一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法及其应用
阅读：66发布：2020-05-08
专利汇可以提供一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法及其应用，属于食品保鲜技术领域。其制备方法包括以下步骤：将壳聚糖溶解于 水 中，加入 醋酸 和甘油，并调节pH值为3.5～4.5，然后进行加热搅拌得成膜溶液；向成膜溶液中加入桑叶多酚溶液进行均质，静置后进行超声脱气处理，即得桑叶多酚复合保鲜剂。本发明制得的桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬中具有良好的保水性、保鲜性和 阻气性 ，不易染菌，显著降低了鲜切果蔬贮藏的腐烂、失水，增加了 货架期 ，延长了鲜切果蔬的寿命，在食品保鲜剂中具有极大的推广应用价值。，下面是一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法及其应用专利的具体信息内容。
1.一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将壳聚糖溶解于水中，加入醋酸和甘油，并调节pH值为3.5～4.5，然后进行加热搅拌得成膜溶液；
S2、将桑叶多酚粉末溶于水中制成桑叶多酚溶液，所述桑叶多酚粉末与水按g:L计为5:
1；
S3、向成膜溶液中加入桑叶多酚溶液进行均质，静置后进行超声脱气处理，即得桑叶多酚复合保鲜剂。
2.根据权利要求1所述一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法，其特征在于，所述S1中，壳聚糖、水、醋酸与甘油按g:mL:mL:g计为2:100:1:1。
3.根据权利要求1所述一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法，其特征在于，所述S2中，成膜溶液与桑叶多酚溶液的体积比为1:50。
4.根据权利要求1所述一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法，其特征在于，所述桑叶多酚粉末的制备方法包括以下步骤：
1)桑叶粉的制备：取新鲜桑叶，洗净，干燥，粉碎，即得桑叶粉；
2)粗提：将桑叶粉加入到体积浓度为70％的乙醇溶液中进行超声提取，然后过滤，将滤液进行真空浓缩，离心，即得桑叶多酚浓缩液；
3)纯化：将大孔树脂放入层析柱中，同时缓慢加入桑叶多酚浓缩液，然后用水洗脱至洗脱水澄清，以除去水溶性物质，再用体积浓度为60％的乙醇溶液洗脱至洗脱液澄清，将洗脱液进行真空浓缩，使浓缩液中的总酚含量在18.5～19.5mg GAE/g dw之间，将浓缩液冷冻干燥成桑叶多酚粉末，即可。
5.根据权利要求4所述一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中，桑叶粉与乙醇溶液的质量比为3:97。
6.根据权利要求4所述一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中，超声提取的功率为400W，温度为50℃，时间为1h。
7.根据权利要求4所述一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中，乙醇溶液中乙醇的体积浓度为70％。
8.如权利要求1至权利要求7任一所述制备方法制得的桑叶多酚复合保鲜剂。
9.如权利要求8所述的桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬中作为鲜切果蔬保鲜剂的应用。
