技术领域
[0001] 本
发明涉及动物营养与饲料技术领域，特别涉及一种仔猪酶菌饲料添加剂 及其应用。
背景技术
[0002] 在现代养猪业生产中，仔猪出生后的食物来源主要是
母乳。在仔猪断奶时， 肠道功能未发育完全，营养源的摄入由液态母乳转化为固态
植物性日粮，因此 容易造成仔猪产生较大的食物应激，造成其消化道肠道结构形态的损伤以及各 种消化酶活性的下降，具体如小肠绒毛长度减小、腺体深度变大、内源蛋白酶 和
淀粉酶活性的减弱等，引起腹泻及生长受阻等多种负面后果，严重时影响生 猪全期生长性能的发挥。同时，仔猪断乳时，由于仔猪的肠道损伤等原因，一 些有害菌如大肠杆菌和链球菌、肠杆菌大量繁殖，甚至成为优势菌，造成肠道 的微
生态系统失调，这些致病菌可以产生内毒素，与宿主争夺营养物质，它们 也可以大量定植在小肠黏膜及上皮细胞，从而诱发仔猪的肠道
疾病。因此，除 了满足仔猪的日粮营养需求之外，也可以通过添加饲用酶制剂和
益生菌的方 法，有助于弥补断奶仔猪内源酶分泌量的不足，同时减轻断奶应激对肠道组织 和功能上的不利影响，从而实现改善动物生长性能及肠道屏障功能的作用。
[0003] 近年来，人们发现单纯通过单一添加剂，不能满足动物生产的需要，因此 混合型酶菌制剂引起了广大畜牧工作者的极大关注。特别是针对专一性强的断 奶仔猪阶段，必须有效梳理不同酶制剂及益生菌的作用效果，才能更好的进行 产品设计，实现改善动物生长发育、提高饲料利用率的功能。但迄今为止，相 关研究及产品开发较少。
发明内容
[0004] 本发明的目的在于提供一种能提高仔猪生长性能、提高
机体免疫
力、调节 仔猪肠道功能的酶菌饲料添加剂，以解决仔猪饲养过程中的肠道损伤和生长性 能的下降问题。
[0005] 本发明提供一种酶菌饲料添加剂，所述酶菌饲料添加剂包含
碱性蛋白酶、 酸性蛋白酶、中性蛋白酶、色
氨酸、淀粉酶、甘露聚糖酶、丁酸梭菌和枯草芽 胞杆菌。
[0006] 所述酶菌饲料添加剂各组分占饲料添加剂总
质量的百分比分别为：碱性蛋 白酶20％-30％、酸性蛋白酶10％-30％、中性蛋白酶5％-15％、
色氨酸5％-10％、 淀粉酶5％-
10％、甘露聚糖酶2％-7％、丁酸梭菌3％-8％、枯草芽胞杆菌3％-8％； 优选地，所述淀粉酶为中温淀粉酶。
[0007] 本发明提供的酶菌饲料添加剂，主要原料组成及配比合理、相互之间发挥 协同作用：碱性蛋白酶和中性蛋白酶主要在仔猪小肠内发挥作用，可以
钝化蛋 白原料中的
抗营养因子，如β-伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子等，进而减少 仔猪的过敏反应，进而减少仔猪腹泻，也可以把
蛋白质水解成小分子肽键，提 高一些必需氨基酸的吸收效率；酸性蛋白酶主要在仔猪的胃中发挥作用，可以 弥补胃蛋白酶分泌的不足，进而改善胃酸环境，显著提高仔猪对日粮蛋白质的 利用效率，降低
排泄物中氮的排放数量；色氨酸是仔猪日粮的必需氨基酸之一， 具有调控体内
激素分泌、刺激采食、提高饲料转化效率等多种作用，还能够缓 解各种免疫应激，也可以提高仔猪肠道绒毛高度，增加与营养物质的
接触面积， 提高仔猪对营养物质的利用率；淀粉酶采用中温淀粉酶，其发挥作用的最适温 度和仔猪的体温相近，可以很好的发挥酶解作用，提高仔猪对糖的利用率；添 加甘露聚糖酶可以提高仔猪对植物性原料中的甘露糖的吸收效率，对仔猪的生 长起到积极作用；丁酸梭菌和枯草芽胞杆菌，可以在仔猪肠道上皮细胞上大量 粘附，同时释放出有益酸如丁酸等物质，实现有益菌的优势定植，改善肠道菌 群结构，帮助仔猪建立良好的肠道内环境。
[0008] 所述酶菌饲料添加剂各组分占饲料添加剂总质量的百分比分别为：碱性蛋 白酶20％-30％、酸性蛋白酶25％-30％、中性蛋白酶10％-15％、色氨酸5％、 淀粉酶10％、甘露聚糖酶5％-7％、丁酸梭菌5％-8％、枯草芽胞杆菌5％。
[0009] 在本发明
实施例中，所述酶菌饲料添加剂各组分占饲料添加剂总质量的百 分比分别为：
[0010] 碱性蛋白酶30％、酸性蛋白酶30％、中性蛋白酶10％、色氨酸5％、淀粉 酶10％、甘露聚糖酶5％、丁酸梭菌5％、枯草芽胞杆菌5％；或，
[0011] 碱性蛋白酶25％、酸性蛋白酶25％、中性蛋白酶15％、色氨酸5％、淀粉 酶10％、甘露聚糖酶7％、丁酸梭菌8％、枯草芽胞杆菌5％；或，
[0012] 碱性蛋白酶20％、酸性蛋白酶30％、中性蛋白酶15％、色氨酸5％、淀粉 酶10％、甘露聚糖酶7％、丁酸梭菌8％、枯草芽胞杆菌5％。
