专利汇可以提供一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种基于复合纳米酶系统的 葡萄糖 检测方法,具体涉及 纳米材料 、 生物 催化及分析化学技术领域,包括以下步骤:S1、MnO2纳米片-Au 复合材料 的构建,以多肽为模板制备MnO2纳米片,再采用生物矿化和静电组装技术,将Au纳米簇原位生成在MnO2纳米片上;S2、将分子印迹和仿酶纳米复合材料结合起来用于多模式葡萄糖检测。本发明采用分子印迹技术与复合纳米材料的 串联 仿酶活性相结合实现对葡萄糖的检测,提高了反应的选择性,对其他糖(乳糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、木糖、 蔗糖 )无明显响应,可用于葡萄糖多模式检测,其应用于实际样品的测定,表现出良好的重现性、可靠性、准确性。,下面是一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法专利的具体信息内容。
1.一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、MnO2纳米片-Au复合材料的构建,合成步骤包括:
S1.1、将多肽与含有二价锰离子的水溶液混合均匀,静置一段时间,然后向上述混合溶液中加入一定量的碱液并混匀,振荡反应一段时间,采用多肽作为生物模板,在敞开的碱性环境下锰离子被氧化从而快速简便地制备出多肽负载的MnO2纳米片悬浮液;
S1.2、将上述反应液离心,去除含有未反应成分的上清液,收集沉淀,合成了同时具有过氧化物酶和仿葡萄糖氧化酶活性的MnO2纳米片,4℃保存以备用;
S1.3、将MnO2纳米片、NaBH4依次加入HAuCl4溶液中,采用静电组装及生物矿化技术,将同时具有过氧化物酶和仿葡萄糖氧化酶活性的Au纳米簇原位生成在也同时具有过氧化物酶和仿葡萄糖氧化酶活性MnO2纳米片上,得到同时具有过氧化物酶和仿葡萄糖氧化酶活性且活性加强的MnO2纳米片-Au复合材料;
S2、将分子印迹和MnO2纳米片-Au复合材料结合起来用于葡萄糖检测,制备及检测步骤包括:
S2.1、分子印迹制备:将葡萄糖和过氧化物酶底物构成的模板分子、印迹聚合物单体加入MnO2纳米片-Au复合材料悬浮液中,并加入引发剂引发聚合反应,待聚合过程完成后,离心并用水清洗,放入pH 4的缓冲溶液中以使作为模板分子的葡萄糖反应并用水洗脱,放入含H2O2的pH 4的缓冲液中以使作为模板分子的过氧化物酶底物反应并用水洗脱,最终得到分子印迹-复合纳米酶系统;
S2.2、建立催化反应体系,具体为包含葡萄糖、分子印迹-复合纳米酶系统以及过氧化物酶底物的缓冲液;待反应体系反应一段时间后,利用分光光度计或荧光仪检测其吸光值或荧光,并绘制出葡萄糖标准工作曲线,实现葡萄糖的检测。
2.根据权利要求1所述的一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法,其特征在于:所述步骤S1.1中,所述含有二价锰离子的水溶液可由醋酸锰、氯化锰、硫酸锰、硝酸锰配制而成;所述碱液可由氢氧化钠、氢氧化钾、氨水配制而成。
3.根据权利要求1所述的一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法,其特征在于:所述步骤S1.1中,多肽与含有二价锰离子的水溶液混合静置时间为半分钟以上,加入碱液混合振荡时间为0.3h-3天。
4.根据权利要求1所述的一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法,其特征在于:所述步骤S1.2中,也可通过透析或过滤的方法收集纯化MnO2纳米片。
5.根据权利要求1所述的一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法,其特征在于:所述步骤S2.2中,催化反应体系中葡萄糖浓度为0-20mmol/L。
6.根据权利要求1所述的一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法,其特征在于:所述步骤S2.1和S2.2中,催化反应体系中过氧化物酶底物为2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐、3,3’,5,5’-四甲基联苯胺、邻苯二胺或Amplex Red,在步骤S2.1中,聚合物单体为丙烯酰胺、N-异丙基丙烯酰胺、N,N-亚甲基双丙烯酰胺、十二烷基磺酸钠、多巴胺或苯硼酸和邻苯二胺,引发剂为过硫酸铵、偶氮二异丁腈或四甲基乙二胺。
7.根据权利要求1所述的一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法,其特征在于:所述步骤S2.2中,催化反应体系中缓冲液的pH值为3-7。
8.根据权利要求1所述的一种基于复合纳米酶系统的葡萄糖检测方法,其特征在于:所述步骤S2.2中,催化反应体系在37℃或是室温25℃下反应5-90分钟。
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