| 序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开（公告）号 | 公开（公告）日 | 发明人 |
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| 81 | 一种提高球孢白僵菌抗氧化水平和毒力的方法 | CN201711433560.6 | 2017-12-26 | CN108018217B | 2020-08-21 | 张永军; 罗廷英; 黄帅帅; 何张江; 罗志兵 |
| 本发明提供了一种提高球孢白僵菌抗氧化水平和毒力的方法，和上述方法得到的突变菌株。以载体同源重组方式置换掉正常球孢白僵菌的C6TF1基因，提高了球孢白僵菌抗氧化水平、细胞壁完整性和毒力。 | ||||||
| 82 | 一种比较分析不同牛支原体菌株毒力的方法 | CN201910833459.2 | 2019-09-04 | CN110804641A | 2020-02-18 | 郝华芳; 陈胜利; 储岳峰; 颜新敏; 蔡莉娟; 刘永生 |
| 本发明公开一种不同牛支原体菌株毒力比较分析方法。本发明的比较分析牛支原体菌株毒力的方法是将等活菌菌落浓度的经复苏传代的待比较分析的各待测牛支原体株、牛支原体标准株接种于鸡胚上，再将接种后的鸡胚置于恒温箱培养，定时检测鸡胚状态及死亡情况，统计接种各个菌株的卵黄囊接种鸡胚致死率、尿囊腔接种鸡胚致死率，结合死亡鸡胚尿囊液牛支原体分离鉴定情况，以此进行比较判定。本发明的方法具有操作简单、成本低、实验动物便宜且易得、无需复杂动物饲养管理条件、耗时短、重复性好等优点，极大减少动物试验工作量，避免了使用大动物牛所存在试验操作复杂、试验周期长、工作量大、成本昂贵、实验动物个体差异较大且要求高、重复性不理想等不足。 | ||||||
| 83 | 一种检测非粘液型肺炎克雷伯菌毒力的方法 | CN201911063408.2 | 2019-11-04 | CN110669853A | 2020-01-10 | 黄维; 邹全明; 张敏; 章金勇; 胡春霞; 惠真; 邓秋洋; 钟裕欣; 柳施一; 崔瑞勤 |
| 本发明公开了一种检测非粘液型肺炎克雷伯菌毒力的方法，属于生物检测技术领域。以高毒力非粘液型肺炎克雷伯菌基因组中ampR基因序列为标志物，并以该特异性序列设计引物，最后基于聚合酶链反应，完成对非粘液型肺炎克雷伯菌毒力的定性检测，以弥补现有技术中肺炎克雷伯菌定性检测方法只能通过是否为粘液型来判断肺炎克雷伯菌的毒力，而无法区分非粘液型菌株中的毒力差异，从而保证了检测非粘液型肺炎克雷伯菌毒力的标志物、检测方法的应用价值。 | ||||||
| 84 | 自闭症肠道菌群毒力因子基因及其应用 | CN201811114576.5 | 2018-09-25 | CN109266733A | 2019-01-25 | 王明帮; 王艳; 周家秀; 何福生 |
| 本发明公开了一组自闭症生物标志物及其应用。其中，本发明的一组自闭症生物标志物为如下所示的一组肠道菌群毒力因子基因的至少之一：acpXL、cpsH、escL、cpsJ、IlsP、wzy、lgtC、legK2、Cj1440c、wlaN、wbcG、cpsM、lpg2885、cpsO、ospC4、legLC8、flgF、pvdM、afaC-VII、wcbE、tcpI。基于待测个体和健康对照的一组自闭症生物标志物中各肠道菌群毒力因子基因的丰度检测结果，即可有效确定待测个体是否易患自闭症。 | ||||||
