一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法
专利汇可以提供一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致 化学发光 传感器 的制备方法，属于新型 纳米材料 领域与 生物 传感技术领域；本发明基于电致化学发光ECL技术，首次以 铁 蛋白共价交联鲁米诺（Ft-luminol）作为 信号 源，以CeO2@SnS2作为促进剂，利用CeO2@SnS2对鲁米诺优异的协同催化作用对检测信号进行有效放大，提出了一种制备简单、成本低、反应能耗低、绿色环保的 生物传感器 制备方法，并将其应用于降 钙 素原的实际样品检测，检出限低至1.6 fg/mL，线性范围宽至5 fg/mL-100 ng/mL，灵敏度高、重现性好，具有较大的潜在应用价值。，下面是一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 ~ 4 mg/mL的CeO2@SnS2材料溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为2 4 mg/mL的抗体标记的鲁米诺-铁蛋白（Ft-luminol）溶液，用~
pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（4）滴加3 μL、质量分数为1 3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活~
性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加6 μL 降钙素原的标准溶液或未知浓度的降钙素原溶液，37 °C下孵化0.5 2 ~
h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
2.如权利要求1所述的一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，所述CeO2@SnS2材料溶液，按以下步骤制备：
首先，将0.01 0.03 mol的五水合四氯化锡、0.001 0.003 mol六水合硝酸铈、0.04 ~ ~
0.06 mol的硫代乙酰胺、0.4 0.6 g溴化十六烷基三甲铵完全溶解于乙醇和蒸馏水的~ ~
混合物在80 °C下搅拌2 h，将获得物转移至200 mL聚四氟乙烯内衬的高温反应釜中，温度保持在180 °C，反应24 48 h，随后冷却至室温；所得到的固体离心洗涤多次后，在40 ~ ~
80 °C的真空干燥箱中干燥12 ~ 36 h，然后在500 °C，氩气保护下烧结3 ~ 6 h，得到CeO2@SnS2，取2 4 mg的产品溶于1 mL超纯水中配成浓度为2 4 mg/mL的CeO2@SnS2溶液。
~ ~
3.如权利要求1所述的一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，所述抗体标记的鲁米诺-铁蛋白（Ft-luminol）溶液，按以下步骤制备：
将3 5 mL、浓度为5 μg/mL的铁蛋白溶液与0.5 2.5 mL、浓度为10 mmol/L的鲁米~ ~
诺溶液混合，随后加入3.5 5.5 mL去离子水进行稀释，然后，向上述混合溶液中加入50 ~ ~
150 uL、质量分数50%的戊二醛溶液，持续搅拌2 h后得到浅黄色的鲁米诺-铁蛋白溶液，继续加入100 300 μL、浓度为10 mg/mL的降钙素原抗体溶液，在4 °C下振荡孵化6 18 h，~ ~
离心后分散到1 mL pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液中得到抗体标记的鲁米诺-铁蛋白溶液，置于
4 °C下储存备用。
4.如权利要求1所述制备方法制备的电致化学发光传感器用于降钙素原浓度的检测。
5.如权利要求4所述的降钙素原浓度的检测，其特征在于，操作步骤如下：
（1）参数设置：超微弱电致化学发光仪的光电倍增管高压设置为800 V，电化学工作站循环伏安扫描电位范围设置为0 0.6 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
~
（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以上述方法制备的传感器为工作电极，在10 mL含45 75 mmol/L过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发~
光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.6 fg/mL，线性范围5 fg/mL-50 ng/mL；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算即可得到该试剂样品中的降钙素原浓度。
一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备
方法
技术领域
背景技术
发明内容
（1）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 4 mg/mL的CeO2@SnS2材料溶液为传感基底，~
将其置于37 °C晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为2 4 mg/mL的抗体标记的鲁米诺-铁蛋白（Ft-luminol）溶液，用~
pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（4）滴加3 μL、质量分数为1 3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活~
性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加6 μL 降钙素原的标准溶液或未知浓度的降钙素原溶液，37 °C下孵化0.5 2 ~
h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
0.06 mol的硫代乙酰胺、0.4 0.6 g溴化十六烷基三甲铵完全溶解于乙醇和蒸馏水的~ ~
混合物在80 °C下搅拌2 h，将获得物转移至200 mL聚四氟乙烯内衬的高温反应釜中，温度保持在180 °C，反应24 48 h，随后冷却至室温。所得到的固体离心洗涤多次后，在40 ~ ~
80 °C的真空干燥箱中干燥12 ~ 36 h，然后在500 °C，氩气保护下烧结3 ~ 6 h，得到CeO2@SnS2，取2 ~ 4 mg的产品溶于1 mL超纯水中配成浓度为2 ~ 4 mg/mL的CeO2@SnS2溶液。
诺溶液混合，随后加入3.5 5.5 mL去离子水进行稀释，然后，向上述混合溶液中加入50 ~ ~
150 uL、质量分数50%的戊二醛溶液，持续搅拌2 h后得到浅黄色的鲁米诺-铁蛋白溶液，继续加入100 300 μL、浓度为10 mg/mL的降钙素原抗体溶液，在4 °C下振荡孵化6 18 h，~ ~
离心后分散到1 mL pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液中得到抗体标记的鲁米诺-铁蛋白溶液，置于
4 °C下储存备用。
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（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以上述方法制备的传感器为工作电极，在10 mL含45 75 mmol/L过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发~
光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.6 fg/mL，线性范围5 fg/mL-50 ng/mL；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算即可得到该试剂样品中的降钙素原浓度。
（2）本发明弥补了现有电化学检测技术操作复杂、灵敏度低、重现差的问题，将该技术应用于降钙素原的样品检测，检出限为1.6 fg/mL，线性范围5 fg/mL-50 ng/mL，具有响应速度快、灵敏度高、重现好、制备简单、成本低、绿色环保的优点。
具体实施方式
（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 mg/mL的CeO2@SnS2材料溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为2 mg/mL的抗体标记的鲁米诺-铁蛋白（Ft-luminol）溶液，用pH
7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（4）滴加3 μL、质量分数为1 %的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加6 μL 降钙素原的标准溶液或未知浓度的降钙素原溶液，37 °C下孵化0.5 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为3 mg/mL的CeO2@SnS2材料溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为3 mg/mL的抗体标记的鲁米诺-铁蛋白（Ft-luminol）溶液，用pH
7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（4）滴加3 μL、质量分数为2 %的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加6 μL 降钙素原的标准溶液或未知浓度的降钙素原溶液，37 °C下孵化1 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为4 mg/mL的CeO2@SnS2材料溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为4 mg/mL的抗体标记的鲁米诺-铁蛋白（Ft-luminol）溶液，用pH
7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（4）滴加3 μL、质量分数为3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加6 μL 降钙素原的标准溶液或未知浓度的降钙素原溶液，37 °C下孵化 2 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
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（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以上述方法制备的传感器为工作电极，在10 mL含45 mmol/L 过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.6 fg/mL，线性范围5 fg/mL-50 ng/mL；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算即可得到该试剂样品中的降钙素原浓度。
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（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以上述方法制备的传感器为工作电极，在10 mL含55 mmol/L 过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.6 fg/mL，线性范围5 fg/mL-50 ng/mL；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算即可得到该试剂样品中的降钙素原浓度。
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（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以上述方法制备的传感器为工作电极，在10 mL含75 mmol/L 过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.6 fg/mL，线性范围5 fg/mL-50 ng/mL；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算即可得到该试剂样品中的降钙素原浓度。
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