒

使3-氨基-6-氯代哒嗪(1.29g，10mmol)悬浮于无水甲苯(20ml)中， 加入二甲基乙酰胺缩二甲醇(1.46ml，10mmol)。搅拌该混合物并加热 回流3小时，然后于室温下放置18小时。通过过滤从反应混合物中 除去不溶性物质，用乙酸乙酯洗涤滤液。然后蒸发滤液，该残留物 用异己烷研磨，过滤收集固体产物，用异己烷洗涤，得到标题化合物 (1.7g，85％)，为黄色固体。NMR：(CDCl3)2.13(s，3H)，3.1(s，6H)，6.92 (d，1H)，7.25(d，1H)；m/z：199[MH]+。

方法27-28

通过与方法26中所述类似方法，制备以下化合物。

方法 化合物 NMR M/z SM 271 N，N-二甲基-N′-(6-氯代- 4，5-二甲基哒嗪-3-基)乙 脒 2.22(s，3H)，2.24(s，3H)，3.02(s， 3H)，3.1(s，3H)，8.38(s，1H) 213 [MH]+ Com av 282 N，N-二甲基-N′-(6-氯代- 5-甲基哒嗪-3-基)乙脒 2.24(s，3H)，3.0(s，3H)，3.12(s， 3H)，7.1(s，1H)，8.45(s，1H) 199 [MH]+ 方法 43

1于120℃加热7小时

2经柱层析纯化，用异己烷/乙酸乙酯(70∶30极性逐渐增大至90∶10) 洗脱：-

方法29

3-乙酰基-5-氯代-2-甲基咪唑并[1，2b]哒嗪

将氯代丙酮(2.9ml，36.2mmol)加入到粉末状溴化钠(3.73g， 36.2mmol)在乙醇(75ml)中的悬浮液中，于室温下搅拌该混合物2小 时。加热N，N-二甲基-N′-(6-氯代哒嗪-3-基)乙脒(方法26；6.0g， 30.2mmol)，搅拌该悬浮液并加热回流5.5小时。使反应混合物冷却 至室温，通过蒸发除去挥发物。将水(60ml)加入到该残留物中，过滤 收集产生的沉淀，用水洗涤，干燥得到标题化合物(4.93g，79％)，为 淡黄色固体。NMR：2.6(s，3H)，2.7(s，3H)，7.57(d，1H)，8.23(d，1H)； m/z：209[MH]+。

方法30-33

通过与方法29中所述类似方法，制备以下化合物。

方法 化合物 NMR M/z SM 30 3-乙酰基-5-氯代-2-乙基 咪唑并[1，2b]哒嗪 1.23(t，3H)，2.7(s，3H)，3.02(q， 2H)，7.58(d，1H)，8.25(d，1H) 224 [MH]+ 方法 39 311 3-乙酰基-5-氯代-2-二甲 基氨基咪唑并[1，2b]哒 嗪 (CDCl3)：2.78(s，3H)，3.13(s，6H)， 7.13(d，1H)，7.63(d，1H) 239 [MH]+ 方法 40 322 3-乙酰基-5-氯代-6，7-二 甲基咪唑并[1，2b]哒嗪 2.4(s，3H)，2.62(s，3H)，2.65(s， 3H)，8.50(s，1H) 224 [MH]+ 方法 27 333 3-乙酰基-5-氯代-6-甲基 咪唑并[1，2b]哒嗪 2.45(s，3H)，2.6.(s，3H)，8.32(s， 1H)，8.52(s，1H) 210 [MH]+ 方法 28

