一种量子点功能化金属有机框架结构检测N-端脑钠肽前体的电化学发光传感器的制备方法
专利汇可以提供一种量子点功能化金属有机框架结构检测N-端脑钠肽前体的电化学发光传感器的制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种 量子点 功能化金属有机 框架 结构检测N-端脑钠肽前体的电 化学发光 传感器 的制备方法，属于电化学发光传感器领域。本发明以锰掺杂的锌 银 铟硫量子点作为电化学发光体，以具有较大孔径的UiO-66-NH2作为量子点的载体，以 雪 花状硫化亚 铜 -二硫化钼作为共反应剂过 硫酸 钾 的共反应促进剂，采用共反应促进剂型 信号 放大策略，构建了信号增强型ECL传感器，实现了在1 fg·mL-1~100 ng·mL-1线性范围内对N-端脑钠肽前体的灵敏检测， 检测限 为0.41 fg·mL-1。，下面是一种量子点功能化金属有机框架结构检测N-端脑钠肽前体的电化学发光传感器的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种量子点功能化金属有机框架结构检测N-端脑钠肽前体的电化学发光传感器的制备方法，其特征在于，电化学发光免疫传感器的制备包括以下步骤：
（1）将直径为4 mm的玻碳电极用0.05 μm氧化铝粉打磨抛光至镜面，再用超纯水洗涤干净；
（2）将4 8 µL雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物滴涂到电极表~
面，室温保存至干燥；
（3）继续滴涂6 μL、浓度为10 μg·mL-1的N-端脑钠肽前体捕获抗体标准溶液于玻碳电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（4）继续滴涂3 μL、质量分数为1%的牛血清白蛋白溶液来封闭非特异性活性位点，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（5）继续将6 μL、浓度为1 fg·mL-1～100 ng·mL-1的一系列不同浓度的N-端脑钠肽前体抗原标准溶液滴涂在电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（6）将5 10 μL所制得的锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检~
测抗体的复合物MnZnAgInS/ZnS@UiO-66-NH2-Ab2滴涂到电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗，即制得检测N-端脑钠肽前体的电化学发光免疫传感器。
2.如权利要求1所述的一种量子点功能化金属有机框架结构检测N-端脑钠肽前体的电化学发光传感器的制备方法，所述雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物，其特征在于，制备步骤如下：
（1）制备雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物
将0.1～0.3 mmol氯化铜超声溶解于30 mL乙二胺中，然后加入3～6 mmol硫脲，搅拌2小时后转移至反应釜中，60～80 ºC反应8小时，离心后，将沉淀用无水乙醇洗涤三次后置于真空干燥箱中，60 ºC干燥后得到雪花状硫化亚铜；将6～18 mg钼酸钠和12～84 mg硫脲溶于20 mL水中形成透明溶液，然后加入50 mg所制得的雪花状硫化亚铜，分散均匀后将溶液转移至反应釜中，200 ºC反应24小时，离心后，将沉淀用无水乙醇洗涤三次后置于真空干燥箱中，60 ºC干燥后得到雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物；
（2）制备雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物
将10 mg雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与5 mL金纳米粒子溶液混合，振荡12小时后离心，得到雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物。
3.如权利要求1所述的一种量子点功能化金属有机框架结构检测N-端脑钠肽前体的电化学发光传感器的制备方法，所述锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检测抗体的复合物，其特征在于，制备步骤如下：
（1）制备锰掺杂量子点MnZnAgInS/ZnS
