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一种生物柴油的制备方法

阅读:0发布:2020-08-30

专利汇可以提供一种生物柴油的制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种 生物 柴油 的制备方法,属于石油化工领域。本发明以催芽花生匀浆、 甘蔗 渣处理液、活化紫丁香磨菌丝等原料经 发酵 制生物油脂,再与低分子量的甲醇酯化反应制生物柴油,以甘蔗渣、玉米芯为原料,经 粉碎 、酶解、 碱 沉降至甘蔗渣处理液,分解其中的 纤维 素,木质素等,以紫丁香蘑为原料,通过对菌丝的活化,再与其它组分进行发酵培养,菌丝发酵作用,产生大量的含脂物,离心,将离心物超临界二 氧 化 碳 萃取,制得生物油脂,通过酯化获得高燃烧效 脂肪酸 酯。本发明解决了目前生物柴油燃烧效率不高的问题。,下面是一种生物柴油的制备方法专利的具体信息内容。

1.一种生物柴油的制备方法,其特征在于,该制备方法包括如下步骤:
(1)于50 70℃,按质量比5:1 2取甘蔗渣、玉米芯混合粉碎过筛,取过筛颗粒按质量比~ ~
1:10 15加入溶剂A混合,静置,过滤,取滤渣干燥,于32 40℃,取干燥后的滤渣按质量比1:8~ ~
12:0.01加入无菌、复合酶液混合,保温,离心,取上清液调pH值,于30 38℃保温,离心,~ ~
得甘蔗渣处理液,备用;
(2)于30 35℃,取花生按质量比1:10 15加入浸渍液混合,保温浸泡,过滤,取滤渣干~ ~
燥,恒温恒湿催芽,催芽期间每隔5 8h向滤渣喷淋滤渣质量15 25%的营养液,得催芽花生,~ ~
按质量比1:12 18取催芽花生、溶剂B混合,捣碎、打浆,得催芽花生匀浆;
~
(3)取紫丁香蘑子实体用乙醇溶液冲洗表面,切丝,按6%的接种量接种至活化培养基,于25 28℃培养3 5天,得活化物,取活化物挑取菌丝按6%的接种量接种至种子培养基中,于~ ~
25 30℃培养5 7天,得种子培养液,按质量份数计,取20 40份种子培养液、4 8份酪素、10~ ~ ~ ~ ~
15份催芽花生匀浆、15 25份备用的甘蔗处理液、0.3 0.8份硫酸铵、10 15份铃薯、0.1~ ~ ~ ~
0.4份维生素B6、50~70份水混合,于28~30℃,震动摇床,发酵培养,得发酵物,取发酵物离心,收集离心物;
(4)取离心物干燥,得基料,取基料超临界二萃取,得生物油脂,于40 60℃,按质~
量比3:15 20:0.1取生物油脂、甲醇、NaOH混合搅拌,保温静置,得反应物,取反应物抽真空~
干燥,即得生物柴油。
2.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的溶剂A:按质量比10:1 3取硫酸溶液柠檬酸钠混合,即得溶剂A。
~
3.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的复合酶液:按质量份数计,取2 5份纤维素酶、1 4份木聚糖酶、1 4份葡聚糖酶、120 150份无菌水~ ~ ~ ~
混合,即得复合酶液。
4.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的浸渍液:按质量比6 10:1取PBS缓冲液、氯化铵混合,即得浸渍液。
~
5.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的营养液:按质量比1:4 9取大米和水进行淘米操作,得淘米水,取淘米水于密封日晒,过滤,取滤~
液按质量比5 8:1加入磷酸二氢搅拌混合,得营养液。
