一种红曲黄色素的制备方法
专利汇可以提供一种红曲黄色素的制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 属于 食品添加剂 领域，具体涉及一种红曲黄色素的制备方法。本发明的一种红曲黄色素的制备方法，包括下述的步骤：（1）菌种选育；（2） 种子 培养；（3） 发酵 ；（4）过滤；（5）浸提；（6）浓缩；（7）干燥。本发明的有益效果在于，采用本发明的方法得到产黄色素能 力 强及快的优势菌株；再采用该优势菌株进行液体深层发酵的方法提取红曲黄色素，该方法得到的红曲黄色素色价高（≥300U/g）、桔青霉素含量低（≤50U/Kg）、耐光性强，不易褪色，对 金属离子 稳定，且本发明的方法得到的红曲黄成本低，安全无毒。，下面是一种红曲黄色素的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种红曲霉菌株（Monascus anka），于2015年6月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10909。
2.一种红曲黄色素的制备方法，包括下述的步骤：
（1）菌种选育
选用通过诱变分离获得的红曲霉菌株（Monascus anka），挑选出产黄色素能力强及快的优良菌株，所述的红曲霉菌株于2015年6月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10909；
（2）种子培养
将步骤（1）中的选取的菌株接种到灭菌后的斜面培养基中，在30-37℃下于摇床中培养8-12d；
（3）发酵：将步骤（2）中培养好的优良红曲霉菌种接种到以下的发酵培养基中，所述的培养具体为：4-8%玉米粉、1-5%葡萄糖、0.1-0.5%（NH4）2SO4、0.05-0.15KH2PO4、
0.05-0.15MgSO4，摇瓶培养4-6d，培养温度30-37℃，在第3-5d每天添加0.3-0.5%葡萄糖溶液，发酵后得发酵液；
（4）过滤：加入盐酸调节发酵液pH2-3,沉淀4-8h后过滤，得滤渣；
（5）浸提：将过滤所得滤渣加入到5-12倍重量的60%-80%乙醇溶液中，搅拌1-2h，采用NaOH调节溶液pH为8-13,浸泡5-12h后陶瓷滤膜过滤，得浸提液；
（6）浓缩：采用三效多级蒸发器对浸提液进行浓缩，得浓缩液，用盐酸调节pH 7左右；
（7）干燥：将浓缩液进行喷雾干燥，得红曲黄色素粉末。
3.如权利要求2所述的一种红曲黄色素的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）中的诱变方式为物理或紫外诱变。
4.如权利要求3所述的一种红曲黄色素的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）中的诱变方式为物理诱变，所述的物理诱变处理为采用最大功率1000w，脉冲频率2540MHZ的家用微波炉，按照20-60s不同时间，对红曲菌孢子悬浮液进行微波处理，随后吸取0.1mL的菌悬液涂布于平板上，随后将平板置于15W紫外灯30cm处照射10-30s，随后立即用黑纸包裹置33℃恒温培养箱培养7d，挑选出产黄色素能力强及快的优良菌株。
5.如权利要求4所述的一种红曲黄色素的制备方法，其特征在于，所述的步骤（2）中，在33℃下于摇床中培养10d。
6.如权利要求5所述的一种红曲黄色素的制备方法，其特征在于，所述的步骤（3）中，培养基具体为：6%玉米粉、3%葡萄糖、0.3%（NH4）2SO4、0.1KH2PO4、0.1MgSO4，摇瓶培养5d，培养温度30-37℃，在第3-5d每天添加0.4%葡萄糖溶液，发酵后得发酵液。
