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C-芳基葡糖苷SGLT2抑制剂和方法

阅读:1003发布:2020-12-20

专利汇可以提供C-芳基葡糖苷SGLT2抑制剂和方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且式I的化合物,也提供一种单独使用上述化合物或联合使用其他 治疗 剂来治疗糖尿病和相关 疾病 的方法。,下面是C-芳基葡糖苷SGLT2抑制剂和方法专利的具体信息内容。

1.式I的化合物
或其药学可接受的盐。
2.一种药物组合物,所述组合物包含权利要求1所述的式I的化合物和药学可接受的载体。
3.一种药物组合物,所述组合物包含权利要求1所述的式I的化合物和至少一种选自抗糖尿病剂、抗肥胖剂、抗高血压剂、抗动脉粥样硬化剂和降脂剂的治疗剂。
4.如权利要求3的药物组合物,所述组合物包含权利要求1所述的式I的化合物和至少一种抗糖尿病剂。
5.如权利要求4的药物组合物,其中所述抗糖尿病剂是至少一种选自下列的抗糖尿病剂:双胍类、磺酰脲类、葡糖苷酶抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPARα/γ双重激动剂、aP2抑制剂、DPP4抑制剂、胰岛素致敏剂、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、PTP1B抑制剂、糖原磷酸化酶抑制剂、葡萄糖-6-磷酸酶抑制剂、胰岛素和氯茴苯酸。
6.如权利要求4的药物组合物,其中所述抗糖尿病剂是至少一种选自下列的抗糖尿病剂:二甲双胍、格列本脲、格列美脲、瑞易宁、格列吡嗪、氯磺丙脲、格列齐特、阿卡波糖、米格列醇、吡格列、曲格列酮、罗格列酮、胰岛素、依沙列酮、瑞格列奈、那格列奈、吗格立他和吡格立他。
7.如权利要求4的药物组合物,其中所存在的权利要求1所述的式I的化合物与抗糖尿病剂的重量比范围是0.01到300∶1。
8.如权利要求3的药物组合物,其中所述抗肥胖剂是至少一种选自下列的抗肥胖剂:
β3肾上腺素能激动剂、脂酶抑制剂、5-羟色胺再摄取抑制剂、甲状腺受体β药物、5HT2C激动剂、MCHR1拮抗剂、黑皮质素受体激动剂、浓黑色素-激素受体拮抗剂、促生长激素神经肽受体调节剂、阿立新拮抗剂、CCK激动剂、NPY1或NPY5拮抗剂、NPY2或NPY4调节剂、促皮质释放因子激动剂、组胺受体-3(H3)调节剂、11-β-HSD-1抑制剂、脂联素受体调节剂、单胺再摄取抑制剂、睫状节神经细胞营养因子、脑源性神经营养因子、来普汀或来普汀受体调节剂、大麻素-1受体拮抗剂和厌食剂。
9.如权利要求8的药物组合物,其中所述抗肥胖剂是至少一种选自利莫那班、奥利斯特、西布曲明、托吡酯、右旋苯丙、苯丁胺、苯丙醇胺和氯苯咪吲哚的抗肥胖剂。
10.如权利要求3的药物组合物,其中所述降脂剂是至少一种选自下列的降脂剂:MTP抑制剂、CETP抑制剂、HMG CoA还原酶抑制剂、鲨烯合成酶抑制剂、纤维酸衍生物、LDL受体活性向上调节剂、脂合酶抑制剂和ACAT抑制剂。
11.如权利要求10的药物组合物,其中所述降脂剂是至少一种选自下列的降脂剂:普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、尼伐他汀、韦伐他汀、阿他伐他汀、罗苏伐他汀、非诺贝特、吉非贝齐、氯贝丁酯和阿伐麦布。
12.如权利要求10的药物组合物,其中所存在的权利要求1所述的式I的化合物与降脂剂的重量比范围是0.01到300∶1。
13.权利要求1所述的式I的化合物在制备用于治疗或延迟糖尿病、延迟伤口愈合、高血糖症、高胰岛素血症、脂肪酸或甘油的血中平升高、高脂血症、肥胖、综合征X、糖尿病并发症、动脉粥样硬化或高血压的发展或发生,或提高高密度脂蛋白水平的药物的用途。
14.权利要求13的用途,其中所述糖尿病是胰岛素抗性。
15.权利要求13的用途,其中所述糖尿病并发症是糖尿病性视网膜病、糖尿病性神经病或糖尿病性肾病。
16.权利要求13的用途,其中所述高脂血症是高甘油三酯血症。
17.权利要求1所述的式I的化合物与至少一种选自抗糖尿病剂、抗肥胖剂、抗高血压剂、抗动脉粥样硬化剂和降脂剂的治疗剂在制备用于治疗或延迟糖尿病、延迟伤口愈合、高血糖症、高胰岛素血症、脂肪酸或甘油的血中水平升高、高脂血症、肥胖、综合征X、糖尿病并发症、动脉粥样硬化或高血压的发展或发生,或提高高密度脂蛋白水平的药物的用途。
18.权利要求17的用途,其中所述糖尿病是胰岛素抗性。
19.权利要求17的用途,其中所述糖尿病并发症是糖尿病性视网膜病、糖尿病性神经病或糖尿病性肾病。
20.权利要求17的用途,其中所述高脂血症是高甘油三酯血症。
21.权利要求1所述的式I的化合物在制备用于治疗II型糖尿病的药物的用途,所述药物单独施用,或与至少一种选自抗糖尿病剂、用于治疗糖尿病并发症的治疗剂、抗肥胖剂、抗高血压剂、抗动脉粥样硬化剂和降脂剂的其他治疗剂组合施用。
22.具有下列结构的化合物

说明书全文

C-芳基葡糖苷SGLT2抑制剂和方法

[0001] 与相关申请的交叉参考
[0002] 本申请要求2004年9月23日提交的美国临时申请号60/612,599的优先权,在此将其以整体通过参考引入本文。
[0003] 发明领域
[0004] 本发明涉及C-芳基葡糖苷,其是在肾中发现的钠依赖性葡萄糖载体的选择性抑制剂,并涉及治疗糖尿病或疾病的方法,包括单独使用C-芳基葡萄糖苷或与一种或多中其他类型的治疗剂联用。
[0005] 发明背景
[0006] 全世界约有1亿人患有II型糖尿病(NIDDM),该病的特征在于肝中过量葡萄糖的产生和外周的胰岛素抗性,其根源还是未知的。在糖尿病患者中血浆葡萄糖平的一致性控制可以影响糖尿病并发症的发展,在重病中可以观察到β-细胞衰竭。
[0007] 血浆葡萄糖在肾的肾小球中过滤并在近端小管积极地再吸收。肾中90%的葡萄糖的再吸收发生在肾皮质近端小管前SP1节段的上皮细胞中,而SGLT2包含14个跨膜片段的672个基酸蛋白,主要表达于肾近端小管前SP1节段中,可能负责是这种重摄取的主要载体。底物的特异性、钠依赖性和SGLT2的定位作用于人肾皮质肾近端小管的高容量、低亲和、钠-依赖性葡萄糖载体的特性是一致的。此外,杂交体耗竭研究研究表明,SGLT2为近+
端小管SP1节段中主要的Na/葡萄糖协同转运蛋白,因为实际上在来自大鼠肾皮质的mRNA中编码的所有钠-依赖性葡萄糖转运活性受到大鼠SGLT2特异性的反义寡核苷酸的抑制。
在人体中SGLT2的变异与某些类型的家族性肾糖尿有关,这近一步提供了SGLT2在肾葡萄糖再吸收中发挥主要作用提供了证据。在这些患者中,肾的形态和肾功能都是正常的。预计SGLT2的抑制作用将通过增加糖尿病患者的葡萄糖排泄来降低血浆葡萄糖水平。 [0008] 与SGLT2在氨基酸水平有60%同一性的另一种钠依赖性葡萄糖 协同转运蛋白SGLT1,表达于小厂和肾近端小管较远端的S3节段。尽管它们序列相似,但人SGLT1和SGLT2在生物化学上仍然是可区别的。
[0009] 一种SGLT活性的特异性抑制剂-根皮苷的施用,在几个糖尿病啮齿动物模型和在一个犬糖尿病模型中,通过体内促进葡萄糖的排泄,降低了禁食和进食后的血浆葡萄糖,增加了葡萄糖的利用,而无低血糖的副作用。而施用长达2周的根皮苷治疗时,未观察到对血浆离子平衡、肾功能或肾形态学有不利作用。此外,当给正常动物施用根皮苷时,不论是否存在糖尿,都未观察到低血糖或其他不利作用。据报道,施用6个月的肾SGLTs抑制剂(Tanabe Seiyaku)可在肥胖NIDDM大鼠模型中改善禁食和进食的血浆葡萄糖,改善胰岛素的分泌和利用,在无低血糖或肾副作用的情况下,抵消肾病和神经病的发展
[0010] SGLT 1 & 2活性的通用抑制剂是没有治疗性的,因为SGLT 1的抑制作用也有严重的有害后果,例如遗传性综合征葡萄糖/半乳糖吸收不良(GGM)、威胁生命的腹泻和脱水,在GGM中SGLT1协同转运蛋白的突变导致了肠中葡萄糖吸收受损。在糖尿病患者中,希望SGLT2的选择性抑制可以通过增强尿中葡萄糖的排泄而使血浆葡萄糖正常化,因此改善了胰岛素敏感性并延迟了糖尿病并发症的发展,同时没有显著的胃肠副作用。
[0011] 因此,对SGLT2载体具有选择性的化合物的发现可以证明用于治疗或预防与控制血浆葡萄糖水平有关的疾病和病症,例如糖尿病的用途。
[0012] 发明简述
[0013] 根据本发明,提供一种C-芳基葡萄糖苷化合物,具有下列结构
[0014]
[0015] 式I的化合物包括其药学可接受的盐、络合物、立体异构体和前药酯。
[0016] 式I的化合物具有作为SGLT2选择性抑制剂的活性,因此提供了用于治疗或预防与控制血浆葡萄糖水平有关的疾病和病症的用途。这些疾病或病症的例子包括糖尿病和糖尿病的微-和大-血管并发症。
