【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、環境ストレスや加齢によって引き起こされる生体機能の低下、特に皮膚・
毛髪・口腔組織の機能の低下を予防あるいは改善する効果の高い外用組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】通常、
皮膚・毛髪・口腔などの生体組織は、新陳代謝によって、種々の要因により起こる機能の低下や構造的変化などを速やかに改善することができる。 しかしながら、紫外線や乾燥・有害科学物質などの過度な暴露や加齢に伴って、生体組織に傷害が蓄積することにより、本来の働きが損なわれ、さまざまなトラブルが発生する。 皮膚であれば、しみやしわ、肌荒れ、アトピー様症状などに悩まされるようになる。 毛髪においては、抜け毛、薄毛、
白髪などの発生を引き起こす。 口腔分野では、歯肉の退縮や歯茎からの出血といった病態を示すようになる。 このように機能的、構造的な劣化を示す生体組織に対して、機能低下の原因となる活性酸素種の発生や慢性的炎症を防いだり、組織自体を賦活化して機能の低下した生体組織を修復し、健常組織へと再生する方法が考えられている。

【０００３】活性酸素種の発生を防ぐものとしては、生体組織にダメージを与える活性酸素種の一つである一重項酸素を消去するものとしてビタミン類や各種植物抽出物が提案されている（特開平７−１３３２１６等公報）。 また、慢性的な炎症やアレルギー反応を抑えるものとしては、ヒアルロニダーゼ阻害活性を有する物質の探索が盛んに行われており、いくつかの海藻や植物成分が見出されている（特開平８−５３３６０等公報）。 組織自体を賦活化する手段としては、皮膚組織や歯肉組織のコラーゲン合成能を高める方法が数多く示されおり、
細菌や植物の抽出物、アミノ酸組成物を用いる方法（特開平７−１９４３７５等公報）などが提案されている。

【０００４】しかしいずれの手段も、安全性上使用量の制限が必要であったり、作用・効果が不十分な点や、活性を保ったまま製剤に安定に配合することが困難であるというような問題点が残されていた。

【０００５】本発明は、上記事情に鑑みなされたもので、医薬品、医薬部外品、化粧品など様々な分野に適用でき、安全性が高く、かつ生体組織に対する優れた傷害防御作用ならびに賦活作用を有する外用組成物を提供することを目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段及び発明の実施の形態】本発明者らは、天然物の生体組織に対する優れた傷害防御作用ならびに賦活作用について鋭意研究を重ねた結果、
カンナ・グラウカ（Ｃａｎｎａ ｇｌａｕｃａ）、フィカス・インスピーダ（Ｆｉｃｕｓ ｉｎｓｐｉｄａ）、
アネモパエグマ（Ａｎｅｍｏｐａｅｇｍａ）属植物、ヒマタンツス（Ｈｉｍａｔａｎｔｈｕｓ）属植物、オコテア（Ｏｃｏｔｅａ）属植物、アブタ（Ａｂｕｔａ）属植物、カヤポニア（Ｃａｙａｐｏｉｎａ）属植物、ナハカノコソウ（Ｂｏｅｒｈａｖｉａ）属植物又はそれらの抽出物に優れた生体組織に対する傷害防御作用ならび賦活作用があることを見出し、本発明を完成するに至った。

【０００７】従って、本発明は、上記植物又はそれらの抽出物の一種又は二種以上を含有する外用組成物を提供する。 本発明の外用組成物は、皮膚・毛髪組織、口腔組織に対して優れた傷害防御作用ならびに賦活作用を有し、かつ安全性が高く、医薬品、医薬部外品、化粧品などに好適に用いることができる。 以下、本発明につき更に詳しく説明する。

