作为SYK抑制剂的吡咯并[2,3-B]吡嗪
阅读：1026发布：2020-06-23
专利汇可以提供作为SYK抑制剂的吡咯并[2,3-B]吡嗪专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及新的吡咯并[2,3‑b]吡嗪的用途，其中所有变量取代基如本 申请 所定义，所述吡咯并[2,3‑b]吡嗪为SYK 抑制剂 且用于 治疗 自身免疫和炎性 疾病 。，下面是作为SYK抑制剂的吡咯并[2,3-B]吡嗪专利的具体信息内容。
1.式I的化合物或其药学上可接受的盐
其中：
R1为H；
R2为叔丁基；
R3为H或C1-6烷基；
A为苯基，其任选被一个或多个A’取代；且
每个A’独立为C1-6烷基、卤素、C1-6烷基磺酰基、酰氨基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、氨基C1-6烷基或氘。
2.权利要求1的化合物，其中R3为C1-6烷基。
3.权利要求1的化合物，其中R3为H。
4.权利要求1的化合物，其中每个A’独立为C1-6烷基、卤素、C1-6烷基磺酰基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、氨基C1-6烷基或氘。
5.权利要求1的化合物，其中A’为C1-6烷基。
6.权利要求1的化合物，其中A’为C1-6烷基磺酰基。
7.权利要求1的化合物，其中A’为C1-6烷基或C1-6烷基磺酰基。
8.化合物，选自：
N-叔丁基-2-(2-氟-4-甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
N-叔丁基-2-(对甲苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
N-叔丁基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
N-叔丁基-2-(2-(二甲基氨甲酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
N-叔丁基-2-(2,4-二甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
N-叔丁基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
N-叔丁基-2-(3-(1-羟基乙基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
2-(3-(1-氨基乙基)苯基氨基)-N-叔丁基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺；和
2-苯基氨基(D5)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺。
9.药物组合物，包含与至少一种药用载体、赋形剂或稀释剂混合的权利要求1-8中任一项的化合物。
10.权利要求9的药物组合物，还包含选自以下的额外的治疗剂：化疗或抗增殖剂、抗炎剂、免疫调节或免疫抑制剂、神经营养因子、治疗心血管疾病的药剂、治疗糖尿病的药剂和治疗免疫缺陷病症的药剂。
11.权利要求1-8中任一项的化合物在制备用于治疗与Syk相关的病症的药物中的用途。
12.权利要求1-8中任一项的化合物在制备用于治疗免疫病症的药物中的用途，所述免疫病症选自狼疮、多发性硬化、类风湿性关节炎、银屑病、器官移植、异体移植并发症、糖尿病、癌症、哮喘、特应性皮炎、自身免疫性甲状腺病症、溃疡性结肠炎、节段性回肠炎和阿尔茨海默病。
作为SYK抑制剂的吡咯并[2,3-B]吡嗪
[0001] 蛋白激酶构成了最大的人类酶家族之一，并且通过将磷酸基团添加至蛋白质调节多种不同的信号转导过程；尤其是酪氨酸激酶磷酸化蛋白质酪氨酸残基的醇部分。酪氨酸激酶家族包括控制细胞生长、迁移和分化的成员。异常的激酶活性涉及多种人类疾病，包括癌症、自身免疫性和炎性疾病。由于蛋白激酶是细胞信号转导重要的调节子，它们提供了一种使用激酶活性的小分子抑制剂调节细胞功能的手段，并且因此成为好的药物设计靶点。除治疗激酶介导的疾病过程外，选择性且有效的激酶活性抑制剂也可用于研究细胞信号转导过程和鉴定其它有治疗益处的细胞靶点。
[0002] SYK(脾酪氨酸激酶)是一种非受体酪氨酸激酶，其是B细胞通过BCR信号转导激活所必需的。SYK在结合磷酸化的BCR后活化，从而启动BCR活化后的早期信号转导事件。SYK缺陷的小鼠展示B细胞发育的早期阻断。因此，通过其对自身抗体生成的作用，抑制细胞中SYK的酶活性被提议作为自身免疫性疾病的治疗。
[0003] 除在BCR信号转导和B细胞活化中的作用外，SYK还在FcεRI介导的肥大细胞脱颗粒和嗜酸性粒细胞活化中起重要作用。因此，SYK涉及过敏性病症(包括哮喘)。SYK经由其SH2域结合FcγRI的磷酸化的γ链且是下游信号转导所必需的。SYK缺陷的肥大细胞表明有脱颗粒的缺陷、花生四烯酸和细胞因子分泌。抑制肥大细胞中SYK活性的药理活性剂也显示如此。使用SYK反义寡核苷酸的治疗抑制哮喘动物模型中抗原诱导的嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的浸润。SYK缺陷的嗜酸性粒细胞也显示对FcεR刺激应答的活化障碍。因此，SYK小分子抑制剂可用于治疗过敏诱导的炎性疾病(包括哮喘)。
[0004] 鉴于通过涉及调节SYK通路的治疗可使涵盖的数目众多的病症受益，因此显而易见的是新的调节SYK通路的化合物和使用这些化合物的方法应当能够为广大患者提供实质的治疗益处。本申请提供了通过靶向SYK通路或通过抑制SYK激酶用于治疗性治疗自身免疫性和炎性疾病的新型化合物。
[0005] 本申请提供了式I、II或III的化合物或其药学上可接受的盐
[0006]
[0007] 其中：
[0008] R1为H、卤素或低级烷基；
[0009] R2为低级烷基或羟基低级烷基；
[0010] R3为H或低级烷基；
[0011] A为单环杂芳基或二环杂芳基(优选吡啶基、嘧啶基、吡唑基、异噁唑基、噻二唑基、噻唑基或吡嗪基)或苯基，其任选被一个或多个A’取代；且
[0013] 本申请提供了用于治疗炎性或自身免疫性病症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物。
[0014] 本申请提供了药物组合物，包含与至少一种药用载体、赋形剂或稀释剂混合的式I的化合物。
[0015] 定义
[0016] 本申请所用的不定冠词“a”或“an”的实体指的是一种或多种该实体；例如，化合物(a compound)指的是一种或多种化合物或至少一种化合物。因此，术语的“(a)”(或“(an)”)与“一种(one)或多种(more)”和“至少一种(at least one)”在本申请中可互换使用。
[0017] 如本说明书所用，无论在过渡性短语中还是权利要求主体中，术语“包括”和“包含”应当被解释为具有开放式结尾的含义。即，该术语应当被解释为与短语“至少具有”或“至少包括”同义。当在方法的情况中使用时，术语“包括”是指该方法至少包括所述步骤，但可能包括另外的步骤。当在化合物或组合物的情况中使用时，术语“包含”是指该化合物或组合物至少包含所述特征或组分，但可能包含其它特征或组分。
[0018] 如本申请所用，除非明确表明，否则词语“或”以“和/或”中的“包括”意思而不是“任一/或”中的“排他”意思使用。
[0019] 本申请所用的术语“独立地”表示无论同一化合物内具有相同或不同定义的变量存在或不存在，变量可应用于任一种情况。因此，在R”出现两次且定义为“独立地为碳或氮”的化合物中，两个R”均可为氮或者一个R”可为碳而另一个为氮。
[0020] 当任一变量在描绘和描述本发明所使用或所要求的化合物的任一部分或式中出现不止一次时，其在每次出现时的定义独立于其它次出现时的定义。而且，只有该化合物为稳定化合物，取代基和/或变量的组合才是被允许的。
[0021] 键末端的符号“*”或穿过键的“------”各自指的是官能团或其它化学部分与分子的其它部分的连接点，其中所述官能团或其它化学部分为该分子的一部分。因此，例如：
[0022]
[0024] 本申请所用的术语“任选”或“任选地”是指随后所述的事件或情况可能，但未必，出现，并且是指说明书包括包括该事件或情况发生的实例和该事件或情况未发生的实例。例如，“任选取代的”是指该任选取代的部分可带有氢原子或取代基。
[0026] 本申请所用的术语“约”是指大约、附近、大致或左右。当术语“约”与数值范围组合使用时，其通过衍生所述数值范围的上下边界来修饰该范围。通常，本申请术语“约”用于修饰标示值上下偏差20％的数值。
[0027] 一些化合物可显示互变异构。互变异构化合物可以以两种或更多种可互变的物种存在。质子迁移互变异构体由两个原子之间的共价键合的氢的迁移引起。互变异构体通常平衡地存在且尝试分离单个互变异构体通常得到一种混合物，其化学和物理性质与多种化合物的混合物一致。平衡的位置取决于分子内的化学特征。例如，在很多脂肪族醛和酮如乙醛中，酮式占优势；而在酚类中，烯醇式占优势。常见的质子迁移互变异构体包括酮/烯醇酰胺/亚胺酸 和脒 互变异构体。后两者在杂芳基和杂环中尤其常见，
而本发明涵盖这些化合物的所有互变异构体形式。
而本发明涵盖这些化合物的所有互变异构体形式。
[0028] 除非另有定义，否则本申请所用的技术和科学术语具有本发明所述领域的技术人员通常理解的含义。本申请提及了本领域技术人员已知的多种方法学和物料。描述药理学一般原理的标准参考工具书包括Goodman和Gilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics,10th Ed.,McGraw Hill Companies Inc.,New York(2001)。在实施本发明中，可利用任何本领域技术人员已知的适宜的物料和/或方法。然而，本申请描述了优选的物料和方法。除非另有说明，否则下文说明书和实施例中提及的物料、试剂等可以从商业来源获得。
[0029] 可将本申请所述的定义拼接以形成化学相关的组合，如“杂烷基芳基”、“卤代烷基杂芳基”、“芳基烷基杂环基”、“烷基羰基”、“烷氧基烷基”等。当术语“烷基”用于另一术语之后作为后缀时，如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，其是指被一个或两个选自另一明确命名的基团的取代基所取代的如上所定义的烷基。因此，例如“苯基烷基”指的是具有一个或两个苯基取代基的烷基，从而包括苄基、苯基乙基和联苯基。“烷基氨基烷基”为具有一个或两个烷基氨基取代基的烷基。“羟基烷基”包括2-羟基乙基、2-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、2,3-二羟基丁基、2-(羟基甲基)、3-羟基丙基等。因此，本申请所用的术语“羟基烷基”用于定义下文所定义的杂烷基的一个亚组。
[0030] 术语(芳)烷基指的是未取代的烷基或芳烷基。术语(杂)芳基((hetero)aryl或(het)aryl)指的是芳基或杂芳基。
[0031] 本申请所用的术语“螺环烷基”是指螺环环烷基，例如螺[3.3]庚烷。本申请所用的术语螺杂环烷基是指螺环杂环烷基，例如2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷。
[0032] 本申请所用的术语“酰基”表示式-C(＝O)R的基团，其中R为如本申请所定义的氢或低级烷基。本申请所用的术语“烷基羰基”表示式C(＝O)R的基团，其中R为如本申请所定义的烷基。术语C1-6酰基指的是含有6个碳原子的-C(＝O)R基团。本申请所用的术语“芳基羰基”是指式C(＝O)R的基团，其中R为芳基；本申请所用的术语“苯甲酰基”是其中R为苯基的“芳基羰基”。
[0033] 本申请所用的术语“酯”表示式-C(＝O)OR的基团，其中R为如本申请所定义的低级烷基。
[0034] 本申请所用的术语“烷基”表示含有1-10个碳原子的非支链或支链、饱和、单价烃基。术语“低级烷基”表示含有1-6个碳原子的直链或支链烃基。本申请所用的“C1-10烷基”指的是由1-10个碳原子组成的烷基。烷基的实例包括但不限于，低级烷基，包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基或戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。
[0035] 当术语“烷基”用于另一术语之后作为后缀时，如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，其是指被一个或两个选自另一明确命名的基团的取代基所取代的如上所定义的烷基。因此，例如“苯基烷基”表示R’R”-，其中R’为苯基，R”为本申请所定义的亚烷基，含义是该苯基烷基部分的连接点在该亚烷基上。芳基烷基的实例包括但不限于，苄基、苯基乙基、3-苯基丙基。可类似解释术语“芳基烷基”或“芳烷基”，除R’为芳基外。可类似解释术语“(杂)芳基烷基”或“(杂)芳烷基”，除R’任选为芳基或杂芳基外。
[0036] 术语“卤代烷基”或“卤代-低级烷基”或“低级卤代烷基”指的是含有1-6个碳原子的直链或支链烃基，其中一个或多个碳原子被一个或多个卤素原子取代。
[0037] 除非另有说明，否则本申请所用的术语“亚烷基(“alkylene”或“alkylenyl”)”表示具有1-10个碳原子的二价饱和直链烃基(例如(CH2)n)或具有2-10个碳原子的支链饱和二价烃基(例如-CHMe-或-CH2CH(i-Pr)CH2-)。除在亚甲基的情况中外，亚烷基的自由价(open valences)不连接于同一原子。亚烷基的实例包括但不限于，亚甲基、亚乙基、亚丙基、2-甲基-亚丙基、1,1-二甲基-亚乙基、亚丁基、2-乙基亚丁基。
[0038] 本申请所用的术语“烷氧基”是指-O-烷基，其中烷基如上文所定义，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基，包括它们的异构体。本申请所用的“低级烷氧基”表示具有如前述定义的“低级烷基”的烷氧基。本申请所用的“C1-10烷氧基”指的是-O-烷基，其中烷基为C1-10。
[0039] 术语“卤代烷氧基”或“卤代-低级烷氧基”或“低级卤代烷氧基”指的是低级烷氧基，其中一个或多个碳原子被一个或多个卤素原子取代。
[0040] 本申请所用的术语“羟基烷基”表示如本申请所定义的烷基，其中在不同碳原子上的1-3个氢原子被羟基取代。
[0041] 本申请所用的术语“烷基磺酰基”和“芳基磺酰基”指的是式S(＝O)2R的基团，其中R分别为烷基或芳基且烷基和芳基如本申请所定义。本申请所用的术语“杂烷基磺酰基”表示式-S(＝O)2R的基团，其中R为如上所定义的“杂烷基”。
[0042] 本申请所用的术语“低级烷基氨甲酰基”指的是式CONRaRb的基团，其中Ra和Rb独立为H和如本申请定义的低级烷基。
[0043] 本申请所用的术语“烷基磺酰基氨基”和“芳基磺酰基氨基”指的是式-NR'S(＝O)2R的基团，其中R分别为烷基或芳基，R’为氢或C1-3烷基，且烷基和芳基如本申请所定义。
[0044] 本申请所用的术语“环烷基”指的是含有3-8个碳原子的饱和的碳环，即环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。本申请所用的“C3-7环烷基”指的是由碳环环中3-7个碳组成的环烷基。
[0045] 本申请中所用的术语“羧基-烷基”指的是一个氢原子被羧基取代的烷基部分，其中应理解的是杂烷基的连接点为碳原子。术语“羧基”(carboxy或carboxyl)指的是–CO2H部分。
[0046] 本申请所用的术语“杂芳基”或“杂芳族的”是指具有5-12个环原子的单环或二环基，其具有至少一个芳族或部分不饱和的环，每个环含有4-8个原子，掺合有一个或多个N、O或S杂原子，其它环原子为碳，其中应理解的是该杂芳基的连接点在芳族或部分不饱和的环上。如本领域技术人员所公知的，杂芳基环比它们对应的全碳环具有较小的芳香性。因此，为了本发明的目的，杂芳基仅需要具有一定程度的芳香性。杂芳基部分的实例包括具有5-6个环原子和1-3个杂原子的单环芳族杂环，包括但不限于，吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噁嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、4,5-二氢-噁唑基、5,6-二氢-4H-[1,3]噁唑基、异噁唑、噻唑、异噻唑、三唑啉、噻二唑和噁二唑啉(oxadiaxoline)，其可任选被一个或多个，优选一个或两个选自以下的取代基取代：羟基、氰基、烷基、烷氧基、硫代(thio)、卤代低级烷氧基、烷基硫基、卤代、卤代低级烷基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、卤素、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基和二烷基氨基烷基、硝基、烷氧基羰基和氨甲酰基、烷基氨甲酰基、二烷基氨甲酰基、芳基氨甲酰基、烷基羰基氨基和芳基羰基氨基。二环部分的实例包括但不限于，喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑、苯并异噁唑、苯并噻唑、萘啶基、5,6,7,8-四氢-[1,6]萘啶基和苯并异噻唑。二环部分可任选在任一环上被取代，但是连接点在含有杂原子的环上。
[0047] 除非另有说明，否则本申请所用的术语“杂环基”、“杂环烷基”或“杂环”表示单价饱和的环基，其由一个或多个环优选一个至两个环(包括螺环环系)构成，每个环3-8个原子，掺合有一个或多个环杂原子(选自N、O或S(O)0-2)，而且其可任选独立地被一个或多个优选一个或两个选自以下的取代基取代：羟基、氧代、氰基、低级烷基、低级烷氧基、卤代低级烷氧基、烷基硫基、卤代、卤代低级烷基、羟基烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基和其离子形式。杂环基的实例包括但不限于，吗啉基、哌嗪基、哌啶基、氮杂环丁基、吡咯烷基、六氢氮杂 基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、噁唑烷基、噻唑烷基、异噁唑烷基、四氢吡喃基、硫吗啉基、奎宁环基和咪唑啉基和其离子形式。实例也可以是二环的，例如，3,8-二氮杂-二环[3.2.1]辛烷、2,5-二氮杂-二环[2.2.2]辛烷或八氢-吡嗪并[2,1-c][1,4]噁嗪。
[0048] SYK抑制剂
[0049] 本申请提供了式I、II或III的化合物或其药学上可接受的盐
[0050]
[0051] 其中：
[0052] R1为H、卤素或低级烷基；
[0053] R2为低级烷基或羟基低级烷基；
[0054] R3为H或低级烷基；
[0055] A为单环杂芳基或二环杂芳基(优选吡啶基、嘧啶基、吡唑基、异噁唑基、噻二唑基、噻唑基或吡嗪基)或苯基，其任选被一个或多个A’取代；且
[0056] 每个A’独立为低级烷基、卤素、低级烷基磺酰基、低级烷基氨甲酰基、酰氨基、羟基低级烷基、低级烷氧基、氨基低级烷基或氘。
[0057] 特别地，本申请提供了式I的化合物或其药学上可接受的盐
[0058]
[0059] 其中：
[0060] R1为H、卤素或低级烷基；
[0061] R2为低级烷基或羟基低级烷基；
[0062] R3为H或低级烷基；
[0063] A为单环杂芳基或二环杂芳基(优选吡啶基、嘧啶基、吡唑基、异噁唑基、噻二唑基、噻唑基或吡嗪基)或苯基，其任选被一个或多个A’取代；且
[0064] 每个A’独立为低级烷基、卤素、低级烷基磺酰基、酰氨基、羟基低级烷基、低级烷氧基、氨基低级烷基或氘。
[0065] 本申请提供了式I、II或III的化合物，其中R3为低级烷基。
[0066] 本申请提供了式I、II或III的化合物，其中R3为H。
[0067] 本申请提供了式I、II或III的化合物，其中R2为低级烷基。
[0068] 本申请提供了式I、II或III的化合物，其中R3为H且R2为低级烷基。
[0069] 本申请提供了式I、II或III的化合物，其中R1为H。
[0070] 本申请提供了式I、II或III的化合物，其中R1为H且R3为H。
[0071] 本申请提供了式I、II或III的化合物，其中R1为H且R2为低级烷基。
[0072] 本申请提供了式I、II或III的化合物，其中R1为H，R3为H且R2为低级烷基。
[0073] 本申请提供了式I的化合物，其中A为单环杂芳基，其任选被一个或多个A’取代。
[0074] 本申请提供了式I的化合物，其中A为单环杂芳基，其任选被一个或多个A’取代，R13 2
为H，R为H且R为低级烷基。
为H，R为H且R为低级烷基。
[0075] 本申请提供了式I的化合物，其中A’为低级烷基。
[0076] 本申请提供了式I的化合物，其中A’为氘。
[0077] 本申请提供了式I的化合物，其中A为单环杂芳基，其任选被一个或多个A’取代，R1为H，R3为H，R2为低级烷基且A’为低级烷基。
[0078] 本申请提供了式I的化合物，其中A’为低级烷基磺酰基。
[0079] 本申请提供了式I的化合物，其中A为单环杂芳基，其任选被一个或多个A’取代，R1为H，R3为H，R2为低级烷基且A’为低级烷基磺酰基。
[0080] 本申请提供了式I的化合物，其中A为苯基，其任选被一个或多个A’取代。
[0081] 本申请提供了式I的化合物，其中A为苯基，其任选被一个或多个A’取代，R1为H，R3为H且R2为低级烷基。
[0082] 本申请提供了式I的化合物，其中A’为低级烷基或低级烷基磺酰基。
[0083] 本申请提供了式I的化合物，其中A’为低级烷基或低级烷基磺酰基，A为苯基，其任选被一个或多个A’取代，R1为H，R3为H且R2为低级烷基。
[0084] 本申请提供了式I的化合物，其中A为二环杂芳基，其任选被一个或多个A’取代。
[0085] 本申请提供了式I的化合物，其中A为二环杂芳基，其任选被一个或多个A’取代，R1为H，R3为H且R2为低级烷基。
[0086] 在优选的实施方案中，本申请提供了式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为H；R2为低级烷基或羟基低级烷基；R3为H；A为吡啶基、嘧啶基、吡唑基、异噁唑基、噻二唑基、噻唑基、吡嗪基或苯基，其任选被一个或多个A’取代；且
[0087] 每个A’独立为低级烷基、卤素、低级烷基磺酰基、羟基低级烷基、低级烷氧基、氨基低级烷基或氘。
[0088] 本申请提供了化合物，选自：
[0089] N-叔丁基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0090] N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0091] N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0092] N-异丙基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0093] N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0094] N-叔丁基-2-(6-甲基吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0095] N-叔丁基-2-(2-甲基嘧啶-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0096] N-叔丁基-2-(5-甲基吡嗪-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0097] N-叔丁基-2-(3-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0098] N-叔丁基-2-(吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0099] N-叔丁基-2-(2-氟-4-甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0100] N-叔丁基-2-(对甲苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0101] N-叔丁基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0102] N-叔丁基-2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0103] N-叔丁基-2-(2-(二甲基氨甲酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0104] N-叔丁基-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0105] N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0106] N-叔丁基-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0107] N-叔丁基-2-(2,4-二甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0108] N-叔丁基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0109] N-叔丁基-2-(甲基(吡啶-3-基)氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0110] N-叔丁基-2-(3-甲基异噁唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0111] N-叔丁基-2-(6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0112] N-叔丁基-2-(3-(1-羟基乙基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0113] N-叔丁基-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0114] N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0115] 2-(3-(1-氨基乙基)苯基氨基)-N-叔丁基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0116] N-叔丁基-2-(2-(甲基磺酰基)吡啶-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0117] N-叔丁基-2-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0118] N-叔丁基-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0119] N-叔丁基-2-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0120] N-叔丁基-2-(2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0121] N-叔丁基-2-(1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺；
[0122] 3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺；
[0123] 2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺；
[0124] 3-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺；
[0125] 2-苯基氨基(D5)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺；和
[0126] N-叔丁基-3-氯-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺。
[0127] 本申请提供了用于治疗炎性或自身免疫性病症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物。
[0128] 本申请提供了上述方法，还包括给予选自以下的额外的治疗剂：化疗或抗增殖剂、抗炎剂、免疫调节或免疫抑制剂、神经营养因子、治疗心血管疾病的药剂、治疗糖尿病的药剂或治疗免疫缺陷病症的药剂。
[0129] 本申请提供了用于治疗炎性病症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物。