[0017] 本发明提供了式I的化合物,使用该化合物的药物组合物和使用该化合物的方法。特别地,本发明提供了一种药物组合物,包含单独的治疗有效量的式I的化合物,或与药学可接受的载体组合。
[0018] 此外,根据本发明,提供一种治疗或延迟此处所述疾病或病症发展或发生的方法,其中给需要治疗的人类患者施用治疗有效量的式I的化合物。
[0019] 本发明的化合物可以单独使用,或与在此处所述的治疗区有效的一种或多种其他治疗剂组合。
[0020] 此外,提供一种治疗如上述或下文定义的疾病的方法,其中给需要治疗的人类患者施用治疗有效量的式I的化合物和另一类型的抗糖尿病剂和/或另一类型的治疗剂,例如降血脂剂。
[0021] 发明详述
[0022] 下图包含本发明化合物(化合物1,栏4)与相似结构化合物的基本比较,以考察几种与化合物用途和商业生存力有关的特性。化合物1(本发明的化合物)和3-5的结构如下所示。
[0023]
[0024]
[0025] 化合物5
[0026]
[0027] 化合物4
[0028]
[0029] 化合物3
[0030]
[0031] 化合物1(一种式I化合物)
[0032] 如上图所示,只有式I的化合物在所有的试验分类中显示了良好的特性。也就是说只有式I的化合物在糖尿病大鼠中良好地降低了血浆葡萄糖(效力),在主要制剂中是稳定的(贮存效果)和在体外诱裂活性研究中具有阴性结果(降低的致癌潜能)。
[0033] 比较研究的各个方案
[0034] I.研究A的方案:在链唑霉素治疗的糖尿病大鼠中确定血液葡萄 糖效应 [0035] 下列分析是用于合理地预测在上述基质中分析的化合物对血浆葡萄糖的影响。 [0036] 将重量为250-275g的雄性Sprague Dawley大鼠(Charles River)通过以65mg/kg腹膜内注射链唑霉素制成患糖尿病的,其中该链唑霉素是在新鲜的冷的(4℃)柠檬酸盐缓冲液中制备的。4天后,在喂养状态下给动物放血。通过尾末端收集全血,并通过葡萄糖化法用血糖测计仪(Bayer)分析葡萄糖。平均血糖水平范围是450-550mg/dl。
[0037] 在试验当天,将混合物溶解在包含5%m-Pyrol,20%PEG 400和20mM二磷酸钠的载体中。给大鼠称重,并随机分成4个组,每组6只大鼠,口服载体或0.1mg/kg的该化合物。口腔强饲法的总体积是1ml/kg体重。在服用后,从笼中移出食物,在实验期间大鼠可以随意饮水。在给药后0、30、60、120、180、240和300分钟从尾末端获得血样。通过葡萄糖氧化法用血糖测计仪(Bayer)分析血糖。
[0038] A.统计数据分析
[0039] 用Microsoft Excel进行每个时间点平均血糖值和百分比变化vs.载体的计算。用Microsoft Excel或统计程序StatView进行药物治疗组vs.载体对照组比较的统计学分析(T检验,或ANOVA然后进行Fisher′s检验)。P小于0.05即认为是统计学显著的。 [0040] II.研究B的方案:在加速老化的条件下,当通常使用的固体赋形剂存在时氧化易变质的治疗剂的稳定性测定
[0041] 下面的方法是用于测定在通常使用的赋形剂和典型的抗氧化剂存在下化合物3的化学稳定性。
[0042] 在研钵中研磨该药物和各自的抗氧化剂,然后在干燥条件下与辖表所列得其他赋形剂混合。在本研究中使用亚硫酸钠和丁羟基茴香醚作为抗氧化剂。BHA以两个水平使用,0.01%w/w和0.5%w/w,使用的亚硫酸钠是0.01%w/w。样品贮存于40℃/73%RH及HDL/uv,用氧气清洁该玻璃瓶,将它们紧紧盖住。在进行HPLC分析前,在第二个表所列的不同加速老化条件下放置药物-赋形剂混合物1到3周。我们发现,没有任何明显的氧化不稳定性问题的化合物(化合物1、4和5)在通常以固体剂型使用的赋形剂存在下是化学稳定的。
[0043] 表1
[0044] 在原型药物-赋形剂混合物的稳定性评价期间在使用的抗炎化剂存
[0045] 在和不存在下常用的赋形剂
[0046]
[0047] 表2
[0048] 在加速老化条件下药物赋形剂混合物的稳定性研究的条件
[0049]
[0050] III.研究C的方案:在中国仓鼠卵巢细胞中的细胞遗传学研究
[0051] 可以在人中致癌的可能的治疗剂的早期研究是非常需要的。体外诱裂性研究提供了一种化合物1的潜在诱裂性的早期指示。下面的方案是用于预测关注的治疗化合物的体外诱裂活性。
[0052] 预测诱裂性,包括确定所关注化合物诱导中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的结构性染色体损伤的可能性。如果相对于背景水平染色体损伤显著提高,即证明该化合物是有诱裂可能的。在该分析中检测到显著提高水平的染色体损伤被认为是遗传损伤的标志。 [0053] A.检品载体和对照品
[0054] 载体对照物是二甲亚砜(DMSO)。阳性对照物是没有S9活化时暴露3小时和20小时丝裂霉素C和在S9大鼠-肝酶中暴露3小时的环磷酰胺。用无菌水稀释丝裂霉素C和环磷酰胺。
[0055] B.所选择浓度的所关注化合物的施用
[0056] 制备所关注化合物在DMSO中的2种母液—一种是高浓度,另一种是低浓度。在处理CHO细胞后收集载体对照物、低和高浓度施用溶液的等分部分,然后分析已确定所关注化合物的浓度。选择的浓度是基于用所关注化合物进行的非-GLP溶解度/混溶性/范围-寻找细胞毒性(ATP)分析。当在DMSO中确定了所关注化合物溶解度的上限时,将该DMSO溶液加入到培养基中以确定对pH和重量可分子渗透压浓度的影响。在寻找范围的细胞毒性分析中,在存在(3小时)和不存在(20小时)的大鼠肝(S9)酶时检测11个浓度的所关注化合物。所检测的最高浓度是10mM,5000μg/ml,或溶解度的极限。根据溶解度/混溶性/范围-寻找细胞毒性(ATP)分析结果,选择6个浓度用于整个细胞遗传学研究试验。 [0057] 检品浓度
[0058] 所关注化合物的DMSO母液是在对照分析中使用的检品最高浓度的100X浓度。试验了6个浓度。在范围寻找研究中观测到的毒性剂量确定为5个较低剂量的连续稀释因子。将总剂量体积50μl(母液加DMSO)加入到所有治疗组的5ml培养基中。
[0059] 试验设计
[0060] 每个治疗组使用双份的培养基。试验设计如下:
[0061]
[0062] D.试验系统
[0063] CHO细胞系来自雌性中国仓鼠的卵巢生检。在该分析(CHO-WBL)中使用的细胞是来自Dr.S.Wolff,University of California,San Francisco的实验室。该细胞已经亚克隆以维持染色体组型的稳定性。该细胞系的平均周期是12到14小时,形态染色体数是21。该细胞用于常规检测染色体组型的稳定性和可能的支原体污染。
[0064] E.鉴定
[0065] 在该研究中使用的所有的培养烧瓶和导管都标上数字。给收集细胞、低渗处理、和固定的离心管标上与相应的烧瓶相同的数字。此外,由固定细胞制备的载玻片具有与离心管相同的数字。通过染色体畸变的无偏向细胞遗传分析独立的观测者给载玻片编码。将不变的标签粘着到编码的载玻片上。
[0066] F.试验方法
[0067] 用标准方法2-6,通过CHO细胞暴露在最少4种浓度的检品和阳性和载体对照中的培养,进行染色体畸变。在非活化试验系统中,处理约3小时和20小时,在S9活化的系统中,暴露3小时。7,8
[0068] S9代谢活化
[0069] 外源性代谢活化(S9)系统包括Aroclor 1254-诱导的大鼠肝S9(线粒体后)部分,以及盐和辅助因子。在外源性代谢活化(S9)系统中S 9、盐和辅助因子的浓度是10μl/ml(1%v/v)Aroclor 1254-诱导的大鼠肝S9(线粒体后)部分,2.5mM MgCl2·6H2O,1.25mM葡萄糖-6-磷酸盐,10.3mM KCl,1mM NADP,和12.8mM Na2HPO4。
[0070] 靶细胞的制备
[0071] 指数型生长的CHO-WBL细胞是以0.5×106细胞/252cm烧瓶植入到McCoy′s 5A培养基中,该培养基中补充了10%胎血清、L-谷氨酰胺(2mM)、青霉素G(100单位/ml)和链霉素(100μg/ml)。该烧瓶在约5%CO2的潮湿大气和约37℃下在空气中培养16-24小时。
[0072] 靶细胞的处理
[0073] 在开始培养的次日,用新鲜培养基取代原培养基。为在无代谢活化下暴露3和20小时,在上述的完全培养基中完成剂量。在3小时的暴露中,在存在S9代谢活化时,该培养基与上述的相同,却别在于其不含胎牛血清并包含S 9、盐和辅助因子。在用或不用代谢活化处理3小时后,抽出培养基,用磷酸盐缓冲盐水冲洗细胞,用完全培养基再进料,并放回细菌培养器中。
