用于狭窄病变和溶解血栓疗法的切变控制释放
阅读：725发布：2020-08-17
专利汇可以提供用于狭窄病变和溶解血栓疗法的切变控制释放专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了用于对狭窄、狭窄病变、内腔闭塞、栓塞现象或血栓障碍进行 治疗 或成像的组合物和方法。本发明进一步提供了用于对内出血进行治疗的组合物和方法。，下面是用于狭窄病变和溶解血栓疗法的切变控制释放专利的具体信息内容。
1.一种聚集体在制备用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变和/或闭塞病变进行治疗的药物方面的用途，所述聚集体包含多个纳米粒子，其中，所述纳米粒子包含聚乳酸和聚乙醇酸共聚物(PLGA)，其中，当暴露至预先确定的切应力时，所述聚集体在所述预先确定的切应力以上解聚，其中，所述预先确定的切应力为>70dyn/cm2，并且其中，所述聚集体的尺寸≤50μm，以及其中，所述聚集体进一步包含分子，所述分子为治疗剂，并且其中，所述治疗剂为血管扩张剂、抗血栓形成剂或血栓溶解剂。
2.一种聚集体在制备用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变和/或闭塞病变进行成像的药物方面的用途，所述聚集体包含多个纳米粒子，其中，所述纳米粒子包含聚乳酸和聚乙醇酸共聚物(PLGA)，其中，当暴露至预先确定的切应力时，所述聚集体在所述预先确定的切应力以上解聚，其中，所述预先确定的切应力为>70dyn/cm2，并且其中，所述聚集体的尺寸≤50μm，以及其中，所述聚集体进一步包含分子，所述分子为显像剂。
3.一种聚集体在制备用于对受试者中的内出血进行治疗的药物方面的用途，所述聚集体包含多个纳米粒子，其中，所述纳米粒子包含聚乳酸和聚乙醇酸共聚物(PLGA)，其中，当暴露至预先确定的切应力时，所述聚集体在所述预先确定的切应力以上解聚，其中，所述预先确定的切应力为>70dyn/cm2，并且其中，所述聚集体的尺寸≤50μm，以及其中，所述聚集体进一步包含分子，所述分子为治疗剂，并且其中，所述治疗剂为血栓形成剂或血管扩张剂。
4.如权利要求1-3中任一项所述的用途，其中，所述分子封装于所述纳米粒子中、或所述分子吸收/吸附于所述纳米粒子的表面。
5.如权利要求1-4中任一项所述的用途，其中，所述分子共价连接至所述纳米粒子。
6.如权利要求1或3所述的用途，其中，所述治疗剂是抗血栓形成剂和/或血栓溶解剂。
7.如权利要求6所述的用途，其中，所述抗血栓形成剂或血栓溶解剂选自于由以下抗血栓形成剂或血栓溶解剂所组成的组：抗凝血剂、促凝血剂拮抗剂、抗血小板剂、血栓溶解剂、抗血栓溶解剂拮抗剂、纤维蛋白溶解酶，以及上述抗血栓形成剂或血栓溶解剂的任意组合。
8.如权利要求3所述的用途，其中，所述治疗剂是血栓形成剂。
9.如权利要求8所述的用途，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：血栓溶解剂拮抗剂、抗凝血剂拮抗剂、促凝血酶、促凝血分子，以及上述血栓形成剂的任意组合。
10.如权利要求8或9所述的用途，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：鱼精蛋白、维生素K1、氨基己酸(amicar)、氨甲环酸(amstat)、阿那格雷、阿加曲班、西洛他唑、达曲班、去纤苷酸、依诺肝素、速避凝、吲哚布芬、lamoparan、奥扎格雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上述血栓形成剂的任意组合。
11.如权利要求1所述的用途，其中，所述治疗剂为选自于由以下血栓溶解剂所组成的组中的血栓溶解剂：组织纤溶酶原激活物(t-PA)、链激酶(SK)、尿激酶原、尿激酶(uPA)、阿替普酶(又名 Genentech，Inc.)、瑞替普酶(又名r-PA或 Centocor，
Inc.)、替奈普酶(又名TNKTM，Genentech，Inc.)、 (AstraZeneca，LP)、拉诺替普酶(Bristol-Myers Squibb Company)、孟替普酶(Eisai Company，Ltd.)、沙芦普酶(又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.)、葡激酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶激活剂复合物(又名APSAC、Anistreplase和 SmithKline Beecham Corp.)，以
及上述血栓溶解剂的任意组合。
12.如权利要求1或3所述的用途，其中，所述治疗剂是血管扩张剂。
13.如权利要求12所述的用途，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：α-肾上腺素受体拮抗剂(α-阻断剂)、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素受体阻断剂(ARB)、β2-肾上腺素受体激动剂(β2-激动剂)、钙通道阻断剂(CCB)、中枢性交感神经阻滞剂、直接作用的血管扩张剂、内皮素受体拮抗剂、神经节阻断剂、硝基扩张剂、磷酸二酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
14.如权利要求12或13所述的用途，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：哌唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪、曲马唑嗪、酚妥拉明、酚苄明、贝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地平、尼群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农(旧称amrinone)、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的药学上可接受的盐。
15.如权利要求14所述的用途，其中，所述血管扩张剂是硝化甘油。
16.如权利要求1-15中任一项所述的用途，其中，相对于非解聚聚集体而言，所述分子以更高的释放速率和/或更高的释放量由解聚聚集体释放。
17.如权利要求16所述的用途，其中，相对于非解聚聚集体而言，所述解聚聚集体的释放速率至少高出10％。
18.如权利要求1-17中任一项所述的用途，其中，所述多个纳米粒子中的至少一个纳米粒子包含配体。
19.如权利要求18所述的用途，其中，所述配体是靶向配体。
20.如权利要求18或19所述的用途，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：肽、多肽、蛋白质、肽模拟物、糖蛋白、凝血素、核苷、核苷酸、核酸、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、糖胺聚糖、脂多糖、脂类、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体以及受体配体。
21.如权利要求20所述的用途，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：多核苷酸、寡核苷酸、基因、自我复制体系、病毒DNA或质粒DNA、单链和双链RNA干扰剂、短发卡RNA(shRNA)、反义寡核苷酸、核酶、microRNA、microRNA模拟物、supermirs、适配子、antimirs、antagomirs、U1衔接头、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸。
22.如权利要求18-21中任一项所述的用途，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：聚赖氨酸(PLL)、聚L-天冬氨酸、聚L-谷氨酸、苯乙烯-顺丁烯二酸酐共聚物、聚(L-丙交酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺共聚物(HMPA)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前胶原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、Sapphyrin、多环芳烃、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、二甲氧三苯甲基、吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素-1β、γ干扰素、GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇(如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇)、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及上述配体的任意组合。
23.如权利要求22所述的用途，其中，所述多环芳烃是吩嗪或二氢吩嗪。
24.如权利要求18-23中任一项所述的用途，其中，所述配体是选自于由以下肽所组成的组中的肽：SEQ ID NO：1(CREKA)、SEQ ID NO：2(CRKRLDRNK)、SEQ ID NO：3(CHVLWSTRC)、SEQ ID NO：4(ALEALAEALEALAEA)、SEQ ID NO：5(KFFKFFKFFK(细菌细胞壁渗透肽))、SEQ ID NO：6(AALEALAEALEALAEALEALAEAAAAGGC(GALA))、SEQ ID NO：7
(ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC(EALA))、SEQ ID NO：8(GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG(INF-
7))、SEQ ID NO：9(GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG(Inf HA-2))、SEQ ID NO:10(GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGWEGMI DGWYGC(diINF-7))、SEQ ID NO:11(GLF EAI EGFI ENGWEGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC(diINF-3))、SEQ ID NO:12(GLFGALAEALAEALAEHLAEALAEALEALAAGGSC(GLF))、SEQ ID NO:13(GLFEAIEGFIENGWEGLAEALAEALEALAAGGSC(GALA-INF3))、SEQ ID NO:14(GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG K GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG(INF-5，n为正亮氨酸))、SEQ ID NO:15(RQIKIWFQNRRMKWKK(穿膜肽))、SEQ ID NO:16(GRKKRRQRRRPPQC(Tat片段48-60))、SEQ ID NO:17
(GALFLGWLGAAGSTMGAWSQPKKKRKV(基于信号序列的肽))、SEQ ID NO:18
(LLIILRRRIRKQAHAHSK(PVEC))、SEQ ID NO:19(WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL(细胞穿透肽))、SEQ ID NO:20(KLALKLALKALKAALKLA(两亲模型肽))、SEQ ID NO:21(RRRRRRRRR(Arg9))、SEQ ID NO:22(LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES(LL-37))、SEQ ID NO:
23(SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR(天蚕素P1))、SEQ ID NO:24
(ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC(α-防卫素))、SEQ ID NO:25(DHYNCVSSGGQCLYSACPIFTKIQGTCYRGKAKCCK(β-防卫素))、SEQ ID NO:26(RRRPRPPYLPRPRPPPFFPPRLPPRIPPGFPPRFPPRFPGKR-NH2(PR-39))、SEQ ID NO:27(ILPWKWPWWPWRR-NH2(indolicidin))、SEQ ID NO:28(AAVALLPAVLLALLAP(RFGF))、SEQ ID NO:29(AALLPVLLAAP(RFGF类似物))、SEQ ID NO:30(RKCRIVVIRVCR(bactenecin))、天蚕素、lycotoxins、paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽(BLP)、cathelicidins、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗肠道抗菌肽(HFIAP)、magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、esculentinis-1以及caerins。
25.如权利要求18-24中任一项所述的用途，其中，相比于对照而言，所述配体将解聚速率降低至少10％。
26.如权利要求1-25中任一项所述的用途，其中，相对于非狭窄区域而言，所述聚集体在狭窄区域中解聚至少10％。
27.如权利要求26所述的用途，其中，相对于非狭窄区域而言，所述狭窄区域中的切应力高出至少一倍。
28.如权利要求26或27所述的用途，其中，所述非狭窄区域中的切应力为正常生理学切应力。
29.如权利要求26-28中任一项所述的用途，其中，所述狭窄区域中的切应力为至少
70dyn/cm2。
30.如权利要求1-29中任一项所述的用途，其中，所述聚集体为球体、圆柱体、盘状、长方体、立方体、或不规则形状。
31.如权利要求1-30中任一项所述的用途，其中，所述纳米粒子为球体、圆柱体、盘状、长方体、立方体、或不规则形状。
32.如权利要求1-31中任一项所述的用途，其中，对所述纳米粒子的表面进行修饰，以调节两个以上纳米粒子间的分子间静电相互作用、氢键相互作用、偶极-偶极相互作用、亲水相互作用、疏水相互作用、范德华力、以及上述作用的任意组合。
33.如权利要求1-32中任一项所述的用途，其中，所述预先确定的切应力为至少
100dyn/cm2。
34.如权利要求1-33中任一项所述的用途，其中，所述聚集体的尺寸为1μm至3μm。
35.如权利要求2所述的用途，其中，所述显像剂选自于由以下显像剂所组成的组：
Alexa 染料(Invitrogen Corp.；Carlsbad，Calif)、荧光素、异硫氰酸荧光素
(FITC)、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)、5-羧基荧光素(FAM)、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素(JOE)、四氯荧光素(TET)、6-羧基罗丹明(R6G)、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明(TAMRA)、6-羧基-X-罗丹明(ROX)、在α位或β位上具有氨基的萘胺染料、香豆素、吖啶、N-(p(2-苯并噁唑基)苯基)顺丁烯二酰亚胺、青色素、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白、放射性同位素、顺磁性金属离子、X射线吸收剂，以及上述显像剂的任意组合。
36.如权利要求35所述的用途，其中，所述萘胺染料是包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-6-萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸(EDANS)在内的萘胺化合物；所述香豆素是3-苯基-7-异氰酸香豆素；所述吖啶是
9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙；所述青色素是Cy2、吲哚二羰花青3(Cy3)、吲哚二羰花青5(Cy5)、吲哚二羰花青5.5(Cy5.5)、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青(CyA)、1H,
5H,11H,15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium或9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,
16,17八氢-内盐；以及所述荧光蛋白是绿色荧光蛋白、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、去稳定EGFP、红色荧光蛋白、红色荧光蛋白变体DsRed、红色荧光蛋白变体mRFPmars、红色荧光蛋白变体mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白或天蓝色荧光蛋白。
37.如权利要求35所述的用途，其中，所述放射性同位素是99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、
68 153 18 124 125 131 47 64 67 89 86 87 90 105 111 111 117
Ga、Ga、 Gd、F、 I、 I、 I、Sc、Cu、Cu、Sr、Y、Y、Y、 Rh、 Ag、 In、 mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At或212Bi；所述顺磁性金属离子是Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)；所述X射线吸收剂是Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag或Ir。
38.如权利要求1-37中任一项所述的用途，其中，所述纳米粒子包含至少一个延长所述聚集体体内寿命的部分。
39.如权利要求38所述的用途，其中，所述至少一个部分是聚乙二醇。
40.如权利要求1或2所述的用途，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变选自于由以下狭窄、狭窄病变或闭塞病变所组成的组：间歇性跛行、心绞痛、颈动脉狭窄、主动脉狭窄、钮孔狭窄、钙化结节性狭窄、冠状动脉或静脉口狭窄、双侧主动脉狭窄、鱼嘴二尖瓣狭窄、特发性肥厚性主动脉瓣下狭窄、漏斗部狭窄、二尖瓣狭窄、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭窄、肺栓塞、肺高血压、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄、瓣上狭窄、三尖瓣狭窄、肾动脉狭窄、幽门狭窄、阻塞性黄疸、肠阻塞、包茎、脑积水、狭窄性腱鞘炎、椎管狭窄、声门下狭窄(SGS)、高血压、镰状细胞贫血，以及它们的任意组合。
41.如权利要求1或2所述的用途，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变是外周动脉狭窄、冠状动脉狭窄、胃流出阻塞、胆道狭窄。
42.如权利要求1、2、40或41所述的用途，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变的起因为：外伤或损伤、动脉粥样硬化、先天缺陷、糖尿病、医源性、感染、局部缺血、肿瘤、血管痉挛、冠状动脉或静脉痉挛、Raynaud现象、中风、血液凝结、Moyamoya病、Takayasu病、结节性多动脉炎、播散性红斑狼疮、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒、血液透析、镰状细胞贫血，以及以上起因的任意组合。
43.如权利要求1、2、40或41所述的用途，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变的起因为炎症。
44.如权利要求3所述的用途，其中，所述内出血的起因为：外伤、高血压导致的血管破裂、感染、癌症、坏血病、自身免疫性血小板减少症、异位妊娠、恶性体温过低、卵巢囊肿、维生素K缺乏症、血友病、药物副作用。
45.如权利要求44所述的用途，其中，所述感染是Ebola或Marburg感染；所述癌症是肝细胞癌或肝癌。
46.如权利要求1-3或40-45中任一项所述的用途，其中，所述药物通过注射、输液、滴注、吸入或摄食给予。
用于狭窄病变和溶解血栓疗法的切变控制释放
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 根据35U.S.C.§119（e），本申请要求2010年8月30日提交的美国临时专利申请No.61/378,057和2011年4月25日提交的美国临时专利申请No.61/478,700的优先权，以引
用的方式将两者的整体内容并入本文。
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[0003] 政府支持
[0004] 本发明是在由美国国立卫生研究院授予的基金号R01ES016665以及由美国国防部授予的基金号BC074986和81XWH-08-1-0659的政府支持下完成的。美国政府对本发明享有
一定权利。
一定权利。
技术领域
背景技术
[0006] 将药物选择性递送至限定的疾病位点是纳米尺度药物载体最有前景的优点之一。药物和显像剂的靶向作用（targeting）以对疾病状态的异常特征进行利用为基础，所述异
常特征例如：肿瘤中pH升高、癌症中血管通透性增强、缺氧区域氧水平下降、细胞表面抗原
上调或靶向部分与病理组织的分子亲和力上调。基于这些特性，已开发了不同的药物递送
方案。物理力（physical forces）在组织功能和疾病中起重要作用，然而，还没有提出过基
于这些参数的靶向策略。
常特征例如：肿瘤中pH升高、癌症中血管通透性增强、缺氧区域氧水平下降、细胞表面抗原
上调或靶向部分与病理组织的分子亲和力上调。基于这些特性，已开发了不同的药物递送
方案。物理力（physical forces）在组织功能和疾病中起重要作用，然而，还没有提出过基
于这些参数的靶向策略。
[0007] 流体切应力（shear stress）是血液循环重要的生理学特征，在正常生理条件下受到严格控制。切应力已经显示出在调节内皮细胞表现型和基因表达、血小板和血红细胞
（RBC）聚集、动脉生成以及血液动力学特性中起重要作用。由于堵塞（blockage）、紧缩
（constriction）或变形（malformation）导致的狭窄（血管异常收缩（narrowing））显著改变了局部血液流动的特性；使这一区域与正常生理条件相区别。例如，动脉粥样硬化狭窄位点
处的壁切应力可能比正常生理学切应力水平高两个数量级。这些异常的切应力诱导血小板
活化，并促进形成血栓。
（RBC）聚集、动脉生成以及血液动力学特性中起重要作用。由于堵塞（blockage）、紧缩
（constriction）或变形（malformation）导致的狭窄（血管异常收缩（narrowing））显著改变了局部血液流动的特性；使这一区域与正常生理条件相区别。例如，动脉粥样硬化狭窄位点
处的壁切应力可能比正常生理学切应力水平高两个数量级。这些异常的切应力诱导血小板
活化，并促进形成血栓。
[0008] 作为驱动力，切变（shear）可导致不同长度尺度的单一和集合元素在形态和结构上的变化。已广泛研究了切应力和不同形式的潜在药物载体间的相互作用，所述药物载体
包括：纳米球/微球、微胶囊和微凝胶。随着切变增加，单个粒子变形并最终破裂。切变触发
的微胶囊/纳米胶囊解体（breakup）正成功应用于美容产品中，使得在与皮肤摩擦时释放活
性成分。然而，还未曾建议或开发这些方法或替代方法以用于将药物靶向递送至血管中或
体内其它充以流体的通道中的狭窄位点。
包括：纳米球/微球、微胶囊和微凝胶。随着切变增加，单个粒子变形并最终破裂。切变触发
的微胶囊/纳米胶囊解体（breakup）正成功应用于美容产品中，使得在与皮肤摩擦时释放活
性成分。然而，还未曾建议或开发这些方法或替代方法以用于将药物靶向递送至血管中或
体内其它充以流体的通道中的狭窄位点。
发明内容
[0010] 在另一方面，本发明提供一种用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变进行治疗或成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予本文所述的聚集体。
[0012] 在又一方面，本发明提供一种用于对受试者中的内出血进行治疗或成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予本文所述的聚集体。
[0014] 本专利或申请文件包含至少一幅彩色附图。本专利或专利申请具有彩色附图的副本将由官方（Office）根据要求提供，并需支付必要费用。
[0015] 图1A-图1C为示出基于切变解聚作用对狭窄区域进行靶向的原理的图解。图1A显示在Hagen-Poiseuille流动条件下，切应力（τ）为血管直径（d）的强函数（strong
function）（τ≈d3），由此，狭窄或阻塞区域产生异常高水平的切应力，其数量级高于任何正
常切应力。这一增强的切应力将微米尺寸（micron-sized）的聚集体物理性地分裂（break
apart）为它们的NP组分。图1B显示释放的NP由于其尺寸较小，与微米尺度的粒子相比所经
受的血液动力学力（hemodynamic forces，Fhydro）较小（Fhydro≈r2），使其能更快沉降并更有效地粘着于周围的血管壁和表面内皮，而较大的粒子则被流体流动拖离（也参见图6A和图
6B）。图1C显示当微尺度（microscale）的聚集体解体为多个NP时，总暴露表面积显著增加，
这也能够进一步增强靶向位点处固定于NP上的药物或酶的释放或活性。
function）（τ≈d3），由此，狭窄或阻塞区域产生异常高水平的切应力，其数量级高于任何正
常切应力。这一增强的切应力将微米尺寸（micron-sized）的聚集体物理性地分裂（break
apart）为它们的NP组分。图1B显示释放的NP由于其尺寸较小，与微米尺度的粒子相比所经
受的血液动力学力（hemodynamic forces，Fhydro）较小（Fhydro≈r2），使其能更快沉降并更有效地粘着于周围的血管壁和表面内皮，而较大的粒子则被流体流动拖离（也参见图6A和图
6B）。图1C显示当微尺度（microscale）的聚集体解体为多个NP时，总暴露表面积显著增加，
这也能够进一步增强靶向位点处固定于NP上的药物或酶的释放或活性。
[0016] 图2A-图2E显示微尺度的血小板模拟物仅在暴露至病理性切应力时才分散为纳米粒子聚集体。图2A是微尺度（～2-5μm）血小板模拟物（左侧）以及用于制造所述模拟物的
PLGA纳米粒子（～180nm）（右侧）的扫描电子显微照片（标尺，2μm）。图2B是展示完整的血小板模拟物（左侧）以及使用流变仪将其暴露于1,000dyne/cm2下10min后分散的纳米粒子（右
侧）的荧光显微照片（标尺，10μm）。图2C是显示由血小板模拟物释放的荧光NP的量（作为切
应力的函数）的柱状图，显示出与暴露于生理水平的切应力（1dyne/cm2或10dyne/cm2）相比，
暴露于病理水平的切应力（≥100dyne/cm2，1min）导致微尺度的聚集体显著解体（*p<
0.005）。图2D是一名63岁的老年男性患者狭窄的左冠状动脉的血管造影照片。图2E显示对
正常冠状动脉（左侧）以及图2D中显示的狭窄血管（具有60%内腔阻塞）（右侧）的流动分布
（flow distributions）进行比较的计算流体动力学（CFD）模拟；几何形状基于血管内超声
扫描而重建。注意到在血管狭窄区域，提高的壁切应力水平（>100dyne/cm2）与图2C中显示
的从血小板模拟物中诱导NP释放所需的壁切应力水平相似。
PLGA纳米粒子（～180nm）（右侧）的扫描电子显微照片（标尺，2μm）。图2B是展示完整的血小板模拟物（左侧）以及使用流变仪将其暴露于1,000dyne/cm2下10min后分散的纳米粒子（右
侧）的荧光显微照片（标尺，10μm）。图2C是显示由血小板模拟物释放的荧光NP的量（作为切
应力的函数）的柱状图，显示出与暴露于生理水平的切应力（1dyne/cm2或10dyne/cm2）相比，
暴露于病理水平的切应力（≥100dyne/cm2，1min）导致微尺度的聚集体显著解体（*p<
0.005）。图2D是一名63岁的老年男性患者狭窄的左冠状动脉的血管造影照片。图2E显示对
正常冠状动脉（左侧）以及图2D中显示的狭窄血管（具有60%内腔阻塞）（右侧）的流动分布
（flow distributions）进行比较的计算流体动力学（CFD）模拟；几何形状基于血管内超声
扫描而重建。注意到在血管狭窄区域，提高的壁切应力水平（>100dyne/cm2）与图2C中显示
的从血小板模拟物中诱导NP释放所需的壁切应力水平相似。
[0017] 图3A-图3E显示在微流装置（microfluidic devices）中，在血液动力学条件（hemodynamic conditions）下由切变诱导的血小板模拟物分散以及纳米粒子靶向作用。图
3A是微流血管狭窄模型的示意图。血小板模拟物（大球）经微流通道注入，所述微流通道中
央区域的横截面积紧缩了90%，以模拟血管狭窄。通道底部排布（lined）有单层的、经培养而
得的牛动脉内皮细胞。血小板模拟物在狭窄前区域保持完整，然而在流经紧缩区时解体为
纳米粒子（小球）。图3B是以PDMS制造的狭窄微管装置的照片。图3C显示对图3B中的微流装
置进行的CFD模拟，表明紧缩区上游的生理学入口切变速率1,000（l/s）在狭窄区域（90%内
腔闭塞）增加至～100,000（l/s）的病理水平；这些切变速率各自相当于10dyne/cm2和1,
000dyne/cm2的切应力。图3D是显示荧光NP由血小板模拟物中的释放显著增加（*p<0.005）
的柱状图，所述显著增加为将所述血小板模拟物经图3B显示的通道注入时，与流经具有生
理水平的切应力（10dyne/cm2）的非紧缩通道时相比较而产生的显著增加。在右侧的荧光显
微照片中，比较了从非紧缩通道的流出物中收集的NP（上方）与从具有90%紧缩的通道的流
出物中收集的NP（下方）。图3E为显示排布于紧缩区下游区域（狭窄后区域）的内皮细胞中的
荧光NP相比于紧缩区上游区域（狭窄前区域）显著积累（p<0.005）的柱状图。右侧显示的是
对应的来自于紧缩区前方区域（左侧）和紧缩区后方区域（右侧）的细胞的荧光显微图像（标
尺，20μm）。
3A是微流血管狭窄模型的示意图。血小板模拟物（大球）经微流通道注入，所述微流通道中
央区域的横截面积紧缩了90%，以模拟血管狭窄。通道底部排布（lined）有单层的、经培养而
得的牛动脉内皮细胞。血小板模拟物在狭窄前区域保持完整，然而在流经紧缩区时解体为
纳米粒子（小球）。图3B是以PDMS制造的狭窄微管装置的照片。图3C显示对图3B中的微流装
置进行的CFD模拟，表明紧缩区上游的生理学入口切变速率1,000（l/s）在狭窄区域（90%内
腔闭塞）增加至～100,000（l/s）的病理水平；这些切变速率各自相当于10dyne/cm2和1,
000dyne/cm2的切应力。图3D是显示荧光NP由血小板模拟物中的释放显著增加（*p<0.005）
的柱状图，所述显著增加为将所述血小板模拟物经图3B显示的通道注入时，与流经具有生
理水平的切应力（10dyne/cm2）的非紧缩通道时相比较而产生的显著增加。在右侧的荧光显
微照片中，比较了从非紧缩通道的流出物中收集的NP（上方）与从具有90%紧缩的通道的流
出物中收集的NP（下方）。图3E为显示排布于紧缩区下游区域（狭窄后区域）的内皮细胞中的
荧光NP相比于紧缩区上游区域（狭窄前区域）显著积累（p<0.005）的柱状图。右侧显示的是
对应的来自于紧缩区前方区域（左侧）和紧缩区后方区域（右侧）的细胞的荧光显微图像（标
尺，20μm）。
[0018] 图4是以示意图的方式（左侧）及以计算机断层扫描血管造影（CTA）图像的方式（右侧）对基于肺栓塞的血栓溶解的建议方法进行说明的示意图。下方：包覆/装载有血栓溶解
剂（组织纤溶酶原激活物；tPA）的NP聚集体在流经具有栓塞的区域时分裂，所述栓塞区域部
分地阻塞血流并因此产生增高的切应力。NP在这些位点积累，并局部发挥溶解栓塞的作用。
剂（组织纤溶酶原激活物；tPA）的NP聚集体在流经具有栓塞的区域时分裂，所述栓塞区域部
分地阻塞血流并因此产生增高的切应力。NP在这些位点积累，并局部发挥溶解栓塞的作用。
[0019] 图5A-图5H显示血栓溶解药物的切变-靶向作用。图5A是实验性切变-活化药物靶向方法的示意图。部分阻塞血管流动的栓塞（沉积的血液凝块（lodged blood clot））的形
成导致切应力在收缩的内腔中局部升高（左侧），这将使血小板模拟物分裂并布置（deploy）
将局部积累的NP组分（中部）。若以血栓溶解药物（例如tPA）包覆所述NP，则与凝块结合的NP
将溶解阻塞（右侧）。图5B是人肺部的肺栓塞计算机断层扫描血管造影照片；栓塞作为暗区
出现，其可在更高放大率下看见（插图中的箭头），该栓塞紧缩血液流动，由于造影剂
（contrast agent）的使用，血液流动在这一视图中显示为白色。图5C是在注入包覆有t-PA
（50ng/ml）的血小板模拟物之前（0min）和之后（1min和60min），在微流装置收缩的微通道内
阻塞流动的人造微栓塞（～200μm）的延时荧光视图（上方）以及明场视图（下方）。荧光NP在
注入后1min内在凝块表面上局部积累，导致凝块随时间逐渐溶解并缩小。图5D是显示与可
溶性tPA相比，使用包覆有tPA的血小板模拟物时栓塞溶解动力学提高的曲线图。包覆有tPA
（50ng/ml）的血小板模拟物在1小时内将栓塞尺寸降低了超过50%（蓝线），而同样浓度的游
离tPA将栓塞尺寸降低了小于5%（红线）。图5E是全肺组织切片的荧光视图（上方）和相衬
（phase contrast）视图（下方），其中，使用小鼠离体肺通气-灌注模型，将人造纤维蛋白凝
块注入肺动脉，该图显示出阻塞的栓塞中荧光NP的局部积累。虽然某些血管并没有栓塞（左
侧），在其它血管中可容易地看到栓塞（右侧）。图5F是显示与非阻塞血管相比，荧光NP在阻
塞区域中的积累大幅增加（10倍至20倍，p<0.005）的柱状图，由显微荧光测定法检测。图5G
是显示在离体肺栓塞模型中静脉注射后1小时内，包覆有50ng/ml t-PA的血小板模拟物使
肺动脉压正常化的柱状图，而同样浓度或10倍剂量（500ng/ml）的游离t-PA并未降低肺动脉
压（N=3；*p<0.005）；需要100倍的剂量（5000ng/ml）才能产生相似的血栓溶解效果。图5H是
在肺栓塞模型中对肺动脉压进行的实时测量，显示出包覆有tPA的血小板模拟物（蓝线）在
大约1小时后逆转了肺高血压，而同样浓度（50ng/ml）的游离t-PA则无效（红线）。
成导致切应力在收缩的内腔中局部升高（左侧），这将使血小板模拟物分裂并布置（deploy）
将局部积累的NP组分（中部）。若以血栓溶解药物（例如tPA）包覆所述NP，则与凝块结合的NP
将溶解阻塞（右侧）。图5B是人肺部的肺栓塞计算机断层扫描血管造影照片；栓塞作为暗区
出现，其可在更高放大率下看见（插图中的箭头），该栓塞紧缩血液流动，由于造影剂
（contrast agent）的使用，血液流动在这一视图中显示为白色。图5C是在注入包覆有t-PA
（50ng/ml）的血小板模拟物之前（0min）和之后（1min和60min），在微流装置收缩的微通道内
阻塞流动的人造微栓塞（～200μm）的延时荧光视图（上方）以及明场视图（下方）。荧光NP在
注入后1min内在凝块表面上局部积累，导致凝块随时间逐渐溶解并缩小。图5D是显示与可
溶性tPA相比，使用包覆有tPA的血小板模拟物时栓塞溶解动力学提高的曲线图。包覆有tPA
（50ng/ml）的血小板模拟物在1小时内将栓塞尺寸降低了超过50%（蓝线），而同样浓度的游
离tPA将栓塞尺寸降低了小于5%（红线）。图5E是全肺组织切片的荧光视图（上方）和相衬
（phase contrast）视图（下方），其中，使用小鼠离体肺通气-灌注模型，将人造纤维蛋白凝
块注入肺动脉，该图显示出阻塞的栓塞中荧光NP的局部积累。虽然某些血管并没有栓塞（左
侧），在其它血管中可容易地看到栓塞（右侧）。图5F是显示与非阻塞血管相比，荧光NP在阻
塞区域中的积累大幅增加（10倍至20倍，p<0.005）的柱状图，由显微荧光测定法检测。图5G
是显示在离体肺栓塞模型中静脉注射后1小时内，包覆有50ng/ml t-PA的血小板模拟物使
肺动脉压正常化的柱状图，而同样浓度或10倍剂量（500ng/ml）的游离t-PA并未降低肺动脉
压（N=3；*p<0.005）；需要100倍的剂量（5000ng/ml）才能产生相似的血栓溶解效果。图5H是
在肺栓塞模型中对肺动脉压进行的实时测量，显示出包覆有tPA的血小板模拟物（蓝线）在
大约1小时后逆转了肺高血压，而同样浓度（50ng/ml）的游离t-PA则无效（红线）。
[0020] 图6A和图6B显示纳米粒子与微粒子（microparticles）相比在流动时更高的粘着性。图6A是显示包覆有tPA的PLGA纳米粒子（平均尺寸200nm）以及微聚集体（平均尺寸2mm；
两者均为PBS中100mg/ml，tPA包覆量为0.5mg/mg）流经包覆有纤维蛋白的80mm通道
（10dyne/cm2）15min时的表面粘着的定量结果的柱状图。图6B是显示NP（左侧）与微聚集体
（右侧）相比，结合水平高出许多的荧光显微图像。
两者均为PBS中100mg/ml，tPA包覆量为0.5mg/mg）流经包覆有纤维蛋白的80mm通道
（10dyne/cm2）15min时的表面粘着的定量结果的柱状图。图6B是显示NP（左侧）与微聚集体
（右侧）相比，结合水平高出许多的荧光显微图像。
[0021] 图7是显示当流经具有模拟活体狭窄血管特性的狭窄通道时，微聚集体解体为纳米粒子的效果增强的柱状图。将聚集体悬浮液注入不具有狭窄区域的装置（640微米高的通
道，壁切应力10dyne/cm2）或具有狭窄区域的装置（80%狭窄，高度80微米）。随后以0.22微米
过滤器过滤所述悬浮液，除去所有微米尺寸的粒子并测量荧光强度（相应的荧光图像在各
柱上方显示）。与不具有狭窄区域的装置相比，具有狭窄区域的装置中流动诱发的释放高出
8倍。
道，壁切应力10dyne/cm2）或具有狭窄区域的装置（80%狭窄，高度80微米）。随后以0.22微米
过滤器过滤所述悬浮液，除去所有微米尺寸的粒子并测量荧光强度（相应的荧光图像在各
柱上方显示）。与不具有狭窄区域的装置相比，具有狭窄区域的装置中流动诱发的释放高出
8倍。
[0022] 图8是装载有FITC-葡聚糖（MW70kDa）的RBC影细胞（RBC ghosts）的荧光图像，在制备后5天时成像。
[0023] 图9是显示RBC影细胞流经狭窄处时释放增强的柱状图。