[0013] 所述碱性蛋白酶活力不低于2.5万单位/克，酸性蛋白酶活力不低于2万单 位/克，中性蛋白酶活力不低于2万单位/克，色氨酸纯度不低于65％，淀粉酶 活力不低于3000单位/克，甘露聚糖酶活力不低于3万单位/克，丁酸梭菌活力 不低于109cfu/克，枯草芽胞杆菌活力不低于109cfu/克。
[0014] 本发明还提供一种制备上述酶菌饲料添加剂的方法，所述方法为：将各种 原料称重后进行筛分过60目，将筛分好的原料，按配比进行称重，进行总混， 得到酶菌饲料添加剂产品。
[0015] 本发明还提供一种仔猪日粮，所述日粮包含
基础日粮和上述的酶菌饲料添 加剂。
[0016] 所述基础日粮与酶菌饲料添加剂的质量比为1000kg：150g-1000kg：450g； 优选地，所述基础日粮与酶菌饲料添加剂的质量比为1000kg：450g。
[0017] 本发明还提供上述的酶菌饲料添加剂在仔猪饲料中的应用。
[0018] 所述应用为如下任意一种应用：
[0019] (1)提高仔猪的生长性能；
[0020] (2)提高仔猪的免疫功能；
[0021] (3)调节仔猪的肠道功能。
[0022] 本发明提供的酶菌饲料添加剂，主要原料组成及配比合理、相互之间发挥 协同作用，与目前常用的抗生素、化学抗菌药物、抗病毒药物以及营养性药物 均无配伍禁忌。本发明酶菌饲料添加剂具体有益效果如下：
[0023] 1、提高仔猪生长性能：日粮添加酶菌饲料添加剂，显著提高了断奶仔猪 平均日增重和平均日采食量，显著降低了断奶仔猪的饲料增重比。
[0024] 2、提高仔猪机体免疫力：添加中酶菌饲料添加剂，可以显著降低血清尿 素氮含量；随着酶菌制剂含量的提高，显著影响血清尿素氮和血清谷草转氨酶 的水平。
[0025] 3、调节仔猪的肠道功能：添加中酶菌饲料添加剂，可以改善肠道健康， 显著提高断奶仔猪十二肠道和空肠的绒毛高度；随着酶菌饲料添加剂添加量的 提高，可以显著改善仔猪的空肠绒毛高度。
[0026] 4本饲料添加剂原料较为稳定，可以在室温条件下长期储存，保质期可达 两年，具有较大的应用前景。
[0027] 5、该添加剂产品具有利用率高、添加方便等诸多优势，市场前景较好。
具体实施方式
[0028] 以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用 于说明本发明而非用于限定本发明的范围。所述方法如无特别说明均为常规方 法，所述原料如无特别说明均能从公开商业途径获得。
[0029] 以下实施例中使用的原料：
[0030] 酸性蛋白酶：酶活力为4万单位/克，购自洛阳牧为
生物科技有限公司
[0031] 碱性蛋白酶：酶活力为3万单位/克，购自河南新仰韶生物科技有限公司
[0032] 中性蛋白酶：酶活力为6万单位/克，购自洛阳牧为生物科技有限公司
[0033] 淀粉酶：酶活性4千单位/克，购自河南新仰韶生物科技有限公司
[0034] 甘露聚糖酶：酶活力为5万单位/克，购自洛阳牧为生物科技有限公司
[0035] 丁酸梭菌：活菌数不低于109cfu/克，购自河南新仰韶生物科技有限公司
[0036] 枯草芽胞杆菌：活菌数不低于109cfu/克，购自河南新仰韶生物科技有限 公司[0037] 实施例1、不同剂量的酶菌饲料添加剂对断奶仔猪的影响
[0038] 1、试验设计
[0039] 试验采用单因子随机区组设计，选择初始体重为6.5kg的三元健康断奶仔 猪240头，随机分为4个处理，每个处理6个重复，每个重复(栏)10头猪， 试验期28d。试验开始前测定日粮原料的氨基酸和
粗蛋白质水平。
[0040] 试验分组如下：
[0041] 第1组饲喂基础日粮，为对照组
[0042] 第2组每吨基础日粮添加150克酶菌饲料添加剂，为低剂量组
[0043] 第3组每吨基础日粮添加300克酶菌饲料添加剂，为中剂量组
[0044] 第4组每吨基础日粮添加450克酶菌饲料添加剂，为高剂量组
[0045] 酶菌饲料添加剂各组分占饲料添加剂总质量的百分比为：碱性蛋白酶 30％、酸性蛋白酶30％、中性蛋白酶10％、色氨酸5％、中温淀粉酶10％、甘 露聚糖酶5％、丁酸梭菌5％、枯草芽胞杆菌5％。
[0046] 日粮的其余养分满足NRC(2012)推荐值，日粮配方及营养水平参照表1。
[0047] 表1基础日粮组成及营养水平(％，饲喂基础)
[0048]
[0049]
