本发明涉及新的吲哚衍生物，用于下调雌激素受体的表达，用于治疗 肿瘤，特别是雌激素依赖性肿瘤如有关乳腺、卵巢、子宫和宫颈组织的肿 瘤，和与雌激素激活相关的其他疾病。

本发明提供下式的新吲哚衍生物或其药学上可接受的盐： 其中 n为1-12的整数； p为0或1； X为1-3个独立地选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基 和-OC(O)R6的取代基；R1为氢、C1-C4烷基、或选自下组的基 团： 其中q为1、2、3或4； Y每次为1-3个独立地选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4 烷氧基和-OC(O)R6的取代基； G为-NH-或-(CH2)r-，其中r为1、2或3； R7为C1-C6烷基； R2为氢、C1-C4烷基、或下式基团； R3为氢或C1-C4烷基； R4为氢或C1-C4烷基； R5为氢、C1-C8烷基、或苯基；或 R4、R5及相邻氮一起形成环-CH2-CH2-G1-CH2-CH2-，其中 G1为一键、-NCH3-、-CH2-或-O-；及 R6每次独立地选自C1-C4烷基、苯基和具有1-3个取代基的取代苯基， 其中取代基独立地选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、或C1-C4烷氧基；

条件是当n为1时，R1、R2、R4和R5中至少一个不是氢。

本发明包括治疗患有肿瘤疾病的患者的肿瘤或控制肿瘤生长的方法， 包括施用上式化合物。

本发明的另一实施方案是预防性治疗有患肿瘤疾病危险的患者的方 法，包括施用上式化合物。

乳腺癌是妇女癌症的主因，也是妇女的第二大杀手。美国妇女中乳腺 癌的年龄相关发病率，在1986到1987年间为每10万人中108.9人。这比 结肠癌的年龄相关发病率大两倍以上，后者是妇女癌症的第二种主要形 式。见Satariano，W.A.在《癌症和老化中有关分子、细胞和免疫学因子》 (The Underlying Molecular，Cellular，and Immunological Factors in Cancer and Aging，Young，S.S.和Warner，H.R.，编)一书中题为“老化、 共发病和乳腺癌存活率：流行病学综述”(Aging，Comorbidity，and Breast Cancer Survival：An Epidemiologic View，Plenum Press，New York，PP. 1-11，1993)的文章。

随着年龄增长妇女患乳腺癌的几率急剧增大(Pike等，Banbury Report 8：Hormones and Breast Cancer(Pike，M.C.，Siiteri，P.K.和Welsch， C.M.编)中“The epidemiology of breast cancer as it relates to menarche pregnancy and menopause”一文，Cold Spring Harbor Laboratory，pp.3- 21，1981)。30岁时妇女患乳腺癌的几率为约2500分之一。在60岁时妇女 患乳腺癌的几率为24分之一。虽然在乳腺癌患者的治疗选择方面已有显著 的进展，但乳患癌的死亡率仍很高。

妇女绝经前后乳腺癌发病率的差别提示：接触雌激素对乳腺癌的发生 和恶变是关键的。通过比较男女中乳腺癌的发病率映证了这一结论：妇女 患乳腺癌的几率是男人的约100倍。卵巢切除术和/或抗雌激素和抗促孕药 已成功地用于治疗乳腺癌(Iino.Y.等在Regulatory Mechanisms in breast Cancer，Lippman，M.E.和Dickson，R.B.编，Klower Academic Publishers， Norwell，Massachusetts，pp.221-238，1990中Antiestrogen therapy for breast cancer：Current Strategies and potential causes for therapeutic failure一文)。

人们已知某些乳腺癌的甾类依赖性近100年，已采用内分泌治疗和手 术(卵巢切除术/肾上腺切除术)控制这一疾病。这种甾体依赖性已被乳腺 肿瘤中雌激素受体的变化水平所阐明。在那些具有可检测雌激素受体的肿 瘤中，经胞液测得每毫克蛋白含10fmol以上雌激素受体的，已证明60％ 以上对内分泌治疗有响应，而那些每毫克蛋白含10fmol以下受体的，只有 5％以下的有响应。

认为雌激素通过存在于胞液中的雌激素受体(ER)调节肿瘤细胞的 生长。当ER与诸如雌二醇和雌激素的配体结合时被“激活”。一旦结合， 雌激素-雌激素受体复合物在胞质中迁移并到达细胞核，认为该复合物在 其中启动其他蛋白的转录。雌激素与雌激素受体的结合暴露出一些基团， 后者使该复合物与酸性或碱性大分子形成紧密复合物，如与DNA、酸性多 糖、组蛋白和其他碱性蛋白。结合以后发生一系事件，包括从热激蛋白解 离、二聚化和与DNA的雌激素反应元件(ERE)结合。与DNA结合后， 认为活化的雌激素-ER复合物与转录因子相作用，并使启动子处的启动前 复合物稳定，以使RNA聚合酶启动基因转录，造成的mRNA的转录。随 后从正常细胞向肿瘤细胞的转化步骤仍有待阐明；但认为阻止乳腺细胞的 雌激素激活可阻止随后发展为由于雌激素活化转录造成的失控的细胞生 长。

基本上所有相关甾类激素的许多受体已被克隆和测序。结果发现甾体 激素受体属于一个核受体大家族，包括视黄酸受体、甲状腺激素受体、和 几种其生理配体迄今未知的基因，称为“孤”受体。

核受体家族的所有成员都有一短的DNA结合区，由含许多保守半脱氨 酸的70个氨基酸残基组成。8个这样的保守半脱氨酸可组成2个所谓的锌 “指”，一种首次在爪蟾FT IIIA转录因子中提出的结构。每个锌“指” 含有4个半脱氨酸残基，呈四面体与一锌离子配价。

每个锌“指”的序列保守性(分别由不同的外显子编码)，核受体基 因被分为两个亚族。糖皮质激素受体(GR)是较小亚族的原型，该亚族 包括黄体酮受体(PR)、雄激素受体和盐皮质素受体。较大亚族的原型是 雌激素受体(ER)，该类包括维生素D3受体、各种甲状腺激素受体、视 黄酸受体和许多孤受体。

已鉴定出ER具有两个激活结构域，称为TAF1(位于受体的氨基末 端)和TAF2(位于羧基末端第60氨基酸)。TAF1激活是雌激素依赖性 的；一旦输送至DNA就可激活转录。对人类ER突变体的研究已证明： TAF1和TAF2的作用取决于启动子结构；某些启动子转录活性要求TAF1 和TAF2两者的激活。对另一些启动子，TAF1和TAF2活化子独立地起 作用。

已对能用于治疗乳腺肿瘤的雌激素激动剂和拮抗剂进行了大量研究。 抗雌激素的他莫昔芬广泛用于激素依赖性乳腺肿瘤的内分泌治疗。尽管恶 变组织中存在ER，约有40％的病人对他莫昔芬治疗没有反应。Maass， H.等，Cancer，46：2783(1980)。失败的一个可能原因是由于他莫 昔芬的弱雌激素活性，或由于他莫昔芬的不完全拮抗性。他莫昔芬的拮抗 活性被认为是来自其固有的不能活化雌激素受体的TAF2功能的特性。 Tzukerman，M.T.等，Mol.Endocrin.，8(1)：21-30(1994)。但他莫昔芬治疗 具有毒理学问题，包括肿瘤突发、阴道角质化和高钙血症，这使得在某些 情形下长期他莫昔芬治疗是不适宜的。另外，尽管存在雌激素受体，某些 肿瘤耐受他莫昔芬。因此，需要更好的治疗雌激素依赖性肿瘤的方法。

为了开发“纯”抗雌激素药，研究者研究了雌激素样化合物。最早的 化合物之一是ICI164384(11-(3-17β-二羟基雌甾-1，3，5(10) -三烯-7α-基)-N-正丁基-N-甲基十一烷酰胺)。已证明ICI 164384通过干扰受体二聚化抑制鼠雌激素受体的结合。Fawell，S.E.等， Proe.Nat’l.Acad.Sci.USA，87：6883-6887(1990)。Von Angerer 和其同事已开发出在吲哚氮上有氨烷基链的2-苯基吲哚衍生物。Von Angerer.E.等，J.Med.Chem.1990，33，2635-2640。这些1-(氨 基烷基)-2-苯基吲哚是雌激素拮抗剂，被认为可避免他莫昔芬的雌激 素活性问题。

男人和女人、绝经前和后的乳腺癌发病率统计数据表明：乳腺接触卵 巢雌激素和黄体酮是乳腺癌发生和恶变的关键。其他生长调节机制也可能 在绝经过程中卵巢功能的丧失中起作用，也可能在乳腺癌的发生中起作 用。另外，还认为遗传因素、遗传的家族常染色体显性基因影响乳腺癌的 发病率。

ER广泛分布在与女性生殖有关的器官组织体中，例如阴道、宫颈、宫 体、输卵管、卵巢和乳腺。但ER的存在不限于女性生殖器官的细胞中； ER还见于全身的细胞中，包括子宫[(Quarmby，V.E.等，Endocrin.， 114：694-702(1984)，骨[Yamamoto，T.T.等，Proc.Natl.Acad.Sci. USA，48：2172-2176(1990)；Migliaccio.S.等，Endocrin.130：1756- 1758(1992)；Eriksen E.F.等，Science，241：84-86(1988)]，肾[Davidoff，M. 等，Histochem.，9：39-48(1980)]和脑[FoX，T.O.，Nature， 258：441-443(1975)]。迄今为止，对这些ER在正常和病态下的作用的理解 仍不确切。既然已知雌激素的超营养(pleotrophic)效果是作用在细胞上， 那么从逻辑上预期：ER激活造成的基因转录对ER表达细胞的失控细胞生 长(肿瘤)和/或细胞功能障碍起一份作用。

高雌激素活性可在几种看似不相关的疾病的症状中起作用。自身免疫 疾病似由于自身耐受之正常机制的失灵。一些自身免疫疾病涉及对解剖上 的远距位点表达的自身分子的免疫应答；而有些是由于对普遍存在的核抗 原和胞浆抗原的免疫应答。人类自身免疫疾病已按几种方式分类；许多与 编码主要组织相容性复合物(MHC)的基因相关，I类和II类。对自身 免疫病的易感性还与环境因素相关，如先期感染和内分泌因素。许多自身 免疫疾病在青春期或其后不久达到一个发病率高峰，在四十几和五十几岁 这种内分泌系统改变的年龄出现第二个发病率高峰。自身免疫疾病一般在 女人中比在男人中严重，常在怀孕后突发，并且患自身免疫疾病的约三分 之二是妇女。因此，自身免疫疾病的病因学中涉及雌激素活性，如多发性 硬化、类风湿性关节炎、胰岛素依赖性糖尿病、Graves病、重症肌天力和 全身性红斑狼疮。多发性硬化、类风温性关节炎、全身性红斑狼疮和重症 肌无力常出现恶化和缓解阶段。恶化阶段与雌性激素、压力和感染相关。 对这些观察结果的一种解释是雌激素受体被雌激素激活造成编码γ-干扰 素的相邻基因的基因转录，γ-干扰素加重自身免疫过程。因此，阻止雌激 素诱发的转录可望缓解或甚至防止这种疾病的症状。

本发明提供下式的新吲哚衍生物或其药学上可接受的盐： 其中 n为1-12的整数； p为0或1； X为1-3个独立地选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基 和-OC(O)R6的取代基；R1为氢、C1-C4烷基、或选自下组的基 团： 其中 q为1、2、3或4； Y每次为1-3个独立地选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4 烷氧基和-OC(O)R6的取代基； G为-NH-或-(CH2)r-，其中r为1、2或3； R7为C1-C6烷基； R2为氢、C1-C4烷基、或下式基团； R3为氢或C1-C4烷基； R4为氢或C1-C4烷基； R5为氢、C1-C8烷基、或苯基；或 R4、R5及相邻氮一起形成环-CH2-CH2-G1-CH2-CH2-，其中 G1为一键、-NCH3-、-CH2-或-O-；及 R6每次独立地选自C1-C4烷基、苯基和具有1-3个取代基的取代苯基， 其中取代基独立地选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、或C1-C4烷氧基；

条件是当n为1时，R1、R2、R3、R4和R5中至少一个不是氢。

本发明还涉及含有新吲哚衍生物的药物组合物。还提供下调ER的表 达和阻止雌激素依赖性转录的方法。本发明还涉及治疗肿瘤，特别是与乳 腺、子宫和宫颈组织相关的雌激素依赖性肿瘤，和包括自身免疫疾病的其 他雌激素依赖性疾病的方法。

