一种培育无刺黑果枸杞的方法
专利汇可以提供一种培育无刺黑果枸杞的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且一种培育无刺黑果枸杞的方法，其特征是培育步骤中以有刺黑果枸杞的茎或成熟 种子 为原始供体材料，采用茎或叶为外植体培养获得无菌组培苗；将获得的组培苗接种于改良的1/4或1/2MS固体培养基，置于日光下进行壮苗培养；壮苗培养之后进行移栽驯化；刚移栽的组培苗要置于散射光下定期浇蒸馏 水 使栽培介质的 含水量 保持在100%田间持水量；对移栽驯 化成 活的健康盆栽组培苗进行控 水处理 并定期浇灌1/8改进的MS 营养液 或1/4改进的MS营养液：盆苗置于日光下，环境 温度 保持在18～28℃。本 发明 采用有茎刺黑果枸杞作为起始材料，成功培育出大量无刺黑果枸杞植株，且无刺植株生长发育良好，为培育无刺黑果枸杞新品种奠定 基础 。，下面是一种培育无刺黑果枸杞的方法专利的具体信息内容。
1.一种培育无刺黑果枸杞的方法，其特征是培育步骤如下：
(1)无性系组培苗的获得
以有刺黑果枸杞的茎或成熟种子为原始供体材料，采用茎或叶为外植体培养获得无菌组培苗；
(2)壮苗培养
将上步获得的组培苗接种于改良的1/4或1/2MS固体培养基，置于自然日光下进行壮苗培养；改良的1/4MS固体培养基，是除了KH2PO4 和KNO3的含量与MS培养基一样，其它大量元素、微量元素、铁盐及有机物质含量均为MS培养基1/4的一种培养基；而改良的1/2MS固体培养基是除了KH2PO4 和KNO3的含量与MS培养基一样，其它大量元素、微量元素、铁盐及有机物质含量均为MS培养基1/2的一种培养基；改良的1/4和1/2MS固体培养基的蔗糖浓度为15～
20 g/L,琼脂浓度为4.3～7.0 g/L,pH值为5.4～5.8；
（3）炼苗及移栽
生根完整小植株在壮苗培养之后进行移栽驯化；移栽介质采用菜园土、腐殖土、沙子、草炭其一或其两种以上混合物；移栽介质121℃高压灭菌30 min～2 h；将壮苗之后的带根植株冲洗干净，并迅速置于多菌灵或甲基托布津工作液中浸泡5～10 min；之后将苗栽植于盆钵中的移栽介质中，浇透蒸馏水之后覆盖带孔塑料膜或带孔保鲜膜保湿；刚移栽的组培苗要置于散射光下，避免日光直射；定期浇蒸馏水使栽培介质的含水量保持在100%田间持水量，从移栽第5～10天开始逐渐揭去保鲜膜或塑料膜；待植株明显开始生长之时再逐渐挪到自然日光下；整个过程的盆土含水量均要保持在80%～100%田间持水量，环境温度保持在
18～28℃；
（4）盆栽控水处理及浇灌营养液
对移栽驯化成活的健康盆栽组培苗进行控水处理并定期浇灌1/8改进的MS营养液或1/
4改进的MS营养液：每日浇水，使土壤含水量保持在75%～100%田间持水量；间隔10～30天浇灌一次营养液，浇灌营养液的同时要保证土壤含水量与原先设置的相同，即75%～100%田间持水量；盆苗置于日光下，环境温度保持在18～28℃；此步提到的改进的MS营养液不含蔗糖和琼脂；其大量元素及铁盐含量与MS培养基相同；不含硫酸铜和氯化钴,但其它微量元素的含量为MS培养基的1/2；不含肌醇和甘氨酸，但其它有机物质的含量与MS培养基相同；1/8改进的MS营养液的各种物质含量为改进的MS营养液的1/8；1/4改进的MS营养液的各种物质含量为改进的MS营养液的1/4。