[0131] 本申请提供了用于治疗哮喘的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物。
[0132] 本申请提供了用于治疗免疫病症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物，所述免疫病症包括狼疮、多发性硬化、类风湿性关节炎、银屑病、I型糖尿病、器官移植并发症、异体移植并发症、糖尿病、癌症、哮喘、特应性皮炎、自身免疫性甲状腺病症、溃疡性结肠炎、节段性回肠炎、阿尔茨海默病和白血病。
[0133] 本申请提供了用于治疗炎性病症的方法，包括向有此需要的患者共同给予治疗有效量的抗炎化合物和式I的化合物的组合。
[0134] 本申请提供了用于治疗免疫病症的方法，包括向有此需要的患者共同给予治疗有效量的免疫抑制化合物和式I的化合物的组合。
[0135] 本申请提供了药物组合物，包含与至少一种药用载体、赋形剂或稀释剂混合的式I的化合物。
[0136] 本申请提供了上述药物组合物，还包含选自以下的额外的治疗剂：化疗或抗增殖剂、抗炎剂、免疫调节或免疫抑制剂、神经营养因子、治疗心血管疾病的药剂、治疗糖尿病的药剂和治疗免疫缺陷病症的药剂。
[0137] 本申请提供了式I的化合物在制备用于治疗与Syk相关的病症的药物中的用途。
[0138] 本申请提供了式I的化合物在制备用于治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。
[0139] 下表中提供了本发明所涵盖的且在本发明范围内的代表性化合物的实例。提供这些实例和随后的制备以使得本领域的技术人员能够更清楚地理解并实施本发明。它们不应当被视为对本发明范围的限制，而应仅仅作为本发明的解释和代表。
[0140] 一般而言，本发明中所用的命名基于AUTONOMTM v.4.0(一种Beilstein Institute计算机化系统)或结构＝名称(一种 应用)用于生成IUPAC系统
命名。如果所描绘的结构和给出的该结构的名称不一致，应以所描绘的结构为准。此外，如果结构或结构的一部分的立体化学未用例如粗体或虚线标示，则应当解释为所述结构或结构的一部分涵盖它的所有立体异构体。
命名。如果所描绘的结构和给出的该结构的名称不一致，应以所描绘的结构为准。此外，如果结构或结构的一部分的立体化学未用例如粗体或虚线标示，则应当解释为所述结构或结构的一部分涵盖它的所有立体异构体。
[0141] 表I描述了通式I的化合物的实例。
[0142] 表I
[0143]
[0144]
[0145]
[0146]
[0147]
[0148]
[0149]
[0150]
[0151]
[0152] 合成
[0153] 通用路线
[0154] 在如下的通用路线中，R2可为低级烷基或羟基低级烷基；A可为单环杂芳基或二环杂芳基或苯基，其任选被一个或多个A’取代；且每个A’可独立为低级烷基、卤素、低级烷基磺酰基、酰氨基、羟基低级烷基、低级烷氧基、氨基低级烷基或氘。
[0155] 路线1
[0156]
[0157] 路线2
[0158]
[0159] 药物组合物和给药
[0160] 可在多种口服给药剂型和载体中配制本发明的化合物。口服给药的形式可以是片剂、包衣片、糖衣丸、硬和软明胶胶囊、溶液剂、乳剂、糖浆剂或混悬剂。本发明的化合物当由其他的给药途径(包括连续(静脉滴注)局部肠胃外的、肌内的、静脉内的、皮下的、经皮的(其可以包括渗透促进剂)、经口腔的、经鼻的、吸入和栓剂给药等)给药时是有效的。优选的给药方式通常是使用方便的每日给药方案的口服，能够根据痛苦的程度和患者对活性成分的反应对其进行调节。
[0161] 可以将本发明的化合物及其药学上可接受的盐与一种或多种常规的赋形剂、载体或稀释剂一起制成药物组合物和单位剂型。药物组合物和单位剂型可以由常规比例的常规成分组成，有或没有另外的活性化合物或物质，并且单位剂型可以含有与意欲使用的每日剂量范围相匹配的任意合适的有效量的活性成分。药物组合物可以以固体(例如片剂或填充的胶囊)、半固体、粉末、缓释制剂或液体(例如溶液、混悬剂、乳剂、酏剂或口服的填充的胶囊)口服使用；或者以用于直肠或阴道给药的栓剂的形式；或者以肠胃外使用的无菌注射液的形式。典型的制剂将含有约5％至约95％的活性化合物(w/w)。术语“制剂”或“剂型”包括活性化合物的固体和液体制剂，并且本领域的技术人员将理解活性成分能够依据靶器官或组织和依据需要的剂量和药物代谢动力学参数而存在于不同的制剂中。
[0162] 本申请所用的术语“赋形剂”是指用于制备药物组合物的化合物，其通常是安全的、无毒的并且既不是生物学上的也不是其它方面不希望的，并且其包括可兽用和可人药用的赋形剂。本发明的化合物能够单独给药，但是通常与根据意欲的给药途径和标准的制药实践选择的一种或多种合适的药物赋形剂、稀释剂或载体混合给药。
[0163] “药学上可接受的”是指其可用于制备药物组合物，其通常是安全的、无毒的并且既不是生物学上的也不是其它方面不希望的，并且其包括可兽用和可人药用。
[0164] 活性成分的“药学上可接受的盐”形式也可以最初赋予活性成分在非盐的形式中所没有的需要的药物代谢动力学性质，甚至可以在其体内治疗活性方面正面地影响活性成分的药效学。短语化合物的“药学上可接受的盐”是指药用的并且具有需要的母体化合物的药理活性的盐。所述盐包括：(1)与无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等)形成的或与有机酸(例如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基二环[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等)形成的酸加成盐；或(2)当母体化合物中所存在的酸性质子被金属离子(例如碱金属离子、碱土离子或铝离子)代替或与有机碱(例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨基丁三醇、N-甲基葡糖胺等)配位时所形成的盐。
[0165] 固体形式制剂包括粉末剂、片剂、丸剂、胶囊、扁囊剂、栓剂和可分散的颗粒剂。固体载体可以是一种或多种物质，其也可以作为稀释剂、矫味剂、增溶剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包囊材料。在粉末剂中，载体通常是细碎的固体，其是与细碎的活性成分的混合物。在片剂中，活性成分通常以合适的比例与具有必要的结合容量的载体混合，并且压制成需要的形状和尺寸。合适的载体非限制性地包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。除了活性成分，固体形式制剂还可以含有着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人造和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
[0166] 液体制剂也适用于口服给药，液体制剂包括乳剂、糖浆剂、酏剂、水溶液、水性混悬剂。这些包括预计在使用前转化为液体形式制剂的固体形式制剂。乳剂可以在溶液中、例如在水性丙二醇溶液中进行制备，或者其可以含有乳化剂，例如卵磷脂、去水山梨糖醇单油酸酯或阿拉伯胶。水溶液能够通过将活性成分溶解于水中并且加入合适的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂进行制备。水性混悬剂能够通过将细碎的活性成分分散于含有粘性材料(例如天然或合成的胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其他已知的助悬剂)的水中进行制备。
[0167] 本发明的化合物可以配制用于肠胃外给药(例如通过注射，例如推注或连续输注)并且其可以是在安瓿、预填充注射器、小容量输液中或在具有添加的防腐剂的多剂量容器中的单位剂型。组合物可以采用如混悬剂、溶液剂或在油性或水性媒介物中的乳剂的形式，例如在水性聚乙二醇中的溶液剂。油性或非水性载体、稀释剂、溶剂或溶媒的实例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)和可注射的有机酯(例如油酸乙酯)，并且其可以含有配方剂，例如防腐剂、润湿剂、乳化剂或助悬剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可以是在使用前用合适的溶媒(例如无菌、无热原的水)重构的粉末形式，其通过无菌固体的无菌分离或通过溶液的冷冻干燥而得到。
[0168] 本发明的化合物可以配制用于以软膏剂、乳膏剂或洗液或者以透皮贴剂向表皮局部给药。例如，软膏剂和乳膏剂可以与添加了合适的增稠剂和/或胶凝剂的水性或油性基进行配制。洗液可以与水性或油性基进行配制并且通常也将含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂、增稠剂或着色剂。适合于在口中局部给药的制剂包括：在矫味的基质(通常是蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶)中包含活性剂的锭剂；在惰性基质(例如明胶和甘油或者蔗糖和阿拉伯胶)中包含活性成分的软锭剂；和在合适的液体载体中包含活性成分的漱口剂。
[0169] 本发明的化合物可以配制用于以栓剂给药。首先将低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯和可可脂的混合物)熔化并且使活性成分均匀分散，例如通过搅拌。然后将熔融的均一的混合物倒入常规尺寸的模具，使其冷却和固化。
[0170] 本发明的化合物可以配制用于阴道给药。本领域已知，除了活性成分、还含有这些载体的阴道栓剂、填塞剂、乳膏、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂是合适的。
[0171] 本发明的化合物可以配制用于经鼻给药。通过常规的方法，例如用滴管、吸量管或喷雾器，溶液剂和混悬剂可以直接应用于鼻腔。可以以单或多剂量形式提供制剂。在滴管或吸量管的后一种情况中，这可以通过患者施用合适的、预定体积的溶液或混悬液来实现。在喷雾器的情况中，这可以例如通过计量雾化喷雾泵来实现。
[0172] 本发明的化合物可以配制用于气雾剂给药、特别是向呼吸道给药，并且其包括鼻内给药。化合物通常具有小粒径，例如5微米或更小的量级。该粒径可以通过本领域已知的方法得到，例如通过微粉化。以具有合适的抛射剂的加压包装提供活性成分，抛射剂例如氯氟烃(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷或二氧化碳或其他合适的气体。气雾剂也可以适宜地含有表面活性剂，例如卵磷脂。通过量阀可以控制药物的剂量。或者可以以干粉的形式提供活性成分，例如在合适的粉末基质(例如乳糖、淀粉、淀粉衍生物(例如羟丙甲基纤维素)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP))中的化合物的粉末混合物。粉末载体在鼻腔中将形成凝胶。粉末组合物可以是单位剂量形式，例如以如明胶的胶囊或药盒或泡罩包装，可以通过吸入器从其中施用粉末。
[0173] 当需要的时候，制剂能够用适合于活性成分的缓释或控释给药的肠包衣进行制备。例如，本发明的化合物能够配制到经皮或皮下药物递送装置中。当化合物的缓释是必需的时和当患者对治疗方案顺应性是至关重要的时，这些给药系统是有优势的。在经皮给药系统中的化合物经常附着到粘附皮肤的固体支撑物上。目的化合物也能够与渗透促进剂(例如氮酮(1-十二烷基氮杂-环庚-2-酮))联合。通过手术或注射将缓释给药系统皮下插入到皮下层。皮下植入物在脂溶性膜(例如硅酮橡胶)或生物可降解聚合物(例如聚乳酸)中包裹化合物。
[0174] 具有药物载体、稀释剂和赋形剂的合适的制剂记载于由E.W.Martin编辑的Remington:The Science and Practice of Pharmacy 1995,MackPublishing Company,第19版,Easton，宾夕法尼亚州。有经验的制剂科学家在说明书的教导下可以改变制剂从而提供用于特定的给药途径的大量制剂，但不会致使本发明的组合物不稳定或损害其治疗活性。
[0175] 例如，通过微小的改变(成盐、酯化等)可以容易地实现本发明的化合物的改变从而使其在水或其他媒介物中更稳定，这属于本领域的普通技术。为了控制本发明的化合物的药物代谢动力学从而使患者体内的有益效果最大化，可改变特定的化合物的给药途径和剂量方案，这也属于本领域的普通技术。
[0176] 本申请所用的术语“治疗有效量”是指为了减少个体中的疾病的症状所需的量。根据每一种特定的情况中的个体需求调整剂量。剂量能够在宽范围内变化，这取决于大量因素，例如所治疗的疾病的严重性、患者的年龄和总体健康状况、患者接受治疗的同时所用的其他药物、给药途径和形式、和主治医师的偏好和经验。对于口服给药，在每天约0.01到约1000mg/kg体重之间的每日剂量应当适用于单一疗法和/或联合治疗。优选的每日剂量是在约0.1和约500mg/kg体重之间，更优选的是在每天0.1和约100mg/kg体重之间，最优选的是在每天1.0和约10mg/kg体重之间。因此，对于向70kg的人给药，剂量范围将是每天约7mg至
0.7g。每日剂量能够以单一剂量或分开的剂量施用，通常每天给药在1和5次之间。通常，治疗以低于化合物的最佳剂量的较小的剂量开始。其后，以小的增量来增加剂量直至达到各患者的最佳效果。治疗本申请所述的疾病的普通技术人员不需要过度的实验，依赖其个人的知识、经验和本申请的内容，将能够确定对给定的疾病和患者的本发明化合物的治疗有效量。
0.7g。每日剂量能够以单一剂量或分开的剂量施用，通常每天给药在1和5次之间。通常，治疗以低于化合物的最佳剂量的较小的剂量开始。其后，以小的增量来增加剂量直至达到各患者的最佳效果。治疗本申请所述的疾病的普通技术人员不需要过度的实验，依赖其个人的知识、经验和本申请的内容，将能够确定对给定的疾病和患者的本发明化合物的治疗有效量。
[0177] 药物制剂优选是单位剂量形式。以这种形式，将制剂再分成含有合适的量的活性成分的单位剂量。单位剂量形式能够是包装的制剂，所述的包装含有离散数量的制剂，例如包裹的片剂、胶囊、和小瓶或安瓿中的粉末。单位剂量形式本身也能够是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂，或者其能够是以包装形式的合适数量的任意的这些形式。
[0178] 制剂
[0179] 如下表所示，配制了通过多种途径递送的药物制剂。表中所用的“活性成分”或“活性化合物”是指一种或多种式I的化合物。
[0180] 用于口服给药的组合物
[0181]成分 ％重量/重量
活性成分 20.0％
乳糖 79.5％
硬脂酸镁 0.5％
活性成分 20.0％
乳糖 79.5％
硬脂酸镁 0.5％
[0182] 将这些成分混合并分配至胶囊中，每粒胶囊含约100mg；一粒胶囊约为总日剂量。
[0183] 用于口服给药的组合物
[0184]成分 ％重量/重量
活性成分 20.0％
硬脂酸镁 0.5％
交联羧甲基纤维素钠 2.0％
乳糖 76.5％
PVP(聚乙烯吡咯烷酮) 1.0％
活性成分 20.0％
硬脂酸镁 0.5％
交联羧甲基纤维素钠 2.0％
乳糖 76.5％
PVP(聚乙烯吡咯烷酮) 1.0％
[0185] 将这些成分混合并使用溶剂如甲醇制粒。然后将制剂干燥并使用适当的压片机形成片剂(含有约20mg活性化合物)。
[0186] 用于口服给药的组合物
[0187]成分 量
活性化合物 1.0g
富马酸 0.5g
氯化钠 2.0g
对羟基苯甲酸甲酯 0.15g
对羟基苯甲酸丙酯 0.05g
砂糖 25.5g
山梨醇(70％溶液) 12.85g
Veegum K(Vanderbilt Co.) 1.0g
调味剂 0.035ml
着色剂 0.5mg
蒸馏水 足量至100ml
活性化合物 1.0g
富马酸 0.5g
氯化钠 2.0g
对羟基苯甲酸甲酯 0.15g
对羟基苯甲酸丙酯 0.05g
砂糖 25.5g
山梨醇(70％溶液) 12.85g
Veegum K(Vanderbilt Co.) 1.0g
调味剂 0.035ml
着色剂 0.5mg
蒸馏水 足量至100ml
[0188] 将这些成分混合形成混悬剂用于口服。
[0189] 肠胃外制剂
[0190]成分 ％重量/重量
活性成分 0.25g
氯化钠 适量至等张
注射用水 100ml
活性成分 0.25g
氯化钠 适量至等张
注射用水 100ml
[0191] 将这些活性成分溶于部分注射用水中。然后在搅拌下添加足量的氯化钠以使溶液等张。然后使用剩余注射用水将溶液补至足量，通过0.2μm膜滤器过滤并在无菌条件下封装。
[0192] 栓剂制剂
[0193]成分 ％重量/重量
活性成分 1.0％
聚乙二醇1000 74.5％
聚乙二醇4000 24.5％
活性成分 1.0％
聚乙二醇1000 74.5％
聚乙二醇4000 24.5％
[0194] 将这些成分在蒸气浴上融化并混合，然后倾倒至含2.5g总重量的模具中。
[0195] 局部制剂
[0196]成分 克
活性化合物 0.2-2
司盘60(Span 60) 2
吐温60 2
矿物油 5
凡士林 10
对羟基苯甲酸甲酯 0.15
对羟基苯甲酸丙酯 0.05
BHA(丁基化羟基茴香醚) 0.01
水 适量100
活性化合物 0.2-2
司盘60(Span 60) 2
吐温60 2
矿物油 5
凡士林 10
对羟基苯甲酸甲酯 0.15
对羟基苯甲酸丙酯 0.05
BHA(丁基化羟基茴香醚) 0.01
水 适量100
[0197] 将所有这些成分(除了水)混合并在搅拌下加热至60℃。然后在剧烈搅拌下添加足量的约60℃的水以使这些成分乳化，然后加入水适量约100g。
[0198] 鼻喷雾剂
[0199] 若干含有约0.025-0.5％活性化合物的水性混悬剂被制备成鼻喷雾剂。这些制剂任选含有无活性成分，例如，微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、葡萄糖等。可添加盐酸以调节pH。这些鼻喷剂可经由鼻喷计量泵来递送，通常每揿递送约50-100ml制剂。典型的给药方案为每4-12小时2-4喷。
[0200] 适应症和治疗方法
[0201] 本申请所述的化合物为激酶抑制剂，特别是SYK抑制剂。这些抑制剂可用于治疗哺乳动物中一种或多种对激酶抑制应答的疾病，包括对SYK抑制和/或B细胞增殖抑制应答的疾病。不希望受限于任何具体的理论，应当认为本发明的化合物与SYK的相互作用导致SYK活性的抑制，从而实现这些化合物的药物效用。因此，本发明包括治疗患有对SYK活性抑制和/或B细胞增殖抑制应答的疾病的哺乳动物，如人的方法，其包括向患有该疾病的哺乳动物给予有效量的至少一种本申请提供的化学实体。有效浓度可通过实验确定，例如通过测定化合物的血液浓度或者理论上通过计算生物利用度来确定。除SYK外，其它可能受影响的激酶包括但不限于其它酪氨酸激酶和丝氨酸/苏氨酸激酶。
[0202] 激酶在控制基本细胞过程如增殖、分化和死亡(凋亡)的信号转导通路中起显著作用。异常的激酶活性牵涉于多种疾病，包括多种癌症、自身免疫和/或炎性疾病，以及急性炎性反应。激酶在关键细胞信号转导通路中的多面性作用为鉴定靶向激酶和信号转导通路的新型药物提供了重要的机遇。
[0203] 本申请提供了用于治疗炎性或自身免疫性病症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物。
[0204] 本申请提供了上述方法，还包括给予选自以下的额外的治疗剂：化疗或抗增殖剂、抗炎剂、免疫调节或免疫抑制剂、神经营养因子、治疗心血管疾病的药剂、治疗糖尿病的药剂或治疗免疫缺陷病症的药剂。
[0205] 本申请提供了用于治疗炎性病症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物。
[0206] 本申请提供了用于治疗类风湿性关节炎的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物。
[0207] 本申请提供了用于治疗哮喘的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物。
[0208] 本申请提供了用于治疗免疫病症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式I的化合物，所述免疫病症包括狼疮、多发性硬化、类风湿性关节炎、银屑病、I型糖尿病、器官移植并发症、异体移植并发症、糖尿病、癌症、哮喘、特应性皮炎、自身免疫性甲状腺病症、溃疡性结肠炎、节段性回肠炎、阿尔茨海默病和白血病。
[0209] 本申请提供了用于治疗炎性病症的方法，包括向有此需要的患者共给予治疗有效量的抗炎化合物与式I化合物的组合。
[0210] 本申请提供了用于治疗免疫病症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的免疫抑制化合物与式I化合物的组合。实施例
[0211] 缩写
[0212] 常用的缩写包括：乙酰基(Ac)、偶氮-二-异丁腈(AIBN)、大气压(Atm)、9-硼杂双环[3.3.1]壬烷(9-BBN或BBN)、2,2’-双(二苯基膦基)-1,1’-联萘(BINAP)、叔丁氧基羰基(Boc)、二碳酸二叔丁酯或Boc酸酐(Boc2O)、苄基(Bn)、丁基(Bu)、化学文摘登记号(CASRN)、苄氧基羰基(CBZ或Z)、羰基二咪唑(CDI)、1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(DABCO)、二乙基氨基三氟化硫(DAST)、二苄叉丙酮(dba)、1,5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)、1,2-二氯乙烷(DCE)、二氯甲烷(DCM)、2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯并苯醌(DDQ)、偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)、偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)，二异丁基氢化铝(DIBAL或DIBAL-H)、二异丙基乙基胺(DIPEA)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、4-N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、1,1'-双-(二苯基膦基)乙烷(dppe)、1,1'-双-(二苯基膦基)二茂铁(dppf)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉(EEDQ)、乙基(Et)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、2-乙氧基-2H-喹啉-1-羧酸乙酯(EEDQ)、乙醚(Et2O)、乙基异丙基醚(EtOiPr)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐乙酸(HATU)、乙酸(HOAc)、1-N-羟基苯并三唑(HOBt)、高压液相色谱(HPLC)、异丙醇(IPA)、异丙基氯化镁(iPrMgCl)、六甲基二硅氮烷(HMDS)、液相色谱质谱仪(LCMS)、六甲基二硅烷基氨基锂(LiHMDS)、间氯过氧基苯甲酸(m-CPBA)、甲醇(MeOH)、熔点(mp)、MeSO2-(甲磺酰基或Ms)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、间氯过苯甲酸(MCPBA)、质谱(ms)、甲基叔丁基醚(MTBE)、甲基四氢呋喃(MeTHF)、N-溴丁二酰亚胺(NBS)、正丁基锂(nBuLi)、N-羧基酸酐(NCA)、N-氯丁二酰亚胺(NCS)、N-甲基吗啉(NMM)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、氯铬酸吡啶(PCC)、二氯-((双-二苯基膦基)二茂铁基)钯(II)(Pd(dppf)Cl2)、乙酸钯(II)(Pd(OAC)2)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd2(dba)3)、重铬酸吡啶(PDC)、苯基(Ph)、丙基(Pr)、异丙基(i-Pr)、磅每平方英寸(psi)、吡啶(pyr)、1,2,3,4,5-五苯基-1’-(二叔丁基膦基)二茂铁(Q-Phos)、室温(环境温度、rt或RT)、仲丁基锂(sBuLi)、叔丁基二甲基甲硅烷基或t-BuMe2Si(TBDMS)、四正丁基氟化铵(TBAF)、三乙基胺(TEA或Et3N)、2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基(TEMPO)、三氟甲磺酸基或CF3SO2-(Tf)、三氟乙酸(TFA)、1,1'-双-2,2,6,6-四甲基庚烷-2,6-二酮(TMHD)、O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TBTU)、薄层色谱法(TLC)、四氢呋喃(THF)、三甲基甲硅烷基或Me3Si(TMS)、对甲苯磺酸一水合物(TsOH或pTsOH)、4-Me-C6H4SO2-或甲苯磺酰基(Ts)、N-尿烷-N-羧酐(UNCA)。惯用的命名(包括前缀正(n)、异(i-)、仲(sec-)、叔(tert-)和新)当其与烷基部分一起使用时具有其常规的含义(J.Rigaudy和D.P.Klesney,Nomenclature in Organic Chemistry,IUPAC 1979Pergamon Press,Oxford.)。
[0213] 通用条件
[0214] 除非另有说明，否则所有温度，包括熔点(即MP)为摄氏度(℃)。应当理解产生所指明和/或所需要的产物的反应可不必由最初添加的两种试剂的组合引起，即可能是一种或多种在混合物中产生的中间体最终导致了所指明和/或所需要的产物的形成。前述缩写可用于制备和实施例。所有名字使用Autonom或ChemDraw产生。
[0215] 给出以下制备和实施例使得本领域的技术人员能够更清楚地理解并实施本发明。它们不应被视为限制被发明的范围，而应仅仅被是作为本发明的解释和代表。
[0216] 制备实施例
[0217] 实施例1
[0218] 操作1
[0219] 2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛[0220]
[0221] 方法A
[0222] 步骤1
[0223] (2-溴-7-羟基甲基-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-基)-甲醇
[0224]
[0225] 向2-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(5.0g,25.2mmol)在1,4-二噁烷(100mL)中的部分混悬液中加入2.0MNaOH水溶液(25mL,50.0mmol)和37％甲醛水溶液(19mL,252mmol)。将深色均匀反应混合物在室温搅拌过夜。将有机物减压蒸发。将水层用1.0M HCl中和并用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机物浓缩得到2.6g橙色固体。静置时，在水层中形成粘稠的棕色析出物。将析出物经滤过收集并干燥。将棕色固体用热的10％MeOH/EtOAc(3x 200mL)萃取。合并萃取物并蒸发得到另外的3.05g橙色固体。总产量为5.65g(87％)的(2-溴-7-羟基甲基-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-基)-甲醇。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ(ppm)8.43(s,1H),7.96(s,1H),6.71(t,J＝7.3Hz,1H),5.59(d,J＝7.6Hz,2H),5.10(t,J＝5.3Hz,1H),4.66(d,J＝5.6Hz,
2H)。
2H)。
[0226] 步骤2
[0227] (2-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-基)-甲醇
[0228]
[0229] 向(2-溴-7-羟基甲基-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-基)-甲醇(5.65g,21.9mmol)在THF(150mL)中的混悬液中加入2.0M NaOH水溶液(33mL,66mmol)。将均匀的反应混合物搅拌过夜，然后将有机物减压除去。将水性残留物用1.0MHCl水溶液调节到pH 4。将所得的析出物经滤过收集，并用H2O淋洗得到3.68g黄色固体。将滤液用EtOAc(2x)萃取，并将有机物减压浓缩得到另外的0.92g黄色固体。总产量为4.60g(92％)的(2-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-基)-甲醇。1H NMR(DMSO-d6,300MHz)：δ(ppm)12.19(宽单峰,1H),8.33(s,1H),7.85(s,