本文使用：

a)术语“C1-C4烷基”指1-4个碳原子的饱和直链或支链烃基，包 括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基；

b)术语“C1-C8烷基”指1-8个碳原子的饱和直链或支链烃基，包 括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、 己基、2，3-二甲基-2-丁基、庚基、2，2-二甲基-3-戊基、2 -甲基-2-己基、辛基、4-甲基-3-庚基等；

c)术语“卤素”、“卤”、“卤化”或“Hal”指氟原子、氯原子、溴 原子或碘原子；

d)术语“C1-C4烷氧基”指含1-4个碳原子的直链或支链烷氧基， 如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧 基等； e)“-C(O)-”指下式羰基：

f)术语“苯基”指

g)术语“取代苯基”指

其中Y是1-3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4 烷氧基和-OC(O)R6的取代基，其中R6是C1-C4烷基、苯基或有 1-3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的取代 基的取代苯基；

h)术语“苄基”指：

i)术语“取代苄基”指：

其中Y是1-3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4 烷氧基和-OC(O)R6的取代基，其中R6是C1-C4烷基、苯基或有1 -3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的取代基 的取代苯基；

j)术语“苯甲酰”指：

k)术语“取代的苯甲酰”指：

其中Y是1-3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4 烷氧基和-OC(O)R6的取代基，其中R6是C1-C4烷基、苯基或有1 -3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的取代基 的取代苯基；

l)术语“Pg”指如T.Greene在《有机合成中的保护基团》(Protecting Groups in Organic Synthesis)中描述的保护基团，该文献是本领域技术人 员熟悉知和认可的；及

m)术语“药学上可接受的盐”指上式化合物或其任何中间体的碱加合 盐，包括任何无毒的有机或无机碱加合盐。能形成合成盐的碱例如包括碱 金属或碱土金属氢氧化物，如钠、钾、钙、镁、或钡的氢氧化物；氨，和 脂环的或芳香的有机胺，如甲基胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、 异丙基二乙基胺、吡啶和甲基吡啶。

n)术语“C1-C6烷基”指1-6个碳原子的饱和直链或支链烃基，包 括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基、 环戊基、环己基等；

o)下式基团

当G为-NH-时，指

其中Y是1-3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4 烷氧基和-OC(O)R6的取代基，其中R6是C1-C4烷基、苯基或有1 -3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和 -OC(O)R6的取代基的取代苯基，其中R6是C1-C4烷基、苯基或有1-3 个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的取代基的取 代苯基；及

当G为-(CH2)r-时，指

Y是1-3个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧 基和-OC(O)R6的取代基，其中R6是C1-C4烷基、苯基或有1-3 个独立选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和 -OC(O)R6的取代基的取代苯基，其中R6是C1-C4烷基、苯基或有1-3个独立 选自氢、卤素、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的取代基的取代苯基。

可以理解，当R4和R5与相邻氯一起形成环-CH2-CH2-G1-CH2-CH2-而G1为一键时，所成环为吡咯烷，当G1为-NCH3-时所成环 为4-甲基哌嗪，当G1为-CH2-时所成环为哌啶，及G1为-O-时所 成环为吗啉。

还应认识到，当每次Y取代基存在于R1或R2中时，R1或R2独立地 选择Y取代基。还有，当每次R6存在于R1或R2中时，R1或R2独立地选 择R6取代基。

包含在本发明中的化合物的实例有： 8-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨 基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-甲基-2-(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-苄基2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-甲基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -辛酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-辛酸丁基-酰胺； 12-[[5氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 十二烷酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰-N-丁 基氨基]-十二烷酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-氯-1-乙基2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己 酸甲基-丁基-酰胺； 1-[[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-乙 酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲基-1-[(4-甲基)苄基]-2-甲基-1-1H-吲哚-3- 基]-乙酰-N-甲基氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-苄基2甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] 辛酸丁基-辛基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -辛酸二甲基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨 基]-辛酸甲基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨 基]-辛酸二丁基-酰胺； 5-氯-1甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基) -辛基]-酰胺； 5-甲氧基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲 酰基)-辛基]-酰胺； 5-氯-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基) -辛基]-酰胺； 5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲 酰基)-辛基]-酰胺； 1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲 酰基)-辛基]-酰胺； 1-苯甲酰-2-[4-(甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基- 甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺； 5-氯-1-苄基-1H-吲哚3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基) -辛基]-酰胺； 5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲 酰基)-辛基]-酰胺； 8-[[5-羟基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-苯甲酰-2甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)-苯基]-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-甲基-2-[(4-羟基)-苯基]-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)-苯基]-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸丁基-酰胺； 5-羟基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰 基)-辛基]-酰胺； 5-羟基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰 基)-辛基]-酰胺； 8-[[5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲 基-丁基-酰胺； 2-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基] -酰胺； 2-[4-(甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲 酰基)-辛基]-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨 基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-苯甲酰氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[1-苄基-1H吲哚3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰 胺； 8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸二乙基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸二乙基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸二乙基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸吡咯烷-酰胺； 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸吡咯烷-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-(4-氯苯甲酰)2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸吡咯烷-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-(4-甲氧苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-(4-甲氧苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-(4-甲氧苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-辛酸甲基丁基-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨 基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-苯甲酰2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -庚酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-苯甲酰2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨 基]-庚酸甲基-苯基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -庚酸甲基-苯基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-庚酸甲基-苯基-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨 基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-氟-1-苯甲酰-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-庚酸二乙 基-酰胺； 8-[[5-氟-1-苄基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基- 丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-1H-引哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸吗啉-酰胺； 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸吗啉-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸吗啉-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-苄基2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3 基]-乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基[ -乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-乙酰氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-苄基-2-(4氟苯基)-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-乙酰氧基-1苄基-2-[(4-乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-(羧酸4-甲氧基苯基酰胺)-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-(羧酸4羟基苯基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1-(羧酸4-乙酰氧基苯基酰胺)-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-(羧酸4-氯苯基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-(羧酸4氯苯基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1(羧酸4-氯苯基酰胺)-1H-吲哚-3-基] 乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-(羧酸丁基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-(羧酸丁基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1-(羧酸丁基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨 基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-甲氧基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 8-[[5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲 基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基 -丁基-酰胺； 7-[[5-乙酰氧基-1-(4-丁基苯甲酰)2-甲基-1H-吲哚-3 基]-乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺；

在方案A中给出了制备式(I)化合物的一般合成步骤。方案A中， 除非另有说明，所有取代基如前文所定义。方案A中所用的起始物、试剂、 技术和操作是本领域普通技术所熟悉知和认可的。

                                   方案A

方案A步骤a中，适当的式(1)吲哚化合物与适当的式(2)胺或 其盐进行酰胺化反应，生成保护的式(I)化合物或式(I)化合物。适当 的式(1)吲哚化合物中A进行酰胺化反应、而X、R1、R2和P与式(I) 终产物中的相同，或当脱保护后与式(I)终产物中的相同。适当的式(2) 化合物中R3、R4、R5和n是与式(I)终产物中的相同。

酰胺化反应可通过酸(A＝-OH)进行；或可将酸先转化为酰氯， A＝-Cl；或活化中间体；如酸酐；与取代磷酸如二烷基磷酸、二苯基磷酸、 卤代磷酸，脂肪羧酸如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、新戊酸、2- 乙基丁酸、三氯乙酸、三氟乙酸等，芳香羧酸如苯甲酸等的混合酸酐；或 活化酯，如酚酯、对硝基酚酯、2，4-二硝基酚酯、五氟酚酯、五氯酚酯、 N-羟基琥珀酰亚胺酯、N-羟基邻苯二甲酰亚胺酯、1-羟基-1H- 苯并三唑酯等；活化酰胺，如咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑酰胺；或在 偶联剂存在下形成的中间体，偶联剂如二环己基碳化二亚胺或1-(3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺。可制备酰氯和活化中间体，但在 加入适当的式(2)胺或其盐之前不必分离。或者，可制备并分离酰氯和 活化中间体，但在加入适当的式(2)胺或其盐之前不纯化。酰氯和活化 中间体的使用和形成是本领域熟知和认可的。

例如，适当的A＝-OH的式(1)吲哚化合物转化为A＝-Cl的 酰氯。A＝-OH的式(1)吲哚化合物与亚硫酰氯或草酰氯接触。用亚硫 酰氯或草酰氯作为溶剂进行反应，或反应可在适当的溶剂中进行，如甲苯、 苯、二氯甲烷、四氯化碳、或氯仿。反应可在适当的催化剂如二甲基甲酰 胺或吡啶存在下进行。反应温度为-40℃到溶剂的回流温度。反应一般需 要30分钟到24小时。可在形成后或分离后直接使用产物，或在用本领域 熟知的技术(如蒸发、萃取、层析和重结晶)分离和纯化后使用该产品。

A＝-Cl的式(1)吲哚化合物与式(2)的胺或式(2)胺的盐接 触。反应在适当的溶剂中进行，如甲苯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、二氯 甲烷、吡啶或氯仿。反应在稍过量(摩尔)的适宜碱存在下进行，如三乙 胺、碳酸钠、碳酸氢钾、吡啶、或二异丙基乙基胺，如果使用式(2)胺 的盐则使用多一个摩尔量的适当碱。反应温度为-70℃到溶剂的回流温 度。反应一般需要30分钟到24小时。产物在用本领域熟知的技术分离和 纯化后使用，例如经萃取、蒸发、层析和重结晶。

或者，A＝-OH的式(1)吲哚化合物与1.2-1.7当量适当碱如N -甲基吗啉在适当溶剂(如四氢呋喃)中接触。在加入1.2-1.7当量氯甲 酸异丁酯前，将反应混合物冷却至-50℃到0℃的温度，优选-25℃到 -20℃。搅拌反应30分钟到3小时，形成混合酸酐(活化中间体)。保 持温度在-50℃到0℃，加入适当的式(2)胺，如果使用式(2)胺的 盐，则多加等摩尔量的适当碱。加完胺之后，反应混合物可温热至室温。 反应需要2-48小时。产物可在按本领域熟知的技术分离和纯化后使用， 例如经萃取、蒸发、层析和重结晶。

或者。在稍过量(摩尔)的偶联剂如二环己基碳化二亚胺或1-(3 -二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺存在下，A＝-OH的式(1) 吲哚化合物与稍过量(摩尔)的适当的式(2)胺或其盐以及水合1-羟 基苯并三唑接触。反应在适当碱如二异丙基乙基胺存在下进行，如果使用 式(2)胺的盐则多使用等摩尔量的适当碱。反应在适当溶剂中进行，如 二氯甲烷或氯仿。可按本领域熟知的技术分离和纯化产物，如萃取、蒸发、 层析和重结晶。

方案A任选步骤b中，式(I)化合物或保护的式(I)化合物进行 修饰和/或脱保护反应，得到式(I)化合物。保护基团的使用和去除是本 领域中熟知的，具体讲，利用如T.Greene在《有机合成中的保护基团》中 描述的适当保护基团，选择、使用和去除羟基保护基和吲哚NH保护基， 以及依次去除羟基保护基和吲哚NH保护基都是本领域技术人员所熟知和 认可的。去除保护基或按规定的顺序去除保护基，得式(I)化合物。X 和/或Y为羟基的式(I)化合物可经本领域熟知的方法烷基化或酰化而修 饰，生成其中X和Y为C1-C4烷氧基或-OC(O)R6的烷基化和酰 化式(I)化合物。本领域技术人员可认识到，为获得目标式(I)化合物， 修饰和脱保护反应的数目和顺序可有变化。

式(1)吲哚化合物是本领域中熟知的，并可按多种方法制备，包括 Fischer吲哚合成；M.Julia和P.Manoury，Buli.Soc.Chim.Fr.1411 (1965)；B.S.Thyagarajan等，Tet.Lets.1999-2002(1974)；E.E.Fischer和 R.B.Carlin，JACS 70，3421(1948)；A.P.Kozikowski等，J.Med.Chem.36， 2908-2920(1993)；B.Robinson，Chem.Rev.69，227(1963)；Indoles Partl， W.A.Remers和R.K.Brown，chap.2pp.227-558(W.J.Houlihan 编)；Wiley-Interscience 1972；T-Y，Shen，1968年8月21日出版的英国专利 1,124,972；和1968年8月21日出版的英国专利1,124,973；D.L.Hughes， Org.Preps.and Proc.Int.25,609-632(1993)；P.R.Ashton等，Synlett 919- 922(1992)；D.Zhoa等，JOC 56，3001-3006(1991)；R.S.Eichon-Conn 等，JOC 55，2908-2913(1990)。另外，p＝0的式(1)吲哚化合物可通过 1H-吲哚在碱性条件下用适于转移羧基或保护的羧基的试剂羧基化而获 得，所述试剂例如为二氧化碳、氯甲酸甲酯、碳酸二乙酯或氯甲酸乙酯。 或者，p＝0且R1不是氢的式(1)吲哚化合物可从1-R1-吲哚经 Vilsmeier-Haack反应形成1-R1-吲哚-3-醛、然后氧化成相应的1 -R1-吲哚-3-羧酸而获得。

