用于校验血细胞分析仪的质控品和校准品及其制备方法
专利汇可以提供用于校验血细胞分析仪的质控品和校准品及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 是一种用于校验 血细胞分析仪 的质控品和校准品，它们对各种液体进行了整合，细胞处理液融合了抗凝、保存血细胞和细胞 固化 稳定的作用；其次优化了制造工艺， 采血 后立刻进行预处理，一来保证血液不 凝固 不溶血，二来稳定细胞环境，保持血液的新鲜活性；再加入细胞处理液反复漂洗和固化血细胞，最终实现血细胞的固化，同时不失其如新鲜血液的活性性能，这道工艺不仅决定血细胞的鲜活程度，还决定着血细胞存活的时效，接着通过离心和分离技术，提取所需要的血细胞，最后加入不同浓度的细胞模拟物，从而合成完整的标准物质，这种工艺过程的生产成本低，且生产出来的校准品和质控品的成品率高，使合成出来的质控品和校准品的活性稳定，时效更长。，下面是用于校验血细胞分析仪的质控品和校准品及其制备方法专利的具体信息内容。
1.一种用于校验血细胞分析仪的质控品，其特征在于：包括有猴全血、细胞处理液、羟乙基淀粉40氯化钠注射液和细胞模拟物，其中细胞处理液分4～6次加入到猴全血中来制得细胞固化液，除最后一次加入的细胞处理液以外，每次在加入细胞处理液后充分混匀、离心并将分离出来的上清液全部舍弃；首次加入的细胞处理液与猴全血之间的配比为1：
2.5～5，往后每次加入的细胞处理液的份量与上一次分离、舍弃的上清液相等；在所得细
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胞固化液中按1.5～6.5×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞后经离心分离出上清液，在舍弃75%~85%体积的上清液后再加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，在此：
所述的细胞处理液的原料组成有：NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，它们的配比为：5～10g：3～6g：4～10g：1～3g：20～50g：10～50g：0.5～5g：
0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml；
所述的细胞模拟物的原料是哺乳动物的血细胞或直径1～10μm的乳胶颗粒。
2.根据权利要求1所述的用于校验血细胞分析仪的质控品，其特征在于：首次加入的细胞处理液与猴全血之间的配比为1：5；
所述NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水的配比为6g：5.25g：
5.5g：2g：30g：20g：1g：0.1ml：0.1ml：0.5g：5g：1000ml。
3.根据权利要求1所述的用于校验血细胞分析仪的质控品，其特征在于：首次加入的细胞处理液与猴全血之间的配比为1：4；
所述NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水的配比为6g：5.25g：
5.5g：2g：30g：20g：1g：0.05ml：0.05ml：0.5g：6g：1000ml。
4.一种用于校验血细胞分析仪的质控品的制备方法，其包括有如下步骤：
1)、制备细胞处理液：按配比：5～10g：3～6g：4～10g：1～3g：20～50g：10～
50g：0.5～5g：0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml的比例来分别称取或量取NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2)、采血预处理：采猴血至已消毒的玻璃容器，将细胞处理液以1：2.5～5的比例立即加入其猴血中，充分混匀并加盖密封，静置1~3小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行2～4次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
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5）、分离提取：取已过滤的血液，按1.5～6.5×10 /L的单位容量来提取所需的猴全血红细胞；再次混匀并离心分离出上清液，抽出并舍弃75%～85%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：加入哺乳动物的血细胞或直径1～10μm的乳胶颗粒作为细胞模
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拟物，当它用来替代白细胞时，则按2～25×10/L的单位容量来添加，当用来替代血小板
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时，则按30～900×10/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
5.根据权利要求4所述的用于校验血细胞分析仪的质控品的制备方法，其特征在于：
在所述的步骤二中，将细胞处理液以1：5的比例立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置2小时；
在所述的步骤三中，重复进行加入与上一道工序重量相等的细胞处理液的次数为3次；
在所述的步骤五中，抽出并舍弃80%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液。
6.根据权利要求4所述的用于校验血细胞分析仪的质控品的制备方法，其特征在于：
在所述的步骤二中，将细胞处理液以1：4的比例立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置3小时；
在所述的步骤三中，重复进行加入与上一道工序重量相等的细胞处理液的次数为3次；
在所述的步骤五中，抽出并舍弃80%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液。
7.一种用于校验血细胞分析仪的校准品，其特征在于：包括有猴全血、细胞处理液、羟乙基淀粉40氯化钠注射液和细胞模拟物，其中细胞处理液分4~6次加入到猴全血中来制得细胞固化液，且首次加入的细胞处理液与猴全血之间的配比为1：2.5～5，往后每次加入的细胞处理液的份量与上一次分离、舍弃的上清液相等；在所得细胞固化液中按