[0024] 图10是显示流经狭窄处时FITC-葡聚糖从Pluronic-PEI微胶囊中的释放的柱状图。
具体实施方式
[0025] 在一方面，本发明提供一种包含多个纳米粒子的聚集体，其中，所述聚集体在切应力作用下解聚。本发明可用于将感兴趣的化合物（例如治疗剂和/或显像剂）递送至局部位
点，该位点处由于受限和/或受制约的流体流动产生升高的流体切应力。在本发明这一方面
以及其它方面的某些实施方式中，所述聚集体用于生物医学用途。在本发明这一方面以及
其它方面的其它实施方式中，所述聚集体用于非医学用途或工业用途。
点，该位点处由于受限和/或受制约的流体流动产生升高的流体切应力。在本发明这一方面
以及其它方面的某些实施方式中，所述聚集体用于生物医学用途。在本发明这一方面以及
其它方面的其它实施方式中，所述聚集体用于非医学用途或工业用途。
[0026] 在本发明这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述聚集体为微尺寸的聚集体。“微尺寸”表示尺寸为0.1μm至1000μm级别的聚集体。所述聚集体可以是规则形状或不规
则形状。例如，所述聚集体可以是球体、空心球体、立方体、多面体、棱柱、圆柱、棒状、盘状或其它几何形状或者不规则形状。一般而言，本发明的聚集体具有至少一个≥1μm的维度
（dimension）（例如，1μm以上、2μm以上、5μm以上、10μm以上、20μm以上、30μm以上、40μm以上、
50μm以上、60μm以上、70μm以上、80μm以上、90μm以上、100μm以上、150μm以上、200μm以上、
250μm以上、300μm以上、或500μm以上）。在某些实施方式中，聚集体具有至少一个≤500μm的维度（例如，500μm以下、400μm以下、300μm以下、250μm以下、200μm以下、150μm以下、100μm以下、50μm以下、25μm以下、20μm以下、15μm以下、10μm以下、或5μm以下）。在某些实施方式中，所述聚集体的一个维度在约0.5μm至约200μm的范围以内，优选在约0.75μm至约50μm的范围
以内，更优选在约1μm至约20μm的范围以内。在某些实施方式中，所述聚集体的尺寸为1μm至
3μm。在某些实施方式中，所述聚集体的尺寸为2.5μm至5.5μm。在一个实施方式中，所述聚集
体的尺寸约为3.8μm。
则形状。例如，所述聚集体可以是球体、空心球体、立方体、多面体、棱柱、圆柱、棒状、盘状或其它几何形状或者不规则形状。一般而言，本发明的聚集体具有至少一个≥1μm的维度
（dimension）（例如，1μm以上、2μm以上、5μm以上、10μm以上、20μm以上、30μm以上、40μm以上、
50μm以上、60μm以上、70μm以上、80μm以上、90μm以上、100μm以上、150μm以上、200μm以上、
250μm以上、300μm以上、或500μm以上）。在某些实施方式中，聚集体具有至少一个≤500μm的维度（例如，500μm以下、400μm以下、300μm以下、250μm以下、200μm以下、150μm以下、100μm以下、50μm以下、25μm以下、20μm以下、15μm以下、10μm以下、或5μm以下）。在某些实施方式中，所述聚集体的一个维度在约0.5μm至约200μm的范围以内，优选在约0.75μm至约50μm的范围
以内，更优选在约1μm至约20μm的范围以内。在某些实施方式中，所述聚集体的尺寸为1μm至
3μm。在某些实施方式中，所述聚集体的尺寸为2.5μm至5.5μm。在一个实施方式中，所述聚集
体的尺寸约为3.8μm。
[0027] 不希望受理论约束，由于本发明的聚集体为微尺寸聚集体，因此可容易地随胆汁排出；或者，如果所述聚集体是可生物降解的，则可降解为化学成分并经肾排出。这可以有
利于在军用和/或紧急情况时的药物递送。例如，由血液凝块引起的血管快速闭塞
（occlusion）导致切应力局部大量增强，因此所述聚集体可以用于治疗血管梗塞（中风、心
脏病发作、肺栓塞）。所述聚集体还可用于治疗出血。因为大量血液流经血管壁上的小孔而
导致出血点处切应力很高，本发明的聚集体将在出血点处解聚。因此，若NP上含有促凝剂
（pro-coagulant），则将其递送至出血点。
利于在军用和/或紧急情况时的药物递送。例如，由血液凝块引起的血管快速闭塞
（occlusion）导致切应力局部大量增强，因此所述聚集体可以用于治疗血管梗塞（中风、心
脏病发作、肺栓塞）。所述聚集体还可用于治疗出血。因为大量血液流经血管壁上的小孔而
导致出血点处切应力很高，本发明的聚集体将在出血点处解聚。因此，若NP上含有促凝剂
（pro-coagulant），则将其递送至出血点。
[0028] 本文所使用的术语“切应力”是指力与面积之比。流体响应施加的切变力而流动。然而，如图1A的左侧所示，当流体流经通道时，临近通道壁的流体倾向于粘着至壁上，导致
产生速度梯度。流体速度随着与壁间距离的增加而增加。流体速度的差异（如速度梯度所
示）产生向流体中流动的细胞和粒子所施加的切应力。所述切应力随着与壁间距离的减少
（流体速度的差异更大）而增加。切应力还是半径的函数，因此当通道紧缩时也增加（如图1A
中部所示）。本文所使用的术语“切应力条件”是指流体施加切应力的条件。由流动流体产生
的切应力可转移至或施加至流动流体中可能存在的分子、粒子和聚集体。这些切应力条件
可在具有通常为层流或湍流特性的流体中出现。聚集体经受的切应力大小是聚集体尺寸的
函数。
产生速度梯度。流体速度随着与壁间距离的增加而增加。流体速度的差异（如速度梯度所
示）产生向流体中流动的细胞和粒子所施加的切应力。所述切应力随着与壁间距离的减少
（流体速度的差异更大）而增加。切应力还是半径的函数，因此当通道紧缩时也增加（如图1A
中部所示）。本文所使用的术语“切应力条件”是指流体施加切应力的条件。由流动流体产生
的切应力可转移至或施加至流动流体中可能存在的分子、粒子和聚集体。这些切应力条件
可在具有通常为层流或湍流特性的流体中出现。聚集体经受的切应力大小是聚集体尺寸的
函数。
[0029] 一般而言，在正常血管中壁切应力远低于70dyn/cm2（7Pa），而在狭窄位点切应力2
则超过70dyn/cm（AM Malek，S.A.与S.Izumo“Hemodyamic shear stress and its role
in atherosclerosis.”JAMA，1999，282：2035-2042）。相应地，本文所述的聚集体解聚时的
切应力为5dyn/cm2至3000dyn/cm2。在某些实施方式中，本文所述的聚集体解聚时的切应力
为≥5dyn/cm2、≥6dyn/cm2、≥7dyn/cm2、≥8dyn/cm2、≥9dyn/cm2、≥10dyn/cm2、≥11dyn/
cm2、≥12dyn/cm2、≥13dyn/cm2、≥14dyn/cm2、≥15dyn/cm2、或≥20dyn/cm2。将要理解的是
并不要求聚集体完全解聚。
则超过70dyn/cm（AM Malek，S.A.与S.Izumo“Hemodyamic shear stress and its role
in atherosclerosis.”JAMA，1999，282：2035-2042）。相应地，本文所述的聚集体解聚时的
切应力为5dyn/cm2至3000dyn/cm2。在某些实施方式中，本文所述的聚集体解聚时的切应力
为≥5dyn/cm2、≥6dyn/cm2、≥7dyn/cm2、≥8dyn/cm2、≥9dyn/cm2、≥10dyn/cm2、≥11dyn/
cm2、≥12dyn/cm2、≥13dyn/cm2、≥14dyn/cm2、≥15dyn/cm2、或≥20dyn/cm2。将要理解的是
并不要求聚集体完全解聚。
[0030] 与对照切变条件（例如，正常血管切应力）相比，本文所述的聚集体在切应力条件（例如，狭窄位点切应力）下可解聚至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、或
100%（即完全解聚）。
100%（即完全解聚）。
[0031] 解聚的量和/或速率可通过调整聚集体中纳米粒子的非共价结合（non-covalent association）来进行控制。本文所使用的术语“非共价结合”是指两个以上个体分子间不涉
及共价键的分子间相互作用。分子间相互作用取决于例如极性、电荷、和/或个体分子的其
它特性，并不受限制地包括静电（例如离子）相互作用、偶极-偶极相互作用、范德华力、及它
们中两种以上的组合。相应地，非共价结合的强度可通过改变上述分子间相互作用中的一
种或多种来进行调整。例如，可修饰纳米粒子的表面以调整两个以上纳米粒子间的分子间
静电相互作用、氢键相互作用、偶极-偶极相互作用、亲水相互作用、疏水相互作用、范德华
力以及上述作用的任意组合。
及共价键的分子间相互作用。分子间相互作用取决于例如极性、电荷、和/或个体分子的其
它特性，并不受限制地包括静电（例如离子）相互作用、偶极-偶极相互作用、范德华力、及它
们中两种以上的组合。相应地，非共价结合的强度可通过改变上述分子间相互作用中的一
种或多种来进行调整。例如，可修饰纳米粒子的表面以调整两个以上纳米粒子间的分子间
静电相互作用、氢键相互作用、偶极-偶极相互作用、亲水相互作用、疏水相互作用、范德华
力以及上述作用的任意组合。
[0032] 一种控制结合强度的方法是通过使纳米粒子表面上包含亲和结合对（affinity binding pairs）、并通过调整上述分子间相互作用中的一种或多种来对这些亲和结合对的
分子间结合进行调整。
分子间结合进行调整。
[0033] 本文所使用的术语“亲水相互作用”是指对水分子的吸引作用，其中，材料/化合物或其一部分可与水结合、吸收水和/或溶于水中。本文所使用的术语“疏水相互作用”是指对
水分子的排斥作用，其中，材料/化合物或其一部分并不与水结合、吸收水和/或溶于水中。
结合强度可通过调整纳米粒子表面的亲水和/或疏水特性而进行控制。例如，更疏水的纳米
粒子在亲水条件下（例如，血液中）将聚集在一起。相反，更亲水的纳米粒子在亲水条件下将
不会聚集。
水分子的排斥作用，其中，材料/化合物或其一部分并不与水结合、吸收水和/或溶于水中。
结合强度可通过调整纳米粒子表面的亲水和/或疏水特性而进行控制。例如，更疏水的纳米
粒子在亲水条件下（例如，血液中）将聚集在一起。相反，更亲水的纳米粒子在亲水条件下将
不会聚集。
[0034] 本文所使用的术语“静电相互作用”是指两个以上带正电或带负电的部分/基团间的分子间相互作用，当两者所带电荷相反（即，一个为正电、另一个为负电）时，可相互吸引；
当两者电荷符号相同（即，两个均为正电或两个均为负电）时，则可相互排斥；或者，该相互
作用可为上述作用的组合。静电相互作用可通过使纳米粒子表面包括带正电和带负电的部
分/基团来进行调整。通过调整正电荷与负电荷之比，可对纳米粒子的结合强度进行调整；
并由此控制解聚速率。
当两者电荷符号相同（即，两个均为正电或两个均为负电）时，则可相互排斥；或者，该相互
作用可为上述作用的组合。静电相互作用可通过使纳米粒子表面包括带正电和带负电的部
分/基团来进行调整。通过调整正电荷与负电荷之比，可对纳米粒子的结合强度进行调整；
并由此控制解聚速率。
[0035] 本文所使用的术语“偶极-偶极相互作用”是指两个以上极性分子间的分子间引力，例如具有不带电、部分正电端δ+（例如，正电性头基，如卵磷脂的胆碱头基）的第一分子
以及具有不带电、部分负电端δ-（例如，负电性原子，如多糖中的杂原子O、N或S）的第二分
子。偶极-偶极相互作用还指分子间氢键，其中氢原子在位于不同分子中的负电性原子间起
桥接（bridge）作用，其中氢原子通过共价键结合至第一分子并通过静电力结合至第二分
子。
以及具有不带电、部分负电端δ-（例如，负电性原子，如多糖中的杂原子O、N或S）的第二分
子。偶极-偶极相互作用还指分子间氢键，其中氢原子在位于不同分子中的负电性原子间起
桥接（bridge）作用，其中氢原子通过共价键结合至第一分子并通过静电力结合至第二分
子。
[0036] 本文所使用的术语“氢键”是指共价结合至第一负电性原子（例如，O、N或S）的氢原子与第二负电性原子之间的引力或桥接，其中，第一负电性原子和第二负电性原子可在两
个不同分子中（分子间氢键）或在单个分子中（分子内氢键）。纳米粒子间的结合强度可通过
调整纳米粒子彼此间能形成的分子间氢键的数量而进行调整。较多的分子间氢键导致较强
的结合作用；并因而导致较低的解聚速率。相反，较少的分子间氢键导致较弱的结合作用；
并因而导致较高的解聚速率。
个不同分子中（分子间氢键）或在单个分子中（分子内氢键）。纳米粒子间的结合强度可通过
调整纳米粒子彼此间能形成的分子间氢键的数量而进行调整。较多的分子间氢键导致较强
的结合作用；并因而导致较低的解聚速率。相反，较少的分子间氢键导致较弱的结合作用；
并因而导致较高的解聚速率。
[0038] 在本文描述的本发明这一方面以及其它方面的某些实施方式中，一种或多种化合物（例如，待递送的化合物）可与聚集体相结合。本文所使用的短语“与……结合
（associated with）”相对于聚集体指的是缠绕（entangled）、嵌入（embedded）、并入
（incorporated）、封装（encapsulated）、与表面结合、或以其它方式与聚集体或聚集体的纳
米粒子组分相结合。
（associated with）”相对于聚集体指的是缠绕（entangled）、嵌入（embedded）、并入
（incorporated）、封装（encapsulated）、与表面结合、或以其它方式与聚集体或聚集体的纳
米粒子组分相结合。
[0039] 不希望受理论约束，所述化合物可以与聚集体中的纳米粒子共价结合或非共价结合。相应地，在本文描述的本发明这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述化合物封
装于纳米粒子中。
装于纳米粒子中。
[0040] 在本文所述的本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述化合物被吸收/吸附于纳米粒子的表面上。
[0041] 在本文所述的本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述化合物与纳米粒子共价连接。
[0042] 将要理解的是，当化合物在聚集体中时，不需要与纳米粒子相结合。例如，预形成的纳米粒子可以在化合物存在的情况下聚集。不希望受理论约束，所述化合物可因此存在
于聚集体中的空间（space）（或空腔（cavities））中。
于聚集体中的空间（space）（或空腔（cavities））中。
[0044] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述聚集体包含抗炎剂和另一种治疗剂。另一种治疗剂可以是抗炎剂、也可以不是抗炎剂。
[0045] 纳米粒子
[0046] 本文所使用的术语“纳米粒子”是指尺寸约为10-9米或十亿分之一米、并且尺寸在10-6米或百万分之一米以下的粒子。术语“纳米粒子”包括纳米球（nanospheres）、纳米棒
（nanorods）、纳米壳（nanoshells）以及纳米棱柱（nanoprisms）；并且这些纳米粒子可以是
纳米网络（nanonetwork）的一部分。术语“纳米粒子”还包括具有纳米粒子尺寸的脂质体和
脂质粒子。所述粒子可为例如单分散或多分散的，并且给定分散度的粒子直径可以变化，例
如粒子直径可为约0.1nm至100nm。
（nanorods）、纳米壳（nanoshells）以及纳米棱柱（nanoprisms）；并且这些纳米粒子可以是
纳米网络（nanonetwork）的一部分。术语“纳米粒子”还包括具有纳米粒子尺寸的脂质体和
脂质粒子。所述粒子可为例如单分散或多分散的，并且给定分散度的粒子直径可以变化，例
如粒子直径可为约0.1nm至100nm。
[0047] 本文所使用的术语“脂质体”包括任何由脂双层（lipid bilayer）包围的区室（compartment）。脂质体的特征可在于膜类型与尺寸。脂质体在本领域也被称为脂囊泡
（lipid vesicles）。为了形成脂质体，脂质分子包含细长的非极性（疏水）部分以及极性（亲
水）部分。所述分子的疏水部分和亲水部分优选位于细长分子结构的两端。当将这种脂质分
散于水中时，它们自发形成称为片层（lamellae）的双层膜。片层由两层脂质分子单层片组
成，脂质分子的非极性（疏水）表面彼此相对，极性（亲水）表面朝向水介质。由脂质形成的膜
以与细胞膜包围细胞内物质相似的方式包围一部分水相。因此，脂质体的双层与细胞膜中
不具有蛋白质组分的细胞膜相似。
（lipid vesicles）。为了形成脂质体，脂质分子包含细长的非极性（疏水）部分以及极性（亲
水）部分。所述分子的疏水部分和亲水部分优选位于细长分子结构的两端。当将这种脂质分
散于水中时，它们自发形成称为片层（lamellae）的双层膜。片层由两层脂质分子单层片组
成，脂质分子的非极性（疏水）表面彼此相对，极性（亲水）表面朝向水介质。由脂质形成的膜
以与细胞膜包围细胞内物质相似的方式包围一部分水相。因此，脂质体的双层与细胞膜中
不具有蛋白质组分的细胞膜相似。
[0048] 脂质体包括单层囊泡（unilamellar vesicles），单层囊泡由单层脂质层组成，通常具有20纳米至100纳米的直径；大单层囊泡（LUVS）典型地大于100nm，可通过对多层脂质
体进行超声处理获得。优选的脂质体具有20nm-250nm范围内的直径。
体进行超声处理获得。优选的脂质体具有20nm-250nm范围内的直径。
[0049] 不受限制地，可用于形成本发明聚集体的纳米粒子至少有十种类型：（1）由聚合物或其它材料形成的纳米粒子，感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）吸收/吸附于所述
聚合物或材料、或在纳米粒子核上形成药物包衣；（2）由感兴趣的分子形成的核而形成的纳
米粒子，所述感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）包覆有聚合物或其它材料；（3）由
聚合物或其它材料形成的纳米粒子，感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）共价连接
至所述聚合物或材料；（4）由感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）与其它分子形成的
纳米粒子；（5）以如下方式形成的纳米粒子：使纳米粒子包含大致均匀的混合物，该混合物
为治疗剂、显像剂或配体与纳米粒子组成成分或其它非药物物质的混合物；（6）纯药物或药
物混合物的纳米粒子，该纳米粒子在感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）的核上覆
有包衣；（7）不含任何相结合的感兴趣化合物的纳米粒子；（8）全部由治疗剂、显像剂或生物
活性化合物组成的纳米粒子；（9）纳米粒子中渗透（permeated）有感兴趣的分子（例如治疗
剂、显像剂或配体）的纳米粒子；以及（10）吸附有感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配
体）的纳米粒子。
聚合物或材料、或在纳米粒子核上形成药物包衣；（2）由感兴趣的分子形成的核而形成的纳
米粒子，所述感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）包覆有聚合物或其它材料；（3）由
聚合物或其它材料形成的纳米粒子，感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）共价连接
至所述聚合物或材料；（4）由感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）与其它分子形成的
纳米粒子；（5）以如下方式形成的纳米粒子：使纳米粒子包含大致均匀的混合物，该混合物
为治疗剂、显像剂或配体与纳米粒子组成成分或其它非药物物质的混合物；（6）纯药物或药
物混合物的纳米粒子，该纳米粒子在感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配体）的核上覆
有包衣；（7）不含任何相结合的感兴趣化合物的纳米粒子；（8）全部由治疗剂、显像剂或生物
活性化合物组成的纳米粒子；（9）纳米粒子中渗透（permeated）有感兴趣的分子（例如治疗
剂、显像剂或配体）的纳米粒子；以及（10）吸附有感兴趣的分子（例如治疗剂、显像剂或配
体）的纳米粒子。
[0050] 在某些实施方式中，感兴趣的化合物（例如治疗剂、显像剂或配体）包覆在聚集体的外表面，即，感兴趣的化合物在聚集体的外表面形成包衣。不希望被理论约束，在聚集体
中存在的纳米粒子的子集在表面上包含感兴趣的化合物（即，表面包覆有感兴趣的化合
物），并且这些纳米粒子随后将感兴趣的化合物递呈至聚集体的外表面。
中存在的纳米粒子的子集在表面上包含感兴趣的化合物（即，表面包覆有感兴趣的化合
物），并且这些纳米粒子随后将感兴趣的化合物递呈至聚集体的外表面。
[0051] 在某些实施方式中，在以纳米粒子形成聚集体后，可在聚集体的外表面包覆感兴趣的化合物。例如，配体和/或化学活性基团可递呈至聚集体中纳米粒子的外表面上，并且
可利用这些配体和/或化学基团将感兴趣的化合物结合至聚集体的外表面。
可利用这些配体和/或化学基团将感兴趣的化合物结合至聚集体的外表面。
[0052] 在某些实施方式中，感兴趣的化合物可吸收/吸附于预形成的聚集体的外表面上，以在聚集体的外表面上形成感兴趣的化合物包衣。
[0053] 并非聚集体中的每个纳米粒子都需要包含感兴趣的化合物。可以只有纳米粒子的子集包含感兴趣的化合物。例如，在聚集体中，至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少
50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、或至少100%的纳米粒子（即全部纳米粒
子）可包含感兴趣的化合物。
50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、或至少100%的纳米粒子（即全部纳米粒
子）可包含感兴趣的化合物。
[0054] 本领域技术人员清楚知晓许多本领域中熟知的用于药物递送的纳米粒子。相应地，可用于本发明的纳米粒子包括例如以下文件中所述的纳米粒子：美国专利No.6,645,
517、No.5,543,158、No.7,348,026、No.7,265,090、No.7,541,046、No.5,578,325、No.7,
371,738、No.7,651,770、No.9,801,189、No.7,329,638、No.7,601,331和No.5,962,566；以
及美国专利申请公开No.US2006/0280798、No.US2005/0281884、No.US2003/0223938、
No.2004/0001872、No.2008/0019908、No.2007/0269380、No.2007/0264199、No.2008/
0138430、No.2005/0003014、No.2006/0127467、No.2006/0078624、No.2007/0243259、
No.2005/0058603、No.2007/0053870、No.2006/0105049、No.2007/0224277、No.2003/
0147966、No.2003/0082237、No.2009/0226525、No.2006/0233883、No.2008/0193547、
No.2007/0292524、No.2007/0014804、No.2004/0219221、No.2006/0193787、No.2004/
0081688、No.2008/0095856、No.2006/0134209和No.2004/0247683，以引用的方式将上述文
件的内容全部并入本文。
517、No.5,543,158、No.7,348,026、No.7,265,090、No.7,541,046、No.5,578,325、No.7,
371,738、No.7,651,770、No.9,801,189、No.7,329,638、No.7,601,331和No.5,962,566；以
及美国专利申请公开No.US2006/0280798、No.US2005/0281884、No.US2003/0223938、
No.2004/0001872、No.2008/0019908、No.2007/0269380、No.2007/0264199、No.2008/
0138430、No.2005/0003014、No.2006/0127467、No.2006/0078624、No.2007/0243259、
No.2005/0058603、No.2007/0053870、No.2006/0105049、No.2007/0224277、No.2003/
0147966、No.2003/0082237、No.2009/0226525、No.2006/0233883、No.2008/0193547、
No.2007/0292524、No.2007/0014804、No.2004/0219221、No.2006/0193787、No.2004/
0081688、No.2008/0095856、No.2006/0134209和No.2004/0247683，以引用的方式将上述文
件的内容全部并入本文。
[0055] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，纳米粒子是来自Acusphere的全氟丁烷（perflubutane）聚合物微球或HDDSTM（疏水药物递送系统）
（www.acusphere.com/technology/home.html）。全氟丁烷聚合物微球是通过制成含有PLGA
（聚乳酸-共-乙醇酸）、磷脂以及造孔剂（pore-forming agent）的乳状液而制备的。这一乳
状液进一步通过喷雾干燥处理而制成类似于蜂窝结构的、含有气体的小型多孔微球。
（www.acusphere.com/technology/home.html）。全氟丁烷聚合物微球是通过制成含有PLGA
（聚乳酸-共-乙醇酸）、磷脂以及造孔剂（pore-forming agent）的乳状液而制备的。这一乳
状液进一步通过喷雾干燥处理而制成类似于蜂窝结构的、含有气体的小型多孔微球。
[0056] 不希望受理论限制，HDDSTM可将一大类无法在水中充分溶解的药物或疏水性药物转化为药物微球或包埋入小型微球的药物纳米球，从而可更快溶于水中。一种优选的HDDSTM
是AI-850TM，这是疏水药物紫杉醇的重制药物，与Abraxis Bioscience的
（导向癌症药物）生物等效。可递送这种药物以抑制由于细胞过度生长导致的血管紧缩或内
膜增生。
是AI-850TM，这是疏水药物紫杉醇的重制药物，与Abraxis Bioscience的
（导向癌症药物）生物等效。可递送这种药物以抑制由于细胞过度生长导致的血管紧缩或内
膜增生。
[0057] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述纳米粒子具有约10nm至约500nm的平均直径。在某些实施方式中，所述纳米粒子具有约50nm至约250nm的平均直
径。在一个实施方式中，所述纳米粒子具有约100nm至约250nm的平均直径。在一个实施方式
中，所述纳米粒子具有约180nm的平均直径。
径。在一个实施方式中，所述纳米粒子具有约100nm至约250nm的平均直径。在一个实施方式
中，所述纳米粒子具有约180nm的平均直径。
[0058] 不受限制地，可用于本发明的纳米粒子可由任何材料组成。在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述纳米粒子包含聚合物，例如生物相容聚合物。所述聚
合物由凝胶渗透色谱测定的平均分子量可在20,000至约500,000的范围内。
合物由凝胶渗透色谱测定的平均分子量可在20,000至约500,000的范围内。
[0059] 本文所使用的术语“生物相容的”指的是在接触体液或组织时显示出基本没有细胞毒性或免疫原性。本文所使用的术语“聚合物”是指低聚物、共低聚物、高聚物和共高聚
物，例如，无规嵌段、多嵌段、星型、接枝、梯度共聚物及它们的组合。
物，例如，无规嵌段、多嵌段、星型、接枝、梯度共聚物及它们的组合。
[0060] 术语“生物相容聚合物”是指当在受试者体内使用时非毒性、化学惰性、以及大致上非免疫原性的聚合物以及大致上不溶于血液的聚合物。所述生物相容聚合物可以是不可
生物降解的、或优选为可生物降解的。当原位使用时，所述生物相容聚合物还优选是非炎性
的。
生物降解的、或优选为可生物降解的。当原位使用时，所述生物相容聚合物还优选是非炎性
的。
[0061] 可生物降解聚合物在本领域中已有公开。合适的可生物降解聚合物的例子包括但不仅限于：线性链状（linear-chain）聚合物例如聚丙交酯、聚乙交酯、聚己内酯、聚乳酸和
聚乙醇酸共聚物、聚酸酐、聚ε-己内酯、聚酰胺、聚氨酯（polyurethanes）、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二氧环己酮、聚缩醛（polyacetal）、聚缩酮（polyketals）、聚碳酸酯、聚原碳酸酯
（polyorthocarbonates）、聚二氢吡喃、聚磷腈、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊酸酯、聚亚烷基草
酸酯、聚亚烷基琥珀酸酯、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚羟基纤维素、
聚甲基丙烯酸甲酯、壳多糖（chitin）、壳聚糖（chitosan）、聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚甘
油癸二酸酯（PGS），以及共聚物、三元共聚物，以及包含上文一种或多种聚合物的共聚物。其
它可生物降解聚合物包括例如，明胶、胶原、丝（silk）、壳聚糖、藻酸盐/酯、纤维素、聚核酸等。
聚乙醇酸共聚物、聚酸酐、聚ε-己内酯、聚酰胺、聚氨酯（polyurethanes）、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二氧环己酮、聚缩醛（polyacetal）、聚缩酮（polyketals）、聚碳酸酯、聚原碳酸酯
（polyorthocarbonates）、聚二氢吡喃、聚磷腈、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊酸酯、聚亚烷基草
酸酯、聚亚烷基琥珀酸酯、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚羟基纤维素、
聚甲基丙烯酸甲酯、壳多糖（chitin）、壳聚糖（chitosan）、聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚甘
油癸二酸酯（PGS），以及共聚物、三元共聚物，以及包含上文一种或多种聚合物的共聚物。其
它可生物降解聚合物包括例如，明胶、胶原、丝（silk）、壳聚糖、藻酸盐/酯、纤维素、聚核酸等。
[0062] 合适的不可生物降解的生物相容聚合物包括，例如醋酸纤维素（包括双醋酸纤维素）、聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、尼龙、聚碳酸酯、聚硫化物、聚砜、水凝胶（例如，丙烯酸水凝胶（acrylics））、聚丙烯腈、聚乙酸乙烯酯、醋酸丁酸纤维素、硝化纤维素、氨酯/碳酸酯共聚物、苯乙烯/马来酸共聚物、聚乙烯
亚胺、泊洛沙姆（Poloxamers）（例如Pluronic，如泊洛沙姆407和泊洛沙姆188）、透明质酸
酶、肝素、琼脂糖、普鲁兰多糖（Pullulan），以及包含上述一种或多种聚合物的共聚物，例如
乙烯/乙烯醇共聚物（EVOH）。
亚胺、泊洛沙姆（Poloxamers）（例如Pluronic，如泊洛沙姆407和泊洛沙姆188）、透明质酸
酶、肝素、琼脂糖、普鲁兰多糖（Pullulan），以及包含上述一种或多种聚合物的共聚物，例如
乙烯/乙烯醇共聚物（EVOH）。
[0063] 在某些实施方式中，所述生物相容聚合物是聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚(甘油癸二酸酯)（PGS）、聚乙烯亚胺、Pluronic（泊洛沙姆407、泊洛沙姆188）、透明质酸酶、肝素、琼胶糖、或普鲁兰多糖。
[0064] 除感兴趣的分子以外，所述纳米粒子可包含额外的部分，所述部分可延长血液中纳米粒子的体内寿命。例如，所述纳米粒子可包含延长血液中纳米粒子体内寿命的官能部
分。一种示例性的用于延长体内寿命的部分为聚乙二醇。相应地，所述聚集体可包含表面聚
乙二醇化（polyethylene glycoated）的纳米粒子。
分。一种示例性的用于延长体内寿命的部分为聚乙二醇。相应地，所述聚集体可包含表面聚
乙二醇化（polyethylene glycoated）的纳米粒子。
[0065] 血红细胞
[0066] 虽然讨论了本发明关于聚集体的多个方面，然而也可使用血红细胞（RBC）代替聚集体，其中，感兴趣的化合物（例如治疗剂和/或显像剂）与血红细胞相结合。本发明人已经
发现封装入血红细胞的化合物可在切应力作用下从血红细胞中优先释放。相应地，在一方
面，本发明提供一种用于对受试者中的狭窄、狭窄病变、血液凝块、阻塞病变和/或内出血进
行治疗或成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予血红细胞，其中，所述血红细胞
包含治疗剂和/或显像剂。
发现封装入血红细胞的化合物可在切应力作用下从血红细胞中优先释放。相应地，在一方
面，本发明提供一种用于对受试者中的狭窄、狭窄病变、血液凝块、阻塞病变和/或内出血进
行治疗或成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予血红细胞，其中，所述血红细胞
包含治疗剂和/或显像剂。
[0067] 对于将化合物与RBC结合有两种主要方法。最广泛使用的方法是使用若干封装方法中的一种将化合物封装于RBC内。第二种方法是可逆或不可逆地将化合物附着于RBC膜
上。相应地，在某些实施方式中，感兴趣的化合物（例如，治疗剂和/或显像剂）封装于RBC内。
因此，在感兴趣的化合物与RBC膜间没有共价连接。
上。相应地，在某些实施方式中，感兴趣的化合物（例如，治疗剂和/或显像剂）封装于RBC内。
因此，在感兴趣的化合物与RBC膜间没有共价连接。
[0068] 血红细胞为血液中最普遍的细胞，负责氧运输并具有典型的两面凹的形状。正常人RBC具有7-8μm的直径以及90fl的平均体积。在哺乳动物中，血红细胞是无核的，并在成熟
过程中失去其细胞器。人体通常拥有2-3×1013个RBC，并以2百万个每秒的速度连续不断地
制造。RBC在其100-120天的寿命内在循环系统内移动，直至被网状内皮系统（RES）中的巨噬
细胞选择性清除。
过程中失去其细胞器。人体通常拥有2-3×1013个RBC，并以2百万个每秒的速度连续不断地
制造。RBC在其100-120天的寿命内在循环系统内移动，直至被网状内皮系统（RES）中的巨噬
细胞选择性清除。
[0069] 成熟、两面凹的RBC的表面积约为136μm2，但可膨胀至约150fl的球形。值得注意的是RBC还可穿过直径为2-3μm的未受损伤的毛细血管。RBC膜与组织为均一壳层（uniform
shell）的膜骨架蛋白紧密相关。RBC的形状可进行多次可逆变形。RBC存活的重要决定因素
是其可变形性。影响可变形性的关键因素是内部粘度（internal viscosity）（主要来自RBC
血红蛋白）、细胞的表面/体积以及膜固有的可变形性。RBC具有其它非常有趣的特性，即，由
于将其置入高渗溶液时收缩，而置入低渗溶液时则膨胀，因此可作为渗透压力计。RBC可达
到导致膜上出现孔洞（10nm直至500nm）的临界溶血体积。这些过程通常是可逆的，在溶血
后，孔洞闭合，细胞恢复其两面凹的形状。
shell）的膜骨架蛋白紧密相关。RBC的形状可进行多次可逆变形。RBC存活的重要决定因素
是其可变形性。影响可变形性的关键因素是内部粘度（internal viscosity）（主要来自RBC
血红蛋白）、细胞的表面/体积以及膜固有的可变形性。RBC具有其它非常有趣的特性，即，由
于将其置入高渗溶液时收缩，而置入低渗溶液时则膨胀，因此可作为渗透压力计。RBC可达
到导致膜上出现孔洞（10nm直至500nm）的临界溶血体积。这些过程通常是可逆的，在溶血
后，孔洞闭合，细胞恢复其两面凹的形状。
[0070] 血红细胞由于可完全生物降解而不产生有毒产物，并尤其在使用自体红细胞时显示出高度生物相容性，因此是生物相容的载体。血红细胞可通过多种技术容易地离体操作
以封装不同分子，之后可获得经装载的红细胞，其形态特性、免疫特性和生化特性都与天然
细胞相似。由于缺少核和其它细胞器，红细胞的大部分体积都能用于封装药物。红细胞保护
所封装的药物免于由内源性因素导致的过早失活与降解，并同时避免了受试者对药物的毒
性效应产生的免疫反应。存在多种可被封装的化学物质。相比其它合成载体，它们在循环系
统中寿命更长；并且，由于具备多种酶促活性（可直接影响所装载的分子），它们可作为生物
反应器发挥作用；在装载前药（prodrug）的情况下，它们能够产生活性药物自身。
以封装不同分子，之后可获得经装载的红细胞，其形态特性、免疫特性和生化特性都与天然
细胞相似。由于缺少核和其它细胞器，红细胞的大部分体积都能用于封装药物。红细胞保护
所封装的药物免于由内源性因素导致的过早失活与降解，并同时避免了受试者对药物的毒
性效应产生的免疫反应。存在多种可被封装的化学物质。相比其它合成载体，它们在循环系
统中寿命更长；并且，由于具备多种酶促活性（可直接影响所装载的分子），它们可作为生物
反应器发挥作用；在装载前药（prodrug）的情况下，它们能够产生活性药物自身。
[0071] 不受限制地，血红细胞可包括自体血红细胞，即从需要治疗的受试者处取得的细胞（即，供体和受体为同一个体）。自体血红细胞具有避免任何基于免疫的细胞排斥这一优
点。或者，所述细胞可以是异源的，例如，由供体处取得。第二受试者可以是相同种或不同种
的。典型地，当所述细胞来自供体时，其将来自与受体足够免疫相容的供体，即不会产生移
植排斥，以减小或去除对免疫抑制的需求。在某些实施方式中，所述细胞取自异种来源
（xenogeneic source），即经遗传工程改造至与受体或受体的种足够免疫相容的非人哺乳
动物。确定免疫相容性的方法是本领域已知的，并包括评定供体-受体对于HLA与ABO决定子
的相容性的组织配型，参见例如Transplantation Immunology，Bach与Auchincloss，Eds.
（Wiley，John & Sons，Incorporated1994）。在某些实施方式中，血红细胞是重组血红细胞
或血红细胞衍生的囊泡，例如在美国专利No.7,521,174以及美国专利申请公开No.2009/
0274630中所描述的，以引用的方式将两者的内容全部并入本文。
点。或者，所述细胞可以是异源的，例如，由供体处取得。第二受试者可以是相同种或不同种
的。典型地，当所述细胞来自供体时，其将来自与受体足够免疫相容的供体，即不会产生移
植排斥，以减小或去除对免疫抑制的需求。在某些实施方式中，所述细胞取自异种来源
（xenogeneic source），即经遗传工程改造至与受体或受体的种足够免疫相容的非人哺乳
动物。确定免疫相容性的方法是本领域已知的，并包括评定供体-受体对于HLA与ABO决定子
的相容性的组织配型，参见例如Transplantation Immunology，Bach与Auchincloss，Eds.
