胰酶的制备方法
专利汇可以提供胰酶的制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及 生物 技术领域，公开了一种胰酶的制备方法，其步骤为胰脏解冻，用含0.1~2%病毒灭活剂的75% 乙醇 浸泡1~6小时，灭活病毒，沥干清洗，预处理的胰脏磨浆后加入 磷酸 三钠以及低浓度 有机 溶剂 ，加 钙 盐激活提取；分离过滤除内毒素等杂质；沉淀；干燥、 粉碎 得到产品。本发明的含过 氧 乙酸的75%乙醇胰脏预处理工艺能够快速渗透动物组织，同时在提取过程中加入 磷酸盐 、钙盐激活剂，形成磷酸钙，能够除去内毒素，更加有效达到病毒灭活目的，工艺简洁容易操作，制备出的胰酶酶活 力 、收率不受影响， 过氧乙酸 残留符合要求，极大增强胰酶药物的安全性。，下面是胰酶的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种胰酶的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
（1）原料预处理：将新鲜或解冻后的完整或切成2 5英寸长条的胰腺原料，浸泡在含0.1~
2%病毒灭活剂的75%乙醇中，2 15℃下浸泡1 6小时；
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（2）磨浆：将预处理后的胰腺原料磨成胰浆；
（3）激活、提取：向胰浆中加入1 2倍浓度为20 30%、pH为3 4的的乙醇水溶液，并加入磷~ ~ ~
酸盐搅拌1 2h，然后加入钙盐，10～15℃下反应提取3 6h，得提取液；
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（4）将所述提取液冷冻离心分离去除杂质，然后经沉淀、脱脂、干燥、粉碎制得胰酶。
2.根据权利要求 1 所述的胰酶的制备方法，其特征在于，在所述步骤（2）中，所述病毒灭活剂为以下任意一种或其组合：
过氧乙酸、过氧化氢、次氯酸钠、过碳酸盐、苯甲酸、丁酸过氧酸。
3.根据权利要求 1 所述的胰酶的制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）中，所述磷酸盐为磷酸钠盐、磷酸钾盐以及磷酸铵盐。
4.根据权利要求 3所述的胰酶的制备方法，其特征在于，加入的所述磷酸盐的量为乙醇水溶液和胰浆总体积的0.5% 1.5%。
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5.根据权利要求 1 所述的胰酶的制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）中，所述钙盐为醋酸钙或氯化钙。
6.根据权利要求 5所述的胰酶的制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）中，加入的所述钙盐的量为乙醇水溶液和胰浆总体积的0.5% 1.5%。
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7.根据权利要求1至6中任一项所述的胰酶的制备方法，其特征在于，在所述步骤（4）中，胰酶沉淀的方法是：提取液冷冻离心得到乳悬液，0 5℃向乳悬液中加入乙醇至含75%乙~
醇浓度，沉淀，收集沉淀得到胰酶。
8.根据权利要求1至6中任一项所述的胰酶的制备方法，其特征在于，在所述步骤（4）中，胰酶脱脂的方法是：向上述胰酶沉淀中加入5倍量的丙酮，0 5℃下脱脂2 3次，脱脂沉淀~ ~
装袋，用螺旋千斤顶压榨至袋内残留物呈块状且无水滴滴出为止，然后再加压 0.5～1小时，得胰酶块状物。
9. 根据权利要求 1 至6中任一项所述的胰酶的制备方法，其特征在于，在所述步骤（4）中，胰酶干燥的条件为 ：维持真空压力500～750mmHg，温度35～45℃，干燥 12～ 24小时。