1用乙腈作为反应溶剂，于65℃加热24小时：-

2用DMF作为反应溶剂，于70℃加热12小时，接着通过SCX离子 交换柱纯化产物，用2N氨的甲醇溶液/二氯甲烷(50∶50)洗脱，从乙 酸乙酯/甲醇中重结晶

3用DMF作为反应溶剂，用碘化内代替溴化钠，于70℃加热12小 时

方法34

3-乙酰基-2-甲基咪唑并[1，2b]哒嗪

在氢气氛下，将3-乙酰基-5-氯代-2-甲基咪唑并[1，2b]哒嗪(方法29； 4.8g，22.9mmol)、三乙胺(3.21ml，22.9mmol)和5％披钯碳(1.6g)在乙酸 乙酯(180ml)中的混合物剧烈搅拌，直至氢气的吸收停止。通过硅藻 土垫过滤反应混合物。滤垫用乙酸乙酯洗涤，通过蒸发除去挥发物。 该残留物用异己烷研磨，过滤收集，用少量异己烷洗涤，干燥得到标 题化合物(3.7g，92％)，为白色固体。NMR：2.6(s，3H)，2.73(s，3H)，7.43 (dd，1H)，8.15(d，1H)，8.67(d，1H)；m/z：176[MH]+。

方法35-38

通过与方法34中所述类似方法，制备以下化合物。

 方法 化合物 NMR M/z SM  35 3-乙酰基-2-乙基咪唑并 [1，2b]哒嗪 1.23(t，3H)，2.73(s，3H)，3.02(q， 2H)，7.43(dd，1H)，8.18(d，1H)， 8.68(d，1H) 190 [MH]+ 方法 30  36 3-乙酰基2-二甲基氨基 咪唑并[1，2b]哒嗪 2.67(s，3H)，3.0(s，6H)，7.35(dd， 1H)，7.93(d，1H)，8.5(d，1H) 205 [MH]+ 方法 31  37 3-乙酰基-6，7-二甲基咪唑 并[1，2b]哒嗪 2.39(s，3H)，2.55(s，3H)，2.65(s， 3H)，8.45(s，1H)，8.78(s，1H) 190 [MH]+ 方法 32  381 3-乙酰基-6-甲基咪唑并 [1，2b]哒嗪 2.44(s，3H)，2.62(s，3H)，8.07(q， 1H)，8.44(s，1H)，8.64(d，1H) 176 [MH]+ 方法 33

1用乙醇作为反应溶剂

方法39

N，N-二甲基-N′-(6-氯代哒嗪-3-基)丙脒(propionamidine)

用15分钟，将磷酰氯(9.32ml，100mmol)的无水甲苯(30ml)溶液滴 加到搅拌的二甲基丙酰胺(10.88ml，100mmol)的无水甲苯(180ml)溶液 中，然后将该混合物于室温下搅拌24小时。加入为固体的3-氨基-6- 氯代哒嗪(12.9g，100mmol)，搅拌该混合物，于85℃加热18小时。 使反应混合物冷却，放置并倾出甲苯层。用更多的无水甲苯洗涤该 残留物，并将其倾出。使该残留物溶于水中，用二氯甲烷提取，通 过小心加入40％氢氧化钠水溶液，将水层调节至pH12。加入二氯甲 烷，过滤该混合物以除去不溶性杂质。分离有机层，用二氯甲烷提 取水层。合并有机提取物，干燥(硫酸钠)，通过蒸发除去挥发物。粗 产物经硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷洗脱/甲醇(96.5∶3.5)洗脱，得到 标题化合物(4.4g，21％)，为棕色油状物。NMR(CDCl3)：1.18(t，3H)， 2.53(q，2H)，3.1(s，6H)，6.93(d，1H)，7.27(d，1H)；m/z：213[MH]+

方法40

通过与方法39中所述类似方法，制备以下化合物。

 方法 化合物 NMR M/z  40 N，N，N′，N′-四甲基-N″-(6- 氯代哒嗪-3-基)胍 (CDCl3)3.0(s，12H)，7.5(d，1H)， 7.67(d，1H) 228[MH]+