（Wiley，John & Sons，Incorporated1994）。在某些实施方式中，血红细胞是重组血红细胞
或血红细胞衍生的囊泡，例如在美国专利No.7,521,174以及美国专利申请公开No.2009/
0274630中所描述的，以引用的方式将两者的内容全部并入本文。
[0072] 许多不同方法可用于将感兴趣的化合物装载或封装至RBC中。这些方法中有些具有物理性（例如，基于渗透作用和电脉冲的方法）或化学性（例如，对膜进行化学扰动）。
[0073] 最广泛用于红细胞装载的方法通常基于RBC的如下显著特性：当置于降低的渗透压条件下时（如在低渗溶液存在时），RBC体积增加。相应地，基于渗透作用的方法构成了用
于在血红细胞中封装化合物的更标准的方法。虽然不同方法之间在方法论方面存在差异，
它们全都是基于将红细胞暴露于低渗溶液时，伴有红细胞膜通透性增加的细胞膨胀。由于
红细胞在降低的渗透压条件下膜上出现孔洞，因此有利于封装物质。存在这些方法的几种
变型，例如低渗稀释、低渗预膨胀（pre-swelling）、渗透脉冲、低渗溶血、以及低渗透析，后
者为最普遍使用的方法。
于在血红细胞中封装化合物的更标准的方法。虽然不同方法之间在方法论方面存在差异，
它们全都是基于将红细胞暴露于低渗溶液时，伴有红细胞膜通透性增加的细胞膨胀。由于
红细胞在降低的渗透压条件下膜上出现孔洞，因此有利于封装物质。存在这些方法的几种
变型，例如低渗稀释、低渗预膨胀（pre-swelling）、渗透脉冲、低渗溶血、以及低渗透析，后
者为最普遍使用的方法。
[0074] 低渗溶血过程有三种可用的变型：稀释法、预膨胀稀释法和透析法。通常使用低渗透析法，因为这一方法由其过程而保留了RBC的生化特性和生理特性，并获得最高的封装百
分比。
分比。
[0075] 在低渗透析中，将具有适当红细胞比容的红细胞悬浮液置于透析袋中，在4℃下利用低渗缓冲液进行透析，重量渗透摩尔浓度（osmolalities）范围为100mosM/kg（狗红细胞
中）至200-220mosM/kg（羊红细胞中）的。一般而言，用于人红细胞的推荐重量渗透摩尔浓度
为约120mosM/kg。介质的重量渗透摩尔浓度暗含着在透析的红细胞的封装效率和最小溶血
可能之间有所折衷。待封装的化合物倾向于包含至透析袋内的红细胞悬浮液中。虽然组成
并不相同，低渗缓冲液通常包括NaH2PO4、NaHCO3、葡萄糖、还原型谷胱甘肽和ATP（pH为7.4）。
可将ATP和还原型谷胱甘肽加入透析缓冲液中以分别发挥保持细胞能量以及还原红细胞内
部环境的作用。透析时间可在20min至180min间变化。为了进行低渗透析，可使用如
C.Ropars，G.Avenard与M.Chassaigne.In：Methods in Enzymology，149卷，R.Green与
K.J.Widder，Editors，Academic Press，San Diego（1987），242-248页所描述的持续流动透
析装置。
中）至200-220mosM/kg（羊红细胞中）的。一般而言，用于人红细胞的推荐重量渗透摩尔浓度
为约120mosM/kg。介质的重量渗透摩尔浓度暗含着在透析的红细胞的封装效率和最小溶血
可能之间有所折衷。待封装的化合物倾向于包含至透析袋内的红细胞悬浮液中。虽然组成
并不相同，低渗缓冲液通常包括NaH2PO4、NaHCO3、葡萄糖、还原型谷胱甘肽和ATP（pH为7.4）。
可将ATP和还原型谷胱甘肽加入透析缓冲液中以分别发挥保持细胞能量以及还原红细胞内
部环境的作用。透析时间可在20min至180min间变化。为了进行低渗透析，可使用如
C.Ropars，G.Avenard与M.Chassaigne.In：Methods in Enzymology，149卷，R.Green与
K.J.Widder，Editors，Academic Press，San Diego（1987），242-248页所描述的持续流动透
析装置。
[0076] 随后，在37℃下将经装载的红细胞置于等渗介质中10min来进行退火过程。最后，在37℃下使用高渗缓冲液进行红细胞再密封。所述高渗缓冲液通常包含腺嘌呤、肌苷、葡萄
糖、丙酮酸盐/酯、NaH2PO4以及NaCl（pH值为7.4）。在封装过程结束时，再次将红细胞悬浮于
自体血浆中以用于后续给药。
糖、丙酮酸盐/酯、NaH2PO4以及NaCl（pH值为7.4）。在封装过程结束时，再次将红细胞悬浮于
自体血浆中以用于后续给药。
[0077] 当使用低渗透析时，几个因素可影响封装性能，即所用溶液的渗透压、透析时间、介质的pH值、温度、与红细胞接触的药物或肽的浓度等。该程序使得能够封装约40%-50%所
加入的化合物。化合物的细胞内终浓度与细胞外浓度相似。
加入的化合物。化合物的细胞内终浓度与细胞外浓度相似。
[0078] 此外，可从外部将ZnCl2加至经装载的RBC。不希望受理论约束，这将诱导带3蛋白（band3protein，RBC表面上的阴离子转运蛋白）的可逆集聚化（clusterization）。通过改变
使用的Zn2+的量，能够通过控制带3蛋白集聚的程度而对经处理的细胞的体内存活率进行调
整。
使用的Zn2+的量，能够通过控制带3蛋白集聚的程度而对经处理的细胞的体内存活率进行调
整。
[0079] 渗透脉冲法是基于渗透作用的方法的变型，该方法使用二甲亚砜（DMSO）促进物质进入红细胞。其机理为跨越红细胞膜的瞬时渗透梯度，其结果为药物被装载入红细胞。渗透
脉冲法的使用在例如R.Franco，R.Barker与M.Weiner，Adv.Biosci.(series)67（1987），63-
72页中有所描述，以引用的方式将其内容并入本文。
脉冲法的使用在例如R.Franco，R.Barker与M.Weiner，Adv.Biosci.(series)67（1987），63-
72页中有所描述，以引用的方式将其内容并入本文。
[0080] 低渗溶血的使用在例如S.Jain与N.K.Jain，Indian J.Pharm.Sci.59（1997），275-281页；G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods Enzymol.（series）149（1987），221-229页；以及G.M.Ihler，Pharmacol.Ther.20（1983），151-169页中有所描述，以引用的方式将上述文献
内容全部并入本文。
内容全部并入本文。
[0081] 低渗稀释的使用在例如D.A.Lewis与H.O.Alpar，Int.J.Pharm.22（1984），137-146页；U.Zimmermann，In：Targeted Drugs，E.P.Goldberg，Editor，John Wiley&Sons，New
York（1983），153-200页；V.Jaitely等，Indian Drugs33（1996），589-594页；S.J.Updike与R.T.Wakamiya，J.Lab.Clin.Med.101（1983），679-691页；D.A.Lewis，Pharm.J.233（1984），
384-385页；K.Adriaenssenset等，Clin.Chem.22（1976），323-326页；R.Baker，Nature215
（1967），424-425页；G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods Enzymol.（series）149（1987），
221-229页；S.J.Updike，R.T.Wakarniya与E.N.Lightfoot，Science193（1976），681-683页；
N.Talwar与N.K.Jain，Drug Devel.Ind.Pharm.18（1992），1799-1812页；E.Pitt等，
Biochem.Pharmacol.22（1983），3359-3368页；G.M.Iher，R.M.Glew与F.W.Schnure，
Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.70（1973），2663-2666页；J.R.Deloach与G.M.Ihler，
Biochim.Biophys.Acta496（1977），136-145页；以及S.Bhaskaran与S.S.Dhir，Indian
J.Pharm.Sci.57（1995），240-242页中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本
文。
York（1983），153-200页；V.Jaitely等，Indian Drugs33（1996），589-594页；S.J.Updike与R.T.Wakamiya，J.Lab.Clin.Med.101（1983），679-691页；D.A.Lewis，Pharm.J.233（1984），
384-385页；K.Adriaenssenset等，Clin.Chem.22（1976），323-326页；R.Baker，Nature215
（1967），424-425页；G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods Enzymol.（series）149（1987），
221-229页；S.J.Updike，R.T.Wakarniya与E.N.Lightfoot，Science193（1976），681-683页；
N.Talwar与N.K.Jain，Drug Devel.Ind.Pharm.18（1992），1799-1812页；E.Pitt等，
Biochem.Pharmacol.22（1983），3359-3368页；G.M.Iher，R.M.Glew与F.W.Schnure，
Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.70（1973），2663-2666页；J.R.Deloach与G.M.Ihler，
Biochim.Biophys.Acta496（1977），136-145页；以及S.Bhaskaran与S.S.Dhir，Indian
J.Pharm.Sci.57（1995），240-242页中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本
文。
[0082] 低渗透析的使用在例如U.Zimmermann，In：Targeted Drugs，E.P.Goldberg，Editor，John Wiley&Sons，New York（1983），153-200页；V.Jaitely等，Indian Drugs33
（1996），589-594页；H.G.Erchler等，Clin.Pharmacol.Ther.40（1986），300-303页；
G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods Enzymol.（series）149（1987），221-229页；U.Benatti
等，Adv.Biosci.（series）67（1987），129-136页；R.Kravtozoff等，J.Pharm.Pharmacol.42
（1990），473-476页；J.D.Berman，Adv.Biosci.（series）67（1987），145-152页；J.R.Deloach等，Adv.Biosci.（series）67（1987），183-190页；J.R.Deloach与G.M.Ihler，
Biochim.Biophys.Acta496（1977），136-145页；M.Jrade等，Adv.Biosci.（series）67
（1987），29-36页；A.Zanella等，Adv.Biosci.（series）67（1987），17-27页；G.Fiorelli等，Adv.Biosci.（series）67（1987），47-54页；以及M.I.Garin等，Pharm.Res.13（1996），869-
874页中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
（1996），589-594页；H.G.Erchler等，Clin.Pharmacol.Ther.40（1986），300-303页；
G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods Enzymol.（series）149（1987），221-229页；U.Benatti
等，Adv.Biosci.（series）67（1987），129-136页；R.Kravtozoff等，J.Pharm.Pharmacol.42
（1990），473-476页；J.D.Berman，Adv.Biosci.（series）67（1987），145-152页；J.R.Deloach等，Adv.Biosci.（series）67（1987），183-190页；J.R.Deloach与G.M.Ihler，
Biochim.Biophys.Acta496（1977），136-145页；M.Jrade等，Adv.Biosci.（series）67
（1987），29-36页；A.Zanella等，Adv.Biosci.（series）67（1987），17-27页；G.Fiorelli等，Adv.Biosci.（series）67（1987），47-54页；以及M.I.Garin等，Pharm.Res.13（1996），869-
874页中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
[0083] 低渗预膨胀的使用在例如V.Jaitely等，Indian Drugs33（1996），589-594页；S.Jain与N.K.Jain，Indian J.Pharm.Sci.59（1997），275-281页；H.O.Alpar与W.J.Irwin，
Adv.Biosci.（series）67（1987），1-9页；N.Talwar与N.K.Jain，J.Control.Release20
（1992），133-142页；D.J.Jenner等，Br.J.Pharmacol.73（1981），212P-213P页；H.O.Alpar与D.A.Lewis，Biochem.Pharmacol.34（1985），257-261页；G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods
Enzymol.（series）149（1987），221-229页；E.Pitt，D.A.Lewis与R.Offord，
Biochem.Pharmacol.132（1983），3355-3358页；N.Talwar与N.K.Jain，Drug
Devel.Ind.Pharm.18（1992），1799-1812页；E.Pitt等，Biochem.Pharmacol.22（1983），
3359-3368页；S.Jain，S.K.Jain与V.K.Dixit，Drug Devel.Ind.Pharm.23（1997），999-1006
页；H.Tajerzadeh与M.Hamidi，Drug Devel.Ind.Pharm.26（2000），1247-1257页；M.Hamidi
等，Drug Deliv.8（2001），231-237页；以及J.Bird，R.Best与D.A.Lewis，
J.Pharm.Pharmacol.35（1983），246-247页中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部
并入本文。
Adv.Biosci.（series）67（1987），1-9页；N.Talwar与N.K.Jain，J.Control.Release20
（1992），133-142页；D.J.Jenner等，Br.J.Pharmacol.73（1981），212P-213P页；H.O.Alpar与D.A.Lewis，Biochem.Pharmacol.34（1985），257-261页；G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods
Enzymol.（series）149（1987），221-229页；E.Pitt，D.A.Lewis与R.Offord，
Biochem.Pharmacol.132（1983），3355-3358页；N.Talwar与N.K.Jain，Drug
Devel.Ind.Pharm.18（1992），1799-1812页；E.Pitt等，Biochem.Pharmacol.22（1983），
3359-3368页；S.Jain，S.K.Jain与V.K.Dixit，Drug Devel.Ind.Pharm.23（1997），999-1006
页；H.Tajerzadeh与M.Hamidi，Drug Devel.Ind.Pharm.26（2000），1247-1257页；M.Hamidi
等，Drug Deliv.8（2001），231-237页；以及J.Bird，R.Best与D.A.Lewis，
J.Pharm.Pharmacol.35（1983），246-247页中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部
并入本文。
[0084] 还可通过将细胞暴露至膜活性药物（如伯氨喹（primaquine）、氢化可的松、长春碱（vinblastine）和氯丙嗪）来将化合物封装入血红细胞，已知所述膜活性药物在细胞膜中诱
导口型红细胞（stomatocyte）形成。化学扰动的使用在例如U.Zimmermann，In：Targeted
Drugs，E.P.Goldberg，Editor，John Wiley&Sons，New York（1983），153-200页；J.Connor与A.J.Schroit，Adv.Biosci.（series）67（1987），163-171页；I.Ben-Bassat，K.G.Bensch与
S.L.Schrier，J.Clin.Invest.51（1972），1833-1844页；L.M.Matovcik，I.G.Junga与
S.L.Schrier，Drug-induced endocytosis of neonatal erythrocytes.Blood65（1985），
1056-1063页；S.L.Schrier，A.Zachowski与P.F.Devaux，Blood79（1992），782-786页；以及
M.Tonetti等，Eur.J.Cancer27（1991），947-948页中有所描述，以引用的方式将上述文献内
容全部并入本文。
导口型红细胞（stomatocyte）形成。化学扰动的使用在例如U.Zimmermann，In：Targeted
Drugs，E.P.Goldberg，Editor，John Wiley&Sons，New York（1983），153-200页；J.Connor与A.J.Schroit，Adv.Biosci.（series）67（1987），163-171页；I.Ben-Bassat，K.G.Bensch与
S.L.Schrier，J.Clin.Invest.51（1972），1833-1844页；L.M.Matovcik，I.G.Junga与
S.L.Schrier，Drug-induced endocytosis of neonatal erythrocytes.Blood65（1985），
1056-1063页；S.L.Schrier，A.Zachowski与P.F.Devaux，Blood79（1992），782-786页；以及
M.Tonetti等，Eur.J.Cancer27（1991），947-948页中有所描述，以引用的方式将上述文献内
容全部并入本文。
[0085] 电穿孔法基于如下内容：通过将细胞暴露至强外部电场而在血红细胞膜上诱导裂孔。这些裂孔能允许不同尺寸的化合物进入。这一封装方法是其它通常使用的技术的良好
替代方法，并已经用于封装酶（例如乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶）和药物（例如双氯芬酸钠）。
电穿孔稀释的使用在例如D.A.Lewis与H.O.Alpar，Int.J.Pharm.22（1984），137-146页；
U.Zimmermann，In：Targeted Drugs，E.P.Goldberg，Editor，John Wiley&Sons，New York
（1983），153-200页；V.Jaitely等，Indian Drugs33（1996），589-594页；D.A.Lewis，
Pharm.J.233（1984），384-385页；K.Kinosita与T.Y.Tsong，Nature272（1978），258-260页；
S.Jain，S.K.Jain与V.K.Dixit，Indian Drugs32（1995），471-476页；C.A.Kruse等，
Adv.Biosci.（series）67（1987），137-144页；U.Zimmermann，F.Riemann与G.Pilwat，
Biochim.Biophys.Acta436（1976），460-474页；D.H.Mitchell，G.T.James与C.A.Kruse，
Biotechnol.Appl.Biochem.12（1990）（3），264-275页；T.Y.Tsong，Biophys.J.60（1991），
297-306页；C.Lizano等，Biochim.Biophys.Acta1425（1998），328-336页；C.Lizano，
M.T.Perez与M.Pinilla，Life Sci.68（2001），2001-2016页；Q.Dong与W.Jin，
Electrophoresis2213（2001），2786-2792页；M.Haritou等，Clin.Hemorheol.Microcirc.19
（1988），205-217页；以及P.C.Mangal与A.Kaur，Indian J.Biochem.Biophys.28（1991），
219-221页中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
替代方法，并已经用于封装酶（例如乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶）和药物（例如双氯芬酸钠）。
电穿孔稀释的使用在例如D.A.Lewis与H.O.Alpar，Int.J.Pharm.22（1984），137-146页；
U.Zimmermann，In：Targeted Drugs，E.P.Goldberg，Editor，John Wiley&Sons，New York
（1983），153-200页；V.Jaitely等，Indian Drugs33（1996），589-594页；D.A.Lewis，
Pharm.J.233（1984），384-385页；K.Kinosita与T.Y.Tsong，Nature272（1978），258-260页；
S.Jain，S.K.Jain与V.K.Dixit，Indian Drugs32（1995），471-476页；C.A.Kruse等，
Adv.Biosci.（series）67（1987），137-144页；U.Zimmermann，F.Riemann与G.Pilwat，
Biochim.Biophys.Acta436（1976），460-474页；D.H.Mitchell，G.T.James与C.A.Kruse，
Biotechnol.Appl.Biochem.12（1990）（3），264-275页；T.Y.Tsong，Biophys.J.60（1991），
297-306页；C.Lizano等，Biochim.Biophys.Acta1425（1998），328-336页；C.Lizano，
M.T.Perez与M.Pinilla，Life Sci.68（2001），2001-2016页；Q.Dong与W.Jin，
Electrophoresis2213（2001），2786-2792页；M.Haritou等，Clin.Hemorheol.Microcirc.19
（1988），205-217页；以及P.C.Mangal与A.Kaur，Indian J.Biochem.Biophys.28（1991），
219-221页中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
[0086] 用于将感兴趣的化合物封装入RBC的方法还在例如L.Rossi，S.Serafini与M.Magnani，In：M.Magnani，Editor，Erythrocytes Engineering for Drug Delivery and
Targeting，M.Magnani，Editor，Kluwer Academic/Plenum Publishers，New York（2003），
1-18页；C.Lizano，M.T.Perez与M.Pinilla，Life Sci.68（2001），2001-2016页；R.S.Franco
等，Transfusion30（1990），196-200页；M.Ihler，Bibl.Haematol.51（1985），127-133页；
G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods Enzymol.（series）149（1987），221-229页；
S.E.Mulholland等，Pharm.Res.16（1999）（4），514-518页；以及L.A.Lotero，G.Olmos与
J.C.Diez，Biochim.Biophys.Acta1620（2003）（1-3），160-166页中有所描述，以引用的方式
将上述文献内容全部并入本文。
Targeting，M.Magnani，Editor，Kluwer Academic/Plenum Publishers，New York（2003），
1-18页；C.Lizano，M.T.Perez与M.Pinilla，Life Sci.68（2001），2001-2016页；R.S.Franco
等，Transfusion30（1990），196-200页；M.Ihler，Bibl.Haematol.51（1985），127-133页；
G.M.Ihler与H.C.W.Tsong，Methods Enzymol.（series）149（1987），221-229页；
S.E.Mulholland等，Pharm.Res.16（1999）（4），514-518页；以及L.A.Lotero，G.Olmos与
J.C.Diez，Biochim.Biophys.Acta1620（2003）（1-3），160-166页中有所描述，以引用的方式
将上述文献内容全部并入本文。
[0087] 已将许多活性物质封装入RBC。参见例如M.Magnan等，Drug Deliv.2（1995），57-61页；U.Benatti等，Biochem.Biophys.Res.Commun.220（1996），20-25页；A.Fraternale，
L.Rossi and M.Magnani，Biochem.Biophys.Acta1291（1996），149-154页；L.Rossi等，AIDS
Res .Hum .Retroviruses15（1999），345-353页；M.Magnani等，
Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.93（1996），4403-4408页；L.Rossi等，AIDS
Res.Hum.Retroviruses14（1998），435-444页；L.Rossi等，J.Antimicrob.Chemother.47
（2001），819-827页；P.Franchetti等，Antivir.Chem.Chemother.12（2001），151-159页；
P.Franchetti等，Antivir.Res.47（2000），149-158页；M.D’Ascenzo等，In：Erythrocytes
as Drug Carriers in Medicine，U.Sprandel与J.L.Way，Editors，Plenum Press，New
York（1997），81-88页；R.Crinelli等，Blood Cells Mol.Diseases26（2000），211-222页；
L.Rossi等，Biotechnol.Appl.Biochem.33（2001），85-89页；L.Rossi等，Blood Cells
Mol.Diseases33（2004），57-63页；R.Kravtzoff等，In：Advances in the Biosciences，
R.Green and J.R.De Loach，Editors，Pergamon Press，Oxford（1991），127-137页；
M.Magnani等，Biotechnol.Appl.Biochem.18（1993），217-226页；M.Magnani等，Alcohol
Clin.Exp.Res.13（1989），849页；L.Rossi等，In：Resealed Erythrocytes as Carriers
and Bioreactors，R.Green and J.R.De Loach，Editors，Pergamon Press，Oxford（1991），
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Chastellier，T.Lang and L.Thilo，Eur.J.Cell.Biol.68（1995），167-182页；A.Antonell
等，Br.J.Haematol.104（1999），475-481页；A.Fraternale等，Antivir.Res.56（2002），263-
272页；A.T.Palamara等，AIDS Res.Hum.Retroviruses12（1996），1373-1381页；
A.Fraternale等，J.Antimicrob.Chemother.52（2003），551-554页；R.Buhl等，Lancet2
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212页；M.Egholm等，Nature365（1993），566-568页；P.Wittung等，FEBS Lett.365（1995），
27-29页；L.Chiarantini等，Biochemistry41（2002），8471-8477页；以及H.Arima等，
J.Pharm.Sci.86（1997），1079-1084页，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。在这
些引用文献的大多数中，所述药物作为非扩散性前药封装，所述前药通过RBC驻留酶
（resident enzyme）转化为扩散性药物并释放进入循环。或者，所述药物维持在RBC中直至
这些RBC被巨噬细胞靶向并吞噬，此时其内含物得以释放。在某些情况下，将RBC用作降解代
谢物或外源物（xenobiotics）的循环生物反应器。这种情况下，将酶封装入RBC，其中只要细
胞循环，所述酶就在RBC中保持其催化活性。在能穿过RBC膜的代谢物和/或外源物接触细胞
内的酶时，这些修饰的RBC能够起到循环生物反应器的作用。
L.Rossi and M.Magnani，Biochem.Biophys.Acta1291（1996），149-154页；L.Rossi等，AIDS
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L.Rossi等，Biotechnol.Appl.Biochem.33（2001），85-89页；L.Rossi等，Blood Cells
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Clin.Exp.Res.13（1989），849页；L.Rossi等，In：Resealed Erythrocytes as Carriers
and Bioreactors，R.Green and J.R.De Loach，Editors，Pergamon Press，Oxford（1991），
169-179页；L.Rossi等，J.Antimicrob.Chemother.53（2004），863-866页；C.De
Chastellier，T.Lang and L.Thilo，Eur.J.Cell.Biol.68（1995），167-182页；A.Antonell
等，Br.J.Haematol.104（1999），475-481页；A.Fraternale等，Antivir.Res.56（2002），263-
272页；A.T.Palamara等，AIDS Res.Hum.Retroviruses12（1996），1373-1381页；
A.Fraternale等，J.Antimicrob.Chemother.52（2003），551-554页；R.Buhl等，Lancet2
（1989），1294-1298页；F.J.Staal等，AIDS Res.Hum.Retroviruses8（1992），305-311页；
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（1992），1090-1096页；A.T.Palamara等，Antivir.Res.27（1995），237-253页；A.T.Palamara等，AIDS Res.Hum.Retroviruses12（1996），1537-1541页；M.Magnani等，AIDS
Res.Hum.Retroviruses13（1997），1093-1099页；Y.Murata等，Int.Immunol.14（2002），201-
212页；M.Egholm等，Nature365（1993），566-568页；P.Wittung等，FEBS Lett.365（1995），
27-29页；L.Chiarantini等，Biochemistry41（2002），8471-8477页；以及H.Arima等，
J.Pharm.Sci.86（1997），1079-1084页，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。在这
些引用文献的大多数中，所述药物作为非扩散性前药封装，所述前药通过RBC驻留酶
（resident enzyme）转化为扩散性药物并释放进入循环。或者，所述药物维持在RBC中直至
这些RBC被巨噬细胞靶向并吞噬，此时其内含物得以释放。在某些情况下，将RBC用作降解代
谢物或外源物（xenobiotics）的循环生物反应器。这种情况下，将酶封装入RBC，其中只要细
胞循环，所述酶就在RBC中保持其催化活性。在能穿过RBC膜的代谢物和/或外源物接触细胞
内的酶时，这些修饰的RBC能够起到循环生物反应器的作用。
[0088] 除了与感兴趣的化合物（例如治疗剂和/或显像剂）结合以外，许多物质实体（entities）（例如配体）也能与血红细胞结合。这些配体可利用本领域已知的方法附着于血
红细胞膜上。例如，可利用非特异性化学交联接头（如鞣酸和氯化铬）将配体结合至RBC。参
见例如V.R.Muzykantov等，Anal Biochem.（1993）208:338-342；V.R.Muzykantov等，Am J
Pathol.（1987）128：276-285；以及L.Chiarantini等，Biotechnol Appl Biochem.（1992），
15：171-184，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。或者，可利用用于将限定的反应
性基团结合至RBC膜上的特异性交联接头将配体结合至RBC。特别地，在许多体外和体内应
用中，利用生物素的NHS酯进行的RBC赖氨酸残基的受控生物素化是将物质（cargoes）缀合
（conjugation）至RBC表面最普遍的手段之一。用于将分子连接至RBC的特异性交联接头的
使用在例如G.A.Orr GA，J Biol Chem.（1981）256：761-766；W.Godfrey等，Exp Cell Res.
（1981）135：137-145；E.Roffman等，Biochem Biophys Res Commun.（1986）136：80-85；
E.A.Bayer等，Anal Biochem.（1987）161：262-271；M.Wilchek等，Biochem Biophys Res
Commun.（1986）138：872-879；G.P.Samokhin等，FEBS Lett.（1983）154：257-261；
V.R.Muzykantov等，J Immunol Methods.（1993）158：183-190；M.D.Smirnov等，Biochem
Biophys Res Commun.（1983）116：99-105；V.R.Muzykantov等，FEBS Lett.（1985）182：62-
66；M.Magnani等，Biotechnol Appl Biochem.（994）20（Pt3）：335-345；V.R.Muzykantov等，Anal Biochem.（1994）223：142-148；以及H.Cowley等，Transfusion（1999）39：163-168中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
红细胞膜上。例如，可利用非特异性化学交联接头（如鞣酸和氯化铬）将配体结合至RBC。参
见例如V.R.Muzykantov等，Anal Biochem.（1993）208:338-342；V.R.Muzykantov等，Am J
Pathol.（1987）128：276-285；以及L.Chiarantini等，Biotechnol Appl Biochem.（1992），
15：171-184，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。或者，可利用用于将限定的反应
性基团结合至RBC膜上的特异性交联接头将配体结合至RBC。特别地，在许多体外和体内应
用中，利用生物素的NHS酯进行的RBC赖氨酸残基的受控生物素化是将物质（cargoes）缀合
（conjugation）至RBC表面最普遍的手段之一。用于将分子连接至RBC的特异性交联接头的
使用在例如G.A.Orr GA，J Biol Chem.（1981）256：761-766；W.Godfrey等，Exp Cell Res.