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1.5~6.5×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞后经离心分离出上清液，在舍弃75%~85%体积的上清液后再加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，在此：
所述的细胞处理液的原料组成有：NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，它们的配比为：5～10g：3～6g：4～10g：1～3g：20～50g：10～50g：0.5～5g：
0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml；
所述的细胞模拟物的原料是直径1～10μm的乳胶颗粒。
8.根据权利要求7所述的用于校验血细胞分析仪的校准品，其特征在于：首次加入的细胞处理液与猴全血之间的配比为1：5；
所述NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水的配比为6g：5.25g：
5.5g：2g：30g：20g：1g：0.1ml：0.1ml：0.5g：5g：1000ml。
9.根据权利要求7所述的用于校验血细胞分析仪的校准品，其特征在于：首次加入的细胞处理液与猴全血之间的配比为1：4；
所述NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水的配比为6g：5.25g：
5.5g：2g：30g：20g：1g：0.05ml：0.05ml：0.5g：6g：1000ml。
10.一种用于校验血细胞分析仪的校准品的制备方法，其包括有如下步骤：
1)、制备细胞处理液：按配比：5～10g：3～6g：4～10g：1～3g：20～50g：10～
50g：0.5～5g：0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml的比例来分别称取或量取NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2)、采血预处理：采猴血至已消毒的玻璃容器，将细胞处理液以1：2.5～5的比例立即加入其猴血中，充分混匀并加盖密封，静置1～3小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行2～4次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
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5）、分离提取：取已过滤的血液，按1.5～6.5×10 /L的单位容量来提取所需的猴全血红细胞；再次混匀并离心分离出上清液，抽出并舍弃75%～85%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：加入直径1～10μm的乳胶颗粒作为细胞模拟物，当它用来替
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代白细胞时，则按2～25×10/L的单位容量来添加，当用来替代血小板时，则按30～
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900×10/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
11.根据权利要求10所述的用于校验血细胞分析仪的校准品的制备方法，其特征在于：
在所述的步骤二中，将细胞处理液以1：5的比例立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置2小时；
在所述的步骤三中，重复进行加入与上一道工序重量相等的细胞处理液的次数为3次；
在所述的步骤五中，抽出并舍弃80%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液。
12.根据权利要求10所述的用于校验血细胞分析仪的校准品的制备方法，其特征在于：
在所述的步骤二中，将细胞处理液以1：4的比例立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置3小时；
在所述的步骤三中，重复进行加入与上一道工序重量相等的细胞处理液的次数为3次；
在所述的步骤五中，抽出并舍弃80%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液。
用于校验血细胞分析仪的质控品和校准品及其制备方法
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中按1.5～6.5×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞后经离心分离出上清液，在舍弃
75%~85%体积的上清液后再加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，在此：
所述的细胞处理液的原料组成有：NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，它们的配比为：5～10g：3～6g：4～10g：1～3g：20～50g：10～50g：0.5～5g：
0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml；
所述的细胞模拟物的原料是哺乳动物的血细胞或直径1～10μm的乳胶颗粒。
50g：0.5～5g：0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml的比例来分别称取或量取NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2)、采血预处理：采猴血至已消毒的玻璃容器，将细胞处理液以1：2.5～5的比例立即加入其猴血中，充分混匀并加盖密封，静置1~3小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行2～4次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