~
6.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的溶剂B:按质量比5 8:1取Tris-HCl缓冲液、氯化铵混合,即得溶剂B。
~
7.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的恒温恒湿条件为:温度18 22℃、65 75%空气相对湿度
~ ~
8.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中的活化培养基: 按质量份数计,取150 200份马铃薯、8 12份葡萄糖、0.05 0.07份硫酸镁、800~ ~ ~ ~
1000份水混合,灭菌,即得活化培养基。
9.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中的种子培养基:按质量份数计,取150 200份马铃薯、10 15份乳糖、2 5份酵母膏、1 3份磷酸氢二~ ~ ~ ~
钾、0.05 0.07份硫酸镁、0.01 0.03份氯化、0.2 0.5份磷酸氢二钠、0.01 0.03份维生素~ ~ ~ ~
B1、800~1000份水混合,灭菌,即得种子培养基。
10.根据权利要求1所述一种生物柴油的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)中的超临界CO2萃取的条件:CO2流量20~25kg/h、萃取时间1~3h、萃取压20-35MPa、萃取温度30~45℃。

说明书全文

一种生物柴油的制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于石油化工领域,具体涉及一种生物柴油的其制备方法。

背景技术

[0002] 生物柴油,又称生化柴油,是指以油料植物与工程微藻等植物油脂以及动物油脂、餐饮废油等为原料,通过酯交换工艺生成的长链脂肪酸甲酯或乙酯。生物柴油除与石化柴油相近的性能外,还具有持续的可再生性能,以及优良的环保特性,生物柴油中含量高,不含硫和芳香族烷,燃烧产生的废气中一氧化、二氧化硫、硫化物量大大减低,此外,生物柴油的可降解性也明显高于石化柴油。常规汽油、柴油的调合技术相对成熟,例如通过利用炼油厂的一些非标凝析油经精制处理后,辅以添加剂可调合成符合客户要求的汽、柴油;又例如石脑油利用,石脑油辛烷值低,以往大部分作为乙烯裂解原料,近年发展的调合技术可通过精制脱硫并与高辛烷值组分混合,加入抗爆剂可调合出汽油,虽油品不高,但可节约数量可观的石油资源。
[0003] 近年均重点转向试点推广甲醇汽油,甲醇的市场价格远低于汽油,主要来源是化工或很多化工的副产品,现阶段技术用两吨煤可生产一吨多甲醇,生产数量庞大,并且不与粮农业争夺资源,燃烧时碳排放低,被各国视为替代或混合石油使用的清洁燃料之一。
[0004] 甲醇与柴油互溶不容易,从技术构象简单分析,甲醇是典型的亲性化合物,理论上和水可以无限互溶,而柴油则是典型的油相碳氢高分子化合物,俗语“水油不相容”,因此常规条件下甲醇和柴油完全不能互溶,由于极性甲醇与非极性柴油互不相溶,甲醇和柴油即使可混溶也极不稳定,极微量的水分侵入也会引起乳化分层,一般是在甲醇柴油的助溶剂中加入一定量的乳化剂,甲醇在乳化剂的存在下,可以形成较为稳定的甲醇微液滴分散于柴油中的乳化液,提高甲醇/柴油混合燃料的稳定性和着火性,通常使用离子型乳化剂。