2.根据权利要求1所述的培育无刺黑果枸杞的方法，其特征是以有刺黑果枸杞的茎段为最初的外植体培养无菌组培苗：采集温室内的有菌有刺黑果枸杞茎，在无菌超净工作台用70-75%体积比酒精浸泡茎段30 S～1 min，再用0.1～0.2%质量体积比的氯化汞水溶液或者2%质量体积比次氯酸钠溶液浸泡2～5 min，无菌水冲洗3～6遍；将1～3 cm长的茎段接种到添加 6-BA 0.05～1.0 mg/L+NAA 0～0.5 mg/L的1/2MS或MS固体培养基上，20～28℃每天8～16小时光照培养；待接种的茎段腋芽萌发出嫩枝之后，采集嫩枝的叶片或茎段为外植体：将生长良好的幼叶片横向剪或切为直径3～5mm的小块，接种到含6-BA 0.05～1.0 mg/L+NAA 0～0.5 mg/L的MS固体培养基上，20～28℃下置于微弱散射光下培养1～4周；之后转到正常光照下培养，每天光照8～12 h；将茎剪切为0.5～2 cm的小段，下端朝下插入含6-BA
0.05～1.0 mg/L+NAA 0～0.5 mg/L的MS固体培养基上，20～28℃下每天光照8～12 h；或者将萌发嫩枝插于生根培养基，获得生根小植株之后，再取其茎、叶作为外植体来培养无性系；继续采集无菌无性系的幼嫩茎和叶为外植体，通过离体培养获得次生无性系；用到的MS固体培养基添加0.43～0.7%质量体积比的固化剂琼脂，3～4%质量体积比的蔗糖；121℃高压灭菌15～20min之前用NaOH或KOH溶液将pH值调节到5.4～5.8；1/2MS固体培养基添加蔗糖、大量元素、微量元素、铁盐和有机物质浓度均为MS固体培养基的一半，琼脂含量、pH值及灭菌条件与MS培养基一致。
3.根据权利要求1所述的培育无刺黑果枸杞的方法，其特征是：无性系组培苗的获取是以叶片或茎段为外植体，经过愈伤组织阶段产生的不定芽诱导出的完整小植株最适宜用于后续实验；待愈伤不定芽生长到4 cm高时，剪下带顶芽嫩茎接种到不添加任何植物生长调节剂的1/2MS固体培养基诱导生根；此处的1/2MS固体培养基是添加4.5 g/L的琼脂粉+ 20 g/L分析纯蔗糖+ 1/2MS大量元素+1/2 MS微量元素+ 1/2 MS铁盐+ 1/2MS有机物质的培养基；培养基121℃高压灭菌15 min之前用1 mol/L的KOH将pH值调节为5.6；培养室温度25℃；
叶片外植体在散射光下诱导出愈伤组织之后置于12光照/12黑暗的光周期条件下培养；光照由14 W的led灯管提供。
4.根据权利要求1所述的培育无刺黑果枸杞的方法，其特征是：壮苗培养是将生根小植株接种到玻璃瓶内的改良1/4MS固体培养基；培养基121℃高压灭菌15 min之前用1mol/L的KOH溶液将pH值调节到5.6；培养基添加20 g/L的蔗糖和5.0 g/L的琼脂；接种完后将玻璃瓶置于房屋南面的窗台上，让其接受自然光照，光周期遵从自然日升日落规律；培养温度保持在25℃；待组培苗茎干粗壮、根系发达且叶片变厚呈深绿色时进行移栽。
5.根据权利要求1所述的培育无刺黑果枸杞的方法，其特征是：炼苗及移栽的移栽介质为质量比3:2的腐殖土和草炭；移栽介质121℃高压灭菌40 min，凉透的介质用于移栽；开瓶之后立即将壮苗连同培养基一起取出，放于网眼筐内置于自来水龙头下冲洗；边冲洗边从上往下挤压培养基，不要左右挤压培养基，以避免伤害植株根系；将冲洗干净的组培苗迅速置于多菌灵工作液中浸泡5 min；之后将苗栽植于盆钵中的移栽介质中，浇透蒸馏水之后覆盖带孔保鲜膜保湿；刚移栽的组培苗要置于散射光下，避免日光直射；定期浇蒸馏水保持盆土含水量为100%田间持水量，从移栽第10天开始逐渐揭去保鲜膜；待植株明显开始生长之时再逐渐挪到自然日光下；整个过程的环境温度保持在25℃，并要定期浇灌蒸馏水以保持盆土含水量为90%～100%田间持水量。
