技术领域
[0001] 本
发明涉及一种贻贝多肽螯合钙的制备方法，属于
食品加工技术领域。
背景技术
[0002] 钙是人体内含量最高的金属元素，约占人体总重的1.5％，被人们称作“生命中的
钢筋混泥土”，是骨骼和
牙齿的主要成分，此外，钙在维持神经正常兴奋、
机体酸
碱平衡、新陈代谢等生命活动中起着至关重要的作用。我国营养学会公布的每人每日钙摄入量为800mg，青少年和孕妇推荐摄入量为1200～1500mg。但是，由于饮食结构、饮食习惯等问题，从食物中摄取的钙常常难以满足人体的需求，所以许多人通过使用钙补充剂来弥补钙摄入量的不足。
[0003] 我国钙补充剂的发展可以划分为以下四代：第一代以无机钙为主，
磷酸钙、
碳酸钙就是这类钙补充剂的代表，也是市面上最常见的钙补充剂，无机钙的钙含量高，但是其吸收率低且消化时需要消耗胃酸，对胃有一定刺激作用；第二代是有机钙，乳酸钙、
葡萄糖酸钙和
柠檬酸钙是第二代钙补充剂的代表，第二代钙补充剂吸收影响因素多，且均为离子钙，可能对身体有一定毒
副作用；第三代钙是
氨基酸螯合钙，常见的有天
门冬氨酸钙和苏糖酸钙，氨基酸螯合钙中的钙元素嵌合在氨基酸中间，不会与食物中的植酸、
草酸、胃酸和碱性物质反应而影响吸收，氨基酸螯合钙是直接通过肠道粘膜吸收，增加了其
生物利用度；多肽螯合钙属于第四代钙补充剂，小肽与钙螯合，不易饱和、吸收速度快、耗能低，更有利于提高钙的生物学效应。
[0004] 贻贝，是被广泛使用的海洋生物之一，来源广泛、无毒无害、营养价值高，人称“海中鸡蛋”。中医中药记载：贻贝味咸、性温、无毒，入肝肾经，可补肾益精、调肝养血，消瘿瘤、调经血和降血压。我国年产量可达85万吨，其中大连的产量最高，紫贻贝是其主要品种。目前，市场上常见的贻贝产品主要有冷冻调理贻贝、贻贝串、烟熏
风味贻贝和贻贝半干制品，鲜见其他深加工产品。
[0005] 现有螯合钙制备方法通常为常温或高温螯合，螯合反应时间长，生产效率低。
发明内容
[0006] 本发明针对以上的问题，而研究设计一种贻贝多肽螯合钙的制备方法，从而生产一种贻贝多肽螯合钙，来解决当前常用钙补充剂存在的溶解性差、吸收率低和副作用大的缺点。本发明采用的技术手段如下：
[0007] 一种贻贝多肽螯合钙的制备方法，包括以下步骤：
[0008] S1、匀浆：将鲜贻贝肉制成浆体；
[0009] S2、酶解：将步骤S1所得的浆体与
水混合后，加入复合蛋白酶进行酶解，反应完成后灭酶，再离心；
[0010] S3、脱腥脱色：向步骤S2离心后所得的上清液中加入
活性炭粉，充分
吸附后过滤得到贻贝酶解液；
[0011] S4、
超滤：将步骤S3所得的贻贝酶解液进行超滤，将透过液干燥得到贻贝多肽粉；
[0012] S5、螯合：将步骤S4所得的贻贝多肽粉溶于水中，加入
氯化钙，溶解后进行螯合反应，螯合压
力为150～200MPa，
温度为4～10℃，pH为5.0～7.0，反应一段时间，将反应结束后得到的贻贝多肽螯合液浓缩得到贻贝多肽螯合钙浓缩液；
[0013] S6、结晶：向步骤S5所得的贻贝多肽螯合钙浓缩液中加入
乙醇，静置、过滤，将滤渣干燥得到贻贝多肽螯合钙粉。
[0014] 优选地，步骤S1中，所述贻贝为翡翠贻贝、紫贻贝和厚壳贻贝中的一种或两种以上，取贻贝肉用料理机初步磨浆后，再使用胶体磨磨浆。