[0074] 分裂中期细胞的收集
[0075] 从开始处理算起,使用约20小时的单个采集时间。该采集时间对应地是细胞周期(约13小时)的约1.5倍。在采集细胞前2-3小时,向最终浓度0.1μg/ml的培养基中加入秋水仙胺。
[0076] 通过胰蛋白酶消化采集细胞,通过离心分离收集,除去等分部分以确定细胞细胞数和存活细胞的百分比。细胞数和存活百分比是用于确定相对于载体对照的细胞生长的抑制作用(细胞毒性)。用0.075MKCl使剩余的细胞溶胀,用三种连续变化的固定剂(甲醇∶醋酸,3∶1v/v)洗涤,盖上帽并贮存过夜,或在约2-8℃下贮存更长时间。为制备载玻片,离心分离收集细胞,并再悬浮于新鲜的固定剂中。将固定细胞的混悬液应用于玻璃载玻片上并空气干燥。用Giemsa给载玻片染色并持久地放置。
[0077] G.染色体畸变分析
[0078] 根据观测到的细胞毒性,选择最少三种浓度来用于染色体畸变分析。一般地,减少细胞数和有丝分裂指数>50%的浓度不能用于评价染色体畸变,因为显而易见地,过度的细胞毒性会诱导出与检品的直接诱裂作用无关的染色体畸变。每个载玻片至少500个细胞,每个烧瓶2个载玻片来评价有丝细胞中细胞的频率(有丝分裂指数),用至少100个有丝分裂细胞来评价数目畸变的频率(多倍性和核内复制)。从每个双份的烧瓶中,通过两个独立的评价法给来自分离的载玻片的50个中期细胞的结构性染色体畸变评分。仅评价包含21±2个染色体的中期。联合两个独立的评价物得到每个烧瓶100个中期细胞,每个浓度为200个中期细胞,以用于结构性染色体。申请人注意到,如果由于细胞毒性或>50%的异常中期细胞而达不到这些数目,那么在开始时就观测25个中期细胞/载玻片。
[0079] H.统计数据分析
[0080] 计算所发现的畸变的树木和类型,在所检查的总的细胞中结构损坏细胞的百分比(异常细胞的百分比),和每个细胞的平均畸变,并报告每个治疗组的情况。在该数据中存在染色单体和等臂染色单体裂隙,但不包括在含有一个或多个畸变的细胞的总百分比中,或不包含 在每个细胞的结构异常频率中。用Fisher′s精密检验进行异常细胞(结构或数目)频率的统计学分析。用Fisher′s检验来配对比较每个治疗组中和溶剂对照中异常细胞的频率。在任意检品剂量水平时在阳性Fisher′s精密检验中,Cochran-Armitage检验用于测定剂量-响应。为了解释数据,认为当畸变细胞的百分比在剂量响应方式中随着一种或多种浓度而增加时,认为检品诱导的阳性响应是统计学显著的(p<0.05)。但是,统计学显著而没超过以往的阴性或载体对照范围的值可以判定是生物学不显著的。推定在畸变中不显示统计学显著性增加的检品是阴性的。
[0081] I.可接受的分析的标准
[0082] 如果满足下列条件,就认为整个染色体畸变分析是可接受的:
[0083] 1)阳性对照培养必须显示5%水平的统计学显著的染色体畸变频率增加。 [0084] 2)在载体对照培养中损坏的中期细胞的百分比必须不超过6%(平均数)。 [0085] 3)至少最高剂量的检品应当显示一些细胞毒性(即降低细胞数或有丝分裂指数)。如果在最高浓度观测不到细胞毒性,但检品是在溶解度极限,或其剂量浓度有限(即,10mM或5000μg/ml),或其体积极限(20%)时,该分析认为是可接受的。
[0086] J.阳性响应的标准
[0087] 如果满足下列条件,就认为检品是阳性的:
[0088] 1)用Fisher′s精密检验证明异常细胞的百分比统计学显著(p<5%)地增加。 [0089] 2)在用于测定剂量-响应的Cochran-Armitage检验中证明染色体畸变频率统计学显著(p<5%)地增加。
[0090] 3)损坏的中期细胞的平均百分比超过了以往的性对照水平(即,载体-对照组的平均+2标准差)。
[0091] 细胞产生部分的参考
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[0102] 本文使用下列的缩写:
[0103] Me=甲基
[0104] Et=乙基
[0105] TBS=叔丁基二甲基甲烷基
[0106] THF=四氢呋喃
[0107] Et2O=乙醚
[0108] EtOAc=乙酸乙酯
[0109] DMF=二甲基甲酰胺
[0110] MeOH=甲醇
[0111] EtOH=乙醇
[0112] DMAP=4-二甲基氨基吡啶
[0113] n-BuLi=正丁基锂
[0114] min=分钟
[0115] h或hr=小时
[0116] L=升
[0117] mL=毫升
[0118] g=克
[0119] mg=毫克
[0120] mol=摩尔
[0121] mmol=毫摩尔
[0122] meq=毫克当量
[0123] at或sat′d=饱和
[0124] aq.=水的
[0125] TLC=薄层色谱法
[0126] NMR=核磁共振
[0127] HPLC=高效液相色谱法
[0128] LC/MS=高效液相色谱/质谱
[0129] MS或Mass Spec=质谱法
[0130] 下面是本发明的说明书中各种术语的定义。这些定义用于该术语,就如同它们是用于整个说明书(除非在特定情况中另有限定)中分别或做为更大组的一部分。
[0131] 任何可以在体内转变以提供生物活性剂(即,式I的化合物)的化合物都是本发明范围和精神内的前药。
[0132] 各种形式的前药市本领域公知的。对前药和前药衍生物的综述在下面的文献中进行了描述:
[0133] a)The Practice of Medicinal Chemistry,Camille G.Wermuth等人,Ch 31,(Academic Press,1996);
[0134] b)Design of Prodrugs,H.Bundgaard编辑,(Elsevier,1985);和
[0135] c)A Textbook of Drug Design and Development,P.Krogsgaard-Larson 和H.Bundgaard,eds.Ch 5,pgs 113-191(Harwood AcademicPublishers,1991)。所述参考文献都通过参考引入本文。
[0136] 本发明的治疗剂的施用包括治疗有效量的本发明的治疗剂的施用。此处使用的术语“治疗有效量”是指通过施用本发明的组合物治疗或预防可治疗病症的治疗剂的量。该量是足以显示可检测的治疗或预防或缓解效果的量。效果可以包括,例如,治疗或预防此处所列的病症。患者的精确有效量取决于患者的大小和健康、要治疗病症的性质和成都,治疗医生的推荐、所选择施用的治疗剂或治疗剂的组合。因此,不需要预先规定精确的有效量。 [0137] 本发明的式I的化合物可以如下面反应方案1所示及其所述来制备,以及根据本领域技术人员很容易即可使用的相关公开文献的方法,不需要过多的试验来制备此处所述和所要求保护的化合物。这些反应的示例性试剂和方法在下文的工作实施例中将变得显而易见。
[0138] 反应方案1
[0139]
[0140] 可以如方案1所示制备式I的化合物,包括在溶剂例如H2O/THF/MeOH的1∶2∶3混合物或aq.MeOH或aq.EtOH中用例如LiOH或NaOH处理通式II的化合物
[0141]
[0142] 通式II的化合物提供了一种便利的方法来纯化作为α和β异头物的混合物的通式Ia的粗化合物。制备通式II的化合物,包括在溶剂例如包含吡啶和催化剂例如二甲基氨基吡啶(DMAP)的CH2Cl2中用Ac2O处理通式Ia的化合物。
[0143]
[0144] 制备通式Ia的化合物,包括在路易斯酸催化剂例如BF3-Et2O存在下和-10℃下,在溶剂例如1∶1 CH2Cl2/MeCN中用还原剂例如Et3SiH还原通式III的化合物。
[0145]
[0146] 可替代地,通式II的化合物可以由通式III的化合物来制备,包括首先在包含碱溶剂例如例如Hunig′s碱或Et3N和催化剂例如DMAP的甲苯或CH2Cl2中用Ac2O乙酰化通式III的化合物,产生通式IV的化合物。
[0147]
[0148] 然后实现通式IV的化合物到通式II的化合物的转变,包括在溶剂例如包含1当量的水和路易斯酸催化剂例如BF3-Et2O的MeCN中在20℃下用还原剂例如Et3SiH处理。 [0149] 反应方案2
[0150]
[0151] 如上述方案2所概述,可以制备通式Ia的化合物,包括在-75℃下向在溶剂例如甲苯中通式IV的persilylated葡糖酸内酯中加入通式V的芳基锂的冷THF溶液。然后在30分钟后加入质子酸例如甲磺酸(MSA)的甲醇溶液,在20℃搅拌该溶液,直至中间体乳醇转化成III完成。
[0152]
[0153] 可以制备通式VI的化合物,包括在溶剂例如包含碱例如N-甲基吗啉的THF中,用硅烷化剂例如三甲基硅烷氯处理商业销售的D-葡糖酸内酯。