（1981）135：137-145；E.Roffman等，Biochem Biophys Res Commun.（1986）136：80-85；
E.A.Bayer等，Anal Biochem.（1987）161：262-271；M.Wilchek等，Biochem Biophys Res
Commun.（1986）138：872-879；G.P.Samokhin等，FEBS Lett.（1983）154：257-261；
V.R.Muzykantov等，J Immunol Methods.（1993）158：183-190；M.D.Smirnov等，Biochem
Biophys Res Commun.（1983）116：99-105；V.R.Muzykantov等，FEBS Lett.（1985）182：62-
66；M.Magnani等，Biotechnol Appl Biochem.（994）20（Pt3）：335-345；V.R.Muzykantov等，Anal Biochem.（1994）223：142-148；以及H.Cowley等，Transfusion（1999）39：163-168中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
[0089] 缀合高度亲水性的链长范围在MW3-10kD内的聚乙二醇（PEG）已经成为通用的“秘密”技术，该技术延长循环，并对体内防御系统掩蔽脂质体、纳米粒子、聚合物纳米载体、蛋
白质、其它药物载体以及药物本身。相应地，本文描述的血红细胞可以PEG化。不希望受理论
约束，包覆有PEG的RBC经受调理作用、被吞噬细胞吞噬和被抗RBC抗原的抗体识别的效果下
降。将PEG结合至RBC的方法在本领域是熟知的，并在例如A.J.Bradley等，Transfusion41
（2001）1225-1233页；D.Sabolovic等，Electrophoresis21（2000）301-306页；P.Nacharaju
等，Transfusion45（2005）374-383页；P.Nacharaju等，Artif Cells Blood Substit
Immobil Biotechnol35（2007）107-118页；H.A.Chung等，J Biomed Mater Res A70（2004）
179-185页；M.D.Scott等，Proc Natl Acad Sci USA94（1997）7566-7571页；J.K.Leach，
A.Hinman与E.A.O’Rear，Biomed Sci Instrum38（2002）333-338页；以及S.Hashemi-
Najafabadi等，Bioconjug Chem17（2006）1288-1293页中有所描述，以引用的方式将上述文
献内容全部并入本文。还可通过Pluronic修饰RBC，Pluronic是亲水性较弱部分的末端结合
两条PEG链的三嵌段共聚物，这在J.K.Armstrong等，Biorheology38（2001）239-247页中有
所描述，以引用的方式将其内容并入本文。
白质、其它药物载体以及药物本身。相应地，本文描述的血红细胞可以PEG化。不希望受理论
约束，包覆有PEG的RBC经受调理作用、被吞噬细胞吞噬和被抗RBC抗原的抗体识别的效果下
降。将PEG结合至RBC的方法在本领域是熟知的，并在例如A.J.Bradley等，Transfusion41
（2001）1225-1233页；D.Sabolovic等，Electrophoresis21（2000）301-306页；P.Nacharaju
等，Transfusion45（2005）374-383页；P.Nacharaju等，Artif Cells Blood Substit
Immobil Biotechnol35（2007）107-118页；H.A.Chung等，J Biomed Mater Res A70（2004）
179-185页；M.D.Scott等，Proc Natl Acad Sci USA94（1997）7566-7571页；J.K.Leach，
A.Hinman与E.A.O’Rear，Biomed Sci Instrum38（2002）333-338页；以及S.Hashemi-
Najafabadi等，Bioconjug Chem17（2006）1288-1293页中有所描述，以引用的方式将上述文
献内容全部并入本文。还可通过Pluronic修饰RBC，Pluronic是亲水性较弱部分的末端结合
两条PEG链的三嵌段共聚物，这在J.K.Armstrong等，Biorheology38（2001）239-247页中有
所描述，以引用的方式将其内容并入本文。
[0090] 在某些实施方式中，RBC包含至少一种治疗剂和至少一种显像剂。
[0091] 微胶囊
[0092] 还可将感兴趣的化合物（例如治疗剂和/或显像剂）封装入微胶囊，以递送至狭窄位点。相应地，在一方面，本发明提供一种用于对受试者中的狭窄、狭窄病变、血液凝块、阻
塞病变、和/或内出血进行治疗或成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予微胶
囊，其中所述微胶囊包含治疗剂和/或显像剂。不希望受理论限制，所述微胶囊在狭窄位点
处升高的切应力下分裂并释放感兴趣的化合物（例如，治疗剂或显像剂）。
塞病变、和/或内出血进行治疗或成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予微胶
囊，其中所述微胶囊包含治疗剂和/或显像剂。不希望受理论限制，所述微胶囊在狭窄位点
处升高的切应力下分裂并释放感兴趣的化合物（例如，治疗剂或显像剂）。
[0093] 本文所使用的术语“微胶囊”指的是球体、立方体、多面体、棱柱、圆柱、棒状、盘状或其它几何形状或不规则形状的结构，其尺寸范围为约1微米至约5,000微米的数量级，该
结构由包围位于壳内的封装介质（例如感兴趣的化合物）的不同聚合物壳（作为成壁材料）
组成。这一术语与微球不同，微球是由分散于聚合物中的感兴趣的化合物的球形均匀颗粒
构成，并在严格意义上是球形中空粒子。
结构由包围位于壳内的封装介质（例如感兴趣的化合物）的不同聚合物壳（作为成壁材料）
组成。这一术语与微球不同，微球是由分散于聚合物中的感兴趣的化合物的球形均匀颗粒
构成，并在严格意义上是球形中空粒子。
[0094] 微胶囊可以是单层微胶囊或多层微胶囊。本文所使用的术语“单层微胶囊”是指由单层聚合物壳及封装化合物（位于壳内微胶囊中心）构成的微胶囊。术语“多层微胶囊”是指
由内核微胶囊和一层或多层外部聚合物壳构成的微胶囊。术语“双层微胶囊”是指由包覆有
第二聚合物壳的内核微胶囊构成的微胶囊。在微封装过程中，将核微胶囊引入聚合物-塑化
剂（plasticizer）溶液或聚合物-矿物质分散液中，并促进形成“胚胎”壳，所述胚胎壳转变
为双层微胶囊的结构性固体壳。
由内核微胶囊和一层或多层外部聚合物壳构成的微胶囊。术语“双层微胶囊”是指由包覆有
第二聚合物壳的内核微胶囊构成的微胶囊。在微封装过程中，将核微胶囊引入聚合物-塑化
剂（plasticizer）溶液或聚合物-矿物质分散液中，并促进形成“胚胎”壳，所述胚胎壳转变
为双层微胶囊的结构性固体壳。
[0095] 本文所使用的术语“内核微胶囊”是指位于双层或多层微胶囊内部的如上文定义的单层微胶囊。
[0097] 在某些实施方式中，所述成壁聚合物是泊洛沙姆。泊洛沙姆是非离子三嵌段共聚物，其由中部的聚氧丙烯（聚(环氧丙烷)）疏水链以及两侧的两条聚氧乙烯（聚(环氧乙烷)）
亲水链组成。泊洛沙姆以商品名Pluronic或Pluronics而为人所知。由于聚合物嵌段长度可
以定制，存在许多性质略有差别的不同泊洛沙姆。对于通用术语“泊洛沙姆”，这些共聚物通
常以字母“P”（表示泊洛沙姆）加上之后的三位数字命名，前两位数字×100给出聚氧丙烯核
的近似分子量，最后一位数字×10给出聚氧乙烯含量的百分比（例如，P407=聚氧丙烯分子
量为4,000g/mol、聚氧乙烯含量为70%的泊洛沙姆）。对于商品名Pluronic，这些共聚物的命
名以定义其室温下物理形态的字母起始（L=液体、P=糊状物（paste）、F=薄片（flake）（固
体））并在之后加上两位或三位数字，数字标号的首位（三位数字则为前两位）乘以300表示
疏水链段的近似分子量；最后一位数字×10给出聚氧乙烯含量的百分比（例如，L61=聚氧丙
烯分子量为1,800g/mol、聚氧乙烯含量为10%的Pluronic）。在某些实施方式中，所述泊洛沙
姆是Pluronic F127。
亲水链组成。泊洛沙姆以商品名Pluronic或Pluronics而为人所知。由于聚合物嵌段长度可
以定制，存在许多性质略有差别的不同泊洛沙姆。对于通用术语“泊洛沙姆”，这些共聚物通
常以字母“P”（表示泊洛沙姆）加上之后的三位数字命名，前两位数字×100给出聚氧丙烯核
的近似分子量，最后一位数字×10给出聚氧乙烯含量的百分比（例如，P407=聚氧丙烯分子
量为4,000g/mol、聚氧乙烯含量为70%的泊洛沙姆）。对于商品名Pluronic，这些共聚物的命
名以定义其室温下物理形态的字母起始（L=液体、P=糊状物（paste）、F=薄片（flake）（固
体））并在之后加上两位或三位数字，数字标号的首位（三位数字则为前两位）乘以300表示
疏水链段的近似分子量；最后一位数字×10给出聚氧乙烯含量的百分比（例如，L61=聚氧丙
烯分子量为1,800g/mol、聚氧乙烯含量为10%的Pluronic）。在某些实施方式中，所述泊洛沙
姆是Pluronic F127。
[0098] 本文所使用的术语“聚合物壳”是指含有成壁聚合物并任选地含有其它成分（如塑化剂和/或矿物质）的聚合物层。
[0099] 根据所封装的物质的性质以及所使用的成壁聚合物的类型，存在多种可用于形成微胶囊的技术。用于将不溶于水的物质（如某些维生素、药物和油）封装入不溶于水的聚合
物的广泛使用的方法是溶剂去除法（solvent removal method）。通常在这一方法中，将所
需的成壁聚合物溶于适当的有机溶剂中。这一操作后加入待封装的所需化合物。将这一化
合物溶解或分散于所述有机溶剂中。将所得到的有机溶液或分散液分散于水相中，以获得
油质微粒子分散于水相中的水包油型乳状液。在完成从微粒子中除去溶剂的步骤后，形成
微胶囊。对于这一方法，基本先决条件是使用能同时有效溶解待封装的化合物和成壁材料
的溶剂。这一溶剂必须仅部分可溶于水，产生有机相处于连续水相中的乳状液。由于能促进
微封装过程，含氯溶剂（如二氯甲烷和氯仿）以及乙二醇或它们与其它溶剂的混合物已被广
泛使用。
物的广泛使用的方法是溶剂去除法（solvent removal method）。通常在这一方法中，将所
需的成壁聚合物溶于适当的有机溶剂中。这一操作后加入待封装的所需化合物。将这一化
合物溶解或分散于所述有机溶剂中。将所得到的有机溶液或分散液分散于水相中，以获得
油质微粒子分散于水相中的水包油型乳状液。在完成从微粒子中除去溶剂的步骤后，形成
微胶囊。对于这一方法，基本先决条件是使用能同时有效溶解待封装的化合物和成壁材料
的溶剂。这一溶剂必须仅部分可溶于水，产生有机相处于连续水相中的乳状液。由于能促进
微封装过程，含氯溶剂（如二氯甲烷和氯仿）以及乙二醇或它们与其它溶剂的混合物已被广
泛使用。
[0101] 用于形成微胶囊的方法在例如美国专利No.3,173,878；No.3,460,972；No.3,516,941；No.4,089,802；No.4,093,556；No.4,105,823；No.4,140,516；No.4,157,983；No.4,
219,604；No.4,219,631；No.4,221,710；No.4,272,282；No.4,534,783；No.4,557,755；
No.4,574,110；No.4,601,863；No.4,711,749；No.4,753,759；No.4,898,696；No.4,936,
916；No.4,956,129；No.4,957,666；No.5,011,634；No.5,061,410；No.5,160,529；No.5,
204,185；No.5,236,782；No.5,401,577；No.5,529,877；No.5,603,986；No.5,650,173；
No.5,654,008；No.5,733,561；No.5,837,653；No.5,861,360；No.5,86,9424；No.6,099,
864；No.6,197,789；No.6,248,364；No.6,251,920；No.6,270,836；No.6,524,763；No.6,
534,091；No.6,733,790；No.6,818,296；No.6,951,836；No.6,969,530；No.6,974,592；
No.7,041,277；No.7,736,695；No.7,803,422；No.7,833,640；以及No.7,897,555，与美国专
利公开No.2003/0118822；No.2004/0115280；No.2004/0170693；No.2006/0040844；
No.2007/0042184；No.2006/0256423；No.2009/0289216；以及No.2010/0009893中有所描
述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。用于制备多壁微球的方法在例如美国专
利No.3,429,827；No.4,861,627；No.5,795,570；No.5,985,354；No.6,511,749；以及No.6,
528,035，与美国专利申请公开No.2003/0222378中有所描述，以引用的方式将上述文献内
容全部并入本文。
219,604；No.4,219,631；No.4,221,710；No.4,272,282；No.4,534,783；No.4,557,755；
No.4,574,110；No.4,601,863；No.4,711,749；No.4,753,759；No.4,898,696；No.4,936,
916；No.4,956,129；No.4,957,666；No.5,011,634；No.5,061,410；No.5,160,529；No.5,
204,185；No.5,236,782；No.5,401,577；No.5,529,877；No.5,603,986；No.5,650,173；
No.5,654,008；No.5,733,561；No.5,837,653；No.5,861,360；No.5,86,9424；No.6,099,
864；No.6,197,789；No.6,248,364；No.6,251,920；No.6,270,836；No.6,524,763；No.6,
534,091；No.6,733,790；No.6,818,296；No.6,951,836；No.6,969,530；No.6,974,592；
No.7,041,277；No.7,736,695；No.7,803,422；No.7,833,640；以及No.7,897,555，与美国专
利公开No.2003/0118822；No.2004/0115280；No.2004/0170693；No.2006/0040844；
No.2007/0042184；No.2006/0256423；No.2009/0289216；以及No.2010/0009893中有所描
述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。用于制备多壁微球的方法在例如美国专
利No.3,429,827；No.4,861,627；No.5,795,570；No.5,985,354；No.6,511,749；以及No.6,
528,035，与美国专利申请公开No.2003/0222378中有所描述，以引用的方式将上述文献内
容全部并入本文。
[0102] 本文所述的微胶囊能分裂时所经受的切应力为5dyn/cm2至3000dyn/cm2。在某些实施方式中，本文所述的微胶囊分裂时所经受的切应力为≥5dyn/cm2、≥6dyn/cm2、≥7dyn/
cm2、≥8dyn/cm2、≥9dyn/cm2、≥10dyn/cm2、≥11dyn/cm2、≥12dyn/cm2、≥13dyn/cm2、≥
2 2 2
14dyn/cm、≥15dyn/cm，或≥20dyn/cm。
cm2、≥8dyn/cm2、≥9dyn/cm2、≥10dyn/cm2、≥11dyn/cm2、≥12dyn/cm2、≥13dyn/cm2、≥
2 2 2
14dyn/cm、≥15dyn/cm，或≥20dyn/cm。
[0103] 本文所使用的“分裂”是指微胶囊的聚合物壳破碎为小片。将理解的是不要求聚合物壳完全解体。相应地，在某些实施方式中，与对照切变条件（例如，正常血管切应力）相比，
微胶囊可在切应力条件（例如，狭窄位点切应力）下以如下方式分裂：使聚合物壳的至少5%、
至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、或100%（即完全解体）破碎为小片。
微胶囊可在切应力条件（例如，狭窄位点切应力）下以如下方式分裂：使聚合物壳的至少5%、
至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、或100%（即完全解体）破碎为小片。
[0104] 与未升高的切应力（即，正常血管切应力）下的释放相比，在升高的切应力下，所封装的化合物由微胶囊中的释放速率为至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少
60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少1倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、或至少100倍或更高。
60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少1倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、或至少100倍或更高。
[0105] 在某些实施方式中，与对照切变条件（如，正常血管切应力）相比，在切应力条件下（例如，狭窄位点切应力），所封装的化合物由微胶囊中的释放量为至少10%、至少20%、至少
30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少1倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、或至少100倍或更高。
30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少1倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、或至少100倍或更高。
[0106] 示例性的可用于本发明的微胶囊包括在例如美国专利No.3,173,878；No.3,429,827；No.3,460,972；No.3,516,941；No.4,089,802；No.4,093,556；No.4,105,823；No.4,
140,516；No.4,157,983；No.4,219,604；No.4,219,631；No.4,221,710；No.4,272,282；
No.4,534,783；No.4,557,755；No.4,574,110；No.4,601,863；No.4,711,749；No.4,753,
759；No.4,861,627；No.4,898,696；No.4,936,916；No.4,956,129；No.4,957,666；No.5,
011,634；No.5,061,410；No.5,160,529；No.5,204,185；No.5,236,782；No.5,401,577；
No.5,529,877；No.5,603,986；No.5,650,173；No.5,654,008；No.5,733,561；No.5,795,
570；No.5,837,653；No.5,861,360；No.5,86,9424；No.5,985,354；No.6,099,864；No.6,
197,789；No.6,248,364；No.6,251,920；No.6,270,836；No.6,511,749；No.6,524,763；
No.6,528,035；No.6,534,091；No.6,733,790；No.6,818,296；No.6,951,836；No.6,969,
530；No.6,974,592；No.7,041,277；No.7,736,695；No.7,803,422；No.7,833,640；以及
No.7,897,555，与美国专利公开No.2003/0118822；No.2003/0222378；No.2004/0115280；
No.2004/0170693；No.2006/0040844；No.2007/0042184；No.2006/0256423；No.2009/
0289216；以及No.2010/0009893中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
140,516；No.4,157,983；No.4,219,604；No.4,219,631；No.4,221,710；No.4,272,282；
No.4,534,783；No.4,557,755；No.4,574,110；No.4,601,863；No.4,711,749；No.4,753,
759；No.4,861,627；No.4,898,696；No.4,936,916；No.4,956,129；No.4,957,666；No.5,
011,634；No.5,061,410；No.5,160,529；No.5,204,185；No.5,236,782；No.5,401,577；
No.5,529,877；No.5,603,986；No.5,650,173；No.5,654,008；No.5,733,561；No.5,795,
570；No.5,837,653；No.5,861,360；No.5,86,9424；No.5,985,354；No.6,099,864；No.6,
197,789；No.6,248,364；No.6,251,920；No.6,270,836；No.6,511,749；No.6,524,763；
No.6,528,035；No.6,534,091；No.6,733,790；No.6,818,296；No.6,951,836；No.6,969,
530；No.6,974,592；No.7,041,277；No.7,736,695；No.7,803,422；No.7,833,640；以及
No.7,897,555，与美国专利公开No.2003/0118822；No.2003/0222378；No.2004/0115280；
No.2004/0170693；No.2006/0040844；No.2007/0042184；No.2006/0256423；No.2009/
0289216；以及No.2010/0009893中有所描述，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
[0107] 在某些实施方式中，微胶囊包含至少一种治疗剂和至少一种显像剂。
[0108] 感兴趣的化合物
[0109] 许多化合物可与聚集体、血红细胞和微胶囊结合。相应地，不受限制地，感兴趣的化合物可选自于由以下化合物所组成的组：有机或无机小分子或大分子、单糖、二糖、三糖、
寡糖、多糖、生物大分子，例如，肽、蛋白质、肽类似物及它们的衍生物、肽模拟物
（peptidomimetics）、核酸、核酸类似物及衍生物、多核苷酸、寡核苷酸、酶、由生物材料（如细菌、植物、真菌、或动物细胞或组织）制备而得的提取物、天然存在的或合成的组合物、颗
粒物（particulate）、非聚集纳米粒子，或它们的任意组合。所述化合物可以是疏水、亲水、
或两亲化合物。
寡糖、多糖、生物大分子，例如，肽、蛋白质、肽类似物及它们的衍生物、肽模拟物
（peptidomimetics）、核酸、核酸类似物及衍生物、多核苷酸、寡核苷酸、酶、由生物材料（如细菌、植物、真菌、或动物细胞或组织）制备而得的提取物、天然存在的或合成的组合物、颗
粒物（particulate）、非聚集纳米粒子，或它们的任意组合。所述化合物可以是疏水、亲水、
或两亲化合物。
[0110] 本文所使用的术语“颗粒物”是指粒子、粉末、薄片（flake）等，其本身以相对较小的形式存在，并可以由例如研磨、切丝（shredding）、破碎（fragmenting）、粉碎
（pulverizing）、雾化（atomizing）或其它方式将较大的材料分割至相对较小的形式。
（pulverizing）、雾化（atomizing）或其它方式将较大的材料分割至相对较小的形式。
[0111] 本文所使用的术语“非聚集纳米粒子”是指在本文所述的聚集条件下并不聚集的纳米粒子。
[0112] 本文所使用的术语“小分子”可以指“类天然产物（natural product-like）”的化合物，然而术语“小分子”并不限于“类天然产物”化合物。特别地，小分子的典型特征在于其
包含数个碳-碳键，分子量低于5000道尔顿（5kD）、优选低于3kD、更优选低于2kD、并最优选
低于1kD。在某些情况下非常优选的是，小分子的分子量等于或低于700道尔顿。
包含数个碳-碳键，分子量低于5000道尔顿（5kD）、优选低于3kD、更优选低于2kD、并最优选
低于1kD。在某些情况下非常优选的是，小分子的分子量等于或低于700道尔顿。
[0113] 在一个实施方式中，所述化合物是肽或蛋白质。本文所使用的术语“肽”以其最广义使用，是指包含两个以上氨基酸、氨基酸等同物或其它非氨基基团（彼此间通过肽键或改
性（modified）肽键相连接）的化合物。肽等同物可在如下方面与常规肽不同：通过以有关的
有机酸（如PABA）、氨基酸等替换一个或多个氨基酸、或对侧链或官能团进行取代或修饰。肽
可以是任意尺寸的；然而，在某些实施方式中，优选具有20个以下总氨基酸的肽。另外，所述
肽可以是链状或环状的。本文中具体列举的肽序列以氨基末端在左侧、羧基末端在右侧的
方式书写。
性（modified）肽键相连接）的化合物。肽等同物可在如下方面与常规肽不同：通过以有关的
有机酸（如PABA）、氨基酸等替换一个或多个氨基酸、或对侧链或官能团进行取代或修饰。肽
可以是任意尺寸的；然而，在某些实施方式中，优选具有20个以下总氨基酸的肽。另外，所述
肽可以是链状或环状的。本文中具体列举的肽序列以氨基末端在左侧、羧基末端在右侧的
方式书写。
[0114] 并且，术语“肽”广义上包括通常是多肽的蛋白质。本文所使用的术语“蛋白质”用于描述蛋白质及其片段。因此，任何显示出三维结构的氨基酸链都包含于术语“蛋白质”中，
且蛋白质片段也相应地包含在内。
且蛋白质片段也相应地包含在内。
[0115] 肽模拟物是能折叠至限定的类似于天然肽的三维结构的分子。本文所使用的术语“核酸”是指核苷酸或核苷单体的多聚物（多核苷酸）或寡聚物（寡核苷酸）（由天然存在的碱
基、糖和内糖键（intersugar linkages）组成）。术语“核酸”还包括具有相似功能的、包含非天然存在的单体或其部分的多聚物或寡聚物。与天然形式的核酸相比，这种改性或取代核
酸由于其特性（例如增强细胞摄取和提高核酸酶存在时的稳定性）而通常更优选。
基、糖和内糖键（intersugar linkages）组成）。术语“核酸”还包括具有相似功能的、包含非天然存在的单体或其部分的多聚物或寡聚物。与天然形式的核酸相比，这种改性或取代核
酸由于其特性（例如增强细胞摄取和提高核酸酶存在时的稳定性）而通常更优选。
[0116] 核酸可以是单链核酸或双链核酸。单链核酸可以具有双链区域、且双链核酸可以具有单链区域。示例性的核酸包括但不仅限于：结构基因、包括控制和终止区域的基因、自
我复制体系（如病毒DNA或质粒DNA）、单链和双链siRNA以及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或
iRNA试剂）、短发卡RNA（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、microRNA、microRNA模拟物、适配子
（aptamers）、antimirs、antagomirs、三链形成（triplex-forming）寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸（decoy oligonucleotides）。
我复制体系（如病毒DNA或质粒DNA）、单链和双链siRNA以及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或
iRNA试剂）、短发卡RNA（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、microRNA、microRNA模拟物、适配子
（aptamers）、antimirs、antagomirs、三链形成（triplex-forming）寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸（decoy oligonucleotides）。
[0117] 在本文所述的本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述化合物是生物活性化合物或具有生物活性。
[0118] 本文所使用的术语“生物活性（biological activity或bioactivity）”是指化合物能对生物样品产生作用的能力。生物活性可不受限制地包括在生物分析中，在分子水平、
细胞水平、组织水平或器官水平上诱发刺激、抑制、调节、毒性或致死响应。例如，生物活性
可以指化合物的以下能力：显示出或调节酶的效果/活性、阻断受体、刺激受体、调节一个或
多个基因的表达水平、调节细胞增殖、调节细胞分裂、调节细胞形态、或上述能力的任意组
合。在某些情况下，生物活性可以指化合物在生物样品中产生毒性效应的能力、或者指化合
物对靶分子或靶细胞进行化学修饰的能力。
细胞水平、组织水平或器官水平上诱发刺激、抑制、调节、毒性或致死响应。例如，生物活性
可以指化合物的以下能力：显示出或调节酶的效果/活性、阻断受体、刺激受体、调节一个或
多个基因的表达水平、调节细胞增殖、调节细胞分裂、调节细胞形态、或上述能力的任意组
合。在某些情况下，生物活性可以指化合物在生物样品中产生毒性效应的能力、或者指化合
物对靶分子或靶细胞进行化学修饰的能力。
[0119] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述化合物是治疗剂。本文所使用的术语“治疗剂”是指用于治疗、治愈、缓和、或预防受试者中的有害状况的生物制
剂或化学试剂。术语“治疗剂”还包括用于对抗受试者的疾病、状况、或障碍的物质和试剂，
并包括药物、诊断和仪器。“治疗剂”还包括在医疗诊断中、或在恢复、矫正、或修饰生理机能
中使用的任何事物。术语“治疗剂”和“药物活性剂”在本文中可互换使用。
剂或化学试剂。术语“治疗剂”还包括用于对抗受试者的疾病、状况、或障碍的物质和试剂，
并包括药物、诊断和仪器。“治疗剂”还包括在医疗诊断中、或在恢复、矫正、或修饰生理机能
中使用的任何事物。术语“治疗剂”和“药物活性剂”在本文中可互换使用。
[0120] 根据所需的治疗目的和生物作用选择所述治疗剂。治疗剂的一般性分类包括抗微生物剂如肾上腺素能剂、抗生素或抗菌剂、抗病毒剂、驱虫剂、抗炎剂、抗肿瘤剂、抗氧化剂、
生物反应抑制剂、肉毒杆菌毒素剂、化疗剂、诊断剂、基因治疗剂、激素剂、粘液溶解剂、放射
防护剂、放射剂（包括短程放射疗法材料）、组织生长抑制剂、组织生长促进剂、血管活化剂、
血栓溶解剂（即，凝块破坏剂）、血凝诱导剂、以及镰状细胞病中RBC聚集的抑制剂。
生物反应抑制剂、肉毒杆菌毒素剂、化疗剂、诊断剂、基因治疗剂、激素剂、粘液溶解剂、放射
防护剂、放射剂（包括短程放射疗法材料）、组织生长抑制剂、组织生长促进剂、血管活化剂、
血栓溶解剂（即，凝块破坏剂）、血凝诱导剂、以及镰状细胞病中RBC聚集的抑制剂。
[0121] 所述治疗剂可选自适于治疗目的的任一类。例如，若所述目的是治疗涉及狭窄的疾病或状况，所述治疗剂可包括抗血栓形成剂或血栓溶解剂或纤维蛋白溶解剂。作为另外
的例子，若所要求的治疗目的是治疗癌症，所述治疗剂可包括放射性粒子（直接在肿瘤内或
靠近肿瘤处提供放射治疗）形式的放射性材料。另外，可选择或设置所述治疗剂以在一段时
间内提供治疗活性。
的例子，若所要求的治疗目的是治疗癌症，所述治疗剂可包括放射性粒子（直接在肿瘤内或
靠近肿瘤处提供放射治疗）形式的放射性材料。另外，可选择或设置所述治疗剂以在一段时
间内提供治疗活性。
[0122] 示例性的药物活性化合物包括但不仅限于：在Harrison’s Principles of Internal Medicine，13th Edition，Eds.T.R.Harrison McGraw-Hill N.Y.，NY；Physicians
Desk Reference，50th Edition，1997，Oradell New Jersey，Medical Economics Co.；
Pharmacological Basis of Therapeutics，8th Edition，Goodman and Gilman，1990；
United States Pharmacopeia，The National Formulary，USP XII NF XVII，1990；
Goodman与Oilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics现行版；以及The
Merck Index现行版中有所描述的药物活性化合物，将以上所有文献的全部内容整体引入
本文。
Desk Reference，50th Edition，1997，Oradell New Jersey，Medical Economics Co.；
Pharmacological Basis of Therapeutics，8th Edition，Goodman and Gilman，1990；
United States Pharmacopeia，The National Formulary，USP XII NF XVII，1990；
Goodman与Oilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics现行版；以及The
Merck Index现行版中有所描述的药物活性化合物，将以上所有文献的全部内容整体引入
本文。
[0123] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述治疗剂是抗血栓形成剂或血栓溶解剂或纤维蛋白溶解剂，其选自于由以下试剂所组成的组：抗凝血剂、抗凝血剂
拮抗剂、抗血小板剂、血栓溶解剂、血栓溶解剂拮抗剂，以及上述试剂的任意组合。
拮抗剂、抗血小板剂、血栓溶解剂、血栓溶解剂拮抗剂，以及上述试剂的任意组合。
[0124] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述治疗剂是血栓形成剂，其选自于由以下试剂所组成的组：血栓溶解剂拮抗剂、抗凝血剂拮抗剂、促凝血酶、促凝
血蛋白、以及上述试剂的任意组合。某些示例性的血栓形成剂包括但不仅限于：鱼精蛋白
（protamine）、维生素K1、氨基己酸（amicar）、氨甲环酸（tranexamic acid）（amstat）、阿那格雷（anagrelide）、阿加曲班（argatroban）、西洛他唑（cilstazol）、达曲班（daltroban）、去纤苷酸（defibrotide）、依诺肝素（enoxaparin）、速避凝（fraxiparine）、吲哚布芬
（indobufen）、lamoparan、奥扎格雷（ozagrel）、吡考他胺（picotamide）、普拉贝脲
（plafibride）、替地肝素（tedelparin）、噻氯匹定（ticlopidine）、三氟柳（triflusal）、胶原以及包覆有胶原的粒子。
血蛋白、以及上述试剂的任意组合。某些示例性的血栓形成剂包括但不仅限于：鱼精蛋白
（protamine）、维生素K1、氨基己酸（amicar）、氨甲环酸（tranexamic acid）（amstat）、阿那格雷（anagrelide）、阿加曲班（argatroban）、西洛他唑（cilstazol）、达曲班（daltroban）、去纤苷酸（defibrotide）、依诺肝素（enoxaparin）、速避凝（fraxiparine）、吲哚布芬
（indobufen）、lamoparan、奥扎格雷（ozagrel）、吡考他胺（picotamide）、普拉贝脲
（plafibride）、替地肝素（tedelparin）、噻氯匹定（ticlopidine）、三氟柳（triflusal）、胶原以及包覆有胶原的粒子。
[0125] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述治疗剂是血栓溶解剂。本文所使用的术语“血栓溶解剂”是指任何能通过溶解、移走（dislodging）或其它使凝
块解体的方式（例如，通过溶解纤维蛋白-血小板凝块、或抑制这一凝块的形成）诱导再灌注
的试剂。再灌注在凝块溶解、血液流动恢复时发生。示例性的血栓溶解剂包括但不仅限于：
组织纤溶酶原激活物（t-PA）、链激酶（streptokinase，SK）、尿激酶原（prourokinase）、尿激酶（urokinase，uPA）、阿替普酶（alteplase，又名 Genentech，Inc.）、瑞替普酶
（reteplase，又名r-PA或 Centocor，Inc.）、替奈普酶（tenecteplase，又名
TNKTM，Genentech，Inc.）、 （AstraZeneca，LP）、拉诺替普酶（lanoteplase）
(Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（monteplase）（Eisai Company，Ltd.）、沙芦
普酶（saruplase，又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激酶
（staphylokinase）、以及茴香酰化（anisoylated）纤溶酶原-链激酶激活剂复合物（又名
APSAC、Anistreplase和 SmithKline Beecham Corp.）。血栓溶解剂还包括其它
经基因工程改造的纤溶酶原激活物。本发明可另外使用上述血栓溶解剂的混合物、生理活
性片段或突变形式。本文所使用的术语“组织纤溶酶原激活物”旨在包括这类混合物、片段
和突变体，以及天然来源和重组来源的组织纤溶酶原激活物。
块解体的方式（例如，通过溶解纤维蛋白-血小板凝块、或抑制这一凝块的形成）诱导再灌注
的试剂。再灌注在凝块溶解、血液流动恢复时发生。示例性的血栓溶解剂包括但不仅限于：
组织纤溶酶原激活物（t-PA）、链激酶（streptokinase，SK）、尿激酶原（prourokinase）、尿激酶（urokinase，uPA）、阿替普酶（alteplase，又名 Genentech，Inc.）、瑞替普酶
（reteplase，又名r-PA或 Centocor，Inc.）、替奈普酶（tenecteplase，又名
TNKTM，Genentech，Inc.）、 （AstraZeneca，LP）、拉诺替普酶（lanoteplase）
(Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（monteplase）（Eisai Company，Ltd.）、沙芦
普酶（saruplase，又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激酶
（staphylokinase）、以及茴香酰化（anisoylated）纤溶酶原-链激酶激活剂复合物（又名
APSAC、Anistreplase和 SmithKline Beecham Corp.）。血栓溶解剂还包括其它
经基因工程改造的纤溶酶原激活物。本发明可另外使用上述血栓溶解剂的混合物、生理活
性片段或突变形式。本文所使用的术语“组织纤溶酶原激活物”旨在包括这类混合物、片段
和突变体，以及天然来源和重组来源的组织纤溶酶原激活物。
[0126] 术语“抗凝血剂”指的是任何能延长凝血酶原（prothrombin）和部分促凝血酶原激酶（thromboplastin）时间测试并降低凝血酶原和凝血因子VII、IX和X的水平的试剂。抗凝
血剂典型地包括香豆素衍生物、肝素以及阿斯匹林（还可被称为抗血小板剂）。
血剂典型地包括香豆素衍生物、肝素以及阿斯匹林（还可被称为抗血小板剂）。
[0127] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述药物活性剂包括本领域已知用于治疗炎症或炎症相关障碍、或感染的试剂。示例性的抗炎剂包括但不仅限于：非
甾体类抗炎药物（NSAID，如阿斯匹林、布洛芬或萘普生）、皮质类固醇（corticosteroid）（如泼尼松（presnisone））、抗疟疾药物（如羟氯喹（hydrochloroquine））、甲氨蝶呤
（methotrexate）、柳氮磺吡啶（sulfasalazine）、来氟米特（leflunomide）、抗TNF药物、环磷酰胺（cyclophosphamide）、麦考酚酯（mycophenolate）、地塞米松（dexamethasone）、罗格列酮（rosiglitazone）、泼尼松龙（prednisolone）、皮质酮（corticosterone）、布地奈德
（budesonide）、雌激素、雌二醇、柳氮磺吡啶、非诺贝特（fenfibrate）、普伐他汀
（provastatin）、辛伐他汀（simvastatin）、匹格列酮（proglitazone）、乙酰水杨酸、麦考酚酸（mycophenolic acid）、5-氨基水杨酸（mesalamine）、羟基脲（hydroxyurea）、，及它们的类似物、衍生物、前药、以及药学上可接受的盐。
甾体类抗炎药物（NSAID，如阿斯匹林、布洛芬或萘普生）、皮质类固醇（corticosteroid）（如泼尼松（presnisone））、抗疟疾药物（如羟氯喹（hydrochloroquine））、甲氨蝶呤
（methotrexate）、柳氮磺吡啶（sulfasalazine）、来氟米特（leflunomide）、抗TNF药物、环磷酰胺（cyclophosphamide）、麦考酚酯（mycophenolate）、地塞米松（dexamethasone）、罗格列酮（rosiglitazone）、泼尼松龙（prednisolone）、皮质酮（corticosterone）、布地奈德
（budesonide）、雌激素、雌二醇、柳氮磺吡啶、非诺贝特（fenfibrate）、普伐他汀
（provastatin）、辛伐他汀（simvastatin）、匹格列酮（proglitazone）、乙酰水杨酸、麦考酚酸（mycophenolic acid）、5-氨基水杨酸（mesalamine）、羟基脲（hydroxyurea）、，及它们的类似物、衍生物、前药、以及药学上可接受的盐。
[0128] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述药物活性剂是血管扩张剂。血管扩张剂可选自于由以下试剂所组成的组：α-肾上腺素受体拮抗剂（α-阻断剂）、血
管紧张素转化酶（ACE）抑制剂、血管紧张素受体阻断剂（ARB）、β2-肾上腺素受体激动剂（β2-激动剂）、钙通道阻断剂（CCB）、中枢性交感神经阻滞剂（sympatholytic）、直接作用的血管
扩张剂、内皮素（endothelin）受体拮抗剂、神经节（ganglionic）阻断剂、硝基扩张剂
（nitrodilator）、磷酸二酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素（renin）抑制剂，以及上述试剂的任意组合。示例性的血管扩张剂包括但不仅限于：哌唑嗪（prazosin）、特拉唑嗪
（terazosin）、多沙唑嗪（doxazosin）、曲马唑嗪（trimazosin）、酚妥拉明（phentolamine）、酚苄明（phenoxybenzamine）、贝那普利（benazepril）、卡托普利（captopril）、依那普利
（enalapril）、福辛普利（fosinopril）、赖诺普利（lisinopril）、莫昔普利（moexipril）、喹那普利（quinapril）、雷米普利（ramipril）、坎地沙坦（candesartan）、依普罗沙坦
（eprosartan）、厄贝沙坦（irbesartan）、氯沙坦（losartan）、奥美沙坦（olmesartan）、替米沙坦（telmisartan）、缬沙坦（valsartan）、肾上腺素（Epinephrine）、去甲肾上腺素
（Norepinephrine）、多巴胺（Dopamine）、多巴酚丁胺（Dobutamine）、异丙肾上腺素