方案B中列出了通过Fischer吲哚合成制备式(1)吲哚化合物的一 般合成步骤。方案B中，除非另有说明，所有取代基均如前文所定义。方 案B中所用起始物、试剂、技术和操作是本领域普通技术人员熟知和认可 的。

                                            方案B

方案B步骤a中，适当的式(3)肼或其盐与适当的式(4)羰基化 合物接触，生成式(5)的腙。

适当的式(3)肼或其盐中X和R1同式(I)终产物中的，或在脱保 护和/或修饰后与式(I)终产物中X和R1相同。适当的式(3)肼或其盐 是本领域普通技术人员易得的，即将从相应苯胺制备的适当二唑翁盐还 原。本领域已知，其中R1为C1-C4烷基、苄基、取代苄基、苯甲酰或取 代的苯甲酰的适当式(3)肼或其盐，可通过其中R1为氢的适当保护的式 (3)肼烷基化、苄基化或苯甲酰化反应而制得。适当保护基团包括亚胺 和t-BOC保护基[P.R.Ashton等，Synlett919-922(1992)]。烷基 化、苄基化或苯甲酰化肼脱保护得到其中R1为C1-C4烷基、苄基、取代 苄基、苯甲酰或取代苯甲酰的适当式(3)肼。

适当的式(4)羰基化合物中R2和p与式(I)终产物中的相同，或 在脱保护和/或修饰后R2与式(I)终产物中的相同。

p＝0的适当式(4)羰基化合物可从适当的酮用适当的转移羧基或保 护羧基的试剂羧化而获得，所述试剂如二氧化碳、氯甲酸甲酯、碳酸二乙 酯、或氯甲酸乙酯[E.J.Corney和R.H.K.Chen，JOC38，4086(1973)；S.B. Soloway和F.B.LaForge，JACS 69，2677(1947)；N.Green和F.B.LaForge， JACS，70，2287(1948)；Y-L Chen和W.F.Barthel，JACS，75，4287(1953)]。

或者，p＝0的适当式(4)羰基化合物可经活化酸(如酰氯)与转 移甲基羧基或保护的甲基羧基的试剂反应而获得，所述试剂如为丙二酸 酯、丙二酸半酯、乙酰乙酸酯或乙酸酯[Org.Syn.37，32-33(1957)(John wiley & Sons Inc.)；J.Heterocyclic Chem.24，453(1987)]。

p＝1的适当式(4)羰基化合物可通过氰离子催化下适当的醛与丙烯 腈加成，然后氢化而获得[H.Stetter和H.Kulhmann，Org.Reactions 40，407-496(1991)]。或者，p＝1的适当式(4)羰基化合物可通过琥珀 酸酐与适当的苯基或取代苯基进行熟知的Friedel-Crafts反应而获得。[A.P. kozikowski等，J.Med.Chem.，36，2908-2920(1993)]。

例如，方案B步骤a中，适当的式(4)羰基化合物与等摩尔量或稍 过量的适当的式(3)肼或其盐接触。反应在适当的溶剂中进行，如甲醇、 乙醇、或乙酸。当使用适当的式(3)肼的盐时，反应在等摩尔量的适当 碱存在下进行，如醋酸钠、三乙胺、或二异丙基乙基胺。反应温度为室温 至溶剂的回流温度。反应一般需要5分钟到8小时。可直接使用产物，或 在使用前分离或用本领域熟知的技术分离和纯化，如过滤、研制、蒸发、 层析和重结晶。

方案B步骤b中，Z为氢的适当式(5)腙进行吲哚形成反应，生成 式(1)吲哚化合物。

例如，方案B步骤b中，Z二氢的适当式(5)腙进行吲哚形成反应。 反应在适当溶剂中进行，如甲苯、苯、甲醇、乙醇、水、硫酸或乙酸。进 行热反应或反应在适当催化剂存在下进行，催化剂如为强酸(对甲苯磺酸、 盐酸、硫酸、多聚磷酸等)、弱酸(乙酸、甲酸、吡啶盐酸盐等)、固体 酸(沸石催化剂，如沸石Y、丝光沸石、磺酸树脂等)、或路易斯酸(氯 化锌、三氯化磷、三氟化硼等)。反应一般在室温到溶剂的回流温度下进 行。反应一般需要30分钟到48小时。可用本领域熟知的技术分离和纯化 产物，如过滤、研制、蒸发、层析和重结晶。

或者，方案B步骤b中，Z为保护基，如C1-C4烷基或苄基的适当 式(5)腙如方案B步骤b所示进行吲哚形成反应，生成Z为保护基如C1 -C4烷基或苄基的式(6)吲哚化合物。Z为保护基R1为氢的式(6) 适当吲哚化合物可作为起始物用于以其他途径进行修饰反应引入R1，后者 为C1-C4烷基、苄基、取代苄基、苯甲酰基和取代苯甲酰基。

方案B任选的步骤c中，式(I)化合物可用本领域中熟知的方法酯 化，生成Z为保护基如C1-C4烷基或苄基的式(6)吲哚化合物。

方案B任选的步骤d中，将其中R1为氢、C1-C4烷基、苄基、取代 苄基、苯甲酰和取代苯甲酰，Z为保护基如C1-C4烷基或苄基的式(6) 吲哚化合物脱保护。利用适当的保护基如T.Greene在《有机合成中的保 护基团》中描述的那些，脱保护反应如酯水解是本领域熟知和认可的。任 选地，将R1为氢、Z为保护基如C1-C4烷基或苄基的式(6)吲哚化合 物修饰，生成其中R1为C1-C4烷基、苄基、取代苄基、苯甲酰和取代苯 甲酰、Z为保护基的式(6)吲哚化合物。经修饰反应如烷基化、苄基化、 或酰化(这些是本领域所熟知的)，生成其中Z为保护基而R1为C1-C4 烷基、苄基、取代苄基、苯甲酰、或取代苯甲酰的式(6)吲哚化合物。 通过脱保护反应如T.Greene在《有机合成中的保护基团》中描述的那些， 除去保护基Z得到其中R1为C1-C4烷基、苄基、取代苄基、苯甲酰或取 代苯甲酰的式(1)吲哚化合物。

本领域普通技术人员会认识到：为了获得目标式(I)化合物，修饰 和脱保护反应的数目和顺序可有变化。

方案C中给出了制备式(2)胺的一般合成方法。方案C中，除非另 有说明，所有取代基均如前文所定义。方案C中所用起始物、试剂、技术 和操作是本领域技术人员所熟知和认定的。

                                       方案C

R3＝C1-C4烷基的(2)

方案C步骤a中，适当的式(10)ω-氨基酸进行t-BOC形成反 应得到式(11)的t-BOC保护的ω-氨基酸。适当的式(10)ω-氨 基酸中，n与式(I)终产物中的相同。

例如，适当的式(10)ω-氨基酸与转移t-BOC基团的试剂如二碳酸 二-叔丁基酯或2-(叔丁氧羰基氧基亚氨基)-2-苯基乙腈接触。反 应在适当的溶剂中进行，如甲苯、甲醇、乙醇、二氯甲烷、四氢呋喃、或 乙腈。反应可在适当催化剂如4-二甲氨基吡啶存在下进行。反应一般在0 ℃到溶剂的回流温度下进行。反应一般需要30分钟到24小时。可按本领 域熟知的技术分离和纯化产物，如过滤、研制、蒸发、萃取、层析和重结 晶。

方案C步骤b中，式(1)t-BOC保护的ω-氨基酸与适当的胺或适 当的胺盐进行酰胺化，生成式(12)t-BOC保护的ω-氨基酸酰胺。适当 的胺HNR4R5中，R4和R5与式(I)终产物中的相同。

该酰胺化反应可通过式(11)t-BOC保护的ω-氨基酸进行，或先将 式(11)t-BOC保护的ω-氨基酸的酸功能团转化为活化中间体；如酸 酐；与取代磷酸如二烷基磷酸、二苯基磷酸、卤代磷酸，脂肪羧酸如甲酸、 乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、新戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸、三氟乙 酸等，芳香羧酸如苯甲酸等的混合酸酐；或活化脂、如酚酯、对硝基酚酯、 2，4-二硝基酚酯、五氟酚酯、五氯酚酯、N-羟基琥珀酰亚胺酯、N 羟基邻苯二甲酰亚胺酯、1-羟基-1H-苯并三唑酯等；活化酰胺，如咪 唑、二甲基吡唑、三唑或四唑酰胺；或在偶联剂存在下形成的中间体，偶 联剂如二环己基碳化二亚胺或1-(3二甲氨基丙基)-3-乙基碳化 二亚胺。可制备并直接使用活化中间体，或在加入适当胺HNR4R5之前制 备并分离。或者，在加入适当胺HNR4R5之前制备、分离并纯化活化中间 体。活化中间体的使用和形成是本领域熟知和认定的。

例如，式(11)t-BOC保护的ω-氨基酸与稍过量(摩尔)的适当胺 HNR4R5或适当胺的盐以及水合1-羟基苯并三唑在稍过量的偶联剂存在 下接触，偶联剂如为二环己基碳化二亚胺或1-(3-二甲氨基丙基)-3 -乙基碳化二亚胺。反应在适当碱如二异丙基乙基胺存在下进行，如果使 用胺盐，则多加入等摩尔量的适当碱。反应在适当溶剂如二氯甲烷或氯仿 中进行。可按本领域熟知的技术分离和纯化产物，如萃取、蒸发、层析和 重结晶。

或者，式(11)t-BOC保护的ω-氨基酸与1.2-1.7当量适当碱如 N-甲基吗啉在适当溶剂(如四氢呋喃)中接触。在加入1.2-1.7当量氯甲 酸异丁酯前，将反应混合物冷却至-50℃到0℃的温度，优选-25℃到 -20℃。搅拌反应30分钟到3小时，形成混合酸酐(活化中间体)。保 持温度在-50℃到0℃，加入适当的HNR4R5，如果使用胺的盐，则多加 等摩尔量的适当碱。加完胺之后，反应混合物可温热至室温。反应需要2 -48小时。产物可按本领域熟知的技术分离和纯化，例如经萃取、蒸发、 层析和重结晶。

在方案C步骤c中，将式(12)t-BOC保护的ω-氨基酸酰胺脱 保护，生成R3为氢的式(2)胺或R3为氢的式(2)胺的盐。

例如，式(12)t-BOC保护的ω-氨基酸酰胺与适当的质子酸如 三氟乙酸、盐酸、氢溴酸或硫酸接触。反应在适当溶剂中进行，如二噁烷、 甲醇、乙醇、乙酸乙酯或水。反应温度一般为0℃到溶剂的回流温度。反 应一般需要30分钟到24小时。可用本领域熟知的技术分离和纯化产物， 如萃取、蒸发、层析和重结晶。分离后的产物溶液可直接使用或可进一步 纯化。

方案C任选步骤d中，式(11)t-BOC保护的ω-氨基酸烷基化， 生成式(13)t-BOC保护的N-烷基ω-氨基酸。

例如，式(11)t-BOC保护的ω-氨基酸与稍过量的适当烷基化试剂 接触。适当的烷基化试剂是能转移C1-C4烷基的试剂，如甲基碘、甲基 溴、乙基碘、乙基溴、丙基碘、对甲苯磺酸丙酯、丁基碘或三氟甲磺酸丁 酯。反应在2.0-4.0摩尔当量的适当碱存在下进行，如氢化钠、叔丁醇钾、 乙醇钠、六甲基二硅氮化锂或二异丙基氨基锂，优选氢化钠。反应在适当 溶剂中进行，如四氢呋喃。反应温度一般为-78℃到溶剂的回流温度。反 应一般需要30分钟到24小时。可用本领域中熟知的技术分离和纯化产物， 如萃取、蒸发、层析和重结晶。

方案C步骤b中，式(13)t-BOC保护的N-烷基-ω-氨基酸如 上所述与适当的胺HNR4R5进行酰胺化反应，生成式(14)t-BOC保护 的N-烷基-ω-氨基酸酰胺。

或者，方案C任选的步骤e中，将式(12)t-BOC保护的ω-氨基 酸酰胺烷基化，生成式(14)t-BOC保护的N-烷基-ω-氨基酸酰胺。

例如，式(12)t-BOC保护的ω-氨基酸酰胺与稍过量的适当烷在化 试剂接触。适当的烷基化试剂是能转移C1-C4烷基的试剂，如甲基碘、 甲基溴、乙基碘、乙基溴、丙基碘、对甲苯磺酸丙酯、丁基碘或三氟甲磺 酸丁酯。反应在1.0-2.0摩尔当量的适当碱存在下进行，如氢化钠、叔丁醇 钾、乙醇钠、六甲基二硅氮化锂或二异丙基氨基锂，优选氢化钠。反应在 适当溶剂中进行，如四氢呋喃。反应温度一般为-78℃到溶剂的回流温度。 反应一般需要30分钟到24小时。可用本领域中熟知的技术分离和纯化产 物，如萃取、蒸发、层析和重结晶。