10.根据权利要求9所述桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬中作为鲜切果蔬保鲜剂的应用，其特征在于，所述桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬中作为鲜切果蔬保鲜剂的应用方法为：待果蔬采摘、洗净、晾干鲜切后直接置于制备好的桑叶多酚复合保鲜剂中，保证桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬表面成膜但不形成液滴为宜，取出后置于筛盘上，在无菌环境中晾干，然后包装于自封保鲜袋中，即可。
一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法及其应用
技术领域
[0001] 本发明属于食品保鲜技术领域，具体涉及一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法及其应用。
背景技术
[0002] 桑叶在我国有丰富的资源，是“药食同源”的植物。传统的桑叶只用于养蚕，用途单一，每年有大量桑叶过剩而浪费。桑叶具有类似人参的补益和抗衰老作用，但是桑叶的综合利用率很低。目前还没有很好的方法提高桑叶产品附加值和桑资源利用率，从而造成农产品原料的浪费。充分提高桑叶的综合利用率，既能使桑蚕企业产生良好的经济效益，又有利于保护环境。桑叶中含有大量的多酚类化合物(如酚酸和黄酮类)，这些活性物质具有抗氧化、抗菌、降血脂及免疫调节等作用。桑叶多酚具有安全、高效、天然和健康等特点，可以作为天然抗氧化剂和抗菌剂的新来源，是一种理想的天然的保鲜剂。
[0003] 水果蔬菜是日常生活中的必需品，在我国的各大超市和快餐店中，鲜切果蔬制品随处可见，但是鲜切果蔬因受到切割损伤，食品中的营养成分及其活性成分直接暴露于空气中或是与空气间接接触，会与氧气发生生理生化反应，导致鲜切果蔬容易氧化、褐变并且受微生物污染。如何减轻微生物造成的这些不良影响，保证鲜切产品在较长时间内保持较高的新鲜度已经成为当今果蔬鲜切行业函待解决的问题。目前以无机抗菌剂与有机合成抗菌剂为主的保鲜剂的使用越来越广泛，但是其安全性和化学稳定性较差，且易产生耐药性，不能满足目前安全、高效、绿色环保的食品生产需求。
[0004] 为了响应消费者关于减少食物中化学合成添加剂的诉求，使用天然物质防止鲜切水果或蔬菜微生物腐败同时确保安全性并维持产品的感官特性的研究明显增加。其中，植物类天然保鲜剂主要包括茶多酚、苹果多酚、姜蒜提取液、百里香精油和柠檬精油等从植物不同组织部位提取出来，具有优良保鲜成分的物质,来源及应用广泛、实用性强、安全无毒和作用明显，现阶段已广泛应用于鲜切果蔬保鲜的研究中。特别是，研究植物精油的各种挥发性活性成分对微生物活性的抑制作用。然而，由于精油刺激性气味的影响以及它们在食物产品中可能引起的感官变化，它们在水果和蔬菜中的实际应用可能受到某种程度的限制。多酚被广泛认可为一种有抗氧化活性和抗菌活性的天然活性物质，将其作为一种天然保鲜剂并应用于鲜切果蔬领域是近年来的研究热点。
发明内容
[0005] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法及其应用。
[0006] 为实现上述目的，本案发明人经过长期研究和大量实践，得以提供本发明技术方案，具体实施过程如下：
[0007] 1.一种桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法，包括以下步骤：
[0008] S1、将壳聚糖溶解于水中，加入醋酸和甘油，并调节pH值为3.5～4.5，然后进行加热搅拌得成膜溶液；
[0009] S2、将桑叶多酚粉末溶于水中制成桑叶多酚溶液，所述桑叶多酚粉末与水按g:L计为5:1；