（Isoproterenol）、氨氯地平（amlodipine）、非洛地平（felodipine）、伊拉地平
（isradipine）、尼卡地平（nicardipine）、硝苯地平（nifedipine）、尼莫地平（nimodipine）、尼群地平（nitrendipine）、可乐定（clonidine）、胍那苄（guanabenz）、胍法辛
（guanfacine）、α-甲基多巴、肼屈嗪（hydralazine）、波生坦（Bosentan）、樟磺咪芬
（trimethaphan camsylate）、二硝酸异山梨酯（isosorbide dinitrate）、单硝酸异山梨酯
（isosorbide mononitrate）、硝化甘油、丁四硝酯（erythrityl tetranitrate）、季戊四醇
四硝酸酯（pentaerythritol tetranitrate）、硝普酸钠（sodium nitroprusside）、米力农
（milrinone）、氨力农（inamrinone，旧称amrinone）、西洛他唑（cilostazol）、西地那非
（sildenafil）、他达拉非（tadalafil）、米诺地尔（minoxidil）、阿利吉仑（aliskiren），及它们的类似物、衍生物、前药、以及药学上可接受的盐。
管紧张素转化酶（ACE）抑制剂、血管紧张素受体阻断剂（ARB）、β2-肾上腺素受体激动剂（β2-激动剂）、钙通道阻断剂（CCB）、中枢性交感神经阻滞剂（sympatholytic）、直接作用的血管
扩张剂、内皮素（endothelin）受体拮抗剂、神经节（ganglionic）阻断剂、硝基扩张剂
（nitrodilator）、磷酸二酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素（renin）抑制剂，以及上述试剂的任意组合。示例性的血管扩张剂包括但不仅限于：哌唑嗪（prazosin）、特拉唑嗪
（terazosin）、多沙唑嗪（doxazosin）、曲马唑嗪（trimazosin）、酚妥拉明（phentolamine）、酚苄明（phenoxybenzamine）、贝那普利（benazepril）、卡托普利（captopril）、依那普利
（enalapril）、福辛普利（fosinopril）、赖诺普利（lisinopril）、莫昔普利（moexipril）、喹那普利（quinapril）、雷米普利（ramipril）、坎地沙坦（candesartan）、依普罗沙坦
（eprosartan）、厄贝沙坦（irbesartan）、氯沙坦（losartan）、奥美沙坦（olmesartan）、替米沙坦（telmisartan）、缬沙坦（valsartan）、肾上腺素（Epinephrine）、去甲肾上腺素
（Norepinephrine）、多巴胺（Dopamine）、多巴酚丁胺（Dobutamine）、异丙肾上腺素
（Isoproterenol）、氨氯地平（amlodipine）、非洛地平（felodipine）、伊拉地平
（isradipine）、尼卡地平（nicardipine）、硝苯地平（nifedipine）、尼莫地平（nimodipine）、尼群地平（nitrendipine）、可乐定（clonidine）、胍那苄（guanabenz）、胍法辛
（guanfacine）、α-甲基多巴、肼屈嗪（hydralazine）、波生坦（Bosentan）、樟磺咪芬
（trimethaphan camsylate）、二硝酸异山梨酯（isosorbide dinitrate）、单硝酸异山梨酯
（isosorbide mononitrate）、硝化甘油、丁四硝酯（erythrityl tetranitrate）、季戊四醇
四硝酸酯（pentaerythritol tetranitrate）、硝普酸钠（sodium nitroprusside）、米力农
（milrinone）、氨力农（inamrinone，旧称amrinone）、西洛他唑（cilostazol）、西地那非
（sildenafil）、他达拉非（tadalafil）、米诺地尔（minoxidil）、阿利吉仑（aliskiren），及它们的类似物、衍生物、前药、以及药学上可接受的盐。
[0129] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述药物活性剂是血管收缩剂。本文所使用的术语“血管收缩剂”是指使血管收缩从而保持或增高血压、和/或减少血
液流动的化合物或分子。许多障碍可受益于使用血管收缩剂进行的治疗。例如，皮肤发红
（例如，红斑或红血丝（cuperose）），皮肤发红典型地涉及血管扩张，可通过血管收缩剂得以
治疗，所述血管收缩剂收缩毛细血管从而减少令人不愉快的发红。所述血管收缩剂组的其
它描述性名称包括血管活化激动剂、血管加压剂和血管收缩药物。某些血管收缩剂作用于
特定受体，如加压素受体（vasopressin receptor）或肾上腺素受体。示例性的血管收缩剂
包括但不仅限于：α-肾上腺素受体激动剂、儿茶酚胺（catecholamine）、加压素、加压素受体
调节剂、钙通道激动剂、以及其它内源性或外源性血管收缩剂。
液流动的化合物或分子。许多障碍可受益于使用血管收缩剂进行的治疗。例如，皮肤发红
（例如，红斑或红血丝（cuperose）），皮肤发红典型地涉及血管扩张，可通过血管收缩剂得以
治疗，所述血管收缩剂收缩毛细血管从而减少令人不愉快的发红。所述血管收缩剂组的其
它描述性名称包括血管活化激动剂、血管加压剂和血管收缩药物。某些血管收缩剂作用于
特定受体，如加压素受体（vasopressin receptor）或肾上腺素受体。示例性的血管收缩剂
包括但不仅限于：α-肾上腺素受体激动剂、儿茶酚胺（catecholamine）、加压素、加压素受体
调节剂、钙通道激动剂、以及其它内源性或外源性血管收缩剂。
[0130] 在某些实施方式中，所述血管收缩剂选自于由以下试剂所组成的组：硫酸铝、阿米福林（amidephrine）、安非他明（amphetamine）、血管紧张素、抗组胺剂、精氨酸加压素
（argipressin）、碱式没食子酸铋（bismuth subgallate）、咖啡胺醇（cafaminol）、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明（cyclopentamine）、脱氧肾上腺素（deoxyepinephrine）、多巴胺、麻黄
素、肾上腺素、苯赖加压素（felypressin）、茚唑啉（indanazoline）、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺（lisergic acid diethylamine）、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸（lysergic acid）、甲氧麻黄酮（mephedrone）、甲氧明（methoxamine）、哌甲酯（methylphenidate）、美替唑啉
（metizoline）、metraminol、米多君（midodrine）、萘甲唑啉（naphazoline）、异肾上腺素
（nordefrin）、去甲肾上腺素、二甲己胺（octodrine）、鸟氨酸加压素（ornipressin）、羟甲唑啉（oxymethazoline）、苯乙醇胺（phenylethanolamine）、苯肾上腺素（phenylephrine）、苯异丙胺（phenylisopropylamines）、苯丙醇胺（phenylpropanolamine）、苯加压素
（phenypressin）、丙己君（propylhexedrine）、伪麻黄碱（pseudoephedrine）、塞洛西宾
（psilocybin）、四肼屈嗪（tetrahydralazine）、四氢唑啉（tetrahydrozoline）、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢唑啉与硫酸锌、曲马唑啉（tramazoline）、异庚胺（tuaminoheptane）、泰马唑啉（tymazoline）、加压素、加压催产素（vasotocin）、赛洛唑啉（xylometazoline）、氧化锌等。
（argipressin）、碱式没食子酸铋（bismuth subgallate）、咖啡胺醇（cafaminol）、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明（cyclopentamine）、脱氧肾上腺素（deoxyepinephrine）、多巴胺、麻黄
素、肾上腺素、苯赖加压素（felypressin）、茚唑啉（indanazoline）、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺（lisergic acid diethylamine）、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸（lysergic acid）、甲氧麻黄酮（mephedrone）、甲氧明（methoxamine）、哌甲酯（methylphenidate）、美替唑啉
（metizoline）、metraminol、米多君（midodrine）、萘甲唑啉（naphazoline）、异肾上腺素
（nordefrin）、去甲肾上腺素、二甲己胺（octodrine）、鸟氨酸加压素（ornipressin）、羟甲唑啉（oxymethazoline）、苯乙醇胺（phenylethanolamine）、苯肾上腺素（phenylephrine）、苯异丙胺（phenylisopropylamines）、苯丙醇胺（phenylpropanolamine）、苯加压素
（phenypressin）、丙己君（propylhexedrine）、伪麻黄碱（pseudoephedrine）、塞洛西宾
（psilocybin）、四肼屈嗪（tetrahydralazine）、四氢唑啉（tetrahydrozoline）、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢唑啉与硫酸锌、曲马唑啉（tramazoline）、异庚胺（tuaminoheptane）、泰马唑啉（tymazoline）、加压素、加压催产素（vasotocin）、赛洛唑啉（xylometazoline）、氧化锌等。
[0131] 在某些实施方式中，所述血管活化剂是由草药来源衍生或提取的物质及其盐、异构体、类似物和衍生物，所述草药来源选自于包括以下来源的组：麻黄（ephedra sinica）、
拳参（polygonum bistorta）（拳参根（bistort root））、北美金缕梅（hamamelis
virginiana）（金缕梅（witch hazel））、北美黄连（hydrastis canadensis）（金印草
（goldenseal））、地笋（lycopus virginicus）（bugleweed）、白坚木（aspidosperma
quebracho）（quebracho bianco）、金雀儿（cytisus scoparius）（scotch broom）、柏树
（cypress）。
拳参（polygonum bistorta）（拳参根（bistort root））、北美金缕梅（hamamelis
virginiana）（金缕梅（witch hazel））、北美黄连（hydrastis canadensis）（金印草
（goldenseal））、地笋（lycopus virginicus）（bugleweed）、白坚木（aspidosperma
quebracho）（quebracho bianco）、金雀儿（cytisus scoparius）（scotch broom）、柏树
（cypress）。
[0132] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述药物活性剂是抗肿瘤剂、抗增殖剂和/或抗有丝分裂（anti-miotic）剂。示例性的抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分
裂剂包括但不仅限于：紫杉醇（paclitaxel）、5-氟尿嘧啶、多柔比星（doxorubicin）、柔红霉素（daunorubicin）、环孢素（cyclosporine）、顺铂（cisplatin）、长春碱（vinblastine）、长春新碱（vincristine）、埃坡霉素（epothilones）、甲氨蝶呤（methotrexate）、硫唑嘌呤
（azathioprine）、阿霉素（adriamycin）和自力霉素（mutamycin）；内皮抑素（endostatin）、血管抑素（angiostatin）和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨（cladribine）、紫杉酚（taxol）、曲匹地尔（trapidil）、卤夫酮（halofuginone）、血纤维蛋白溶酶（plasmin），及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。在某些实施方式中，所述药物活性剂在血液或血清中具有
非常短的半衰期。例如，所述药物活性剂在血液或血清中的半衰期为1分钟、2分钟、3分钟、4
分钟、5分钟、5分钟、10分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、8小时、9小时、10小时、11小时、或12小时以内。这些短半衰期试剂可具有局部效应。
裂剂包括但不仅限于：紫杉醇（paclitaxel）、5-氟尿嘧啶、多柔比星（doxorubicin）、柔红霉素（daunorubicin）、环孢素（cyclosporine）、顺铂（cisplatin）、长春碱（vinblastine）、长春新碱（vincristine）、埃坡霉素（epothilones）、甲氨蝶呤（methotrexate）、硫唑嘌呤
（azathioprine）、阿霉素（adriamycin）和自力霉素（mutamycin）；内皮抑素（endostatin）、血管抑素（angiostatin）和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨（cladribine）、紫杉酚（taxol）、曲匹地尔（trapidil）、卤夫酮（halofuginone）、血纤维蛋白溶酶（plasmin），及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。在某些实施方式中，所述药物活性剂在血液或血清中具有
非常短的半衰期。例如，所述药物活性剂在血液或血清中的半衰期为1分钟、2分钟、3分钟、4
分钟、5分钟、5分钟、10分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、8小时、9小时、10小时、11小时、或12小时以内。这些短半衰期试剂可具有局部效应。
[0133] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述治疗剂选自于由以下试剂所组成的组：阿斯匹林、华法林（warfarin）（香豆素）、醋硝香豆素（acenocoumarol）、安克洛酶（ancrod）、茴茚二酮（anisindione）、溴茚二酮（bromindione）、氯茚二酮
（clorindione）、库美香豆素（coumetarol）、环香豆素（cyclocumarol）、葡聚糖、葡聚糖硫酸酯钠、双香豆素（dicumarol）、二苯茚酮（diphenadione）、双香豆乙酯（ethyl
biscoumacetate）、乙双香豆素（ethylidene dicoumarol）、氟茚二酮（fluindione）、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠（lyapolate sodium）、奥沙二酮（oxazidione）、多硫酸戊聚糖
（pentosan polysulfate）、苯茚二酮（phenindione）、苯丙香豆素（phenprocoumon）、卵黄高磷蛋白（phosvitin）、吡考他胺（picotamide）、噻氯香豆素（tioclomarol）、双嘧达莫
（dipyridamole）（潘生丁（persantin））、磺吡酮（sulfinpyranone，苯磺唑酮（anturane））、噻氯匹定（ticlopidine，抵克立得（ticlid））、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶（anistreplase）/APSAC（依米那酶（eminase）），及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
（clorindione）、库美香豆素（coumetarol）、环香豆素（cyclocumarol）、葡聚糖、葡聚糖硫酸酯钠、双香豆素（dicumarol）、二苯茚酮（diphenadione）、双香豆乙酯（ethyl
biscoumacetate）、乙双香豆素（ethylidene dicoumarol）、氟茚二酮（fluindione）、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠（lyapolate sodium）、奥沙二酮（oxazidione）、多硫酸戊聚糖
（pentosan polysulfate）、苯茚二酮（phenindione）、苯丙香豆素（phenprocoumon）、卵黄高磷蛋白（phosvitin）、吡考他胺（picotamide）、噻氯香豆素（tioclomarol）、双嘧达莫
（dipyridamole）（潘生丁（persantin））、磺吡酮（sulfinpyranone，苯磺唑酮（anturane））、噻氯匹定（ticlopidine，抵克立得（ticlid））、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶（anistreplase）/APSAC（依米那酶（eminase）），及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0134] 所述治疗剂可以是放射性材料。合适的放射性材料包括例如90钇、192铱、198金、125碘、137铯、60钴、55钴、56钴、57钴、57镁、55铁、32磷、90锶、81铷、206铋、67镓、77溴、129铯、73硒、72硒、72砷、103钯、123铅、111铟、52铁、167铥、57镍、62锌、62铜、201铊和123碘。不希望受理论限制，包含放射性材料的聚集体可用于对如肿瘤、动静脉畸形等疾病组织进行治疗。
[0135] 本文所述的聚集体、血红细胞和微胶囊可在多种生物医疗应用中用作组织和器官的体内显像剂，所述应用包括但不仅限于：血管闭塞成像、肿瘤成像、器官断层扫描成像、器
官功能监控、冠状动脉或静脉血管造影、荧光内窥镜检查、激光引导手术、光声
（photoacoustic）方法与声致荧光（sonofluorescence）方法等。本文所述的聚集体、血红细
胞和微胶囊对于检测和/或诊断动脉粥样硬化斑块或血液凝块很有用。当用于成像应用时，
本文所述的聚集体、血红细胞和微胶囊典型地包含可以共价或非共价附着至所述聚集体的
显像剂。
官功能监控、冠状动脉或静脉血管造影、荧光内窥镜检查、激光引导手术、光声
（photoacoustic）方法与声致荧光（sonofluorescence）方法等。本文所述的聚集体、血红细
胞和微胶囊对于检测和/或诊断动脉粥样硬化斑块或血液凝块很有用。当用于成像应用时，
本文所述的聚集体、血红细胞和微胶囊典型地包含可以共价或非共价附着至所述聚集体的
显像剂。
[0136] 相应地，在某些实施方式中，所述化合物为显像剂。本文所使用的术语“显像剂”是指满足如下条件的分子中的元素或官能团：允许对状况、病理障碍和/或疾病的存在和/或
进展进行检测、成像和/或监控。所述显像剂可为回波物质（echogenic substance）（液体或
气体）、非金属同位素、光学报告子、硼中子吸收剂、顺磁性金属离子、铁磁性金属、发射γ射
线的放射性同位素、发射正电子的放射性同位素、或x射线吸收剂。
进展进行检测、成像和/或监控。所述显像剂可为回波物质（echogenic substance）（液体或
气体）、非金属同位素、光学报告子、硼中子吸收剂、顺磁性金属离子、铁磁性金属、发射γ射
线的放射性同位素、发射正电子的放射性同位素、或x射线吸收剂。
[0137] 合适的光学报告子包括但不仅限于：荧光报告子和化学发光基团。许多荧光报告子染料是本领域已知的。典型地，荧光团（fluorophore）是芳香化合物或芳香杂环化合物，
其可以是芘、蒽、萘、吖啶、二苯乙烯（stilbene）、吲哚、苯并吲哚、噁唑（oxazole）、噻唑、苯并噻唑、青色素（cyanine）、羰花青（carbocyanine）、水杨酸盐/酯、邻氨基苯甲酸盐/酯、香豆素、荧光素（fluorescein）、罗丹明（rhodamine）或其它类似化合物。合适的荧光报告子包
括呫吨染料（xanthene dyes），如荧光素或罗丹明染料，包括但不仅限于：Alexa 染
料（Invitrogen Corp.；Carlsbad，Calif）、荧光素、异硫氰酸荧光素（FITC）、Oregon
GreenTM、罗丹明、德克萨斯红（Texas red）、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）。合适的荧光报告子还包括在α位或β位上具有氨基的萘胺染料。例如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、
1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-6-萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-
磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物。其它荧光报告子染料包括香豆素，如3-苯基-7-异氰酸香
豆素；吖啶，如9-异硫氰酸酯吖啶和吖啶橙；N-(p(2-苯并噁唑基)苯基)顺丁烯二酰亚胺；青
色素，如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA）；1H,5H,11H,15H-占吨并[2,3,4-ij:5,
6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]-6-氧代己
基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-内盐（1H,5H,11H,15H-
Xantheno[2,3,4-ij:5,6,7-i'j']diquinolizin-18-ium，9-[2(or4)-[[[6-[2,5-dioxo-l-
pyrrolidinyl)oxy]-6-oxohexyl]amino]sulfonyl]-4(or2)-sulfophenyl]-2,3,6,7,12,
13,16,17octahydro-inner salt）（TR或德克萨斯红）；BODIPYTM染料；苯并噁二唑；二苯乙
烯；芘等。这些荧光化合物的许多适合类型都能够获取且能使用。
其可以是芘、蒽、萘、吖啶、二苯乙烯（stilbene）、吲哚、苯并吲哚、噁唑（oxazole）、噻唑、苯并噻唑、青色素（cyanine）、羰花青（carbocyanine）、水杨酸盐/酯、邻氨基苯甲酸盐/酯、香豆素、荧光素（fluorescein）、罗丹明（rhodamine）或其它类似化合物。合适的荧光报告子包
括呫吨染料（xanthene dyes），如荧光素或罗丹明染料，包括但不仅限于：Alexa 染
料（Invitrogen Corp.；Carlsbad，Calif）、荧光素、异硫氰酸荧光素（FITC）、Oregon
GreenTM、罗丹明、德克萨斯红（Texas red）、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）。合适的荧光报告子还包括在α位或β位上具有氨基的萘胺染料。例如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、
1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-6-萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-
磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物。其它荧光报告子染料包括香豆素，如3-苯基-7-异氰酸香
豆素；吖啶，如9-异硫氰酸酯吖啶和吖啶橙；N-(p(2-苯并噁唑基)苯基)顺丁烯二酰亚胺；青
色素，如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA）；1H,5H,11H,15H-占吨并[2,3,4-ij:5,
6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]-6-氧代己
基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-内盐（1H,5H,11H,15H-
Xantheno[2,3,4-ij:5,6,7-i'j']diquinolizin-18-ium，9-[2(or4)-[[[6-[2,5-dioxo-l-
pyrrolidinyl)oxy]-6-oxohexyl]amino]sulfonyl]-4(or2)-sulfophenyl]-2,3,6,7,12,
13,16,17octahydro-inner salt）（TR或德克萨斯红）；BODIPYTM染料；苯并噁二唑；二苯乙
烯；芘等。这些荧光化合物的许多适合类型都能够获取且能使用。
[0138] 适于用作显像剂的荧光蛋白的例子包括但不仅限于：绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白，以及它们的变体（参见，例如，美国专利No.6,403,374、No.6,800,733以及No.7,157,566）。GFP变体的具体例子包括但
不仅限于：增强型GFP（EGFP）、去稳定EGFP、在Doan等，Mol.Microbiol，55:1767-1781（2005）中描述的GFP变体、在Crameri等，Nat.Biotechnol.，14:315319（1996）中描述的GFP变体、在
Rizzo等，Nat.Biotechnol，22:445（2004）和Tsien，Annu.Rev.Biochem.，67:509（1998）中描述的天蓝色荧光蛋白、以及在Nagal等，Nat.Biotechnol.，2087-90（2002）中描述的黄色荧
光蛋白。DsRed变体在例如Shaner等，Nat.Biotechnol.，22:1567-1572（2004）中有所描述，
并包括mStrawberry、mCherry、mOrange、mBanana、mHoneydew和mTangerine。另外的DsRed变
体在例如Wang等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，101:16745-16749（2004）中有所描述，并包
括mRaspberry和mPlum。DsRed变体的其它例子包括在Fischer等，FEBS Lett.，577:227-232
（2004）中描述的mRFPmars以及在Fischer等，FEBS Lett，580:2495-2502（2006）中描述的
mRFPruby。
不仅限于：增强型GFP（EGFP）、去稳定EGFP、在Doan等，Mol.Microbiol，55:1767-1781（2005）中描述的GFP变体、在Crameri等，Nat.Biotechnol.，14:315319（1996）中描述的GFP变体、在
Rizzo等，Nat.Biotechnol，22:445（2004）和Tsien，Annu.Rev.Biochem.，67:509（1998）中描述的天蓝色荧光蛋白、以及在Nagal等，Nat.Biotechnol.，2087-90（2002）中描述的黄色荧
光蛋白。DsRed变体在例如Shaner等，Nat.Biotechnol.，22:1567-1572（2004）中有所描述，
并包括mStrawberry、mCherry、mOrange、mBanana、mHoneydew和mTangerine。另外的DsRed变
体在例如Wang等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，101:16745-16749（2004）中有所描述，并包
括mRaspberry和mPlum。DsRed变体的其它例子包括在Fischer等，FEBS Lett.，577:227-232
（2004）中描述的mRFPmars以及在Fischer等，FEBS Lett，580:2495-2502（2006）中描述的
mRFPruby。
[0139] 合适的回波气体包括但不仅限于：六氟化硫或全氟化碳气体，如全氟甲烷、全氟乙烷、全氟丙烷、全氟丁烷、全氟环丁烷、全氟戊烷或全氟己烷。
[0140] 合适的非金属同位素包括但不仅限于：11C、14C、13N、18F、123I、124I、和125I。
[0141] 合适的放射性同位素包括但不仅限于：99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga和153
Gd。
Gd。
[0142] 合适的顺磁性金属离子包括但不仅限于：Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)。
[0143] 合适的X射线吸收剂包括但不仅限于：Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir。
[0144] 在某些实施方式中，放射性核素结合至螯合剂或螯合剂接头（附着至聚集体）。适合直接缀合使用的放射性核素不受限制地包括18F、124I、125I、131I及它们的混合物。适合与螯合剂共同使用的放射性核素不受限制地包括47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、
111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At、212Bi及它们的混合物。合适的螯合剂包括但不仅限于：DOTA、BAD、TETA、DTPA、EDTA、NTA、HDTA、它们的膦酸盐/酯类似物
（phosphonate analog）及它们的混合物。本领域技术人员将通晓用于将放射性核素、螯合
剂和螯合剂接头附着于纳米粒子上的方法。
111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At、212Bi及它们的混合物。合适的螯合剂包括但不仅限于：DOTA、BAD、TETA、DTPA、EDTA、NTA、HDTA、它们的膦酸盐/酯类似物
（phosphonate analog）及它们的混合物。本领域技术人员将通晓用于将放射性核素、螯合
剂和螯合剂接头附着于纳米粒子上的方法。
[0145] 可检测的响应通常是指通过观测的方式或利用仪器的方式可检测的信号变化或信号出现。在某些情况下，所述可检测的响应是荧光或荧光变化，例如荧光强度、荧光激发
或发射波长分布、荧光寿命和/或荧光偏振的变化。本领域技术人员将领会的是，受试者或
样品中标记的程度和/或位置可与标准或对照（例如，健康组织或器官）相比较。在某些其它
情况下，所述可检测的响应是放射性的（即，辐射），包括由放射性物质（如放射性核素）发射
的γ射线、α粒子、β粒子、核子、电子、正电子和中微子。
或发射波长分布、荧光寿命和/或荧光偏振的变化。本领域技术人员将领会的是，受试者或
样品中标记的程度和/或位置可与标准或对照（例如，健康组织或器官）相比较。在某些其它
情况下，所述可检测的响应是放射性的（即，辐射），包括由放射性物质（如放射性核素）发射
的γ射线、α粒子、β粒子、核子、电子、正电子和中微子。
[0146] 本领域已知的用于体内检测荧光（例如来自于荧光团或荧光蛋白的荧光）的具体装置或方法包括但不仅限于：体内近红外荧光（参见，例如，Frangioni，
Curr.Opin.Chem.Biol，7:626-634（2003））、MaestroTM体内荧光成像系统（Cambridge
Research & Instrumentation，Inc.；Woburn，Mass.）、使用飞点扫描装置（flying-spot
scanner）进行的体内荧光成像（参见，例如，Ramanujam等，IEEE Transactions on
Biomedical Engineering，48:1034-1041(2001)）等。其它用于检测光学响应的方法或装置
不受限制地包括目视检查、CCD摄像机、摄影机、成像胶片（photographic film）、激光扫描
装置、荧光计、光电二极管、量子计数器、落射荧光显微镜（epifluorescence
microscopes）、扫描显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪（fluorescence microplate
readers）、或使用光电倍增管进行信号放大。
Curr.Opin.Chem.Biol，7:626-634（2003））、MaestroTM体内荧光成像系统（Cambridge
Research & Instrumentation，Inc.；Woburn，Mass.）、使用飞点扫描装置（flying-spot
scanner）进行的体内荧光成像（参见，例如，Ramanujam等，IEEE Transactions on
Biomedical Engineering，48:1034-1041(2001)）等。其它用于检测光学响应的方法或装置
不受限制地包括目视检查、CCD摄像机、摄影机、成像胶片（photographic film）、激光扫描
装置、荧光计、光电二极管、量子计数器、落射荧光显微镜（epifluorescence
microscopes）、扫描显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪（fluorescence microplate
readers）、或使用光电倍增管进行信号放大。
[0147] 任何本领域已知用于检测受试者中放射性核素的放射性发射的装置或方法都适于在本发明中使用。例如，如单光子发射计算机断层扫描（SPECT，使用旋转γ照相机检测发
射单光子γ射线的放射性核素）和放射性核素闪烁扫描术（使用闪烁γ照相机获得放射性
核素在组织、器官或身体系统中的影像或系列连续影像）的方法可用于检测经放射性同位
素标记的聚集体发射的辐射。正电子发射断层扫描（PET）是另一种适于用于检测受试者中
的辐射的技术。
射单光子γ射线的放射性核素）和放射性核素闪烁扫描术（使用闪烁γ照相机获得放射性
核素在组织、器官或身体系统中的影像或系列连续影像）的方法可用于检测经放射性同位
素标记的聚集体发射的辐射。正电子发射断层扫描（PET）是另一种适于用于检测受试者中
的辐射的技术。
[0148] 本领域技术人员将理解的是，本文所述的用于将配体附着至纳米粒子上的方法可同样用于将显像剂附着至所述纳米粒子。另外，本领域普通技术人员还将知晓其它用于将
显像剂附着至纳米粒子和/或制造包含显像剂的纳米粒子的方法。
显像剂附着至纳米粒子和/或制造包含显像剂的纳米粒子的方法。
[0149] 在某些实施方式中，所述聚集体包含至少一种治疗剂和至少一种显像剂。
[0150] 不希望受理论限制，纳米粒子聚集为聚集体降低了与聚集体相结合的化合物的释放速率和/或释放量、或阻止了所述化合物接触可吸收或吸附所述化合物的细胞。这可归结
于聚集体的表面积相对于单个纳米粒子的总表面积下降。相应地，在某些实施方式中，相对
于非解聚聚集体而言，所结合的化合物由解聚聚集体中的释放速率和/或释放量更高。例
如，相对于由非解聚聚集体的释放而言，由解聚聚集体的释放速率可为至少10%、至少20%、
至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少1倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、或至少100倍或更高。
于聚集体的表面积相对于单个纳米粒子的总表面积下降。相应地，在某些实施方式中，相对
于非解聚聚集体而言，所结合的化合物由解聚聚集体中的释放速率和/或释放量更高。例
如，相对于由非解聚聚集体的释放而言，由解聚聚集体的释放速率可为至少10%、至少20%、
至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少1倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、或至少100倍或更高。
[0151] 由于纳米粒子聚集为聚集体降低了与聚集体相结合的化合物的释放速率和/或释放量，本文描述的聚集体可用作延长治疗剂循环半衰期的缓释药物载体。例如，正常血管切
应力下仅产生部分解聚的聚集体将不释放或几乎不释放纳米粒子和与其相结合的分子。这
将增加所述纳米粒子和所结合的治疗剂的循环半衰期。因此，在正常血管切应力（例如，低
于70dyne/cm2、低于60dyne/cm2、低于50dyne/cm2、低于40dyne/cm2、低于30dyne/cm2、低于
25dyne/cm2、低于20dyne/cm2、或低于15dyne/cm2）下，部分解聚（例如，低于20%、低于15%、低于10%、低于5%、低于4%、低于3%、或低于2%）的聚集体可用作提高治疗剂循环半衰期的缓释
药物载体。
应力下仅产生部分解聚的聚集体将不释放或几乎不释放纳米粒子和与其相结合的分子。这
将增加所述纳米粒子和所结合的治疗剂的循环半衰期。因此，在正常血管切应力（例如，低
于70dyne/cm2、低于60dyne/cm2、低于50dyne/cm2、低于40dyne/cm2、低于30dyne/cm2、低于
25dyne/cm2、低于20dyne/cm2、或低于15dyne/cm2）下，部分解聚（例如，低于20%、低于15%、低于10%、低于5%、低于4%、低于3%、或低于2%）的聚集体可用作提高治疗剂循环半衰期的缓释
药物载体。
[0152] 在某些实施方式中，在切应力范围为约1dyne/cm2至约25dyne/cm2、约2dyne/cm2至约20dyne/cm2、或约5dyne/cm2至约15dyne/cm2时部分解聚（例如，低于20%、低于15%、低于
10%、低于5%、低于4%、低于3%、或低于2%）的聚集体可用作提高治疗剂循环半衰期的缓释药
物载体。
10%、低于5%、低于4%、低于3%、或低于2%）的聚集体可用作提高治疗剂循环半衰期的缓释药
物载体。
[0153] 另外，这一缓释可在整个血管系统中随时间推移而发生。这在生理学切应力条件下对内皮进行长期靶向中很有用。
[0154] 配体
[0155] 许多实体可结合至所述纳米粒子、血红细胞和微胶囊。优选的部分是直接或经中介系链（intervening tether）间接地结合（优选共价结合）的配体。在优选的实施方式中，
配体改变并入所述配体的纳米粒子、血红细胞或微胶囊的分布、靶向或寿命。在优选的实施
方式中，与缺少这种配体的种类相比，配体向所选择的靶标（例如，分子、细胞或细胞类型、
区室（例如细胞区室或器官区室）、组织、器官或身体区域）提供更高的亲和力。提供更高聚
集作用的配体在本文中定义为聚集配体。
配体改变并入所述配体的纳米粒子、血红细胞或微胶囊的分布、靶向或寿命。在优选的实施
方式中，与缺少这种配体的种类相比，配体向所选择的靶标（例如，分子、细胞或细胞类型、
区室（例如细胞区室或器官区室）、组织、器官或身体区域）提供更高的亲和力。提供更高聚
集作用的配体在本文中定义为聚集配体。
[0156] 向所选择的靶标提供更高亲和力的配体在本文中还定义为靶向配体。本文所使用的术语“靶向配体”是指结合至靶分子或与靶分子相互作用的分子。所述相互作用或结合的
性质典型地为非共价结合（例如，通过氢键作用、静电作用或范德华相互作用）；然而，结合
也可是共价的。
性质典型地为非共价结合（例如，通过氢键作用、静电作用或范德华相互作用）；然而，结合
也可是共价的。
[0157] 不受限制地，配体可选自于由以下物质所组成的组：肽、多肽、蛋白质、肽模拟物、糖蛋白、凝集素（lectin）、核苷、核苷酸、核酸、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、脂多糖、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体、受体配体，及它们的类似物和衍生物。
[0158] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述配体选自于由以下物质所组成的组：聚赖氨酸（PLL）、聚L-天冬氨酸、聚L-谷氨酸、苯乙烯-顺丁烯二酸酐共聚物、
聚（L-丙交酯-共-乙交酯）共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙
烯酰胺共聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈（polyphosphazine）、聚乙烯亚胺、精胺（spermine）、亚精胺
（spermidine）、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白（asialofetuin）、透明质酸（hyaluronan）、前胶原（procollagen）、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素(cross-psoralen)、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林（texaphyrin）、Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸（bile acids）、胆固醇、胆酸（cholic acid）、金刚烷乙酸（adamantane acetic acid）、1-芘丁酸、二氢睾酮（dihydrotestosterone）、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团
（geranyloxyhexyl group）、十六烷基甘油、冰片（borneol）、薄荷醇、1,3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、二甲氧三苯甲基
（dimethoxytrityl）、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生（naproxen）、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛（pyridoxal）、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素（cytochalasin）、诺考达唑（nocodazole）、japlakinolide、拉春库林A（latrunculin A）、鬼笔环肽（phalloidin）、swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、
GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（cluster）（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长
抑素（somatostatin），以及上述物质的任意组合。
聚（L-丙交酯-共-乙交酯）共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙
烯酰胺共聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈（polyphosphazine）、聚乙烯亚胺、精胺（spermine）、亚精胺
（spermidine）、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白（asialofetuin）、透明质酸（hyaluronan）、前胶原（procollagen）、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素(cross-psoralen)、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林（texaphyrin）、Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸（bile acids）、胆固醇、胆酸（cholic acid）、金刚烷乙酸（adamantane acetic acid）、1-芘丁酸、二氢睾酮（dihydrotestosterone）、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团