【０００８】本発明に用いられる、カンナ・グラウカ（Ｃａｎｎａ ｇｌａｕｃａ）は、現地名をアルバラー（Ａｌｂａｒａ）といい、熱帯アメリカに分布する。 利尿、発汗、リューマチなどに用いられ、優れた傷害防御作用ならびに賦活作用を有する。 フィカス・インスピーダ（Ｆｉｃｕｓ ｉｎｓｐｉｄａ）は、現地名をコアジングーバ（Ｃｏａｊｉｎｇｕｂａ）といい、熱帯アメリカに分布する。 駆虫剤としての作用があり、また黄疸や水腫病などに用いられ、優れた傷害防御作用ならびに賦活作用を有している。 アネモパエグマ（Ａｎｅｍｏｐａ
ｅｇｍａ）属は、熱帯アメリカに分布し、消化器病、循環器病に用い、また神経痛、リューマチ、赤痢などの用途で用いられており、中でも現地名カツアーバ（Ｃａｔ
ｕａｂａ：Ａｎｅｍｏｐａｅｇｍａ ａｒｖｅｎｓｅおよびＡｎｅｍｏｐａｅｇｍａ ｇｌａｕｃｕｍ）に優れた傷害防御作用ならびに賦活作用があり特に望ましい。
ヒマタンツス（Ｈｉｍａｔａｎｔｈｕｓ）属は、熱帯アメリカに分布し、駆風剤、リューマチなどの用途で用いられており、中でも現地名スクーバ（Ｓｕｃｃｕｂａ：
Ｈｉｍａｔａｎｔｈｕｓ ｓｕｃｃｕｂａ）に優れた傷害防御作用ならびに賦活作用があり特に望ましい。 オコテア（Ｏｃｏｔｅａ）属は、熱帯から温暖のアメリカに分布し、少数がアフリカ、マダカスカルに分布する。 強壮剤、リューマチ、神経痛などの用途で用いられており、中でも現地名カネラ・デ・シェイロ（Ｃａｎｅｌａ
−ｄｅｃｈｅｉｒｏ：Ｏｃｏｔｅａ ｏｐｉｆｅｒａ）
に優れた傷害防御作用ならびに賦活作用があり特に望ましい。 アブタ（Ａｂｕｔａ）属は、熱帯南アメリカに分布し、利尿、腎臓結石、胃弱などの用途で用いられており、中でも現地名アブツア（Ａｂｕｔｕａ：Ａｂｕｔａ
ｇｒａｎｄｉｆｏｌｉａ）に優れた傷害防御作用ならびに賦活作用があり特に望ましい。 カヤポニア（Ｃａｙ
ａｐｏｉｎａ）属は、熱帯アメリカに分布し、下剤、蛇毒の解毒などの用途で用いられており、中でも現地名タユヤー（Ｔａｉｕｉａ：Ｃａｙａｐｏｎｉａｔａｙｕｙ
ａ）に優れた傷害防御作用ならびに賦活作用があり特に望ましい。 ナハカノコソウ（Ｂｏｅｒｈａｖｉａ）属は、熱帯・亜熱帯地方に分布し、利尿、肝炎、腎臓炎、
健胃などの用途で用いられており、中でも現地名エルヴァ・トストン（Ｅｒｖａ−ｔｏｓｔａｏ：Ｂｏｅｒｈａ
ｖｉａ ｃｏｃｃｉｎｅａ）に優れた傷害防御作用ならびに賦活作用があり特に望ましい。

【０００９】上記植物群は、その木部、心材部、樹皮部、茎部、枝部、葉部、根部、種子部、果実部、花部などを用いることができる。

【００１０】上記植物の抽出物としては、抽出エキスでもよく、抽出液から分離精製したものでもよい。 抽出エキスの場合は、上記植物体を乾燥あるいはそのまま粉砕したものを溶媒抽出することによって得ることができ、
抽出溶媒が使用上無毒性のものであれば抽出液をそのまま用いても、適宜な溶媒で希釈した希釈液として用いてもよく、あるいは濃縮エキスとしたり、凍結乾燥などにより乾燥粉末としたり、ペースト状に調製したものなどが利用できる。

【００１１】上記植物の抽出物を得るのに用いる溶媒としては、メタノール、エタノール、ブタノール、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン、酢酸エチル、アセトンなどの一般に用いられる有機溶媒、及び水などを挙げることができ、これらの１種を単独で又は２種以上を混合して使用することができる。 これらの溶媒の中では特にメタノール、エタノール、水が好ましい。 なお、抽出処理は、通常３〜７０℃程度の温度で常法によって行うことができる。

【００１２】溶媒抽出の他に、炭酸ガスを超臨界状態にして行う超臨界抽出によって得たエキスも同様に利用できる。 このときには、抽出助剤としてヘキサン、エタノールなどを用いることもできる。 また、抽出物からの有効成分の分離精製は、抽出物をカラムクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィーなどで精製することによって行うことができる。

【００１３】本発明の外用組成物は、上記植物又はそれらの抽出物の一種又は二種以上を有効成分として含有するものである。 その配合量は、有効量であり、組成物の用途、剤型等に応じて適宜選定されるが、通常０．００
００１〜２０質量％配合するのがよい。 好ましくは０．
０００１〜１０質量％配合するのがよい。 配合量が０．
００００１質量％未満であると、本発明の効果を発揮できず、また剤形によっては製造が困難になるものもあることから、２０質量％を超えないほうがよい。