[0005] 目前公开了一种甲醇改性剂,其润滑剂为油酸、助燃剂为乙酸丁酯、点火剂为石油醚、脱水剂为壬基酚聚氧乙烯醚、抗磨剂为氯化石蜡、抗氧剂为2,6-二叔丁基对甲酚、清洁剂为四氯乙烯、防腐剂为苯并三氮唑、十六烷值改进剂为硝酸异辛酯、相溶剂为正丁醇、辛醇或其混合物。这些配方都在一定程度上有助于甲醇-柴油的互溶,也都存在互溶度不足、燃烧效率不高的缺陷。因此,需开发一种燃烧率高的生物柴油产品。

发明内容

[0006] 本发明所要解决的技术问题:针对目前生物柴油燃烧效率不高的问题,提供一种生物柴油的制备方法。
[0007] 为解决上述技术问题,本发明采用如下所述的技术方案是:一种生物柴油的制备方法包括如下步骤:
(1)于50 70℃,按质量比5:1 2取甘蔗渣、玉米芯混合粉碎过筛,取过筛颗粒按质量比~ ~
1:10 15加入溶剂A混合,静置,过滤,取滤渣干燥,于32 40℃,取干燥后的滤渣按质量比1:8~ ~
12:0.01加入无菌水、复合酶液混合,保温,离心,取上清液调pH值,于30 38℃保温,离心,~ ~
得甘蔗渣处理液,备用;
(2)于30 35℃,取花生按质量比1:10 15加入浸渍液混合,保温浸泡,过滤,取滤渣干~ ~
燥,恒温恒湿催芽,催芽期间每隔5 8h向滤渣喷淋滤渣质量15 25%的营养液,得催芽花生,~ ~
按质量比1:12 18取催芽花生、溶剂B混合,捣碎、打浆,得催芽花生匀浆;
~
(3)取紫丁香蘑子实体用乙醇溶液冲洗表面,切丝,按6%的接种量接种至活化培养基,于25 28℃培养3 5天,得活化物,取活化物挑取菌丝按6%的接种量接种至种子培养基中,于~ ~
25 30℃培养5 7天,得种子培养液,按质量份数计,取20 40份种子培养液、4 8份酪素、10~ ~ ~ ~ ~
15份催芽花生匀浆、15 25份备用的甘蔗处理液、0.3 0.8份硫酸铵、10 15份铃薯、0.1~ ~ ~ ~
0.4份维生素B6、50~70份水混合,于28~30℃,震动摇床,发酵培养,得发酵物,取发酵物离心,收集离心物;
(4)取离心物干燥,得基料,取基料超临界二氧化碳萃取,得生物油脂,于40 60℃,按质~
量比3:15 20:0.1取生物油脂、甲醇、NaOH混合搅拌,保温静置,得反应物,取反应物抽真空~
干燥,即得生物柴油。
[0008] 所述步骤(1)中的溶剂A:按质量比10:1 3取硫酸溶液柠檬酸钠混合,即得溶剂A。~
[0009] 所述步骤(1)中的复合酶液:按质量份数计,取2 5份纤维素酶、1 4份木聚糖酶、1~ ~ ~4份葡聚糖酶、120 150份无菌水混合,即得复合酶液。
~
[0010] 所述步骤(2)中的浸渍液:按质量比6 10:1取PBS缓冲液、氯化铵混合,即得浸渍~液。
[0011] 所述步骤(2)中的营养液:按质量比1:4 9取大米和水进行淘米操作,得淘米水,取~淘米水于密封日晒,过滤,取滤液按质量比5 8:1加入磷酸二氢搅拌混合,得营养液。
~
[0012] 所述步骤(2)中的溶剂B:按质量比5 8:1取Tris-HCl缓冲液、氯化铵混合,即得溶~剂B。
[0013] 所述步骤(2)中的恒温恒湿条件为:温度18 22℃、65 75%空气相对湿度。~ ~
[0014] 所述步骤(3)中的活化培养基:按质量份数计,取150 200份马铃薯、8 12份葡萄~ ~糖、0.05 0.07份硫酸镁、800 1000份水混合,灭菌,即得活化培养基。
~ ~
[0015] 所述步骤(3)中的种子培养基:按质量份数计,取150 200份马铃薯、10 15份乳糖、~ ~2 5份酵母膏、1 3份磷酸氢二钾、0.05 0.07份硫酸镁、0.01 0.03份氯化、0.2 0.5份磷酸~ ~ ~ ~ ~
氢二钠、0.01 0.03份维生素B1、800 1000份水混合,灭菌,即得种子培养基。
~ ~