（geranyloxyhexyl group）、十六烷基甘油、冰片（borneol）、薄荷醇、1,3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、二甲氧三苯甲基
（dimethoxytrityl）、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生（naproxen）、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛（pyridoxal）、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素（cytochalasin）、诺考达唑（nocodazole）、japlakinolide、拉春库林A（latrunculin A）、鬼笔环肽（phalloidin）、swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、
GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（cluster）（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长
抑素（somatostatin），以及上述物质的任意组合。
[0159] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述配体选自于由以下肽所组成的组：SEQ ID NO：1（CREKA）、SEQ ID NO：2（CRKRLDRNK）、SEQ ID NO：3（CHVLWSTRC）、SEQ ID NO：4（ALEALAEALEALAEA）、SEQ ID NO：5（KFFKFFKFFK（细菌细胞壁渗透肽））、SEQ ID NO：6（AALEALAEALEALAEALEALAEAAAAGGC（GALA））、SEQ ID NO：7
（ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA））、SEQ ID NO：8（GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-
7））、SEQ ID NO：9（GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2））、SEQ ID NO:10（GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7））、SEQ ID NO:11（GLF EAI
EGFI ENGW EGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC（diINF-3））、SEQ ID NO:12（GLFGA
LAEALAEALAEHLAEALAEALEALAAGGSC（GLF））、SEQ ID NO:13（GLFEAIEGFIENGWEGLAEALAEALE
ALAAGGSC（GALA-INF3））、SEQ ID NO:14（GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG K GLF EAI EGFI
ENGW EGnI DG（INF-5，n为正亮氨酸））、SEQ ID NO:15（RQIKIWFQNRRMKWKK（穿膜肽
（penetratin）））、SEQ ID NO:16（GRKKRRQRRRPPQC（Tat片段48-60））、SEQ ID NO:17
（GALFLGWLGAAGSTMGAWSQPKKKRKV（基于信号序列的肽））、SEQ ID NO:18
（LLIILRRRIRKQAHAHSK（PVEC））、SEQ ID NO:19（WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL（细胞穿透肽
（transportan）））、SEQ ID NO:20（KLALKLALKALKAALKLA（两亲模型肽（amphiphilic model peptide）））、SEQ ID NO:21（RRRRRRRRR（Arg9））、SEQ ID NO:22（LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES（LL-37））、SEQ ID NO:23（SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素
（cecropin）P1））、SEQ ID NO:24（ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC（α-防卫素））、SEQ ID NO:25（DHYNCVSSGGQCLYSACPIFTKIQGTCYRGKAKCCK（β-防卫素））、SEQ ID NO:26（RRRPRPPYL
PRPRPPPFFPPRLPPRIPPGFPPRFPPRFPGKR-NH2（PR-39））、SEQ ID NO:27（ILPWKWPWWPWRR-NH2
（indolicidin））、SEQ ID NO:28（AAVALLPAVLLALLAP（RFGF））、SEQ ID NO:29（AALLPVLLAAP（RFGF类似物））、SEQ ID NO:30（RKCRIVVIRVCR（bactenecin））、天蚕素、lycotoxins、
paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽（bombinin-like peptide）（BLP）、组织蛋白酶抑
制素（cathelicidins）、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗（hagfish）肠道抗菌肽（HFIAP）、magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽（melittins）、pleurocidin、H2A肽、爪蟾
肽（Xenopus peptide）、esculentinis-1、caerins，及它们的任何类似物与衍生物。
（ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA））、SEQ ID NO：8（GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-
7））、SEQ ID NO：9（GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2））、SEQ ID NO:10（GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7））、SEQ ID NO:11（GLF EAI
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（penetratin）））、SEQ ID NO:16（GRKKRRQRRRPPQC（Tat片段48-60））、SEQ ID NO:17
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（transportan）））、SEQ ID NO:20（KLALKLALKALKAALKLA（两亲模型肽（amphiphilic model peptide）））、SEQ ID NO:21（RRRRRRRRR（Arg9））、SEQ ID NO:22（LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES（LL-37））、SEQ ID NO:23（SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素
（cecropin）P1））、SEQ ID NO:24（ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC（α-防卫素））、SEQ ID NO:25（DHYNCVSSGGQCLYSACPIFTKIQGTCYRGKAKCCK（β-防卫素））、SEQ ID NO:26（RRRPRPPYL
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paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽（bombinin-like peptide）（BLP）、组织蛋白酶抑
制素（cathelicidins）、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗（hagfish）肠道抗菌肽（HFIAP）、magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽（melittins）、pleurocidin、H2A肽、爪蟾
肽（Xenopus peptide）、esculentinis-1、caerins，及它们的任何类似物与衍生物。
[0160] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述配体是聚集配体。不希望受理论限制，相比于对照而言，聚集配体可将解聚速率降低至少10%、至少20%、至少
30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、或至少90%或以上。
30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、或至少90%或以上。
[0161] 在某些实施方式中，所述配体为荧光报告子或化学发光分子。
[0162] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，纳米粒子同时包含靶向配体与靶分子。不希望受理论限制，将一个纳米粒子上的靶向配体与另一个纳米粒子上的靶
分子结合增强了聚集作用。
分子结合增强了聚集作用。
[0163] 分子连接
[0164] 可使用本领域技术人员已知的各种方法中的任意一种将分子（例如化合物或配体）缀合至纳米粒子、血红细胞或微胶囊。所述分子可与纳米粒子、血红细胞或微胶囊共价
或非共价地结合或缀合。所述分子和所述纳米粒子、血红细胞或微胶囊之间的共价连接可
通过接头介导。所述分子和所述纳米粒子、血红细胞或微胶囊之间的非共价连接可基于离
子相互作用、范德华相互作用、偶极-偶极相互作用、氢键、静电相互作用、和/或形状识别
（shape recognition）相互作用。
或非共价地结合或缀合。所述分子和所述纳米粒子、血红细胞或微胶囊之间的共价连接可
通过接头介导。所述分子和所述纳米粒子、血红细胞或微胶囊之间的非共价连接可基于离
子相互作用、范德华相互作用、偶极-偶极相互作用、氢键、静电相互作用、和/或形状识别
（shape recognition）相互作用。
[0165] 本文所使用的术语“接头”是指连接化合物两部分的有机部分。接头典型地包括直接的键或原子（如氧或硫）、单元（如NH、C(O)、C(O)NH、SO、SO2、SO2NH）或原子链（如取代或非取代的C1-C6烷基、取代或非取代的C2-C6烯基、取代或非取代的C2-C6炔基、取代或非取代的
C6-C12芳基、取代或非取代的C5-C12杂芳基、取代或非取代的C5-C12杂环基、取代或非取代的
C3-C12环烷基，其中，一个或多个亚甲基可被O、S、S(O)、SO2、NH、C(O)间隔或终止）。
C6-C12芳基、取代或非取代的C5-C12杂芳基、取代或非取代的C5-C12杂环基、取代或非取代的
C3-C12环烷基，其中，一个或多个亚甲基可被O、S、S(O)、SO2、NH、C(O)间隔或终止）。
[0166] 可通过亲和结合对将所述分子缀合至所述纳米粒子、血红细胞或微胶囊。术语“亲和结合对”或“结合对”是指特异性相互结合的第一分子和第二分子。亲和结合对的第一成
员缀合至所述分子，而第二成员则缀合至所述纳米粒子、血红细胞或微胶囊。本文所使用的
术语“特异性结合”是指相比其它分子，结合对的第一成员与结合对的第二成员以更高的亲
和力和特异性相互结合。
员缀合至所述分子，而第二成员则缀合至所述纳米粒子、血红细胞或微胶囊。本文所使用的
术语“特异性结合”是指相比其它分子，结合对的第一成员与结合对的第二成员以更高的亲
和力和特异性相互结合。
[0167] 示例性的结合对包括任何半抗原化合物或抗原化合物与相应的抗体或结合部分或其片段的联合（例如，地高辛与抗地高辛；小鼠免疫球蛋白与羊抗小鼠免疫球蛋白）以及
非免疫性结合对（例如，生物素-抗生物素蛋白、生物素-链霉亲和素、激素[例如，甲状腺素
和皮质醇-激素结合蛋白]、受体-受体激动剂、受体-受体拮抗剂（例如，乙酰胆碱受体-乙酰
胆碱或其类似物）、IgG-蛋白A、凝集素-碳水化合物、酶-酶辅因子、酶-酶抑制剂、以及能形
成核酸双链的互补寡核苷酸对）等。所述结合对还可包括带负电的第一分子和带正电的第
二分子。
非免疫性结合对（例如，生物素-抗生物素蛋白、生物素-链霉亲和素、激素[例如，甲状腺素
和皮质醇-激素结合蛋白]、受体-受体激动剂、受体-受体拮抗剂（例如，乙酰胆碱受体-乙酰
胆碱或其类似物）、IgG-蛋白A、凝集素-碳水化合物、酶-酶辅因子、酶-酶抑制剂、以及能形
成核酸双链的互补寡核苷酸对）等。所述结合对还可包括带负电的第一分子和带正电的第
二分子。
[0168] 使用结合对进行缀合的一个实例是生物素-抗生物素蛋白或生物素-链霉亲和素缀合。在这种方法中，所述分子或纳米粒子、血红细胞或微胶囊中的一方进行生物素化，另
一方则与抗生物素蛋白或链霉亲和素相缀合。许多市售的试剂盒也可用于进行分子（如蛋
白质）的生物素化。
一方则与抗生物素蛋白或链霉亲和素相缀合。许多市售的试剂盒也可用于进行分子（如蛋
白质）的生物素化。
[0169] 使用结合对进行缀合的另一个实例是生物素三明治法。参见例如，Davis等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，103：8155-60(2006)。对两种待缀合在一起的分子进行生物素
化，随后使用四价链霉亲和素作为接头使其相缀合。
化，随后使用四价链霉亲和素作为接头使其相缀合。
[0170] 使用结合对进行缀合的又一个实例是双链核酸缀合。在这种方法中，所述分子或纳米粒子、血红细胞或微胶囊中的一方与双链核酸的第一链缀合，另一方则与双链核酸的
第二链缀合。核酸可不受限制地包括确定的序列区段和序列（包括核苷酸、核糖核苷酸、脱
氧核糖核苷酸、核苷酸类似物、经修饰的核苷酸和包含骨架修饰、分支点（branchpoints）以
及非核苷酸残基、基团或桥接的核苷酸）。
第二链缀合。核酸可不受限制地包括确定的序列区段和序列（包括核苷酸、核糖核苷酸、脱
氧核糖核苷酸、核苷酸类似物、经修饰的核苷酸和包含骨架修饰、分支点（branchpoints）以
及非核苷酸残基、基团或桥接的核苷酸）。
[0171] 聚集体的制造
[0172] 在一方面，本发明提供用于制备本文描述的聚集体的方法，所述方法包括：（i）制造多个纳米粒子；（ii）将所述多个纳米粒子聚集成为微米尺寸的粒子。还可进一步对制成
的纳米粒子施加离心，以降低聚集体中单个未结合纳米粒子的浓度。还可进一步对制成的
纳米粒子施加离心，以降低聚集体中单个未结合纳米粒子的浓度。
的纳米粒子施加离心，以降低聚集体中单个未结合纳米粒子的浓度。还可进一步对制成的
纳米粒子施加离心，以降低聚集体中单个未结合纳米粒子的浓度。
[0173] 在聚集后，可通过使用多种本领域技术人员熟知的多种技术选择所需尺寸的粒子，所述技术如尺寸排阻色谱法或使用径迹蚀刻（track etched）过滤器。在一个非限制性
实施例中，可使用具有合适孔尺寸的过滤器过滤聚集的粒子。在另一个非限制性实施例中，
可对聚集的粒子施加密度梯度离心。
实施例中，可使用具有合适孔尺寸的过滤器过滤聚集的粒子。在另一个非限制性实施例中，
可对聚集的粒子施加密度梯度离心。
[0174] 相应地，在某些实施方式中，所述方法进一步包括选择满足如下尺寸要求的聚集粒子的步骤：≥1μm、≥2μm、≥3μm、≥4μm、≥5μm、≥6μm、≥7μm、≥8μm、≥9μm或≥10μm。
[0175] 在某些实施方式中，所述方法进一步包括选择满足如下尺寸要求的聚集粒子的步骤：≤20μm、≤15μm、≤10μm或≤5μm。
[0176] 在某些实施方式中，所述方法进一步包括选择特定尺寸范围的聚集粒子，例如，由1μm至50μm、由1μm至25μm、由1μm至20μm、由1μm至10μm、或由0.5μm至5μm。这可通过首次选择尺寸小于尺寸上限的粒子、并由这些粒子中选择尺寸大于尺寸下限的粒子而实现；反之亦
可。
可。
[0177] 可使用多种方法制造尺寸适于聚集的纳米粒子。这些方法包括气化法（vaporization method）（例如，自由射流膨胀（free jet expansion）、激光气化、火花浸蚀（spark erosion）、电爆炸和化学气相沉积）、涉及力学摩擦的物理方法（例如，由Elan
Nanosystems of Dublin，Ireland开发的珠磨（pearlmilling）技术）以及界面沉积继以溶
剂置换。
Nanosystems of Dublin，Ireland开发的珠磨（pearlmilling）技术）以及界面沉积继以溶
剂置换。
[0178] 溶剂置换法在实验室规模或工业规模上实施起来相对简易、并可制造能穿过0.22μm过滤器的纳米粒子。通过这一方法制得的纳米粒子的尺寸对有机溶剂中聚合物的浓度、
混合速率、和该方法中使用的表面活性剂敏感。尽管使用表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）
的溶剂置换法已产出小的纳米粒子（<100nm），但SDS并不能理想地用于药物制剂。然而，类
似的天然表面活性剂（例如，胆酸或牛磺胆酸（taurocholic acid）盐）可代替SDS以获得类
似尺寸的纳米粒子。牛磺胆酸是由胆酸和牛磺酸形成的缀合物，是一种可完全代谢的磺酸，
具有与SDS非常相似的两亲溶液化学。牛磺胆酸的类似物牛磺熊去氧胆酸
（tauroursodeoxycholic acid，TUDCA）是无毒的，并实际已知具有神经保护特性和抗凋亡
特性。TUDCA是天然形成的胆汁酸，是牛磺酸和熊去氧胆酸（UDCA）的缀合物。UDCA是被批准
用于治疗胆囊结石溶解的药物（ Watson Pharmaceuticals）。其它天然形成
的阴离子表面活性剂（例如半乳糖脑苷脂（galactocerebroside）硫酸盐/酯）、中性表面活
性剂（例如乳糖神经酰胺（lactosylceramide））或两性离子表面活性剂（例如鞘磷脂
（sphingomyelin）、磷脂酰胆碱（phosphatidyl choline）、棕榈酰肉碱（palmitoyl
carnitine））可用于代替SDS或其它已在纳米粒子制剂研究中普遍应用的表面活性剂。可使
用其它通常认为是安全的赋形剂（如用于使加环利定（gacylidine）的碱性形式溶解的赋形
剂）制备纳米粒子。还可使用包括聚氧乙烯脂肪酸酯（例如，聚山梨酯80（例如，
））、12-羟基硬脂酸的聚乙二醇单酯或二酯（例如， HS15）、以
及 在内的赋形剂。还可使用泊洛沙姆如（然而并不限于）泊洛沙姆407。
混合速率、和该方法中使用的表面活性剂敏感。尽管使用表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）
的溶剂置换法已产出小的纳米粒子（<100nm），但SDS并不能理想地用于药物制剂。然而，类
似的天然表面活性剂（例如，胆酸或牛磺胆酸（taurocholic acid）盐）可代替SDS以获得类
似尺寸的纳米粒子。牛磺胆酸是由胆酸和牛磺酸形成的缀合物，是一种可完全代谢的磺酸，
具有与SDS非常相似的两亲溶液化学。牛磺胆酸的类似物牛磺熊去氧胆酸
（tauroursodeoxycholic acid，TUDCA）是无毒的，并实际已知具有神经保护特性和抗凋亡
特性。TUDCA是天然形成的胆汁酸，是牛磺酸和熊去氧胆酸（UDCA）的缀合物。UDCA是被批准
用于治疗胆囊结石溶解的药物（ Watson Pharmaceuticals）。其它天然形成
的阴离子表面活性剂（例如半乳糖脑苷脂（galactocerebroside）硫酸盐/酯）、中性表面活
性剂（例如乳糖神经酰胺（lactosylceramide））或两性离子表面活性剂（例如鞘磷脂
（sphingomyelin）、磷脂酰胆碱（phosphatidyl choline）、棕榈酰肉碱（palmitoyl
carnitine））可用于代替SDS或其它已在纳米粒子制剂研究中普遍应用的表面活性剂。可使
用其它通常认为是安全的赋形剂（如用于使加环利定（gacylidine）的碱性形式溶解的赋形
剂）制备纳米粒子。还可使用包括聚氧乙烯脂肪酸酯（例如，聚山梨酯80（例如，
））、12-羟基硬脂酸的聚乙二醇单酯或二酯（例如， HS15）、以
及 在内的赋形剂。还可使用泊洛沙姆如（然而并不限于）泊洛沙姆407。
[0179] 可对多种表面活性剂进行取样以确定用于小型（例如，<200nm）、非毒性的包含药物的纳米粒子的最优表面活性剂。表面活性剂浓度也影响纳米粒子形成、纳米粒子的密度
和尺寸。可针对各聚合物组合物、所需药物浓度和预期用途来优化表面活性剂浓度。
和尺寸。可针对各聚合物组合物、所需药物浓度和预期用途来优化表面活性剂浓度。
[0180] 在先前用于纳米粒子制剂的多种有机溶剂中，丙酮由于其在制备可滤过的纳米粒子方面的在先用途、其低毒性以及其操作便利性而引人注意。由L-乳酸和D,L-乳酸组成的
多种聚合物（PLA）或乳酸和乙醇酸的混合物组成的聚合物（聚(丙交酯-共-乙交酯)）（PLGA）
都可溶于丙酮，100%L-PLA和100%乙醇酸（PGA）例外。由100%L-PLA组成的聚合物可溶于二氯
甲烷；由100%L-PLA或100%PGA组成的聚合物可溶于六氟异丙醇（HFIP）。
多种聚合物（PLA）或乳酸和乙醇酸的混合物组成的聚合物（聚(丙交酯-共-乙交酯)）（PLGA）
都可溶于丙酮，100%L-PLA和100%乙醇酸（PGA）例外。由100%L-PLA组成的聚合物可溶于二氯
甲烷；由100%L-PLA或100%PGA组成的聚合物可溶于六氟异丙醇（HFIP）。
[0181] 当使用溶剂置换法制备纳米粒子时，可使用快速混合。在某些此种实施方式中，典型地使用500rpm或更高的搅拌速率。混合期间较慢的溶剂交换速率产生较大的粒子。使用
脉动压力梯度（fluctuating pressure gradient）产生高的雷诺数并在充分发展的湍流中
高效混合。通过达到与高雷诺数时湍流混合所达到的相类似的离心粒子加速度，使用超重
力反应性混合，已经产生小的纳米粒子（10nm）。
脉动压力梯度（fluctuating pressure gradient）产生高的雷诺数并在充分发展的湍流中
高效混合。通过达到与高雷诺数时湍流混合所达到的相类似的离心粒子加速度，使用超重
力反应性混合，已经产生小的纳米粒子（10nm）。
[0182] 声波法（sonication）是一种可提供湍流混合的方法。声波法是最常与复乳（double emulsion）纳米粒子制造法使用的方法，但较不适于溶剂置换法。声波法可通过将
两股液流（例如一股液流溶有粒子聚合材料、另一股液流含有将使粒子从溶液中析出并凝
固的药物或药物组合）混合来进行，这两股液流通过在液流交叉处具有管内（inline）超声
振动板的管。在纳米粒子制造中还采用振动雾化来形成非常小的液滴。例如，由Dimatix，
Inc.（Santa Clara，Calif.）的Spectra Printing Division（Lebanon，N.H.）制造的基于
DMP-2800MEMS的压电微泵（piezoelectric micropump）（inkjet）系统以100,000pL/s的速
率形成10-50pL（1-5×10-11升）尺寸的液滴。微泵（inkjet系统）提供均匀混合，并能将所述
方法可靠地从实验室规模转化至生产规模，但在使用压电微泵制造小的装载有聚合物的液
滴时，小于200nm的纳米粒子的制造仍将依靠混合动力学（即，混合产生的液体中间体或所
沉淀的固体的凝固时间）。温度、表面活性剂和溶剂组成改变制造的纳米粒子的密度和凝固
动力学，因而在使用这一方法时是重要的变量。
两股液流（例如一股液流溶有粒子聚合材料、另一股液流含有将使粒子从溶液中析出并凝
固的药物或药物组合）混合来进行，这两股液流通过在液流交叉处具有管内（inline）超声
振动板的管。在纳米粒子制造中还采用振动雾化来形成非常小的液滴。例如，由Dimatix，
Inc.（Santa Clara，Calif.）的Spectra Printing Division（Lebanon，N.H.）制造的基于
DMP-2800MEMS的压电微泵（piezoelectric micropump）（inkjet）系统以100,000pL/s的速
率形成10-50pL（1-5×10-11升）尺寸的液滴。微泵（inkjet系统）提供均匀混合，并能将所述
方法可靠地从实验室规模转化至生产规模，但在使用压电微泵制造小的装载有聚合物的液
滴时，小于200nm的纳米粒子的制造仍将依靠混合动力学（即，混合产生的液体中间体或所
沉淀的固体的凝固时间）。温度、表面活性剂和溶剂组成改变制造的纳米粒子的密度和凝固
动力学，因而在使用这一方法时是重要的变量。
[0183] 可通过本领域技术人员可用并熟知的许多方法来诱导所述纳米粒子形成聚集体。许多疏水性纳米粒子（如基于PLGA的纳米粒子）在水溶液中可自聚集。参见例如，
C.E.Astete与C.M.Sabliov，J.Biomater.Sci，Polymer Ed.17:247(2006)。相应地，包含所
述纳米粒子的浓溶液可在室温下或更低温度下贮存一段时间。在某些实施方式中，贮存温
度是4℃或更低。不受限制地，贮存时间可持续数分钟至数天或数周。例如，贮存时间为1天、
2天、3天、4天、5天、6天、1周、2周或以上。
C.E.Astete与C.M.Sabliov，J.Biomater.Sci，Polymer Ed.17:247(2006)。相应地，包含所
述纳米粒子的浓溶液可在室温下或更低温度下贮存一段时间。在某些实施方式中，贮存温
度是4℃或更低。不受限制地，贮存时间可持续数分钟至数天或数周。例如，贮存时间为1天、
2天、3天、4天、5天、6天、1周、2周或以上。
[0184] 或者，纳米粒子的浓溶液可喷雾干燥以形成聚集体。参见例如，Sung等，Pharm.Res.26:1847(2009)和Tsapis等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，99:12001(2002)。
[0185] 所述浓溶液可包含2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、11mg/ml、12mg/ml、13mg/ml、14mg/ml、15mg/ml、16mg/ml、17mg/ml、18mg/ml、
19mg/ml、20mg/ml或以上的纳米粒子。
19mg/ml、20mg/ml或以上的纳米粒子。
[0186] 其它形成聚集体的方法包括但不仅限于：w/o/w乳液法和简单（simple）溶剂置换法。
[0187] 在一个非限制性实施例中，所述纳米粒子由PLGA聚合物制造。所述PLGA聚合物可与PEG和/或配体相缀合。相应地，在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所
述纳米粒子由PEG-PLGA聚合物制造，所述聚合物缀合有肽CREKA（SEQ ID NO:1）、CRKRLDRNK
（SEQ ID NO:2）、或CHVLWSTRC（SEQ ID NO:3）。CREKA（SEQ ID NO:1）肽已知用于靶向（home in to）许多肿瘤。不希望受理论限制，CREKA（SEQ ID NO:1）肽识别血凝块，所述凝块存在于
肿瘤血管内但在正常组织的血管内并不存在。另外，CREKA（SEQ ID NO:1）肽用于靶向位于
动脉粥样硬化斑块内腔表面（luminal surface）的纤维蛋白。
述纳米粒子由PEG-PLGA聚合物制造，所述聚合物缀合有肽CREKA（SEQ ID NO:1）、CRKRLDRNK
（SEQ ID NO:2）、或CHVLWSTRC（SEQ ID NO:3）。CREKA（SEQ ID NO:1）肽已知用于靶向（home in to）许多肿瘤。不希望受理论限制，CREKA（SEQ ID NO:1）肽识别血凝块，所述凝块存在于
肿瘤血管内但在正常组织的血管内并不存在。另外，CREKA（SEQ ID NO:1）肽用于靶向位于
动脉粥样硬化斑块内腔表面（luminal surface）的纤维蛋白。
[0188] CRKRLDRNK（SEQ ID NO:2）肽是靶向发炎内皮的已知肽。
[0189] CHVLWSTRC（SEQ ID NO:3）肽是靶向胰岛内皮细胞的已知肽。
[0190] 狭窄的治疗
[0191] 在另一方面，本发明提供一种用于对受试者的狭窄和/或狭窄病变进行治疗的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予本文所述的聚集体。
[0192] 本文所使用的术语“狭窄”是指体内中空通道（例如，导管（duct）或管道（canal））收缩或缩窄（stricture）。术语“血管狭窄”是指循环系统内腔或管道闭塞或收缩。血管狭窄
经常归因于脂肪沉积（如在动脉粥样硬化的情况下）、血管平滑肌细胞和内皮细胞过度迁移
和增殖、由于形成凝块而致的急性收缩、或归因于血管畸形。本文所使用的术语“血管狭窄”
包括闭塞病变。动脉对狭窄尤为敏感。本文所使用的术语“狭窄”特别地包括初次狭窄和再
狭窄。在管道或内腔中的堵塞的典型实例包括由疾病或损伤导致的、或在伤口愈合位点处
的凝块形式的血液组分如血小板、纤维蛋白和/或其它细胞组分的聚集物、原位或栓塞的粥
样化物质或斑块。形成凝块的条件包括血栓、栓塞和极端情况下的异常凝聚状态。其它血管
堵塞包括由循环系统内的微生物或大生物感染（如真菌或心丝虫（heartworm）感染）导致的
堵塞。由于RBC镰状化并堆积形成大于微血管内腔的结构，镰状细胞病也可导致血管阻塞。
因此，在镰状细胞危象（crisis）期间，RBC改变形状/硬度并可使血管闭塞。这一现象还存在
于疟疾的危象阶段。
经常归因于脂肪沉积（如在动脉粥样硬化的情况下）、血管平滑肌细胞和内皮细胞过度迁移
和增殖、由于形成凝块而致的急性收缩、或归因于血管畸形。本文所使用的术语“血管狭窄”
包括闭塞病变。动脉对狭窄尤为敏感。本文所使用的术语“狭窄”特别地包括初次狭窄和再
狭窄。在管道或内腔中的堵塞的典型实例包括由疾病或损伤导致的、或在伤口愈合位点处
的凝块形式的血液组分如血小板、纤维蛋白和/或其它细胞组分的聚集物、原位或栓塞的粥
样化物质或斑块。形成凝块的条件包括血栓、栓塞和极端情况下的异常凝聚状态。其它血管
堵塞包括由循环系统内的微生物或大生物感染（如真菌或心丝虫（heartworm）感染）导致的
堵塞。由于RBC镰状化并堆积形成大于微血管内腔的结构，镰状细胞病也可导致血管阻塞。
因此，在镰状细胞危象（crisis）期间，RBC改变形状/硬度并可使血管闭塞。这一现象还存在
于疟疾的危象阶段。
[0193] 术语“再狭窄”是指在对初次狭窄进行治疗并取得明显成功后再次发生狭窄。例如，在血管狭窄背景下的“再狭窄”，是指在对血管狭窄进行治疗（例如通过球囊血管成形术
（balloon angioplasty）去除脂肪沉积）取得明显成功后再次发生血管狭窄。再狭窄的成因
之一是内膜增生（intimal hyperplasia）。术语“内膜增生”可与“新生内膜增生
（neointimal hyperplasia）”和“新生内膜形成（neointimal formation）”互换使用，是指
血管最内部一层、即内膜由于血管平滑肌细胞和内皮细胞过度增殖和迁移而变厚。在再狭
窄期间发生的多种变化常统称为“血管壁重建”。
（balloon angioplasty）去除脂肪沉积）取得明显成功后再次发生血管狭窄。再狭窄的成因
之一是内膜增生（intimal hyperplasia）。术语“内膜增生”可与“新生内膜增生
（neointimal hyperplasia）”和“新生内膜形成（neointimal formation）”互换使用，是指
血管最内部一层、即内膜由于血管平滑肌细胞和内皮细胞过度增殖和迁移而变厚。在再狭
窄期间发生的多种变化常统称为“血管壁重建”。
[0194] 术语“球囊血管成形术”和“经皮腔内冠状动脉成形术（percutaneous transluminal coronary angioplasty，PTCA）”经常可互换使用，是指用于从冠状动脉处去
除斑块的基于非外科的导管治疗。由于血液流动阻力升高，狭窄或再狭窄经常导致高血压。
除斑块的基于非外科的导管治疗。由于血液流动阻力升高，狭窄或再狭窄经常导致高血压。
[0195] 术语“高血压”是指异常高的血压，即，超出正常范围的上限值。
[0196] 狭窄和/或狭窄病变的某些示例性起因包括但不仅限于：外伤（trauma）或损伤（injury）、动脉粥样硬化、先天缺陷、糖尿病、医源性、感染、炎症、局部缺血（ischemia）、肿瘤（neoplasm）、血管痉挛（vasospasm）、冠状动脉或静脉痉挛、Raynaud现象、中风、血液凝
结、Moyamoya病、Takayasu病、结节性多动脉炎（polyarteritis nodosa）、播散性红斑狼疮
（disseminated lupus erythematous）、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒
（fluorosis）、体外（extracorporeal）装置（例如，血液透析、血液泵等）、血栓和/或栓塞障碍、镰状细胞病，以及上述起因的任意组合。
结、Moyamoya病、Takayasu病、结节性多动脉炎（polyarteritis nodosa）、播散性红斑狼疮
（disseminated lupus erythematous）、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒
（fluorosis）、体外（extracorporeal）装置（例如，血液透析、血液泵等）、血栓和/或栓塞障碍、镰状细胞病，以及上述起因的任意组合。
[0197] 本文所使用的术语“血栓和/或栓塞障碍”意味着由因血栓或栓塞而致的血管闭塞或部分闭塞导致的急性或慢性病理状态或状况。类似地，术语“血栓或栓塞闭塞”意味着因
血栓或栓塞而致的血管闭塞或部分闭塞。血栓和栓塞障碍的实例包括但不仅限于：脑血栓
和栓塞障碍，如脑梗塞（中风）、短暂性脑缺血发作和血管性痴呆；心脏血栓和栓塞障碍，如
心肌梗塞、急性冠状动脉或静脉综合症、不稳定心绞痛（unstable angina）和局部缺血猝
死；肺栓塞；肺或肾梗塞、外周循环障碍和深静脉血栓形成。
血栓或栓塞而致的血管闭塞或部分闭塞。血栓和栓塞障碍的实例包括但不仅限于：脑血栓
和栓塞障碍，如脑梗塞（中风）、短暂性脑缺血发作和血管性痴呆；心脏血栓和栓塞障碍，如
心肌梗塞、急性冠状动脉或静脉综合症、不稳定心绞痛（unstable angina）和局部缺血猝
死；肺栓塞；肺或肾梗塞、外周循环障碍和深静脉血栓形成。
[0198] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，狭窄或狭窄病变选自于由以下病症所组成的组：间歇性跛行（intermittent claudication，外周动脉狭窄）、心绞痛
（冠状动脉狭窄）、颈动脉狭窄（导致中风和短暂性脑缺血发作）、主动脉狭窄（aortic
stenosis）、钮孔狭窄（buttonhole stenosis）、钙化结节性狭窄（calcific nodular
stenosis）、冠状动脉或静脉口狭窄（coronary ostial stenosis）、双侧主动脉狭窄
（double aortic stenosis）、鱼嘴二尖瓣狭窄（fish-mouth mitral stenosis）、特发性肥
厚性主动脉瓣下狭窄（idiopathic hypertrophic subaortic stenosis）、漏斗部狭窄
（infundibular stenosis）、二尖瓣狭窄（mitral stenosis）、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭
窄（pulmonary stenosis）、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄（subvalvar stenosis）、瓣上狭窄
（supravalvar stenosis）、三尖瓣狭窄（tricuspid stenosis）、肾动脉狭窄、幽门狭窄（胃
流出阻塞）、阻塞性黄疸（obstructive jaundice，胆道狭窄）、肠阻塞、包茎（phimosis）、脑积水（hydrocephalus）、狭窄性腱鞘炎（stenosing tenosynovitis）、椎管狭窄（spinal
stenosis）、声门下狭窄（subglottic stenosis，SGS），以及上述病症的任意组合。
（冠状动脉狭窄）、颈动脉狭窄（导致中风和短暂性脑缺血发作）、主动脉狭窄（aortic
stenosis）、钮孔狭窄（buttonhole stenosis）、钙化结节性狭窄（calcific nodular
stenosis）、冠状动脉或静脉口狭窄（coronary ostial stenosis）、双侧主动脉狭窄
（double aortic stenosis）、鱼嘴二尖瓣狭窄（fish-mouth mitral stenosis）、特发性肥
厚性主动脉瓣下狭窄（idiopathic hypertrophic subaortic stenosis）、漏斗部狭窄
（infundibular stenosis）、二尖瓣狭窄（mitral stenosis）、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭
窄（pulmonary stenosis）、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄（subvalvar stenosis）、瓣上狭窄
（supravalvar stenosis）、三尖瓣狭窄（tricuspid stenosis）、肾动脉狭窄、幽门狭窄（胃
流出阻塞）、阻塞性黄疸（obstructive jaundice，胆道狭窄）、肠阻塞、包茎（phimosis）、脑积水（hydrocephalus）、狭窄性腱鞘炎（stenosing tenosynovitis）、椎管狭窄（spinal
stenosis）、声门下狭窄（subglottic stenosis，SGS），以及上述病症的任意组合。
[0199] 内出血的治疗
[0200] 本文所使用的术语“内出血”是指身体内部发生的流血。这种流血根据所发生的位置（例如，脑、胃、肺）而可能很严重，若不能迅速得到适当的医疗处理，很可能导致死亡和心
博停止。相应地，在一方面，本发明提供用于对受试者中的内出血或出血性障碍进行治疗的
方法，所述方法包括向有需要的受试者给予本文描述的聚集体。根据出血的性质，在流血位
点处或流血位点附近切应力可为高切应力。
博停止。相应地，在一方面，本发明提供用于对受试者中的内出血或出血性障碍进行治疗的
方法，所述方法包括向有需要的受试者给予本文描述的聚集体。根据出血的性质，在流血位
点处或流血位点附近切应力可为高切应力。
[0201] 内出血可由下列原因导致：外伤、高血压导致的血管破裂、感染（例如，Ebola或Marburg）、癌症、坏血病（scurvy）、肝细胞癌、自身免疫性血小板减少症（autoimmune
thrombocytopenia）、异位妊娠（ectopic pregnancy）、恶性体温过低（malignant
hypothermia）、卵巢囊肿（ovarian cysts）、肝癌、维生素K缺乏症、血友病（hemophilia）、或药物副作用。
thrombocytopenia）、异位妊娠（ectopic pregnancy）、恶性体温过低（malignant
hypothermia）、卵巢囊肿（ovarian cysts）、肝癌、维生素K缺乏症、血友病（hemophilia）、或药物副作用。
[0202] 本文所使用的术语“出血性障碍”是指由受损的血管流血导致的急性或慢性病理状态或状况。出血性障碍的实例包括但不仅限于：脑出血如脑内出血（intracerebral
hemorrhage，ICH）、蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）和出血性中风。
hemorrhage，ICH）、蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）和出血性中风。
[0203] 本文所述的聚集体也能用于体外装置，如血液透析装置（还可用于人造血管/瓣膜（valve）等），这些装置可导致切应力升高，从而诱导血小板切变活化等。可将本文所述的聚
集体加至所述体外装置中，从而在这些体外装置中存在升高的切应力时释放抗血小板药
物。
集体加至所述体外装置中，从而在这些体外装置中存在升高的切应力时释放抗血小板药
物。
[0204] 所述聚集体还可用于检测体内/体外装置内的异常流动。例如通过测量标记分子的释放速率和/或释放量进行检测。
[0205] 另外，所述聚集体还可与栓塞术治疗联合使用。栓塞术是指将多种物质引入循环以使血管闭塞，从而阻止或预防出血；通过闭塞结构、肿瘤或器官的血液供给使其失活；或
减少流至动静脉畸形的血液。因此，栓塞术包括通过在血管内有目的地引入栓子（emboli）
而选择性闭塞血管。栓塞术用于治疗许多影响人体不同器官的状况，包括动静脉畸形、脑动
脉瘤（cerebral aneurysm）、胃肠出血、鼻出血（epistaxis）、原发性产后出血（primary
post-partum hemorrhage）、手术失血，减缓或停止血液供给并由此降低肝病变、肾病变、子
宫肌瘤（uterine fibroids）、以及肿瘤尺寸。
减少流至动静脉畸形的血液。因此，栓塞术包括通过在血管内有目的地引入栓子（emboli）
而选择性闭塞血管。栓塞术用于治疗许多影响人体不同器官的状况，包括动静脉畸形、脑动
脉瘤（cerebral aneurysm）、胃肠出血、鼻出血（epistaxis）、原发性产后出血（primary
post-partum hemorrhage）、手术失血，减缓或停止血液供给并由此降低肝病变、肾病变、子
宫肌瘤（uterine fibroids）、以及肿瘤尺寸。
[0206] 药物组合物
[0207] 为了向受试者给药，可以药学上可接受的组合物的形式来提供聚集体。这些药学上可接受的组合物包含与一种或多种药学上可接受的载体（添加剂）和/或稀释剂共同配制
而成的聚集体。如下详述，本发明的药物组合物可被具体配制用于以固体或液体形式给药，
包括适宜于下列给药的形式：（1）口服给药，例如顿服药（drenches，水性或非水性的溶液或
悬浮液）、灌服药（gavage）、锭剂（lozenge）、糖衣剂（dragee）、胶囊剂、丸剂、片剂（例如，目标是用于口含吸收、舌下吸收和全身吸收的片剂）、大丸剂（boluse）、散剂、颗粒剂、应用于
舌部的膏剂；（2）胃肠道外给药，例如，作为如无菌溶液或悬浮液或缓释制剂经皮下注射
（subcutaneous）、肌内注射（intramuscular）、静脉注射（intravenous）或硬膜外注射
（epidural injection）给药；（3）局部施用，例如，作为霜剂、软膏剂、或控释贴剂或喷雾剂施用于皮肤；（4）阴道内给药或直肠内给药，例如作为阴道栓剂（pessary）、霜剂或泡沫剂；
（5）舌下给药（sublingually）；（6）眼部给药（ocularly）；（7）经皮给药（transdermally）；
（8）经粘膜给药（transmucosally）；或（9）鼻部给药（nasally）。此外，可使用药物递送系统将化合物注射入或植入患者体内。参见例如，Urquhart等，
Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.24：199-236(1984)；Lewis编著，“Controlled Release of
Pesticides and Pharmaceuticals”(Plenum Press，New York，1981)；美国专利No.3,773,
919；以及美国专利No.353,270,960，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