[0010] S3、向成膜溶液中加入桑叶多酚溶液进行均质反应，静置后进行超声脱气处理，即得桑叶多酚复合保鲜剂。
[0011] 优选的，所述S1中，壳聚糖、水、醋酸与甘油按g:mL:mL:g计为2:100:1:1。
[0012] 优选的，所述S2中，成膜溶液与桑叶多酚溶液的体积比为1:50。
[0013] 其中，甘油作为塑性剂。调节pH值可采用1mol/L的氢氧化钠溶液进行调节。加热搅拌的时间优选为1h。均质反应的时间优选为30min，均质后优选静置2h再进行超声脱气处理。
[0014] 优选的，所述桑叶多酚粉末的制备方法包括以下步骤：
[0015] 1)桑叶粉的制备：取新鲜桑叶，洗净，干燥，粉碎，即得桑叶粉；
[0017] 3)纯化：将大孔树脂放入层析柱中，同时缓慢加入桑叶多酚浓缩液，然后用水洗脱至洗脱水澄清，以除去水溶性物质，再用体积浓度为30～70％的乙醇水溶液洗脱至洗脱液澄清，将洗脱液进行真空浓缩，使浓缩液中的总酚含量在18.5～19.5mg GAE/g dw之间，将浓缩液冷冻干燥成桑叶多酚粉末，即可。
[0019] 优选的，所述步骤1)中，采用粉碎机进行粉碎，时间为5min。
[0020] 优选的，所述步骤2)中，桑叶粉与乙醇溶液的质量比为3:97。
[0021] 优选的，所述步骤2)中，超声提取的功率为400W，温度为50℃，时间为1h。
[0023] 优选的，所述步骤2)中，采用离心机进行离心，离心机的转速为4000×g，离心时间为20min。
[0024] 优选的，所述步骤2)中，乙醇溶液中乙醇的体积浓度为70％。
[0025] 其中，步骤3)中，当桑叶多酚浓缩液流过层析柱时，酚类物质被吸附于大孔树脂中，加入水可洗脱桑叶多酚浓缩液中的糖、酸和其他水溶性化合物，然后加入的乙醇水溶液可洗脱吸附在大孔树脂中的酚类物质。纯化的桑叶多酚溶液经过浓缩，冷冻干燥成粉末后，需在-80℃条件下储存备用。
[0026] 优选的，所述步骤3)中，大孔树脂的型号为H103，层析柱为3cm×30cm。
[0027] 优选的，所述步骤3)中，乙醇水溶液中乙醇的体积浓度为60％。
[0028] 优选的，所述步骤3)中，洗脱液采用旋转蒸发仪进行真空浓缩，温度为40℃，真空度为0.08MPa。
[0029] 更优选的，所述步骤3)中，真空浓缩后的桑叶多酚溶液中的总酚含量为18.90±0.207mg GAE/g dw。
[0030] 其中，上述所用水均为无菌蒸馏水。旋转蒸发后的乙醇均可重复利用，从而降低生产成本和实现资源循环再利用。
[0031] 2.采用上述制备方法制得的桑叶多酚复合保鲜剂。
[0032] 3.桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬中作为鲜切果蔬保鲜剂的应用。
[0033] 优选的，所述桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬中作为鲜切果蔬保鲜剂的应用方法为：待果蔬采摘、洗净、晾干鲜切后直接置于制备好的桑叶多酚复合保鲜剂中，保证桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬表面成膜但不形成液滴为宜，取出后置于筛盘上，在无菌环境中晾干，然后包装于自封保鲜袋中，即可。
[0034] 壳聚糖是《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760-2007)批准使用的被膜剂，壳聚糖是一类广泛存在于甲壳动物和节肢动物以及细菌细胞壁中的多糖类化合物，本身无味、无毒无害，对腐败菌、致病菌，包括大肠杆菌、枯草杆菌、葡萄球菌、黑曲霉、假丝酵母都有抑制作用，并且具有良好的成膜性，可将食品营养物质与空气或微生物隔离，延缓氧化和感染，在微酸和溶解状态条件下，壳聚糖亦能很好地深入果蔬皮肉中，由于壳聚糖分子的正电荷和细菌细胞膜上负电荷的相互作用，使细胞内的蛋白酶和其他成分泄漏，从而达到抗菌、杀菌作用。