硝酸银、0.2 mmol硝酸铟、0.2 mmol乙酸锌和0.0125 0.0500 mmol乙酸锰溶于10 mL水~
中，搅拌5分钟后加入2 mL、0.6 mol·L-1的半胱氨酸溶液，然后用6 mol·L-1的NaOH溶液调节pH至8.5，加入6.5 mL、0.05 mol·L-1的硫代乙酰胺，将该溶液转移至反应釜中，110 ºC反应4小时，离心后，将沉淀用无水乙醇洗涤三次后分散到10 mL水中，得到MnZnAgInS溶液；为制得核壳MnZnAgInS/ZnS量子点，将10 mL MnZnAgInS溶液置于三口烧瓶中，油浴加热到100 ºC，然后加入200 μL、0.05 mol·L-1乙酸锌，回流搅拌2小时后离心，将沉淀分散到10 mL水中；
（2）制备金属有机框架结构UiO-66-NH2
氨基对苯二甲酸、0.120 g氯化锆和4 mL冰乙酸分散到32 mL N，N-二甲基甲酰胺中，搅拌30分钟后转移到反应釜中，120 ºC反应12～24小时，离心后将沉淀分散到乙醇中搅拌48小时以交换溶剂N，N-二甲基甲酰胺，再次离心后置于真空干燥箱中干燥；为扩大UiO-66-NH2的孔径，将干燥得到的粉末置于管式炉中，200～300 ºC反应6小时得到具有较大孔径的UiO-66-NH2；
（3）制备锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检测抗体的复合物将10 mg UiO-66-NH2与10 mL MnZnAgInS/ZnS混合，室温下搅拌8小时，离心后分散到2 mL pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液中，加入1 mL、10 μg·mL-1的N-端脑钠肽前体检测抗体混合，
4 ºC下孵化12小时得到MnZnAgInS/ZnS@UiO-66-NH2-Ab2复合物。
4.如权利要求2所述的金纳米粒子溶液，是将1 mL、质量分数为1%的氯金酸溶液稀释到
100 mL超纯水中，加入2.5 mL、质量分数为1%的柠檬酸三钠搅拌至沸腾后制得的。
5.如权利要求1所述的1 fg·mL-1～100 ng·mL-1的一系列不同浓度的N-端脑钠肽前体抗原标准溶液为从上海领潮生物科技有限公司购得的1 mg·mL-1的N-端脑钠肽前体溶液用磷酸盐缓冲溶液稀释得到。
6.如权利要求1所述的N-端脑钠肽前体的检测，其特征在于，检测步骤如下：
（1）将Ag/AgCl电极作为参比电极、铂丝电极作为对电极、所制得的电化学发光传感器作为工作电极，连接在化学发光检测仪的暗盒中，将电化学工作站和化学发光检测仪连接在一起；
（2）化学发光检测仪参数设置为，光电倍增管的高压设置为600～800 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（3）电化学工作站参数设置为，循环伏安扫描电位范围为-1.7 V～0 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（4）以含有0.1 mol·L-1的K2S2O8的10 mL磷酸盐缓冲溶液作为共反应剂，通过电化学发光法检测不同浓度的N-端脑钠肽前体产生的电化学发光信号强度；所述磷酸盐缓冲溶液，其pH为7.4，用0.1 mol·L-1磷酸氢二钠和0.1 mol·L-1磷酸二氢钾配制；
（5）根据所得的电化学发光强度值与N-端脑钠肽前体抗体浓度对数的线性关系，绘制工作曲线。
一种量子点功能化金属有机框架结构检测N-端脑钠肽前体的
技术领域
背景技术
发明内容
（1）将直径为4 mm的玻碳电极用0.05 μm氧化铝粉打磨抛光至镜面，再用超纯水洗涤干净；
（2）将4 8 µL雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物滴涂到电极表~
面，室温保存至干燥；
（3）继续滴涂6 μL、浓度为10 μg·mL-1的N-端脑钠肽前体抗体标准溶液于玻碳电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（4）继续滴涂3 μL、质量分数为1%的牛血清白蛋白溶液来封闭非特异性活性位点，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（5）继续将6 μL、浓度为1 fg·mL-1～100 ng·mL-1的一系列不同浓度的N-端脑钠肽前体抗原标准溶液滴涂在电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（6）将5 10 μL所制得的锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检~
