技术领域
[0001] 本
发明涉及木槿繁殖领域，尤其涉及一种快速繁育海滨木槿幼苗的方法。
背景技术
[0002] 海滨木槿(Hibiscus hamabo Sieb.et Zucc.)为锦葵科木槿属落叶小乔木，是近年鉴定新种。其树冠浓密，花金黄色，形大而艳丽且花期长，可作为良好的园林绿化树种。除观赏价值外，海滨木槿耐干旱、贫瘠，是贫瘠丘陵山地
水土保持优良树种；而且它极耐盐
碱、水淹，抗海
风，是护堤林和海岸基干林带造林先锋树种。但海滨木槿自然分布狭窄，现仅在我国浙江舟山群岛、福建沿海岛屿等形成小居群，国外仅朝鲜、日本有分布，被列为浙江省珍稀濒危
植物。近年来，随着海滨木槿综合开发利用价值的提高，海滨木槿需求量也在不断加大。因此，加强对其繁育技术的研发对于海滨木槿的开发利用具有重要意义。
[0003] 目前，海滨木槿的繁殖栽培主要采用传统的
播种育苗法，但存在
种子自然萌发率低，且不利于海滨木槿优植株良性状的保持等问题。通过利用扦插技术对海滨木槿进行繁育的研究已有报道，但均以8-10cm长的海滨木槿7-8月份枝条作为繁殖材料，繁殖过程繁琐，且生根时间较长，很难满足规模化繁育海滨木槿优良品种的需求。
[0004] 因此，针对目前海滨木槿繁育过程中所存在的诸多问题，急需开发一种简单、快速且不易受季节和外界环境影响的海滨木槿幼苗繁育技术。
发明内容
[0005] 本发明的目的在于克服
现有技术的不足，提供了一种步骤简单、操作方便、不易受季节和外界环境影响的快速繁育海滨木槿幼苗的方法。
[0006] 本发明是通过以下技术方案实现的：一种快速繁育海滨木槿幼苗的方法，包括如下步骤：
[0007] (1)取材
[0008] 选取野外多年生具有优良农艺性状的海滨木槿当年生健壮枝条作为外植体来源，并剪切成适宜长度且带有1个
腋芽和1片叶子的微茎段，备用；
[0009] (2)外植体的预处理
[0010] 将步骤(1)中的海滨木槿微茎段经流水冲洗后，通过高锰酸
钾溶液进行表面消毒，消毒后阴干表面残留消毒液，备用；
[0011] (3)外植体不定根的诱导处理
[0012] 将步骤(2)中经过消毒处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端置于含有1000-3000mg/L吲哚丁酸的生根促进液中进行不定根的诱导处理；
[0013] (4)外植体的定植
[0014] 将步骤(3)中的经过生根促进液处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端切口插入浇有营养补液的粒径为0.3-0.5mm的沙盘中，以互不重叠为准；
[0015] (5)外植体的成苗管理
[0016] 将步骤(4)中定植后的海滨木槿微茎段盖上塑料膜，于
温室大棚中进行不定根的诱导和成苗培养。
[0017] 作为本发明的优选方式之一，所述步骤(1)中优良农艺性状指具有高产、花期长、抗逆性强中一种或几种的性状。
[0018] 作为本发明的优选方式之一，所述步骤(1)中适宜长度为0.5-2.0cm的长度。
[0019] 作为本发明的优选方式之一，所述步骤(2)中海滨木槿微茎段于流水下冲洗10-20min。
[0020] 作为本发明的优选方式之一，所述步骤(2)中高锰酸钾溶液为1.0-5.0‰(w/v)高锰酸钾消毒溶液。
[0021] 作为本发明的优选方式之一，所述1.0-5.0‰(w/v)高锰酸钾消毒溶液的使用方法为：将待消毒的样品置于1.0-5.0‰(w/v)高锰酸钾消毒溶液中消毒5-10min。
[0022] 作为本发明的优选方式之一，所述步骤(3)中将消毒处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端置于生根促进液中处理10-60s。
[0023] 作为本发明的优选方式之一，所述步骤(4)中将经过生根促进液处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端切口插入浇有营养补液的沙盘中，其插入长度为0.3-1.0cm。
[0024] 作为本发明的优选方式之一，所述步骤(5)中
温室大棚为
温度25-30℃、
相对湿度80-85％的温室大棚。
[0025] 作为本发明的优选方式之一，所述营养补液为不含有机元素的DKW基本培养液。