[0015] 优选地，步骤S2中，所述浆体与水的
质量比为1:3～5，所述复合蛋白酶为匀浆质量的0.9～1.5％，所述复合蛋白酶的组成和质量配比为：酸性蛋白酶2-6重量份、菠萝蛋白酶4-13重量份、木瓜蛋白酶3-8重量份、胰蛋白酶1-4重量份和胃蛋白酶1-3重量份，酶解反应中，温度为40～60℃，pH为5.0～7.0，酶解时间为2～4小时，所述灭酶步骤为沸水浴10～20分钟，所述离心转速为4000～4500rpm，离心时间为10～20分钟。
[0016] 优选地，步骤S3中，所述活性碳粉的添加量为匀浆质量的1.5～3％，吸附过程在45～60℃水浴中进行，吸附时间为20～30分钟。
[0017] 优选地，步骤S4中，所述超滤使用的是1000～3000Da的超滤膜，超滤压力为0.15～0.4MPa，温度为25～40℃，运行周期为35～50分钟；所述干燥方式包括但不限于
真空冷冻干燥、
喷雾干燥和减压干燥。
[0018] 优选地，步骤S5中，所述贻贝多肽的质量分数为10～30％，所述氯化钙与贻贝多肽粉的质量比为1:1.5～8，反应时间为10～20分钟。
[0019] 优选地，步骤S6中，所述乙醇的纯度为95％，其添加量为浓缩液的8～12倍，所述静置的时间为4～6小时。
[0020] 优选地，步骤S6后，再进行微囊化：将魔芋胶加入蒸馏水中，在60℃水浴中加热溶解，制成魔芋胶溶液，将螯合钙用水溶解后，加入到魔芋胶溶液中，制成混合溶液，对所述混合溶液进行均质，将麦醇溶蛋白溶于乙醇中，并搅拌均匀，将所述混合溶液加入到麦醇溶蛋白醇溶液中，搅拌至乙醇挥发后，进行过滤、干燥，即可得到螯合钙
纳米级微囊粉。
[0021] 优选地，所述魔芋胶与螯合钙的质量比为1～3:1，魔芋胶溶液的质量分数为1～3g/100mL，麦醇溶蛋白与螯合钙的质量比为1～3:1，麦醇溶蛋白的质量分数为0.5～1.5g/
100mL，乙醇浓度为90％，所述磁力搅拌器的转速为1200～1600rpm，温度为35～45℃，所述
蠕动泵的流量为5～8mL/min。
[0022] 与
现有技术相比，本发明所述的一种贻贝多肽螯合钙的制备方法的优点有：
[0023] 1、在酶解完成后获得了贻贝酶解液，进行超滤、干燥，得到了分子量小于3000Da的贻贝多肽粉，其与氯化钙反应得到的螯合钙可以促进人体对钙元素的吸收。
[0024] 2、本发明中原料在高压低温条件下进行螯合，可大幅度缩短反应时间，螯合时间从现有技术的半个小时以上缩短至10分钟左右，极大提高了生产效率，同时4-10℃低温反应，原料保鲜程度高，提高产品品质，适合大规模生产。
[0025] 3、本发明采用魔芋胶和玉米醇溶蛋白对贻贝多肽螯合钙进行了微囊化，不仅可以避免胃酸对螯合钙的分解、促进小肠内钙的吸收，而且可以增强螯合钙的生物利用率，要求制备成口服液、片剂和肠溶等类型，或作为营养强化剂加入到食品和保健品中，实现贻贝的高值化利用。
附图说明
具体实施方式
[0027] 实施例1
[0028] 本发明一种贻贝多肽螯合钙微囊粉的制备方法，步骤如下：
[0029] S1、匀浆：取紫贻贝，清水清洗后，取肉，用料理机初步磨浆后，再使用胶体磨磨浆。
[0030] S2、酶解：向匀浆中加匀浆质量3倍的水，将调整pH调整为5.0，并向上述