测抗体的复合物MnZnAgInS/ZnS@UiO-66-NH2-Ab2滴涂到电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗，即制得检测N-端脑钠肽前体的电化学发光免疫传感器。
将0.1～0.3 mmol氯化铜超声溶解于30 mL乙二胺中，然后加入3～6 mmol硫脲，搅拌2小时后转移至反应釜中，60～80 ºC反应8小时，离心后，将沉淀用无水乙醇洗涤三次后置于真空干燥箱中，60 ºC干燥后得到雪花状硫化亚铜；将6～18 mg钼酸钠和12～84 mg硫脲溶于20 mL水中形成透明溶液，然后加入50 mg所制得的雪花状硫化亚铜，分散均匀后将溶液转移至反应釜中，200 ºC反应24小时，离心后，将沉淀用无水乙醇洗涤三次后置于真空干燥箱中，60 ºC干燥后得到雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物；
（2）制备雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物
将10 mg雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与5 mL金纳米粒子溶液混合，振荡12小时后离心，得到雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物。
将0.05 mmol硝酸银、0.2 mmol硝酸铟、0.2 mmol乙酸锌和0.0125 0.0500 mmol乙酸锰~
-1 -1
溶于10 mL水中，搅拌5分钟后加入2 mL、0.6 mol·L 的半胱氨酸溶液，然后用6 mol·L的NaOH溶液调节pH至8.5，加入6.5 mL、0.05 mol·L-1的硫代乙酰胺，将该溶液转移至反应釜中，110 ºC反应4小时，离心后，将沉淀用无水乙醇洗涤三次后分散到10 mL水中，得到MnZnAgInS溶液；为制得核壳MnZnAgInS/ZnS量子点，将10 mL MnZnAgInS溶液置于三口烧瓶-1
中，油浴加热到100 ºC，然后加入200 μL、0.05 mol·L 乙酸锌，回流搅拌2小时后离心，将沉淀分散到10 mL水中；
（2）制备金属有机框架结构UiO-66-NH2
将0.096 g 2-氨基对苯二甲酸、0.120 g氯化锆和4 mL冰乙酸分散到32 mL N，N-二甲基甲酰胺中，搅拌30分钟后转移到反应釜中，120 ºC反应12～24小时，离心后将沉淀分散到乙醇中，搅拌48小时以交换溶剂N，N-二甲基甲酰胺，再次离心后置于真空干燥箱中干燥；为扩大UiO-66-NH2的孔径，将干燥得到的粉末置于管式炉中，200～300 ºC反应6小时得到具有较大孔径的UiO-66-NH2；
（3）制备锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检测抗体的复合物将10 mg UiO-66-NH2与10 mL MnZnAgInS/ZnS混合，室温下搅拌8小时，离心后分散到2 mL pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液中，加入1 mL、10 μg·mL-1的N-端脑钠肽前体检测抗体混合，
4 ºC下孵化12小时得到MnZnAgInS/ZnS@UiO-66-NH2-Ab2复合物。
（2）化学发光检测仪参数设置为，光电倍增管的高压设置为600～800 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（3）电化学工作站参数设置为，循环伏安扫描电位范围为-1.7 V～0 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
-1
（4）以含有0.1 mol·L 的K2S2O8的10 mL磷酸盐缓冲溶液作为共反应剂，通过电化学发光法检测不同浓度的N-端脑钠肽前体产生的电化学发光信号强度；所述磷酸盐缓冲溶液，其pH为7.4，用0.1 mol·L-1磷酸氢二钠和0.1 mol·L-1磷酸二氢钾配制；
（5）根据所得的电化学发光强度值与N-端脑钠肽前体抗体浓度对数的线性关系，绘制工作曲线。
（2）为扩大UiO-66-NH2的孔径，本发明将水热法得到的UiO-66-NH2通过热处理来除去部分有机配体，从而使UiO-66-NH2具有合适的孔径来大量地负载MnZnAgInS/ZnS量子点。该锰掺杂量子点功能化的MOF与单纯的量子点相比，ECL信号增强了二分之一；
（3）本发现首先合成了雪花状的硫化亚铜，随后在硫化亚铜表面反应生成二硫化钼纳米片。该雪花状硫化亚铜-二硫化钼材料具有大的比表面积和大量的催化活性位点，能够作为共反应促进剂，催化共反应剂过硫酸钾的分解，进一步增强量子点的发光强度。此外，将金纳米粒子修饰到基底材料表面，提高了基底材料的导电性；