方案C步骤c中，式(14)t-BOC保护的N-烷基-ω-氨基酸酰 胺如上所述脱保护，生成其中R3为C1-C4烷基的式(2)胺或R3为C1 -C4烷基的式(2)胺的盐。

或者，方案C任选的步骤f中，R3为氢的式(2)胺或R3为氢的式 (2)胺的盐进行还原胺化，生成R3为C1-C4烷基的式(2)胺或R3 为C1-C4烷在的式(2)胺的盐。

例如，R3为氢的式(2)胺或式(2)胺的盐与适当的醛接触，如甲 醛、乙醛、丙醛、或丁醛。在过量氰基硼氢化钠存在下按R.F.Borch等， JACS 93，2891-2904(1971)的方法进行反应。反应在适当的溶剂中 进行，如乙醇、甲醇或四氢呋喃/甲醇混合物。反应混合物的pH在反应过 程中通过加入浓盐酸水溶液保持在6-8之间。反应一般在室温到溶剂的 回流温度下进行。反应一般需要15分钟到24小时。可用本领域熟知的技 术分离和纯化产物，如萃取、蒸发、层析和重结晶。

下列制备例如实施例代表方案A、B和C中描述的典型合成。应理解 这些制备例如实施例仅用于说明，而无意于限制本发明的范围。在下列制 备例和实施例中使用的术语含义如下：“g”指克，“mg”指毫克， “mmol”指毫摩尔，“ml”指毫升，“℃”指摄氏度，“mp”指熔点， “dec”代表分解。

                      制备例1

a)1-[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氯

将1-[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]- 乙酸(1.0g，3.0mmol)和亚硫酰氯(1.5ml，6.0mmol)在甲苯(10ml) 中混合。加热到70℃计1小时。冷却至室温，在氮气流下蒸发，得残余物 为标题化合物，不用进一步纯化直接使用。

b)[5-甲氧基-1-(4氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氯

用[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3 -基]-乙酸按与制备例1a相似的方法制备。

                        制备例2

a)N-苯甲酰-N-(4-甲氧苯基)-肼盐酸盐

混合(4-甲氧苯基)-肼盐酸盐(10g，57mmol)和氢氧化钠溶液 (50ml，1M)，并用甲苯萃取。有机层用MgSO4干燥、过滤并真空蒸发 成残余物。残余物与甲苯(50ml)混合并冷却至0℃。以甲苯(10ml) 溶液形成滴加乙醛(3.5ml，63mmol)。加完后温热至室温。室温下1小 时后，在氮气流下蒸发，得N-(4-甲氧苯基)-N’-亚乙基肼。

将N-(4-甲氧苯基)-N’-亚乙基肼(6.0g，43mmol)、苯甲酰 氯(5.2ml，44mmol)、吡啶(3.7ml，46mmol)和乙醚(25ml)混合。 24小时后加入乙醚(100ml)，过滤出固体并真空干燥，得N-苯甲酰 N-(4甲氧苯基)-N’-亚乙基肼固体。

混合如上得到的N-苯甲酰-N-(4-甲氧苯基)-N’-亚乙基 肼、乙醚(10ml)和乙醇(10ml)。加入氯化氢气体直到溶液饱和。20 分钟后加入乙醚(100ml)形成固体。滤出固体并真空干燥得标题化合物。

b)N-苯甲酰-N-苯基-肼盐酸盐

用苯基肼盐酸盐按与制备例2a相似的方法制备。

c)N-(4-氯苯甲酰)-N-(4-甲氧苯基)-肼盐酸盐

用4-氯苯甲酰氯按与制备例2a相似的方法制备。

                        制备例3

乙酰丙酸甲酯

混合乙酰丙酸(6.0g)和甲醇(75ml)中的Amberlyst 15。24小 时后，过滤除去树脂，真空蒸发得残余物。残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸 氢钠之间分配。有机层在MgSO4上干燥、过滤并真空蒸发得标题化合物。 实施例1： 8-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基- 酰胺 方案A，步骤a：

混合1-[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氯(3.0mmol)、 8-氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺(3.0mmol，甲苯中(100ml))和二异丙基乙基胺 (1.0ml，6.0mmol)。室温下搅拌4小时。反应混合物在乙酸乙酯和饱和氯化 钠溶液间分配。有机层用MgSO4干燥、过滤并真空蒸发得残余物。残余 物在硅胶上层析，用25％丙酮/二氯甲烷洗脱，得到标题化合物。 实施例2： 8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基- 丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氯按与实施 例1相似的方法制备。 实施例3： 8-[[5-甲氧基-1-甲基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲 基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

将1-[5-甲氧基-1-甲基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸(0.2g， 0.64mmol)、8-氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺盐酸盐(0.64mmol)、N-甲基吗啉 (0.38ml，3.0mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.12g， 0.64mmol)和水合4-羟基苯并三唑(0.01g)在二氯甲烷(20ml)中混合。18小 时后，加水、用乙酸乙酯萃取。有机层用MgSO4干燥并真空蒸发得到残 余物。残余物在硅胶上层析，用50％乙酸乙酯/己烷洗脱。 实施例4： 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲 基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸按与实施 例3相似的方法制备。 实施例5： 8-[[5-甲氧基-1-甲基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰 胺

用1-[5-甲氧基-1-甲基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸按与实施例3相似的 方法制备。 实施例6： 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰 胺

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸按与实施例3相似的 方法制备。 实施例7： 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己酸甲 基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸和6-氨基 -己酸甲基-丁基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例8： 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸丁

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸按与实施 例3相似的方法制备。 实施例9： 12-[[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-十二烷酸甲基-丁基- 酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和12-氨基-十二烷酸丁基 -甲基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例10： 8-[[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰基-N-丁基氨基]-辛酸甲基-丁 基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和8-N-丁基氨基-辛酸甲 基-丁基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例11： 6-[[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和6-氨基-己酸甲基-丁基 -酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例12： 1-[[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-乙酸甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和1-氨基-乙酸甲基-丁 基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例13： 8-[[5-甲基-1-[(4-甲基)苄基]-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰基-N- 甲基氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲基-1-[(4-甲基)苄基]-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸 和8-N-甲基氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例14： 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸丁基-辛基-酰 胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和8-氨基-辛酸丁基- 辛基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例15： 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和8-氨基-辛酸甲基- 酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例16： 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸二甲基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和8-氨基-辛酸二甲 基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例17： 8-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和8-氨基-辛酸甲 基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例18： 8-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸二丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸和8-氨基-辛酸 二丁基-酰胺按与实施例3相似的方法制备。 实施例19： 5-氯-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，步骤a：

用5-氯-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸按与实施例3相似的方法制备。 实施例20： 5-甲氧基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基--氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，步骤a：

用5-甲氧基-1-甲基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸按与实施例3相似的方法制 备。 实施例21： 5-氯-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，步骤a：

用5-氯-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸按与实施例3相似的方法制备。 实施例22： 5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，步骤a：

用5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸按与实施例3相似的方法制备。 实施例23： 1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，步骤a：

用1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-羧酸按与实施例3相似的方法制备。 实施例24： 1-苯甲酰-2-[4-(甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)- 辛基]-酰胺 方案A，步骤a：

用1-苯甲酰-2-[4-(甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-羧酸按与实施例3相似的方 法制备。 实施例25： 5-氯-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[6-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-己基]-酰胺 方案A，步骤a：

用5-氯-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸和6-氨基己酸甲基-丁基-酰胺按与实施 例3相似的方法制备。 实施例26： 5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-己基]-酰胺

用5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸和6-氨基己酸甲基-丁基-酰胺按与 实施例3相似的方法制备。 实施例27： 8-[[5-羟基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰 胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

混合8-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲 基-丁基-酰胺(0.4g，0.75mmol)和二氯甲烷(9ml)。冷却至-10℃，加入三溴 化硼(1ml，1M二氯甲烷溶液，1mmol)。加完后温热至室温。24小时后，反 应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机层用MgSO4干燥、过滤并真空蒸 发得到残余物。残余物在硅胶上层析并用25％丙酮/氯仿洗脱得到标题化合 物。 实施例28： 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁 基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用8-[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸 甲基-丁基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例29： 8-[[5-羟基-1-苄基-2-[(羟基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁 基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

混合8-[[5-甲氧基-1-甲基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 辛酸甲基-丁基-酰胺(0.31g，0.61mmol)和二氯甲烷(10ml)。冷却至-10℃， 加入三溴化硼(2.44ml，1M二氯甲烷溶液，2.44mmol)。加完后温热至室温。 18小时后，反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。有机层用MgSO4干燥、 过滤并真空蒸发得到残余物。残余物在硅胶上层析并用25％丙酮/氯仿洗脱 得到标题化合物。 实施例30： 8-[[5-羟基-1-苄基-2-(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己酸甲基-丁 基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用8-[5-甲氧基-1-苄基-2-(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己 酸甲基-丁基-酰胺按与实施例29相似的方法制备。 实施例31： 8-[[5-羟基-1-苄基-2-(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸丁基-酰 胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用8-[5-甲氧基-1-苄基-2-(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛 酸丁基-酰胺按与实施例29相似的方法制备。 实施例32： 5-羟基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，任选步骤b：

用5-甲氧基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]- 酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例33： 5-羟基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，任选步骤b：

用5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]- 酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例34： 8-[[5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b： 混合8-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲 基-丁基-酰胺(3.0mmol)、氢氧化钠(4.0mmol)和乙醇/水(20ml/5ml)。加热回 流。10小时后，反应混合物在乙酸乙酯和饱和氯化钠溶液之间分配。有机 层用MgSO4干燥、过滤并真空蒸发得到残余物。残余物在硅胶上层析得到 标题化合物。 实施例35： 2-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，任选脱保护步骤b：

用1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]- 酰胺按与实施例34相似的方法制备。 实施例36： 2-[4-(甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰基)-辛基]-酰胺 方案A，任选步骤b：

用1-苯甲酰-2-[4-(甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲 酰基)-辛基]-酰胺按与实施例34相似的方法制备。 实施例37： 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-乙酰氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 辛酸甲基-丁基-酰胺 方案A，任选的修饰步骤b：

混合8-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸 甲基-丁基-酰胺(0.462g，0.79mmol)和乙酸酐(2.20g，1.74mmol)、4-二甲 氨基吡啶(1.97mmol)和二氯甲烷(10ml)。24小时后，反应混合物在乙酸乙 酯和水之间分配。有机层用MgSO4干燥、过滤并真空蒸发得到残余物。残 余物在硅胶上层析，用25％丙酮/氯仿洗脱得到标题化合物：mp60-70℃。 实施例38 1-[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚3-基]-乙酸 方案B，步骤a和b：

将N-苯甲酰-N-(4-甲氧基苯基)-肼盐酸盐(3.0g，11mmol)、醋酸钠 (11mmol)和乙酰丙酸(1.3g，11mmol)在乙酸(130ml)中混合。加热反应混合 物至80℃。3小时后，冷却至室温并搅拌18小时。过滤形成的固体，真 空干燥得固体标题化合物。 实施例39 1-[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，步骤a和b：

用N-(4-氯苯甲酰)-N-(4-甲氧苯基)-肼盐酸盐按与实施例38类似的方 法制备。 实施例40 l-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-羧酸 方案B，步骤a和b：

用N-苯甲酰-N-苯基-肼盐酸盐按与实施例38类似的方法制备。 实施例41 1-[5-甲氧基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，步骤a和b及随后的任选的步骤c：

在甲醇(100ml)中混合N-(4-甲氧基苯基)-肼盐酸盐(12..22g ，70mmol)、醋酸钠(5.74g，70mmol)和对甲氧基苯甲酰-丙酸 (19g，90mmol)。3小时后冷却至0℃，用氯化氢气体饱和。加热回流4小 时，冷却至室温并真空蒸发得残余物。残余物在硅胶上层析，用50％乙酸 乙酯/己烷洗脱得到标题化合物。 实施例42 1-苯甲酰-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-羧酸 方案B，步骤a和b：

用N-苯甲酰-N-苯基-肼盐酸盐按与实施例41类似的方法制备。 实施例43 1-[5-甲基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，步骤a和b及随后的任选的步骤c：

用N-对甲苯基-肼盐酸盐按与实施例41类似的方法制备。 实施例44 1-[5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，步骤a和b及随后的任选的步骤c：