| 85 | 内吸性杀虫剂对绿盲蝽的毒力测定方法 | CN201510231533.5 | 2015-05-08 | CN104823924B | 2017-11-03 | 李国平; 金银利; 田彩红; 黄建荣; 封洪强; 邱峰; 陈培育 |
| 本发明涉及一种有效评价内吸性杀虫剂对绿盲蝽的毒力测定方法，包括以下步骤:人工饲料制备、试验对象准备、饲料混合、混药饲料包的制作、饲喂、试验统计等，本发明毒力测定方法克服了现有技术中的缺陷，采用稳定、一致性好的人工饲料混药饲喂，并模拟绿盲蝽的自然取食状态，最终达到客观正确的评价内吸性杀虫剂的杀灭效果的目的，有利于筛选出对绿盲蝽杀灭高效的杀虫剂，为指导大田绿盲蝽的防治提供技术支持。 | ||||||
| 86 | 一种罗非鱼源无乳链球菌毒力弱化方法 | CN201410087094.0 | 2014-04-18 | CN103881959B | 2016-02-03 | 李莉萍; 王瑞; 陈明; 甘西; 梁万文; 黄婷; 朱佳杰; 雷爱莹; 李健; 陈福艳 |
| 本发明公开了一种罗非鱼源无乳链球菌毒力弱化方法，将分离保存的野生菌株在血平板划线培养，挑单菌落于TSB培养基25℃振荡培养；步骤1：培养6h后接种于新TSB培养基25℃振荡培养，6h传一代传至20代；步骤2：取第20代培养物接种于新LTSB培养基35℃振荡培养，6h传一代传至40代；取第41代重复操作步骤1至60代；取第61代重复操作步骤2至80代；按照上述方法持续传代，在传代过程中对菌株的毒力进行测定，传代直至确定菌株毒力弱化。本发明具有简单快速的特点，应用该方法对罗非鱼源无乳链球菌野生菌株毒力弱化获得的弱毒株毒力弱、不易返毒，该方法为罗非鱼链球菌病弱毒疫苗的开发具有重要意义和应用价值。 | ||||||
| 87 | 一种抑制金黄色葡萄球菌毒力因子的方法 | CN201310748317.9 | 2013-12-31 | CN104031876A | 2014-09-10 | 陈一强; 黄莹莹; 陈艳; 孔晋亮; 黄宏 |
| 本发明公开一种抑制金黄色葡萄球菌毒力因子的方法，包括药物干预作用、试剂配制、测量总蛋白浓度、SDS-PAGE电泳和测定溶血毒素的表达，将不同浓度的黄芩苷和黄芩素加入到含有金黄色葡萄球菌的培养基中，分别测定其总蛋白浓度，SDS-PAGE电泳进行分析，测定其溶血毒素的表达。 | ||||||
| 88 | 幽门螺旋杆菌毒力蛋白质组的制备方法 | CN201210113718.2 | 2012-04-18 | CN102643850B | 2013-08-21 | 金守光; 杨洪江 |
| 本发明涉及一种幽门螺旋杆菌毒力蛋白质组的制备方法，步骤如下：(1)分别扩增6种毒力蛋白基因，针对6种毒力蛋白设计引物，引物序列见序列1至序列12，引物分别插入限制性内切酶位点，这6种重组毒力蛋白的N端分别携带6个His标记；(2)分别克隆6种毒力蛋白编码基因；(3)分别亚克隆6种毒力蛋白编码基因到表达载体上；(4)大肠杆菌宿主细胞内分别表达6种毒力蛋白；(5)纯化。本6种蛋白编码基因或氨基酸序列具有高度保守性和特异性，并且与患者的症状相关，因此制备的毒力蛋白可以用于基因工程疫苗和临床诊断试剂盒的候选抗原。 | ||||||
| 89 | 一种驱除炭疽杆菌毒力大质粒pXO1的方法 | CN201110087128.2 | 2011-04-07 | CN102732544A | 2012-10-17 | 王恒樑; 刘先凯; 王东澍; 王华贵; 冯尔玲 |