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5）、分离提取：取已过滤的血液，按1.5～6.5×10 /L的单位容量来提取所需的猴全血红细胞；再次混匀并离心分离出上清液，抽出并舍弃75%～85%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：加入哺乳动物的血细胞或直径1～10μm的乳胶颗粒作为细胞模
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拟物，当它用来替代白细胞时，则按2～25×10/L的单位容量来添加，当用来替代血小板
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时，则按30～900×10/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
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液的份量与上一次分离、舍弃的上清液相等；在所得细胞固化液中按1.5~6.5×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞后经离心分离出上清液，在舍弃75%~85%体积的上清液后再加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，在此：
所述的细胞处理液的原料组成有：NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，它们的配比为：5～10g：3～6g：4～10g：1～3g：20～50g：10～50g：0.5～5g：
0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml；
所述的细胞模拟物的原料是直径1～10μm的乳胶颗粒。
50g：0.5～5g：0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml的比例来分别称取或量取NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2)、采血预处理：采猴血至已消毒的玻璃容器，将细胞处理液以1：2.5～5的比例立即加入其猴血中，充分混匀并加盖密封，静置1～3小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行2～4次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
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5）、分离提取：取已过滤的血液，按1.5～6.5×10 /L的单位容量来提取所需的猴全血红细胞；再次混匀并离心分离出上清液，抽出并舍弃75%～85%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：加入直径1～10μm的乳胶颗粒作为细胞模拟物，当它用来替
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代白细胞时，则按2～25×10/L的单位容量来添加，当用来替代血小板时，则按30～
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900×10/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
针对专利申请号为201110000498.8的技术方案在配方组分和制造工艺两个方面的缺陷和不足，本发明再次进行了多次实验，首先改良了配方组分，并对各种液体进行了整合，细胞处理液融合了抗凝、保存血细胞和细胞固化稳定的作用。其次优化了制造工艺，采血后立刻进行预处理，一来保证血液不凝固不溶血，二来稳定细胞环境，保持血液的新鲜活性；
再加入细胞处理液反复漂洗和固化血细胞，最终实现血细胞的固化，同时不失其如新鲜血液的活性性能，这道工艺不仅决定血细胞的鲜活程度，还决定着血细胞存活的时效，接着通过离心和分离技术，提取所需要的血细胞，最后加入不同浓度的细胞模拟物，从而合成完整的质控品和校准品，这种工艺过程的生产成本低，且生产出来的质控品和校准品的成品率高，合成出来的质控品和校准品的活性稳定，时效更长，在通过血细胞分析仪测试或人工计数测试时，发现其与人血质控品和校准品有相同的效果。
与上一次分离、舍弃的上清液相等；在所得细胞固化液中按1.5～6.5×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞后经离心分离出上清液，在舍弃75%～85%体积的上清液后再加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，在此：
所述的细胞处理液的原料组成有：NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，它们的配比为：5～10g：3～6g：4～10g：1～3g：20～50g：10～50g：0.5～5g：
0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml。其中，细胞处理液的作用有防止猴全血凝固，为血细胞提供营养，保持血细胞活性，对血细胞进行预处理和固化处理，延长细胞存活寿命；用2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠和3-羟基-3-羧基戊二酸作为抗凝剂，它们形成的缓冲对可以调节和稳定溶液酸碱度pH，维持血液酸碱平衡；NaH2PO4防止红细胞聚集，为红细胞能量代谢提供磷酸盐，减缓2,3-二磷酸甘油酸下降速度；NH4Cl可降低血浆中二氧化碳含量；C6H12O6是红细胞代谢所必需的营养成分，可延长红细胞的保存时间，且防止溶血，并可使细胞中的有机磷消失缓慢，防止红细胞储存的损伤；C6H14O6对细胞膜有保护作用，且不影响细胞膜的功能，从而提高了红细胞的再活率；C5H5N5可促进红细胞ATP合成，延长红细胞的保存期，并增强红细胞放氧功能；C5H8O2和(CH2O)n可以固化细胞；NaN3可以防腐；氯化钠用来调节溶液的渗透压。
可以替代同等级大小细胞，当加入的细胞模拟物用来替代白细胞时，则按2～25×10/L的
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单位容量来添加，当加入的细胞模拟物用来替代血小板时，则按30～900×10/L的单位容量来添加。由于乳胶颗粒稳定，可以保证数量的准确性，并配合不同仪器所需制作不同的固定的直方图或散点图供数据分析。