[0050] 注：每公斤饲料中由预混料提供：维生素A，5,512IU；维生素D3，2,200IU；维生素 E，30IU；维生素K3，2.2mg；维生素B12，27.6μg；核黄素，4.0mg，泛酸，13.8mg； 烟酸，30.0mg；氯化胆碱，400mg；叶酸，0.7mg；维生素B1,1.5mg；维生素B6,3.0mg； 锰，40mg；
铁，75mg；锌，
75mg；
铜，100mg；碘，0.3mg；硒，0.3mg。
[0051] 试验猪饲养在封闭式猪舍内，
水泥地面，通
风良好。试验期间自由采食和 饮水，按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。以栏为单位准确记录猪每天的 饲料采食量。
[0052] 2、测定指标与方法
[0053] (1)日粮成分
[0054] 日粮粗蛋白质参照中华人民共和国国家标准GB/T 6432-1994推荐的方法 测定。15种氨基酸和含硫氨基酸分别参照GB/T 18246-2000和GB/T 15399-94 的方法测定，使用仪器为氨基酸自动分析仪(日立L-8900型，日立集团，日 本)测定。色氨酸参照GB/T 18246-
2000方法测定，使用仪器为高效液相色谱 仪(安捷伦1200型，安捷伦科技有限公司，美国)测定。
[0055] (2)生长性能
[0056] 试验开始和结束
时空腹12h逐个称重，以重复(栏)为单位记录耗料量， 计算平均日增重、平均日采食量和饲料增重比。
[0057] (3)血液指标
[0058] 试验结束时，每栏选择接近平均体重的健康猪1头(每个处理6头猪)， 用
真空采血管从前腔静脉采血约9mL，室温下倾斜1h后，3,000r/min离心 10min，分离血清，置于-80℃冷冻保存。通过全自动血清分析仪检测血清谷 草转氨酸、总蛋白、
白蛋白、肌酐、甘油三酯、总胆固醇和
葡萄糖的含量。血 清尿素氮采用
试剂盒(南京建成生物科技有限公司，中国)方法测定。
[0059] (4)肠道形态
[0060] 取出肠道的十二指肠、空肠、回肠各3cm左右，用玻璃棒轻轻刮去消化 道食糜，用生理盐水冲干净，然后用
滤纸吸干消化道残余水分，置于10％甲
醛 磷酸缓冲液中进行固定，经过脱色、
石蜡包埋、切片、
染色后，利用
软件测量 十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度和隐窝深度，每张切片观察10个
视野，并 计算绒毛高度和隐窝深度的比值。
[0061] 3、数据统计与分析
[0062] 在进行数据分析时，以试验重复为单位，采用SAS(2001)中GLM模型 (SAS Institute，Cary，NC)进行数据分析，通过单因素方差分析、线性和二 次效应评估日粮不同色氨酸含量对生长性能、血液指标及肠道形态的影响，处 理间显著性判定水平为P<0.05，数据平均值以LSMEANS表示。
[0063] 4、结果
[0064] (1)日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪生长性能的影响
[0065] 酶菌饲料添加剂对断奶仔猪生长性能影响见表2。从表可知，日粮添加酶 菌饲料添加剂产品，显著提高了断奶仔猪平均日增重和平均日采食量 (P<0.05)；与对照组相比，添加不同比例酶菌饲料添加剂时，显著降低了断 奶仔猪的饲料增重比(P<0.05)；随着酶菌饲料添加剂的剂量增加，显著改善 平均日增重(线性和二次，P<0.05)和平均日采食量(二次，P<0.05)，显著 降低饲料增重比(线性，P<0.05)。
[0066] 表2日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪生长性能的影响
[0067]
[0068] 注：上述表中同行上标不同表示差异显著，下同。
[0069] (2)日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪血清指标的影响
[0070] 日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪血清指标的影响见表3。从表可 知，与对照组相比，添加高剂量酶菌饲料添加剂，可以显著降低血清尿素氮含 量(P<0.05)；随着酶菌饲料添加剂含量的提高，显著影响血清尿素氮(线性 和二次，P<0.05)和血清谷草转氨酶的水平(线性，P<0.05)。
[0071] 表3日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪血清生化指标的影响