| 本发明公开了一种驱除炭疽杆菌毒力大质粒pXO1的方法。本发明提供了的重组载体，为将DNA分子插入穿梭质粒pKSV7的SmaI位点得到的载体；所述DNA分子的核苷酸序列为序列表中的序列1。本发明的实验证明，本发明根据质粒不相容原理构建一个不相容质粒，特异地从炭疽杆菌A16R(pXO1+pXO2-)中驱除了毒力大质粒pXO1，然后在37℃培养，驱除导入的外源质粒，从而获得了一株驱除pXO1的菌株A16RO。该方法具有简单、快速、特异性好、安全性高的特点。该方法对于构建炭疽杆菌的质粒缺失株，从而研究大质粒pXO1与染色体的相互作用具有极其重要的意义，对于构建新的疫苗株提供了新的实验手段，为炭疽杆菌的防治提供了新的思路。 | ||||||
| 90 | 一种肠球菌属及毒力基因多重PCR检测引物 | CN201010239995.9 | 2010-07-29 | CN101880727B | 2012-03-21 | 王亚宾; 胡慧; 孟振北; 段志刚; 陈丽颖; 胡清林; 耿鑫 |
| 本发明的技术方案公开了一种肠球菌属及毒力基因多重PCR检测引物，它包括肠球菌属引物的序列、聚集物质引物的序列和溶血素引物的序。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌属及其主要毒力基因的多重PCR方法。本方法特异性高；敏感性实验表明该方法最低能检测到100pg DNA。为肠球菌感染的分子流行病学调查，研究肠球菌致病机制机制、早期预防提供了一种新的快速检测方法，同时构建的标准质粒也为未来建立实时荧光定量PCR方法提供了基础。 | ||||||
| 91 | 一种测定杀菌剂对黄瓜霜霉病菌毒力的方法 | CN200510070977.1 | 2005-05-19 | CN100394182C | 2008-06-11 | 刘西莉; 朱书生; 李健强; 顾宝根; 袁善奎; 刘亮; 王岩; 罗爽; 赵志华 |
| 本发明公开了一种测定杀菌剂对黄瓜霜霉病菌毒力的方法。该方法是在无菌条件下，用经消毒的黄瓜植株第3-5叶位上的健康离体叶片制成叶碟，将其分成若干组，分别于稀释为若干浓度的杀菌剂中浸泡1-2h，所述杀菌剂中添加有质量百分浓度相同的0.003-0.01%的吐温20和0.1-0.3%的甲醇；再将每个叶碟背面接种浓度为1.0×104-1.0×105个孢子囊/mL的黄瓜霜霉病菌的孢子囊悬浮液，然后将其在17-20℃黑暗条件下保湿培养20-28h，再于17-20℃、湿度RH大于80%、10-14h光暗交替条件下保湿培养5-7d，测量叶碟上的发病面积，计算防治效果和EC50值。本发明具有潜在的社会经济意义。 | ||||||
| 92 | 用不含探针的荧光PCR方法检测病毒毒力 | CN200410003003.7 | 2004-01-04 | CN1584045A | 2005-02-23 | 陈继明; 王志亮; 弋英 |
| 本发明属于生物与医学领域，可以用于动植物检疫等方面。本发明利用不含探针的荧光PCR方法检测病毒毒力；本发明在利用不含探针的荧光PCR方法检测病毒毒力时，采用通过比较两套或两套以上引物的扩增效率的方法来区分强毒毒株和弱毒毒株；本发明在利用不含探针的荧光PCR方法检测病毒毒力时，采用Tm值大于或等于63℃的引物；本发明利用不含探针的荧光PCR检测新城疫病毒的毒力；本发明在利用不含探针的荧光PCR检测新城疫病毒的毒力时，设计了三条新的引物；本发明在利用不含探针的荧光PCR检测新城疫病毒的毒力时，按照不完全配对的方式设计了针对新城疫弱毒核酸序列特征的引物。 | ||||||
| 93 | 利用毒力虫霉生产杀蚜虫生物制剂的方法 | CN95107132.7 | 1995-06-23 | CN1056960C | 2000-10-04 | 程素琴; 龙厚茹 |