[0154] 可以制备通式V的化合物,包括-75℃下在溶剂例如THF中,用烷基锂例如正丁基锂或叔丁基锂处理通式VII的化合物。
[0155]
[0156] 可以容易地制备通式VII的化合物,包括在60℃下,在路易斯酸 催化剂例如BF3-Et2O或CF3SO3H存在下,在溶剂例如TFA中用还原剂例如Et3SiH处理通式VIII的化合物。
[0157]
[0158] 可以制备通式VIII的化合物,包括在溶剂例如包含1当量的路易斯酸例如AlCl3或AlBr3的乙苯中用2-氯-5-溴苯甲酰氯与商业销售的乙苯进行Friedel-Craft酰化作用。2-氯-5-溴苯甲酰氯容易地刻有商业销售的2-氯-5-溴苯甲酸来制备,包括在溶剂例如包含催化量的DMF的CH2Cl2中用乙二酰氯处理。
[0159] 实用性和组合
[0160] A.实用性
[0161] 本发明的化合物具有作为在哺乳动物的肠和肾中发现的钠依赖性葡萄糖载体的抑制剂的活性。优选地,本发明的化合物是肾SGLT2活性的选择性抑制剂,因此可以用于治疗与SGLT2活性有关的疾病或疾病。
[0162] 因此,本发明的化合物可以施用于哺乳动物,优选人,来治疗各种疾病和病症,包括但不限于,治疗或延迟糖尿病(包括I型和II型,葡萄糖耐量降低,胰岛素抗性,和糖尿病并发症例如肾病、视网膜病、神经病和白内障)、高血糖症、高胰岛素血症、高胆固醇血症、游离脂肪酸或甘油的血中水平升高、高脂血症、高甘油三酯血症、肥胖、伤口愈合、组织局部缺血、动脉粥样硬化和高血压的发展或发生。本发明的化合物也可以用于提高高密度脂蛋白(HDL)的血中水平。
[0163] 此外,如Johannsson J.Clin.Endocrinol.Metab.,82,727-34(1997)中详述,这些疾病、病症和病况共同称作“综合征X”和代谢综合征,它们可以使用本发明的化合物来治疗。
[0164] B.组合
[0165] 本发明包括在其药物组合物范围内,该化合物仅包含治疗有效量的式I的化合物作为活性成分,或其与药物载体或稀释剂的组合。任选地,本发明的化合物可以用于个体治疗,或用于与一种或多种治疗剂的组合。
[0166] 适合于本发明的化合物组合的其他“治疗剂”包括但不限于已知的用于治疗上述疾病的治疗剂:抗糖尿病剂;抗高血糖剂;降血脂/降脂剂;抗肥胖剂;抗高血压剂和食欲抑制剂。
[0167] 用于与本发明的化合物组合的适当的抗糖尿病剂的例子包括双胍类(例如,二甲双胍或苯乙双胍)、葡糖苷酶抑制剂(例如,阿卡波糖或米格列醇)、胰岛素(包括促胰岛素分泌药或胰岛素致敏剂)、氯茴苯酸类(例如,瑞格列奈)、磺脲类(例如,格列美脲、格列本脲、格列齐特、氯磺丙脲和格列吡嗪)、双胍/格列本脲组合(例如, )、噻唑烷二类(例如,曲格列酮、罗格列酮和吡格列酮)、PPAR-α激动剂、PPAR-γ激动剂、PPARα/γ双重激动剂、糖原磷酸化酶抑制剂、脂肪酸结合蛋白(aP2)的抑制剂、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)或GLP-1受体的其他激动剂、和二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂。
[0168] 据信,使用式I的化合物和至少一种或多种其他抗糖尿病剂的组合提供了超过单独每一种药物可能的抗高血糖结果,并超过了这些药物产生的抗高血糖加和作用。 [0169] 其他适当的噻唑烷二酮类包括Mitsubishi′s MCC-555(在U.S.5,594,016)、Glaxo-Welcome′s GL-262570、恩格列酮(CP-68722,Pfizer)或达格列酮(CP-86325,Pfizer,依沙列 酮(isaglitazone)(MIT/J&J)、JTT-501(JPNT/P&U)、L-895645(Merck)、R-119702(Sankyo/WL)、NN-2344(Dr.Reddy/NN)、或YM-440(Yamanouchi)。
[0170] PPAR-α激动剂、PPAR-γ激动剂和PPAR α/γ双重激动剂的例子包括吗格 立 他(muraglitizar)、吡 格 立 他 (peliglitazar)、AR-HO39242(Astra/Zeneca)、GW-409544(Glaxo-Wellco me)、GW-501516(Glaxo-Wellcome)、KRP297(Kyorin Merck)以及在Murakami等人,″A Novel Insulin Sensitizer Acts As a Coligand for PeroxisomeProliferation-ActivatedReceptor A(PPARα)and PPAR gamma.Effect onPPARαActivation on Abnormal Lipid Metabolism in Liver of ZuckerFatty Rats″,Diabetes 47,1841-1847(1998)、WO 01/21602和U.S 6,653,314 中所述的那些,通过参考将这些内容引入本文,使用如所上所列的剂量,其中指定优选的化合物是在此处优选使用的。
[0171] 适当的aP2抑制剂包括在1999年9月7日提交的U.S.申请号09/391,053和200年3月6日提交的U.S.申请号09/519,079,使用如所列的剂量。
[0172] 适当 的DPP4抑 制 剂包 括在 WO99/38501、WO99/46272、WO99/67279(PROBIO DRUG)、WO99/67278(PROBIODRUG)、WO99/61431(PROBIODRUG)、HughesN 等 人 公 开 的VP-DPP728A(1-[[[2-[(5-氰基吡啶-2-基)氨基]乙基]氨基]乙酰基]-2-氰基-(S)-吡咯烷)(Novartis),Biochemistry,38(36),11597-11603,1999,TSL-225(色氨酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(Yamada等人公开,Bioorg.& Med.Chem.Lett.8(1998)1537-1540)、Ashworth等人公开的2-氰基吡咯烷和4-氰基吡咯烷,Bioorg.& Med.Chem.Lett.,Vol.6,No.22,pp 1163-1166和2745-2748(1996)、在U.S.申请号10/899641,WO 01/868603和U.S.6,395,767公开的化合物,使用如所上所列的剂量。
[0173] 其他适当的氯茴苯酸类包括那格列奈(Novartis)或KAD1229(PF/Kissei)。 [0174] 用于和本发明的化合物组合的抗高血糖剂的例子包括胰高血糖素样肽-1(GLP-1),例如GLP-1(1-36)酰胺、GLP-1(7-36)酰胺、GLP-1(7-37)(如U.S.5,614,492所 公 开),以 及 塞 那 肽 (Amylin/Lilly)、LY-315902(Lilly)、MK-0431(Merck)、liraglutide(NovoNordisk)、ZP-10(Zealand Pharmaceuticals A/S)、CJC-1131(Conjuchem Inc)、和在WO 03/033671中公开的化合物。
[0175] 用于和本发明的化合物组合的适当的降血脂/降脂剂的例子包括一种或多种MTP抑制剂、HMG CoA还原酶抑制剂、鲨烯合成酶抑制剂、纤维酸衍生物、ACAT抑制剂、脂氧合+酶抑制剂、胆固醇吸收抑制剂、回肠Na/胆汁酸协同转运蛋白抑制剂、LDL受体活性向上调节剂、胆汁酸多价螯合剂、胆固醇酯转移蛋白(例如,CETP抑制剂例如CP-529414(Pfizer)和JTT-705(Akros Pharma))、PPAR激动剂(如上所述)和/或烟酸及其衍生物。
[0176] 可以如上所述使用的MTP抑制剂包括在U.S.5,595,872、U.S. 5,739,135、U.S.5,712,279、U.S.5,760,246、U.S.5,827,875、U.S.5,885,983和U.S.5,962,440中所述的那些。
[0177] 可以与一种或多种式I的化合物组合使用的HMG CoA还原酶抑制剂包括如公开于U.S.3,983,140所述的美伐他汀及相关化合物、如公开于U.S.4,231,938中的洛伐他汀(mevinolin)及相关化合物、如公开于U.S.4,346,227中的普伐他汀及相关化合物、如公开于U.S.4,448,784和4,450,171中的辛伐他汀及相关化合物。在此可以使用的其它HMGCoA还原酶抑制剂包括但不限于,如公开于U.S.5354772中的氟伐他汀、如公开于U.S.5,006,530和5,177,080中的西立伐他汀、如公开于U.S.4,681,893、5,273,995、5,385,929和5,686,104中的阿伐他汀、如公开于U.S.5,011,930中的阿他伐他汀
