专利汇可以提供一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁 醛 稳定高产的方法,为最大化细胞工厂生产异丁醛的产量并使产率接近理论值,异丁醛合成途径必须能够持续高效地表达,以便最小化菌体 生物 量的增长及副产物的生成对资源的消耗。解除合成途径对σ70的唯一性依赖,增强其对σ38的兼容性是实现生产途径持续表达的关键。以σ70非依赖型抗胁迫启动子gadA替代常规的σ70型启动子驱动异丁醛的合成,实现了稳定期和酸胁迫条件下异丁醛合成途径的稳定表达。,下面是一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法专利的具体信息内容。
1.一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法,以σ70非依赖型抗胁迫启动子gadA替代常规的σ70型启动子驱动异丁醛的合成,解除合成途径对σ70的唯一性依赖,增强其对σ38的兼容性,实现了稳定期和酸胁迫条件下异丁醛合成途径的稳定表达。
2.根据权利要求所述一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法,其特征在于采用如下步骤:
A.根据异丁醛合成途径,以σ70非依赖型抗胁迫启动子替代异丁醛合成途径中常规的σ70型启动子;
B.使用PCR方法得到对应的基因序列,并将启动子与生产途径进行连接,构建新的重组质粒;
C.将步骤B所得连接产物化转至大肠杆菌中,经过菌落PCR验证,挑选正确的单菌落,提取得到连接成功的重组质粒;
D.制备用于发酵的菌株JCL260的感受态,将步骤C中得到的质粒使用化转至发酵菌株感受态中,涂布于平板上培养;
E.将步骤D中转化得到的单菌落逐个转接至发酵培养基中,试管培养12小时;
F.将步骤E所得种子液进行转接,,进一步在发酵培养基中进行发酵培养,培养前在发酵瓶中加入同发酵液相同体积的油醇;
发酵培养基组成为:6.0g/l Na2HPO4,3.0g/l KH2PO4,1.0g/l NH4Cl,0.5g/l NaCl,1mM MgSO4,0.1mM CaCl2,10mg/l vitamin B1,8.5%葡萄糖,1%酵母提取物,调节pH至7.0。另加入100μg/ml氨苄霉素和50μg/ml卡那霉素。
3.如权利要求1或2所述的一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法,其特征在于步骤(A)中,所述σ70非依赖型抗胁迫启动子:gadA启动子。
4.如权利要求1或2所述的一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法,其特征在于步骤(F)中,构建的σ70非依赖型抗胁迫启动子调控的细胞工厂的发酵有效期能一直持续到稳定期。
5.如权利要求1或2所述的一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法,其特征在于步骤(F)中,发酵培养基组成为:6.0g/l Na2HPO4,3.0g/l KH2PO4,1.0g/l NH4Cl,0.5g/l NaCl,1mM MgSO4,0.1mM CaCl2,10mg/l vitamin B1,8.5%葡萄糖,1%酵母提取物,调节pH至7.0,另加入100μg/ml氨苄霉素和50μg/ml卡那霉素。
6.如权利要求1或2所述的一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法,其特征在于步骤(F)中,发酵液中加入等体积油醇萃取异丁醛间接增加异丁醛产量。
一种利用σ 非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的
方法
标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
---|---|---|
一种香蕉枯萎菌4号生理小种DCL基因缺失突变体及其小RNA | 2020-05-08 | 735 |
一种大豆生物调控基因的应用 | 2020-05-08 | 876 |
一种利用σ70非依赖型抗胁迫启动子实现异丁醛稳定高产的方法 | 2020-05-13 | 274 |
ZmNAC89转录因子基因的克隆及其在提高玉米耐盐碱性和产量中的应用 | 2020-05-12 | 801 |
抗逆性相关蛋白质及其编码基因和应用 | 2020-05-15 | 45 |
利用BCS1L基因和向导RNA/CAS核酸内切酶系统改良植物农艺性状的方法 | 2020-05-08 | 237 |
番茄TGase基因在提高番茄非生物胁迫抗性中的应用 | 2020-05-11 | 664 |
扁果枸杞中与逆境胁迫响应相关基因及其编码蛋白和克隆方法 | 2020-05-13 | 180 |
中间锦鸡儿CiCPK10基因在调控植物抗逆性的应用 | 2020-05-16 | 860 |
金属和抗坏血酸复合物的制剂、及其获得和用途 | 2020-05-12 | 475 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。