在甲醇(100ml)中混合N-(4-甲氧基苯基)-肼盐酸盐(5.36g，30.7mmol) 和乙酰-丙酸甲酯(4.3g，30.7mmol)。24小时后加入氢氯酸二噁烷溶液 (7.7ml，4M 31mmol)。加热回流4小时，冷却至室温并真空蒸发得残余物。 残余物在硅胶上层析，用50％乙酸乙酯/己烷洗脱得到标题化合物。 实施例45 1-[5-氯-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，步骤a和b及随后的任选的步骤c：

用N-(对氯苯基)-肼盐酸盐按与实施例41类似的方法制备。 实施例46 5-氯-1H-吲哚-3-羧酸甲酯 方案B，任选步骤c：

混合5-氯-1H-吲哚3-羧酸(Aldrich Chemical Co.)(100mmol) 和甲醇(200ml)，加入硫酸(1ml)。24小时后，反应混合物在乙酸乙酯和饱 和碳酸氢钠溶液之间分配。有机层在硫酸镁上干燥，过滤并真空蒸发得残 余物。残余物在硅胶上层析得到标题化合物。 实施例47 5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯 方案B，任选步骤c：

用5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸(Aldrich Chemical Co.)按与实施 例46相似的方法制备。 实施例48 1-[5-甲氧基-1-甲基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基] -乙酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

混合1-[5-甲氧基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-基] -乙酸甲酯(2.0g，6.2mmol)和二甲基甲酰胺(20ml)。冷却至-10℃后加入氢 化钠(0.27g，油中60％，6.7mmol)，搅拌直到不再产生气体。加入甲基碘 (0.8ml，12.5mmol)，温热至室温。18小时后，反应混合物在乙酸乙酯和饱 和氯化钠溶液间分配。有机层在硫酸镁上干燥，过滤并真空蒸发得残余物。 残余物在硅胶上层析，用33％乙酸乙酯/己烷洗脱得到标题化合物。 实施例49 1-[5-甲氧基-1-甲基-2甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用1-[5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯按与实 施例48相似的方法制备。 实施例50 5-氯-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用5-氯-1H-吲哚-3-羧酸甲酯按与实施例48相似的方法制备。 实施例51 5-甲氧基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯按与实施例48相似的方法 制备。 实施例52 1-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3- 基]-乙酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用1-[5-甲氧基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基] -乙酸甲酯和苄基溴按与实施例48相似的方法制备。 实施例53 1-[5-甲氧基-1-苄基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用1-[5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯和苄基 溴按与实施例48相似的方法制备。 实施例54 5-氯-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用5-氯-1H-吲哚-3-羧酸甲酯和苄基溴按与实施例48相似的 方法制备。 实施例55 5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3羧酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯和苄基溴按与实施例48相 似的方法制备。 实施例56 1-[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用1-[5-氯-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯和乙基溴按 与实施例48相似的方法制备。 实施例57 1-[5-甲基-1-[(4-甲基)-苄基]-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲 哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用1-[5-甲基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酸甲酯和4-甲基苄基溴按与实施例48相似的方法制备。 实施例58 1-[5-甲氧基-1-甲基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3- 基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

在四氢呋喃(20ml)中混合1-[5-甲氧基-1-甲基-2-[(4-甲氧 基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯(1.9g，5.8mmol)和氢氧化锂 (10ml，1M水溶液，10mmol)。48小时后，将反应混合物倾入1M盐酸溶 液(20ml)中，用乙酸乙酯萃取。有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发得到 标题化合物。 实施例59 5-氯-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用5-氯-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯按与实施例58相似 的方法制备。 实施例60 5-甲氧基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用5-甲氧基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯按与实施例58 相似的方法制备。 实施例61 5-氯-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用5-氯-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯按与实施例58相似 的方法制备。 实施例62 5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3羧酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用5-甲氧基-1-苄基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯按与实施例57 相似的方法制备。 实施例63 1-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3-乙 酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用1-[5-甲氧基-1-苄基2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -乙酸甲酯按与实施例57相似的方法制备。 实施例64 1-[5-甲氧基-1-甲基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用1-[5-甲氧基-1甲基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸 甲酯按与实施例57相似的方法制备。 实施例65 1-[5-氯1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用1-[5-氯-1-乙基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 按与实施例57相似的方法制备。 实施例66 1-[5-甲基-1-[(4-甲基)苄基]-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H-吲哚 -3-基]乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲基-1-[(4-甲基)苄基]-2-[(4-甲氧基)苯基]-1H- 吲哚-3-乙酸甲酯按与实施例57相似的方法制备。 实施例67 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸 方案C，步骤a：

在四氢呋喃(100ml)中混合8-氨基辛酸(5.9g，34mmol)、三乙胺(5.0ml， 30mmol)和二碳酸二叔丁酯(7.5g，34mmol)。24小时后，将反应混合物在 乙酸乙酯和1M盐酸溶液之间分配。用硫酸镁干燥有机层，过滤并真空蒸 发得到标题化合物。 实施例68 12-(叔丁氧羰基)氨基-十二烷酸 方案C，步骤a：

用12-氨基-十二烷酸按与实施例67相似的方法制备。 实施例69 6-(叔丁氧羰基)氨基-己酸 方案C，步骤a：

用6-氨基-己酸按与实施例67相似的方法制备。 实施例70 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案C，步骤b：

在二氯甲烷(20ml)中混合8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸(1.28g， 5mmol)、N-甲基吗啉(1.2ml，10mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3- 乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.95g，5.0mmol)、甲基-丁基胺盐酸盐(5.0mmol) 和4-羟基苯并三唑水合物(0.05g)。4小时后，加水并用乙酸乙酯萃取。 有机层用硫酸镁干燥并真空蒸发得到标题化合物。 实施例71 8-(叔丁氧羰基)氨基辛酸丁基-酰胺 方案C，步骤b：

用丁胺按与实施例70相似的方法制备。 实施例72 6-(叔丁氧羰基)氨基-己酸甲基-丁基-酰胺 方案C，步骤b：

用6-(叔丁氧羰基)-氨基-己酸按与实施例70相似的方法制备。 实施例73 8-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案C，步骤b：

用8-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基-辛酸按与实施例70相似的方法 制备。 实施例74 12-(叔丁氧羰基)氨基-十二烷酸甲基-丁基-酰胺 方案C，步骤b：

用12-(叔丁氧羰基)氨基-十二烷酸按与实施例70相似的方法制备。 实施例75 1-(叔丁氧羰基)氨基-乙酸甲基-丁基-酰胺 方案C，步骤b：

用1-(叔丁氧羰基)-氨基-乙酸(叔丁氧羰基-甘氨酸)按与实施例70 相似的方法制备。 实施例76 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸丁基-辛基-酰胺 方案C，步骤b：

用丁基-辛基胺按与实施例70相似的方法制备。 实施例77 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸甲基-酰胺 方案C，步骤b：

用甲胺按与实施例70相似的方法制备。 实施例78 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸二甲基-酰胺 方案C，步骤b：

用二甲基胺按与实施例70相似的方法制备。 实施例79 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸二丁基-酰胺 方案C，步骤b：

用二丁基胺按与实施例70相似的方法制备。 实施例80 8-氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案C，步骤c：

混合8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺和4M氢氯酸二噁 烷溶液(10ml)。1小时后，将反应混合物蒸发成残余物。残余物在甲苯和 1M氢氧化钠溶液中分配。用甲苯萃取水层。合并有机层，用硫酸镁干燥， 过滤得标题化合物的甲苯溶液。真空蒸发得到标题化合物。 实施例81 8-氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

混合8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺和4M氢氯酸二噁 烷溶液(10ml)。1小时后，将反应混合物真空蒸发成残余物。残余物用乙醚 研制形成固体。过滤收集固体并真空蒸发得到标题化合物。 实施例82 8-氨基-辛酸丁基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸丁基-酰胺按与实施例81相似的方法 制备。 实施例83 12-氨基-十二烷酸丁基-甲基酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用12-(叔丁氧羰基)氨基-十二烷酸丁基-甲基酰胺按与实施例81 相似的方法制备。 实施例84 1-氨基-乙酸丁基-甲基酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用1-(叔丁氧羰基)氨基-乙酸丁基-甲基酰胺按与实施例81相似的 方法制备。 实施例85 6-氨基-己酸丁基-甲基酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用6-(叔丁氧羰基)氨基-己酸丁基-甲基酰胺按与实施例81相似的 方法制备。 实施例86 8-N-甲基氨基-辛酸丁基-甲基酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用8-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基-辛酸丁基-甲基酰胺按与实施 例81相似的方法制备。 实施例87 8-氨基-辛酸丁基-辛基酰胺盐酸盐 方案C，步骤b：

用8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸丁基-辛基酰胺按与实施例81相似的 方法制备。 实施例88 8-氨基-辛酸甲基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤b：

用8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸甲基-酰胺按与实施例81相似的方法 制备。 实施例89 8-氨基-辛酸二甲基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤b：

用8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸二甲基-酰胺按与实施例81相似的方 法制备。 实施例90 8-氨基-辛酸二丁基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤b：

用8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸二丁基-酰胺按与实施例81相似的方 法制备。 实施例91 8-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基-辛酸 方案C，任选的步骤d：

在四氢呋喃(250ml)中混合8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸(100mmol)和氢 化钠(220mmol)。搅拌直到不再产生气体。加入甲基碘(13.64ml)。3小时 后，反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配，调节pH至4并萃取。有机层用 硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发得到标题化合物。 实施例92 8-(叔丁氧羰基)-N-甲基氨基-辛酸丁基-甲基-酰胺 方案C，任选的步骤e：

在四氢呋喃(25ml)中混合8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸丁基-甲基- 酰胺(10mmol)和氢化钠(11mmol)。搅拌直到不再产生气体。加入乙基碘 (11mmol)。24小时后，反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配，调节pH至 4并萃取。有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发得到标题化合物。 实施例93 8-N-丁基氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案C，任选的步骤f：

混合8-氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺(5mmol)和甲醇(50ml)，加入 丁醛(5mmol)、氰基硼氢化钠(5mmol)和1滴1％溴甲酚绿甲醇溶液。用1N 氢氯酸甲醇溶液保持反应的pH直到指示剂不再变色。真空蒸发，残余物在 1N的氢氧化钠(50ml)和乙酸乙酯(100ml)之间分配。分离有机相，干燥(硫 酸镁)并真空蒸发溶剂，得到标题化合物。 实施例104 [1-苄基-吲哚-3-基]-乙酸乙酯 方案B，任选的修饰步骤d：

混合氢化钠(1.08g，油中60％，27.1mmol)和二甲基甲酰胺(50ml)。加入 吲哚-3-基-乙酸乙酯(5g，24.6mmol)的二甲基甲酰胺(20ml)溶液。搅拌 至不再产生气体。加入苄基溴(5.85ml，49.2mmol)，温热至室温。48小 时后，将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。分离有机层并用饱和氯化 钠溶液萃取。有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发得残余物。残余物在 硅胶上层析，用10％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物。 实施例105 [1-苄基-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

在水(5.5ml)和四氢呋喃(20ml)中混合[1-苄基-吲哚-3-基]-乙酸 乙酯(3.78g，13.5mmol)和氢氧化锂(0.91g，21.6mmol)。60小时后，将反应 混合物倾入1M盐酸溶液(20ml)并用乙酸乙酯萃取。有机层用硫酸镁干燥， 过滤并真空蒸发得到标题化合物。 实施例106 8-[1-苄基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]辛酸甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用[1-苄基-1H-吲哚-3-基]-乙酸按与实施例3相似的方法制 备。 实施例107 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸二乙基-酰胺 方案C，步骤b：

用二乙胺按与实施例70相似的方法制备。 实施例108 8-氨基-辛酸二乙基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸二乙基-酰胺按与实施例81相似的方 法制备。 实施例109 8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸二乙基-酰胺 方案A，步骤a：

用8-氨基-辛酸二乙基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制 备。 实施例110 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸二乙基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸二乙基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例111 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸吡咯烷-酰胺 方案C，步骤b：

用吡咯烷按与实施例70相似的方法制备。 实施例112 8-氨基-辛酸吡咯烷酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸吡咯烷-酰胺按与实施例81相似的方 法制备。 实施例113 8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸吡咯烷-酰胺 方案A，步骤a：

用8-氨基-辛酸吡咯烷-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制 备。 实施例114 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸吡咯烷-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸吡咯烷-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例115 [5-甲氧基-2-甲基吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯 方案B，任选的步骤c：

混合5-甲氧基-2-甲基吲哚-3-基-乙酸(5.0)和甲苯(50ml)， 加热至65℃。滴加N，N-二甲基甲酰胺二叔丁基缩醛(16.4ml， 64.8mmol)，加热至80℃。2小时后冷却至室温，将反应混合物真空蒸发 成残余物。残余物在二氯甲烷和水之间分配。分离有机层并用饱和氯化钠 溶液萃取。有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发，得残余物。残余物在 硅胶上层析，用1.4/1乙酸乙酯/己烷洗脱得到标题化合物。 实施例116 [5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸叔 丁酯 方案B，任选的修饰步骤d：