(atavastatin)(Nissan/Sankyo的尼伐他汀(NK-104))、公开于U.S.5,260,440中的韦伐他汀(visastatin)(Shionogi-Astra/Zeneca(ZD-4522))、公开于U.S.5,753,675中的他汀类相关化合物、如公开于U.S.4613610中的甲羟戊酸内酯衍生物的吡唑类似物、如公开于PCT申请WO 86/03488中的甲羟戊酸内酯衍生物的茚类似物、如公开于U.S.4,647,576中的6-[2-(取代的-吡咯-1-基)-烷基]吡喃-2-酮及其衍生物、Searle的SC-45355(一种3-取代的戊二酸衍生物)二氯代乙酸盐、如公开于PCT申请WO 86/07054中的甲羟戊酸内酯的咪唑类似物、如公开于法国专利2,596,393中的3-羧基-2-羟基-丙烷-膦酸衍生物、如公开于欧洲专利申请0221025中的2,3.二取代的吡咯、呋喃和噻吩衍生物、如公开于U.S.4,686,237中的甲羟戊酸内酯的基类似物、如U.S.4,499,289中公开的八氢蔡、如公开于欧洲专利申请0142146A2中的洛伐他汀的酮基类似物和公开于U.S.5,506,219和
5,691,322中的喹啉和吡啶衍生物。
[0178] 优选的降血脂剂是普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀、atavastatin和ZD-4522。
[0179] 此外,在抑制HMG CoA还原酶中有用的膦酸化合物,例如在GB2205837所述的那些也适合在于本发明的化合物组合使用。
[0180] 适合在此处使用的角鲨烯合成酶抑制剂包括但不限于,公开于U.S.5,712,396中的[α]-膦酰基-磺酸盐类、公开于Biller等人,J.Med.Chem.,1988,Vol.31,No.10,pp1869-1871的那些,包括类异戊二烯(氧膦基-甲基)膦酸酯以及其它已知的角鲨烯合成酶抑制剂,例如公开于U.S.4,871,721和4,924,024和Biller,S.A.,Neuenschwander,K.,Ponpipom,M.M.,and Poulter,CD.,Current PharmaceuticalDesign,2,1-40(1996)中的那些。
[0181] 此外,适合于在此使用的其它角鲨烯合成酶抑制剂包括由P.Ortizde Montellano等人,J.Med.Chem.,1977,20,243-249公开的焦磷酸萜类化舍物、由由Corey和Volante,J.Am.Chem.Soc,1976,98,1291-1293公开的法呢基二磷酸酯类似物A和焦磷酸前角鲨烯(PSQ-PP)类似物,由McClard,R.W.等人,J.A.C.S.,1987,109,5544报道的氧膦基膦酸酯和由Capson,T.L.,PhD dissertation,June,1987,Dept.Med.Chem.U of Utah,Abstract,Table of Contents,pp16,17,40-43,48-51,Summary报道的的环丙烷类。
[0182] 可以与式I的化合物组合使用的纤维酸衍生物包括非诺贝特、吉非贝齐、氯贝丁酯、苯扎贝特、环丙贝特、克利贝特等,普罗布考,及如在U.S.3,674,836中公开的相关化合物,普罗布考和吉非贝齐为优选的,胆酸多价螯合剂如考来烯胺、考来替泊和DEAE-Sephadex((Secholex 、Policexide )),以及保脂妥(Rhone-Poulene)、EisaiE-5050(一种N-取代的乙醇胺衍生物)、伊昔尔(HOE-402)、奥列司他(TI LL)、istigmastanylphos-phorylcholine(SPC,Roche)、氨基环糊精(Tanabe Seiyoku)、Ajinomoto A3-814(甘菊环衍生物)、甲亚油酰胺(Sumitomo)、Sandoz 58-035、American Cyanamid CL-277082和CL-283546(二取代的脲衍生物)、烟酸、阿昔莫司、阿昔呋喃、新霉素、对-氨基水杨酸、阿司匹林、如公开于U.S.4,759,923中的聚(二烯丙基甲胺)衍生物、如公开于U.S.4,027,009中的季胺聚(氯化二烯丙基二甲基铵)和紫罗烯,以及其它已知的降血清胆固醇的治疗剂。
[0183] 可以与式I的化合物组合使用的ACAT抑制剂包括在Drugs ofthe Future 24,9-15(1999),(Avasimibe); ″ The ACAT inhibitor,Cl-1011 is effective in the prevention and regression of aortic fatty streakarea in hamsters″,Nicolosi等人,Atherosclerosis(Shannon,Irel).(1998),137(1),77-85;″The pharmacological profile of FCE 27677:a novel ACAT inhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selective suppression of the hepatic secretion of ApoBlOO-containing lipoprotein ″,Ghiselli,Giancarlo,Cardiovasc.Drug Rev.(1998),16(1),16-30;″RP 73163:a bioavailable alkylsulfinyl-diphenylimidazole ACAT inhibitor″,Smith,C,等人,Bioorg.Med.Chem.Lett.(1996),6(1),47-50;″ACAT inhibitors:physiologicmechanisms for hypolipidemic and anti-atherosclerotic activities inexperimental animals ″,Krause 等 人,Editor(s):Ruffolo,Robert R.,Jr.;Hollinger,Mannfred A.,Inflammation:Mediators Pathways(1995),
173-98,Publisher:CRC,Boca Raton,FIa.; ″ ACAT inhibitors:potential anti-atherosclerotic agents″,Sliskovic 等 人,Curr.Med.Chem.(1994),1(3),
204-25; ″ Inhibitors of acyl-CoAxholesterol O-acyltransferase(ACAT)as hypocholesterolemic agents.6.The first water-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity.Inhibitors ofacyl-CoA:cholesterol acyltransferase(ACAT).7.Development of aseries of substituted N-phenyl-N ′ -[(1-phenylcyclopentyl)methyl]ureaswith enhanced hypocholesterolemic activity ″,Stout 等人,Chemtracts:Org.Chem.(1995),8(6),359-62, 或 TS-962(TaishoPha[pi]naceutical Co.Ltd)中公开的那些。
[0184] 其他的抗血脂剂可以是LD2受体活性的向上调节剂,例如MD-700(Taisho Pharmaceutical Co.Ltd)和LY295427(Eli Lilly)。
[0185] 与本发明的化合物组合使用的适当的胆固醇吸收抑制剂的例子包括SCH48461(Schering-Plough)、以 及 在 Atherosclerosis 115,45-63(1995) 和 J.Med.Chem.41,973(1998)中公开的那些。
[0186] 与本发明的化合物组合使用的适当的回肠Na+/胆汁酸协同转运蛋白抑制剂的例子包括在Drugs of the Future,24,425-430(1999)中公开的那些化合物。