【００１４】本発明の外用組成物は、皮膚、口腔などの粘膜、毛髪などに適用され、例えばクリーム、ハンドクリーム、乳液、化粧水、、ローション、石鹸、ハンドソープ、ボディソープ、制汗剤、水虫薬、にきび治療剤、
手指消毒剤、美白剤、貼付剤などの皮膚外用剤及び皮膚化粧料、シャンプー、リンス、トニック、育毛剤等の毛髪化粧料、歯磨、洗口剤、歯肉マッサージクリーム等の口腔用組成物などとして調製することができる。

【００１５】この場合、本発明の外用組成物は、上記外用組成物の種類、剤型などに応じた公知の配合成分を用いて常法により調製できる。 なお、本発明組成物には、
上記有効成分に加えて、一般に用いられている細胞賦活剤、例えばホルモン類、ビタミン類、サポニン類などの生薬抽出物、胎盤抽出物、植物レクチンなどをあわせて用いることができる。

【００１６】

【発明の効果】本発明の外用組成物は、安定で、環境ストレスや加齢によって引き起こされる生体機能の低下、
特に皮膚・毛髪・口腔組織の機能の低下を予防あるいは改善する効果に優れていることから、応用範囲が極めて広いものである。

【００１７】

【実施例】以下、調製例、実験例、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の例に制限されるものではない。

【００１８】〔調製例１〕カンナ・グラウカ（Ｃａｎｎ
ａ ｇｌａｕｃａ）の抽出 アルバラー：Ａｌｂａｒａ（カンナ・グラウカ：Ｃａｎ
ｎａ ｇｌａｕｃａ）の全草の粉砕物１ｋｇに１０Ｌの７０％エタノールを加え、２日間抽出した。 抽出液を濾過した後、エタノールを減圧留去して抽出エキス９６ｇ
を得た。

【００１９】〔調整例２〕フィカス・インスピーダ（Ｆ
ｉｃｕｓ ｉｎｓｐｉｄａ）の抽出 コアジングーバ：Ｃｏａｊｉｎｇｕｂａ（フィカス・インスピーダ：Ｆｉｃｕｓ ｉｎｓｐｉｄａ）の樹皮の粉砕物１ｋｇに１０Ｌの７０％エタノールを加え、２日間抽出した。 抽出液を濾過した後、エタノールを減圧留去して抽出エキス８５ｇを得た。

【００２０】〔調製例３〕アネモパエグマ（Ａｎｅｍｏ
ｐａｅｇｍａ）属植物の抽出 カツアバ：Ｃａｔｕａｂａ（アネモパエグマ・アルベンス：Ａｎｅｍｏｐａｅｇｍａ ａｒｖｅｎｓｅ）の樹皮の粉砕物１ｋｇに１０Ｌのメタノールを加え、室温で２
日間抽出した。 抽出液を濾過した後、メタノールを減圧留去して、抽出エキス１０３ｇを得た。 また、アネモパエグマ・グラウカム：Ａｎｅｍｏｐａｅｇｍａ ｇｌａ
ｕｃｕｍ）の樹皮も同様に抽出し、８８ｇのエキスを得た。

【００２１】〔調製例４〕ヒマタンツス（Ｈｉｍａｔａ
ｎｔｈｕｓ）属植物の抽出 スクーバ：Ｓｕｃｕｕｂａ（ヒマタンツス・スクーバ：
Ｈｉｍａｔａｎｔｈｕｓ ｓｕｃｃｕｂａ）の樹皮および葉の粉砕物１ｋｇに１０Ｌの９５％エタノールを加え、室温で２日間抽出した。 抽出液を濾過した後、エタノールを減圧留去して、抽出エキス９０ｇを得た。

【００２２】〔調製例５〕オコテア（Ｏｃｏｔｅａ）属植物の抽出 カネラ・デ・シェイロ：Ｃａｎｅｌａ−ｄｅ−ｃｈｅｉ
ｒｏ（オコテア・オピフェラ：Ｏｃｏｔｅａ ｏｐｉｆ
ｅｒａ）の果実および樹皮の粉砕物それぞれ１ｋｇに１
０Ｌの９５％エタノールを加え、室温で２日間抽出した。 抽出液を濾過した後、エタノールを減圧留去して抽出エキス１１６ｇと１０９ｇを得た。

