专利汇可以提供一种用于鉴定凉山虫草的引物对及其应用专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种用于鉴定凉山虫草的引物对及其应用,所述引物对及其序列为:P1,SEQ ID NO.1~2;P2,SEQ ID NO.3~4;P3,SEQ ID NO.5~6。(1)本发明克服了传统分类学研究的弊端,实现了凉山虫草的快速准确鉴定;(2)本发明所述引物对具有很高的 稳定性 ,不仅可以区分鉴定基原物种,还可以用来澄清虫草属一些特定种类或复合种的分类问题,对虫草属的系统学和分类提供技术支持。,下面是一种用于鉴定凉山虫草的引物对及其应用专利的具体信息内容。
1.一种用于鉴定凉山虫草的引物对,其特征在于,所述引物对及其序列为:P1,SEQ ID NO.1~2;P2,SEQ ID NO.3~4;P3,SEQ ID NO.5~6。
2.根据权利要求1所述的一种用于鉴定凉山虫草的引物对,其特征在于,所述引物对P1、P2和P3的上游引物的5,端加上特异性的GC发卡结构,所述发卡结构的长度为40bp,序列为SEQ ID NO.7。
3.权利要求1或2所述引物对在制备鉴定凉山虫草试剂盒中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述试剂盒的组分包括:引物对、dNTP、DNA聚合酶、LC Green、反应缓冲液。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述试剂盒鉴定凉山虫草的步骤包括:
(1)提取凉山虫草样品的基因组DNA;
(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,以P1为特异性引物,进行第一轮PCR扩增;
(3)取步骤(2)的扩增产物,稀释100~1000倍后作为第二轮PCR的模板,以P2作为特异性引物,进行第二轮PCR扩增;
(4)取第二轮PCR扩增的产物,稀释10~100倍后作为第三轮PCR的模板,以P3作为特异性引物,进行第三轮PCR扩增;
(5)收集第三轮PCR扩增的产物,并采用琼脂糖凝胶电泳检测。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述凉山虫草样品的基因组DNA的提取方法是试剂盒法或改良CTAB法。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述PCR扩增的程序为:95℃,2min;95℃,
30s,52℃,30s,72℃,55s,35个循环;72℃,7min。
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