[0187] 与本发明的化合物组合使用的脂氧合酶抑制剂包括15-脂氧合酶(15-LO)抑制剂,例如在WO 97/12615中公开的苯并咪唑衍生物,在WO 97/12613中公开的
15-LO抑制剂,在WO 96/38144中公开的噻唑酮类,和由Sendobry等人″Attenuation of diet-inducedatherosclerosis in rabbits with a highly selective
15-lipoxygenaseinhibitor lacking significant antioxidant properties″,Brit.J. Pharmacology (1997) 120,1199-1206,和 Cornicelli等 人,″ 15-Lipoxygenase and its Inhibition:A Novel Therapeutic Target forVascular Disease″,Current Pharmaceutical Design,1999,5,11-20公开的15-LO抑制剂。
[0188] 与本发明的化合物组合使用的适当的抗高血压剂的例子包括β肾上腺素能神经阻断剂、通道阻滞剂(L-型和T-型;例如地尔硫 维拉帕米、硝苯地平、氨氯地平和mybefradil)、利尿剂(例如,氯噻嗪、氢氯噻嗪、氟甲噻嗪、氢氟噻嗪、苄氟噻嗪、甲基氯噻嗪、三氯噻嗪、泊利噻嗪、苄噻嗪、ethacrynic acid tricrynafen、氯噻酮、呋塞米、musolimine、布美他尼、triamtrenene、阿米洛利、螺内酯)、肾素抑制剂、ACE抑制剂(例如,卡托普利、佐芬普利、福辛普利、依那普利、ceranopril、cilazopril、地拉普利、喷托普利、喹那普利、雷米普利、赖诺普利)、AT-I受体拮抗剂(例如,氯沙坦、依贝沙坦、缬沙坦)、ET受体拮抗剂(例如,塞塔生坦、atrsentan和在U.S.5,612,359和6,043,265中公开的化合物)、双重ET/AII拮抗剂(例如,在WO00/01389中公开的化合物)、中性肽链内切酶(NEP)抑制剂、血管肽酶抑制剂(双重NEP-ACE抑制剂)(例如,奥马曲拉和gemopatrilat)和硝酸盐类。
[0189] 与本发明的化合物组合使用的适当的抗肥胖剂的例子包括β3肾上腺素能激动剂、脂酶抑制剂、5-羟色胺(和多巴胺)再摄取抑制剂、甲状腺受体β药物、5HT2C激动剂(例如Arena APD-356);MCHRI拮抗剂例如Synaptic SNAP-7941和Takeda T-226926、黑皮质素受体(MC4R)激动剂、浓黑色素-激素受体(MCHR)拮抗剂(例如SynapticSNAP-7941和Takeda T-226926)、促生长激素神经肽受体调节剂、阿立新拮抗剂、CCK激动剂、NPY1或NPY5拮抗剂、NPY2和NPY4调节剂、促皮质释放因子激动剂、组胺受体-3(H3)调节剂、11-β-HSD-1抑制剂、脂联素(adinopectin)受体调节剂、单胺再摄取抑制剂或释放剂、睫状节神经细胞营养因子(CNTF,例如Regeneron的AXO KIN )、BDNF(来自脑源性神经营养因子)、来普汀和来普汀受体调节剂、大麻素-1受体拮抗剂(例如SR-141716(Sanofi)或SLV-319(Solvay))、和/或厌食剂。
[0190] 可以任选在与本发明的化合物的组合中使用的β3肾上腺素能激动剂包括AJ9677(Takeda/Dainippon)、L750355(Merck)、或CP331648(Pfizer)或在U.S.5,541,204、5,770,615、5,491,134、5,776,983和5,488,064公开的其他已知的β3激动剂。
[0191] 可以任选在与本发明的化合物的组合中使用的脂酶抑制剂的例子包括奥利斯特或ATL-962(Alizyme)。
[0192] 可以任选在与本发明的化合物的组合中使用的5-羟色胺(和多巴胺)再摄取抑制剂(或5-羟色胺受体激动剂)可以是BVT-933(Biovitrum)、西布曲明、托吡酯(Johnson & Johnson)或阿索开(Regeneron)。
[0193] 可以任选在与本发明的化合物的组合中使用的甲状腺受体β化合物的例子包括甲状腺受体配体,例如在WO97/21993(U.CaI SF)、WO99/00353(KaroBio)和GB98/284425(KaroBio)中公开的那些。
[0194] 可以任选在与本发明的化合物的组合中使用的单胺再摄取抑制剂包括芬氟拉明、右芬氟拉明、氟伏沙明、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、对氯苯丁胺、氯福雷司、氯特胺、匹西雷司、西布曲明、右旋苯丙、苯丁胺、苯丙醇胺或氯苯咪吲哚。
[0195] 可以任选在与本发明的化合物的组合中使用的厌食剂包括托吡酯(Johnson & Johnson)、右旋苯丙、苯丁胺、苯丙醇胺或氯苯咪吲哚。
[0196] 上述的专利和专利申请都通过参考引入本文。
[0197] 当可以在与本发明的化合物的组合中使用时,上述的其他治疗剂例如是按照Physician′s Desk Reference、上述所列的专利所指示或本领域普通技术人员确定的量使用
[0198] 当本发明的化合物用于与一种或几种其他治疗剂的组合时,无论同时还是连续给药,优选下列的组合比例和剂量范围:
[0199] 当其他的抗糖尿病剂是双胍类时,式I的化合物与双胍的重量比范围是约0.01∶1到约100∶1,优选约0.1∶1到约5∶1。
[0200] 所使用的式I的化合物与葡糖苷酶抑制剂的重量比范围是约0.01∶1到约100∶1,优选约0.5∶1到约50∶1。
[0201] 所使用的式I的化合物与磺酰脲的重量比范围是0.01∶1到约100∶1,优选约0.2∶1到约10∶1。
[0202] 所使用的式I的化合物与噻唑烷二酮的重量比范围是约0.01∶1到约100∶1,优选约0.2∶1到约10∶1。
[0203] 当存在时,噻唑烷二酮抗糖尿病剂的使用量范围是约0.01到约2000mg/天,其可以单剂量施用,或以分剂量每日1到4次施用。
[0204] 任选地,磺酰脲和噻唑烷二酮可以小于约150mg的量与式I的化合物掺入到一个片剂中。
[0205] 当存在时,二甲双胍或其盐可以以每天约500到约2000mg的范围使用,其可以单剂量施用,或以分剂量每日1到4次施用。
[0206] 当 存 在 时,GLP-1 肽 可 以 在 口 腔 含 化 制 剂 中 施 用,通 过U.S.5,346,701(TheraTech)、5,614,492和5,631,224所述的鼻内或胃肠外给药来施用,通过参考将这三篇文献引入本文。
[0207] 所使用的通式I的SGLT2抑制剂与氯茴苯酸、PPAR-γ激动剂、PPAR-α/γ双重激动剂、aP2抑制剂或DPP4抑制剂的重量比范围是0.01∶1到约100∶1,优选约0.2∶1到约10∶1。
[0208] 一般地所使用的本发明的式I的化合物与降血脂药(当存在时)的重量比范围是约500∶1到约1∶500,优选约100∶1到约1∶100。
[0209] 当口服时,每日1到4次使用约0.01mg/kg到约500mg,优选约0.1mg到约100mg的MTP抑制剂可以得到令人满意的结果。
[0210] 优选口服剂型,例如片剂或胶囊包含约1到约500mg,优选约2到约400mg,更优选约5到约250mg的MTP抑制剂,每日1到4次。
[0211] 当口服时,使用约1到2000mg,优选约4到约200mg的HMG CoA还原酶抑制剂可以得到令人满意的结果。
[0212] 优选口服剂型,例如片剂或胶囊包含约0.1到约100mg,优选约5到约80mg,更优选约10到约40mg的HMG CoA还原酶抑制剂。
[0213] 可以在剂量中使用的角鲨烯合成酶抑制剂的范围是约10mg到约2000mg,优选约25mg到约200mg。
[0214] 优选口服剂型,例如片剂或胶囊包含约10到约500mg,优选约25到约200mg的角鲨烯合成酶抑制剂。
[0215] 式I的化合物可以通过任何适当的方法,例如口服,例如以片剂、胶囊、颗粒或粉末的形式;舌下给药;含服;胃肠外给药,例如通过皮下、静脉内、肌内或胸骨内注射或输注技术(例如,武军注射水性或非水性溶液或混悬液);鼻内给药,包括施用于鼻膜,例如通过吸入喷雾;局部给药,例如以乳膏或软膏的形式;或直肠给药,例如以 栓剂的形式;在包含无毒性、药学可接受的载体或稀释剂的剂量单元制剂中施用于此处所述的任何用途。 [0216] 当实施本发明的优选方法来治疗任何的此处所述的疾病例如糖尿病和相关疾病时,将使用包含与药学上可接受的载体或稀释剂结合的一种或多种通式I化合物的药用组合物,该组合物可含有或不含有另一种抗糖尿病剂物和/或抗高血脂剂和/或其他治疗剂。使用常规的固体或液体载体或稀释剂以及一种适合于所需给药方式的类型的药物添加剂,例如药学可接受的载体、赋形剂、粘合剂等等可以配制药用组合物。该化合物可以以例如片剂、胶囊、珠、颗粒或粉末的形式,通过口服途径施用于哺乳动物类,包括人、猴、狗等,或者它们可以以注射制剂的形式经胃肠外途径施用,或者它们可以经鼻腔或以透皮贴剂的形式施用。典型的固体剂型将包含约10到约500mg的式I的化合物。对于成人,剂量优选在10到2000mg/天之间,其可以单一剂量或以分剂量的形式,每日1-4次施用。