[0035] 本发明的有益效果在于：
[0036] 1)本发明制备的桑叶多酚复合保鲜剂以生物相容性好、无毒无害且具有良好抗菌抑菌的壳聚糖和抗微生物活性的桑叶多酚为主要原料，桑叶多酚的生物活性成分在壳聚糖的作用下，增强了酚酸的稳定性，延缓其氧化失效和缓慢释放的效果，对于鲜切果蔬表面微生物的抑制作用更持久，起到了抗菌剂的作用；
[0037] 2)本发明的桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法简单快捷，原料来源广泛，成本低，且无毒无害，天然环保，且制得的桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切水果中的保鲜应用方法操作简单方便；
[0038] 3)本发明的桑叶多酚复合保鲜剂在鲜切果蔬中具有良好的保水性、保鲜性和阻气性，不易染菌，显著降低了鲜切果蔬贮藏的腐烂、失水，增加了货架期，延长了鲜切果蔬的寿命，在食品保鲜剂中具有极大的推广应用价值。附图说明
[0039] 下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步的详细说明，其中：
[0040] 图1为本发明实施例2中在4℃条件下各组的DPPH自由基清除率图；
[0041] 图2为本发明实施例2中在25℃条件下各组的DPPH自由基清除率图；
[0042] 图3为本发明实施例2中在37℃条件下各组的DPPH自由基清除率图；
[0043] 图4为本发明实施例2中在4℃条件下各组的还原能力图；
[0044] 图5为本发明实施例2中在25℃条件下各组的还原能力图；
[0045] 图6为本发明实施例2中在37℃条件下各组的还原能力图；
[0046] 图7为本发明实施例3中在4℃条件下各组的菌落总数图；
[0047] 图8为本发明实施例3中在25℃条件下各组的菌落总数图；
[0048] 图9为本发明实施例3中在37℃条件下各组的菌落总数图。
具体实施方式
[0049] 下面通过具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
[0050] 实施例1
[0051] 本实施例中的桑叶多酚粉末的制备方法，包括以下步骤：
[0052] 1)桑叶粉的制备：取新鲜桑叶，洗净，干燥，粉碎，即得桑叶粉；
[0053] 2)粗提：将桑叶粉3g加入到97g体积浓度为70％的乙醇溶液中进行超声提取，然后过滤，将滤液进行真空浓缩，离心，即得桑叶多酚浓缩液；
[0054] 3)纯化：将大孔树脂放入层析柱中，同时缓慢加入桑叶多酚浓缩液，然后用水洗脱至洗脱水澄清，以除去水溶性物质，再用体积浓度为60％的乙醇水溶液洗脱至洗脱液澄清，将洗脱液进行真空浓缩，是浓缩液中总酚含量为18.90±0.207mg GAE/g dw，冷冻干燥成桑叶多酚粉末，即可。
[0055] 将本实施例制得的桑叶多酚粉末制成桑叶多酚复合保鲜剂的制备方法为：取2g壳聚糖溶解于100mL水中，加入1mL醋酸和1g甘油，并用氢氧化钠溶液调节pH值为4.0，然后进行加热反应，搅拌混合均匀得成膜溶液；按成膜溶液与桑叶多酚溶液的体积比为1:50，向成膜溶液中加入桑叶多酚溶液，其中桑叶多酚溶液中，桑叶多酚粉末与水按g:L的比例为5:1，然后进行均质搅拌反应30min，静置2h后，进行超声脱气处理，即得桑叶多酚复合保鲜剂。
[0056] 实施例2
[0057] 本实施例对实施例1所制得的桑叶多酚复合保鲜剂的抗氧化能力进行检测分析，其中，抗氧化能力包括DPPH自由基的清除活性和还原能力。