1H),4.96(t,J＝5.3Hz,1H),4.62(d,J＝4.9Hz,2H)。
1H),4.96(t,J＝5.3Hz,1H),4.62(d,J＝4.9Hz,2H)。
[0230] 步骤3
[0231] 2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛[0232]
[0233] Jones试剂的储备溶液(2.67M)通过小心地将浓H2SO4(2.3mL)加入至CrO3(2.67g)、然后用H2O稀释至10mL来制备。向(2-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-基)-甲醇(4.6g,20.1mmol)在丙酮(300mL)中的部分混悬液中缓慢加入Jones试剂(9mL,24.0mmol)。在加入过程中，起始物质逐渐溶解并形成粘稠的绿色析出物。将反应混合物搅拌15分钟，然后用i-PrOH(2mL)终止并经硅藻土滤过，用丙酮淋洗。将滤液浓缩得到4.76g的2-溴-5H-吡咯并[2,
3-b]吡嗪-7-甲醛，其为黄橙色固体，其无需进一步纯化即可使用。在0℃向该固体在DMF(50mL)中的溶液中加入NaH(60％在矿物油中,1.2g,30.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌
30分钟，然后冷却至返回0℃并缓慢加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(4.3mL,
24.1mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌1小时，然后用H2O终止并用EtOAc(3x)萃取。将合并的有机物用H2O(3x)和盐水洗涤，然后经MgSO4干燥并浓缩。将残留物经SiO2色谱法(20％至30％EtOAc/己烷)纯化分离，得到3.82g(53％)的2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛，其为黄色固体。1H NMR(CDCl3,300MHz)：δ(ppm)
10.37(s,1H),8.50(s,1H),8.33(s,1H),5.73(s,2H),3.53-3.70(m,2H),0.90-1.05(m,2H),
0.00(s,9H)。
3-b]吡嗪-7-甲醛，其为黄橙色固体，其无需进一步纯化即可使用。在0℃向该固体在DMF(50mL)中的溶液中加入NaH(60％在矿物油中,1.2g,30.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌
30分钟，然后冷却至返回0℃并缓慢加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(4.3mL,
24.1mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌1小时，然后用H2O终止并用EtOAc(3x)萃取。将合并的有机物用H2O(3x)和盐水洗涤，然后经MgSO4干燥并浓缩。将残留物经SiO2色谱法(20％至30％EtOAc/己烷)纯化分离，得到3.82g(53％)的2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛，其为黄色固体。1H NMR(CDCl3,300MHz)：δ(ppm)
10.37(s,1H),8.50(s,1H),8.33(s,1H),5.73(s,2H),3.53-3.70(m,2H),0.90-1.05(m,2H),
0.00(s,9H)。
[0234] 方法B
[0235] 步骤1
[0236] 2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪
[0237]
[0238] 在干燥的圆底烧瓶中，将2-溴-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(5.0g,25.2mmol)在DMF(50mL)中溶解。将反应混合物冷却至0℃并加入氢化钠(60％在矿物油中的分散液,1.22g,30.6mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌15分钟，然后冷却至返回0℃并缓慢加入SEM-Cl(5.4mL,30.4mmol)。在完成加入后，移去冰浴并将反应混合物在室温搅拌1.5小时。将反应混合物用50mL水终止并用150mL乙醚(2x)萃取。将合并的有机层用30mL水洗涤两次并用
30mL盐水洗涤一次，然后经硫酸钠干燥，滤过并浓缩。将残留物吸附于～20g SiO2上并经
200g SiO2用EtOAc/己烷(梯度：0-15％EtOAc)进行色谱法纯化。合并含有产物的所有馏分并浓缩，得到2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(6.61g,
80％)，其为淡黄色油状物，其逐渐固化。1H NMR(CDCl3,300MHz)：δ(ppm)8.38(s,1H),7.70(d,J＝3.8Hz,1H),6.76(d,J＝3.8Hz,1H),5.68(s,2H),3.50-3.65(m,2H),0.88-1.03(m,
2H),0.00(s,9H)。
30mL盐水洗涤一次，然后经硫酸钠干燥，滤过并浓缩。将残留物吸附于～20g SiO2上并经
200g SiO2用EtOAc/己烷(梯度：0-15％EtOAc)进行色谱法纯化。合并含有产物的所有馏分并浓缩，得到2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(6.61g,
80％)，其为淡黄色油状物，其逐渐固化。1H NMR(CDCl3,300MHz)：δ(ppm)8.38(s,1H),7.70(d,J＝3.8Hz,1H),6.76(d,J＝3.8Hz,1H),5.68(s,2H),3.50-3.65(m,2H),0.88-1.03(m,
2H),0.00(s,9H)。
[0239] 步骤2
[0240] 2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛[0241]
[0242] 在圆底烧瓶中，将2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(6.58g,20.0mmol)在氯仿(戊烯稳定的,120mL)中溶解并加入氯亚甲基二甲基亚胺鎓氯化物(10.3g,80.2mmol)。将反应混合物回流搅拌8小时，同时将稳定的氮气流鼓泡经过反应混合物。将深棕色溶液冷却至室温并搅拌过夜。将反应混合物小心地用～100mL饱和NaHCO3-溶液终止(注意：放热)，然后用200mL乙醚萃取两次。合并有机层，经硫酸钠干燥，滤过并浓缩。将残留物吸附于～20g SiO2上，并经200g SiO2用EtOAc/己烷(梯度：0-25％EtOAc)进行色谱法纯化。合并含有产物的所有馏分并浓缩，得到5.92g(83％)约3:1的2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛和2-氯-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛的混合物，其为黄色固体。溴化物：1H NMR(CDCl3,300MHz)：δ(ppm)10.37(s,1H),8.50(s,1H),8.33(s,1H),5.73(s,2H),3.56-
3.67(m,2H),0.91-1.02(m,2H),0.00(s,9H)；氯化物：1H NMR(CDCl3,300MHz)：δ(ppm)10.36(s,1H),8.41(s,1H),8.35(s,1H),5.74(s,2H),3.56-3.67(m,2H),0.91-1.02(m,2H),0.00(s,9H)。
3.67(m,2H),0.91-1.02(m,2H),0.00(s,9H)；氯化物：1H NMR(CDCl3,300MHz)：δ(ppm)10.36(s,1H),8.41(s,1H),8.35(s,1H),5.74(s,2H),3.56-3.67(m,2H),0.91-1.02(m,2H),0.00(s,9H)。
[0243] 操作2
[0244] 2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸
[0245]
[0246] 在烧瓶中，将2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛(3.11g,8.74mmol)在二噁烷(120mL)和H2O(30mL)中溶解，并将混合物在0℃冷却。加入氨基磺酸(5.09g,52.4mmol)，随后历时15分钟经加料漏斗加入亚氯酸钠(1.28g,
11.4mmol)和磷酸二氢钾(14.3g,104.9mmol)在H2O(75mL)中的溶液。历时2小时将混合物温热至室温。将所得的黄色固体滤出，用H2O和己烷洗涤并干燥。然后将滤液用EtOAc萃取，并将合并的有机物用盐水洗涤，经MgSO4干燥并浓缩得到额外的产物。得到总计3.71g的2-溴-
5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸，其为黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ(ppm)8.52(s,1H),8.42(s,1H),5.73(s,2H),3.56-3.65(m,2H),
0.90-1.02(m,2H),0.00(s,9H)。
11.4mmol)和磷酸二氢钾(14.3g,104.9mmol)在H2O(75mL)中的溶液。历时2小时将混合物温热至室温。将所得的黄色固体滤出，用H2O和己烷洗涤并干燥。然后将滤液用EtOAc萃取，并将合并的有机物用盐水洗涤，经MgSO4干燥并浓缩得到额外的产物。得到总计3.71g的2-溴-
5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸，其为黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ(ppm)8.52(s,1H),8.42(s,1H),5.73(s,2H),3.56-3.65(m,2H),
0.90-1.02(m,2H),0.00(s,9H)。
[0247] 操作3
[0248] 2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0249]
[0250] 在100ml圆底烧瓶中，将2-溴-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸(1.00g,2.69mmol)在DMF(6ml)中溶解。加入叔丁基胺(1.7ml,16.2mmol)，随后加入HATU(1.12g,2.95mmol)。将黄色的混悬液在室温搅拌72小时，然后用水终止并用乙醚和EtOAc的混合物萃取。将有机层用水洗涤两次并用盐水洗涤一次，然后合并，经硫酸钠干燥，滤过并浓缩。将残留物用石油醚研磨得到989mg(86％)的2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺，其为灰白色粉末。1H NMR(CDCl3,300MHz)：δ(ppm)8.40(s,1H),8.31(s,1H),7.86(s,1H),5.65(s,2H),3.46-3.58(m,2H),1.54(s,9H),0.84-0.98(m,2H),-0.04(s,9H)。
[0251] 操作4
[0252] 2-溴-N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0253]
[0254] 向2-溴-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸(2g,5.37mmol)、2-氨基-2-甲基丙-1-醇(575mg,6.45mmol)和HATU(2.25g,5.91mmol)的混合物中加入DIPEA(2.08g,2.81mL,16.1mmol)和DMF(18mL)。将混合物在室温搅拌16小时，然后用EtOAc和10％枸橼酸稀释。分离各相，然后将有机相先后用10％枸橼酸、NaHCO3和盐水洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，滤过并经色谱法(硅胶,20-60％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-溴-N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(1.95g,4.4mmol,82％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm：8.47(s,1H),8.34(s,1H),8.13(s,1H),5.69(s,2H),3.78(s,2H),3.57(t,J＝8.4Hz,3H),1.52(s,60.96(t,J＝8.4Hz,3H),0.00(s,9H)。
[0255] 实施例1
[0256] N-叔丁基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0257]
[0258] 步骤1
[0259] 向5-甲基吡啶-2-胺(38.0mg,351μmol)、2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(100mg,234μmol)、(R)-(+)-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘(7.28mg,11.7μmol)、乙酸钯(II)(13.1mg,58.5μmol)和叔丁醇钠(56.2mg,585μmol)的混合物中加入DMF(1mL)和甲苯(500μL)，并将混合物在140℃微波中加热20分钟。将产生的深色混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，滤过并经色谱法(硅胶,30-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(62mg,136μmol,58％)，其为灰白色固体。MS(EI/CI)m/z:455.3[M+H]。
[0260] 步骤2
[0261] 向N-叔丁基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(162mg,356μmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入三氟乙酸(813mg,549μL,7.13mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。然后将混合物真空浓缩，并将得到的残留物在二氯甲烷(3mL)、甲醇(1mL)和氢氧化铵(0.6mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌30分钟。将形成的黄色析出物经滤过收集并干燥。将母液经色谱法(硅胶,5-25％的1:4甲醇:二氯甲烷的二氯甲烷溶液)纯化，并与固体合并得到N-叔丁基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(77mg,237μmol,67％)，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.37(s,1H),9.88(s,1H),8.38(s,1H),8.13(d,J＝
2.5Hz,1H),8.04(d,J＝3.2Hz,1H),7.88(d,J＝8.5Hz,1H),7.74(s,1H),7.51(dd,J＝8.2,
2.3Hz,1H),2.25(s,3H),1.47(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:325.1[M+H]。
2.5Hz,1H),8.04(d,J＝3.2Hz,1H),7.88(d,J＝8.5Hz,1H),7.74(s,1H),7.51(dd,J＝8.2,
2.3Hz,1H),2.25(s,3H),1.47(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:325.1[M+H]。
[0262] 实施例2
[0263] N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0264]
[0265] 步骤1
[0266] 向5-甲基吡啶-2-胺(72.1mg,666μmol)、2-溴-N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(197mg,444μmol)、(R)-(+)-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘(13.8mg,22.2μmol)、乙酸钯(II)(24.9mg,111μmol)和叔丁醇钠(107mg,1.11mmol)的混合物中加入DMF(2mL)和甲苯(1mL)，然后在140℃微波中加热20分钟。将产生的深色混合物倒入水中，并用乙酸乙酯(3x)萃取。合并有机层，用盐水(2x)洗涤，经硫酸镁干燥并经色谱法(硅胶,65-100％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(66mg,140μmol,32％)，其为浅黄色固体。MS(EI/CI)m/z:471.4。
[0267] 步骤2
[0268] 向N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(66mg,140μmol)在二氯甲烷(1.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(320mg,216μL,2.8mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，然后将残留物在二氯甲烷(2mL)、甲醇(0.5mL)和氢氧化铵(0.3mL)中溶解。在室温搅拌30分钟后，将混合物真空浓缩并用乙醚和水研磨。将黄色析出物经滤过收集，并用水、然后乙醚洗涤，得到N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(31mg,91.1μmol,65％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.38(s,1H),9.86(s,1H),8.39(s,1H),8.12(d,J＝2.5Hz,1H),
8.04(d,J＝3.3Hz,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,1H),7.74(s,1H),7.54(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),
5.06(s,1H),3.58(s,2H),2.25(s,3H),1.39(s,6H)；MS(EI/CI)m/z:341.1[M+H]。
8.04(d,J＝3.3Hz,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,1H),7.74(s,1H),7.54(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),
5.06(s,1H),3.58(s,2H),2.25(s,3H),1.39(s,6H)；MS(EI/CI)m/z:341.1[M+H]。
[0269] 实施例3
[0270] N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0271]
[0272] 步骤1
[0273] 向2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(200mg,468μmol)、1-甲基-1H-吡唑-3-胺(68.2mg,702μmol)、BINAP(14.6mg,23.4μmol)、乙酸钯(II)(26.3mg,117μmol)和叔丁醇钠(112mg,1.17mmol)的混合物中加入DMF(1.01mL)和甲苯(503μL)并在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物冷却，然后用水稀释并在乙酸乙酯中萃取。合并有机层并用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,
20-100％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(140mg,316μmol,
67％)，其为黄色固体。MS(EI/CI)m/z:444.3。
20-100％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(140mg,316μmol,
67％)，其为黄色固体。MS(EI/CI)m/z:444.3。
[0274] 步骤2
[0275] 向N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(140mg,316μmol)在二氯甲烷(3.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(720mg,486μL,6.31mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物在二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.65mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用乙醚和水研磨。将固体经滤过收集，然后真空干燥得到N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(44mg,140μmol,45％)，其为棕色固体。1H NMR(400MHz,甲醇-d)δppm：8.07(s,1H),7.93(s,1H),7.81(s,1H),7.35(d,J＝2.2Hz,1H),6.32(d,J＝2.2Hz,1H),3.67(s,3H),1.35(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:314.1[M+H]。
[0276] 实施例4
[0277] N-异丙基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0278]
[0279] 步骤1
[0280] 向2-溴-N-异丙基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,363μmol)、5-甲基吡啶-2-胺(58.9mg,544μmol)、BINAP(11.3mg,18.1μmol)、乙酸钯(II)(20.4mg,90.7μmol)和叔丁醇钠(87.2mg,907μmol)的混合物中加入DMF(780μL)和甲苯(390μL)并在140℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后用水和乙酸乙酯稀释。将混合物用乙酸乙酯(3x)萃取，然后合并有机萃取物并用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并经色谱法(硅胶,30-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-异丙基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(90mg,204μmol,56％)，其为灰白色固体。MS(EI/CI)m/z:441.3[M+H]。
[0281] 步骤2
[0282] 向N-异丙基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(90mg,204μmol)在二氯甲烷(2.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(466mg,315μL,4.09mmol)并在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，然后将得到的残留物在二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.45mL)中溶解。在室温3小时后，将混合物真空浓缩，然后用水和乙醚研磨。将固体经滤过收集得到N-异丙基-2-(5-甲基吡啶-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(23mg,74.1μmol,36％)，其为灰白色固1
体。H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.40(s,1H),9.92(s,1H),8.43(s,1H),8.14(s,1H),
8.09(d,J＝3.2,1H),7.86(s,1H),7.85(d,J＝15.1Hz,1H),7.55(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),
4.16(m,1H),2.26(s,3H),1.25(d,J＝6.5,6H)；MS(EI/CI)m/z:311.1[M+H]。
体。H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.40(s,1H),9.92(s,1H),8.43(s,1H),8.14(s,1H),
8.09(d,J＝3.2,1H),7.86(s,1H),7.85(d,J＝15.1Hz,1H),7.55(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),
4.16(m,1H),2.26(s,3H),1.25(d,J＝6.5,6H)；MS(EI/CI)m/z:311.1[M+H]。
[0283] 实施例5
[0284] N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0285]
[0286] 步骤1
[0287] 向2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-胺盐酸盐(70.3mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(84.3mg,877μmol)的混合物中加入DMF(1mL)和甲苯(500μL)。在140℃微波中加热20分钟后，将反应混合物冷却，用水稀释并用乙酸乙酯(3x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥，并经色谱法(硅胶,30-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(89mg,201μmol,57％)，其为黄色固体。MS(EI/CI)m/z:314.1[M+H]。
[0288] 步骤2
[0289] 向N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(89mg,201μmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入三氟乙酸(458mg,309μL,4.01mmol)，并将反应混合物在室温搅拌16小时。将混合物真空浓缩，然后在二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.45mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。真空浓缩后，将混合物用水研磨并滤过收集固体。将固体用乙醚洗涤并干燥得到N-叔丁基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(58mg,185μmol,92％)，其为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.18(s,1H),9.11(s,1H),7.90(d,J＝3.2,1H),7.86(s,1H),7.85(s,1H),7.72(s,1H),7.55(s,1H),3.80(s,3H),1.43(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:314.1[M+H]。
[0290] 实施例6
[0291] N-叔丁基-2-(6-甲基吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0292]
[0293] 步骤1