混合液中加入匀浆质量0.9％的复合蛋白酶，在40℃水浴中反应4小时，反应完成后沸水浴反应10分钟灭酶。灭酶后冷却至室温，4000rpm离心20分钟。所述复合蛋白酶的组成为：酸性蛋白酶10％、菠萝蛋白酶65％、木瓜蛋白酶15％、胰蛋白酶5％、胃蛋白酶5％。
[0031] S3、脱腥脱色：向上清液中加入匀浆质量1.5％的活性炭粉在60℃水浴中反应20分钟，反应完成后减压过滤得到贻贝酶解液。
[0032] S4、超滤：将贻贝酶解液用1000Da的超滤膜进行分离操作，压力为0.2MPa，料液温度为25℃，运行周期为50分钟，并将透过液冻干，得到贻贝多肽粉。
[0033] S5、螯合：将贻贝多肽粉溶于水中，贻贝多肽粉的质量分数为10％，调节pH至5.0，加入氯化钙固体，氯化钙与贻贝多肽粉的质量比为1:8，充分溶解后将其移入超高压低温均质机进行反应，反应结束后得到多肽螯合液，将贻贝多肽螯合液减压浓缩为原体积的1/10得到贻贝多肽螯合钙浓缩液。超高压低温均质机的反应条件为压力150MPa，温度10℃，反应时间为20分钟。
[0034] S6、结晶：将浓缩液12倍体积的95％乙醇加入贻贝多肽螯合钙浓缩液中，静止4小时，过滤。重复此步骤至滤液中检测不出钙为止。将滤渣烘干，得到贻贝多肽螯合钙粉。此螯合钙中钙含量为20％。
[0035] S7、微囊化：取螯合钙1倍质量的魔芋胶加入100倍体积的蒸馏水中，搅拌均匀后，在60℃水浴中加热溶解一段时间。将螯合钙用少量水溶解后，加入已溶解的魔芋胶中，使用高压均质机进行均质。取螯合钙1倍质量的麦醇溶蛋白溶于200倍体积的90％乙醇中，并将此溶液置于磁力搅拌器上，磁力搅拌器转速为1200rpm、温度45℃，将魔芋胶和螯合钙混合溶液用
蠕动泵结合喷头以8mL/min的速度加入麦醇溶蛋白醇溶液。将魔芋胶和螯合钙混合溶液加完后，继续搅拌一段时间。待乙醇挥发充分后，将溶液过滤、滤渣干燥后，即可得到螯合钙纳米级微囊粉。
[0036] 实施例2
[0037] 本发明一种贻贝多肽螯合钙微囊粉的制备方法，步骤如下：
[0038] S1、匀浆：取厚壳贻贝，清水清洗后，取肉，用料理机初步磨浆后，再使用胶体磨磨浆。
[0039] S2、酶解：向匀浆中加匀浆质量4倍的水，将调整pH调整为6.0，并向上述混合液中加入匀浆质量1.0％的复合蛋白酶，在55℃水浴中反应3小时，反应完成后沸水浴反应15分钟灭酶。灭酶后冷却至室温，4500rpm离心10分钟。所述复合蛋白酶的组成为：酸性蛋白酶10％、菠萝蛋白酶20％、木瓜蛋白酶40％、胰蛋白酶20％、胃蛋白酶10％。
[0040] S3、脱腥脱色：向上清液中加入匀浆质量2％的活性炭粉在50℃水浴中反应30分钟，反应完成后减压过滤得到贻贝酶解液。
[0041] S4、超滤：将贻贝酶解液用1000Da的超滤膜进行分离操作，压力为0.3MPa，料液温度为45℃，运行周期为35分钟，并将透过液冻干，得到贻贝多肽粉。
[0042] S5、螯合：将贻贝多肽粉溶于水中，贻贝多肽粉的质量分数为30％，调节pH至6.5，加入氯化钙固体，氯化钙与贻贝多肽粉的质量比为1:1.5，充分溶解后将其移入超高压低温均质机进行反应，反应结束后得到多肽螯合液，将贻贝多肽螯合液减压浓缩为原体积的1/10得到贻贝多肽螯合钙浓缩液。超高压低温均质机的反应条件为压力180MPa，温度8℃，反应时间为15分钟。