1)、制备细胞处理液：按配比：5～10g：3～6g：4～10g：1～3g：20～50g：10～
50g：0.5～5g：0.05～1ml：0.05～1ml：0.5～1.5g：1～9g：1000ml的比例来分别称取或量取NaH2PO4，2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，3-羟基-3-羧基戊二酸，NH4Cl，C6H12O6，C6H14O6，C5H5N5，C5H8O2，(CH2O)n，NaN3，氯化钠和纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2)、采血预处理：采猴血至已消毒的玻璃容器，将细胞处理液以1：2.5～5的比例立即加入其猴血中，充分混匀并加盖密封，静置1~3小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行2～4次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液，并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
5）、分离提取：按照细胞数值的高低定离心的次数和提取细胞的数量，取已过滤的血液
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提取所需的猴全血红细胞，并按1.5～6.5×10 /L的单位容量来提取；再次混匀并离心分离出上清液，抽出并舍弃75%～85%体积的上清液，然后加入与刚舍弃的上清液相等体积的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：其中加入的细胞模拟物的原料是哺乳动物的血细胞或直径1～
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10μm的乳胶颗粒，当它用来替代白细胞时，则按2～25×10/L的单位容量来添加，当用来
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替代血小板时，则按30～900×10/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
2）、采血预处理：采1000ml的猴血至已消毒的玻璃容器，将200ml（即按1：5的比例）的细胞处理液立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置1小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行2次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
5）、分离提取：按照细胞数值的高低来决定离心的次数和提取细胞的数量，取已过滤的
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血液，按1.5×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞，再次混匀并离心分离出上清液(约
1000ml)，抽出并舍弃75%体积的上清液（750ml），然后加入与刚舍弃的上清液相等体积（即
750ml）的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
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6）、添加细胞模拟物：加入猫血的血细胞，当猫血用来替代白细胞时，则按2×10/L的
9
单位容量来添加，当用来替代血小板时，则按30×10/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
1）、制备细胞处理液：按重量或体积分别取10g的NaH2PO4，6g的2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，10g的3-羟基-3-羧基戊二酸，3g的NH4Cl，50g的C6H12O6，50g的C6H14O6，5g的C5H5N5，1ml的C5H8O2，1ml 的(CH2O)n，1.5g的NaN3，1g的氯化钠和1000ml的纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2）、采血预处理：采1000ml的猴血至已消毒的玻璃容器，将400ml（即按1：2.5的比例）的细胞处理液立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置3小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行4次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
5）、分离提取：按照细胞数值的高低来决定离心的次数和提取细胞的数量，取已过滤的
12
血液，按6.5×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞，再次混匀并离心分离出上清液(约
800ml)，抽出并舍弃85%体积的上清液（680ml），然后加入与刚舍弃的上清液相等体积（即
680ml）的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：加入直径为10μm的乳胶颗粒来替代白细胞，按25×109/L的单位容量来添加细胞模拟物，而当用来替代血小板时，加入直径为1.5μm的乳胶颗粒来替代，浓度按900×109/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
1）、制备细胞处理液：按重量或体积分别取7.5g的NaH2PO4，4.5g的2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，7g的3-羟基-3-羧基戊二酸，2g的NH4Cl，35g的C6H12O6，30g的C6H14O6，2.75g的C5H5N5，0.52ml的C5H8O2，0.52ml 的(CH2O)n，1g的NaN3，5g的氯化钠和1000ml的纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2）、采血预处理：采750ml的猴血至已消毒的玻璃容器，将200ml（即按1：3.75的比例）的细胞处理液立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置2.5小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行3次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