方法41

5-甲氧基咪唑并[1，2b]哒嗪

于室温下，将甲醇钠溶液(25％wt的甲醇溶液，56.5g，261.4mmol) 加入到5-氯代咪唑并[1，2b]哒嗪(方法9；10.0g，65.6mmol)的无水甲醇 (100ml)溶液中，将反应混合物搅拌18小时。通过蒸发除去挥发物， 使黄色的油性残留物溶于二氯甲烷(100ml)中。用水洗涤(5×100ml)该 溶液，直至含水的洗液变成为中性。干燥(硫酸镁)该有机溶液，除去 溶剂，得到标题化合物(8.87g，91％)，为淡黄色固体。。NMR：3.92(s， 3H)，6.82(d，1H)，7.59(s，1H)，7.99(d，1H)，8.03(s，1H)；m/z：150 [MH]+。

方法42

5-(2，2，2-三氯乙氧基)咪唑并[1，2b]哒嗪

于室温下，将氢化钠(432mg，10.8mmol)分批加入到2，2，2-三氟乙 醇(10.8mmol)和5-氯代咪唑并[1，2b]哒嗪(1.5g，9.8mmol)的无水DMF (15ml)溶液中，将该混合物搅拌18小时。通过蒸发除去挥发物，使 生成的固体溶于二氯甲烷(20ml)中。用水洗涤(2×15ml)该溶液，干燥 (硫酸镁)有机层，通过蒸发除去溶剂，得到标题化合物(2.05g，92％)， 为淡黄色固体。NMR：5.0(q，2H)，7.0(d，1H)，7.64(s，1H)，8.1(m，2H)； m/z：219[MH]+。

方法43

3-氨基-6-氯代-5-甲基吡嗪

于135℃，将3，6-二氯-5-甲基吡嗪(5g，30.7mmol)在氨的乙醇溶 液(50ml)中的混合物在高压容器中加热8小时。然后通过蒸发除去溶 剂，使该残留物溶于氯仿(40ml)中。用水洗涤(2×25ml)有机溶液，干 燥(硫酸镁)，通过蒸发除去挥发物。粗品固体通过硅胶柱层析半-纯 化，用二氯甲烷/甲醇(95：5)洗脱，得到标题化合物(1.3g，31％)，为带 有其区域异构体的10∶17的混合物。NMR：2.06(s，3H)，2.18(s，3H)，6.2 (br s，4H)，6.74(s，1H)，7.26(s，1H)；m/z：143[MH]+。

方法44

1-(2-氨基乙基)吡唑

将氢氧化钠(22.96g，0.57mol)加入到吡唑(10.88g，0.16mol)的无水 乙腈(80ml)溶液中，于室温下搅拌该混合物30分钟。加入硫酸氢四 丁基铵(2.18g，6.4mmol)和2-氯代乙胺盐酸盐(19.78g，0.172 mole)，将 该混合物加热回流24小时。使该混合物冷却，过滤除去不溶性物质。 通过蒸发从滤液中除去挥发物，将49％溴化氢(30ml)和乙醇(100ml) 顺次加入到该残留物中。将该混合物加热至回流，然后在冰中冷却。 生成的沉淀经过滤收集，用冷乙醇洗涤，得到标题化合物。NMR： 3.20-3.24(m，2H)，4.38(t，2H)，6.30(s，1H)，7.50(s，1H)，7.79(s，1H)， 7.98(s，2H)。

方法45

2-{4-[N-(1-(4-甲苯磺酰基氧基)-2-甲基丙-2基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪 唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶

将4-甲苯磺酰氯(4.44g，0.23mol)加入到2-{4-[N-(1-羟基-2-甲基丙 -2-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b]哒嗪-3-基)嘧啶(实施例57； 3.41g，0.008mol)的吡啶(50ml)溶液中，于室温下搅拌该混合物24小 时。然后用水稀释该混合物，经超声处理。倾出水相，使该残留物 溶于乙酸乙酯/甲醇中。用水洗涤该溶液，干燥(硫酸镁)，通过蒸发除 去溶剂，该残留物用乙醚研磨，得到标题化合物(1.92g，42％)。NMR：1.0 (s，6H)，2.38(s，3H)，3.79(s，2H)，7.40-7.45(m，3H)，7.59(s，1H)，7.65- 7.75(m，4H)，8.05(d，2H)，8.09(d，1H)，8.35(d，1H)，8.66(s，1H)，8.70 (d，1H)，8.80(d，1H)，10.13(s，1H)。