混合氢化钠(0.66g，油中60％，13.1mmol)和二甲基甲酰胺(50ml)，用冰 浴冷却至0℃。加入[5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯 (3g，10.9mmol)。搅拌直到不再产生气体。加入4-甲氧基苯甲酰氯(2.23g， 13mmol)。温热至室温，18小时后加水。将反应混合物在乙酸乙酯和水之 间分配。分离有机层并用饱和氯化钠溶液萃取。有机层用硫酸镁干燥，过 滤并真空蒸发，得残余物。残余物在硅胶上层析，用1/4乙酸乙酯/己烷洗 脱得到标题化合物。 实施例117 [5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

混合[5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基] 乙酸叔丁酯(1g)和三氟乙酸(8ml)。1小时后，真空蒸发成残余物。向残 余物加入甲苯并真空蒸发得到标题化合物。 实施例118 8-[[5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺

用[5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基]- 乙酸按与实施例3相似的方法制备。 实施例119 8-[[5-羟基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

用8-[[5-甲氧基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚 -3-基]-乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺按与实施例27相似的方法 制备。 实施例120 7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸 方案C，步骤a：

用7-氨基-庚酸按与实施例67相似的方法制备。 实施例121 7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸甲基-丁基-酰胺 方案C，步骤b：

用7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸按与实施例70相似的方法制备。 实施例122 7-氨基-庚酸甲基-丁基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸甲基-丁基酰胺按与实施例81相似的 方法制备。 实施例123 [5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用苯甲酰氯按与实施例116相似的方法制备。 实施例124 [5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯 按与实施例117相似的方法制备。 实施例125 7-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]乙酰氨基]- 庚酸甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸和7- 氨基-庚酸甲基-丁基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例126 7-[[5-羟基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 庚酸甲基-丁基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

用7-[[5-羟基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例127 7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸甲基-苯基-酰胺 方案C，步骤b：

用7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸和N-甲基苯胺按与实施例70相似的 方法制备。 实施例128 7-氨基-庚酸甲基-苯基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸甲基-苯基酰胺按与实施例81相似的 方法制备。 实施例129 7-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 庚酸甲基-苯基-酰胺 方案A，步骤a：

用[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸和7- 氨基-庚酸甲基-苯基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例130 7-[[5-羟基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 庚酸甲基-苯基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

用7-[[5-羟基-1-苯甲酰-2甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-庚酸甲基-苯基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例131 7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸二乙基-酰胺 方案C，步骤b：

用7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸和二乙胺按与实施例70相似的方法制 备。 实施例132 7-氨基-庚酸二乙基-酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用7-(叔丁氧羰基)氨基-庚酸二乙基酰胺按与实施例81相似的方法 制备。 实施例133 7-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 庚酸二乙基-酰胺 方案A，步骤a：

用[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸和7 氨基-庚酸二乙基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例134 7-[[5-羟基-1-苯甲酰2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 庚酸二乙基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

用7-[[5-甲氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例135 [5-氟-吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯 方案B，任选的步骤c：

用[5-氟-吲哚-3-基]-乙酸按与实施例115相似的方法制备。 实施例136 [5-氟-1-苯甲酰-吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用[5-氟-吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯和苯甲酰氯按与实施例116相似 的方法制备。 实施例137 [5-氟-1-苯甲酰吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-氟-1-苯甲酰-吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯按与实施例117 相似的方法制备。 实施例138 7-[[5-氟-1-苯甲酰-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-庚酸二乙基 酰胺 方案A，步骤a：

用[5-氟-1-苯甲酰吲哚-3-基]-乙酸和7-氨基-庚酸二乙 基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例139 [5-甲氧基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸叔丁酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用氢化肉桂酰氯按与实施例116相似的方法制备。 实施例140 [5-甲氧基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲氧基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸叔 丁酯按与实施例117相似的方法制备。 实施例141 8-[[5-甲氧基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用[5-甲氧基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸和 8-氨基-辛酸甲基-丁基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例142 8-[[5-羟基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

用8-[[5-甲氧基-1-(3-苯基丙酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例143 [5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，任选的步骤c：

混合5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-基-乙酸(5.34)、甲醇(44ml) 和12M盐酸水溶液(2.0ml)。加热回流，2.75小时后冷却至室温。将反应混 合物真空蒸发成残余物。残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液之间分 配。分离有机层，用硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发得到标题化合物。 实施例144 [5-甲氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸 甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用[5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸甲酯和3-苯基 丙基溴按与实施例48相似的方法制备。 实施例145 [5-甲氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酸甲酯按与实施例105相似的方法制备。 实施例146 7-[[5-甲氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用[5-甲氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸和 7-氨基-庚酸甲基-丁基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例147 7-[[5-羟基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

用7-[[5-甲氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例148 8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸吗啉-酰胺 方案C，步骤b：

用吗啉按与实施例70相似的方法制备。 实施例149 8-氨基-辛酸吗啉-酰胺盐酸盐 方案C，步骤c：

用8-(叔丁氧羰基)氨基-辛酸吗啉-酰胺按与实施例81相似的方法 制备。 实施例150 8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸吗啉-酰胺 方案A，步骤a：

用8-氨基-辛酸吗啉-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例151 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸吗啉-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用8-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸吗啉-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例152 7-[[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-庚酸 甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸和7 -氨基-庚酸甲基-丁基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例153 7-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-庚酸甲基 -丁基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用7-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-庚酸甲基 -丁基-酰胺按与实施例29相似的方法制备。 实施例154 6-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己酸甲基

用[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸和6-氨基-己酸 甲基-丁基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例155 6-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己酸甲基- 丁基-酰胺 方案A，任选步骤b：

用6-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] 己酸甲基-丁基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例156 [5-甲氧基-2-(4-氟苯基)-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，步骤a和b及随后的任选的步骤c：

用对氟苯甲酰-丙酸按与实施例41类似的方法制备。 实施例157 [5-甲氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)-吲哚-3-基]-乙酸甲酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用[5-甲氧基-2-(4-氟苯基)--吲哚-3-基]-乙酸甲酯和苄基溴按与实 施例48类似的方法制备。 实施例158 [5-甲氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)--吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)--吲哚-3-基]-乙酸甲酯按与 实施例105类似的方法制备。 实施例159 8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)--1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -辛酸甲基-丁基-酰胺 方案，步骤a：

用[5-甲氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)--吲哚-3-基]-乙酸8-氨 基-辛酸甲基-丁基酰胺盐酸盐按与实施例3类似的方法制备。 实施例160 8-[[5-羟基-1-苄基-2-(4-氟苯基)--1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] 辛酸甲基-丁基-酰胺 方案，任选的脱保护步骤b：

用8-[[5-甲氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)--1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺按与实施例27类似的方法制备。 实施例161 7-[[5-乙酰氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

在二氯甲烷(2.5ml)中混合7-[[5-羟基-1-(3-苯基丙基)-2-甲 基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺(0.22g， 0.52mmol)、乙酸酐(0.12ml，0.11)和4-二甲氨基吡啶(0.174g)。18小时 后加入甲醇(0.5ml)并搅拌10分钟。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分 配。分离有机层并用1M盐酸水溶液萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤并 真空蒸发得残余物。残余物在硅胶上层析，用乙酸乙酯洗脱得到标题化合 物。 实施例162 6-[[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己酸 甲基-丁基-酰胺 方案A，步骤a：

用1-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酸和6 -氨基-己酸甲基-丁基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例163 6-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-己酸甲基 -丁基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用6-[5-甲氧基-1-苄基-2-[(4-甲氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-己酸甲基 -丁基-酰胺按与实施例29相似的方法制备。 实施例164 6-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-乙酰氧基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 己酸甲基-丁基-酰胺 方案A，任选的修饰步骤b：

用6-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)-苯基]-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]- 己酸甲基-丁基-酰胺按与实施例37相似的方法制备。 实施例165 [5-甲氧基-1-(羧酸4-甲氧基苯基酰胺)-吲哚-3-基]-乙酸叔丁 基酯 方案B，任选的修饰步骤d：

混合[5-甲氧基-吲哚-3-基]-乙酸叔丁基酯(1.0g，3.6mmol)和四氢 呋喃(50ml)。在干冰丙酮浴中冷却，加入正丁基锂(1.60ml，2.5M己烷溶 液，3.99)。温热至室温，30分钟后再用干冰丙酮浴冷却。加入异氰酸4 甲氧基苯基酯(0.53ml，3.99mmol)。温热至室温，1小时后加入饱和氯化 铵水溶液并用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用水萃取再用饱和氯化钠溶液 萃取。用硫酸镁干燥有机层，过滤并真空蒸发的残余物。残余物在硅胶上 层析，用1/4乙酸乙酯/己烷洗脱得到标题化合物。 实施例166 [5-甲氧基-1-(羧酸4-甲氧基苯基酰胺)-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲氧基-1-(羧酸4-甲氧基苯基酰胺)-吲哚-3-基]-乙 酸叔丁基酯按与实施例117相似的方法制备。 实施例167 7-[[5-甲氧基-1-(羧酸4-甲氧基苯基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-

用[5-甲氧基-1-(羧酸4-甲氧基苯基酰胺)-吲哚-3-基]-乙 酸和7-氨基-庚酸二乙基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例168 7-[[5-羟基1-(羧酸4-甲氧基苯基酰胺)-1H-吲哚-3基]-

用7-[[5-甲氧基-1-(羧酸4-甲氧基苯基酰胺)-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]庚酸二乙基-酰胺按与实施例29相似的方法制备。 实施例169 [5-甲氧基-1-(羧酸4-氯苯基酰胺)-吲哚-3-基]-乙酸叔丁基酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用异氰酸4-氯苯基酯按与实施例165相似的方法制备。 实施例170 [5-甲氧基-1-(羧酸4-氯苯基酰胺)-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲氧基-1-(羧酸4-氯苯基酰胺)-吲哚-3-基]-乙酸叔 丁基酯按与实施例117相似的方法制备。 实施例171 7-[[5-甲氧基-1-(羧酸4-氯苯基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]庚酸二乙基-酰胺

用[5-甲氧基-1-(羧酸4-氯苯基酰胺)-吲哚-3-基]-乙酸和7 氨基-庚酸二乙基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例172 7-[[5-羟基-1-(羧酸4-氯苯基酰胺)-1H-吲哚-3基]-乙酰 氨基]庚酸二乙基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

用7-[[5-甲氧基-1-(羧酸4-氯苯基酰胺)-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]庚酸二乙基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例173 [5-甲氧基-1-(羧酸丁基酰胺)-吲哚-3基]-乙酸叔丁基酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用异氰酸丁酯按与实施例165相似的方法制备。 实施例174 [5-甲氧基-1-(羧酸丁基酰胺)-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲氧基-1-(羧酸丁基酰胺)-吲哚3-基]-乙酸叔丁基酯 按与实施例117相似的方法制备。 实施例175 7-[[5-甲氧基-1-(羧酸丁基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -庚酸二乙基-酰胺 方案A，步骤a：

用[5-甲氧基-1-(羧酸丁基酰胺)-吲哚-3-基]-乙酸和7-氨 基庚酸二乙基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例176 7-[[5-羟基-1-(羧酸丁基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -庚酸二乙基-酰胺 方案A，任选的步骤b：

用7-[[5-甲氧基-1-(羧酸丁基酰胺)-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例177 [5-甲氧基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸叔丁 基酯 方案B，任选的修饰步骤d：

用4-丁基苯甲酰氯按与实施例116相似的方法制备。 实施例178 [5-甲氧基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸 方案B，任选的脱保护步骤d：

用[5-甲氧基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙 酸叔丁基酯按与实施例117相似的方法制备。 实施例179 7-[[5-甲氧基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] 乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺

用[5-甲氧基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-吲哚-3-基]-乙 酸和7-氨基-庚酸二乙基酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例180 7-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用7-[[5-甲氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3 基]-乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。 实施例181 8-[[5-甲氧基-2甲基-1H-吲哚3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲 基丁基-酰胺 方案A，步骤a： 用[5-甲氧基-2-甲基吲哚-3基]-乙酸和8-氨基-辛酸甲 基-丁基-酰胺盐酸盐按与实施例3相似的方法制备。 实施例182 8-[[5-羟基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基 -丁基-酰胺 方案A，任选的脱保护步骤b：

用8-[[5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛 酸甲基-丁基-酰胺按与实施例27相似的方法制备。

本发明还提供一种抑制肿瘤发展的方法，特别是显示雌激素受体失控 表达的肿瘤。更具体地讲，本发明提供一种在需要治疗的患者中抑制雌激 素受体表达的方法，包括给予所述患者本发明通式化合物。