[0294] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、6-甲基吡啶-3-胺(56.9mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(84.3mg,877μmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物冷却，然后用水稀释并在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,30-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(6-甲基吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(57mg,125μmol,36％)，其为棕色固体。MS(EI/CI)m/z:455.2[M+H]。
[0295] 步骤2
[0296] 向N-叔丁基-2-(6-甲基吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(55mg,121μmol)在二氯甲烷(1.9mL)中的溶液中加入三氟乙酸(276mg,186μL,2.42mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，然后将得到的残留物在二氯甲烷(2mL)、甲醇(1mL)和氢氧化铵(0.25mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物浓缩并用水研磨，然后滤过得到固体，将其用乙醚洗涤并干燥得到N-叔丁基-2-(6-甲基吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(33mg,102μmol,84％)，其为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.23(s,1H),9.41(s,1H),8.60(d,J＝2.3,1H),7.91(m,3H),7.59(s,1H),7.06(d,J＝8.5,1H),2.31(s,3H),1.32(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:325.1[M+H]。
[0297] 实施例7
[0298] N-叔丁基-2-(2-甲基嘧啶-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0299]
[0300] 步骤1
[0301] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、2-甲基嘧啶-5-胺(57.4mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(84.3mg,877μmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,40-80％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(2-甲基嘧啶-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(78mg,171μmol,49％)，其为棕色固体。MS(EI/CI)m/z:456.2[M+H]。
[0302] 步骤2
[0303] 向N-叔丁基-2-(2-甲基嘧啶-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(78mg,171μmol)在二氯甲烷(2.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(390mg,264μL,3.42mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(2.5mL)、甲醇(1.2mL)和氢氧化铵(0.35mL)稀释，并将混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，然后用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到N-叔丁基-2-(2-甲基嘧啶-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(43mg,132μmol,77％)，其为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.31(s,1H),9.57(s,1H),8.90(s,2H),7.96(d,J＝3.3,1H),7.92(s,1H),7.53(s,1H),2.46(s,3H),1.32(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:326.1[M+H]。
[0304] 实施例8
[0305] N-叔丁基-2-(5-甲基吡嗪-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0306]
[0307] 步骤1
[0308] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、5-甲基吡嗪-2-胺(57.4mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(84.3mg,877μmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,30-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(5-甲基吡嗪-2-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(72mg,158μmol,45％)，其为灰白色固体。MS(EI/CI)m/z:456.2[M+H]。
[0309] 步骤2
[0310] 向N-叔丁基-2-(5-甲基吡嗪-2-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(72mg,158μmol)在二氯甲烷(2.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(360mg,243μL,3.16mmol)并在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(2.5mL)、甲醇(1.2mL)和氢氧化铵(0.35mL)稀释，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到N-叔丁基-2-(5-甲基吡嗪-2-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(26mg,79.9μmol,51％)，其为浅绿色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.45(s,1H),10.12(s,1H),9.17(d,J＝1.5,1H),8.40(s,1H),8.21(s,1H),8.10(d,J＝3.2,1H),7.73(s,1H),2.42(s,3H),
1.46(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:326.1[M+H]。
1.46(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:326.1[M+H]。
[0311] 实施例9
[0312] N-叔丁基-2-(3-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0313]
[0314] 步骤1
[0315] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、3-甲基-1H-吡唑-5-胺(51.1mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(84.3mg,877μmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,50-
100％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(27mg,60.9μmol,
17.3％)，其为棕色固体。MS(EI/CI)m/z:444.3[M+H]。
100％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(27mg,60.9μmol,
17.3％)，其为棕色固体。MS(EI/CI)m/z:444.3[M+H]。
[0316] 步骤2
[0317] 向N-叔丁基-2-(3-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(25mg,56.4μmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液中加入三氟乙酸(129mg,86.8μL,1.13mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(1mL)、甲醇(0.5mL)和氢氧化铵(0.15mL)稀释，并在室温搅拌1小时。经色谱法(硅胶,20-50％[10％甲醇/二氯甲烷/0.5％氢氧化铵]/二氯甲烷)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(10mg,31.9μmol,57％)，其为浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.19(s,1H),10.12(s,1H),9.53(s,1H),8.07(s,1H),7.93(d,J＝3.0,1H),7.81(s,1H),6.33(s,1H),
2.19(s,3H),1.45(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:314.1[M+H]。
2.19(s,3H),1.45(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:314.1[M+H]。
[0318] 实施例10
[0319] N-叔丁基-2-(吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0320]
[0321] 步骤1
[0322] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、吡啶-3-胺(49.5mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(84.3mg,877μmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,30-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(44mg,99.9μmol,28.5％)，其为黄色固体。MS(EI/CI)m/z:311.1[M+H]。
[0323] 步骤2
[0324] 向N-叔丁基-2-(吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(44mg,99.9μmol)在二氯甲烷(1.6mL)中的溶液中加入三氟乙酸(228mg,154μL,2.00mmol)并将反应混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(1.6mL)、甲醇(0.8mL)和氢氧化铵(0.2mL)稀释，并在室温搅拌1小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到N-叔丁基-2-(吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(24mg,77.3μmol,77％)，其为棕色
1
固体。H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.26(s,1H),9.54(s,1H),8.77(d,J＝2.5,1H),8.04(d,J＝4.6,1H),7.98(d,J＝8.5,1H),7.92(d,J＝3.3,1H),7.91(s,1H),7.57(s,1H),7.19(m,1H),1.31(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:311.1[M+H]。
1
固体。H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.26(s,1H),9.54(s,1H),8.77(d,J＝2.5,1H),8.04(d,J＝4.6,1H),7.98(d,J＝8.5,1H),7.92(d,J＝3.3,1H),7.91(s,1H),7.57(s,1H),7.19(m,1H),1.31(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:311.1[M+H]。
[0325] 实施例11
[0326] N-叔丁基-2-(2-氟-4-甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0327]
[0328] 步骤1
[0329] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、2-氟-4-甲基苯胺(65.9mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(84.3mg,877μmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,20-50％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到N-叔丁基-2-(2-氟-4-甲基苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(87mg,184μmol,53％)，其为灰白色固体。MS(EI/CI)m/z:470.1[M-H]。
[0330] 步骤2
[0331] 向N-叔丁基-2-(2-氟-4-甲基苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(87mg,184μmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入三氟乙酸(421mg,284μL,3.69mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.4mL)稀释，并在室温搅拌1小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到N-叔丁基-2-(2-氟-4-甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(58mg,170μmol,92％)，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.27(s,1H),8.97(s,1H),8.10(s,1H),7.96(d,J＝2.3,1H),7.81(t,J＝8.6,1H),7.70(s,1H),7.10(d,J＝12.4,1H),6.95(d,J＝
8.0,1H),2.29(s,3H),1.32(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:342.1[M+H]。
8.0,1H),2.29(s,3H),1.32(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:342.1[M+H]。
[0332] 实施例12
[0333] N-叔丁基-2-(对甲苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0334]
[0335] 步骤1
[0336] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、对甲苯胺(56.4mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(84.3mg,877μmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,20-45％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(对甲苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(80mg,116μmol,33％)，其为棕色胶状物。MS(EI/CI)m/z:454.4[M+H]。
[0337] 步骤2
[0338] 向N-叔丁基-2-(对甲苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(80mg,176μmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入三氟乙酸(402mg,272μL,3.53mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.4mL)稀释，并在室温搅拌1小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤。经色谱法(硅胶,20-
40％的10:89.5:0.5甲醇:二氯甲烷:氢氧化铵的二氯甲烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(对甲苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(17mg,52.6μmol,30％)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.26(s,1H),9.34(s,1H),7.97(s,1H),7.96(d,J＝3.3,
1H),7.76(s,1H),7.57(t,J＝8.5,2H),7.09(d,J＝8.1,2H),2.26(s,3H),1.44(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:324.1[M+H]。
40％的10:89.5:0.5甲醇:二氯甲烷:氢氧化铵的二氯甲烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(对甲苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(17mg,52.6μmol,30％)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.26(s,1H),9.34(s,1H),7.97(s,1H),7.96(d,J＝3.3,
1H),7.76(s,1H),7.57(t,J＝8.5,2H),7.09(d,J＝8.1,2H),2.26(s,3H),1.44(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:324.1[M+H]。
[0339] 实施例13
[0340] N-叔丁基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0341]
[0342] 步骤1
[0343] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、3-(甲基磺酰基)苯胺盐酸盐(109mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(101mg,1.05mmol,Eq:3)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,20-50％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(61mg,118μmol,34％)，其为棕色胶状物。(EI/CI)m/z:518.3[M+H]。
[0344] 步骤2
[0345] 向N-叔丁基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(61mg,118μmol)在二氯甲烷(1.8mL)中的溶液中加入三氟乙酸(269mg,182μL,2.36mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(1.8mL)、甲醇(0.9mL)和氢氧化铵(0.25mL)稀释，并在室温搅拌1小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤。经色谱法(硅胶,梯度未知，二氯甲烷/甲醇/0.5％氢氧化铵)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(26mg,67.1μmol,57％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.42(s,1H),9.87(s,1H),8.33(d,J＝8.2,1H),8.05(d,J＝
3.4,1H),8.03(s,1H),7.79(t,J＝2.0,1H),7.68(s,1H),7.54(t,J＝8.0,1H),7.47(d,J＝
7.7,1H),3.21(s,3H),1.42(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:388.2[M+H]。
3.4,1H),8.03(s,1H),7.79(t,J＝2.0,1H),7.68(s,1H),7.54(t,J＝8.0,1H),7.47(d,J＝
7.7,1H),3.21(s,3H),1.42(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:388.2[M+H]。
[0346] 实施例14
[0347] N-叔丁基-2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0348]
[0349] 步骤1
[0350] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、1-乙基-1H-吡唑-4-胺盐酸盐(51.8mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(101mg,1.05mmol,Eq:3)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,40-80％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(82mg,179μmol,51％)，其为黄色胶状物。(EI/CI)m/z:458.4[M+H]。
[0351] 步骤2
[0352] 向N-叔丁基-2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(82mg,179μmol)在二氯甲烷(2.7mL)中的溶液中加入三氟乙酸(409mg,276μL,3.58mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.4mL)稀释，并在室温搅拌1小时。将反应混合物浓缩，然后经色谱法(硅胶,15-65％二氯甲烷/[10％二氯甲烷/甲醇/0.5％氢氧化铵])纯化，得到N-叔丁基-2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(33mg,101μmol,56％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.16(s,1H),9.06(s,1H),7.90(d,J＝3.3,1H),7.85(s,1H),7.84(s,1H),7.73(s,1H),7.59(s,1H),4.08(q,J＝7.3,2H),1.42(s,9H),1.36(t,J＝7.3,3H)；MS(EI/CI)m/z:
328.1[M+H]。
328.1[M+H]。
[0353] 实施例15
[0354] N-叔丁基-2-(2-(二甲基氨甲酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0355]
[0356] 步骤1
[0357] 向2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)在二氯甲烷(5.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(800mg,541μL,7.02mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(5mL)、甲醇(2.5mL)和氢氧化铵(0.7mL)稀释，并在室温搅拌1小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到2-溴-N-叔丁基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(80mg,269μmol,77％)，其为灰白色固体。
[0358] 步骤2
[0359] 将2-溴-N-叔丁基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(80mg,269μmol)、2-氨基-N,N-二甲基苯甲酰胺盐酸盐(81.0mg,404μmol)、BINAP(8.38mg,13.5μmol)、乙酸钯(II)(15.1mg,67.3μmol)和叔丁醇钠(77.6mg,808μmol,Eq:3)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(15-45％二氯甲烷/[10％二氯甲烷/甲醇/0.5％氢氧化铵])纯化，得到N-叔丁基-2(2(二甲基氨甲酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(16mg,42.1μmol,16％)，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.25(s,1H),8.77(s,1H),8.06(s,1H),7.96(d,J＝3.0,1H),7.91(d,J＝7.9,1H),7.78(s,1H),7.38(t,J＝7.7,1H),7.30(d,J＝7.5,1H),7.11(t,J＝7.5,1H),2.88(s,3H),2.80(s,3H),1.27(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:381.2[M+H]。
[0360] 实施例16
[0361] N-叔丁基-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0362]
[0363] 步骤1
[0364] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、1,5-二甲基-1H-吡唑-4-胺二盐酸盐(96.9mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(118mg,1.23mmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(50-100％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(45mg,98.3μmol,28％)，其为黄色胶状物。(EI/CI)m/z:458.3[M+H]。
[0365] 步骤2
[0366] 向N-叔丁基-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(45mg,98.3μmol)在二氯甲烷(1.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(224mg,152μL,1.97mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(1.5mL)、甲醇(0.75mL)和氢氧化铵(0.2mL)稀释，并在室温搅拌2小时。将反应混合物浓缩，然后经色谱法(硅胶,10-45％的1:4甲醇:二氯甲烷的二氯甲烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯1