[0026] 本发明相比现有技术的优点在于：其一，本发明所用的外植体是0.5-2.0cm、携带腋芽的海滨木槿当年生微茎段，一方面，取材方便，材料丰富，且繁育获得的小苗能够保持母本株系的优良特性；另一方面与传统的长8-10cm的扦插枝条相比，极大节约了种质材料，提高了繁殖效率；其二，本发明采用了将微茎段扦插于沙盘中于温室大棚内直接生根，一步成苗；一方面具有繁育速度快，繁育周期短(28天左右就可以获得完整的海滨木槿再生植株)；另一方面也避免了季节、地域等自然因素的影响和限制，适于海滨木槿优良株系的规模化繁育；其三，本发明严格优化并控制生根促进液的成分和浓度，使其成为海滨木槿不定根诱导的最佳浓度；其四，本发明的消毒剂、营养补液以及营养基质等的种类和浓度选择也严格与海滨木槿生长过程中所需的必要元素相配合，同时避免有害元素的引入。
附图说明
[0027] 图1是
实施例1中的一种快速繁育海滨木槿幼苗的方法的海滨木槿微茎段材料图；
[0028] 图2是实施例1中的一种快速繁育海滨木槿幼苗的方法的海滨木槿微茎段不定根的形成图；
[0029] 图3是实施例1中的一种快速繁育海滨木槿幼苗的方法的海滨木槿微茎段成苗图。
具体实施方式
[0030] 下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
[0031] 实施例1
[0032] 本实施例的一种快速繁育海滨木槿幼苗的方法，包括如下步骤：
[0033] (1)取材
[0034] 分别于5至7月上旬，选取野外多年生具有优良农艺性状(具有高产、花期长、抗逆性强中一种或几种的性状)的海滨木槿当年生健壮枝条作为外植体来源，并剪切成0.5cm长，且带有1个腋芽和1片叶子的微茎段，备用；
[0035] (2)外植体的预处理
[0036] 将步骤(1)中的海滨木槿微茎段经流水冲洗10min后，通过1.0‰(w/v)高锰酸钾消毒溶液进行表面消毒，消毒5min后阴干表面残留消毒液，备用；
[0037] (3)外植体不定根的诱导处理
[0038] 将步骤(2)中经过消毒处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端置于含有1000mg/L吲哚丁酸的生根促进液中10s，进行不定根的诱导处理；
[0039] (4)外植体的定植
[0040] 将步骤(3)中的经过生根促进液处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端切口插入浇有营养补液的粒径为0.3mm的沙盘中，以互不重叠为准，插入长度为0.3cm；其中，营养补液为不含有机元素的DKW基本培养液；
[0041] (5)外植体的成苗管理
[0042] 将步骤(4)中定植后的海滨木槿微茎段盖上塑料膜，于温度25℃、相对湿度80％的温室大棚中进行不定根的诱导和成苗培养；培养18d，微茎段腋芽萌发,且微茎段的形态学下端膨大并伴有根原基形成；培养30d，微茎段腋芽的形态学下端产生细长的乳白色不定根，平均每个外植体产生1-2条不定根，且不定根的平均长度为5.0-6.5cm；培养42d，海滨木槿微茎段不定根的诱导率高达92.3％，且成苗率高达91.7％；研究发现，5-7月份取材对海滨木槿茎段的生根率和成苗率均无明显影响。
[0043] 实施例2
[0044] 本实施例的一种快速繁育海滨木槿幼苗的方法，包括如下步骤：
[0045] (1)取材
[0046] 于8月上旬，选取野外多年生具有优良农艺性状(具有高产、花期长、抗逆性强中一种或几种的性状)的海滨木槿当年生健壮枝条作为外植体来源，并剪切成1.0cm长，且带有1个腋芽和1片叶子的微茎段(如图1)，备用；
[0047] (2)外植体的预处理
[0048] 将步骤(1)中的海滨木槿微茎段经流水冲洗15min后，通过3.0‰(w/v)高锰酸钾消毒溶液进行表面消毒，消毒8min后阴干表面残留消毒液，备用；
[0049] (3)外植体不定根的诱导处理
[0050] 将步骤(2)中经过消毒处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端置于含有2000mg/L吲哚丁酸的生根促进液中35s，进行不定根的诱导处理；
[0051] (4)外植体的定植
[0052] 将步骤(3)中的经过生根促进液处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端切口插入浇有营养补液的粒径为0.4mm的沙盘中，以互不重叠为准，插入长度为0.6cm；其中，营养补液为不含有机元素的DKW基本培养液；
[0053] (5)外植体的成苗管理