[0016] 所述步骤(4)中的超临界CO2萃取的条件:CO2流量20~25kg/h、萃取时间1~3h、萃取压20-35MPa、萃取温度30 45℃。~
[0017] 本发明与其他方法相比,有益技术效果是:本发明以催芽花生匀浆、甘蔗渣处理液、活化紫丁香磨菌丝等原料经发酵制生物油脂,再与低分子量的甲醇酯化反应制生物柴油,以甘蔗渣、玉米芯为原料,经粉碎、酶解、沉降至甘蔗渣处理液,分解其中的纤维素,木质素等,避免其中含有的糠等物质影响发酵操作,为后续的发酵操作提供稳定的碳源,对花生进行浸种和催芽,花生先在浸渍液的浸泡下大量吸水,伴随呼吸作用,消耗花生中储存的多糖,并将其降解为小分子水溶性单糖,同时花生内部结构溶胀,从而有利于打浆过程中油脂体的充分释放,在打浆完成后,利用新芽内部活化的多种酶类催化大豆内部多糖、脂类和蛋白质发生部分水解及活化,在后续处理过程中,活化后的有机质可与体系内部其他物质进行分子自组装或者以结晶形式形成三维网络结构,并组织体系内部的液态油和水的流动,可充分提高燃烧效率,以紫丁香蘑为原料,通过对菌丝的活化,再与其它组分进行发酵培养,菌丝发酵作用,产生大量的含脂物,离心,将离心物超临界二氧化碳萃取,制得生物油脂,通过酯化获得高燃烧效脂肪酸酯。

具体实施方式

[0018] 溶剂A:按质量比10:1 3取浓度0.001mol/L的硫酸溶液、柠檬酸钠混合,即得溶剂~A。
[0019] 溶剂B:按质量比5 8:1取pH为6.5 7.2的Tris-HCl缓冲液、氯化铵混合,即得溶剂~ ~B。
[0020] 复合酶液:按质量份数计,取2 5份纤维素酶、1 4份木聚糖酶、1 4份葡聚糖酶、120~ ~ ~150份无菌水混合,即得复合酶液。
~
[0021] 活化培养基:按质量份数计,取150 200份马铃薯、8 12份葡萄糖、0.05 0.07份硫~ ~ ~酸镁、800 1000份水混合,于121℃灭菌15 20min,即得活化培养基。
~ ~
[0022] 种子培养基:按质量份数计,取150 200份马铃薯、10 15份乳糖、2 5份酵母膏、1 3~ ~ ~ ~份磷酸氢二钾、0.05 0.07份硫酸镁、0.01 0.03份氯化钙、0.2 0.5份磷酸氢二钠、0.01~ ~ ~ ~
0.03份维生素B1、800 1000份水混合,于121℃灭菌15 20min,即得种子培养基。
~ ~
[0023] 浸渍液:按质量比6 10:1取pH为6.5 7.2的PBS缓冲液、氯化铵混合,即得浸渍液。~ ~
[0024] 营养液:按质量比1:4 9取大米和水进行淘米操作,得淘米水,取淘米水于透明玻~璃罐中密封日晒3 5天,过滤,取滤液按质量比5 8:1加入磷酸二氢钾搅拌混合,得营养液。
~ ~
[0025] 一种生物柴油的制备方法,包括如下步骤:(1)于水浴50 70℃,按质量比5:1 2取甘蔗渣、玉米芯混合粉碎过120目筛,取过筛颗粒~ ~
按质量比1:10 15加入溶剂A混合,静置2 5h,过滤,取滤渣于65 80℃烘箱干燥,于32 40℃,~ ~ ~ ~
取干燥后的滤渣按质量比1:8 12:0.01加入无菌水、复合酶液混合,保温2 5天,以3000~ ~ ~
4000r/min离心6 10min,取上清液用浓度0.01mol/L的Ca(OH)2调pH值为6.1 7.5,于30 38~ ~ ~
℃保温20 30min后,离心,得甘蔗渣处理液,备用;
~
(2)于30 35℃,取花生按质量比1:10 15加入浸渍液混合,保温浸泡20 24h,过滤,取滤~ ~ ~
渣于65 80℃烘箱干燥后,平铺于温室腔体,以温度18 22℃、65 75%空气相对湿度条件,恒~ ~ ~
温恒湿催芽3 5天,催芽期间每隔5 8h向滤渣喷淋滤渣质量15 25%的营养液,得催芽花生,~ ~ ~