并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(18mg,55.0μmol,56％)，其为黄色固体。H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.10(s,1H),8.39(s,1H),7.87(s,1H),7.86(s,1H),7.85(d,J＝3.3,1H),3.71(s,
3H),2.16(s,3H),1.30(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:328.2[M+H]。
并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(18mg,55.0μmol,56％)，其为黄色固体。H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.10(s,1H),8.39(s,1H),7.87(s,1H),7.86(s,1H),7.85(d,J＝3.3,1H),3.71(s,
3H),2.16(s,3H),1.30(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:328.2[M+H]。
[0367] 实施例17
[0368] N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0369]
[0370] 步骤1
[0371] 将2-溴-N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,338μmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-胺盐酸盐(67.8mg,526μmol)、BINAP(10.5mg,16.9μmol)、乙酸钯(II)(19.0mg,84.6μmol)和叔丁醇钠(81.3mg,846μmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,20-65％的10:89.5:0.5甲醇:二氯甲烷:氢氧化铵的二氯甲烷溶液)纯化，得到N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(28mg,60.9μmol,18％)，其为浅黄色固体。(EI/CI)m/z:460.3[M+H]。
[0372] 步骤2
[0373] 向N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(26mg,56.6μmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液中加入三氟乙酸(129mg,87.2μL,1.13mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(1mL)、甲醇(0.5mL)和氢氧化铵(0.15mL)稀释，并在室温搅拌2小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(12mg,36.4μmol,64％)，其为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.19(s,1H),9.16(s,1H),8.01(s,1H),7.91(d,J＝3.0,1H),7.86(s,1H),7.70(s,1H),7.49(s,1H),5.15(t,J＝5.7,1H),3.82(s,3H),3.57(d,J＝5.9,2H),1.37(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:330.2[M+H]。
[0374] 实施例18
[0375] N-叔丁基-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0376]
[0377] 步骤1
[0378] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、3-甲基异噻唑-5-胺盐酸盐(79.3mg,526μmol)、BINAP(10.9mg,17.5μmol)、乙酸钯(II)(19.7mg,87.7μmol)和叔丁醇钠(101mg,1.05mmol,Eq:3)在DMF(1.2mL)和甲苯(600μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,50-100％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(32mg,69.5μmol,20％)，其为黄色固体。(EI/CI)m/z:461.3[M+H]。
[0379] 步骤2
[0380] 向N-叔丁基-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(32mg,69.5μmol)在二氯甲烷(1.2mL)中的溶液中加入三氟乙酸(158mg,107μL,1.39mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(1.2mL)、甲醇(0.6mL)和氢氧化铵(0.15mL)稀释，并在室温搅拌2小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到N-叔丁基-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(18mg,54.5μmol,78.4％)，其为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.55(s,1H),11.39(s,1H),8.15(d,J＝3.2,1H),8.11(s,1H),7.37(s,1H),6.70(s,1H),2.33(s,3H),1.55(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:331.1[M+H]。
[0381] 实施例19
[0382] N-叔丁基-2-(2,4-二甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0383]
[0384] 步骤1
[0385] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(200mg,468μmol)、2,4-二甲基苯胺(85.1mg,526μmol)、BINAP(14.6mg,23.4μmol)、乙酸钯(II)(26.3mg,117μmol)和叔丁醇钠(112mg,1.17mmol)在DMF(1mL)和甲苯(500μL)中的混合物在140℃微波中加热20分钟。将反应混合物用水稀释，然后在乙酸乙酯(3x)中萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥。经色谱法(硅胶,20-60％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(2,4-二甲基苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(82mg,175μmol,37.5％)，其为棕色胶状物。(EI/CI)m/z:468.4[M+H]。
[0386] 步骤2
[0387] 向N-叔丁基-2-(2,4-二甲基苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(82mg,175μmol)在二氯甲烷(2.7mL)中的溶液中加入三氟乙酸(400mg,270μL,3.51mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.4mL)稀释，并在室温搅拌
1小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到N-叔丁基-2-(2,4-二甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(7mg,20.7μmol,12％)，其为黄
1
色固体。H NMR(400MHz,CDCl3-d)δppm：9.19(s,1H),8.12(d,J＝3.0,1H),7.95(s,1H),7.86(s,1H),7.50(d,J＝7.8,1H),7.15(s,1H),7.08(d,J＝8.2,1H),6.33(s,1H),2.38(s,3H),
2.34(s,1H),1.49(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:338.2[M+H]。
1小时。将混合物浓缩并用水研磨。将固体经滤过收集，并用水和乙醚洗涤得到N-叔丁基-2-(2,4-二甲基苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(7mg,20.7μmol,12％)，其为黄
1
色固体。H NMR(400MHz,CDCl3-d)δppm：9.19(s,1H),8.12(d,J＝3.0,1H),7.95(s,1H),7.86(s,1H),7.50(d,J＝7.8,1H),7.15(s,1H),7.08(d,J＝8.2,1H),6.33(s,1H),2.38(s,3H),
2.34(s,1H),1.49(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:338.2[M+H]。
[0388] 实施例20
[0389] N-叔丁基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0390]
[0391] 步骤1
[0392] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(125mg,292μmol)、4-(甲基磺酰基)苯胺(75.1mg,439μmol)、Xantphos(50.8mg,87.7μmol)、Pd2(dba)3(26.8mg,29.2μmol)和碳酸铯(191mg,585μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，经硅藻土滤过，并将滤液真空浓缩。经色谱法(硅胶,20-75％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(90mg,174μmol,59％)，其为浅黄色固体。(EI/CI)m/z:518.3[M+H]。
[0393] 步骤2
[0394] 将N-叔丁基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(90mg,174μmol)在二氯甲烷(3mL)中溶解并用三氟乙酸(396mg,268μL,3.48mmol)处理。在室温搅拌16小时后，将混合物真空浓缩，然后再在二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.35mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水稀释，研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到N-叔丁基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(65mg,168μmol,97％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.55(s,1H),10.12(s,1H),8.19(d,J＝2.8,1H),8.16(s,1H),7.95(d,J＝8.8,2H),7.88(d,J＝8.8,2H),7.75(s,1H),3.22(s,
3H),1.54(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:388.2[M+H]。
3H),1.54(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:388.2[M+H]。
[0395] 实施例21
[0396] N-叔丁基-2-(甲基(吡啶-3-基)氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0397]
[0398] 步骤1
[0399] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(125mg,292μmol)、N-甲基吡啶-3-胺(47.4mg,439μmol)、Xantphos(50.8mg,87.7μmol)、Pd2(dba)3(26.8mg,29.2μmol)和碳酸铯(191mg,585μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(甲基(吡啶-3-基)氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(38mg,
83.6μmol,29％)，其为黄色胶状物。(EI/CI)m/z:455.4[M+H]。
83.6μmol,29％)，其为黄色胶状物。(EI/CI)m/z:455.4[M+H]。
[0400] 步骤2
[0401] 将N-叔丁基-2-(甲基(吡啶-3-基)氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(38mg,83.6μmol)在二氯甲烷(1.5mL)中溶解并用三氟乙酸(191mg,129μL,1.67mmol)处理。16小时后，将混合物浓缩并将残留物再在二氯甲烷(1.5mL)、甲醇(0.75mL)和氢氧化铵(0.2mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物浓缩，然后用水研磨并滤过得到固体。将其用乙醚洗涤，然后干燥得到N-叔丁基-2-(甲基(吡啶-3-基)氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(16mg,49.3μmol,59％)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.33(s,1H),8.64(d,J＝2.5,1H),8.40(dd,J＝4.7,1.2,1H),8.05(d,J＝3.1,1H),7.96(s,1H),7.92(s,1H),7.82(m,1H),7.46(m,1H),3.50(s,
3H),1.32(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:325.1[M+H]。
3H),1.32(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:325.1[M+H]。
[0402] 实施例22
[0403] N-叔丁基-2-(3-甲基异噁唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0404]
[0405] 步骤1
[0406] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(125mg,292μmol)、3-甲基异噁唑-5-胺(43.0mg,439μmol)、Xantphos(50.8mg,87.7μmol)、Pd2(dba)3(26.8mg,29.2μmol)和碳酸铯(191mg,585μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,20-75％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-甲基异噁唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(33mg,74.2μmol,25.4％)，其为黄色固体。(EI/CI)m/z:455.3[M+H]。
[0407] 步骤2
[0408] 将N-叔丁基-2-(3-甲基异噁唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(33mg,74.2μmol)在二氯甲烷(1.3mL)中溶解并用三氟乙酸(169mg,114μL,1.48mmol)处理。将混合物在室温搅拌16小时，然后浓缩并再在二氯甲烷(1.3mL)、甲醇(0.65mL)和氢氧化铵(0.2mL)中溶解并在室温搅拌1小时。将混合物浓缩并用水稀释，研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤并干燥得到N-叔丁基-2-(3-甲基异噁唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(16mg,45.8μmol,62％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.53(s,1H),11.06(s,1H),8.14(d,J＝3.0,1H),8.09(s,
1H),7.57(s,1H),6.18(s,1H),2.17(s,3H),1.48(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:315.1[M+H]。
1H),7.57(s,1H),6.18(s,1H),2.17(s,3H),1.48(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:315.1[M+H]。
[0409] 实施例23
[0410] N-叔丁基-2-(6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0411]
[0412] 步骤1
[0413] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、6-(甲基磺酰基)吡啶-3-胺(90.7mg,526μmol)、Xantphos(60.9mg,105μmol)、Pd2(dba)3(32.1mg,35.1μmol)和碳酸铯(229mg,702μmol)在二噁烷(2.4mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,20-95％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(97mg,187μmol,53％)，其为黄色固体。(EI/CI)m/z:458.3[M+H]。
[0414] 步骤2
[0415] 将N-叔丁基-2-(6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(97mg,187μmol)在二氯甲烷(2.88mL)中溶解并用三氟乙酸(426mg,288μL,3.74mmol)处理。将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.5mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到N-叔丁基-2-(6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(71mg,
1
183μmol,98％)，其为黄色固体。H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.51(s,1H),10.26(s,1H),
8.99(d,J＝2.5,1H),8.37(dd,J＝8.4,2.7,1H),8.14(s,1H),8.11(s,1H),7.92(d,J＝8.7,
1H),7.62(s,1H),3.21(s,3H),1.45(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:389.2[M+H]。
1
183μmol,98％)，其为黄色固体。H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.51(s,1H),10.26(s,1H),
8.99(d,J＝2.5,1H),8.37(dd,J＝8.4,2.7,1H),8.14(s,1H),8.11(s,1H),7.92(d,J＝8.7,
1H),7.62(s,1H),3.21(s,3H),1.45(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:389.2[M+H]。
[0416] 实施例24
[0417] N-叔丁基-2-(3-(1-羟基乙基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0418]
[0419] 步骤1
[0420] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、1-(3-氨基苯基)乙醇(72.2mg,526μmol)、Xantphos(60.9mg,105μmol)、Pd2(dba)3(32.1mg,35.1μmol)和碳酸铯(229mg,702μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,40-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-(1-羟基乙基)苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(143mg,148μmol,42％)，其为黄色固体。(EI/CI)m/z:519.3[M+H]。
[0421] 步骤2
[0422] 将N-叔丁基-2-(3-(1-羟基乙基)苯基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(143mg,296μmol)在二氯甲烷(4.5mL)中溶解并用三氟乙酸(674mg,456μL,5.91mmol)处理。将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(4mL)、甲醇(3mL)和氢氧化铵(0.7mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物浓缩，然后经色谱法(硅胶,甲醇的二氯甲烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-(1-羟基乙基)苯基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(55mg,156μmol,53％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.29(s,1H),9.44(s,1H),8.00(s,1H),7.99(s,1H),7.98(d,J＝2.8,1H),7.78(s,1H),7.19(m,2H),6.91(d,J＝7.5,1H),5.17(d,J＝4.0,
1H),4.70(m,1H),3.38(q,J＝7.2,1H),1.43(s,9H),1.34(d.J＝6.3,3H),1.09(t,J＝7.2,
1H)；MS(EI/CI)m/z:354.2[M+H]。
1H),4.70(m,1H),3.38(q,J＝7.2,1H),1.43(s,9H),1.34(d.J＝6.3,3H),1.09(t,J＝7.2,
1H)；MS(EI/CI)m/z:354.2[M+H]。
[0423] 实施例25
[0424] N-叔丁基-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0425]
[0426] 步骤1
[0427] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、2-甲氧基嘧啶-5-胺(65.9mg,526μmol)、Xantphos(60.9mg,105μmol)、Pd2(dba)3(32.1mg,35.1μmol)和碳酸铯(229mg,702μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,40-80％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(99mg,210μmol,60％)，其为黄色固体。(EI/CI)m/z:484.3[M+H]。
[0428] 步骤2
[0429] 将N-叔丁基-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(100mg,212μmol)在二氯甲烷中溶解并用三氟乙酸(484mg,327μL,4.24mmol)处理。将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.45mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到N-叔丁基-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(64mg,187μmol,88％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.35(s,1H),9.48(s,1H),8.86(s,2H),8.01(s,1H),7.97(s,1H),7.63(s,1H),3.88(s,3H),1.38(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:342.1[M+H]。
[0430] 实施例26
[0431] N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0432]
[0433] 步骤1
[0434] 将2-溴-N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,338μmol)、吡啶-3-胺(47.8mg,507μmol)、Xantphos(58.7mg,101μmol)、Pd2(dba)3(31.0mg,33.8μmol)和碳酸铯(220mg,677μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。
将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,40-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度，然后二氯甲烷/甲醇)纯化，得到N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(32mg,59.6μmol,18％)，其为浅黄色固体。(EI/CI)m/z:472.3[M+H]。
将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,40-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度，然后二氯甲烷/甲醇)纯化，得到N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(32mg,59.6μmol,18％)，其为浅黄色固体。(EI/CI)m/z:472.3[M+H]。
[0435] 步骤2
[0436] 将N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(32mg,70.1μmol)在二氯甲烷(1.2mL)中溶解并用三氟乙酸(160mg,108μL,1.4mmol)处理。将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(1mL)、甲醇(0.5mL)和氢氧化铵(0.2mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-2-(吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(21mg,64.3μmol,92％)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.39(s,1H),9.66(s,1H),8.85(d,J＝2.5,1H),8.21(m,1H),8.16(dd,J＝4.7,1.6,1H),8.04(s,1H),
8.03(s,1H),7.67(s,1H),7.33(m,1H),5.05(t,J＝5.6,1H),3.58(d,J＝5.9,2H),1.36(s,
6H)；MS(EI/CI)m/z:327.1[M+H]。
