一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法
专利汇可以提供一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 属于茶叶化合物检测技术领域，具体涉及一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中 代谢物 空间分布的检测新方法。包括以下几个步骤：（1）茶树鲜叶的微尺度样品前处理；（2）茶树鲜叶中代谢物的提取；（3）对提取液进行化学衍生化；（4）基于靶向代谢组学的代谢物检测；（5）茶树鲜叶中代谢物空间分布的还原与 可视化 显示。采用本发明所述方法准确可靠、简单可行，可对茶树鲜叶中近50种代谢物的空间分布同时进行分析，对于茶树体内代谢物的合成与转运、茶树应对 生物 和 非生物胁迫 的研究等方面具有重要的意义。，下面是一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法专利的具体信息内容。
1.一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）茶树鲜叶的微尺度样品前处理；
（2）茶树鲜叶中代谢物的提取：代谢物提取后高速离心，得到上清液即提取液；
（3）对提取液进行化学衍生化：将步骤（2）所述的提取液一分为二，对其中一份进行化学衍生化；
（4）基于靶向代谢组学对步骤（3）所述的两份提取液进行代谢物定量分析；
（5）茶树鲜叶中代谢物空间分布的还原与可视化显示。
2.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于所述步骤（1）中茶树鲜叶为茶树第1至第6叶。
3.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于所述步骤（1）中微尺度样品前处理为：利用手术刀和镊子将茶树鲜叶切割成相同边长的正方形小块，边长长度为1-3毫米，每个正方形小块在茶树鲜叶叶片中的位置进行记录编号，上述操作在冰上完成。
4.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于所述步骤（2）中代谢物提取为：将步骤（1）所述前处理后的茶树鲜叶放置于离心管中，以加入量50-200微升，浓度10-90%的乙腈水溶液为溶剂，温度20-90℃，时间5-
60分钟，进行代谢物提取。
5.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于所述步骤（2）中离心条件为：离心机转速2000-15000转/分钟，时间3-20分钟。
6.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于所述步骤（2）中上清液一分为二即上清液等体积均匀分成两份。
7.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于步骤（3）中化学衍生所用的方法为丹磺酰氯衍生化：取其中一份提取液40微升于离心管中，加入50微升新鲜配制的10 mg/ml丹磺酰氯乙腈溶液和30微升0.15mol/l 的K2CO3/KHCO3缓冲溶液，pH为9.4，混匀后置于60℃水浴30分钟，然后以10000转/分钟的转速离心，时间5分钟，取上清液于进样瓶中等待检测分析。
8.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于步骤（4）中代谢物定量分析所用仪器为液相色谱串联质谱仪UPLC-TQSMicro；液相色谱条件为：Acquity UPLC BEH C18色谱柱，100 × 2.1 mm，1.7 μm，流动相为0.1％甲酸/水溶液和乙腈，流动相梯度设置如下：0分钟，10% B；3分钟，15% B；15分钟，
65% B；19分钟，95% B；22分钟，95% B；22.5分钟，10% B；26分钟，10% B；流速0.35 毫升/分钟，进样量5微升；所述质谱条件为：采用电喷雾离子源，离子化模式为正离子，电压为3 kV，离子源加热温度设置为600℃，锥孔气流和脱溶剂气流分别设置为50和600升/小时。
9.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于所述步骤（4）中定量分析为基于外标曲线的定量分析。
10.根据权利要求1所述的一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测方法，其特征在于所述步骤（5）中代谢物空间分布的还原为：根据每个正方形茶树鲜叶小块中代谢物的含量以及该正方形小块在茶树鲜叶叶片中的位置编号，还原出代谢物在整个茶树鲜叶叶片中的含量空间分布；可视化显示为：以热图的形式呈现代谢物在整个茶树鲜叶叶片中的含量空间分布。
一种基于靶向代谢组学的茶树鲜叶中代谢物空间分布的检测
方法
技术领域
背景技术
发明内容
具体实施方式
0.15mol/l的K2CO3/KHCO3缓冲溶液，pH为9.4，混匀后置于60℃水浴30分钟，然后以10000转/分钟的转速离心，时间5分钟，取上清液于进样瓶中等待检测分析。
0.15mol/l的K2CO3/KHCO3缓冲溶液，pH为9.4，混匀后置于60℃水浴30分钟，然后以10000转/分钟的转速离心，时间5分钟，取上清液于进样瓶中等待检测分析。
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