[0043] S6、结晶：将浓缩液10倍体积的95％乙醇加入贻贝多肽螯合钙浓缩液中，静止5小时，过滤。重复此步骤至滤液中检测不出钙为止。将滤渣烘干，得到贻贝多肽螯合钙粉。此螯合钙中钙含量为23％。
[0044] S7、微囊化：取螯合钙3倍质量的魔芋胶加入33倍体积的蒸馏水中，搅拌均匀后，在60℃水浴中加热溶解一段时间。将螯合钙用少量水溶解后，加入已溶解的魔芋胶中，使用高压均质机进行均质。取螯合钙3倍质量的麦醇溶蛋白溶于67倍体积的90％乙醇中，并将此溶液置于磁力搅拌器上，磁力搅拌器转速为1500rpm、温度38℃，将魔芋胶和螯合钙混合溶液用蠕动泵结合喷头以5mL/min的速度加入麦醇溶蛋白醇溶液。将魔芋胶和螯合钙混合溶液加完后，继续搅拌一段时间。待乙醇挥发充分后，将溶液过滤、滤渣干燥后，即可得到螯合钙纳米级微囊粉。
[0045] 实施例3
[0046] 本发明一种贻贝多肽螯合钙微囊粉的制备方法，步骤如下：
[0047] S1、匀浆：取翡翠贻贝，清水清洗后，取肉，用料理机初步磨浆后，再使用胶体磨磨浆。
[0048] S2、酶解：向匀浆中加匀浆质量5倍的水，将调整pH调整为7.0，并向上述混合液中加入匀浆质量1.5％的复合蛋白酶，在60℃水浴中反应2小时，反应完成后沸水浴反应20分钟灭酶。灭酶后冷却至室温，4000rpm离心20分钟。所述复合蛋白酶的组成为：酸性蛋白酶30％、菠萝蛋白酶20％、木瓜蛋白酶20％、胰蛋白酶15％、胃蛋白酶15％。
[0049] S3、脱腥脱色：向上清液中加入匀浆质量3.0％的活性炭粉在45℃水浴中反应30分钟，反应完成后减压过滤得到贻贝酶解液。
[0050] S4、超滤：将贻贝酶解液用3000Da的超滤膜进行分离操作，压力为0.15MPa，料液温度为30℃，运行周期为40分钟，并将透过液冻干，得到贻贝多肽粉。
[0051] S5、螯合：将贻贝多肽粉溶于水中，贻贝多肽粉的质量分数为20％，调节pH至7.0，加入氯化钙固体，氯化钙与贻贝多肽粉的质量比为1:3，充分溶解后将其移入超高压低温均质机进行反应，反应结束后得到多肽螯合液，将贻贝多肽螯合液减压浓缩为原体积的1/10得到贻贝多肽螯合钙浓缩液。超高压低温均质机的反应条件为压力200MPa，温度4℃，反应时间为10分钟。
[0052] S6、结晶：将浓缩液8倍体积的95％乙醇加入贻贝多肽螯合钙浓缩液中，静止6小时，过滤。重复此步骤至滤液中检测不出钙为止。将滤渣烘干，得到贻贝多肽螯合钙粉。此螯合钙中钙含量为19％。
[0053] S7、微囊化：取螯合钙2倍质量的魔芋胶加入50倍体积的蒸馏水中，搅拌均匀后，在60℃水浴中加热溶解一段时间。将螯合钙用少量水溶解后，加入已溶解的魔芋胶中，使用高压均质机进行均质。取螯合钙2倍质量的麦醇溶蛋白溶于100倍体积的90％乙醇中，并将此溶液置于磁力搅拌器上，磁力搅拌器转速为1600rpm、温度35℃，将魔芋胶和螯合钙混合溶液用蠕动泵结合喷头以6mL/min的速度加入麦醇溶蛋白醇溶液。将魔芋胶和螯合钙混合溶液加完后，继续搅拌一段时间。待乙醇挥发充分后，将溶液过滤、滤渣干燥后，即可得到螯合钙纳米级微囊粉。
[0054] 以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种
变形和改进，均应落入本发明
权利要求书确定的保护范围内。