7.如权利要求6所述的一种红曲黄色素的制备方法，其特征在于，所述的步骤（4）中，加入盐酸调节发酵液pH2.5，沉淀6h后过滤，得滤渣。
8.如权利要求7所述的一种红曲黄色素的制备方法，其特征在于，所述的步骤（5）中：
将过滤所得滤渣加入到8倍重量的70%乙醇溶液中，搅拌1.5h，采用NaOH调节溶液pH为
10,浸泡8h后陶瓷滤膜过滤，得浸提液。
9.如权利要求8所述的一种红曲黄色素的制备方法，其特征在于，步骤（1）选择菌株后，再进行遗传稳定性测试，具体为:筛选出的优势菌株连续传代培养8次，选择产黄色素的能力强及速度快的菌株。
10.如权利要求2所述的一种红曲黄色素的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）中的诱变方式为紫外诱变。
一种红曲黄色素的制备方法
技术领域
背景技术
发明内容
选用通过诱变分离获得的红曲霉（Monascus anka），挑选出产黄色素能力强及快的优良菌株，上述的红曲霉于2015年6月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10909，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；
（2）种子培养
将步骤（1）中的选取的菌株接种到灭菌后的斜面培养基中，在30-37℃下于摇床中培养8-12d；
（3）发酵：将步骤（2）中培养好的优良红曲霉菌种接种到以下的发酵培养基中，所述的培养具体为：4-8%玉米粉、1-5%葡萄糖、0.1-0.5%（NH4）2SO4、0.05-0.15KH2PO4、
0.05-0.15MgSO4，摇瓶培养4-6d，培养温度30-37℃，在第3-5d每天添加0.3-0.5%葡萄糖溶液，发酵后得发酵液；
（4）过滤：加入盐酸调节发酵液pH2-3,沉淀4-8h后过滤，得滤渣；
（5）浸提：将过滤所得滤渣加入到5-12倍重量的60%-80%乙醇溶液中，搅拌1-2h，采用NaOH调节溶液pH为8-13,浸泡5-12h后陶瓷滤膜过滤，得浸提液；
（6）浓缩：采用三效多级蒸发器对浸提液进行浓缩，得浓缩液，用盐酸调节pH 7左右；
（7）干燥：将浓缩液进行喷雾干燥，得红曲黄色素粉末。
具体实施方式
1）红曲霉菌株的筛选
红曲菌孢子悬浮液制备：将红曲霉菌株（红曲霉（Monascus anka）于2015年6月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10909；）刮进带有玻璃珠的无菌水中，置摇床200r/min，振摇1h；
诱变处理：采用最大功率1000w，脉冲频率2540MHZ的家用微波炉，中等功率强度，按照
20-60s不同时间，对红曲菌孢子悬浮液进行微波处理，吸取0.1mL的菌悬液涂布于平板上。
随后将平板置于15W紫外灯30cm处照射15s，立即用黑纸包裹置33℃恒温培养箱培养7d，挑选出产黄色素颜色深及快的优良菌株；
突变菌株的遗传稳定性测试:筛选出的优势菌株连续传代培养8次，观察产黄色素的能力及速度。
发酵：将培养好的优良红曲霉菌种接种到成分为6%玉米粉、3%葡萄糖、0.3%（NH4）2SO4、
0.1KH2PO4、0.1MgSO4的发酵培养基，进行摇瓶培养5d，培养温度33℃左右，在第3-5d每天添加0.4%葡萄糖溶液，发酵后得发酵液；
过滤：加入盐酸调节发酵液pH2,沉淀4h后过滤，得滤渣；
浸提：将过滤所得滤渣加入到10倍重量的70%乙醇溶液中，搅拌1-2h，采用NaOH调节溶液pH为9,浸泡7h后陶瓷滤膜过滤，得浸提液；
浓缩：采用三效多级蒸发器对浸提液进行浓缩，得浓缩液，用盐酸调节pH 7左右；
干燥：将浓缩液进行喷雾干燥，得红曲黄色素粉末。
1）红曲霉菌株的筛选