[0217] 通过无菌操作将250mg的式I的化合物置于管形瓶中,无菌冻干并密封来制备典型的注射制剂。为了使用,将管形瓶中的内容物与2mL生理盐水混合,以制备可注射的制剂。
[0218] 应当理解,对于任何特定患者其具体的剂量水平和服用频率将是不同的,取决于很多因素,包括具体使用的化合物的活性,代谢稳定性和该化合物活性时间的长度,患者的人种、年龄、体重、一般健康、性别和饮食,给药的方式和时间、排泄途径、药物组合,和具体病症的严重性。
[0219] 本发明的化合物的SGLT2抑制剂活性可以通过使用下列的分析系统来确定。 [0220] SGLT2活性的测定
[0221] 采用标准分子生物学技术,通过逆转录和扩增,从人肾mRNA克隆人SGLT2(GenBank # 95549)的mRNA序列。将cDNA序列稳定地转染至CHO细胞中,基本如RyaIl等(1994)所述,对克隆体进行SGLT2活性的测定。基本如Ryan等所述在选择性克隆的细胞系中进行SGLT2活性的抑制作用的评价,但作了以下修改。以每孔10000到20000个细胞接种细胞,在包含10%胎牛血清和500μg/ml 遗传霉素的Ham′s F-12培养基中进行培养。在接种2或3天后分析约90%融合的细胞。用不含钠的缓冲液洗涤细胞1次,该缓冲液包含10mM Hepes/Tris,137mM N-甲基-D-葡萄糖胺,5.4mM KCl,2.8mMCaCl2,和
1.2mM MgSO4,pH 7.4。在包含10mM Hepes/Tris,137mMNaCl,5.4mM KCl,2.8mM CaCl2,和
14
1.2mM MgSO4的无蛋白质的缓冲液中培养120分钟后,在10μM[ C]AMG([α]-甲基-D-吡喃葡萄糖苷)存在下,在8种浓度下分析抑制剂。将响应曲线拟合成经验上的四-参数模型,以确定最大半数响应时的抑制剂浓度,报告为IC50。每个测定值进行3次。通过在包含
0.5mM根皮苷的冰冷1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中洗涤三次来中止分析,然后将细胞溶解在
50μl0.1%NaOH中。在加入200μl MicroScint-40闪烁液后,将细胞振荡1小时,然后在
14
TopCount闪烁计数器上定量[ C]AMG。用或不用NaCl在不存在抑制剂时进行对照分析,在每次分析中产生的根皮苷剂量响应曲线作为阳性对照。
[0222] Ryan MJ,Johnson G,Kirk J,Fuerstenberg SM,Zager RA和Torok-Storb B.1994.HK.2:一种得自正常成人肾的无限增殖化近端小管上皮细胞系。Kidney International45:48-57。
[0223] 以下工作实施例代表用于更好地说明,而不是限制本发明的优选实施方案。 [0224] 实施例1
[0225]
[0226] A.5-溴-2-氯-4′-乙基二苯甲酮
[0227] 向包含在700mLCH2Cl2中的商业销售的5-溴-2-氯苯甲酸(410g, 1.74mol)的磁搅拌混悬液的2L圆底烧瓶中加入乙二酰氯(235g,1.85mol),然后加入1.5mL的DMF。为了捕获所得到的HCl,用管固定该烧瓶以排出搅拌着的KOH水溶液表面上的气体。当2小时后气体的强烈产生停止时,搅拌均相反应过夜,然后用旋转式蒸发真空除去挥发物。在随后的排出期间所得到的油固化
[0228] 在粗5-溴-2-氯苯甲酰氯溶解于530ml的乙苯中后,将该黄色溶液冷却到-30℃,然后在60分钟里按每份30g加入AlCl3(257g,1.93mol)以确保温度不超过10℃。让气体通过搅拌的浓NaOH溶液来捕获在加入60%的AlCl3后开始产生大量的HCl气体。如果反应更加浓缩,在加入AlCl3完成后不要维持磁力搅拌器继续搅拌。在用水浴加热到15℃并搅拌一小时后,移去水浴。在20℃4小时后,将浓汁倾倒到冰(1.5kg)上。然后,当搅拌的混悬液冷却后,加入H2O(1L),然后用EtOAc萃取4次。合并的有机萃取液用1N HCl洗涤2次,用1M KOH洗涤3次,用盐水洗涤2次,然后在Na2SO4上干燥。首先用旋转式蒸发器,然后在1托下加热到60℃来除去挥发物。对所得到的黑色油的1H NMR分析表明了该残留物是邻位/对位异构体~1∶14的混合物。在己烷中溶解,然后通过硅胶垫过滤除去大部分的颜色
浓缩洗脱液得到了560g(99%)的5-溴-2-氯-4′-乙基二苯甲酮/5-溴-2-氯-2′-乙基二苯甲酮~14∶1的混合物。
[0229] HPLC保留时间:4.7分钟,YMC S5C-184.6×50mm柱,2.5mL/分钟,在220nM处检测;4分钟的梯度0-100%B,在100%B时保持2分钟。溶剂A:10%MeOH/H2O+0.2%H3PO4。溶剂B:90%MeOH/H2O+0.2%H3PO4。
[0230] 5-溴-2-氯-4′-乙基二苯甲酮
[0231] 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.73(d,2H,JAB =8.2Hz),7.54(dd,1H,J=2.2Hz,J=8.8Hz),7.32(d,1H,J=8.8Hz),7.295(d,2H,JAB=8.2Hz),2.72(q,2H,J= 7.7Hz),1.27(t,3H,J=7.7Hz).
[0232] 13C NMR(100MHz,CDCl3)δ193.13.151.33,140.49,133.8,133.52,131.6,131.44,130.34,130.16,128.28,120.44,29.04,15.02.
[0233] 5-溴-2-氯-2′-乙基二苯甲酮(区别性信号)
[0234] 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.64(q,2H,J=7.7Hz),1.23(t,3H,J=7.7Hz). [0235] 13C NMR(100MHz,CDCl3)δ28.9,15.5.
[0236]
[0237] B.5-溴-2-氯-4′-乙基二苯甲烷
[0238] 在30 ℃ 下 向 包 含 7 % 的 同 分 异 构 酮 的Et3SiH(400g,3.45mol) 和5-溴-2-氯-4′-乙基二苯甲酮(534g,1.65mol)的300mL TFA搅拌溶液中加入
CF3SO3H(1.5g,0.01mol)。在数分钟内,升高温度以使溶液猛烈回流。小心该适度的放热需要用外部的冰浴来冷却。1小时后,HPLC表明反应完成了90%。在加入Et3SiH(20g)并在
70℃加热过夜后,通过HPLC证明反应完成了>95%。在冷却后,通过减压下球状物对球状物蒸馏除去挥发物。将所得到的1L轻的灰色油倾倒入1L水中。混合物用己烷萃取3次;
合并的有机层用HO洗涤3次,用Na2CO3洗涤2次,用盐水洗涤2次,然后在Na2SO4上干燥。
在用旋转式蒸发器浓缩后,剩余约1L的澄清的轻的琥珀油。进一步浓缩该物质;在0.6托下蒸馏来除去(Et3Si)2O(450mL)。当在蒸馏头上温度达到75℃时,将该瓶冷却。对该瓶的
1H NMR分析表明它包含二芳基基烷和(Et3Si)2O的~8∶1混合物。实现该混合物的结晶,包括将该产物倾倒进剧烈搅拌的10℃的85%EtOH/H2O(1.2L)中,在搅拌数小时后,过滤收集晶体,用冰的1∶1 EtOH/H2O洗涤,并真空干燥。得到的包含~1%(Et3Si)2O的低熔点固体5~溴~2-氯-4′-乙基二苯基-甲烷(500g)不需进一步纯化即可使用。
[0239] HPLC保留时间:5.3分钟,YMC S5C-184.6×50mm柱,2.5mL/分钟,在220nM处检测;4分钟梯度0-100%B,在100%B时保持2分钟。溶剂A:10%MeOH/H2O+0.2%H3PO4.溶剂B:90%MeOH/H2O+0.2%H3PO4。
[0240] 1H NMR(125MHz,CDCl3)δ7.27-7.23(m,3H),7.14(d,2H,JAB =7.7Hz),7.09(d,2H,JAB=7.7Hz),2.63(q,2H,J=7.7Hz),1.23(t,3H,J=7.7Hz).