按质量比1:12 18取催芽花生、溶剂B加入组织捣碎机中混合,捣碎、打浆,得催芽花生匀浆;
~
(3)取紫丁香蘑子实体用质量分数70%乙醇溶液冲洗表面,切成2×2mm规格,按6%的接种量接种至活化培养基,于25 28℃培养3 5天,得活化物,取活化物挑取菌丝按6%的接种量~ ~
接种至种子培养基中,于25 30℃培养5 7天,得种子培养液,按质量份数计,取20 40份种子~ ~ ~
培养液、4 8份酪素、10 15份催芽花生匀浆、15 25份备用的甘蔗处理液、0.3 0.8份硫酸铵、~ ~ ~ ~
10~15份马铃薯、0.1~0.4份维生素B6、50~70份水于发酵罐混合,于28~30℃,以200~250r/min震荡摇床,发酵培养4 7天,得发酵物,取发酵物以3000 4000r/min离心7 15min,收集离~ ~ ~
心物;
(4)取离心物于65 80℃烘箱干燥,得基料,取基料以CO2流量20 25kg/h、萃取时间1~ ~ ~
3h、萃取压力20-35MPa、萃取温度30 45℃条件下,进行超临界二氧化碳萃取,得到生物油~
脂,于40 60℃,按质量比3:15 20:0.1取生物油脂、甲醇、NaOH于反应釜混合,以400 600r/~ ~ ~
min搅拌20 45min,保温静置反应1 3h,得反应物,取反应物抽真空去除水分,即得生物柴~ ~
油。
[0026] 实施例1溶剂A:按质量比10:1取浓度0.001mol/L的硫酸溶液、柠檬酸钠混合,即得溶剂A。
[0027] 溶剂B:按质量比5:1取pH为6.5的Tris-HCl缓冲液、氯化铵混合,即得溶剂B。
[0028] 复合酶液:按质量份数计,取2份纤维素酶、1份木聚糖酶、1份葡聚糖酶、120份无菌水混合,即得复合酶液。
[0029] 活化培养基:按质量份数计,取150份马铃薯、8份葡萄糖、0.05份硫酸镁、800份水混合,于121℃灭菌15min,即得活化培养基。
[0030] 种子培养基:按质量份数计,取150份马铃薯、10份乳糖、2份酵母膏、1份磷酸氢二钾、0.05份硫酸镁、0.01份氯化钙、0.2份磷酸氢二钠、0.01份维生素B1、800份水混合,于121℃灭菌15min,即得种子培养基。
[0031] 浸渍液:按质量比6:1取pH为6.5的PBS缓冲液、氯化铵混合,即得浸渍液。
[0032] 营养液:按质量比1:4取大米和水进行淘米操作,得淘米水,取淘米水于透明玻璃罐中密封日晒3天,过滤,取滤液按质量比5:1加入磷酸二氢钾搅拌混合,得营养液。
[0033] 一种生物柴油的制备方法,包括如下步骤:(1)于水浴50℃,按质量比5:1取甘蔗渣、玉米芯混合粉碎过120目筛,取过筛颗粒按质量比1:10加入溶剂A混合,静置2h,过滤,取滤渣于65℃烘箱干燥,于32℃,取干燥后的滤渣按质量比1:8:0.01加入无菌水、复合酶液混合,保温2天,以3000r/min离心6min,取上清液用浓度0.01mol/L的Ca(OH)2调pH值为6.1,于30℃保温20min后,离心,得甘蔗渣处理液,备用;
(2)于30℃,取花生按质量比1:10加入浸渍液混合,保温浸泡20h,过滤,取滤渣于65℃烘箱干燥后,平铺于温室腔体,以温度18℃、65%空气相对湿度条件,恒温恒湿催芽3天,催芽期间每隔5h向滤渣喷淋滤渣质量15%的营养液,得催芽花生,按质量比1:12取催芽花生、溶剂B加入组织捣碎机中混合,捣碎、打浆,得催芽花生匀浆;