| 利用毒力虫霉生产灭蚜菌制剂。包括摇瓶发酵、大规模发酵生产和后处理步骤。摇瓶发酵使用萨氏葡萄糖培养基，大规模生产使用含花生、黄豆和玉米粉以及葡萄糖、蛋白胨和酵母粉的培养基。发酵过程最好通入空气，发酵的较佳温度为27-30℃。大规模生产时以镜检发现菌丝细胞壁有30-50%破裂时停止发酵。在后处理中加入高渗助剂、悬浮剂和防腐剂。该灭蚜菌效果显著而且对人和其他动物的毒性很低，不破坏生态平衡。生产工艺简单。 | ||||||
| 94 | 利用毒力虫霉生产杀蚜虫生物制剂的方法 | CN95107132.7 | 1995-06-23 | CN1127592A | 1996-07-31 | 程素琴; 龙厚茹 |
| 利用毒力虫霉生产灭蚜菌制剂，包括摇瓶发酵、大规模发酵生产和后处理步骤。摇瓶发酵使用萨氏葡萄糖培养基，大规模生产使用含花生、黄豆和玉米粉以及葡萄糖、蛋白胨和酵母粉的培养基。发酵过程最好通入空气，发酵的较佳温度为27-30℃。大规模生产时以镜检发现菌丝细胞壁有30-50％破裂时停止发酵。在后处理中加入高渗助剂、悬浮剂和防腐剂。该灭蚜菌效果显著而且对人和其他动物的毒性很低，不破坏生态平衡。生产工艺简单。 | ||||||
| 95 | 一种用于检测蜜蜂病原体毒力的装置及利用该装置检测病原体毒力的方法与应用 | CN202210644847.8 | 2022-06-09 | CN114907961A | 2022-08-16 | 黄强; 郑加兰 |
| 本发明涉及一种用于检测蜜蜂病原体毒力的装置及利用该装置检测病原体毒力的方法与应用，属于蜜蜂养殖技术领域。本发明提供的一种用于检测蜜蜂病原体毒力的装置，包括顶板1、侧板2、隔板3、背板4、前板5、底板6、饲喂孔7以及腔体8。本发明的装置可以评估接触方式对蜜蜂病毒毒力以及传播速度的影响。为后期蜜蜂病毒的检测提供依据。 | ||||||
| 96 | 与布氏杆菌毒力相关的基因及其在布氏杆菌毒力评价及制备弱毒布氏杆菌中的应用 | CN202110155985.5 | 2021-02-04 | CN112941088A | 2021-06-11 | 蔡文通; 李干武; 步志高 |
| 本发明公开了一种与布氏杆菌毒力相关的基因及其在布氏杆菌毒力评价及制备弱毒布氏杆菌中的应用。本发明首先利用蛋白结构域及3D结构预测鉴定到一种与布氏杆菌毒力相关的基因——abcS基因。利用RecA同源重组的方法，以卡那霉素抗性基因作为筛选标记替换abcS基因，构建了布氏杆菌abcS基因缺失株M28ΔabcS。荧光定量PCR试验表明，M28ΔabcS突变株中毒力因子四型分泌系统的表达严重下降。利用Balb/c小鼠持留感染模型评价了布氏杆菌abcS基因对布氏杆菌M28毒力的影响。结果显示：abcS基因缺失显著降低感染时脾脏的肿胀，同时严重影响细菌在小鼠脾脏内复制存活的能力，证实该基因是布氏杆菌M28的毒力相关基因。本发明的提出为布氏杆菌疫苗和药品的研发，提供了新的技术手段。 | ||||||
| 97 | 与布鲁氏菌毒力相关的蛋白、基因及其在评价布鲁氏菌毒力、制备减毒布鲁氏菌中的应用 | CN202311529391.1 | 2023-11-16 | CN117700499A | 2024-03-15 | 李志强; 王书利; 韩进诚; 杨广礼; 施传信; 席丽; 张进良; 崔艳艳; 郝俊芳 |
| 本发明属于生物技术领域，涉及布鲁氏菌，特别是指与布鲁氏菌毒力相关的蛋白、基因及其在评价布鲁氏菌毒力、制备减毒布鲁氏菌中的应用。本发明利用同源重组和基因敲除的方法，删除了布鲁氏菌2308分泌蛋白BspL，构建了布鲁氏菌BspL基因缺失株2308ΔBspL。BspL基因缺失后并不会对2308的生长产生影响，但能显著下调亲本株2308在小鼠巨噬细胞系RAW264.7和小鼠脾脏内的生存能力。2308ΔBspL中将BspL基因回补后，其毒力能够恢复到亲本株水平，证实BspL基因是布鲁氏菌2308的毒力相关基因。本发明的提出预示该毒力基因可用于布鲁氏菌减毒疫苗的研发，具有潜在的应用价值。 | ||||||