[0241] 13C NMR(100MHz,CDCl3)δ142.46.141.08,135.68,133.64,133.13,130.85,130.55,128.83,128.1,120.0,38.62,28.43,15.51。
[0242]
[0243] C.2,3,4,6-四-O-三甲基甲硅烷基-D-葡糖酸内酯
[0244] 在氩气中向葡糖酸内酯(239g,1.34mol)和N-甲基吗啉(1180mL,10.73mol)的2.4L的THF的-5℃搅拌溶液中通过滴液漏斗加入三甲基硅烷氯(1022mL,8.05mol),其滴加速度使得温度不超过5℃。一小时后,加热该搅拌溶液至35℃并加热5小时,然后将其冷却到20℃并将反应搅拌过夜。在用3.6L甲苯稀释后,将混合物冷却到0-5℃,然后小心地加入7L的H2O,加入速率使得温度不超过10℃。注意在加入第一部分的H2O时会剧烈放热的后果。在混合后,分离该相,然后分开。用aq.NaH2PO4(2L)、H2O(1L)、和盐水(IL)洗涤有机相。然后用旋转式蒸发器真空浓缩有机层;所得到的轻的黄色油用250mL的甲苯吸收2次,再浓缩得到616g。
[0245] D.
[0246]
[0247] 在氩气氛下向B部分的5-溴-2-氯-4′-乙基二苯甲烷(88g,0.28mol)的450mL1∶2干THF/甲苯的-78℃搅拌溶液中加入2.5Mn-BuLi(136mL,0.34mol)的己烷液,其加入速率使温度保持在-55℃以下。在加入后搅拌10分钟后,用插管将溶液转移到C部分的
2,3,4,6-四-O-三甲基甲硅烷基-D-葡糖酸内酯(153g,0.33mol)的甲苯(350mL)的-78℃搅拌溶液中,其加入速率使温度保持在-55℃以下。在-78℃搅拌该溶液30分钟,然后通过加入包含甲磺酸(28mL,0.45mol)的400mL MeOH中止反应。在20℃搅拌反应过夜18小时。
HPLC分析显示了在LC/MS中相应于所期望的O-甲基葡萄糖苷的新峰。当完成时,通过加入NaHCO3(42g,0.5mol)的200mL H2O溶液中止反应。如果PH是弱碱性的,加入更多的NaHCO3,然后用H2O 2倍稀释,并用EtOAc萃取3次。用盐水洗涤合并的EtOAc部分,在Na2SO4上干燥。在用旋转式蒸发器浓缩厚,油(140g,通过HPLC分析为90%纯)无需进一步纯化,而是不纯的非对映体混合物。
[0248] 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37(m,1H),7.23(m,2H),7.02(m,4H),5.14(m,1H),5.06(m,1H),4.07(m,1H),4.03(d,1H,JAB = 15.4hz),3.97(d,1H,JAB = 15.4Hz),
3.80-3.70(m,4H,3.60(m,1H),3.48(m,1H),3.31(m,1H),2.84(s,3H),2.53(q,2H,J =
7.5Hz),1.14(t,3H,J=7.5Hz).
[0249] 13C NMR(100MHz,CDCl3)δ144.4,140.7,138.94,136.9,132.51,131.6,130.96,130.6,130.2,129.16,103.36,77.0,74.86,72.48,64.27,51.57,41.33,30.75,17.9. [0250] HPLC保留时间:4.28分钟,90%纯,YMC S5 C-18 4.6×50mm柱,2.5mL/分钟,在
220nM处检测;4分钟梯度0-100%B,在100%B时保持2分钟。溶剂A:10%MeOH/H2O+0.2%H3PO4.溶剂B:90%MeOH/H2O+0.2%H3PO4。
[0251] LC/MS:[M-OMe]+391,393;[M+Na]+445,447.
[0252] E.
[0253]
[0254] 将包含二异丙基乙胺(465g,3.6mol)和DMAP(0.5g,4.1mmol)的D部分的O-甲基葡萄糖苷(206g,0.49mol)的THF(1L)溶液冷却到0℃。缓慢加入乙酸酐(326g,3.19mol),其速率使得温度不超过5℃。在溶液逐渐加热到20℃后,搅拌10小时,随后的分析表明完全转变成了四乙酸盐。通过加入EtOAc(1.5L)和10%aq.H3PO4(1.5L)使反应中止。在分离各层后,用EtOAc萃取2次aq.相。用盐水洗涤1次合并的有机相,然后在Na2SO4上干燥并真空浓缩。将所得到的油在溶解300mL甲苯中溶解2次并再浓缩,得到浓稠的油(300g,95%HPLC纯),其可以使用而无需进一步纯化所得到的不纯的非对映体混合物。
[0255] 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(d,1H,J = 8.3Hz),7.28(dd,1H,J = 8.3Hz,J=2.2Hz),7.24(d,1H,J=2.2Hz),7.11(d,2H,JAB=8.3Hz),7.04(d,2H,JAB=8.3Hz),5.56(t,1H,J=9.7Hz),5.21(t,1H,J=10.1Hz),4.93(t,1H,J=10.1Hz),4.20(dd,1H,J=12Hz,J=2Hz),4.12(d,1H,JAB=15.4Hz),4.02(m,1H),4.018(d,1H,JAB=15.4Hz),
3.10(s,3H),2.606(q,2H,J = 7.7Hz),2.097(s,3H),2.05(s,3H),1.94(s,3H),1.72sd(s,
3H),1.21(t,3H,J=7.7Hz).
[0256] 13C NMR(100MHz,CDCl3)δ170.7,170.05,169.47,168.9,142.2,138.74,136.4,135.1,134.7,129.8,129.4,128.6,128.0,126.0,100.02,73.83,71.33,68.87,68.77,
62.11,49.43,38.75,28.4,22.64,20.68,20.58,20.16,15.5.
[0257] HPLC保留时间:4.81分钟,90%纯,YMC S5C-18 4.6×50mm柱,2.5mL/分钟,在220nM处检测;4分钟梯度0-100%B,在100%B时保持2分钟。溶剂A:10%MeOH/H2O+0.2%H3PO4。溶剂B:90%MeOH/H2O+0.2%H3PO4。
[0258] F.
[0259]
[0260] 将包含1当量的H2O(9g,0.5mol)和Et3SiH(188g,1.62mol) 的上述粗油(301g,0.51mol)的CH2Cl2(500mL)搅拌溶液冷却到-20℃,然后加入BF3-Et2O(145g,1.02mol)。在加入其间,保持温度在0℃。然后在10℃下将反应搅拌2小时,在15-20℃下搅拌18小时,然后加入CH2Cl2(500mL)和H2O(500mL)使反应中止。在分离各层后,用CH2Cl2萃取aq相。
用aq NaHCO3和盐水洗涤1次合并的有机层然后在Na2SO4上干燥。在过滤除去Na2SO4后,加入Ac2O(6.4g,65mmol),二异丙基乙胺(9.5g,74mmol)和DMAP(100mg,0.8mmol)。在20℃下将溶液搅拌18小时以确保在还原和生成其间任何水解的葡萄糖苷羟基再乙酰化。真空浓缩后得到的油,加入EtOH进行结晶。在过滤后,通过和PLC分析该物质的纯度是98%;
在EtOH中再结晶得到呈白色固体状的四乙酰化β-C-葡萄糖苷(180g,99.8%纯)。程序D-F总的转变率是61%。
[0261] HPLC保留时间:4.74分钟,100%pure,YMC S5C-184.6×50mm柱,2.5niL/分钟,在220nM处检测;4分钟梯度0-100%B,在100%B时保持2分钟。溶剂A:10%MeOH/H2O+0.2%H3PO4.溶剂B:90%MeOH/H2O+0.2%H3PO4。
[0262] 1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.35(d,1H,J=8.2Hz),7.19(dd,1H,J=8.2Hz,J=2.2Hz),7.11(d,2H,JAB = 8.5Hz),7.086(d,1H,J = 2.2Hz),7.06(d,2H,JAB = 8.5Hz),
5.28(t,1H,J=9.7Hz,5.20(t,1H,J=9.7Hz),5.04(t,1H,J=9.7Hz),4.31(d,1H,J=
9.9Hz,4.26(dd,1H,J=12Hz,J=5Hz),4.135(dd,1H,J=12Hz,J=5Hz),4.095(d,1H,JAB=7.7Hz),3.995(d,1H,JAB=7.7Hz),3.79(m,1H),2.605(q,2H,J=7.7Hz),2.069(s,
3H),2.04(s,3H),1.98(s,3H),1.67(s,3H),1.21(t,3H,J=7.7Hz).
[0263] 13C NMR(125MHz,CDCl3)δ170.64,170.3,169.4,168.7,142.2,138.78,136.4,135.1,134.6,129.9,129.8,128.7,128.0,125.9,79.45,76.1,74.1,72.5,68.45,62.2,
38.6,28.4,20.7,20.6,20.59,20.2,15.55.
[0264] LC-MS[M+NH4+]在m/z 578.3处
[0265] G.
[0266]
[0267] 在2∶3 THF/MeOH(350mL)中搅拌F部分的四乙酰化β-C-葡萄糖苷(25g,44.6mmol)5分钟形成白色混悬液,在N2下在20℃下将该混悬液加入到LiOH-H2O(2.0g,
50mmol)的H2O(70mL)溶液中。15分钟后,该反应成为不透明溶液;在2.5小时后,通过HPLC
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