[0058] 具体操作为：1)选取经过鲜切处理的哈密瓜，分割成2*3*3cm的哈密瓜块。实验组为：将鲜切哈密瓜块置于实施例1制得的桑叶多酚复合保鲜剂中30s，保证桑叶多酚复合保鲜剂在哈密瓜块表面成膜但不形成液滴为宜；取出后置于筛盘上并在无菌环境中晾干，之后包装于自封保鲜袋；包装后的鲜切哈密瓜分别保存在4℃、25℃和37℃环境中贮藏；对照组为：将鲜切哈密瓜块置于实施例1制得的壳聚糖成膜溶液中30s，保证壳聚糖成膜溶液在哈密瓜块表面成膜但不形成液滴为宜；取出后置于筛盘上并在无菌环境中晾干，之后包装于自封保鲜袋；包装后的鲜切哈密瓜分别保存在4℃、25℃和37℃环境中贮藏；空白组为：将鲜切哈密瓜块置于无菌蒸馏水中，取出置于筛盘上并在无菌环境中晾干，之后包装于自封保鲜袋；包装后的鲜切哈密瓜分别保存在4℃、25℃和37℃环境中贮藏；2)分别检测实验组、对照组和空白组贮藏的哈密瓜在不同贮藏时间下的DPPH自由基的清除活性和还原能力。
[0059] 实验组：分别在第0天、1天、2天和3天的同一时间，分别取5g实验组在4℃、25℃和37℃条件下的哈密瓜样品置于不同的烧杯中，分别加入45mL甲醇，并用均化器(FSH-2A)使其均质化，避光静置30min，然后分别以5000g离心5分钟，取上清液；对照组：分别在第0天、1天、2天和3天的同一时间，分别取5g对照组在4℃、25℃和37℃条件下的哈密瓜样品置于不同的烧杯中，分别加入45mL甲醇，并用均化器(FSH-2A)使其均质化，避光静置30min，然后以
5000g离心5分钟，取上清液；空白组：分别在第0天、1天、2天和3天的同一时间，分别取5g空白组在4℃、25℃和37℃条件下的哈密瓜样品置于不同的烧杯中，分别加入45mL甲醇，并用均化器(FSH-2A)使其均质化，避光静置30min，然后分别以5000×g离心5分钟，取上清液。
5000g离心5分钟，取上清液；空白组：分别在第0天、1天、2天和3天的同一时间，分别取5g空白组在4℃、25℃和37℃条件下的哈密瓜样品置于不同的烧杯中，分别加入45mL甲醇，并用均化器(FSH-2A)使其均质化，避光静置30min，然后分别以5000×g离心5分钟，取上清液。
[0060] (1)DPPH自由基的清除活性
[0061] 分别取各组的上清液0.2mL与5.8mL 0.1mM用甲醇溶解的DPPH溶液混合，并在室温下避光静置30min，然后使用分光光度计在517nm处分别测量各组的吸光度。DPPH自由基的清除活性：DPPH清除活性(％)＝(1－样品吸光度/参比吸光度)×100％。其中，参比为0.2mL蒸馏水和0.2mL甲醇与.8mL 0.1mM用甲醇溶解的DPPH溶液的混合溶液。结果如图1～3所示。
[0062] 图1为4℃条件下，各组在不同时间段的DPPH自由基清除率；图2为25℃条件下，各组在不同时间段的DPPH自由基清除率；图3为37℃条件下，各组在不同时间段的DPPH自由基清除率。图1～3中，a代表实验组，b代表对照组，c代表空白组，从图1～3中分析可知，随着贮藏时间的增加，各组的DPPH自由基清除率均有下降，说明了各组的抗氧化活性随时间的增加会逐渐降低，但同一时间下，实验组的DPPH自由基清除率均高于对照组和空白组，说明了实验组即桑叶多酚复合保鲜剂的抗氧化活性均高于对照组即纯壳聚糖涂膜剂和无菌水处理的空白组，且随着贮藏温度的增加，实验组即桑叶多酚复合保鲜剂的抗氧化活性相对于对照组和空白组更为明显，充分证明了实施例1制得桑叶多酚复合保鲜剂对鲜切水果具有良好的保鲜作用。
[0063] (2)还原能力
[0064] 分别取各组的上清液0.2mL与2.5mL 0.2M磷酸钠缓冲液(pH为6.6)和2.5mL 1％的铁氰化钾混合，在50℃下静置20min，加入1.0mL三氯乙酸(10％，w/v)混合均匀，然后使用分光光度计在700nm处分别测量各组的吸光度。其中，参比为0.2mL蒸馏水与2.5mL 0.2M磷酸钠缓冲液(pH为6.6)和2.5mL 1％的铁氰化钾混合，在50℃下静置20min，加入1.0mL三氯乙酸(10％，w/v)混合均匀的混合溶液。结果如图4～6所示。