5）、分离提取：按照细胞数值的高低来决定离心的次数和提取细胞的数量，取已过滤的
12
血液，按4.0×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞，再次混匀并离心分离出上清液(约
600ml)，抽出并舍弃78%体积的上清液（468ml），然后加入与刚舍弃的上清液相等体积（即
468ml）的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：加入直径为6μm的乳胶颗粒来替代白细胞，按13.5×109/L的单位容量来添加细胞模拟物，而当用来替代血小板时，加入直径为3μm的乳胶颗粒来替代，浓度按465×109/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
1）、制备细胞处理液：按重量或体积分别取6g的NaH2PO4，5.25g的2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，5.5g的3-羟基-3-羧基戊二酸，2g的NH4Cl，30g的C6H12O6，20g的C6H14O6，1g的C5H5N5，0.1ml的C5H8O2，0.1ml 的(CH2O)n，0.5g的NaN3，5g的氯化钠和
1000ml的纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2）、采血预处理：采500ml的猴血至已消毒的玻璃容器，将100ml（即按1：5的比例）的细胞处理液立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置2小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行3次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
5）、分离提取：按照细胞数值的高低来决定离心的次数和提取细胞的数量，取已过滤的
12
血液，按2.3×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞，再次混匀并离心分离出上清液(约
400ml)，抽出并舍弃80%体积的上清液（320ml），然后加入与刚舍弃的上清液相等体积（即
320ml）的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：加入直径为6μm的乳胶颗粒来替代白细胞，按7.5×109/L的单位容量来添加细胞模拟物，而当用来替代血小板时，加入直径为2.5μm的乳胶颗粒来替代，浓度按250×109/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
1）、制备细胞处理液：按重量或体积分别取6g的NaH2PO4，5.25g的2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，5.5g的3-羟基-3-羧基戊二酸，2g的NH4Cl，30g的C6H12O6，20g的C6H14O6，1g的C5H5N5，0.05ml的C5H8O2，0.05ml 的(CH2O)n，0.5g的NaN3，6g的氯化钠和
1000ml的纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2）、采血预处理：采500ml的猴血至已消毒的玻璃容器，将125ml（即按1：4的比例）的细胞处理液立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置3小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将之全部抽出并舍弃，再次往里加入与刚舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀、离心、分离得到第二次的上清液，也将之全部抽出并舍弃，以此重复进行3次的加入与上一道工序舍弃的上清液体积相等的细胞处理液、并混匀、离心、抽出和舍弃全部上清液，最后加入的是与最后一次舍弃的上清液相等体积的细胞处理液，充分混匀，静置成为猴血固化液；
4）、过滤：采用输血器来过滤猴血固化液中的杂质及凝块，充分混匀后滤出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血现象破坏细胞，随后检测细胞含量及其它参数；
5）、分离提取：按照细胞数值的高低来决定离心的次数和提取细胞的数量，取已过滤的
12
血液，按5.3×10 /L的单位容量来提取猴全血红细胞，再次混匀并离心分离出上清液(约
390ml)，抽出并舍弃80%体积的上清液（312ml），然后加入与刚舍弃的上清液相等体积（即
312ml）的羟乙基淀粉40氯化钠注射液，充分混匀，静置；
6）、添加细胞模拟物：加入直径为6μm的乳胶颗粒来替代白细胞，按19×109/L的单位容量来添加细胞模拟物，而当用来替代血小板时，加入直径为4μm的乳胶颗粒来替代，浓度按695×109/L的单位容量来添加；
7）、测试并赋值：随机抽取若干分装在试管的血液，在相应的血细胞分析仪上按要求测试或通过颗粒计数仪反复检测各种细胞的含量并计算赋值不确定度。
1）、制备细胞处理液：按重量或体积分别取10g的NaH2PO4，4g的2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠，5g的3-羟基-3-羧基戊二酸，2g的NH4Cl，40g的C6H12O6，30g的C6H14O6，2g的C5H5N5，0.5ml的C5H8O2，0.5ml 的(CH2O)n，1g的NaN3，6g的氯化钠和
1000ml的纯水，然后混合搅拌均匀，经过滤、灭菌后备用；
2）、采血预处理：采600ml的猴血至已消毒的玻璃容器，将200ml（即按1：3的比例）的细胞处理液立即加入其中，充分混匀并加盖密封，静置3小时；
3）、细胞固化处理：取上述猴血预处理品，充分混匀、离心、分离得到首次的上清液，将
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