【００２３】〔調製例６〕アブタ（Ａｂｕｔａ）属植物の抽出 アブツア：Ａｂｕｔｕａ（アブタ・グランデフォリア：
Ａｂｕｔａ ｇｒａｎｄｉｆｏｌｉａ）の根と樹皮の粉砕物１ｋｇに１０Ｌの９５％エタノールを加え、室温で２日間抽出した。 抽出液を濾過した後、エタノールを減圧留去して、抽出エキス７５ｇを得た。

【００２４】〔調製例７〕カヤポニア（Ｃａｙａｐｏｉ
ｎａ）属植物の抽出 タユヤー：Ｔａｉｕｉａ（カヤポニア・タユヤ：Ｃａｙ
ａｐｏｉｎａ ｔａｙｕｙａ）の、全草の粉砕物１ｋｇ
に１０Ｌの７０％エタノールを加え、室温で２日間抽出した。 抽出液を濾過した後、エタノールを減圧留去して、抽出エキス１２０ｇを得た。

【００２５】〔調製例８〕ナハカノコソウ（Ｂｏｅｒｈ
ａｖｉａ）属植物の抽出 エルヴァ・トストン：Ｅｒｖａ−ｔｏｓｔａｏ（ボエルハビア・コクシネア：Ｂｏｅｒｈａｖｉａ ｃｏｃｃｉ
ｎｅａ）の全草の粉砕物１ｋｇに１０Ｌのメタノールを加え、室温で２日間抽出した。 抽出液を濾過した後、メタノールを減圧留去して、抽出エキス１０３ｇを得た。

【００２６】〔実験例１〕調製例に従って得た各植物の抽出エキスを用い、下記の方法で生体組織に傷害を与える一重項酸素の消去能について評価した。 結果を表１に示す。 方法：一重項酸素はローズベンガル（和光純薬工業（株））に蛍光灯を照射することにより発生させ、スクワレンの酸化の程度を指標に一重項酸素消去能を測定した。 ３ｍＭスクワレン、２５μＭ ローズベンガル、
になるようにサンプルを適量とメタノールを加えて溶液を調製した。 コントロールにはメタノールのみを加えた。 ４℃で蛍光灯を１８時間照射した。 照射時間０時間のものをブランクとした。 生じた過酸化スクワレンをＴ
ＢＡ法にて定量した。 標準物質には１，１，３，３−テトラエトキシプロパン（和光純薬工業（株））を用いた。 １ｍｌの溶液にＴＢＡ試薬（０．３７５％チオバルビトール酸、１５％トリクロロ酢酸、０．０４％ブチルヒドロキシトルエン、２％エタノール、０．２５Ｎ塩酸）を２ｍｌ加えて、攪拌後、沸騰水浴上で１時間加熱した。 氷冷して室温まで冷却後、ブタノールで抽出後、
ブランクを対照として５３５ｎｍの吸光度を測定した。
一重項酸素消去能の程度は、コントロールのＴＢＡ値を１００としたときの相対値で表わし、９０％以上を◎、
６０〜８９％を○、３０〜５９％を△、３０％未満を×
として表わした。

【００２７】

【表１】

【００２８】表１の結果から明らかなように、各植物抽出物の高い一重項酸素消去能が立証された。

【００２９】〔実験例２〕調製例に従って得た各植物の抽出エキスを用い、下記の方法で炎症やアレルギーの発症に関与するヒアルロニダーゼの阻害活性について評価した。 結果を表２に示す。 方法：酵素（ｔｙｐｅ ＩＶ
−Ｓ ｆｒｏｍ Ｂｏｖｉｎｅ ｔｅｓｔｉｓ、ＳＩＧ
ＭＡ社製）溶液１００μｌ（４，０００ｕｎｉｔ／ｍ
ｌ）に上記製造例で得た各抽出エキス試料２００μｌを加えて、３７℃で２０分間インキュベートした。 次に、
酵素活性化剤（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ４８／８０、ＳＩＧ
ＭＡ社製）溶液（０．１ｍｇ／ｍｌ）２００μｌを加え、３７℃で２０分間インキュベートした後、基質であるヒアルロン酸カリウム（ｆｒｏｍ ｒｏｏｓｔｅｒ
ｃｏｍｂ、和光純薬社製）溶液（０．４ｍｇ／ｍｌ）５
００μｌを入れ、３７℃で４０分間インキュベートした。