8.03(s,1H),7.67(s,1H),7.33(m,1H),5.05(t,J＝5.6,1H),3.58(d,J＝5.9,2H),1.36(s,
6H)；MS(EI/CI)m/z:327.1[M+H]。
[0437] 实施例27
[0438] 2-(3-(1-氨基乙基)苯基氨基)-N-叔丁基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0439]
[0440] 步骤1
[0441] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、1-(3-氨基苯基)乙基氨基甲酸叔丁酯(124mg,526μmol)、Xantphos(60.9mg,105μmol)、Pd2(dba)3(32.1mg,35.1μmol)和碳酸铯(229mg,702μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,20-40％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到1-(3-(7-(叔丁基氨甲酰基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基氨基)苯基)乙基氨基甲酸叔丁酯(150mg,257μmol,73％)，其为黄色胶状物。(EI/CI)m/z:
583.5[M+H]。
583.5[M+H]。
[0442] 步骤2
[0443] 向1-(3-(7-(叔丁基氨甲酰基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基氨基)苯基)乙基氨基甲酸叔丁酯(150mg,257μmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液中加入三氟乙酸(587mg,397μL,5.15mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(4mL)、甲醇(2mL)和氢氧化铵(0.7mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物浓缩，然后经色谱法(硅胶,6-10％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到2-(3-(1-氨基乙基)苯基氨基)-N-叔丁基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(64mg,182μmol,71％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：9.44(s,1H),8.01(s,1H),7.99(d,J＝7.9,1H),7.98(s,1H),7.77(s,1H),7.22(t,J＝7.8,1H),7.20(s,1H),6.98(d,J＝7.8,1H),4.05(q,J＝6.1,1H),1.43(s,9H),1.32(d,J＝6.5,3H)；MS(EI/CI)m/z:353.2[M+H]。
[0444] 实施例28
[0445] N-叔丁基-2-(2-(甲基磺酰基)吡啶-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0446]
[0447] 步骤1
[0448] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(120mg,281μmol)、2-(甲基磺酰基)吡啶-4-胺(55mg,319μmol)、Xantphos(48.7mg,84.2μmol)、Pd2(dba)3(25.7mg,28.1μmol)和碳酸铯(183mg,562μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,35-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(2-(甲基磺酰基)吡啶-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(127mg,245μmol,87％)，其为浅黄色胶状物。(EI/CI)m/z:519.1[M+H]。
[0449] 步骤2
[0450] 向N-叔丁基-2-(2-(甲基磺酰基)吡啶-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(127mg,245μmol)在二氯甲烷中的溶液中加入三氟乙酸(558mg,377μL,4.9mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(4mL)、甲醇(2mL)和氢氧化铵(0.7mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到N-叔丁基-2-(2-(甲基磺酰基)吡啶-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(94mg,242μmol,99％)，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.51(s,1H),10.36(s,1H),8.39(d,J＝5.9,1H),8.10(s,1H),8.01(s,1H),7.99(dd,J＝5.3,2.3,1H),7.83(d,J＝2.1,
1H),7.52(s,1H),3.15(s,3H),1.35(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:389.1[M+H]。
1H),7.52(s,1H),3.15(s,3H),1.35(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:389.1[M+H]。
[0451] 实施例29
[0452] N-叔丁基-2-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0453]
[0454] 步骤1
[0455] 将2-氨基-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(92mg,253μmol)、3-溴-5-(甲基磺酰基)吡啶(77.7mg,329μmol)、Xantphos(43.9mg,75.9μmol)、Pd2(dba)3(23.2mg,25.3μmol)和碳酸铯(165mg,506μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,30-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(125mg,241μmol,95％)，其为黄色胶状物。(EI/CI)m/z:519.3[M+H]。
[0456] 步骤2
[0457] 向N-叔丁基-2-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(125mg,241μmol)在二氯甲烷中的溶液中加入三氟乙酸(550mg,371μL,4.82mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(3.7mL)、甲醇(1.6mL)和氢氧化铵(0.5mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到N-叔丁基-2-(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(92mg,237μmol,98％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.38(s,1H),9.90(s,1H),9.40(d,J＝2.5,1H),8.55(d,J＝1.9,1H),8.06(t,J＝2.2,1H),8.01(s,1H),7.96(s,1H),7.54(s,1H),3.22(s,3H),1.31(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:389.1[M+H]。
[0458] 实施例30
[0459] N-叔丁基-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0460]
[0461] 步骤1
[0462] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、1,3-二甲基-1H-吡唑-4-胺(58.5mg,526μmol)、Xantphos(60.9mg,105μmol)、Pd2(dba)3(32.1mg,35.1μmol)和碳酸铯(229mg,702μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,25-100％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(89mg,194μmol,55％)，其为黄色胶状物。(EI/CI)m/z:458.3[M+H]。
[0463] 步骤2
[0464] 向N-叔丁基-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(89mg,194μmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入三氟乙酸(443mg,300μL,3.89mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(3mL)、甲醇(1.5mL)和氢氧化铵(0.45mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物浓缩，然后经色谱法(硅胶,5-8％甲醇在二氯甲烷中的溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(40mg,122μmol,63％)，其为浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.13(s,1H),8.44(s,
1H),7.91(s,1H),7.87(d,J＝3.2,1H),7.82(s,1H),7.81(s,1H),3.71(s,3H),2.09(s,3H),
1.35(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:328.1[M+H]。
1H),7.91(s,1H),7.87(d,J＝3.2,1H),7.82(s,1H),7.81(s,1H),3.71(s,3H),2.09(s,3H),
1.35(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:328.1[M+H]。
[0465] 实施例31
[0466] N-叔丁基-2-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0467]
[0468] 步骤1
[0469] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(150mg,351μmol)、3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-胺(60.6mg,526μmol)、Xantphos(60.9mg,105μmol)、Pd2(dba)3(32.1mg,35.1μmol)和碳酸铯(229mg,702μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。经色谱法(硅胶,30-70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-2-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(128mg,277μmol,79％)，其为橙色固体。(EI/CI)m/z:462.3[M+H]。
[0470] 步骤2
[0471] 向N-叔丁基-2-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(128mg,277μmol)在二氯甲烷(4.3mL)中的溶液中加入三氟乙酸(632mg,427μL,5.55mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(4mL)、甲醇(2mL)和氢氧化铵(0.6mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到N-叔丁基-2-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(90mg,272μmol,98％)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.80(s,1H),12.57(s,1H),8.35(s,1H),8.34(s,1H),7.34(s,1H),2.53(s,3H),1.62(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:332.1[M+H]。
[0472] 实施例32
[0473] N-叔丁基-2-(2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0474] 步骤1
[0475] 4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶
[0476]
[0477] 向250mL帕尔瓶中加入1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(2g,16.8mmol,由J&W PharmLab,LLC获得)在TFA(20.0mL)中的溶液和氧化铂(IV)(381mg,1.68mmol)。将反应混合物用氢气抽空两次并在55psi的氢气压力下振摇24小时。将反应混合物经硅藻土滤过，并将滤饼用5％甲醇在CH2Cl2中的溶液洗涤。将滤液真空浓缩得到浅棕色油状物，将其在甲醇(20mL)中溶解。逐滴加入浓氢氧化铵溶液直到pH保持碱性(pH 8)。将混合物真空浓缩，然后将残留物吸附于硅胶上并经色谱法(硅胶,150g柱,50μm，来自Analogix,0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵在二氯甲烷中的溶液,15分钟)纯化，得到黄色油状物。在高真空干燥后该油状物固化，得到
4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(1.712g,13.9mmol,83％)，其为黄色固体。1H NMR(氯仿-d)d:7.09(s,1H),3.14-3.25(m,2H),2.76(t,J＝6.6Hz,2H),1.88-2.02(m,2H)。MS(EI/CI)m/z:124.1[M+H]+。
4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(1.712g,13.9mmol,83％)，其为黄色固体。1H NMR(氯仿-d)d:7.09(s,1H),3.14-3.25(m,2H),2.76(t,J＝6.6Hz,2H),1.88-2.02(m,2H)。MS(EI/CI)m/z:124.1[M+H]+。
[0478] 步骤2
[0479] 6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯
[0480]
[0481] 向4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(168mg,1.36mmol)在甲醇(10mL)中的无色溶液中加入一缩二碳酸二叔丁酯(327mg,348μL,1.5mmol)并将反应混合物在室温搅拌90分钟。将溶剂真空蒸发并将粗残留物经色谱法(40g柱,50μm，来自Analogix,0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵在CH2Cl2中的溶液,20分钟)纯化，得到6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯(188mg,62％)，其为无色油状物。1H NMR(氯仿-d)δ:11.38(宽单峰,1H),7.43-8.06(m,1H),3.69(宽单峰,2H),2.75(t,J＝6.2Hz,2H),1.89-2.02(m,2H),1.43-1.65+
(m,9H)。MS(EI/CI)m/z:224.1[M+H]。
(m,9H)。MS(EI/CI)m/z:224.1[M+H]。
[0482] 步骤3
[0483] 2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯和1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯
[0484]
[0485] 在搅拌的同时将6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯(188mg,842μmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)中的溶液在0℃冷却，然后缓慢加入叔丁醇钾溶液(1M的THF溶液,1.18mL,1.18mmol)。搅拌30分钟后，加入碘甲烷(167mg,73.7μL,1.18mmol)。
30分钟后，将混合物温热至室温并搅拌另外的18小时。将混合物用NH4Cl在水中的饱和溶液终止并将产物用CH2Cl2(3x 30mL)萃取。将合并的有机物经硫酸镁干燥，然后真空浓缩为灰白色固体。将该固体在甲苯中溶解并经快速色谱法(115g柱,50μm硅胶，来自Analogix,0-
20％乙酸乙酯的己烷溶液,15分钟)纯化，得到两个烷基化产物。得到极性较小的N-2烷基化产物，2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯(56mg,28％)，其为浅黄色固体。1H NMR(氯仿-d)δ:7.22-7.78(m,1H),3.78(s,3H),3.56-3.70(m,2H),2.71(t,J＝6.4Hz,2H),1.87-2.00(m,2H),1.46-1.59(m,9H).MS(EI/CI)m/z:238.1[M+H]+。得到极性较大的N-1烷基化产物，1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯(55mg,28％)，其为浅黄色固体。1H NMR(氯仿-d)δ:7.52(宽单峰,1H),3.73(s,3H),3.66(宽单峰,2H),2.65(t,J＝6.4Hz,2H),1.91-2.06(m,2H),1.57(宽单峰,9H)。MS(EI/CI)m/z:
238.1[M+H]+。
30分钟后，将混合物温热至室温并搅拌另外的18小时。将混合物用NH4Cl在水中的饱和溶液终止并将产物用CH2Cl2(3x 30mL)萃取。将合并的有机物经硫酸镁干燥，然后真空浓缩为灰白色固体。将该固体在甲苯中溶解并经快速色谱法(115g柱,50μm硅胶，来自Analogix,0-
20％乙酸乙酯的己烷溶液,15分钟)纯化，得到两个烷基化产物。得到极性较小的N-2烷基化产物，2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯(56mg,28％)，其为浅黄色固体。1H NMR(氯仿-d)δ:7.22-7.78(m,1H),3.78(s,3H),3.56-3.70(m,2H),2.71(t,J＝6.4Hz,2H),1.87-2.00(m,2H),1.46-1.59(m,9H).MS(EI/CI)m/z:238.1[M+H]+。得到极性较大的N-1烷基化产物，1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯(55mg,28％)，其为浅黄色固体。1H NMR(氯仿-d)δ:7.52(宽单峰,1H),3.73(s,3H),3.66(宽单峰,2H),2.65(t,J＝6.4Hz,2H),1.91-2.06(m,2H),1.57(宽单峰,9H)。MS(EI/CI)m/z:
238.1[M+H]+。
[0486] 步骤4
[0487] 2-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶
[0488]
[0489] 在室温向2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯(56mg,236μmol)在CH2Cl2(4.00mL)中的搅拌的溶液中加入TFA(740mg,500μL,6.49mmol)。18小时后，将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物经色谱法(40g柱,50μm硅胶，来自Analogix,
0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵的CH2Cl2溶液,20分钟)纯化，得到2-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡
1
唑并[4,3-b]吡啶(25mg,77％)。H NMR(氯仿-d)δ:6.81(s,1H),3.75(s,3H),3.11-3.18(m,
2H),3.04(s,1H),2.73(t,J＝6.4Hz,2H),1.86-2.00(m,2H)。
0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵的CH2Cl2溶液,20分钟)纯化，得到2-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡
1
唑并[4,3-b]吡啶(25mg,77％)。H NMR(氯仿-d)δ:6.81(s,1H),3.75(s,3H),3.11-3.18(m,
2H),3.04(s,1H),2.73(t,J＝6.4Hz,2H),1.86-2.00(m,2H)。
[0490] 步骤5
[0491] N-叔丁基-2-(2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0492]
[0493] 向微波瓶中加入2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(77.9mg,182μmol)、2-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶(25mg,182μmol)、Xantphos(31.6mg,54.7μmol)、Pd2(dba)3(16.7mg,18.2μmol)和Cs2CO3(119mg,364μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物。将混合物用氩气净化，然后在微波辐射下加热至150℃且保持20分钟。将混合物用CH2Cl2稀释，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩并将残留物经色谱法(40g柱,50μm硅胶，来自Analogix,0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵在CH2Cl2中的溶液,20分钟)纯化，得到N-叔丁基-2-(2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺1
(87mg,99％)，其为黄色泡沫状物。H NMR(氯仿-d)δ:8.20(s,1H),8.15(s,1H),7.99(s,
1H),7.85(s,1H),5.64(s,2H),3.91(s,3H),3.50-3.63(m,2H),2.93(t,J＝6.6Hz,2H),
2.15-2.30(m,2H),1.53-1.62(m,11H),0.86-1.05(m,2H),0.00(s,9H)。MS(EI/CI)m/z:
484.0[M+H]+。
(87mg,99％)，其为黄色泡沫状物。H NMR(氯仿-d)δ:8.20(s,1H),8.15(s,1H),7.99(s,
1H),7.85(s,1H),5.64(s,2H),3.91(s,3H),3.50-3.63(m,2H),2.93(t,J＝6.6Hz,2H),
2.15-2.30(m,2H),1.53-1.62(m,11H),0.86-1.05(m,2H),0.00(s,9H)。MS(EI/CI)m/z:
484.0[M+H]+。
[0494] 步骤6
[0495] N-叔丁基-2-(2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0496]
[0497] 向N-叔丁基-2-(2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(87mg,180μmol)在CH2Cl2(4mL)中的搅拌的溶液中加入TFA(740mg,500μL,6.49mmol)。24小时后，将混合物真空浓缩并将残留物再在5mL混合物(CH2Cl2/甲醇/氢氧化铵；60:10:1)中溶解，并将混合物在室温搅拌24小时，然后蒸发得到黄色固体，将其经色谱法(球状硅胶20-45μm,23g,Versaflash Supelco,0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵的CH2Cl2溶液,30分钟)纯化，得到残留物，将其在CH2Cl2中溶解，然后用环己烷沉淀。通过倾析母液得到黄色固体并高真空干燥得到N-叔丁基-2-(2-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(23mg,36％)。1H NMR(氯仿-d)δ:9.46(宽单峰,1H),8.08-8.21(m,2H),7.97(宽单峰,1H),7.82(s,1H),3.88(m,5H),2.89(t,J＝6.2Hz,2H),2.14-2.28(m,2H),1.56(s,9H)。MS(EI/CI)m/z:354.1[M+H]+。
[0498] 实施例33
[0499] N-叔丁基-2-(1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0500] 步骤1
[0501] 1-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶
[0502]
[0503] 向1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-羧酸叔丁酯(55mg,232μmol)在CH2Cl2(4mL)中的搅拌的溶液中加入TFA(740mg,500μL,6.49mmol)。18小时后，将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物经色谱法(40g柱,50μm硅胶，来自Analogix,0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵的CH2Cl2溶液,20分钟)纯化，得到1-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(22mg,69％)。1H NMR(氯仿-d)δ:7.05(s,1H),3.70(s,3H),3.08-3.21(m,2H),2.88(宽单峰,1H),2.64(t,J＝6.4Hz,2H),1.84-2.01(m,2H)。MS(EI/CI)m/z:138.2[M+H]+。
[0504] 步骤2
[0505] N-叔丁基-2-(1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0506]
[0507] 向微波瓶中加入2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(68.5mg,160μmol)、1-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(22mg,160μmol)、Xantphos(27.8mg,48.1μmol)、Pd2(dba)3(14.7mg,16.0μmol)、Cs2CO3(105mg,321μmol)和二噁烷(2mL)的混合物。将反应混合物用氩气净化，然后在微波辐射下加热至150℃且保持20分钟。将混合物用CH2Cl2稀释，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩并将残留物经色谱法(40g柱,50μm硅胶，来自Analogix,0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵的CH2Cl2溶液,20分钟)纯化，得到N-叔丁基-2-(1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(77mg,99％)，其为黄色泡沫状物。1H NMR(氯仿-d)δ:8.29(s,1H),8.14(s,1H),8.10(s,1H),7.88(s,1H),5.63(s,2H),3.93-4.01(m,2H),3.87(s,3H),3.52-3.63(m,2H),2.80-