[0054] 将步骤(4)中定植后的海滨木槿微茎段盖上塑料膜，于温度28℃、相对湿度83％的温室大棚中进行不定根的诱导和成苗培养；培养14d，微茎段腋芽萌发,且微茎段的形态学下端膨大并伴有根原基形成；培养28d，微茎段腋芽的形态学下端产生粗壮的乳白色不定根，平均每个外植体产生2-4条不定根，且不定根的平均长度为3.0-4.0cm(如图2)；培养42d，海滨木槿微茎段不定根的诱导率高达99.3％，且成苗率高达98.7％(如图3)。
[0055] 实施例3
[0056] 本实施例的一种快速繁育海滨木槿幼苗的方法，包括如下步骤：
[0057] (1)取材
[0058] 分别于9-11月上旬，选取野外多年生具有优良农艺性状(具有高产、花期长、抗逆性强中一种或几种的性状)的海滨木槿当年生健壮枝条作为外植体来源，并剪切成2.0cm长，且带有1个腋芽和1片叶子的微茎段，备用；
[0059] (2)外植体的预处理
[0060] 将步骤(1)中的海滨木槿微茎段经流水冲洗20min后，通过5.0‰(w/v)高锰酸钾消毒溶液进行表面消毒，消毒10min后阴干表面残留消毒液，备用；
[0061] (3)外植体不定根的诱导处理
[0062] 将步骤(2)中经过消毒处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端置于含有3000mg/L吲哚丁酸的生根促进液中60s，进行不定根的诱导处理；
[0063] (4)外植体的定植
[0064] 将步骤(3)中的经过生根促进液处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端切口插入浇有营养补液的粒径为0.5mm的沙盘中，以互不重叠为准，插入长度为1.0cm；其中，营养补液为不含有机元素的DKW基本培养液；
[0065] (5)外植体的成苗管理
[0066] 将步骤(4)中定植后的海滨木槿微茎段盖上塑料膜，于温度30℃、相对湿度85％的温室大棚中进行不定根的诱导和成苗培养；培养20d，微茎段腋芽萌发,且微茎段的形态学下端膨大并伴有根原基形成；培养35d，微茎段腋芽的形态学下端产生粗壮的乳白色不定根，平均每个外植体产生4-8条不定根，且不定根的平均长度为1.0-3.0cm；培养42，海滨木槿微茎段不定根的诱导率高达86.5％，且成苗率高达86.5％；研究发现，9-11月份海滨木槿茎段不定根的诱导时间有所延长，不定根的诱导率有所下降，推测原因，可能是由于木质化程度严重，致使再生能
力下降所致。
[0067] 实施例4
[0068] 本实施例测试了不同种类营养补液对海滨木槿微茎段不定根诱导的影响，包括如下步骤：
[0069] (1)取材
[0070] 于8月上旬，选取野外多年生具有优良农艺性状(具有高产、花期长、抗逆性强中一种或几种的性状)的海滨木槿当年生健壮枝条作为外植体来源，并剪切成1.0cm长，且带有1个腋芽和1片叶子的微茎段备用；
[0071] (2)外植体的预处理
[0072] 将步骤(1)中的海滨木槿微茎段经流水冲洗15min后，通过3.0‰(w/v)高锰酸钾消毒溶液进行表面消毒，消毒8min后阴干表面残留消毒液，备用；
[0073] (3)外植体不定根的诱导处理
[0074] 将步骤(2)中经过消毒处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端置于含有2000mg/L吲哚丁酸的生根促进液中35s，进行不定根的诱导处理；
[0075] (4)外植体的定植
[0076] 将步骤(3)中的经过生根促进液处理后的海滨木槿微茎段的形态学下端切口插入浇有营养补液的粒径为0.4mm的沙盘中，以互不重叠为准，插入长度为0.6cm；其中，营养补液为不含有机元素的不同类型植物基本培养液；
[0077] (5)外植体的成苗管理
[0078] 将步骤(4)中定植后的海滨木槿微茎段盖上塑料膜，于温度28℃、相对湿度83％的温室大棚中进行不定根的诱导和成苗培养；40d后统计微茎段的生根情况。
[0079] 研究结果表明：如表1所示，不同培养液类型对海滨木槿微茎段离体再生具有重要影响，其中，以不含有机元素的DKW培养液的不定根的诱导率和后期苗的长势均最佳，而不含有机元素的MS培养液最差。因此，不含有机元素的DKW培养液为海滨木槿微茎段离体再生的最佳营养补液。
[0080] 表1培养液类型对海滨木槿微茎段离体再生的影响
[0081]
[0082] 注：数据为平均值，每个处理包含140个外植体，每个处理重复三次。
[0083] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何
修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