在另一实施方案中，本发明提供一种治疗患有肿瘤疾病的患者的方 法，包括给予所述患者抗肿瘤治疗有效量的本发明通式化合物。

本文所用术语“肿瘤疾病”指以迅速增殖的细胞生长或肿瘤为特征的 异常状态或状况。用式I化合物治疗特别是有用的肿瘤疾病包括：白血病， 例如但不限于：急性成淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、急性成髓 细胞白血病和慢性髓细胞白血病；癌和腺癌，例如但不限于：宫颈癌、乳 腺癌、前列腺癌、食道癌、胃癌、小肠癌、结肠癌、宫颈癌、卵巢癌和肺 癌、肉瘤，例如但不限于oesteroma、骨肉瘤、脂肪瘤、脂肉瘤、血管瘤、 血管肉瘤、黑瘤，包括不含黑色素的和含黑色素的黑瘤；混合类型的肿瘤， 如但不限于：瘤肉瘤、淋巴样组织型、滤泡网、细胞网瘤和霍奇森病。特 别优选用本发明化合物治疗的肿瘤疾病是雌激素依赖性肿瘤疾病，包括； 乳腺、卵巢、子宫和宫颈的肿瘤。

本文所用“抗肿瘤治疗有效量”指本发明化合物在单剂量或多剂量给 予患者时，对控制肿瘤生长或延长病人存活期超出无这种治疗时的预期存 活期的有效量。本文所用“控制肿瘤生长”指减慢、阻断、抑制或终止其 生长和转移，而不一定指肿瘤的完全消除。

本发明的另一实施方案是通过雌激素受体防止雌激素诱发的转录的方 法。从而，本发明包括治疗或缓解一些疾病症状的方法，在这些疾病中雌 激素受体的过量表达或被雌激素激活引起自身免疫病或对此相关症状起作 用。因此，本发明提供一种治疗或缓解自身免疫病症状的方法，自身免免 病如为多发性硬化、类风湿性关节炎、胰岛素依赖性糖尿病、Graves病、 重症肌无力、寻常天疱疮和全身性红斑狼疮。

基于标准的临床和实验室试验和操作，作为本领域技术人员的主治医 生容易鉴别出需要用如本发明化合物的药物治疗的病人。

式I化合物的有效量是当单剂或多剂给予患者时，对提供抗肿瘤发生 效果有效的量。抗肿瘤发生效果指减缓、阻断、抑制或防止肿瘤细胞进一 步发展。抗肿瘤发生效果还指减缓、阻断、抑制或降低细胞中雌激素受体， 这些细胞显示或具有高于雌激素平均数的较大危险。

作为本领域技术人员的主治医生通过使用已知技术和观察在类似情形 下所得结果，易于确定式(I)化合物的抗肿瘤发生的有效量。在确定有效 量或剂量时，主治医生要考虑多种因素，包括但不限于：哺乳动物种类， 其大小、年龄和一般健康；所涉及的具体病；疾病的程度或累及或严重性； 个体患者的反应；服用的具体化合物；给药方式；所给制剂的生物利用度 特征；选择的给药方案；联合用药；和其他相关情形。

在另一实施方案中，本发明提供一种预防性治疗有发生肿瘤病状危险 的患者的方法，包括给其服用抗肿瘤预防有效量的式(I)化合物。

本文所用“抗肿瘤预防有效量”指式(I)化合物在单剂或多剂给予 患者时，在防止或延迟肿瘤疾病发生中有效的量。

对需要预防性治疗肿瘤病的患者的鉴别在本领域技术人员的能力和知 识范围内。鉴别有发生肿瘤疾病危险的患者的方法是医学领域中已知和认 可的，如发生肿瘤疾病的家族史和存在与肿瘤疾病发生相关的危险因素。 本领域熟练的临床医生利用临床试验、体检和医史/家族史，易于鉴别出有 发生肿瘤病危险的患者，从而易于确定某个体是否需要肿瘤病预防治疗的 患者。

式I化合物的有效量预期在约1μg/kg/天到约500mg/kg/天之间变化。 优选的量预期在约0.01-50mg/kg/天之间变化。

在治疗患者时，式I化合物可以任何能使该化合物以有效量可生物利 用的形式或方式给药，包括口服和胃肠外途径。例如，式I化合物可经口服、 皮下、肌肉、静脉内、透皮、鼻内、直肠内等方式给药。一般优选口服给 药。制剂领域中的技术人员根据所选化合物的具体特征、待治病状、疾病 阶段、病人的反应和其他其关情形，易于选择恰当的给药形式和方式。

这些化合物可以单独给药，或与药学上可接受的载体或赋形剂结合呈 药物组合物的形式，载体或赋形剂的比例和性质由所选化合物的溶解度和 化学性质、选择的给药途径和标准的药学实践来确定。尽管本发明化合物 本身是有效的，但为了稳定性、结晶方便、提高溶解度等目的，可将它们 配制成其药学上可接受的酸加成盐形式给药。优选式I化合物以20％ DMSO/水中悬液形式给药。

在另一实施方案中，本发明提供含有与一种或多种惰性载体混合或以 其他方式结合的式I化合物的组合物。这些组合物可用作如检测标准、进行 原料运输的方便工具，或药物组合物。惰性载体可以是不降解或不以其他 方式与式I化合物共价反应的物质。适当惰性载体的实例有水；水性缓冲 液，如一般用于高效液相色谱(HPLC)分析中的那些；有机溶剂，如乙 腈、乙酸乙酯、己烷等；和药学上可接受的载体或赋形剂。

更具体地讲，本发明提供含有与一种或多种药学上可接受的载体或赋 形剂混合或以其他方式结合的式I化合物的药物组合物。

按药学领域中熟知的方法制备药物组合物。载体或赋形剂可以是能作 为活性成分载体或介质的固体、半固体、或液体物质。适当的载体或赋形 剂是本领域熟知的。可使药物组合物适于口服或胃肠外使用，包括表皮使 用，可以片剂、胶囊、拴剂、溶液、悬液等形式对患者给药。

本发明化合物可以口服给药，例如与惰性稀释剂或与可食性载体一 起。它们可被包含在明胶胶囊中或压制在片剂中。为口服治疗给药目的， 可将化合物掺在赋形剂中，并以片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬乳剂、糖浆、 糯米纤囊剂、橡皮糖等形成使用。这些制剂应含有至少4％的本发明的化 合物(活性成分)，但可根据特定的剂型而不同，可方便地为剂量单位重 的4％到约70％。组合物中化合物的量应是能获得适当剂量的量。制备本 发明的优选组合物和制剂使每个口服剂量单位形成含有5.0-300mg的本发 明化合物。

片剂、丸剂、胶囊、锭剂等还可以含有一种或多种下列佐剂：诸如微 晶纤维素、黄蓍胶或明胶的粘合剂，诸如淀粉或乳糖的赋形剂；诸如藻酸、 Primogel、玉米淀粉等的崩解剂；诸如硬脂酸镁或Sterotex的润滑剂； 诸如胶态二氧化硅的滑动剂；和诸如蔗糖或糖精的甜味剂或诸如薄荷、水 杨酸甲酯或橙味香料的调味剂。当剂量单位形式是胶囊时，除上述类型物 料以外，它可含有诸如聚乙二醇或脂肪油的液态载体。其他剂量单位形式 可含有其他各种调节剂量单位物理形式(如包衣)的物料。例如，片剂或 丸剂可用糖、紫胶、或其他肠衣试剂包衣。糖浆中除本发明化合物外可含 有蔗糖作为甜味剂和一些防瘤剂、染料和着色剂及香料。用于制备这些不 同组合物的物料应是药学纯的，并在使用量下无毒。

对于胃肠外治疗给药，包括表皮给药，可将本发明化合物掺入溶液或 悬液中。这些制剂应含有至少0.1％的本发明化合物，但可在制剂量的0.1％ 到约50％之间变化。这种组合物中本发明化合物的量应是可获得适当剂量 的量。制备本发明的优选组合物和制剂，使胃肠外剂量单位含有5.0mg到 5g的本发明化合物。

这种溶液或悬液还可含有一种或多种下列佐剂：无菌稀释剂如注射用 水、盐水溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶剂；抗菌 剂如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯 合剂如乙二胺四乙酸；缓冲剂如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐以及调节渗透 压的试剂如氯化钠或葡萄糖。胃肠外制剂可包含于玻璃或塑料制含成的 安瓿、一次性注射器或多剂量小瓶中。

对于具有特定总体应用的任何一组结构相关化合物来说，在其最终应 用中优选通式化合物中的一些基团和构型。下列具体的式I化合物是特别优 选的： 8-[[5-羟基-1-(4氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺(MDL101，906)； 8-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺(MDL103，324)； 8-[[5-羟基-1-甲基-2-[(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺(MDL103，134)； 5-羟基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸[8-(丁基-甲基-氨基甲酰 基)-辛基]-酰胺； 8-[[5-羟基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -辛酸甲基-丁基-酰胺(MDL105，813)； 8-[[5-乙酰氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺(MDL104，401)； 8-[[5-乙酰氧基-1-甲基-2-[(4-乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-乙酰氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺(MDL103，494)； 7-[[5-乙酰氧基-1-(4-丁基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3- 基]-乙酰氨基]-庚酸二乙基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基] -庚酸甲基-苯基-酰胺(MDL103，005)； 7-[[5-乙酰氧基-1-苯甲酰-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-庚酸甲基-苯基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺(MDL105，517)； 8-[[5-乙酰氧基-1-(4-甲氧基苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[1-苄基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰 胺(MDL103，948)； 8-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-辛酸二乙基-酰胺(MDL104，631)； 8-[[5-乙酰氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸二乙基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺(MDL103，623)； 7-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 6-[[5-羟基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺(MDL105，643)； 6-[[5-乙酰氧基-1-(4-氯苯甲酰)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] 乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺； 7-[[5-羟基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基]-乙 酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺(MDL104，261)； 7-[[5-乙酰氧基-1-(3-苯基丙基)-2-甲基-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-庚酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-羟基-1-苄基-2-(4-氟苯基)-1H-吲哚-3-基]-乙酰 氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺(MDL103，970)； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-(4-氟苯基)-1H-吲哚-3-基] -乙酰氨基]-辛酸甲基-丁基-酰胺； 8-[[5-氟-1-苄基-1H-吲哚-3-基]-乙酰氨基]-辛酸甲基- 丁基-酰胺(MDL104，822)； 8-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酰氨基]-辛酸丁基-酰胺(MDL104，262)； 8-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-辛酸丁基-酰胺； 6-[[5-羟基-1-苄基-2-[(4-羟基)苯基]-1H-吲哚-3-基]- 乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺(MDL104，982)； 6-[[5-乙酰氧基-1-苄基-2-[(4-乙酰氧基)苯基]-1H-吲哚-3 -基]-乙酰氨基]-己酸甲基-丁基-酰胺；

下列研究证明式I化合物的实用性。这些研究应理解为仅仅是说明性 质的，而绝无意限制本发明的范围。本文所用以下术语的含义如下：“mL” 指微升浓度；“g”指克；“μM”指微摩尔浓度；“单位”指国际接受的 蛋白量度；“S.D.”指标准差；“nmol”指纳摩尔；“mg”指毫克；“ng” 指纳克；“IMEM”指改进的最小基本培养基；“ER”指雌激素受体； “rpm”指每分钟转(数)；“HBSS”指Hanks平衡盐溶液；“PCV 指收集细胞体积。 实施例94 核的、胞液的和全细胞的雌激素受体提取

将MCF-7人乳腺癌细胞单层用H BSS洗涤一次，从培养皿中刮出 转移到有5ml HBSS的15ml锥形管中。250×g离心5分钟将细胞沉降， 悬浮在1ml HBSS中，用1.5ml微量离心管在一台式离心机中以2500rpm 离心沉降。加入2PCV的裂解缓冲液(25mM HEPES，pH7.8，50mM KCl，0.5％Nonidet P40，2mM二硫苏糖醇，0.2mM苯基甲磺酰氟， 0.05mg/ml亮抑蛋白酶肽，0.05mg/ml抑蛋白酶肽，0.0025mg/ml抑胃蛋 白酶肽，0.005mg/ml抗蛋白酶)，将细胞保持在冰上15分钟。裂解的细 胞以10000×g离心3分钟，倾出上清液，并保留作为胞液部分。将沉淀 悬浮在2PCV的提取缓冲液中(25mM HEPES，pH7.8，500mM KCl，10 ％甘油，2mM二硫苏糖醇和上述蛋白酶抑制剂)，在4℃倒置混合20分 钟，并以10000×g离心20分钟。倾出上清液并保留作为核提取物。核提 取物和胞液都对透析缓冲液(25mM HEPES，pH7.8，50mM KCl，10 ％甘油，2mM二硫苏糖醇和上述蛋白酶抑制剂)透析2小时。核部分和胞 液部分都冷冻至-80℃保存，直到用于迁移率变动分析和雌激素受体含量 测定。