| 98 | 与布氏杆菌毒力相关的基因及其在布氏杆菌毒力评价及制备弱毒布氏杆菌中的应用 | CN202110155985.5 | 2021-02-04 | CN112941088B | 2023-06-16 | 蔡文通; 李干武; 步志高 |
| 本发明公开了一种与布氏杆菌毒力相关的基因及其在布氏杆菌毒力评价及制备弱毒布氏杆菌中的应用。本发明首先利用蛋白结构域及3D结构预测鉴定到一种与布氏杆菌毒力相关的基因——abcS基因。利用RecA同源重组的方法，以卡那霉素抗性基因作为筛选标记替换abcS基因，构建了布氏杆菌abcS基因缺失株M28ΔabcS。荧光定量PCR试验表明，M28ΔabcS突变株中毒力因子四型分泌系统的表达严重下降。利用Balb/c小鼠持留感染模型评价了布氏杆菌abcS基因对布氏杆菌M28毒力的影响。结果显示：abcS基因缺失显著降低感染时脾脏的肿胀，同时严重影响细菌在小鼠脾脏内复制存活的能力，证实该基因是布氏杆菌M28的毒力相关基因。本发明的提出为布氏杆菌疫苗和药品的研发，提供了新的技术手段。 | ||||||
| 99 | 与布鲁氏菌毒力相关的基因及其在布鲁氏菌毒力评价以及制备弱毒布鲁氏菌中的应用 | CN201811506327.0 | 2018-12-10 | CN109652429B | 2022-06-03 | 步志高; 胡森; 许达 |
| 本发明公开了一种与布鲁氏菌毒力相关的基因及其在布鲁氏菌毒力评价以及制备弱毒布鲁氏菌中的应用。本发明利用同源重组的方法，以卡那霉素基因替换布鲁氏菌M28核糖体基因L31，构建了布鲁氏菌L31基因缺失株M28ΔL31。利用巨噬细胞RAW264.7和Babl/c小鼠模型评价了布鲁氏菌L31基因对布鲁氏菌M28毒力的影响。结果显示：L31基因缺失后并不会对M28的生长产生影响，但能显著下调强毒株M28在鼠巨噬细胞系RAW264.7和小鼠脾脏内复制生存的能力，M28ΔL31中将L31基因回补后其毒力能够恢复到野生株水平，证实该基因是布鲁氏菌M28的毒力相关基因。本发明的提出预示该毒力基因可能用于布鲁氏菌新疫苗的研发，具有潜在的应用价值。 | ||||||
| 100 | 与布鲁氏菌毒力相关的基因及其在布鲁氏菌毒力评价以及制备弱毒布鲁氏菌中的应用 | CN201811506327.0 | 2018-12-10 | CN109652429A | 2019-04-19 | 步志高; 胡森; 许达 |
| 本发明公开了一种与布鲁氏菌毒力相关的基因及其在布鲁氏菌毒力评价以及制备弱毒布鲁氏菌中的应用。本发明利用同源重组的方法，以卡那霉素基因替换布鲁氏菌M28核糖体基因L31，构建了布鲁氏菌L31基因缺失株M28ΔL31。利用巨噬细胞RAW264.7和Babl/c小鼠模型评价了布鲁氏菌L31基因对布鲁氏菌M28毒力的影响。结果显示：L31基因缺失后并不会对M28的生长产生影响，但能显著下调强毒株M28在鼠巨噬细胞系RAW264.7和小鼠脾脏内复制生存的能力，M28ΔL31中将L31基因回补后其毒力能够恢复到野生株水平，证实该基因是布鲁氏菌M28的毒力相关基因。本发明的提出预示该毒力基因可能用于布鲁氏菌新疫苗的研发，具有潜在的应用价值。 | ||||||
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