(3)取紫丁香蘑子实体用质量分数70%乙醇溶液冲洗表面,切成2×2mm规格,按6%的接种量接种至活化培养基,于25℃培养3天,得活化物,取活化物挑取菌丝按6%的接种量接种至种子培养基中,于25℃培养5天,得种子培养液,按质量份数计,取20份种子培养液、4份酪素、10份催芽花生匀浆、15份备用的甘蔗处理液、0.3份硫酸铵、10份马铃薯、0.1份维生素B6、50份水于发酵罐混合,于28℃,以200r/min震荡摇床,发酵培养4天,得发酵物,取发酵物以3000r/min离心7min,收集离心物;
(4)取离心物于65℃烘箱干燥,得基料,取基料以CO2流量20kg/h、萃取时间1h、萃取压力20MPa、萃取温度30℃条件下,进行超临界二氧化碳萃取,得到生物油脂,于40℃,按质量比3:15:0.1取生物油脂、甲醇、NaOH于反应釜混合,以400r/min搅拌20min,保温静置反应
1h,得反应物,取反应物抽真空去除水分,即得生物柴油。
[0034] 实施例2溶剂A:按质量比10:2取浓度0.001mol/L的硫酸溶液、柠檬酸钠混合,即得溶剂A。
[0035] 溶剂B:按质量比7:1取pH为7的Tris-HCl缓冲液、氯化铵混合,即得溶剂B。
[0036] 复合酶液:按质量份数计,取3份纤维素酶、3份木聚糖酶、3份葡聚糖酶、120 150份~无菌水混合,即得复合酶液。
[0037] 活化培养基:按质量份数计,取180份马铃薯、10份葡萄糖、0.06份硫酸镁、900份水混合,于121℃灭菌18min,即得活化培养基。
[0038] 种子培养基:按质量份数计,取180份马铃薯、13份乳糖、4份酵母膏、2份磷酸氢二钾、0.06份硫酸镁、0.02份氯化钙、0.3份磷酸氢二钠、0.02份维生素B1、900份水混合,于121℃灭菌18min,即得种子培养基。
[0039] 浸渍液:按质量比8:1取pH为7的PBS缓冲液、氯化铵混合,即得浸渍液。
[0040] 营养液:按质量比1:7取大米和水进行淘米操作,得淘米水,取淘米水于透明玻璃罐中密封日晒4天,过滤,取滤液按质量比7:1加入磷酸二氢钾搅拌混合,得营养液。
[0041] 一种生物柴油的制备方法,包括如下步骤:(1)于水浴60℃,按质量比5:1.5取甘蔗渣、玉米芯混合粉碎过120目筛,取过筛颗粒按质量比1:13加入溶剂A混合,静置4h,过滤,取滤渣于70℃烘箱干燥,于38℃,取干燥后的滤渣按质量比1:10:0.01加入无菌水、复合酶液混合,保温4天,以3500r/min离心8min,取上清液用浓度0.01mol/L的Ca(OH)2调pH值为7,于35℃保温25min后,离心,得甘蔗渣处理液,备用;
(2)于33℃,取花生按质量比1:13加入浸渍液混合,保温浸泡22h,过滤,取滤渣于70℃烘箱干燥后,平铺于温室腔体,以温度20℃、70%空气相对湿度条件,恒温恒湿催芽4天,催芽期间每隔6h向滤渣喷淋滤渣质量20%的营养液,得催芽花生,按质量比1:16取催芽花生、溶剂B加入组织捣碎机中混合,捣碎、打浆,得催芽花生匀浆;
(3)取紫丁香蘑子实体用质量分数70%乙醇溶液冲洗表面,切成2×2mm规格,按6%的接种量接种至活化培养基,于27℃培养4天,得活化物,取活化物挑取菌丝按6%的接种量接种至种子培养基中,于28℃培养6天,得种子培养液,按质量份数计,取30份种子培养液、6份酪素、13份催芽花生匀浆、20份备用的甘蔗处理液、0.5份硫酸铵、13份马铃薯、0.3份维生素B6、60份水于发酵罐混合,于29℃,以240r/min震荡摇床,发酵培养6天,得发酵物,取发酵物以3500r/min离心12min,收集离心物;
(4)取离心物于70℃烘箱干燥,得基料,取基料以CO2流量23kg/h、萃取时间2h、萃取压力30MPa、萃取温度35℃条件下,进行超临界二氧化碳萃取,得到生物油脂,于50℃,按质量比3:18:0.1取生物油脂、甲醇、NaOH于反应釜混合,以500r/min搅拌40min,保温静置反应