10. 根据权利要求 1 至6中任一项所述的胰酶的制备方法，其特征在于，所述胰腺原料为胰脏和/或十二指肠。
胰酶的制备方法
技术领域
背景技术
微生物，对于细胞内部的病毒灭活效果十分有限，具有一定的缺陷，而且工艺中灭火病毒没有进行去除步骤，对产品有安全风险。
发明内容
胰浆中加入1 2倍浓度为20 30%、pH为3 4的的乙醇水溶液，并加入磷酸三钠搅拌1 2h，然后~ ~ ~ ~
加入醋酸钙，10～15℃下反应提取3 6h，得提取液；（4）将所述提取液冷冻离心分离去除杂~
质，然后经沉淀、脱脂、干燥、粉碎制得胰酶。
醇具有良好渗透性，使得病毒灭活剂（如过氧乙酸等）和乙醇能够渗透到胰腺细胞内部，有利于病毒灭活剂（如过氧乙酸等）和病毒的充分接触；同时由于75%乙醇对胰脏的自溶起到一定的抑制。因此，本发明在避免发生自溶后的胰脏中加入病毒灭活剂（如过氧乙酸等），从而可以灭活细胞内部的病毒，使得灭活效果更加彻底，同时尽可能避免胰酶活性受到影响。
具体实施方式
（1）鲜冻原料 ：25kg胰脏和十二指肠 ；
（2）原料预处理 ：将鲜冻的原料解冻，浸泡在50L含0.5%过氧乙酸的75%乙醇中，5℃下浸泡6小时，沥干清洗；
（3）磨浆：将预处理后胰脏原料磨成胰浆；
（4）激活、提取：向胰浆中加入50L的pH为3 4的、浓度为25%的乙醇水溶液，按体积加入~
250g的磷酸三钠，搅拌2小时后，加入250g的醋酸钙，在温度为10～15℃下搅拌反应提取6小时；
（5）沉淀：提取液冷冻离心分离取出杂质，收集胰脏提取离心液，离心液加入乙醇至含
75%乙醇浓度，沉淀胰酶，离心收集沉淀；
（6）脱脂干燥：上述沉淀加入5倍量的丙酮0 5℃下脱脂3小时，脱脂沉淀装袋用螺旋千~
斤顶压榨至袋内残留物呈块状且无水滴滴出为止，得胰酶块状物；干燥条件为：维持真空压力500～750mmHg，温度35～45℃，干燥12～24小时；
（7）粉碎 ：将干燥的胰酶用除尘粉碎机粉碎成胰酶粉。
（2）原料预处理：将鲜冻的原料解冻，浸泡在50L含1%过氧乙酸的75%乙醇中，5℃下浸泡
6小时，沥干清洗；
（3）磨浆：将预处理后胰脏原料磨成胰浆；
（4）激活、提取：向胰浆中加入50L的pH为3 4的、浓度为25%的乙醇水溶液，按体积加入~
500g的磷酸三钠，搅拌2小时，加入500g的醋酸钙，在温度为10～15℃下搅拌反应提取6小时；
（5）沉淀：提取液冷冻离心，收集胰脏提取离心液，离心液加入乙醇至含75%乙醇浓度，沉淀胰酶，离心收集沉淀；
（6）脱脂干燥：上述沉淀加入5倍量的丙酮0 5℃下脱脂3小时，脱脂沉淀装袋用螺旋千~
斤顶压榨至袋内残留物呈块状且无水滴滴出为止，得胰酶块状物； 干燥条件为：维持真空压力500～750mmHg，温度35～45℃，干燥12～24小时；
（7）粉碎：将干燥的胰酶用除尘粉碎机粉碎成胰酶粉。
（2）原料预处理：将鲜冻的原料解冻，浸泡在50L含1.5%过氧乙酸的75%乙醇中，5℃下浸泡6小时，沥干清洗；
（3）磨浆：预处理后胰脏原料磨成胰浆；
（4）激活、提取：向胰浆中加入50L的pH为3 4的、浓度为25%的乙醇水溶液，按体积加入~
750g的磷酸三钠，搅拌2小时，加入750g的醋酸钙，温度10～15℃，搅拌反应提取6小时；
（5）沉淀：提取液冷冻离心，收集胰脏提取离心液，离心液加入乙醇至含75%乙醇浓度，沉淀胰酶，离心收集沉淀；
（6）脱脂干燥：上述沉淀加入5倍量的丙酮0 5℃下脱脂3小时，脱脂沉淀装袋用螺旋千~
斤顶压榨至袋内残留物呈块状且无水滴滴出为止，得胰酶块状物；干燥条件为：维持真空压力500～750mmHg，温度35～45℃，干燥12～24小时；
（7）粉碎：将干燥的胰酶用除尘粉碎机粉碎成胰酶粉。
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