（4）本发明通过共反应促进剂型ECL放大策略，设计了信号增强型ECL传感器，根据抗原浓度和最终ECL信号的线性关系，在1 fg·mL-1～100 ng·mL-1浓度范围内实现了对N-端脑钠肽前体的高选择性和高灵敏检测，检测限低至0.41 fg·mL-1。
具体实施方式
（2）将4 µL雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物滴涂到电极表面，室温保存至干燥；
（3）继续滴涂6 μL、浓度为10 μg·mL-1的N-端脑钠肽前体抗体标准溶液于玻碳电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（4）继续滴涂3 μL、质量分数为1%的牛血清白蛋白溶液来封闭非特异性活性位点，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
-1 -1
（5）继续将6 μL、浓度为1 fg·mL ～100 ng·mL 的一系列不同浓度的N-端脑钠肽前体抗原标准溶液滴涂在电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（6）将8 μL所制得的锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检测抗体的复合物MnZnAgInS/ZnS@UiO-66-NH2-Ab2滴涂到电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗，即制得检测N-端脑钠肽前体的电化学发光免疫传感器。
（2）将6 µL雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物滴涂到电极表面，室温保存至干燥；
（3）继续滴涂6 μL、浓度为10 μg·mL-1的N-端脑钠肽前体抗体标准溶液于玻碳电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（4）继续滴涂3 μL、质量分数为1%的牛血清白蛋白溶液来封闭非特异性活性位点，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（5）继续将6 μL、浓度为1 fg·mL-1～100 ng·mL-1的一系列不同浓度的N-端脑钠肽前体抗原标准溶液滴涂在电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗；
（6）将6 μL所制得的锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检测抗体的复合物MnZnAgInS/ZnS@UiO-66-NH2-Ab2滴涂到电极表面，4 ºC冰箱中保存至干燥，超纯水清洗，即制得检测N-端脑钠肽前体的电化学发光免疫传感器。
（2）制备雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物
将10 mg雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与5 mL金纳米粒子溶液混合，振荡12小时后离心，得到雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物。
（2）制备雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物
将10 mg雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与5 mL金纳米粒子溶液混合，振荡12小时后离心，得到雪花状硫化亚铜-二硫化钼硫化物与金纳米粒子的复合物。
（2）制备金属有机框架结构UiO-66-NH2
将0.096 g 2-氨基对苯二甲酸、0.120 g氯化锆和4 mL冰乙酸分散到32 mL N，N-二甲基甲酰胺中，搅拌30分钟后转移到反应釜中，120 ºC反应24小时，离心后将沉淀分散到乙醇中，搅拌48小时以交换溶剂N，N-二甲基甲酰胺，再次离心后置于真空干燥箱中干燥；为扩大UiO-66-NH2的孔径，将干燥得到的粉末置于管式炉中，300 ºC反应6小时得到具有较大孔径的UiO-66-NH2；
（3）制备锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检测抗体的复合物将10 mg UiO-66-NH2与10 mL MnZnAgInS/ZnS混合，室温下搅拌8小时，离心后分散到2 mL pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液中，加入1 mL、10 μg·mL-1的N-端脑钠肽前体检测抗体混合，