红曲菌孢子悬浮液制备：将红曲霉菌株（红曲霉（Monascus anka）于2015年6月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10909；）刮进带有玻璃珠的无菌水中，置摇床200r/min，振摇1h；
诱变处理：采用最大功率1000w，脉冲频率2540MHZ的家用微波炉，中等功率强度，按照
20-60s不同时间，对红曲菌孢子悬浮液进行微波处理，吸取0.1mL的菌悬液涂布于平板上。
随后将平板置于15W紫外灯30cm处照射15s，立即用黑纸包裹置33℃恒温培养箱培养7d。
挑选出产黄色素颜色深及快的优良菌株；
突变菌株的遗传稳定性测试:筛选出的优势菌株连续传代培养8次，观察产黄色素的能力及速度。
发酵：将培养好的优良红曲霉菌种接种到成分为6%玉米粉、3%葡萄糖、0.3%（NH4）2SO4、
0.1KH2PO4、0.1MgSO4的发酵培养基，进行摇瓶培养5d，培养温度33℃左右，在第3-5d每天添加0.4%葡萄糖溶液，发酵后得发酵液；
过滤：加入盐酸调节发酵液pH2.5,沉淀4h后过滤，得滤渣；
浸提：将过滤所得滤渣加入到8倍重量的75%乙醇溶液中，搅拌1-2h，采用NaOH调节溶液pH为10,浸泡10h后陶瓷滤膜过滤，得浸提液；
浓缩：采用三效多级蒸发器对浸提液进行浓缩，得浓缩液，用盐酸调节pH 6.5；
干燥：将浓缩液进行喷雾干燥，得红曲黄色素粉末。
1）红曲霉菌株的筛选
红曲菌孢子悬浮液制备：将红曲霉菌株（红曲霉（Monascus anka）于2015年6月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10909；）刮进带有玻璃珠的无菌水中，置摇床200r/min，振摇1h；
诱变处理：采用最大功率1000w，脉冲频率2540MHZ的家用微波炉，中等功率强度，按照
20-60s不同时间，对红曲菌孢子悬浮液进行微波处理，吸取0.1mL的菌悬液涂布于平板上。
随后将平板置于15W紫外灯30cm处照射15s，立即用黑纸包裹置33℃恒温培养箱培养7d。
挑选出产黄色素颜色深及快的优良菌株；
突变菌株的遗传稳定性测试:筛选出的优势菌株连续传代培养8次，观察产黄色素的能力及速度；
2)红曲黄色素的提取
培养：将高产黄色素的突变菌株接种到灭菌后的成为为4%麦芽糖、4%可溶性淀粉、3%蛋白胨、2%琼脂的斜面培养基中，在温度为33℃的摇床中培养10d；
发酵：将培养好的优良红曲霉菌种接种到成分为6%玉米粉、3%葡萄糖、0.3%（NH4）2SO4、
0.1KH2PO4、0.1MgSO4的发酵培养基，进行摇瓶培养5d，培养温度33℃左右，在第3-5d每天添加0.4%葡萄糖溶液，发酵后得发酵液
过滤：加入盐酸调节发酵液pH3,沉淀5h后过滤，得滤渣；
浸提：将过滤所得滤渣加入到10倍重量的70%乙醇溶液中，搅拌1-2h，采用NaOH调节溶液pH为11,浸泡9h后陶瓷滤膜过滤，得浸提液；
浓缩：采用三效多级蒸发器对浸提液进行浓缩，得浓缩液，用盐酸调节pH 7；
干燥：将浓缩液进行喷雾干燥，得红曲黄色素粉末。
1）红曲霉菌株的筛选
红曲菌孢子悬浮液制备：将红曲霉菌株（红曲霉 (Monascus anka)于2015年6月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10909；）刮进带有玻璃珠的无菌水中，置摇床200r/min，振摇1h。
发酵：将培养好的优良红曲霉菌种接种到成分为6%玉米粉、3%葡萄糖、0.3%（NH4）2SO4、
0.1KH2PO4、0.1MgSO4的发酵培养基，进行摇瓶培养5d，培养温度33℃左右，在第3-5d每天添加0.4%葡萄糖溶液，发酵后得发酵液
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