2h,得反应物,取反应物抽真空去除水分,即得生物柴油。
[0042] 实施例3溶剂A:按质量比10:3取浓度0.001mol/L的硫酸溶液、柠檬酸钠混合,即得溶剂A。
[0043] 溶剂B:按质量比8:1取pH为7.2的Tris-HCl缓冲液、氯化铵混合,即得溶剂B。
[0044] 复合酶液:按质量份数计,取5份纤维素酶、4份木聚糖酶、4份葡聚糖酶、150份无菌水混合,即得复合酶液。
[0045] 活化培养基:按质量份数计,取200份马铃薯、12份葡萄糖、0.07份硫酸镁、1000份水混合,于121℃灭菌20min,即得活化培养基。
[0046] 种子培养基:按质量份数计,取200份马铃薯、15份乳糖、5份酵母膏、3份磷酸氢二钾、0.07份硫酸镁、0.03份氯化钙、0.5份磷酸氢二钠、0.03份维生素B1、1000份水混合,于121℃灭菌20min,即得种子培养基。
[0047] 浸渍液:按质量比10:1取pH为7.2的PBS缓冲液、氯化铵混合,即得浸渍液。
[0048] 营养液:按质量比1:9取大米和水进行淘米操作,得淘米水,取淘米水于透明玻璃罐中密封日晒5天,过滤,取滤液按质量比8:1加入磷酸二氢钾搅拌混合,得营养液。
[0049] 一种生物柴油的制备方法,包括如下步骤:(1)于水浴70℃,按质量比5:2取甘蔗渣、玉米芯混合粉碎过120目筛,取过筛颗粒按质量比1:15加入溶剂A混合,静置5h,过滤,取滤渣于80℃烘箱干燥,于40℃,取干燥后的滤渣按质量比1:12:0.01加入无菌水、复合酶液混合,保温5天,以4000r/min离心10min,取上清液用浓度0.01mol/L的Ca(OH)2调pH值为7.5,于38℃保温30min后,离心,得甘蔗渣处理液,备用;
(2)于35℃,取花生按质量比1:15加入浸渍液混合,保温浸泡24h,过滤,取滤渣于80℃烘箱干燥后,平铺于温室腔体,以温度22℃、75%空气相对湿度条件,恒温恒湿催芽5天,催芽期间每隔8h向滤渣喷淋滤渣质量25%的营养液,得催芽花生,按质量比1:18取催芽花生、溶剂B加入组织捣碎机中混合,捣碎、打浆,得催芽花生匀浆;
(3)取紫丁香蘑子实体用质量分数70%乙醇溶液冲洗表面,切成2×2mm规格,按6%的接种量接种至活化培养基,于28℃培养5天,得活化物,取活化物挑取菌丝按6%的接种量接种至种子培养基中,于30℃培养7天,得种子培养液,按质量份数计,取40份种子培养液、8份酪素、15份催芽花生匀浆、25份备用的甘蔗处理液、0.8份硫酸铵、15份马铃薯、0.4份维生素B6、70份水于发酵罐混合,于30℃,以250r/min震荡摇床,发酵培养7天,得发酵物,取发酵物以4000r/min离心15min,收集离心物;
(4)取离心物于80℃烘箱干燥,得基料,取基料以CO2流量25kg/h、萃取时间3h、萃取压力35MPa、萃取温度45℃条件下,进行超临界二氧化碳萃取,得到生物油脂,于60℃,按质量比3:20:0.1取生物油脂、甲醇、NaOH于反应釜混合,以600r/min搅拌45min,保温静置反应
3h,得反应物,取反应物抽真空去除水分,即得生物柴油。
[0050] 对比例1:无市某公司生产的柴油。
[0051] 将上述实施例所得生物柴油与对比例的生物柴油分别使用于转速在1500rpm以上的柴油机,按照GB/T20828进行测试,测试结果如下表:综合上述,本发明的生物柴油相比于市售产品燃烧性能更好,值得大力推广。
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