2.91(m,2H),2.16-2.29(m,2H),1.55-1.61(m,11H),0.87-1.02(m,2H),0.00(s,9H)。MS(EI/CI)m/z:484.0[M+H]+。
2.91(m,2H),2.16-2.29(m,2H),1.55-1.61(m,11H),0.87-1.02(m,2H),0.00(s,9H)。MS(EI/CI)m/z:484.0[M+H]+。
[0508] 步骤3
[0509] N-叔丁基-2-(1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0510]
[0511] 向N-叔丁基-2-(1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(77mg,159μmol)在CH2Cl2(4mL)中的搅拌的溶液中加入TFA(740mg,500μL,6.49mmol)。24小时后，将溶剂蒸发并将残留物再在5mL混合物(CH2Cl2/甲醇/氢氧化铵；60:10:1)中溶解。在室温搅拌24小时后，将混合物真空浓缩为黄色固体，将其经色谱法(球状硅胶20-45μm,23g,Versaflash Supelco,0至5％的9:1甲醇:氢氧化铵的CH2Cl2溶液,30分钟)纯化，得到产物，将其在CH2Cl2中溶解并通过加入环己烷沉淀。将形成的黄色固体通过倾析母液分离，然后高真空干燥得到N-叔丁基-2-(1-甲基-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-4(5H)-基)-5H-吡咯并[2,3-b]1
吡嗪-7-甲酰胺(33mg,59％)，其为黄色固体。H NMR(氯仿-d)δ:8.95(宽单峰,1H),8.24(s,
1H),8.02-8.14(m,2H),7.85(s,1H),3.88-3.99(m,2H),3.83(s,3H),2.81(t,J＝6.6Hz,
2H),2.08-2.24(m,2H),1.55(s,9H)。MS(EI/CI)m/z:354.1[M+H]+。
吡嗪-7-甲酰胺(33mg,59％)，其为黄色固体。H NMR(氯仿-d)δ:8.95(宽单峰,1H),8.24(s,
1H),8.02-8.14(m,2H),7.85(s,1H),3.88-3.99(m,2H),3.83(s,3H),2.81(t,J＝6.6Hz,
2H),2.08-2.24(m,2H),1.55(s,9H)。MS(EI/CI)m/z:354.1[M+H]+。
[0512] 实施例34
[0513] 3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0514] 步骤1
[0515] 3,5-二溴-6-甲基-吡嗪-2-基胺
[0516]
[0517] 根据Sato(Sato,N.,J.Het.Chem.,1980,17,143-147)所述的方法，通过溴化6-甲基-吡嗪-2-基胺制备3,5-二溴-6-甲基-吡嗪-2-基胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 2.34(s,3H),6.86(宽单峰,2H,-NH2)；MS(EI/CI)m/z:266[M+H]。
[0518] 步骤2
[0519] 5-溴-6-甲基-3-三甲基甲硅烷基乙炔基-吡嗪-2-基胺
[0520]
[0521] 将三甲基甲硅烷基乙炔(1.03g,29.4mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液逐滴加入至3,5-二溴-6-甲基-吡嗪-2-基胺(7.48g,28mmol)、碘化亚铜(I)(1.07g,5.6mmol)、二-三苯基膦二氯化钯(1.97g,2.3mmol)、三乙胺(3.542g,35mmol)和四氢呋喃(75mL)的冷却的(约
15℃的水浴)混合物。将混合物在氩气气氛下搅拌16小时，在此过程中将反应混合物温热至环境温度。将反应混合物倒入水中并用己烷-乙酸乙酯(2:1)萃取。将有机层先后用饱和氯化铵溶液、水洗涤，然后再次用饱和氯化铵溶液、水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，用活性炭处理，经硅藻土滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(6.19g,77％)5-溴-6-甲基-3-三甲基甲硅烷基乙炔基-吡嗪-2-基胺，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 0.26(s,9H),2.39(s,3H),6.71(宽单峰,2H,-NH2)。
15℃的水浴)混合物。将混合物在氩气气氛下搅拌16小时，在此过程中将反应混合物温热至环境温度。将反应混合物倒入水中并用己烷-乙酸乙酯(2:1)萃取。将有机层先后用饱和氯化铵溶液、水洗涤，然后再次用饱和氯化铵溶液、水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，用活性炭处理，经硅藻土滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(6.19g,77％)5-溴-6-甲基-3-三甲基甲硅烷基乙炔基-吡嗪-2-基胺，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 0.26(s,9H),2.39(s,3H),6.71(宽单峰,2H,-NH2)。
[0522] 步骤3
[0523] 2-溴-3-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪
[0524]
[0525] 将5-溴-6-甲基-3-三甲基甲硅烷基乙炔基-吡嗪-2-基胺(6.19g,21.8mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液在氩气气氛下逐滴加入至四氢呋喃(24mL)和1M叔丁醇钾的四氢呋喃溶液(24mL,24mmol)，将其在-30℃冷却浴中冷却。将混合物搅拌1小时，移去冷却浴并将混合物在室温搅拌。19小时后，将混合物在冰浴中冷却并通过加入0.5M盐酸(48mL)终止。然后将混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取两次。将合并的乙酸乙酯层用水洗涤，经无水硫酸镁干燥，用活性炭处理，经硅藻土滤过并减压浓缩得到橙色固体(3.83g)，其大部分为2-溴-3-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪以及少量的脱甲硅烷基化起始物质。该物质无需进一步纯化即可在下一步中使用。由在分离反应中制备并经色谱法(硅胶,己烷-乙酸乙酯70:30)纯
1
化的物质得到NMR数据。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 2.64(s,3H),6.57(d,d,J＝1.5,
3.3Hz,1H),7.84(t,J＝3.3Hz,1H),12.12(宽单峰,1H,NH)。MS(EI/CI)m/z:212[M+H]。
1
化的物质得到NMR数据。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 2.64(s,3H),6.57(d,d,J＝1.5,
3.3Hz,1H),7.84(t,J＝3.3Hz,1H),12.12(宽单峰,1H,NH)。MS(EI/CI)m/z:212[M+H]。
[0526] 步骤4
[0527] 2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪[0528]
[0529] 向在氩气气氛下并在冰浴中冷却的如上制备的粗2-溴-3-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(3.83g,18mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(25mL)的混合物中加入95％氢化钠的油分散液(0.912g,36mmol)(气体放出)。将混合物搅拌15分钟，然后逐滴加入(2-氯甲氧基-乙基)-三甲基甲硅烷(3.61g,22mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液。10分钟后，移去冷却1
浴，并将混合物在室温搅拌另外的3/2小时。将混合物在冰浴中冷却，通过加入水终止，然后倒入水中并用乙醚萃取三次。将合并的乙醚萃取物用水洗涤两次，经无水硫酸镁干燥，滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,15％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(3.47g,56％)，其为琥珀色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.11(s,9H),0.82(m,2H),2.67(s,3H),3.51(m,2H),5.59(s,
2H),6.67(d,J＝3.5Hz,1H),8.01(d,J＝3.5Hz,1H)。
浴，并将混合物在室温搅拌另外的3/2小时。将混合物在冰浴中冷却，通过加入水终止，然后倒入水中并用乙醚萃取三次。将合并的乙醚萃取物用水洗涤两次，经无水硫酸镁干燥，滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,15％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(3.47g,56％)，其为琥珀色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.11(s,9H),0.82(m,2H),2.67(s,3H),3.51(m,2H),5.59(s,
2H),6.67(d,J＝3.5Hz,1H),8.01(d,J＝3.5Hz,1H)。
[0530] 步骤5
[0531] 2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛
[0532]
[0533] 在冷却(冰浴)的同时在氩气气氛下将三氟乙酸酐(10.2mL,60.8mmol)逐滴加入至N,N-二甲基甲酰胺(24mL)。移去冷却浴15分钟以促进搅拌，然后替换。逐滴加入2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(3.47g,10.1mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液。移去冷却浴；将混合物搅拌15分钟，然后在45℃浴中静置，并搅拌16小时。将混合物冷却，然后倒入含有碳酸钠(13g)的冰水(200mL)中并用乙醚萃取四次。将合并的乙醚萃取物用水洗涤两次，经无水硫酸镁干燥，滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛(3.17g,84％)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.09(s,9H),0.85(t,J＝8.0Hz,2H),2.71(s,3H),3.58(t,J＝8.0Hz,2H),5.68(s,2H),8.87(s,1H),10.04(s,1H)。
[0534] 步骤6
[0535] 2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸
[0536]
[0537] 向2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛(3.17g,8.55mmol)、叔丁醇(10mL)、四氢呋喃(10mL)和水(10mL)的搅拌的混合物中加入氨基磺酸(3.32g,34mmol)，然后加入磷酸二氢钾(8.85g,65mmol)和亚氯酸钠(1.93g,21mmol)在水(42mL)中的溶液。1小时后，将混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤一次，经无水硫酸镁干燥，滤过并减压浓缩得到2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-
5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸(3.02g,91％)，其为浅黄色固体。该物质无需进一步纯化即可在下一步中使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.10(s,9H),0.83(t,J＝8.0Hz,2H),
2.69(s,3H),3.55(t,J＝8.0Hz,2H),5.64(s,2H),8.64(s,1H),12.46(宽单峰,J＝9.06Hz,
1H,-COOH)。
5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸(3.02g,91％)，其为浅黄色固体。该物质无需进一步纯化即可在下一步中使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.10(s,9H),0.83(t,J＝8.0Hz,2H),
2.69(s,3H),3.55(t,J＝8.0Hz,2H),5.64(s,2H),8.64(s,1H),12.46(宽单峰,J＝9.06Hz,
1H,-COOH)。
[0538] 步骤7
[0539] 2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0540]
[0541] 将2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸(1.16g,3mmol)、HBTU[1-[二(二甲基氨基)亚甲基]-1H-苯并三唑鎓3-氧化物,六氟磷酸盐(1-)(1:1)](1.48g,3.9mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(12mL)和三乙胺(0.61g,6mmol)的混合物在室温搅拌1小时，然后加入叔丁基胺(0.63mL,6mmol)。将混合物搅拌另外的1小时，然后用乙酸乙酯稀释，用0.5M碳酸钠洗涤一次，用水洗涤两次，用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥，滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(1.22g,92％)，其为白色晶状固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.09(s,9H),0.83(t,J＝8.2Hz,2H),1.43(s,9H),2.71(s,3H),3.54(t,J＝8.2Hz,2H),5.64(s,2H),7.64(s,1H),
8.49(s,1H)。MS(EI/CI)m/z:441[M+H]。
8.49(s,1H)。MS(EI/CI)m/z:441[M+H]。
[0542] 步骤8
[0543] 3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0544]
[0545] 将2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.110g,0.25mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-基胺1.35-盐酸盐(0.073g,0.5mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0.011g,0.0125mmol)、外消旋BINAP[rac-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘](0.023g,0.038mmol)和叔丁醇钠(0.094g,0.98mmol)在甲苯(21/2mL)的混合物在氩气气氛下加热并在110℃在密封容器中搅拌18.5小时。将冷却的反应混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥，滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,
70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到0.104g略微不纯的3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺，其为黄棕色固体。将该物质与0.022g的由分开的、较低收率的偶联反应(使用乙酸钯代替三(二亚苄基丙酮)二钯)获得的部分纯化的产物合并，并经色谱法(硅胶,乙酸乙酯)纯化，得到3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.112g)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.08(s,9H),0.83(t,J＝8.2Hz,2H),1.38(s,9H),2.54(s,3H),3.51(t,J＝8.2Hz,2H),
3.80(s,3H),5.55(s,2H),7.61(s,1H),7.68(s,1H),7.85(s,1H),8.01(s,1H),8.19(s,1H)；
MS(EI/CI)m/z:458[M+H]。
70％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到0.104g略微不纯的3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺，其为黄棕色固体。将该物质与0.022g的由分开的、较低收率的偶联反应(使用乙酸钯代替三(二亚苄基丙酮)二钯)获得的部分纯化的产物合并，并经色谱法(硅胶,乙酸乙酯)纯化，得到3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.112g)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.08(s,9H),0.83(t,J＝8.2Hz,2H),1.38(s,9H),2.54(s,3H),3.51(t,J＝8.2Hz,2H),
3.80(s,3H),5.55(s,2H),7.61(s,1H),7.68(s,1H),7.85(s,1H),8.01(s,1H),8.19(s,1H)；
MS(EI/CI)m/z:458[M+H]。
[0546] 步骤9
[0547] 3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0548]
[0549] 将3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.110g,0.24mmol)、二氯甲烷(2.5mL)和三氟乙酸(0.5mL)的混合物在室温留置静置13小时，然后减压浓缩。将黄色残留物与二氯甲烷-甲醇-氢氧化铵(50:10:1,10mL)搅拌11/2小时，然后减压浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯中并先后用0.5M碳酸钠、水然后盐水洗涤。将乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥，滤过并减压浓缩得到0.082g浅黄色固体。经NMR显示转化不完全，因此将混合物与二氯甲烷-甲醇-氢氧化铵(5:5:1)再搅拌2小时，1.5小时，然后用乙酸乙酯稀释并用水洗涤一次且用盐水洗涤一次。
将乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥，滤过并减压浓缩得到0.075g浅黄色固体。由乙腈-甲醇重结晶得到3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.047g,41％)，其为浅黄色晶状固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.38(s,9H),
2.52(s,3H),3.80(s,3H),7.60(s,1H),7.68(s,1H),7.79(s,1H),7.84(s,1H),8.07(s,1H,-NH),11.97(宽单峰,1H,-NH)。MS(EI/CI)m/z:328[M+H]。
将乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥，滤过并减压浓缩得到0.075g浅黄色固体。由乙腈-甲醇重结晶得到3-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.047g,41％)，其为浅黄色晶状固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.38(s,9H),
2.52(s,3H),3.80(s,3H),7.60(s,1H),7.68(s,1H),7.79(s,1H),7.84(s,1H),8.07(s,1H,-NH),11.97(宽单峰,1H,-NH)。MS(EI/CI)m/z:328[M+H]。
[0550] 实施例35
[0551] 2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺[0552] 步骤1
[0553] 2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0554]
[0555] 将2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.110g,0.25mmol)、3-甲磺酰基-苯基胺(0.086g,0.5mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0.011g,0.0125mmol)、外消旋BINAP[rac-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘](0.023g,0.038mmol)和叔丁醇钠(0.060g,0.63mmol)在甲苯(2.5mL)中的混合物在氩气气氛下加热并在110℃在密封容器中搅拌21.5小时。将冷却的反应混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥，滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,75％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到0.107g略微不纯的2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺，其为浅黄色玻璃状物。重复上述反应，并将合并的略微不纯的产物进一步经色谱法(硅胶,33％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.169g,64％)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.07(s,9H),0.85(t,J＝8.2Hz,2H),1.30(s,9H),2.64(s,3H),
3.19(s,3H),3.54(t,J＝8.2Hz,2H),5.59(s,2H),7.49(m,1H),7.56(m,1H),7.62(s,1H),
7.96(m,1H),8.05(m,1H),8.16(s,1H),8.74(s,1H)。MS(EI/CI)m/z:532[M+H]。
3.19(s,3H),3.54(t,J＝8.2Hz,2H),5.59(s,2H),7.49(m,1H),7.56(m,1H),7.62(s,1H),
7.96(m,1H),8.05(m,1H),8.16(s,1H),8.74(s,1H)。MS(EI/CI)m/z:532[M+H]。
[0556] 步骤2
[0557] 2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺[0558]
[0559] 将2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.167g,0.31mmol)、二氯甲烷(2.5mL)和三氟乙酸(0.5mL)的混合物在室温留置14小时，然后减压浓缩。将黄色残留物与二氯甲烷-甲醇-氢氧化铵(3:3:1,7mL)搅拌3小时。然后将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到0.126g浅黄色固体。将产物由乙腈-甲醇重结晶得到2-(3-甲磺酰基-苯基氨基)-3-甲基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.063g,50％)，其为浅黄色晶状固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.30(s,9H),2.61(s,3H),3.19(s,3H),7.46(m,1H),7.54(m,1H),7.64(s,1H),7.94(m,1H),7.96(s,1H),8.04(m,1H),8.66(s,1H),
12.21(宽单峰,1H)。MS(EI/CI)m/z:402[M+H]。
12.21(宽单峰,1H)。MS(EI/CI)m/z:402[M+H]。
[0560] 实施例36
[0561] 3-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0562] 步骤1
[0563] 3-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0564]
[0565] 将2-溴-3-甲基-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.221g,0.5mmol)、3-甲基-异噻唑-5-基胺盐酸盐(0.151g,1mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0.023g,0.025mmol)、外消旋BINAP[rac-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘](0.047g,0.075mmol)和叔丁醇钠(0.144g,1.5mmol)在甲苯(3.5mL)中的混合物在氩气气氛下加热，并在110℃在密封容器中搅拌19小时。将冷却的反应混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥，滤过并减压浓缩。经色谱法(硅胶,75％乙酸乙酯的己烷溶液，然后反复用50％乙酸乙酯的己烷溶液，并再次用40％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到3-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.101g,43％)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm-0.08(s,9H),0.84(t,J＝8.0Hz,2H),1.55(s,9H),2.35(s,3H),2.67(s,3H),3.53(t,J＝8.0Hz,2H),5.61(s,2H),6.94(s,1H),7.34(s,1H),8.25(s,1H),10.49(s,1H)。MS(EI/CI)m/z:475[M+H]。
[0566] 步骤2
[0567] 3-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0568]
[0569] 将3-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.099g,0.21mmol)、二氯甲烷(2.5mL)和三氟乙酸(0.5mL)的混合物在室温放置14小时，然后减压浓缩。将黄色残留物与二氯甲烷-甲醇-氢氧化铵(3:3:1,7mL)搅拌3小时。然后将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到0.079g浅黄色固体。将产物由乙腈-甲醇重结晶得到3-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(0.046g,