而成的聚集体。如下详述，本发明的药物组合物可被具体配制用于以固体或液体形式给药，
包括适宜于下列给药的形式：（1）口服给药，例如顿服药（drenches，水性或非水性的溶液或
悬浮液）、灌服药（gavage）、锭剂（lozenge）、糖衣剂（dragee）、胶囊剂、丸剂、片剂（例如，目标是用于口含吸收、舌下吸收和全身吸收的片剂）、大丸剂（boluse）、散剂、颗粒剂、应用于
舌部的膏剂；（2）胃肠道外给药，例如，作为如无菌溶液或悬浮液或缓释制剂经皮下注射
（subcutaneous）、肌内注射（intramuscular）、静脉注射（intravenous）或硬膜外注射
（epidural injection）给药；（3）局部施用，例如，作为霜剂、软膏剂、或控释贴剂或喷雾剂施用于皮肤；（4）阴道内给药或直肠内给药，例如作为阴道栓剂（pessary）、霜剂或泡沫剂；
（5）舌下给药（sublingually）；（6）眼部给药（ocularly）；（7）经皮给药（transdermally）；
（8）经粘膜给药（transmucosally）；或（9）鼻部给药（nasally）。此外，可使用药物递送系统将化合物注射入或植入患者体内。参见例如，Urquhart等，
Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.24：199-236(1984)；Lewis编著，“Controlled Release of
Pesticides and Pharmaceuticals”(Plenum Press，New York，1981)；美国专利No.3,773,
919；以及美国专利No.353,270,960，以引用的方式将上述文献内容全部并入本文。
[0208] 本文所使用的术语“药学上可接受的”是指在健全的（sound）医学判断范围内，适合用于与人类和动物组织相接触而无过度的毒性、刺激、过敏反应或者其它问题或并发症
（complication），具有合理的收益/风险比的化合物、材料、组合物和/或剂型。
（complication），具有合理的收益/风险比的化合物、材料、组合物和/或剂型。
[0209] 本文所使用的术语“药学上可接受的载体”意味着参与将主题化合物从生物体的一个器官或部分搬运或转运至生物体的另一器官或部分的药学上可接受的材料、组合物或
辅料（vehicle），如液态或固态的填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂（manufacturing aid，
如，润滑剂、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌、或硬脂酸）、或溶剂包封材料。从与制剂
的其它成分相容以及对患者无害的意义上来说，各载体必须是“可接受的”。一些可作为药
学上可接受的载体的材料的实例包括：（1）糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；（2）淀粉，如玉米淀粉和土豆淀粉；（3）纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤
维素和醋酸纤维素；（4）西黄蓍胶（tragacanth）粉；（5）麦芽；（6）明胶；（7）润滑剂，如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠和滑石；（8）赋形剂，如可可脂和栓蜡；（9）油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；（10）二醇，如丙二醇；（11）多元醇，如甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇（PEG）；（12）酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；（13）琼脂；（14）缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；（15）海藻酸；（16）无热原（pyrogen-free）的水；（17）等渗盐水；（18）林格氏溶液；（19）乙醇；（20）pH缓冲溶液；（21）聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；（22）填充剂，如多肽和氨基酸；（23）血清组分，如血清白蛋白、HDL和LDL；（24）C2-C12醇，如乙醇；以及（25）其它可用于药物制剂中的无毒相容物质。湿润剂、着色剂、隔离剂（release agent）、包衣剂、甜
味剂、增香剂、芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于制剂中。本文所使用的术语如“赋形
剂”、“载体”或“药学上可接受的载体”等可互换使用。
辅料（vehicle），如液态或固态的填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂（manufacturing aid，
如，润滑剂、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌、或硬脂酸）、或溶剂包封材料。从与制剂
的其它成分相容以及对患者无害的意义上来说，各载体必须是“可接受的”。一些可作为药
学上可接受的载体的材料的实例包括：（1）糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；（2）淀粉，如玉米淀粉和土豆淀粉；（3）纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤
维素和醋酸纤维素；（4）西黄蓍胶（tragacanth）粉；（5）麦芽；（6）明胶；（7）润滑剂，如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠和滑石；（8）赋形剂，如可可脂和栓蜡；（9）油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；（10）二醇，如丙二醇；（11）多元醇，如甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇（PEG）；（12）酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；（13）琼脂；（14）缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；（15）海藻酸；（16）无热原（pyrogen-free）的水；（17）等渗盐水；（18）林格氏溶液；（19）乙醇；（20）pH缓冲溶液；（21）聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；（22）填充剂，如多肽和氨基酸；（23）血清组分，如血清白蛋白、HDL和LDL；（24）C2-C12醇，如乙醇；以及（25）其它可用于药物制剂中的无毒相容物质。湿润剂、着色剂、隔离剂（release agent）、包衣剂、甜
味剂、增香剂、芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于制剂中。本文所使用的术语如“赋形
剂”、“载体”或“药学上可接受的载体”等可互换使用。
[0210] 在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，给予受试者治疗有效量的治疗剂。本文所使用的短语“治疗有效量”意味着以合理的收益/风险比可应用至任何医学
治疗，至少在动物体内的细胞亚群中有效产生某些所需的治疗效果的治疗剂的量。例如，向
受试者给予的治疗剂的量足以在狭窄中产生统计学上显著的可测量的变化。
治疗，至少在动物体内的细胞亚群中有效产生某些所需的治疗效果的治疗剂的量。例如，向
受试者给予的治疗剂的量足以在狭窄中产生统计学上显著的可测量的变化。
[0211] 本领域技术人员完全有能力对治疗有效量进行确定。一般而言，治疗有效量可随受试者的病史、年龄、状况、性别和受试者医学状况的严重程度与类型以及其它药物活性剂
的给药而变化。
的给药而变化。
[0212] 本文所使用的术语“给药/给予”是指通过使得至少部分地将组合物定位于期望的位点以产生期望效果的方法或途径，将组合物放置入受试者体内。适于本发明方法的给药
途径包括局部和全身给药。一般而言，局部给药导致与受试者整个身体相比将更多治疗剂
递送至特定位点；而全身给药导致将所述治疗剂递送至受试者的基本整个身体。
途径包括局部和全身给药。一般而言，局部给药导致与受试者整个身体相比将更多治疗剂
递送至特定位点；而全身给药导致将所述治疗剂递送至受试者的基本整个身体。
[0213] 可通过本领域已知的任何合适途径向受试者给药，所述途径包括但不仅限于：口服或胃肠外途径，包括静脉内给药、肌肉内给药、皮下给药、经皮给药、气道给药（气雾剂）、
肺部给药、鼻部给药、直肠给药和局部给药（包括口腔含化给药和舌下给药）。
肺部给药、鼻部给药、直肠给药和局部给药（包括口腔含化给药和舌下给药）。
[0214] 示例性的给药模式包括但不仅限于：注射、输液、滴注、吸入或摄食。“注射”不受限制地包括：静脉注射和输液、肌内注射和输液、动脉内注射和输液、鞘内注射和输液、室内注
射和输液、囊内注射和输液、眼内注射和输液、心内注射和输液、真皮内注射和输液、腹膜内
注射和输液、经气管注射和输液、皮下注射和输液、表皮下注射和输液、关节内注射和输液、
囊下注射和输液、蛛网膜下注射和输液、脊髓内注射和输液、脑脊髓内注射和输液以及胸骨
内注射和输液。在本文描述的方面的某些实施方式中，通过静脉内输液或注射给药。
射和输液、囊内注射和输液、眼内注射和输液、心内注射和输液、真皮内注射和输液、腹膜内
注射和输液、经气管注射和输液、皮下注射和输液、表皮下注射和输液、关节内注射和输液、
囊下注射和输液、蛛网膜下注射和输液、脊髓内注射和输液、脑脊髓内注射和输液以及胸骨
内注射和输液。在本文描述的方面的某些实施方式中，通过静脉内输液或注射给药。
[0215] 本文所使用的术语“受试者”是指人或动物。通常，所述动物为脊椎动物，如灵长类动物、啮齿动物、家畜或狩猎动物（game animal）。灵长类动物包括黑猩猩、食蟹猴、蜘蛛猴
和猕猴（如恒河猴）。啮齿动物包括小鼠、大鼠、旱獭、雪貂、兔和仓鼠。家畜和狩猎动物包括
牛、马、猪、鹿、野牛、水牛、猫科物种（如，家猫）、犬科物种（如，狗、狐狸、狼）、鸟类物种（如，鸡、鸸鹋（emu）、鸵鸟）和鱼类（如，鳟鱼、鲶鱼和鲑鱼）。患者或受试者包括前面所述的任何子集，例如，一个或多个组或物种（如人类、灵长类动物或啮齿动物）的上述所有。在本文描述
的方面的特定的实施方式中，受试者是哺乳动物，例如，灵长类动物、如人类。术语“患者”和
“受试者”在本文中可互换使用。受试者可以为雄性或雌性。
和猕猴（如恒河猴）。啮齿动物包括小鼠、大鼠、旱獭、雪貂、兔和仓鼠。家畜和狩猎动物包括
牛、马、猪、鹿、野牛、水牛、猫科物种（如，家猫）、犬科物种（如，狗、狐狸、狼）、鸟类物种（如，鸡、鸸鹋（emu）、鸵鸟）和鱼类（如，鳟鱼、鲶鱼和鲑鱼）。患者或受试者包括前面所述的任何子集，例如，一个或多个组或物种（如人类、灵长类动物或啮齿动物）的上述所有。在本文描述
的方面的特定的实施方式中，受试者是哺乳动物，例如，灵长类动物、如人类。术语“患者”和
“受试者”在本文中可互换使用。受试者可以为雄性或雌性。
[0216] 优选地，受试者是哺乳动物。所述哺乳动物可以是人、非人灵长类动物、小鼠、大鼠、狗、猫、马或牛，但不仅限于这些实例。除人以外的哺乳动物可有利地用作代表与自身免
疫病或炎症相关的障碍的动物模型的受试者。此外，本文描述的方法和组合物可用于治疗
家畜和/或宠物。
疫病或炎症相关的障碍的动物模型的受试者。此外，本文描述的方法和组合物可用于治疗
家畜和/或宠物。
[0217] 受试者可为在先前已经诊断有或鉴定为遭受或患有以狭窄或狭窄病变为特征的疾病或障碍、或遭受或患有血液动力学障碍或状况的受试者。
[0218] 受试者可为目前正在对狭窄、狭窄病变、以狭窄或狭窄病变为特征的疾病或障碍、或血液动力学障碍或状况进行治疗的受试者。
[0219] 受试者可为在先前已经诊断有或鉴定为遭受或患有内出血的受试者。
[0220] 受试者可为正在对内出血进行治疗的受试者。
[0221] 在本文描述的方面的某些实施方式中，所述方法进一步包括在根据本发明的方法开始治疗之前，对受试者的狭窄、狭窄病变、内出血、或血液动力学障碍或状况进行诊断。
[0222] 在本文描述的方面的某些实施方式中，所述方法进一步包括在根据本发明的方法开始治疗之前，对患有狭窄、狭窄病变、内出血、或血液动力学障碍或状况的受试者进行选
择。
择。
[0223] 可在细胞培养或实验动物中通过标准药学程序测定毒性和疗效，例如测定LD50（使50%的群体致死的剂量）和ED50（对50%的群体在治疗上有效的剂量）。毒性和疗效之间的
剂量比为治疗指数，可以用LD50/ED50的比值来表示。优选显示出治疗指数大的组合物。
剂量比为治疗指数，可以用LD50/ED50的比值来表示。优选显示出治疗指数大的组合物。
[0224] 本文所使用的术语ED表示有效剂量，并与动物模型相联系使用。术语EC表示有效浓度并与体外模型相联系使用。
[0225] 可将由细胞培养分析和动物研究得到的数据用于得出人用剂量的范围。该化合物的剂量优选处于包括ED50并几乎没有毒性或没有毒性的循环浓度范围内。该剂量可在这一
范围内根据所使用的剂型和所利用的给药途径而变化。
范围内根据所使用的剂型和所利用的给药途径而变化。
[0226] 可由细胞培养分析初步评估所述治疗有效剂量。可在动物模型中得出达到循环血浆浓度范围的剂量，所述范围包括在细胞培养中测定的IC50（即，达到症状的半最大抑制
（half-maximum inhibition）的治疗剂浓度）。可通过例如高效液相色谱测定血浆中的水
平。可通过合适的生物分析监测任何特定剂量的效果。
（half-maximum inhibition）的治疗剂浓度）。可通过例如高效液相色谱测定血浆中的水
平。可通过合适的生物分析监测任何特定剂量的效果。
[0227] 可由医师确定剂量，如果有必要的话，可将剂量调整至适合所观察到的治疗效果。一般而言，给予组合物以使得给予的治疗剂的剂量为1μg/kg至150mg/kg、1μg/kg至100mg/
kg、1μg/kg至50mg/kg、1μg/kg至20mg/kg、1μg/kg至10mg/kg、1μg/kg至1mg/kg、100μg/kg至
100mg/kg、100μg/kg至50mg/kg、100μg/kg至20mg/kg、100μg/kg至10mg/kg、100μg/kg至1mg/kg、1mg/kg至100mg/kg、1mg/kg至50mg/kg、1mg/kg至20mg/kg、1mg/kg至10mg/kg、10mg/kg至
100mg/kg、10mg/kg至50mg/kg、或10mg/kg至20mg/kg。将会理解的是，这里给出的范围包含
了所有的中间范围，例如：1mg/kg至10mg/kg的范围包括1mg/kg至2mg/kg、1mg/kg至3mg/kg、
1mg/kg至4mg/kg、1mg/kg至5mg/kg、1mg/kg至6mg/kg、1mg/kg至7mg/kg、1mg/kg至8mg/kg、
1mg/kg至9mg/kg、2mg/kg至10mg/kg、3mg/kg至10mg/kg、4mg/kg至10mg/kg、5mg/kg至10mg/
kg、6mg/kg至10mg/kg、7mg/kg至10mg/kg、8mg/kg至10mg/kg、9mg/kg至10mg/kg等。将进一步
理解的是，上述给定范围中间的范围也在本发明的范围内，例如，在1mg/kg至10mg/kg的范
围内包含了例如2mg/kg至8mg/kg、3mg/kg至7mg/kg、4mg/kg至6mg/kg等范围。
kg、1μg/kg至50mg/kg、1μg/kg至20mg/kg、1μg/kg至10mg/kg、1μg/kg至1mg/kg、100μg/kg至
100mg/kg、100μg/kg至50mg/kg、100μg/kg至20mg/kg、100μg/kg至10mg/kg、100μg/kg至1mg/kg、1mg/kg至100mg/kg、1mg/kg至50mg/kg、1mg/kg至20mg/kg、1mg/kg至10mg/kg、10mg/kg至
100mg/kg、10mg/kg至50mg/kg、或10mg/kg至20mg/kg。将会理解的是，这里给出的范围包含
了所有的中间范围，例如：1mg/kg至10mg/kg的范围包括1mg/kg至2mg/kg、1mg/kg至3mg/kg、
1mg/kg至4mg/kg、1mg/kg至5mg/kg、1mg/kg至6mg/kg、1mg/kg至7mg/kg、1mg/kg至8mg/kg、
1mg/kg至9mg/kg、2mg/kg至10mg/kg、3mg/kg至10mg/kg、4mg/kg至10mg/kg、5mg/kg至10mg/
kg、6mg/kg至10mg/kg、7mg/kg至10mg/kg、8mg/kg至10mg/kg、9mg/kg至10mg/kg等。将进一步
理解的是，上述给定范围中间的范围也在本发明的范围内，例如，在1mg/kg至10mg/kg的范
围内包含了例如2mg/kg至8mg/kg、3mg/kg至7mg/kg、4mg/kg至6mg/kg等范围。
[0228] 在某些实施方式中，以某一剂量给予所述组合物以使在给药后15min、30min、1小时、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时或以上之后，治疗剂或其代谢物具有以下体内浓度：低于500nM、低于400nM、低
于300nM、低于250nM、低于200nM、低于150nM、低于100nM、低于50nM、低于25nM、低于20nM、低于10nM、低于5nM、低于1nM、低于0.5nM、低于0.1nM、低于0.05nM、低于0.01nM、低于0.005nM、低于0.001nM。
于300nM、低于250nM、低于200nM、低于150nM、低于100nM、低于50nM、低于25nM、低于20nM、低于10nM、低于5nM、低于1nM、低于0.5nM、低于0.1nM、低于0.05nM、低于0.01nM、低于0.005nM、低于0.001nM。
[0229] 关于治疗持续时间和频率，对熟练的临床医师而言，一般对受试者进行监测以确定所述治疗何时提供治疗效益，并确定是否增加或减少剂量、是否增加或减少给药频率、是
否中止治疗、是否恢复治疗或是否对治疗方案进行其它改变。给药计划可根据多个临床因
素（如，受试者对治疗剂的敏感性）在一周一次至一天一次的范围内变动。可每天或每三天、
四天、五天、或六天给予所需的剂量。可一次给予期望的剂量，或分成亚剂量（subdose，例
如，2-4份亚剂量）并在一段时间内（例如，以一天中的合适间隔或其它合适的计划）给予期
望的剂量。这样的亚剂量可以采用单位剂型进行给药。在本文描述的方面的某些实施方式
中，给药是长期的，例如，在数周或数月的时间段内每天给予一份或多份剂量。给药计划的
实例为：在1周、2周、3周、4周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月或以上的时间段内每日给予1次、每日给予2次、每日给予3次或每日给予4次以上。
否中止治疗、是否恢复治疗或是否对治疗方案进行其它改变。给药计划可根据多个临床因
素（如，受试者对治疗剂的敏感性）在一周一次至一天一次的范围内变动。可每天或每三天、
四天、五天、或六天给予所需的剂量。可一次给予期望的剂量，或分成亚剂量（subdose，例
如，2-4份亚剂量）并在一段时间内（例如，以一天中的合适间隔或其它合适的计划）给予期
望的剂量。这样的亚剂量可以采用单位剂型进行给药。在本文描述的方面的某些实施方式
中，给药是长期的，例如，在数周或数月的时间段内每天给予一份或多份剂量。给药计划的
实例为：在1周、2周、3周、4周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月或以上的时间段内每日给予1次、每日给予2次、每日给予3次或每日给予4次以上。
[0230] 非医疗用途
[0231] 本文描述的聚集体也可用于工业应用。例如，所述聚集体可用于清理阻塞管道和/或修复管道（pipe）中的泄漏。不受限制地，管道可具有任意直径、且任意物质（例如，化学
品、水、油、气体等）均可流经所述管道。本文所使用的术语“管道”旨在包括流体可在其中流
动的任何种类的设备。实例包括化学品供料系统（feed system）、市政服务以及供给管线，
例如水、气体和油。本文所使用的术语“流体”是指可以流动的物质。相应地，术语“流体”包
括液态、气态和半固态物质。
品、水、油、气体等）均可流经所述管道。本文所使用的术语“管道”旨在包括流体可在其中流
动的任何种类的设备。实例包括化学品供料系统（feed system）、市政服务以及供给管线，
例如水、气体和油。本文所使用的术语“流体”是指可以流动的物质。相应地，术语“流体”包
括液态、气态和半固态物质。
[0232] 不希望受理论限制，阻塞区域内的切应力高于未阻塞区域。因此，聚集体将在阻塞区域处或附近解聚，并释放可清除阻塞的试剂。相应地，在本发明的这一方面以及其它方面
的某些实施方式中，所述聚集体包含可清除管道阻塞的试剂。用于清除管道阻塞的试剂可
包括但不仅限于：能产生放热反应的试剂、能产生氧化反应的试剂、能产生酶促反应的试剂
以及上述试剂的任意组合。
的某些实施方式中，所述聚集体包含可清除管道阻塞的试剂。用于清除管道阻塞的试剂可
包括但不仅限于：能产生放热反应的试剂、能产生氧化反应的试剂、能产生酶促反应的试剂
以及上述试剂的任意组合。
[0233] 可产生放热反应的试剂可包括碱和金属的组合。所述碱和所述金属可分别配制于不同的聚集体内，且在阻塞处释放所述碱和所述金属时发生可清除阻塞的放热反应。在某
些实施方式中，所述碱是氢氧化钠。在某些实施方式中，所述金属是铝。
些实施方式中，所述碱是氢氧化钠。在某些实施方式中，所述金属是铝。
[0234] 可产生氧化反应的试剂可包括过氧化物，如过碳酸钠、过硫酸钠和过硼酸钠；以及含卤素氧化化合物，如次氯酸钙、碱金属次氯酸盐、碱土金属次氯酸盐、二氯-s-三嗪三酮钠
（sodium dichloro-s-triazinetrione）、氯化异氰脲酸盐/酯、1,3-二溴-5-异丁基乙内酰
脲和1,3-二氯-5-异丁基乙内酰脲。在某些实施方式中，所述氧化剂包括过氧化物和有机物
（例如碳水化合物）的组合。
（sodium dichloro-s-triazinetrione）、氯化异氰脲酸盐/酯、1,3-二溴-5-异丁基乙内酰
脲和1,3-二氯-5-异丁基乙内酰脲。在某些实施方式中，所述氧化剂包括过氧化物和有机物
（例如碳水化合物）的组合。
[0235] 可产生酶促反应的试剂可包括细菌。所述细菌可为木质素降解细菌。在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述细菌产生脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶或蛋白
酶中的至少一种。
酶中的至少一种。
[0236] 除了抗阻塞试剂以外，所述聚集体可包括选自于由以下化合物所组成的组中的化合物：表面活性剂、滑爽剂（slip agents）、抑泡剂、抗结块剂、粘合剂、研磨剂、抗腐蚀剂、消泡剂以及上述化合物的任意组合。
[0237] 如上文所述，流经泄漏处也可导致高切应力。根据泄漏的性质，切应力可在泄漏处或其附近为高切应力。相应地，在本发明的这一方面以及其它方面的某些实施方式中，所述
聚集体包括密封材料。示例性的密封材料包括但不仅限于：藻酸盐/酯、颗粒物、矿物油、硅
橡胶、热塑性树脂或热固性树脂（醋酸乙烯树脂或无规聚丙烯）、胶乳（rubber latexes）、非
硅型橡胶（天然橡胶（MR）、异戊二烯橡胶（IR）、丁二烯橡胶（BR）、聚(1,2-丁二烯)（1,2-BR）、苯乙烯-丁二烯橡胶（SBR）、氯丁橡胶（CR）、腈橡胶（nitrile rubber）（NBR）、丁基橡胶
（TfR）、乙烯-丙烯橡胶（EPM，EPDM）、氯磺化聚乙烯橡胶（CSM）、以及丙烯基橡胶（acryl
rubber）（ACM，ANM））。
聚集体包括密封材料。示例性的密封材料包括但不仅限于：藻酸盐/酯、颗粒物、矿物油、硅
橡胶、热塑性树脂或热固性树脂（醋酸乙烯树脂或无规聚丙烯）、胶乳（rubber latexes）、非
硅型橡胶（天然橡胶（MR）、异戊二烯橡胶（IR）、丁二烯橡胶（BR）、聚(1,2-丁二烯)（1,2-BR）、苯乙烯-丁二烯橡胶（SBR）、氯丁橡胶（CR）、腈橡胶（nitrile rubber）（NBR）、丁基橡胶
（TfR）、乙烯-丙烯橡胶（EPM，EPDM）、氯磺化聚乙烯橡胶（CSM）、以及丙烯基橡胶（acryl
rubber）（ACM，ANM））。
[0238] 试剂盒
[0239] 在另一方面，本发明提供包含本文描述的如下组分的试剂盒：聚集体、包含聚集体的制剂、用于制造聚集体的组分或用于制造包含聚集体的制剂的组分。
[0240] 除了上述组分以外，所述试剂盒还可包括信息资料（informational material）。所述信息资料可为说明性资料、指导性资料、销售资料或其它与本文描述的方法和/或将所
述聚集体用于本文描述的方法有关的资料。例如，所述信息资料描述将所述聚集体给予受
试者的方法。所述试剂盒还可包括递送装置。
述聚集体用于本文描述的方法有关的资料。例如，所述信息资料描述将所述聚集体给予受
试者的方法。所述试剂盒还可包括递送装置。
[0241] 在一个实施方式中，所述信息资料可包括以合适的方式给予所述制剂的说明书，所述方式例如以合适的剂量、剂型或给药方式给予所述制剂（例如，本文描述的剂量、剂型
或给药方式）。在另一个实施方式中，所述信息资料可包括鉴定合适受试者的说明书，所述
受试者例如为人，又例如为成人。所述试剂盒的信息资料并不受限于其形式。在许多情况
下，所述信息资料（例如，说明书）可以印刷品的形式（例如，印刷文本、附图、和/或照片，例如，标签或印张）提供。然而，所述信息资料还可以其它形式提供，如盲文、计算机可读资料、
录像或录音。在另一个实施方式中，所述试剂盒的信息资料为链接或联系信息，例如，实际
地址、电子邮件地址、超链接、网站或电话号码，在这些信息资料中，试剂盒的使用者可获得
大量关于本文描述的方法中的制剂和/或其使用的信息。当然，所述信息资料也可以任何组
合形式提供。
或给药方式）。在另一个实施方式中，所述信息资料可包括鉴定合适受试者的说明书，所述
受试者例如为人，又例如为成人。所述试剂盒的信息资料并不受限于其形式。在许多情况
下，所述信息资料（例如，说明书）可以印刷品的形式（例如，印刷文本、附图、和/或照片，例如，标签或印张）提供。然而，所述信息资料还可以其它形式提供，如盲文、计算机可读资料、
录像或录音。在另一个实施方式中，所述试剂盒的信息资料为链接或联系信息，例如，实际
地址、电子邮件地址、超链接、网站或电话号码，在这些信息资料中，试剂盒的使用者可获得
大量关于本文描述的方法中的制剂和/或其使用的信息。当然，所述信息资料也可以任何组
合形式提供。
[0242] 在某些实施方式中，所述制剂的单一组分可以提供于一个容器中。或者，可期望在两个以上的容器中分别提供所述制剂的组分，例如，一个容器用于提供寡核苷酸制剂、至少
另一个容器用于提供载体化合物。可将不同组分例如根据随试剂盒提供的说明书进行组
合。所述组分可根据本文描述的方法组合，例如，以制备和给予药物组合物。
另一个容器用于提供载体化合物。可将不同组分例如根据随试剂盒提供的说明书进行组
合。所述组分可根据本文描述的方法组合，例如，以制备和给予药物组合物。
[0243] 除了制剂以外，所述试剂盒的组合物还可包括其它成分，如溶剂或缓冲剂、稳定剂或防腐剂、和/或用于对本文描述的状况或障碍进行治疗的第二试剂。或者，所述其它成分
可包括于所述试剂盒中，但位于与制剂不同的组合物或容器中。在这些实施方式中，所述试
剂盒可包括用于对制剂和其它成分进行混合的说明书、或用于将寡核苷酸与其它成分共同
使用的说明书。
可包括于所述试剂盒中，但位于与制剂不同的组合物或容器中。在这些实施方式中，所述试
剂盒可包括用于对制剂和其它成分进行混合的说明书、或用于将寡核苷酸与其它成分共同
使用的说明书。
[0244] 所述制剂可以任何形式提供，例如，液体形式、干燥形式或冻干形式。优选所述制剂基本上纯净和/或无菌。当以液体溶液形式提供所述试剂时，所述液体溶液优选是水溶
液，其中优选无菌水溶液。当以干燥形式提供所述制剂时，通常通过加入合适的溶剂进行复
水。所述溶剂（例如，无菌水或缓冲剂）可任选地在试剂盒中提供。
液，其中优选无菌水溶液。当以干燥形式提供所述制剂时，通常通过加入合适的溶剂进行复
水。所述溶剂（例如，无菌水或缓冲剂）可任选地在试剂盒中提供。
[0245] 在某些实施方式中，所述试剂盒包含分开的用于所述制剂和信息资料的容器、分隔器或区室。例如，所述制剂可置于瓶、小瓶（vial）、或注射器中；所述信息资料可置于塑料
套筒或包中。在其它实施方式中，将试剂盒的各个要素置于单一、未分隔的容器中。例如，所
述制剂置于已贴有标签形式的信息资料的瓶、小瓶或注射器中。
套筒或包中。在其它实施方式中，将试剂盒的各个要素置于单一、未分隔的容器中。例如，所
述制剂置于已贴有标签形式的信息资料的瓶、小瓶或注射器中。
[0246] 在某些实施方式中，所述试剂盒包括多个（例如，一组）单独的容器，所述容器各自包含一个或多个单位剂型的所述制剂。例如，所述试剂盒包括多个注射器、安瓿瓶、箔包装
或泡罩包装，其各自包含一单位剂型的所述制剂。所述试剂盒的容器可以是气密和/或防水
的。
或泡罩包装，其各自包含一单位剂型的所述制剂。所述试剂盒的容器可以是气密和/或防水
的。
[0247] 定义
[0248] 除非另有说明或在上下文中有所暗示，下列术语和短语包括下文提供的含义。除非另有明确说明或从上下文中可明显看出，下列术语和短语不排除在其所属领域已具有的
含义。提供所述定义以辅助描述本文描述的方面的具体实施方式，而由于本发明的范围仅
受权利要求所限，因此并不意味着限制所请求保护的发明。另外，除非上下文另有要求，单
数术语涵盖复数，并且复数术语涵盖单数。
含义。提供所述定义以辅助描述本文描述的方面的具体实施方式，而由于本发明的范围仅
受权利要求所限，因此并不意味着限制所请求保护的发明。另外，除非上下文另有要求，单
数术语涵盖复数，并且复数术语涵盖单数。
[0250] 本文所使用的术语“基本上由…组成”涉及给定的实施方式所需的那些元素。该术语允许存在实质上不影响本发明实施方式的基础和新颖性或起作用的特征的额外成分。
[0251] 术语“由…组成”涉及本文所述的组合物、方法及其各自的组成部分，排除没有在实施方式描述中详述的任何要素。
[0252] 除了在操作实施例中或另有指示的地方，本文所用的表示成分的量或反应条件的全部数值在所有情况下都应该被理解为被术语“约”修饰。与百分比相连使用的术语“约”可
意味着±1%。
意味着±1%。
[0253] 除非文中明确地另有所指，单数术语“一（a/an）”和“该/所述（the）”涵盖复数的所指物。相似地，除非文中明确地另有所指，单词“或（or）”意在涵盖“和（and）”。
[0254] 尽管与本文描述的方法和材料相似或等同的方法和材料可被用于本文公开的实践或测试中，合适的方法和材料在下文有所描述。术语“包含/包括（comprises）”意思是“含
有（includes）”。缩写“e.g.”源自拉丁文的例如（exempli gratia），并且在本文中用于表示非限制性的实例。因此，缩写“e.g.”与术语“例如（for example）”同义。
有（includes）”。缩写“e.g.”源自拉丁文的例如（exempli gratia），并且在本文中用于表示非限制性的实例。因此，缩写“e.g.”与术语“例如（for example）”同义。
[0255] 本文使用的术语“降低（decrease）”、“减少（reduced/reduction）”、“降低（decrease）”或“抑制（inhibit）”都意味着减少有统计学意义的量。然而，为避免疑义，“减少（reduced/reduction）”或“降低（decrease）”或“抑制（inhibit）”表示相对于参比水平降低至少10%，例如降低至少约20%、或至少约30%、或至少约40%、或至少约50%、或至少约60%、
或至少约70%、或至少约80%、或至少约90%、或上至并包括降低100%（如，相对于参比样品的
缺乏水平）、或相对于参比水平降低在10%到100%之间的任意量。
或至少约70%、或至少约80%、或至少约90%、或上至并包括降低100%（如，相对于参比样品的
缺乏水平）、或相对于参比水平降低在10%到100%之间的任意量。
[0256] 本文使用的术语“增加（increased/increase）”或“增强（enhance）”或“活化（activate）”通常都意味着增加有统计学意义的量；为避免疑义，术语“增加（increased/
increase）”或“增强（enhance）”或“活化（activate）”表示相对于参比水平增加至少10%，例如增加至少约20%、或至少约30%、或至少约40%、或至少约50%、或至少约60%、或至少约70%、
或至少约80%、或至少约90%、或上至并包括增加100%、或相对于参比水平增加在10%到100%
之间的任意量；或相对于参比水平至少约2倍、或至少约3倍、或至少约4倍、或至少约5倍、或
至少约10倍的增加、或增加在2倍和10倍之间的任意量、或是更大量的增加。
increase）”或“增强（enhance）”或“活化（activate）”表示相对于参比水平增加至少10%，例如增加至少约20%、或至少约30%、或至少约40%、或至少约50%、或至少约60%、或至少约70%、
或至少约80%、或至少约90%、或上至并包括增加100%、或相对于参比水平增加在10%到100%
之间的任意量；或相对于参比水平至少约2倍、或至少约3倍、或至少约4倍、或至少约5倍、或
至少约10倍的增加、或增加在2倍和10倍之间的任意量、或是更大量的增加。
[0257] 本文所使用的术语“治疗（treating/treatment）”是指向受试者给予有效量的组合物以使受试者在疾病的至少一种症状方面有所减缓或所述疾病有所改善（例如，有益的
或期望的临床结果）。为了本发明的目的，有益的或期望的结果包括但不仅限于：减轻一种
或多种症状、降低疾病程度、稳定（例如，不恶化）疾病状态、延迟或延缓疾病进展、改善或减
轻疾病状态、以及缓解（部分或全部），无论上述结果是可检测的还是不可检测的。在某些实
施方式中，治疗可以是指与未得到治疗时预期的生存期相比而言延长了生存期。因此，本领
域技术人员将体会到，治疗可以改善疾病状况，但可能不能完全治愈所述疾病。本文所使用
的术语“治疗”包括预防。或者，如果疾病进展得到减少或停止，则治疗是“有效”的。在某些
实施方式中，术语“治疗”还可以指与未得到治疗时预期的生存期相比而言延长了生存期。
需要治疗的群体包括已经诊断患有疾病或状况的受试者、以及由于遗传易感性或其它导致
疾病或状况的因素而可能患有疾病或状况的受试者（如一个非限制性实例，受试者的体重、
饮食和健康是可导致受试者可能患有糖尿病的因素）。需要治疗的群体还包括需要医疗或
手术关注、护理或管理的受试者。所述受试者通常是患病的或受伤的、或相对于群体的平均
成员来说处于升高的患病风险中，并且，所述受试者需要这类关注、护理或管理。
或期望的临床结果）。为了本发明的目的，有益的或期望的结果包括但不仅限于：减轻一种
或多种症状、降低疾病程度、稳定（例如，不恶化）疾病状态、延迟或延缓疾病进展、改善或减
轻疾病状态、以及缓解（部分或全部），无论上述结果是可检测的还是不可检测的。在某些实
施方式中，治疗可以是指与未得到治疗时预期的生存期相比而言延长了生存期。因此，本领
域技术人员将体会到，治疗可以改善疾病状况，但可能不能完全治愈所述疾病。本文所使用
的术语“治疗”包括预防。或者，如果疾病进展得到减少或停止，则治疗是“有效”的。在某些
实施方式中，术语“治疗”还可以指与未得到治疗时预期的生存期相比而言延长了生存期。
需要治疗的群体包括已经诊断患有疾病或状况的受试者、以及由于遗传易感性或其它导致
疾病或状况的因素而可能患有疾病或状况的受试者（如一个非限制性实例，受试者的体重、
饮食和健康是可导致受试者可能患有糖尿病的因素）。需要治疗的群体还包括需要医疗或
手术关注、护理或管理的受试者。所述受试者通常是患病的或受伤的、或相对于群体的平均
成员来说处于升高的患病风险中，并且，所述受试者需要这类关注、护理或管理。
[0258] 术语“统计学显著（statistically significant）”或“显著地（significantly）”表示统计显著性，并且通常意味着参比水平以上或以下两个标准差（2SD）。这个术语表示统
计证明存在差异。它被定义为当无效假设实际上是真时作出否决该无效假设的决定的可能
性。通常利用p值来作出决定。
计证明存在差异。它被定义为当无效假设实际上是真时作出否决该无效假设的决定的可能
性。通常利用p值来作出决定。
[0259] 术语“纳米球”是指长径比（aspect ratio）至多3:1的纳米粒子。术语“长径比”是指对象的最长轴与对象的最短轴的比值，其中所述轴并非必须相互垂直。
[0260] 术语纳米粒子的“最长维度（dimension）”是指纳米粒子的最长直接路径。术语“直接路径”指的是包含于所述纳米粒子之内、在所述纳米粒子表面上的两点之间的最短路径。
例如，螺旋状纳米粒子的最长维度相当于将螺旋拉伸为直线时所述螺旋的长度。
例如，螺旋状纳米粒子的最长维度相当于将螺旋拉伸为直线时所述螺旋的长度。
[0261] 术语“纳米棒”是指最长维度至多200nm、且长径比为3:1至20:1的纳米粒子。
[0262] 术语“纳米棱柱”是指至少有两个通过共同边相连的非平行面的纳米粒子。
[0263] 纳米粒子的“长度”是指所述纳米粒子的最长维度。
[0264] 纳米粒子的“宽度”是指所述纳米粒子的平均宽度；且纳米粒子的“直径”是指所述纳米粒子的平均直径。
[0265] 多个纳米粒子的“平均”维度是指所述多个纳米粒子的该维度的平均值。例如，多个纳米球的“平均直径”是指所述多个纳米球直径的平均值，其中单个纳米球的直径是该纳
米球直径的平均值。
米球直径的平均值。
[0266] 本文所使用的术语“药学上可接受的盐”是指传统的化合物的无毒盐类或季铵盐类（例如，来自无毒有机酸或无机酸）。这些盐类可在给药辅料或剂型制造过程中原位制备、
或通过单独将处于其游离碱或酸形式的纯化化合物与合适的有机酸/无机酸或有机碱/无
机碱反应并在后续纯化时分离所形成的盐而制备。传统的无毒盐类包括由例如以下无机酸
衍生的盐：硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等；以及由例如以下有机酸制备而来的盐：乙酸、丙
酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲基苯
磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、异硫羰酸（isothionic）等。参见例如：Berge等，
“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.66:1-19(1977)，以引用的方式将其内容整体并入
本文。
或通过单独将处于其游离碱或酸形式的纯化化合物与合适的有机酸/无机酸或有机碱/无
机碱反应并在后续纯化时分离所形成的盐而制备。传统的无毒盐类包括由例如以下无机酸
衍生的盐：硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等；以及由例如以下有机酸制备而来的盐：乙酸、丙
酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲基苯
磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、异硫羰酸（isothionic）等。参见例如：Berge等，
“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.66:1-19(1977)，以引用的方式将其内容整体并入
本文。
[0267] 在本文所述的方面的某些实施方式中，代表性的盐类包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、醋酸盐、琥珀酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐（napthylate）、甲磺酸盐、葡庚糖酸盐、乳糖酸盐（lactobionate）和十二
烷基磺酸盐等。
烷基磺酸盐等。
[0268] 本文所述的“前药”是指可经某些化学或生理学过程（例如，酶促过程和代谢水解）而转化为活性化合物的化合物。因此，术语“前药”还指药学上可接受的生物活性化合物的
前体。前药在给予受试者时可以是非活性的，即酯，但在体内转化为活性化合物，例如，通过
水解为游离羧酸或游离羟基。所述前药化合物经常提供生物体内的缓释作用、组织相容性
或可溶性的优点。术语“前药”也意在包括任何共价结合的载体，当将该前药给予受试者时，
所述载体在体内释放活性化合物。活性化合物的前药可通过以如下方式修饰活性化合物中
存在的官能团而制备：通过常规操作或体内方式将所述修饰物裂解为母体活性化合物。前
药包括其中的羟基、氨基或巯基与任意基团结合的化合物，以使得当将所述活性化合物的
前药给予受试者时，其裂解并各自形成游离羟基、游离氨基或游离巯基。前药的实例包括但
不仅限于：活性化合物中醇的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物，或活性化合物中胺官能团
的乙酰胺、甲酰胺和苯甲酰胺衍生物等。参见：Jucker编著，Progress in Drug Research4:
221-294(1962)中的Harper，“Drug Latentiation”；E.B.Roche编著，Design of
Biopharmaceutical Properties through Prodrugs and Analogs，APHA
Acad.Pharm.Sci.40(1977)的Morozowich等，“Application of Physical Organic
Principles to Prodrug Design”；Bioreversible Carriers in Drug in Drug Design，
Theory and Application，E.B.Roche编著，APHA Acad.Pharm.Sci.(1987)；Design of
Prodrugs，H.Bundgaard，Elsevier(1985)；Wang等“Prodrug approaches to the improved
delivery of peptide drug”in Curr.Pharm.Design.5(4):265-287(1999)；Pauletti等
(1997)Improvement in peptide bioavailability：Peptidomimetics and Prodrug
Strategies，Adv.Drug.Delivery Rev.27:235-256；Mizen等(1998)“The Use of Esters
as Prodrugs for Oral Delivery of(3-Lactam)antibiotics,”Pharm.Biotech.ll,:345-
365；Gaignault等(1996)“Designing Prodrugs and Bioprecursors I.Carrier
Prodrugs,”Pract.Med.Chem.671-696；Asgharnejad，“Improving Oral Drug Transport”，
in Transport Processes in Pharmaceutical Systems，G.L.Amidon，P.I.Lee与
E.M.Topp，Eds.，Marcell Dekker，185-218页(2000)；Balant等，“Prodrugs for the
improvement of drug absorption via different routes of administration”，
Eur.J.Drug Metab.Pharmacokinet.，15(2)：143-53(1990)；Balimane与Sinko，
“Involvement of multiple transporters in the oral absorption of nucleoside
analogues”，Adv.Drug Delivery Rev.，39(1-3)：183-209(1999)；Browne，“Fosphenytoin
(Cerebyx)”，Clin.Neuropharmacol.20(1)：1-12(1997)；Bundgaard，“Bioreversible
derivatization of drugs—principle and applicability to improve the
therapeutic effects of drugs”，Arch.Pharm.Chemi86(1)：1-39(1979)；Bundgaard H.