方法46

2-{4-[N-(2，2-二甲基环乙亚胺基)氨磺酰基}苯胺基)-4-(咪唑并[1，2b]哒 嗪-3-基)嘧啶

将碳酸钾(57mg，0.4mmol)和丙酮(5ml)顺次加入到2-{4-[N-(1-(4- 甲苯磺酰基氧基)-2-甲基丙-2-基)氨磺酰基]苯胺基}-4-(咪唑并[1，2b]哒 嗪-3-基)嘧啶(方法45；220mg，0.38mmol)中，搅拌该混合物，并加热 回流2小时。冷却该混合物，过滤除去不溶性物质，用丙酮洗涤滤器， 蒸发除去溶剂，得到标题化合物(123mg，77％)，为橙色固体。NMR：1.42 (s，6H)，2.43(s，2H)，7.43(dd，1H)，7.84(d，2H)，8.08-8.12(m，3H)，8.35 (d，1H)，8.68(d，1H)，8.70(d，1H)，8.8(d，1H)，10.2(s，1H)。

方法47

1-(1-甲基环丙烷)甲酰胺

将草酰氯(8.24ml，0.095mol)和DMF(几滴)顺次加入到冷却至5℃ 的1-(1-甲基环丙烷)甲酸(9.42g，0.094mol)的二氯甲烷(150ml)溶液中， 于5℃将该混合物搅拌30分钟，然后于室温下搅拌3小时。通过蒸 发除去溶剂和过量的草酰氯，使该残留物溶于二氯甲烷中，加入冷却 至5℃的氨(过量)的甲醇溶液中。使该混合物温热至室温，通过蒸发 除去挥发物，得到标题化合物。NMR：0.29(q，2H)，0.71(q，2H)，1.02(s， 3H)，6.62(s，1H)，6.85(s，1H)。

方法48

1-氨基-1-甲基环丙烷

于0-5℃下，将溴(2.87ml，0.056mol)加入到氢氧化钠(13.5g， 0.338mol)的水溶液(100ml)中，然后加入1-(1-甲基环丙烷)甲酰胺(5.70g 0.056mol)在水(50ml)中的浆状液，于5℃将该反应混合物搅拌2小时， 然后于室温下放置24小时。然后将该混合物于80℃加热2.5小时，使 之冷却，蒸馏该混合物，得到标题化合物(bp75-80℃)。NMR：0.2(q，2H)， 0.14(q，2H)，0.96(s，3H)，1.42(s，2H)。

方法49

1，3-二甲氧基-2-甲磺酰基氧基丙烷

将三乙胺(5ml，0.036mol)和甲磺酰氯(2.72，0.035mol)顺次缓慢 加入到冷却至5℃的1，3-二甲氧基-2-羟基丙烷(3.84g，0.032mol)的二 氯甲烷(70ml)溶液中，然后于室温下搅拌该混合物24小时。然后将 该混合物吸收到硅胶中，经层析纯化，用二氯甲烷/异己烷(1∶1)洗脱， 得到标题化合物(3.74g，59％)。NMR：3.15(s，3H)，3.28(s，6H)，3.52(d， 4H)，4.78(q，1H)。