64％)，其为浅黄色晶状固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.55(s,9H),2.34(s,3H),2.65(s,3H),6.92(s,1H),7.32(s,1H),8.04(d,J＝1.5Hz,1H),10.41(s,1H),12.36(s,1H)。MS(EI/CI)m/z:345[M+H]。
64％)，其为浅黄色晶状固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.55(s,9H),2.34(s,3H),2.65(s,3H),6.92(s,1H),7.32(s,1H),8.04(d,J＝1.5Hz,1H),10.41(s,1H),12.36(s,1H)。MS(EI/CI)m/z:345[M+H]。
[0570] 实施例37
[0571] 2-苯基氨基(D5)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺
[0572]
[0573] 步骤1
[0574] 将2-溴-N-叔丁基-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(125mg,292μmol)、苯胺-D5(43.1mg,439μmol)、Xantphos(50.8mg,87.7μmol)、Pd2(dba)3(26.8mg,29.2μmol)和碳酸铯(191mg,585μmol)在二噁烷(2mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。将反应混合物经硅藻土填料滤过，然后将滤液真空浓缩并经色谱法(硅胶,20-60％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-苯基氨基(D5)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(40mg,90.0μmol,31％)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δppm：8.15(s,1H),7.99(s,1H),7.93(s,1H),6.70(s,1H),5.63(s,2H),3.57(t,J＝8.2,2H),1.57(s,9H),0.96(t,J＝8.1,2H),0.01(s,9H)。
[0575] 步骤2
[0576] 向2-苯基氨基(D5)-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(40mg,90.0μmol)在二氯甲烷(1.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(205mg,139μL,1.8mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(1.5mL)、甲醇(0.75mL)和氢氧化铵(0.2mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到2-苯基氨基(D5)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸叔丁基酰胺(24mg,76.3μmol,85％)，其为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.31(s,1H),9.47(s,1H),8.00(s,1H),7.99(s,1H),7.76(s,
1H),1.44(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:315.1[M+H]。
1H),1.44(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:315.1[M+H]。
[0577] 实施例38
[0578] N-叔丁基-3-氯-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0579] 2-溴-N-叔丁基-3-氯-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0580]
[0581] 步骤1
[0582] 3,5-二溴-6-氯-吡嗪-2-基胺
[0583]
[0584] 在氮气气氛下向6-氯-吡嗪-2-基胺(5.0g,38.8mmol)在氯仿(194mL)中的溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(20.7g,116mmol)并将反应混合物在室温搅拌5小时。将所得的混合物倒入K2CO3水溶液(300mL)中并用二氯甲烷(200mL x 4)萃取。将合并的有机萃取物干燥并经色谱法(硅胶,10-20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到3,5-二溴-6-氯-吡嗪-2-基胺(4.2g,38％)，其为黄色固体。LC-MS:286.0(M-H)。
[0585] 步骤2
[0586] 5-溴-6-氯-3-三甲基甲硅烷基乙炔基-吡嗪-2-基胺
[0587]
[0588] 向3,5-二溴-6-氯-吡嗪-2-基胺(5.0g,17.42mmol)在无水THF(40mL)中的搅拌溶液中加入三乙胺(3.52g,34.84mmol)和CuI(0.333g,1.74mmol)。将混合物通过鼓泡氩气脱气10分钟，然后抽空并用氩气回填。将其用氩气彻底除气20分钟并加入Pd(PPh3)2Cl2(0.355g,0.52mmol)。将反应混合物冷却至-5℃，非常缓慢地加入TMS-乙炔(1.90g,19.16mmol)并在3小时内将温度缓慢升至15℃。将反应混合物用水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机层真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,5％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到5-溴-6-氯-3-三甲基甲硅烷基乙炔基-吡嗪-2-基胺(4.0g,75％)，其为黄色固体。LC-MS:304.0(M+H)。
[0589] 步骤3
[0590] 2-溴-3-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪
[0591]
[0592] 在0℃在氮气气氛下向5-溴-6-氯-3-三甲基甲硅烷基乙炔基-吡嗪-2-基胺(2.0g,6.58mmol)在THF(28mL)中的搅拌的溶液中缓慢加入1M KOtBu在THF中的溶液(7.24mL,
7.24mmol)。将反应混合物在0℃搅拌10分钟，然后温热至室温。2小时后，将混合物真空浓缩，并将得到的残留物混悬于水(7.5mL)和饱和水性NaHCO3(7.5mL)中并在室温搅拌过夜。
将固体滤过，用水和己烷洗涤，然后在80℃烘箱中干燥得到2-溴-3-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(1.64g)，其为棕色固体。LC-MS:232(M-H)。该物质无需进一步纯化即可直接使用。
7.24mmol)。将反应混合物在0℃搅拌10分钟，然后温热至室温。2小时后，将混合物真空浓缩，并将得到的残留物混悬于水(7.5mL)和饱和水性NaHCO3(7.5mL)中并在室温搅拌过夜。
将固体滤过，用水和己烷洗涤，然后在80℃烘箱中干燥得到2-溴-3-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(1.64g)，其为棕色固体。LC-MS:232(M-H)。该物质无需进一步纯化即可直接使用。
[0593] 步骤4
[0594] 2-溴-3-氯-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯
[0595]
[0596] 向2-溴-3-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪(1.52g,6.55mmol)在乙腈(25mL)中的搅拌的混悬液中加入DMAP(0.008g,0.07mmol)。5分钟后，加入一缩二碳酸二叔丁酯(1.82mL,8.52mmol)，并将混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩，然后将得到的残留物经色谱法(硅胶,7％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-溴-3-氯-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(1.0g,46％，历时两步)，其为黄色固体。LC-MS:334.2(M+H)。
[0597] 步骤5
[0598] (2-溴-3-氯-7-羟基甲基-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-基)-甲醇
[0599]
[0600] 向2-溴-3-氯-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(6.0g,18.0mmol)在1,4-二噁烷(100mL)中的搅拌的溶液中加入甲醛(5.4g,180.4mmol)和1M NaOH溶液(54mL)，并将反应混合物在室温搅拌16小时。将1.2N HCl加入至反应混合物中直到混合物达到pH 7。将反应混合物真空浓缩，并将得到的残留物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(150mL x 3)萃取。合并有机层并真空浓缩得到(2-溴-3-氯-7-羟基甲基-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-基)-甲醇(4.4g,83％)，其为黄色固体。LC-MS:292.2(M-H)。该物质无需进一步纯化即可直接使用。
[0601] 步骤6
[0602] 2-溴-3-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛
[0603]
[0604] 向(2-溴-3-氯-7-羟基甲基-吡咯并[2,3-b]吡嗪-5-基)-甲醇(2.0g,6.84mmol)在丙酮(67mL)中的搅拌的混悬液中加入Jone's试剂(2.12mL)，并将混合物在室温搅拌20分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过并将滤液真空浓缩。将残留物用THF(35mL)和1N NaOH溶液(18mL)稀释。将所得的混合物在室温搅拌16小时，然后真空浓缩为～20mL并通过加入1N HCl调节至pH7。将混合物用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取，干燥并浓缩得到2-溴-3-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛(1.4g,80％)，其为棕色固体。LC-MS:260.2(M-H)。该物质无需进一步纯化即可直接使用。
[0605] 注意：制备Jone’s试剂：将CrO3(13.66g)在水(20mL)中的溶液冷却至0℃并缓慢加入浓H2SO4(11.5mL)。通过加入水将所得的溶液的体积补足至50mL得到Jone’s试剂。
[0606] 步骤7
[0607] 2-溴-3-氯-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛[0608]
[0609] 在0℃向2-溴-3-氯-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛(2.0g,7.69mmol)的搅拌的混悬液中加入LiHMDS(1M的THF溶液)(9.46mL,9.46mmol)。1小时后，加入三甲基甲硅烷基乙氧基甲氧基氯(1.5mL,8.46mmol)并历时30分钟将反应混合物温热至室温。将反应混合物用Na2CO3水溶液(1.56g在35mL水中)稀释，然后用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，然后经色谱法(硅胶,5-10％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-溴-3-氯-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛(1.96g,65％)，其为棕色固体。LC-MS:392.2(M+H)。
[0610] 步骤8
[0611] 2-溴-3-氯-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸[0612]
[0613] 向2-溴-3-氯-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲醛(1.96g,5.03mmol)在1,4-二噁烷:水的(1:1)混合溶剂系统(105mL)中的搅拌的溶液中加入氨基磺酸(2.93g,30.15mmol)、亚氯酸钠(0.591g,6.53mmol)和磷酸二氢钾(8.20g,60.3mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。将所得的混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(150mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥并真空浓缩为黄色固体，将其用己烷彻底洗涤得到2-溴-3-氯-5-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸(1.62g,79％)，其为灰白色固体。LC-MS:406.2(M-H)。
[0614] 步骤9
[0615] 2-溴-N-叔丁基-3-氯-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0616]
[0617] 向2-溴-3-氯-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酸(600mg,1.48mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(650mg,3.39mmol)和HOBT(520mg,3.39mmol)，并将混合物搅拌10分钟。加入2-甲基丙-2-胺(432mg,5.9mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时，然后用10％枸橼酸和乙酸乙酯稀释。分离有机层并用10％枸橼酸、饱和水性NaHCO3和盐水洗涤，然后真空浓缩并经色谱法(硅胶,5-20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到2-溴-N-叔丁基-3-氯-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(530mg,1.15mmol,78％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm：8.30(s,1H),7.72(s,1H),5.64(s,2H),3.57(t,J＝8.3Hz,2H),1.56(s,9H),0.96(t,J＝8.3Hz,2H),0.01(s,9H)。
[0618] 步骤10
[0619] N-叔丁基-3-氯-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺
[0620]
[0621] 将2-溴-N-叔丁基-3-氯-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(125mg,271μmol)、3-甲基异噻唑-5-胺盐酸盐(61.2mg,406μmol)、Pd2(dba)3(24.8mg,27.1μmol)、Xantphos(47.0mg,81.2μmol)和碳酸铯(265mg,812μmol)在二噁烷(1.5mL)中的混合物在150℃微波中加热20分钟。加入Pd2(dba)3(24.8mg,27.1μmol)和Xantphos(47.0mg,81.2μmol)并在150℃微波中继续加热30分钟。将混合物冷却，然后经硅藻土填料滤过。将滤液真空浓缩，然后经色谱法(硅胶,10-50％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到N-叔丁基-3-氯-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(40mg,48.5μmol,17.9％)，其为棕色胶状物。(EI/CI)m/z:495.1[M+H]。
[0622] 步骤11
[0623] N-叔丁基-3-氯-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺[0624]
[0625] 向N-叔丁基-3-氯-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(40mg,80.8μmol)在二氯甲烷(1.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(184mg,124μL,1.62mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。将混合物浓缩，然后再在二氯甲烷(1.5mL)、甲醇(0.75mL)和氢氧化铵(0.2mL)中溶解，并将混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，然后用水研磨并滤过。将得到的固体用乙醚洗涤，然后干燥得到N-叔丁基-3-氯-2-(3-甲基异噻唑-5-基氨基)-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-7-甲酰胺(15mg,37.0μmol,46％)，其为深橙色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d)δppm：12.76(s,1H),10.91(s,1H),8.30(d,J＝3.2,1H),7.33(s,1H),7.13(s,1H),2.42(s,3H),1.62(s,9H)；MS(EI/CI)m/z:365.0[M+H]。
[0626] 生物实施例
[0627] SYK测试信息
[0628] 确定脾酪氨酸激酶(SYK)抑制的IC50：
[0629] SYK激酶测定为适用于96孔平板的标准激酶测定。该测试在96孔板中进行，使用8个样品确定IC50，这些样品表示10个半log稀释物和40μL反应体积。该测试测量放射性标记的33PγATP至N-端生物素化肽底物的掺入，该底物衍生自天然存在的磷受体(phosphoacceptor)共有序列(Biotin-11aa DY*E)。在与EDTA的反应终止和添加链霉亲和素包被的珠粒后检测到磷酸化产物。代表性结果示于上表II。
[0630] 测试板：96-孔MultiScreen 0.65um过滤板(Millipore Cat.No.:MADVNOB10)[0631] 链霉亲和素包被的珠粒：链霉亲和素琼脂糖TM,悬浮液5.0mL，于50mM EDTA/PBS稀释(1:100)，(Amersham，Cat.No.:17-5113-01)
[0632] 化合物：10mM于100％二甲亚砜(DMSO)中，终浓度：化合物0.003-100uM于10％DMSO中
[0633] 酶：脾酪氨酸激酶aa 360-635的SYK RPA纯化的、截短的结构,储备溶液1mg/mL,MW:31.2KDa,终浓度：0.0005μM。
[0634] 肽1：生物素化肽衍生自天然存在的磷受体共有序列(Biotin-EPEGDYEEVLE)，特别订购自QCB，储备液20mM，终浓度：5.0μM。
[0635] ATP：腺苷-5’-三磷酸20mM，(ROCHE Cat.No.:93202720)，终浓度：20μM[0636] 缓冲液：HEPES:2-羟基乙基哌嗪-2-乙磺酸(Sigma，Cat.No.:H-3375)终浓度：50mM HEPES pH7.5
[0638] EDTA：EDTA储备溶液500mM，(GIBCO，Cat.No.:15575-038)终浓度：0.1mM[0639] DTT：1,4-二硫苏糖醇(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.:197777)，终浓度：1mM[0640] MgCl2x 6H2O:MERCK，Cat.No.:105833.1000，终浓度：10mM
[0641] 测试稀释缓冲液(ADB):50mM HEPES，0.1mM EGTA，0.1mM钒酸钠，0.1mMβ-甘油磷酸酯，10mM MgCl2，1mM DTT，0.1％BSA，pH 7.5
[0642] 珠粒洗涤缓冲液：10g/L PBS(磷酸缓冲盐溶液)，含有2M NaCl+1％磷酸。
[0643] 实验方法：
[0644] 在40μL体积中，将26μL ADB稀释、纯化的重组人SYK360-635[0.5nM]与4μL 10X浓度的测试化合物[通常为100μM-0.003μM]在[10％]DMSO中的溶液混合，并在室温将混合物孵育10分钟。
[0645] 通过添加10μL 4x含有DYE肽底物[0或5μM]、ATP[20μM]和33PγATP[2μCi/rxn]的底物混合物启动激酶反应。在30℃孵育15分钟后，通过转移25μL反应样品至含有200μL 5mM EDTA和于PBS中的20％链霉亲和素包被的珠粒的96孔0.65μm Millipore MADVNOB膜/板来终止反应。
[0646] 在真空下用3x 250μL 2M NaCl、2x 250μL 2M NaCl+1％磷酸和1x 250μL H2O洗涤未结合的放射性核苷酸。最后一次洗涤后，将膜/板转移至转接板，在60℃加热干燥15分钟，并将50μL闪烁混合物添加至各孔中，并在4小时后在顶部计数器中计数放射性的量。
[0647] 基于未抑制的酶率计算抑制百分数：
[0648] ％抑制＝100/(1+(IC50/抑制剂浓度)n)
[0650] Ramos钙内流FLIPR测试
[0651] 人B细胞淋巴瘤细胞系Ramos在含有10％胎牛血清的RPMI-1640(Invitrogen)中培养。将细胞接种于测定板并根据厂商说明通过加入30μl染料加样缓冲液(Beckton Dickinson钙试剂盒,Cat#80500)而载入钙染料。然后将细胞用连续稀释的化合物处理30分钟，之后刺激。基线荧光记录约20秒，随后针对Ramos细胞用小鼠抗人IgM(10μg/mL,克隆M2E6,AntibodySolutions Inc.)刺激，并记录各孔中的最大荧光计数。用最大计数除以基线计数，将其定义为针对各孔的由基线的倍数变化，其用于IC50计算。
[0652] 在人全血中的B细胞CD69上调测试
[0653] 由健康志愿受试者采集人血至含有肝素钠的Vacutainers(BD Biosciences,San Jose,CA)。将测试化合物混悬于DMSO中并进行9个半-log连续稀释。测试中的化合物浓度为0.5％。将100μL全血预先与化合物培养30分钟，然后山羊F(ab’)2抗人IgM(50μg/mL,Southern Biotech)刺激20小时。在20小时培养结束时，将样品与荧光染料-结合的抗体、PE小鼠抗人CD20和APC小鼠抗人CD69(BD Biosciences)培养30分钟。然后将样品用裂解溶液(BD)裂解并用含有2％胎牛血清(FBS)的PBS洗涤。在流式细胞测定器LSR II(BD)上获取荧光信号并通过Flow Jo分析数据。活化的(CD69hi)B-细胞淋巴细胞(CD20+)的百分比使用未刺激的(阴性对照)和刺激的(阳性对照)孔作为参比指标确定。计算抑制百分比并且使用具有S形曲线拟合的GraphPad Prism软件构建IC50曲线。
[0654] 数据显示于表II中，单位为μM。
[0655] 表II
[0656]化合物 酶_滤过_IC50 RAMOS_IC50 Ic50:人全血
I-1 0.0085 0.1221 0.6271
I-2 0.0274 0.2447 0.5354
I-3 0.0211 0.1463 0.2039
I-4 0.0428 0.2583 0.9178
I-5 0.0137 0.1100 0.0758
I-6 0.0171 0.1146 0.4304
I-7 0.1637 0.2827 0.2575
I-8 0.0513 0.3344 0.4220
I-9 0.0155 0.0931 0.3429
I-10 0.0163 0.0645
I-11 0.0109 1.3326
I-12 0.0032 0.0767 2.1550
I-13 0.0128 0.0690 0.1901
I-14 0.0359 0.1013 0.1835
I-15 0.9339 6.9366
I-16 0.0924 0.1679 0.3753
I-17 0.0499 0.2071 0.1933
I-18 0.0020 0.0789 0.1253
I-19 0.1168 0.5184
I-20 0.0300 0.3382 0.5064
I-21 1.9017 4.8011 >50
I-22 0.0251 0.0797 1.3414
I-23 0.1166 3.6170 0.6298
I-24 0.0059 0.0933 0.4185
I-25 0.0712 0.2133 0.4333
I-26 0.0056 0.2162
I-27 0.0188 0.2232 0.6311
I-28 0.1208 0.8062
I-29 0.2275 0.6417
I-30 0.0975 0.2777 0.2677
I-31 0.0178 0.2508
I-32 0.0437 0.2750 1.1399
I-33 0.1674 0.7908 1.4596
I-34 1.0674 2.1666 5.1197
I-35 2.9354
I-36 0.2507 1.2481 8.2994
I-37 0.0048 0.0377
I-38 0.6400 14.8785
I-1 0.0085 0.1221 0.6271
I-2 0.0274 0.2447 0.5354
I-3 0.0211 0.1463 0.2039
I-4 0.0428 0.2583 0.9178
I-5 0.0137 0.1100 0.0758
I-6 0.0171 0.1146 0.4304
I-7 0.1637 0.2827 0.2575
I-8 0.0513 0.3344 0.4220
I-9 0.0155 0.0931 0.3429
I-10 0.0163 0.0645
I-11 0.0109 1.3326
I-12 0.0032 0.0767 2.1550
I-13 0.0128 0.0690 0.1901
I-14 0.0359 0.1013 0.1835
I-15 0.9339 6.9366
I-16 0.0924 0.1679 0.3753
I-17 0.0499 0.2071 0.1933
I-18 0.0020 0.0789 0.1253
I-19 0.1168 0.5184
I-20 0.0300 0.3382 0.5064
I-21 1.9017 4.8011 >50
I-22 0.0251 0.0797 1.3414
I-23 0.1166 3.6170 0.6298
I-24 0.0059 0.0933 0.4185
I-25 0.0712 0.2133 0.4333
I-26 0.0056 0.2162
I-27 0.0188 0.2232 0.6311
I-28 0.1208 0.8062
I-29 0.2275 0.6417
I-30 0.0975 0.2777 0.2677
I-31 0.0178 0.2508
I-32 0.0437 0.2750 1.1399
I-33 0.1674 0.7908 1.4596
I-34 1.0674 2.1666 5.1197
I-35 2.9354
I-36 0.2507 1.2481 8.2994
I-37 0.0048 0.0377
I-38 0.6400 14.8785
[0657] 为了更为清楚和更容易理解，已通过示例说明和实施例一定程度上详细描述了前述发明。对于本领域的技术人员，在随附的权利要求的范围内可实施变化和改变是显而易见的。因此，应当理解上述说明意欲示例说明而非限制。因此，本发明的范围不应当参考上述说明确定，而是应当参考随附权利要求以及这些权利要求标题的等价物的全部范围来确定。
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