【００３０】次いで、０．４Ｍ水酸化ナトリウム溶液２
００μｌを加えて反応を停止させた後、Ｍｏｒｇａｎ−
Ｅｌｓｏｎ法の変法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２１
７，９５９（１９５５））で生成したＮ−アセチルヘキソサミン量を吸光度ＯＤ _{５８５ｎｍ}から求めた。

【００３１】また、酵素反応には０．１ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ３．５）を用い、ヒアルロニダーゼ阻害活性は次式より求められる阻害率で算出した。

【００３２】

【数１】

９％を△、３０％未満を×として表わした。

【００３３】

【表２】

【００３４】表２の結果から明らかなように、各植物抽出物の高いヒアルロニダーゼ阻害活性が立証された。

【００３５】〔実験例３〕調製例に従って得た各植物の抽出エキスを用い、下記の方法で組織の賦活化に関与しているコラーゲン合成能について評価した。 結果を表３
に示す。 方法：２４穴細胞培養用プレートにヒト皮膚由来線維芽細胞（クラボウ社）を２５％コンフレントになるように播種し、コンフレントになるまで１０％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ培地で３７℃、５％炭酸ガス存在下で培養した。 サンプルを適量加えた後、１８時間同条件にて培養した。 コントロールには同量の培地を加えた。 培養上清中に含まれるＩ型コラーゲンをＥＬＩＳＡ法にて定量した。 １００μｌの培養上清をＥＬＩＳＡ用プレートに添加し、１８時間室温中で保管した。 ０．０５％Ｔｗｅ
ｅｎ−２０を含むＰＢＳ（ＰＢＳ−Ｔ）で洗浄後、１％
スキムミルク／ＰＢＳ−Ｔで２時間ブロッキングした。
抗ヒトＩ型コラーゲン抗体、ペルオキシダーゼ標識抗ラットＩｇＧ抗体で処理し、ペルオキシダーゼ発色用キットを用いて発色させた。 ４５０ｎｍの吸光度から培養上清中に含まれるＩ型コラーゲン量を求めた。 コントロールに対して、Ｉ型コラーゲン量が１２０％以上を◎、１
０１〜１１９％を○、１００％未満を×として表わした。

【００３６】

【表３】

【００３７】表３の結果から明らかなように、各植物抽出物の高いコラーゲン合成能が立証された。

【００３８】以下、本発明の外用組成物を配合した処方例を示す。 下記の例は、いずれも皮膚や毛髪、口腔のトラブルの予防・改善効果に優れており、安全性も良好なものであった。 尚、各植物抽出物は調製例１〜８の方法の抽出法によるものである。

【００３９】

【表４】

【００４０】

【表５】

【００４１】

【表６】

【００４２】

【表７】

【００４３】

【表８】

【００４４】

【表９】

【００４５】

【表１０】

【００４６】

【表１１】

【００４７】

【表１２】

【００４８】

【表１３】

【００４９】

【表１４】

【００５０】

【表１５】

【００５１】

【表１６】

【００５２】

【表１７】

【００５３】

【表１８】

【００５４】

【表１９】

【００５５】

【表２０】

【００５６】

【表２１】

【００５７】

【表２２】

【００５８】

【表２３】

【００５９】

【表２４】

【００６０】

【表２５】

【００６１】

【表２６】

【００６２】

【表２７】

【００６３】

【表２８】

【００６４】

【表２９】

【００６５】

【表３０】

フロントページの続き Ｆターム(参考） 4C083 AA111 AA112 AA122 AB032 AB172 AB212 AB242 AB282 AB332 AB352 AB362 AB442 AC012 AC022 AC072 AC102 AC112 AC122 AC132 AC172 AC182 AC212 AC242 AC272 AC292 AC302 AC312 AC342 AC352 AC392 AC422 AC432 AC442 AC472 AC482 AC532 AC542 AC552 AC562 AC582 AC612 AC642 AC662 AC692 AC712 AC782 AC792 AC812 AC842 AC852 AC862 AC902 AC932 AD022 AD042 AD092 AD132 AD152 AD162 AD172 AD222 AD252 AD272 AD282 AD352 AD392 AD412 AD472 AD512 AD532 AD552 AD572 AD662 CC02 CC04 CC05 CC17 CC23 CC32 CC33 CC36 CC37 CC38 CC39 DD08 DD23 DD31 DD41 EE10 EE12 EE26 EE28 4C088 AB99 AC03 AC04 AC05 AC06 AC11 BA09 BA10 CA03 MA07 MA63 ZA89