6.根据权利要求1所述的培育无刺黑果枸杞的方法，其特征是：盆栽控水处理及浇灌营养液的方法为：挑选健康且长势良好的移栽植株用于盆栽控水处理；每日浇水使盆土含水量保持在85%田间持水量，盆苗置于自然日光下，环境温度保持在25℃；在控水的同时，每隔
15天浇灌一次用0.22 μm滤膜过滤除菌的1/8改进的MS营养液；注意浇灌营养液当天也要保证盆土含水量是85%田间持水量；在整个控水和浇灌营养液的过程中要保证植株不受其他生物或非生物胁迫。
一种培育无刺黑果枸杞的方法
技术领域
背景技术
发明内容
100％田间持水量；盆苗置于日光下，环境温度保持在18～28℃。此步提到的改进的MS营养液不含蔗糖和琼脂；其大量元素及铁盐含量与MS培养基相同；不含硫酸铜和氯化钴,但其它微量元素的含量为MS培养基的1/2；不含肌醇和甘氨酸，但其它有机物质的含量与MS培养基相同。1/8改进的MS营养液的各种物质含量为改进的MS营养液的1/8。1/4改进的MS营养液的各种物质含量为改进的MS营养液的1/4。
具体实施方式
25℃。
4cm的时候，将其剪下插入不添加任何植物生长调节剂的1/2MS固体培养诱导生根。
201610206401.1的方法，嫩茎段外植体接种到含6-BA 0.05mg/L+NAA 0.05mg/L的MS固体培养基诱导愈伤和芽丛；叶片外植体接种到含6-BA 0.4mg/L+NAA 0.05mg/L的MS固体培养基诱导愈伤和芽丛。或者将叶腋萌生嫩枝剪下插入不添加任何植物生长调节剂的1/2MS培养基诱导生根，然后采集生根植株的幼嫩茎和叶为外植体获得无性系。也可以继续采集无菌无性系的幼嫩茎和叶为外植体，通过离体培养获得次生无性系。此步用到的1/2MS固体培养基添加蔗糖20g/L，琼脂0.45g/L。121℃高压灭菌15min之前用1mol/L的KOH溶液将pH值调节到5.6。
硝酸铵(NH4NO3) 206.25(1/8MS)
硝酸钾(KNO3) 237.50(1/8MS)
氯化钙(CaCl2·2H2O) 55.00(1/8MS)
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 46.25(1/8MS)
磷酸二氢钾(KH2PO4) 21.25(1/8MS)
碘化钾(KI) 0.05(1/16MS)
硼酸(H3BO3) 0.39(1/16MS)
硫酸锰(MnSO4·4H2O) 1.39(1/16MS)
硫酸锌(ZnSO4·7H2O) 0.54(1/16MS)
钼酸钠(Na2MoO4·2H2O) 0.02(1/16MS)
硫酸亚铁(FeSO4·7H2O) 3.48(1/8MS)
乙二胺四乙酸二钠(Na2-EDTA·2H2O) 4.66(1/8MS)
烟酸(VB5或VPP) 0.06(1/8MS)
盐酸吡哆醇(VB6) 0.06(1/8MS)
盐酸硫胺素(VB1) 0.01(1/8MS)
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