4 ºC下孵化12小时得到MnZnAgInS/ZnS@UiO-66-NH2-Ab2复合物。
将0.05 mmol硝酸银、0.2 mmol硝酸铟、0.2 mmol乙酸锌和0.0500 mmol乙酸锰溶于10 mL水中，搅拌5分钟后加入2 mL、0.6 mol·L-1的半胱氨酸溶液，然后用6 mol·L-1的NaOH溶液调节pH至8.5，加入6.5 mL、0.05 mol·L-1的硫代乙酰胺，将该溶液转移至反应釜中，110 ºC反应4小时，离心后，将沉淀用无水乙醇洗涤三次后分散到10 mL水中，得到MnZnAgInS溶液；为制得核壳MnZnAgInS/ZnS量子点，将10 mL MnZnAgInS溶液置于三口烧瓶中，油浴加热到100 ºC，然后加入200 μL、0.05 mol·L-1乙酸锌，回流搅拌2小时后离心，将沉淀分散到10 mL水中；
（2）制备金属有机框架结构UiO-66-NH2
将0.096 g 2-氨基对苯二甲酸、0.120 g氯化锆和4 mL冰乙酸分散到32 mL N，N-二甲基甲酰胺中，搅拌30分钟后转移到反应釜中，120 ºC反应12小时，离心后将沉淀分散到乙醇中，搅拌48小时以交换溶剂N，N-二甲基甲酰胺，再次离心后置于真空干燥箱中干燥；为扩大UiO-66-NH2的孔径，将干燥得到的粉末置于管式炉中，200 ºC反应6小时得到具有较大孔径的UiO-66-NH2；
（3）制备锰掺杂量子点功能化金属有机框架结构与N-端脑钠肽前体检测抗体的复合物将10 mg UiO-66-NH2与10 mL MnZnAgInS/ZnS混合，室温下搅拌8小时，离心后分散到2 mL pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液中，加入1 mL、10 μg·mL-1的N-端脑钠肽前体检测抗体混合，
4 ºC下孵化12小时得到MnZnAgInS/ZnS@UiO-66-NH2-Ab2复合物。
（2）化学发光检测仪参数设置为，光电倍增管的高压设置为700 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（3）电化学工作站参数设置为，循环伏安扫描电位范围为-1.7 V～0 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（4）以含有0.1 mol·L-1的K2S2O8的10 mL磷酸盐缓冲溶液作为共反应剂，通过电化学发光法检测不同浓度的N-端脑钠肽前体产生的电化学发光信号强度；所述磷酸盐缓冲溶液，其pH为7.4，用0.1 mol·L-1磷酸氢二钠和0.1 mol·L-1磷酸二氢钾配制；
（5）根据所得的电化学发光强度值与N-端脑钠肽前体抗体浓度对数的线性关系，绘制工作曲线。
（2）化学发光检测仪参数设置为，光电倍增管的高压设置为800 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（3）电化学工作站参数设置为，循环伏安扫描电位范围为-1.7 V～0 V，扫描速率设置为0.1 V/s；
（4）以含有0.1 mol·L-1的K2S2O8的10 mL磷酸盐缓冲溶液作为共反应剂，通过电化学发光法检测不同浓度的N-端脑钠肽前体产生的电化学发光信号强度；所述磷酸盐缓冲溶液，其pH为7.4，用0.1 mol·L-1磷酸氢二钠和0.1 mol·L-1磷酸二氢钾配制；
（5）根据所得的电化学发光强度值与N-端脑钠肽前体抗体浓度对数的线性关系，绘制工作曲线。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 数字波束形成和相位拟合方法 | 2020-06-06 | 1 |
| 工业机器人区域安全防护方法 | 2020-09-12 | 2 |
| 一种蜂王浆抗氧化肽水果酵素及其制作方法 | 2022-09-09 | 1 |
| 一种木薯全粉的应用及其加工方法 | 2022-11-22 | 0 |
| 生态型绿化景观堆坡及施工方法 | 2021-05-14 | 0 |
| 一种带有法兰盘台阶的轮毂单元 | 2020-08-05 | 1 |
| 一种暗牛腿装配式混凝土梁柱抗震节点 | 2020-06-27 | 2 |
| 一种分体式并沟线夹 | 2023-04-21 | 0 |
| 一种废纸环保回收装置 | 2022-06-25 | 1 |
| 砂轮修整器 | 2020-12-20 | 1 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