[0072]
[0073]
[0074] (3)日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪肠道形态的影响
[0075] 日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪肠道形态的影响见表4。从表可 知，与对照组相比，添加中等剂量的酶菌饲料添加剂，显著提高了断奶仔猪十 二肠道和空肠的绒毛高度(P<0.05)；随着酶菌饲料添加剂添加量的提高，可 以显著改善仔猪的空肠绒毛高度(二次，P<0.05)。
[0076] 表4日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪肠道形态的影响
[0077]
[0078] 实施例2、不同组分配比的酶菌饲料添加剂对断奶仔猪的影响
[0079] 1、试验设计
[0080] 试验采用单因子随机区组设计，选择初始体重为6.7kg的三元健康断奶仔 猪240头，随机分为4个处理，每个处理6个重复，每个重复(栏)10头猪， 试验期28d。试验开始前测定日粮原料的氨基酸和粗蛋白质水平。
[0081] 试验分组如下：
[0082] 第1组饲喂基础日粮，为对照组；
[0083] 第2组、3组、4组每吨基础日粮添加450克酶菌饲料添加剂，其中：
[0084] 第2组酶菌饲料添加剂的组分及质量配比为：碱性蛋白酶30％、酸性蛋白 酶30％、中性蛋白酶10％、色氨酸5％、中温淀粉酶10％、甘露聚糖酶5％、 丁酸梭菌5％、枯草芽胞杆菌5％；
[0085] 第3组酶菌饲料添加剂的组分及质量配比为：碱性蛋白酶25％、酸性蛋白 酶25％、中性蛋白酶15％、色氨酸5％、中温淀粉酶10％、甘露聚糖酶7％、 丁酸梭菌8％、枯草芽胞杆菌5％；
[0086] 第4组酶菌饲料添加剂的组分及质量配比为：碱性蛋白酶20％、酸性蛋白 酶30％、中性蛋白酶15％、色氨酸5％、中温淀粉酶10％、甘露聚糖酶7％、 丁酸梭菌8％、枯草芽胞杆菌5％。
[0087] 日粮的其余养分满足NRC(2012)推荐值，日粮配方及营养水平参照表1。
[0088] 试验猪饲养在封闭式猪舍内，水泥地面，
通风良好。试验期间自由采食和 饮水，按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。以栏为单位准确记录猪每天的 饲料采食量。
[0089] 2、测定指标与方法参见实施例1。
[0090] 3、数据统计与分析参见实施例1。
[0091] 4、结果
[0092] (1)日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪生长性能的影响
[0093] 酶菌饲料添加剂对断奶仔猪生长性能影响见表5。从表5可知，日粮添加 酶菌饲料添加剂产品，显著提高了断奶仔猪平均日采食量，显著降低饲料增重 比。
[0094] 表5日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪生长性能的影响
[0095]
[0096] 注：上述表中同行上标不同表示差异显著，下同。
[0097] (2)日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪血清指标的影响
[0098] 日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪血清指标的影响见表6。从表6可 知，与对照组1组相比，添加酶菌饲料添加剂，可以显著降低血清中尿素氮含 量。
[0099] 表6日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪血清生化指标的影响
[0100]
[0101] (3)日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪肠道形态的影响
[0102] 日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪肠道形态的影响见表7。从表7可 知，与对照组1组相比，添加酶菌饲料添加剂，可以提高十二指肠、空肠、回 肠的绒毛高度，提高十二指肠和空肠的隐窝深度。
[0103] 表7日粮中添加酶菌饲料添加剂对断奶仔猪肠道形态的影响
[0104]
[0105]
