一种间充质干细胞成脂诱导分化培养基及其制备方法
专利汇可以提供一种间充质干细胞成脂诱导分化培养基及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供一种间充质干细胞成脂诱导分化培养基，属于干细胞技术领域，包括DMEM/F12培养基，还包括如下组分及其浓度：FBS 5~50%体积百分比、谷 氨 酰胺0.5~5%体积百分比、抗生素0.5~5%体积百分比、吲哚美辛50~500μM、胰岛素50~500nM、地塞米松5~50nM、 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤0.5~5μM和 盐酸 法舒地尔0.05~0.5μM。本发明提供的间充质干细胞成脂诱导分化培养基具有诱导效率高等优点。，下面是一种间充质干细胞成脂诱导分化培养基及其制备方法专利的具体信息内容。
1.一种间充质干细胞成脂诱导分化培养基，其特征在于：包括DMEM/F12培养基，还包括如下组分及其浓度：FBS 5~50%体积百分比、谷氨酰胺0.5~5%体积百分比、抗生素
0.5~5%体积百分比、吲哚美辛50~500 μM、胰岛素50~500 nM、地塞米松5~50 nM、 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤 0.5~5 μM和盐酸法舒地尔0.05~0.5μM。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞成脂诱导分化培养基，其特征在于：包括DMEM/F12培养基，还包括如下组分及其浓度：FBS 5~20%体积百分比、谷氨酰胺0.5~2%体积百分比、抗生素0.5~2%体积百分比、吲哚美辛100~300 μM、胰岛素50~200 nM、地塞米松5~20 nM、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤 0.5~3 μM和盐酸法舒地尔0.1~0.3μM。
3.根据权利要求2所述的间充质干细胞成脂诱导分化培养基，其特征在于：包括DMEM/F12培养基，还包括如下组分及其浓度：FBS 10%体积百分比、谷氨酰胺1%体积百分比、抗生素1%体积百分比、吲哚美辛200 μM、胰岛素100 nM、地塞米松10 nM、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤 1 μM和盐酸法舒地尔0.1 μM。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的间充质干细胞成脂诱导分化培养基，其特征在于：所述间充质干细胞选自骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞或羊膜间充质干细胞。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的间充质干细胞成脂诱导分化培养基，其特征在于：所述抗生素包括青霉素和链霉素。
6.根据权利要求1所述的间充质干细胞成脂诱导分化培养基的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：向DMEM/F12培养基中，按所述浓度加入FBS、谷氨酰胺、抗生素、吲哚美辛母液、胰岛素母液、地塞米松母液、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤母液和盐酸法舒地尔母液，搅拌均匀，过膜除菌即得。
7. 根据权利要求1至5中任一项所述的间充质干细胞成脂诱导分化培养基在间充质干细胞成脂诱导分化中的用途。
8.一种间充质干细胞成脂诱导分化方法，其特征在于：包括如下步骤：a）培养间充质干细胞；b）待细胞汇合度符合要求时，弃去所述步骤a）中的培养基，加入权利要求1至5中任一项所述的间充质干细胞成脂诱导分化培养基培养2~4周。
9.根据权利要求8所述的间充质干细胞成脂诱导分化方法，其特征在于：所述间充质干细胞选自骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞或羊膜间充质干细胞。
一种间充质干细胞成脂诱导分化培养基及其制备方法
技术领域
背景技术
发明内容
具体实施方式
2
细胞，以5000个/cm的密度接种于六孔板中，并用含10%（v/v）FBS的DMEM/F12培养基进行培养，待细胞汇合度达80%时，弃去培养基，分别加入诱导培养基1和诱导培养基3，每3天换液一次。诱导培养3周后，用qPCR鉴定成脂细胞相关基因FABP4的表达水平，结果如图1所示。
干细胞，以5000个/cm的密度接种于六孔板中，并用含10%（v/v）FBS的DMEM/F12培养基进行培养，待细胞汇合度达80%时，弃去培养基，分别加入诱导培养基1、诱导培养基4和诱导培养基5，每3天换液一次。诱导培养3周后，用qPCR鉴定成脂细胞相关基因FABP4的表达水平，结果如图2所示。从图2可知，当盐酸法舒地尔的浓度高于0.3μM时，随着盐酸法舒地尔浓度的增加，FABP4表达水平显著下降（P<0.01）。
0.2μM。
取P3代骨髓间充质干细胞，以5000个/cm的密度接种于六孔板中，并用含10%（v/v）FBS的DMEM/F12培养基进行培养，待细胞汇合度达80%时，弃去培养基，分别加入诱导培养基1和诱导培养基2，每3天换液一次。诱导培养3周后，用油红O进行成脂鉴定，结果如图
3所示；同时，用qPCR鉴定成脂细胞相关基因FABP4的表达水平，结果如图4所示。
取P3代脐带间充质干细胞，以5000个/cm的密度接种于六孔板中，并用含10%（v/v）FBS的DMEM/F12培养基进行培养，待细胞汇合度达80%时，弃去培养基，分别加入诱导培养基1和诱导培养基2，每3天换液一次。诱导培养3周后，用油红O进行成脂鉴定，结果如图
5所示；同时，用qPCR鉴定成脂细胞相关基因FABP4的表达水平，结果如图6所示。
取P3代羊膜间充质干细胞，以5000个/cm的密度接种于六孔板中，并用含10%（v/v）FBS的DMEM/F12培养基进行培养，待细胞汇合度达80%时，弃去培养基，分别加入诱导培养基1和诱导培养基2，每3天换液一次。诱导培养3周后，用油红O进行成脂鉴定，结果如图
7所示；同时，用qPCR鉴定成脂细胞相关基因FABP4的表达水平，结果如图8所示。
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