按Reese和Katzenellenbogen，Nuc.Acids Res.，19：6595-6602(1991)的 方法(有些修改)制备肿瘤细胞的全细胞提取物。细胞单层用HBSS洗一 次，然后乱到HBSS中并离心沉降(5分钟，250×g)。重悬于1ml HBSS 中后，再于4℃以250×g将细胞沉降5分钟。将细胞层重悬于含20mM Tris， pH7.5，10％甘油(v/v)，0.5M氯化钠和0.5％NP-40(V/V)的裂 解/提取缓冲液中，并在冰上孵育25分钟，然后上清液于4℃对25mM HEPES，pH7.8，10％甘油(v/v)，0.5mM二硫苏糖醇和50mM氯化钾 透析2小时。裂解/提取缓冲液和透析缓冲液中都含有蛋白酶抑制剂，其包 括0.5mM苯基甲磺酰氯，0.05mg/ml亮抑蛋白酶肽，0.05mg/ml抑蛋白酶 肽，0.00-25mg/ml抑胃蛋白酶肽和0.005mg/ml抗蛋白酶。透析后的全细 胞提取物分等份储存于-80℃直到使用。

用BIO-RAD试剂盒按制造商的说明测定核部分和胞液部分的蛋白 浓度。 核提取物和全细胞提取物中雌激素受体的定量

用ER-EIA单克隆试剂盒(Abbott Laboratories，Diagnostic Division生产)按试剂盒的说明对肿瘤细胞核提取物和全细胞提取物中雌激 素受体水平进行定量。

                     表1     化合物号     IC50*μM     103，494     28+(WCE)     103，005     27     105，517     16     101，906     19/8.6     103，948     14+(WCE)     104，631     16     104，261     23.5     103，623     16/17     105，643     19     103，970     16     104，822     12     104，262     25     103，324     18     104，982     20     104，401     28

        *除非另有说明，测定的IC50值是核提取物中

          雌激素受体的。

         +WCE指令细胞提取物中雌激素受体的IC50值。 实施例95 两数字间一斜线表示两次独立试验的结果。 通过雌二醇与MCF-7雌激素受体的结合测定吲哚衍生物的相对结合亲和 力

按照Katzenellenbogen J.A等Biochem.，12：4085-4092(1973)中描述 的方法进行竞争性结合试验，以确定试验化合物对MCF-7人乳腺肿瘤细 胞提取的雌激素受体的相对结合亲合力(RBA)。简单地讲，用几个浓度 的雌二醇(E2)在有或无试验化合物时进行竞争性结合试验而确定RBA。 在4℃保温16-18小时后，将未结合的[3H]E2与ER结合的[3H]E2分离。 确定IC50并按下式计算RBA：

RBA＝IC50 E2/IC50化合物×100

MDL101，906、103，324和105，813不显著抑制雌二醇与MCF-7ER 的结合(在100或200nM剂量下抑制一般小于10％)。

实施例96

在DNA迁移率变动分析中对雌激素受体与雌激素反应因子结合的抑 制

按Kumer，V.和Chambon.P.，Cell，55：145-156(1988)中描述的方法进 行DNA迁移率变动分析。简言之，在每个反应管中加入0.01mg核提取物， 2μg多聚dIdC、50mM NaCl、1mM二硫苏糖醇和10mM Tris，pH7.5， 总体积0.01ml，混合物在室温保持10分钟。加入32p-标记的雌激素反应 因子[ERE](一种含有保守的雌激素受体结合序列的35bp寡核苷酸，如 Kumar，V和Chambon，P.，Cell，55：145-156(1988)中所述)，并在室温继 续温育20分钟。加入1μg电泳样品缓冲液(50％甘油、0.02％二甲苯青、 0.02％溴酚蓝、10mM Tris pH75)后，载样于6％非变性聚丙烯酰胺凝胶 上。电泳后将凝胶干燥并对柯达X-O Mat放射自显影膜暴光，以确定结合 的和未结合的相对迁移率。还用磷造影对凝胶进行定量分析，以确定胶上 每个带的放射活性量。

用各种浓度的MDL 101，906获得以下结果，以迁移ERE寡聚物的积 分体积占对照的百分比表示：2μM显示81％抑制：5μM显示76％抑制； 10μM显示46％抑制；及20μM显示38％抑制。MDL101，906的IC50为 8.5μM。

用各种浓度的MDL105，813获得以下结果，以迁移ERE寡聚物的积分 体积占对照的百分比表示：2μM显示7.6％抑制，5μM显示60％抑制； 10μM显示84％抑制，20μM显示33％抑制，及30μM显示30％抑制。

用各种浓度的MDL103，324获得以下结果，以迁移ERE寡聚物的积分 体积占对照的百分比表示：2μM显示60％抑制，5μM显示68％抑制， 10μM显示58％抑制，20μM显示46％抑制，及30μM显示50％抑制。 MDL103，324的IC50为8.5μM。

用各种浓度的MDL104，401获得以下结果，以迁移ERE寡聚物的积分 体积占对照的百分比表示：2μM显示120％抑制，5μM显示92％抑制， 10μM显示59％抑制，20μM显示49％抑制，30μM显示44％抑制。 MDL 103，324的IC50为18μM。 实施例97 MCF-7人乳腺肿瘤细胞中雌激素受体的耗竭

测定了吲哚衍生物对核ER和胞液ER的处理效果。简单讲，将5-7 ×106 MCF-7细胞加到(50mm培养皿中，在补有5％活性炭解吸的牛 血清的IMEM中生长48小时。补充培养基，加入2μM到30μM范围内浓 度的试验化合物，培养细胞24小时。刮出细胞，如上所述制备核部分和胞 液部分。通过酶免疫分析(Abott)按制造商的说明测定ER含量。表2 综合了所得结果。

                      表2  处理 核ER占对 照的百分数 胞液ER占 对照的百 分数  2μM MDL  101，906     108  5μM MDL  101，906     94  10μM MDL  101，906     81  20μM MDL  101，906     64     77  2μM MDL  105，813     75  5μM MDL  105，813     86  10μM MDL  105，813     83  20μM MDL  105，813     53     33  30μM MDL  105，813     37  2μM MDL  103，324     96  5μM MDL  103，324     106  10μM MDL  103，324     82  20μM MDL  103，324     56     36  30μM MDL  103，324     37 实施例98 抑制雌激素刺激的萤光素酶报道质粒的转录

用以前已有描述的雌二醇依赖性萤光素酶报道质粒在MCF-7细胞中 研究MDLl01，906对抑制雌二醇诱导的转录的影响。

在以前描述的雌激素报道质粒基础上构建了雌激素报道质粒 pVETLUC。Shapiro.D.J.等，Prog.Hormone Res.，45：29-64(1989)， Chambon，P.等Cell，51(6)：941-951(1987)。简言之，质粒pVE2tk-LUC含 有两拷贝的卵黄生成素雌激素反应因子(ERE)，5’-AGC TTC TTA TCC AGG TCA GCG TGA CCG TCT TAT CCA GGT CAG CGT FAC CG-3’，ERE与编码胸苷激酶(tk)启动子的180bp片段[ Mcknight，S.L.  和Kingsburg，R.，Science 217：316-324(1982)]相邻，它们被克隆在带有萤光 素酶(Luc)报道基因的pGL2-基本载体(Promega Corp.)中。

人乳腺肿瘤细胞MCF-7用质粒pVETLUC或阳性对照质粒 pCMVβgal(含有病毒增强子控制下的β-半乳糖苷酶基因)[Clontech Laboratories，Inc.；pCMBβ]通过电穿孔进行瞬时转染。

将MCF-7细胞保持在加有5％胎牛血清的IMEM中。在电穿孔的 那天，细胞用胰蛋白酶消化，以2×106细胞/ml悬浮在Opti MEM中。向 电穿孔室(GIBCO-BRL)中的细胞悬液中加入质粒DNA(50μg/ml pVETLU或20μg/ml pCMVβgal)，并施加电压(500伏/cm，800微法 拉弟，0℃，低电阻)。1分钟恢复期以后，将细胞重悬于生长培养基中， 以2×104细胞/孔铺在96孔板上。第二天向细胞中加入无血清而加有 0.1mg/ml纤连蛋白、ITS+和庆大霉素的IMEM。向各孔中加入雌二醇和 试验化合物或仅雌二醇，培养18-22小时。用HBSS洗涤一次并加入120μl 裂解缓冲液(Promega)收集细胞。室温搅拌20分钟后，用一发光计分 析裂解液的萤光素酶活性(Promega分析系统)或β-半乳糖苷酶活性 (Galacto-Light分析系统，Tropix)。用BioLinks软件(Dynatech) 从log-log曲线匹配确定IC50值。

MDL101，906抑制了雌二醇依赖性萤光素酶报道质粒在MCF-7细胞 中的雌激素依赖性转录，IC50为5.2μM。MDL103，324的IC50为2.7μM。 MDL105，813的IC50为8.4μM。 实施例99 对MCF-7人乳腺肿瘤细胞和他莫昔芬抗性LY-2细胞的抑制

按Bronzert，D.A.等Endocrin.，117(4)：1409(1985)中所述方法，测得 MDL 101，906分别以IC50值3.8和4.7μM抑制MCF-7和他莫昔芬抗性 LY-2细胞的生长，细胞生长在补有0.001mg/ml胰岛素的培养液中。 实施例100 对MCF-7细胞生长的抑制

在侧位皮下套针种植MCF-7肿瘤(约3mm3)14天后，向雌性nu/nu 小鼠腹膜内注射MDL101，906(在20％DMSO/水中的悬液)，与对照相 比减小了肿瘤的体积，按Brunner，N，等Cancer Res.49：1515-1520(1989) 中所述的实验方法进行。表3中综合了所得结果：

                    表3 肿瘤种植后   的天数   对照   n＝5  10mg/kg   n＝5  20mg/kg  n＝5  50mg/kg   n＝5  100mg/kg   n＝5     14  65±6  49±18  58±9  77±14  56±10     22  147±7  111±36  140±16  143±13  81±16     29  240±18  155±43  197±30  178±53  110±24     36  376±26  255±70  282±38  291±79  170±41

用MDL 101，906处理造成肿瘤体积随时间以剂量依赖方式减小。最高 剂量的MDL 101，906在肿瘤种植后36天时比对照减小55％。 实施例101 处理后MCF-7人乳腺肿瘤细胞中雌激素受体和GAPDH mRNA水平降 低

人乳腺肿瘤MCF-7细胞(4×106)生长在补有5％活性炭解吸的 胎牛血清和胰岛素的IMEM中。用30μM药处理24小时后，按异硫氰酸 胍法，用5Prime-3Prime公司的RNA制备试剂盒按制造商的说明分离总 RNA。用甲醛凝胶电泳分离RNA并转移到尼龙膜上。先将膜与1.8kb ER cDNA(Tora.L.等EMBO J.8(7)：1981-1986(1989)和Green.S. 等Nature 320：134(1986)中公开的序列)杂交，解吸(strip)，然后与阳 性对照GAPDH探针杂交(甘油醛3-磷酸脱氢酶：探针序列公开于Tso.J. Y.等，Nucleic Acids Res.，13(7)：2485(1985))。按Johnston，R.F等 Electrophoresis 11：355-360(1990)的方法，用分子动力学磷造影 仪(Molecular Dynamics Phosphoimager)测定放射性mRNA带的强度。 结果综合在表4中。

                               表4     处理  雌激素   受体  GAPDH   ER/GAPDH  均值   ％对照     对照1  24，504  5，534     4.43  3.73     100     对照2  22，646  7，454     3.03     MDL  101，9061  5，142  5，227     0.98  0.53     18     MDL  101，9062  1，916  5，077     0.38     MDL  103，3241  5，128  8，300     0.61  0.74     20     MDL  103，3242  7，077  8，118     0.87     MDL  105，8131  5，288  6，996     0.75  0.63     17     MDL  105，8132  2，418  4，830     0.5 实施例102 对MCF-7人乳腺肿瘤细胞的成集落分析

将MCF-7细胞(107)加到100mm组织培养皿中，让其粘附24小 时，然后用MDL101，906或ICI164，384处理24小时。用胰蛋白酶/EDTA 将细胞从平皿中移出，离心洗涤2次。对细胞计数，将每个处理组中500 个细胞加到6-孔培养皿的三个孔中。让细胞生长22天。对直径1mm或 以上的集落计数。结果综合于表5中。

               表5  处理  集落数  ±S.D.   ％对照  对照  33±7     100  10μM MDL  101，906  30±10     91  20μM MDL  101，906  27±5     82  50μM MDL  101，906  12±2     36  0.1μMICI  164，384  48±6     145  1.0μM  ICI164，384  40±2     121

本申请是1994年2月22日提交的08/200057号申请的部分继续申请。