[0065] 图4为4℃条件下，各组在不同时间段的还原能力；图5为25℃条件下，各组在不同时间段的还原能力；图6为37℃条件下，各组在不同时间段的还原能力。图4～6中，a代表实验组，b代表对照组，c代表空白组，从图4～6中分析可知，随着贮藏时间的增加，各组的还原能力均有下降，说明了各组的抗氧化活性随时间的增加会逐渐降低，但同一时间下，实验组的DPPH自由基清除率均高于对照组和空白组，说明了实验组即桑叶多酚复合保鲜剂的抗氧化活性均高于对照组即纯壳聚糖涂膜剂和无菌水处理的空白组，也证明了实施例1制得桑叶多酚复合保鲜剂对鲜切水果具有良好的保鲜作用。
[0066] 综上，通过对实施例1制得的桑叶多酚复合保鲜剂的DPPH自由基的清除活性和还原能力的检测，充分证明了本发明制得的桑叶多酚复合保鲜剂具有良好的抗氧化能力，能延长鲜切果蔬的保鲜期，在鲜切水果保鲜过程中，具有实用价值。
[0067] 实施例3
[0068] 本实施例对实施例1所得的桑叶多酚复合保鲜剂的抑菌性能的进行检测分析，采用微生物菌落计数的方法。
[0069] 选取经过鲜切处理的哈密瓜，分割成2*3*3cm的哈密瓜块。其中，实验组为：将鲜切哈密瓜块置于实施例1制得的桑叶多酚复合保鲜剂溶液中30s，保证桑叶多酚复合保鲜剂在哈密瓜块表面成膜但不形成液滴为宜；取出后置于筛盘上并在无菌环境中晾干，之后包装于自封保鲜袋；包装后的鲜切哈密瓜分别保存在4℃、25℃和37℃环境中贮藏；对照组为：将鲜切哈密瓜块置于实施例1制得的壳聚糖成膜溶液中30s，保证壳聚糖成膜溶液在哈密瓜块表面成膜但不形成液滴为宜；取出后置于筛盘上并在无菌环境中晾干，之后包装于自封保鲜袋；包装后的鲜切哈密瓜分别保存在4℃、25℃和37℃环境中贮藏；空白组为：将鲜切哈密瓜块置于无菌蒸馏水中，取出置于筛盘上并在无菌环境中晾干，之后包装于自封保鲜袋；包装后的鲜切哈密瓜分别保存在4℃、25℃和37℃环境中贮藏。
[0070] 分别在第0天、1天、2天和3天的同一时间，分别取5g实验组、对照组和空白组中各温度条件下的哈密瓜样品与45ml 0.9％无菌生理盐水混合摇匀2min，然后用0.9％无菌生理盐水进行梯度稀释，分别稀释至10-1、10-2、10-3、10-4、10-5和10-6。在无菌条件下，将哈密瓜样品稀释液滴到营养琼脂平板上以进行菌落计数，并在37℃下培养24小时。结果如图7～9所示。
[0071] 图7为4℃条件下，各组在不同时间段的菌落生长总数量；图8为25℃条件下，各组在不同时间段的菌落生长总数量；图9为37℃条件下，各组在不同时间段的菌落生长总数量。图7～9中，a代表空白组，b代表对照组，c代表实验组。从图7～8中分析可知，在不同温度贮藏环境下，随着时间的增加，各组的菌落生长总数量均有增加，但实验组即桑叶多酚复合保鲜剂处理后的鲜切哈密瓜菌落生长总数量均低于用壳聚糖成膜溶液处理的对照组和用无菌水处理的空白组，且在25℃和37℃贮藏环境下，随着时间的增加，实验组即桑叶多酚复合保鲜剂处理后的鲜切哈密瓜菌落生长总数量均显著低于纯壳聚糖溶液处理的对照组和用无菌水处理的空白组，充分说明了桑叶多酚复合保鲜剂对鲜切果蔬上感染的微生物均有良好的抑菌、抗菌作用。
[0072] 综上，本发明通过提取桑叶多酚，并以此为主要活性物质，添加到壳聚糖成膜溶液中，制得桑叶多酚复合保鲜剂，具有高抗氧化活性和抑菌、抗菌活性，可以应用于鲜切果蔬保鲜，有效提高了鲜切果蔬的保鲜效果，拓宽了桑叶多酚的应用领域。
[0073] 以上所述实施例仅为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。
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