方法50-52

通过与方法49中所述类似方法，制备以下化合物。

方法 化合物 NMR 50 1-乙氧基-2-甲磺酰基氧基丙 烷 1.10(t，3H)，1.28(d，3H)，3.14(s，3H)，3.42-3.48 (m，2H)，3.62-3.68(m，2H)，4.78(q，1H) 51 1-丙氧基-2-甲磺酰基氧基丙 烷 0.86(t，3H)，1.28(d，3H)，1.51(q，2H)，3.33-3.40 (m，2H)，3.44(d，2H)，3.69(d，3H)，4.78(q，1H) 52 1，3-二乙氧基-2-甲磺酰基氧基 丙烷 1.12(t，6H)，3.16(s，3H)，3.41-3.45(m，4H)， 3.55(d，4H)，4.75(q，1H)

方法53

1，3-二甲氧基-2-叠氮基丙烷

将1，3-二甲氧基-2-甲磺酰基氧基丙烷(方法49；3.74g，19mmol)和 叠氮化钠(2.03g，31mmol)在DMA(55ml)中于100℃加热8小时，然 后于室温下放置24小时。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取，合 并提取物，用水洗涤，干燥(硫酸镁)，通过蒸发除去挥发物，得到标 题化合物(2.0g，74％)，为澄清油状物。

方法54-56

通过与方法53中所述类似方法，制备以下化合物。

   方法  化合物     SM    54  1-乙氧基-2-叠氮基丙烷     方法50    55  1-丙氧基-2-叠氮基丙烷凝土     方法51    56  1，3-二乙氧基-2-叠氮基丙烷     方法52

方法57

1，3-二甲氧基-2-氨基丙烷

将10％披钯碳(500mg)加入到1，3-二甲氧基-2-叠氮基丙烷(方法53； 2g，0.014mol)的乙醇(40ml)溶液中，于室温、氢气气氛下，搅拌该混 合物6小时。通过硅藻土过滤除去催化剂，用乙醇洗涤滤器垫层， 得到标题化合物的乙醇溶液(20ml)。

方法58-60

通过与方法57中所述类似方法，制备以下化合物。

    方法  化合物     SM     58  1-乙氧基-2-氨基丙烷     方法54     59  1-丙氧基-2-氨基丙烷     方法55     60  1，3-二乙氧基-2-氨基丙烷     方法56

实施例67

以下举例说明在人体中有预防或治疗作用的、含有式(I)的化合 物或其药学上可接受的盐或其体内可水解的酯(在下文中是化合物X) 的代表性的药物剂型：

(a)：片剂I mg/片 化合物X 100 乳糖Ph.Eur 182.75 交联羧甲基纤维素钠 12.0 玉米淀粉糊(5％w/v糊) 2.25 硬脂酸镁 3.0

(b)：片剂II mg/片 化合物X 50 乳糖Ph.Eur 223.75 交联羧甲基纤维素钠 6.0 玉米淀粉 15.0 聚乙烯基吡咯烷酮(5％w/v糊) 2.25 硬脂酸镁 3.0

(c)：片剂III mg/片 化合物X 1.0 乳糖Ph.Eur 93.25 交联羧甲基纤维素钠 4.0 玉米淀粉糊(5％w/v糊) 0.75 硬脂酸镁 1.0

(d)：胶囊剂 mg/胶囊 化合物X 10 乳糖Ph.Eur 488.5 硬脂酸镁 1.5

(e)：注射剂I (50 mg/ml) 化合物X 5.0％w/v 1M氢氧化钠溶液 15.0％v/v 0.1M盐酸 (调节pH至7.6) 聚乙二醇400 4.5％w/v 注射用水 至100％

(f)：注射剂II 10mg/ml 化合物X 1.0％w/v 磷酸钠BP 3.6％w/v 0.1 M氢氧化钠溶液 15.0％v/v 注射用水 至100％

(g)：注射剂III (1mg/ml，缓冲至pH6) 化合物X 0.1％w/v 磷酸钠BP 2.26％w/v 柠檬酸 0.38％w/v 聚乙二醇400 3.5％w/v 注射用水 至100％

注

以上制剂可通过药学领域熟知的常规方法得到。片剂(a)-(c)可通 过常规方式包肠溶衣，例如提供乙酸邻苯二甲酸纤维素包衣。