“Improved drug delivery by the prodrug approach”，Controlled Drug Delivery17：
179-96(1987)；Bundgaard H.“Prodrugs as a means to improve the delivery of
peptide drugs”,Arfv.Drug Delivery Rev.8(1)：1-38(1992)；Fleisher等“Improved
oral drug delivery：solubility limitations overcome by the use of prodrugs”，
Drug Delivery Rev.19(2)：115-130(1996)；Fleisher等“Design of prodrugs for
improved gastrointestinal absorption by intestinal enzyme targeting”，Methods
Enzymol.112(Drug Enzyme Targeting，Pt.A)：360-81，(1985)；Farquhar D等，
“Biologically Reversible Phosphate-Protective Groups”，Pharm.Sci.，72(3)：324-
325(1983)；Freeman S等，“Bioreversible Protection for the Phospho Group：
Chemical Stability and Bioactivation of Di(4-acetoxy-benzyl)Methylphosphonate
with Carboxyesterase,”Chem.Soc.，Chem.Commun.，875-877(1991)；Friis and
Bundgaard，“Prodrugs of phosphates and phosphonates：Novel lipophilic
alphaacyloxyalkyl ester derivatives of phosphate-or phosphonate containing
drugs masking the negative charges of these groups”，Eur.J.Pharm.Sci.4：49-59
(1996)；Gangwar等，“Pro-drug，molecular structure and percutaneous delivery”，
Des.Biopharm.Prop.Prodrugs Analogs，[Symp.]Meeting Date1976，409-21.(1977)；
Nathwani与Wood，“Penicillins：a current review of their clinical pharmacology
and therapeutic use”，Drugs45(6)：866-94(1993)；Sinhababu与Thakker，“Prodrugs of
anticancer agents”，Adv.Drug Delivery Rev.19(2)：241-273(1996)；Stella等，
“Prodrugs.Do they have advantages in clinical practice?”，Drugs29(5)：455-73
(1985)；Tan等“Development and optimization of anti-HIV nucleoside analogs and
prodrugs：A review of their cellular pharmacology，structure-activity
relationships and pharmacokinetics”，Adv.Drug Delivery Rev.39(1-3)：117-151
(1999)；
前体。前药在给予受试者时可以是非活性的，即酯，但在体内转化为活性化合物，例如，通过
水解为游离羧酸或游离羟基。所述前药化合物经常提供生物体内的缓释作用、组织相容性
或可溶性的优点。术语“前药”也意在包括任何共价结合的载体，当将该前药给予受试者时，
所述载体在体内释放活性化合物。活性化合物的前药可通过以如下方式修饰活性化合物中
存在的官能团而制备：通过常规操作或体内方式将所述修饰物裂解为母体活性化合物。前
药包括其中的羟基、氨基或巯基与任意基团结合的化合物，以使得当将所述活性化合物的
前药给予受试者时，其裂解并各自形成游离羟基、游离氨基或游离巯基。前药的实例包括但
不仅限于：活性化合物中醇的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物，或活性化合物中胺官能团
的乙酰胺、甲酰胺和苯甲酰胺衍生物等。参见：Jucker编著，Progress in Drug Research4:
221-294(1962)中的Harper，“Drug Latentiation”；E.B.Roche编著，Design of
Biopharmaceutical Properties through Prodrugs and Analogs，APHA
Acad.Pharm.Sci.40(1977)的Morozowich等，“Application of Physical Organic
Principles to Prodrug Design”；Bioreversible Carriers in Drug in Drug Design，
Theory and Application，E.B.Roche编著，APHA Acad.Pharm.Sci.(1987)；Design of
Prodrugs，H.Bundgaard，Elsevier(1985)；Wang等“Prodrug approaches to the improved
delivery of peptide drug”in Curr.Pharm.Design.5(4):265-287(1999)；Pauletti等
(1997)Improvement in peptide bioavailability：Peptidomimetics and Prodrug
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as Prodrugs for Oral Delivery of(3-Lactam)antibiotics,”Pharm.Biotech.ll,:345-
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enhance the intestinal absorption of peptides”，Drug Discovery Today2(4)：148-
155(1997)；Wiebe与Knaus，“Concepts for the design of anti-HIV nucleoside
prodrugs for treating cephalic HIV infection”，Adv.Drug Delivery Rev.：39(l-3):
63-80(1999)；Waller等，“Prodrugs”，Br.J.Clin.Pharmac.28：497-507(1989)，以引用的方
式将上述文献的全部内容整体并入本文。
enhance the intestinal absorption of peptides”，Drug Discovery Today2(4)：148-
155(1997)；Wiebe与Knaus，“Concepts for the design of anti-HIV nucleoside
prodrugs for treating cephalic HIV infection”，Adv.Drug Delivery Rev.：39(l-3):
63-80(1999)；Waller等，“Prodrugs”，Br.J.Clin.Pharmac.28：497-507(1989)，以引用的方
式将上述文献的全部内容整体并入本文。
[0270] 本文所使用的术语“类似物”是指由母体化合物通过取代、置换或消除多种有机基团或氢原子而得到的化合物。对此，某些类单萜（monoterpenoids）可认为是单萜
（monoterpenes）的类似物，或有时可认为是其它类单萜、包括单萜衍生物的类似物。类似物
在结构上与母体化合物相似，但可相差甚至单个与取代的元素同价及周期表中同族的元
素。
（monoterpenes）的类似物，或有时可认为是其它类单萜、包括单萜衍生物的类似物。类似物
在结构上与母体化合物相似，但可相差甚至单个与取代的元素同价及周期表中同族的元
素。
[0271] 本文所使用的术语“衍生物”是指结构上与另一化学物质（即“原始（original）”物质，可称为“母体”化合物）相关的化学物质。“衍生物”可由结构相关的母体化合物经一步或
多步制成。短语“密切相关的衍生物”是指分子量与母体化合物相比不超出50%的衍生物。密
切相关的衍生物的物理性质和化学形式也与母体化合物类似。
多步制成。短语“密切相关的衍生物”是指分子量与母体化合物相比不超出50%的衍生物。密
切相关的衍生物的物理性质和化学形式也与母体化合物类似。
[0272] 本发明可通过下列经编号的段落中的任一项限定：
[0273] 1.一种用于治疗用途的聚集体，所述聚集体包含多个纳米粒子，其中，当暴露至预先确定的切应力时，所述聚集体在所述预先确定的切应力以上解聚。
[0274] 2.如段1所述的聚集体，其中，所述聚集体的尺寸≤50μm。
[0275] 3.如段1-2中任一项所述的聚集体，其中，所述纳米粒子包含选自于由以下聚合物所组成的组中的聚合物：泊洛沙姆、聚丙交酯、聚乙交酯、聚己内酯、聚乳酸和聚乙醇酸共聚
物、聚酸酐、聚ε-己内酯、聚酰胺、聚氨酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二氧环己酮、聚缩醛、聚缩酮、聚碳酸酯、聚原碳酸酯、聚二氢吡喃、聚磷腈、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊酸酯、聚亚烷基草
酸酯、聚亚烷基琥珀酸酯、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚羟基纤维素、
聚甲基丙烯酸甲酯、壳多糖、壳聚糖、聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚甘油癸二酸酯（PGS）、明
胶、胶原、丝、壳聚糖、藻酸盐/酯、纤维素、聚核酸、醋酸纤维素（包括双醋酸纤维素）、聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、尼龙、聚碳酸酯、聚硫化物、聚砜、水凝胶（例如，丙烯酸水凝胶）、聚丙烯腈、聚乙酸乙烯酯、醋酸丁酸纤维素、硝化纤维素、氨酯/碳酸酯共聚物、苯乙烯/马来酸共聚物、聚乙烯亚胺、透明质酸酶、肝
素、琼脂糖、普鲁兰多糖，以及上述聚合物的共聚物、三元共聚物，以及包含上述聚合物的任
意组合的共聚物。
物、聚酸酐、聚ε-己内酯、聚酰胺、聚氨酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二氧环己酮、聚缩醛、聚缩酮、聚碳酸酯、聚原碳酸酯、聚二氢吡喃、聚磷腈、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊酸酯、聚亚烷基草
酸酯、聚亚烷基琥珀酸酯、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚羟基纤维素、
聚甲基丙烯酸甲酯、壳多糖、壳聚糖、聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚甘油癸二酸酯（PGS）、明
胶、胶原、丝、壳聚糖、藻酸盐/酯、纤维素、聚核酸、醋酸纤维素（包括双醋酸纤维素）、聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、尼龙、聚碳酸酯、聚硫化物、聚砜、水凝胶（例如，丙烯酸水凝胶）、聚丙烯腈、聚乙酸乙烯酯、醋酸丁酸纤维素、硝化纤维素、氨酯/碳酸酯共聚物、苯乙烯/马来酸共聚物、聚乙烯亚胺、透明质酸酶、肝
素、琼脂糖、普鲁兰多糖，以及上述聚合物的共聚物、三元共聚物，以及包含上述聚合物的任
意组合的共聚物。
[0276] 4.如段1-3中任一项所述的聚集体，其中，所述聚集体进一步包含选自于由以下分子所组成的组中的分子：有机或无机小分子或大分子、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、糖胺聚
糖、生物大分子，例如，酶、肽、蛋白质、肽类似物及它们的衍生物、肽模拟物、脂类、碳水化合物、核酸、多核苷酸、寡核苷酸、基因、包括控制和终止区域的基因、自我复制体系如病毒DNA
或质粒DNA、单链和双链siRNA以及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA
（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、microRNA、microRNA模拟物、适配子、antimirs、antagomirs、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸、核酸类似物和衍生
物、由生物材料如细菌、植物、真菌、或动物细胞或组织制备而得的提取物、天然存在的或合
成的组合物，或上述分子的任意组合。
糖、生物大分子，例如，酶、肽、蛋白质、肽类似物及它们的衍生物、肽模拟物、脂类、碳水化合物、核酸、多核苷酸、寡核苷酸、基因、包括控制和终止区域的基因、自我复制体系如病毒DNA
或质粒DNA、单链和双链siRNA以及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA
（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、microRNA、microRNA模拟物、适配子、antimirs、antagomirs、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸、核酸类似物和衍生
物、由生物材料如细菌、植物、真菌、或动物细胞或组织制备而得的提取物、天然存在的或合
成的组合物，或上述分子的任意组合。
[0277] 5.如段1-4中任一项所述的聚集体，其中，所述分子封装于所述纳米粒子中、或所述分子吸收/吸附于所述纳米粒子的表面。
[0278] 6.如段1-5中任一项所述的聚集体，其中，所述分子共价连接至所述纳米粒子。
[0279] 7.如段4-6中任一项所述的聚集体，其中，所述分子具有生物活性。
[0280] 8.如段7所述的聚集体，其中，所述生物活性选自于由以下生物活性所组成的组：在生物分析中的刺激、抑制、调节、毒性或致死响应。
[0281] 9.如段7-8中任一项所述的聚集体，其中，所述生物活性选自于由以下生物活性所组成的组：显示出或调节酶活性、阻断受体、刺激受体、调节一个或多个基因的表达水平、调
节细胞增殖、调节细胞分裂、调节细胞迁移、调节细胞分化、调节细胞凋亡、调节细胞形态，
以及上述生物活性的任意组合。
节细胞增殖、调节细胞分裂、调节细胞迁移、调节细胞分化、调节细胞凋亡、调节细胞形态，
以及上述生物活性的任意组合。
[0282] 10.如段5-9中任一项所述的聚集体，其中，所述分子是疏水分子、亲水分子或两亲分子。
[0283] 11.如段4-10中任一项所述的聚集体，其中，所述分子为治疗剂，或其类似物、衍生物、前药或药学上可接受的盐。
[0284] 12.如段11所述的聚集体，其中，所述治疗剂是抗血栓形成剂和/或血栓溶解剂。
[0285] 13.如段12所述的聚集体，其中，所述抗血栓形成剂或血栓溶解剂选自于由以下抗血栓形成剂或血栓溶解剂所组成的组：抗凝血剂、促凝血剂拮抗剂、抗血小板剂、血栓溶解
剂、抗血栓溶解剂拮抗剂、纤维蛋白溶解酶，以及上述抗血栓形成剂或血栓溶解剂的任意组
合。
剂、抗血栓溶解剂拮抗剂、纤维蛋白溶解酶，以及上述抗血栓形成剂或血栓溶解剂的任意组
合。
[0286] 14.如段11所述的聚集体，其中，所述治疗剂是血栓形成剂。
[0287] 15.如段14所述的聚集体，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：血栓溶解剂拮抗剂、抗凝血剂拮抗剂、促凝血酶、促凝血分子，以及上述血栓形成剂的
任意组合。
任意组合。
[0288] 16.如段14-15中任一项所述的聚集体，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：鱼精蛋白、维生素K1、氨基己酸（amicar）、氨甲环酸（amstat）、阿那格
雷、阿加曲班、西洛他唑、达曲班、去纤苷酸、依诺肝素、速避凝、吲哚布芬、lamoparan、奥扎格雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上
述血栓形成剂的任意组合。
雷、阿加曲班、西洛他唑、达曲班、去纤苷酸、依诺肝素、速避凝、吲哚布芬、lamoparan、奥扎格雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上
述血栓形成剂的任意组合。
[0289] 17.如段11所述的聚集体，其中，所述治疗剂为选自于由以下血栓溶解剂所组成的组中的血栓溶解剂：组织纤溶酶原激活物（t-PA）、链激酶（SK）、尿激酶原、尿激酶（uPA）、阿替普酶（又名 Genentech，Inc.）、瑞替普酶（又名r-PA或 Centocor，
Inc.）、替奈普酶（又名TNKTM，Genentech，Inc.）、 （AstraZeneca，LP）、拉诺替普
酶（Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（Eisai Company，Ltd.）、沙芦普酶（又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶
激活剂复合物（又名APSAC、Anistreplase和 SmithKline Beecham Corp.），以
及上述血栓溶解剂的任意组合。
Inc.）、替奈普酶（又名TNKTM，Genentech，Inc.）、 （AstraZeneca，LP）、拉诺替普
酶（Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（Eisai Company，Ltd.）、沙芦普酶（又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶
激活剂复合物（又名APSAC、Anistreplase和 SmithKline Beecham Corp.），以
及上述血栓溶解剂的任意组合。
[0290] 18.如段11所述的聚集体，其中，所述治疗剂是抗炎剂。
[0291] 19.如段18所述的聚集体，其中，所述抗炎剂选自于由以下抗炎剂所组成的组：非甾体类抗炎药物（NSAID，如阿斯匹林、布洛芬或萘普生）、皮质类固醇（如泼尼松）、抗疟疾药物（如羟氯喹）、甲氨蝶呤、柳氮磺吡啶、来氟米特、抗TNF药物、环磷酰胺、麦考酚酯、地塞米松、罗格列酮、泼尼松龙、皮质酮、布地奈德、雌激素、雌二醇、柳氮磺吡啶、非诺贝特、普伐他汀、辛伐他汀、匹格列酮、乙酰水杨酸、麦考酚酸、5-氨基水杨酸、羟基脲，以及它们的类似
物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0292] 20.如段11所述的聚集体，其中，所述治疗剂是血管扩张剂。
[0293] 21.如段20所述的聚集体，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：α-肾上腺素受体拮抗剂（α-阻断剂）、血管紧张素转化酶（ACE）抑制剂、血管紧张素受体阻断剂（ARB）、β2-肾上腺素受体激动剂（β2-激动剂）、钙通道阻断剂（CCB）、中枢性交感神经阻滞剂、直接作用的血管扩张剂、内皮素受体拮抗剂、神经节阻断剂、硝基扩张剂、磷酸二
酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
[0294] 22.如段20-21中任一项所述的聚集体，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：哌唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪、曲马唑嗪、酚妥拉明、酚苄明、贝那普利、
卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普
罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地
平、尼群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农
（旧称amrinone）、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普
罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地
平、尼群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农
（旧称amrinone）、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0295] 23.如段11所述的聚集体，其中，所述治疗剂是血管收缩剂。
[0296] 24.如段23所述的聚集体，其中，所述血管收缩剂选自于由以下血管收缩剂所组成的组：α-肾上腺素受体激动剂、儿茶酚胺、加压素、加压素受体调节剂、以及钙通道激动剂。
[0297] 25.如段23-24中任一项所述的聚集体，其中，所述血管收缩剂选自于由以下血管收缩剂所组成的组：硫酸铝、阿米福林、安非他明、血管紧张素、抗组胺剂、精氨酸加压素、碱
式没食子酸铋、咖啡胺醇、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明、脱氧肾上腺素、多巴胺、麻黄素、肾
上腺素、苯赖加压素、茚唑啉、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸、甲氧麻黄酮、甲氧明、哌甲酯、美替唑啉、metraminol、米多君、萘甲唑啉、异肾上腺素、去甲
肾上腺素、二甲己胺、鸟氨酸加压素、羟甲唑啉、苯乙醇胺、苯肾上腺素、苯异丙胺、苯丙醇
胺、苯加压素、丙己君、伪麻黄碱、塞洛西宾、四肼屈嗪、四氢唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢
唑啉与硫酸锌、曲马唑啉、异庚胺、泰马唑啉、加压素、加压催产素、赛洛唑啉、氧化锌，以及
上述血管收缩剂的任意组合。
式没食子酸铋、咖啡胺醇、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明、脱氧肾上腺素、多巴胺、麻黄素、肾
上腺素、苯赖加压素、茚唑啉、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸、甲氧麻黄酮、甲氧明、哌甲酯、美替唑啉、metraminol、米多君、萘甲唑啉、异肾上腺素、去甲
肾上腺素、二甲己胺、鸟氨酸加压素、羟甲唑啉、苯乙醇胺、苯肾上腺素、苯异丙胺、苯丙醇
胺、苯加压素、丙己君、伪麻黄碱、塞洛西宾、四肼屈嗪、四氢唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢
唑啉与硫酸锌、曲马唑啉、异庚胺、泰马唑啉、加压素、加压催产素、赛洛唑啉、氧化锌，以及
上述血管收缩剂的任意组合。
[0298] 26.如段11所述的聚集体，其中，所述治疗剂是抗肿瘤剂、抗增殖剂、和/或抗有丝分裂剂、和/或抗迁移剂。
[0299] 27.如段26所述的聚集体，其中，所述抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分裂剂/抗迁移剂选自于由以下抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分裂剂/抗迁移剂所组成的组：紫杉醇、5-氟尿
嘧啶、多柔比星、柔红霉素、环孢素、顺铂、长春碱、长春新碱、埃坡霉素、甲氨蝶呤、硫唑嘌
呤、阿霉素和自力霉素、内皮抑素、血管抑素和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨、紫杉酚、曲匹地
尔、卤夫酮，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
嘧啶、多柔比星、柔红霉素、环孢素、顺铂、长春碱、长春新碱、埃坡霉素、甲氨蝶呤、硫唑嘌
呤、阿霉素和自力霉素、内皮抑素、血管抑素和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨、紫杉酚、曲匹地
尔、卤夫酮，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0300] 28.如段11-27中任一项所述的聚集体，其中，所述治疗剂选自于由以下治疗剂所组成的组：阿斯匹林、华法林（香豆素）、醋硝香豆素、安克洛酶、茴茚二酮、溴茚二酮、氯茚二酮、库美香豆素、环香豆素、葡聚糖、葡聚糖硫酸酯钠、双香豆素、二苯茚酮、双香豆乙酯、乙
双香豆素、氟茚二酮、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠、奥沙二酮、多硫酸戊聚糖、苯茚二酮、苯丙
香豆素、卵黄高磷蛋白、吡考他胺、噻氯香豆素、双嘧达莫（潘生丁）、磺吡酮（苯磺唑酮）、噻氯匹定（抵克立得）、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶
（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶/ASPAC（依米那酶），以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
双香豆素、氟茚二酮、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠、奥沙二酮、多硫酸戊聚糖、苯茚二酮、苯丙
香豆素、卵黄高磷蛋白、吡考他胺、噻氯香豆素、双嘧达莫（潘生丁）、磺吡酮（苯磺唑酮）、噻氯匹定（抵克立得）、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶
（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶/ASPAC（依米那酶），以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0301] 29.如段4-28中任一项所述的聚集体，其中，相对于非解聚聚集体而言，所述分子以更高的释放速率和/或更高的释放量由解聚聚集体释放。
[0302] 30.如段29所述的聚集体，其中，相对于非解聚聚集体而言，所述解聚聚集体的释放速率至少高出10%。
[0303] 31.如段1-30中任一项所述的聚集体，其中，所述多个纳米粒子中的至少一个纳米粒子包含配体。
[0304] 32.如段31所述的聚集体，其中，所述配体是靶向配体。
[0305] 33.如段31-32中任一项所述的聚集体，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：肽、多肽、蛋白质、肽模拟物、糖蛋白、凝血素、核苷、核苷酸、核酸（例如，多核苷酸、寡核苷酸、基因、包括控制和终止区域的基因、自我复制体系如病毒DNA或质粒DNA、单链和双
链siRNA以及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA（shRNA）、反义寡核苷酸、核
酶、microRNA、microRNA模拟物、supermirs、适配子、antimirs、antagomirs、U1衔接头、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸）、单糖、二糖、三糖、寡
糖、多糖、糖胺聚糖、脂多糖、脂类、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体、受体配体，以及它们的类似物和衍生物。
链siRNA以及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA（shRNA）、反义寡核苷酸、核
酶、microRNA、microRNA模拟物、supermirs、适配子、antimirs、antagomirs、U1衔接头、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸）、单糖、二糖、三糖、寡
糖、多糖、糖胺聚糖、脂多糖、脂类、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体、受体配体，以及它们的类似物和衍生物。
[0306] 34.如段31-33中任一项所述的聚集体，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：聚赖氨酸（PLL）、聚L-天冬氨酸、聚L-谷氨酸、苯乙烯-顺丁烯二酸酐共聚物、聚(L-丙
交酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺
共聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚
胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前
胶原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、
Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,
3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、
二甲氧三苯甲基、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、
swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、
GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及
上述配体的任意组合。
交酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺
共聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚
胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前
胶原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、
Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,
3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、
二甲氧三苯甲基、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、
swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、
GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及
上述配体的任意组合。
[0307] 35.如段31-34中任一项所述的聚集体，其中，所述配体是选自于由以下肽所组成的组中的肽：SEQ ID NO：1（CREKA）、SEQ ID NO：2（CRKRLDRNK）、SEQ ID NO：3（CHVLWSTRC）、SEQ ID NO：4（ALEALAEALEALAEA）、SEQ ID NO：5（KFFKFFKFFK（细菌细胞壁渗透肽））、SEQ ID NO：6（AALEALAEALEALAEALEALAEAAAAGGC（GALA））、SEQ ID NO：7
（ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA））、SEQ ID NO：8（GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-
7））、SEQ ID NO：9（GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2））、SEQ ID NO:10（GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7））、SEQ ID NO:11（GLF EAI
EGFI ENGW EGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC（diINF-3））、SEQ ID NO:12（GLFGA
LAEALAEALAEHLAEALAEALEALAAGGSC（GLF））、SEQ ID NO:13（GLFEAIEGFIENGWEGLAEALAEALE
ALAAGGSC（GALA-INF3））、SEQ ID NO:14（GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG K GLF EAI EGFI
ENGW EGnI DG（INF-5，n为正亮氨酸））、SEQ ID NO:15（RQIKIWFQNRRMKWKK（穿膜肽））、SEQ ID NO:16（GRKKRRQRRRPPQC（Tat片段48-60））、SEQ ID NO:17
（GALFLGWLGAAGSTMGAWSQPKKKRKV（基于信号序列的肽））、SEQ ID NO:18
（LLIILRRRIRKQAHAHSK（PVEC））、SEQ ID NO:19（WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL（细胞穿透
肽））、SEQ ID NO:20（KLALKLALKALKAALKLA（两亲模型肽））、SEQ ID NO:21（RRRRRRRRR
（Arg9））、SEQ ID NO:22（LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES（LL-37））、SEQ ID NO:
23（SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素P1））、SEQ ID NO:24
（ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC（α-防卫素））、SEQ ID NO:25（DHYNCVSSGGQCLYSACPIF
TKIQGTCYRGKAKCCK（β-防卫素））、SEQ ID NO:26（RRRPRPPYLPRPRPPPFFPPRLPPRIPPGFPPRFP
PRFPGKR-NH2（PR-39））、SEQ ID NO:27（ILPWKWPWWPWRR-NH2（indolicidin））、SEQ ID NO:28（AAVALLPAVLLALLAP（RFGF））、SEQ ID NO:29（AALLPVLLAAP（RFGF类似物））、SEQ ID NO:30（RKCRIVVIRVCR（bactenecin））、天蚕素、lycotoxins、paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽（BLP）、cathelicidins、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗肠道抗菌肽（HFIAP）、
magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、
esculentinis-1、caerins，以及它们的任何类似物与衍生物。
（ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA））、SEQ ID NO：8（GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-
7））、SEQ ID NO：9（GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2））、SEQ ID NO:10（GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7））、SEQ ID NO:11（GLF EAI
EGFI ENGW EGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC（diINF-3））、SEQ ID NO:12（GLFGA
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23（SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素P1））、SEQ ID NO:24
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magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、
esculentinis-1、caerins，以及它们的任何类似物与衍生物。
[0308] 36.如段31-35中任一项所述的聚集体，其中，相比于对照而言，所述配体将解聚速率降低至少10%。
[0309] 37.如段1-36中任一项所述的聚集体，其中，相对于非狭窄区域而言，所述聚集体在狭窄区域中解聚至少10%。
[0310] 38.如段37所述的聚集体，其中，相对于非狭窄区域而言，所述狭窄区域中的切应力高出至少一倍。
[0311] 39.如段37-38中任一项所述的聚集体，其中，所述非狭窄区域中的切应力为正常生理学切应力。
[0312] 40.如段37-39中任一项所述的聚集体，其中，所述狭窄区域中的切应力为至少70dyn/cm2。
[0313] 41.如段1-40中任一项所述的聚集体，其中，所述聚集体为球体、圆柱体、盘状、长方体、立方体、或不规则形状。
[0314] 42.如段1-41中任一项所述的聚集体，其中，所述纳米粒子为球体、圆柱体、盘状、长方体、立方体、或不规则形状。
[0315] 43.如段1-42中任一项所述的聚集体，其中，对所述纳米粒子的表面进行修饰，以调节两个以上纳米粒子间的分子间静电相互作用、氢键相互作用、偶极-偶极相互作用、亲
水相互作用、疏水相互作用、范德华力、以及上述作用的任意组合。
水相互作用、疏水相互作用、范德华力、以及上述作用的任意组合。
[0316] 44.如段1-43中任一项所述的聚集体，其中，所述预先确定的切应力为至少70dyn/cm2。
[0317] 45.如段1-44中任一项所述的聚集体，其中，所述聚集体的尺寸为1μm至3μm。
[0318] 46.如段4所述的聚集体，其中，所述分子是显像剂。
[0319] 47.如段46所述的聚集体，其中，所述显像剂选自于由以下显像剂所组成的组：Alexa 染料（Invitrogen Corp.；Carlsbad，Calif）、荧光素、异硫氰酸荧光素
（FITC）、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）、在α位或β位上具有氨基的萘胺染
料（如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-6-
萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物）、香豆素（如
3-苯基-7-异氰酸香豆素）、吖啶（如9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙）、N-(p(2-苯并噁唑基)苯基)
顺丁烯二酰亚胺、青色素（如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA））、1H,5H,11H,
15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡
咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-
内盐（TR或德克萨斯红）、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白（如绿色荧光
蛋白、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、去稳定EGFP、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、DsRed变体
mRFPmars和mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、天蓝色荧光蛋白，以及
它们的变体）、放射性同位素（如99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga、153Gd、18F、124I、125I、
131I、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At、212Bi）、顺磁性金属离子（如Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)）、X射线吸收剂（如Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir），以及上述显像剂的任意组合。
（FITC）、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）、在α位或β位上具有氨基的萘胺染
料（如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-6-
萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物）、香豆素（如
3-苯基-7-异氰酸香豆素）、吖啶（如9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙）、N-(p(2-苯并噁唑基)苯基)
顺丁烯二酰亚胺、青色素（如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA））、1H,5H,11H,
15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡
咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-
内盐（TR或德克萨斯红）、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白（如绿色荧光
蛋白、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、去稳定EGFP、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、DsRed变体
mRFPmars和mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、天蓝色荧光蛋白，以及
它们的变体）、放射性同位素（如99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga、153Gd、18F、124I、125I、
131I、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At、212Bi）、顺磁性金属离子（如Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)）、X射线吸收剂（如Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir），以及上述显像剂的任意组合。
[0320] 48.如段1-47中任一项所述的聚集体，其中，所述纳米粒子包含至少一个延长所述聚集体体内寿命的部分。
[0321] 49.如段48所述的聚集体，其中，所述至少一个部分是聚乙二醇。
[0322] 50.包含如段1-49中任一项所述的聚集体的药物组合物。
[0323] 51.一种用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变和/或闭塞病变进行治疗的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予如段1-49中任一项所述的聚集体或如段50所述的药
物组合物。
物组合物。
[0324] 52.一种用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变和/或闭塞病变进行成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予如段1-49中任一项所述的聚集体或如段50所述的药
物组合物。
物组合物。
[0325] 53.如段51-52中任一项所述的方法，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变选自于由以下狭窄、狭窄病变或闭塞病变所组成的组：间歇性跛行（外周动脉狭窄）、心绞痛（冠状
动脉狭窄）、颈动脉狭窄、主动脉狭窄、钮孔狭窄、钙化结节性狭窄、冠状动脉或静脉口狭窄、
双侧主动脉狭窄、鱼嘴二尖瓣狭窄、特发性肥厚性主动脉瓣下狭窄、漏斗部狭窄、二尖瓣狭
窄、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭窄、肺栓塞、肺高血压、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄、瓣上狭
窄、三尖瓣狭窄、肾动脉狭窄、幽门狭窄（胃流出阻塞）、阻塞性黄疸（胆道狭窄）、肠阻塞、包茎、脑积水、狭窄性腱鞘炎、椎管狭窄、声门下狭窄（SGS）、高血压、镰状细胞贫血，以及它们的任意组合。
动脉狭窄）、颈动脉狭窄、主动脉狭窄、钮孔狭窄、钙化结节性狭窄、冠状动脉或静脉口狭窄、
双侧主动脉狭窄、鱼嘴二尖瓣狭窄、特发性肥厚性主动脉瓣下狭窄、漏斗部狭窄、二尖瓣狭
窄、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭窄、肺栓塞、肺高血压、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄、瓣上狭
窄、三尖瓣狭窄、肾动脉狭窄、幽门狭窄（胃流出阻塞）、阻塞性黄疸（胆道狭窄）、肠阻塞、包茎、脑积水、狭窄性腱鞘炎、椎管狭窄、声门下狭窄（SGS）、高血压、镰状细胞贫血，以及它们的任意组合。
[0326] 54.如段51-53中任一项所述的方法，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变的起因为：外伤或损伤、动脉粥样硬化、先天缺陷、糖尿病、医源性、感染、炎症、局部缺血、肿瘤、血管痉挛、冠状动脉或静脉痉挛、Raynaud现象、中风、血液凝结、Moyamoya病、Takayasu病、结
节性多动脉炎、播散性红斑狼疮、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒、血液透
析、镰状细胞贫血，以及以上起因的任意组合。
节性多动脉炎、播散性红斑狼疮、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒、血液透
析、镰状细胞贫血，以及以上起因的任意组合。
[0327] 55.一种用于对受试者中的内出血进行治疗的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予如段1-49中任一项所述的聚集体或如段50所述的药物组合物。
[0328] 56.如段55所述的方法，其中，所述内出血的起因为：外伤、高血压导致的血管破裂、感染（例如，Ebola或Marburg）、癌症、坏血病、肝细胞癌、自身免疫性血小板减少症、异位妊娠、恶性体温过低、卵巢囊肿、肝癌、维生素K缺乏症、血友病、药物副作用。
[0329] 57.如段51-56中任一项所述的方法，其中，所述给予通过注射、输液、滴注、吸入或摄食进行。
[0330] 58.一种用于制备微尺寸聚集体的方法，所述方法包括：
[0331] (iv)获得多个纳米粒子；
[0332] (v)将所述多个纳米粒子聚集成为微尺寸的粒子；以及
[0333] (vi)任选地选择期望尺寸的粒子。
[0334] 59.如段58所述的方法，其中，获得所述多个纳米粒子包括形成或制造所述多个纳米粒子。
[0335] 60.如段58-59中任一项所述的方法，其中，所述纳米粒子包含选自于由以下聚合物所组成的组中的聚合物：泊洛沙姆、聚丙交酯、聚乙交酯、聚己内酯、聚乳酸和聚乙醇酸共
聚物、聚酸酐、聚ε-己内酯、聚酰胺、聚氨酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二氧环己酮、聚缩醛、聚缩酮、聚碳酸酯、聚原碳酸酯、聚二氢吡喃、聚磷腈、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊酸酯、聚亚烷基
草酸酯、聚亚烷基琥珀酸酯、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚羟基纤维
素、聚甲基丙烯酸甲酯、壳多糖、壳聚糖、聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚甘油癸二酸酯（PGS）、明胶、胶原、丝、壳聚糖、藻酸盐/酯、纤维素、聚核酸、醋酸纤维素（包括双醋酸纤维素）、聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、尼龙、聚碳酸酯、聚硫化物、聚砜、水凝胶（例如，丙烯酸水凝胶）、聚丙烯腈、聚乙酸乙烯酯、醋酸丁酸纤维素、硝化纤维素、氨酯/碳酸酯共聚物、苯乙烯/马来酸共聚物、聚乙烯亚胺、透明质酸酶、肝
素、琼脂糖、普鲁兰多糖，以及上述聚合物的共聚物、三元共聚物，以及包含上述聚合物的任
意组合的共聚物。
聚物、聚酸酐、聚ε-己内酯、聚酰胺、聚氨酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二氧环己酮、聚缩醛、聚缩酮、聚碳酸酯、聚原碳酸酯、聚二氢吡喃、聚磷腈、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊酸酯、聚亚烷基
草酸酯、聚亚烷基琥珀酸酯、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚羟基纤维
素、聚甲基丙烯酸甲酯、壳多糖、壳聚糖、聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚甘油癸二酸酯（PGS）、明胶、胶原、丝、壳聚糖、藻酸盐/酯、纤维素、聚核酸、醋酸纤维素（包括双醋酸纤维素）、聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、尼龙、聚碳酸酯、聚硫化物、聚砜、水凝胶（例如，丙烯酸水凝胶）、聚丙烯腈、聚乙酸乙烯酯、醋酸丁酸纤维素、硝化纤维素、氨酯/碳酸酯共聚物、苯乙烯/马来酸共聚物、聚乙烯亚胺、透明质酸酶、肝
素、琼脂糖、普鲁兰多糖，以及上述聚合物的共聚物、三元共聚物，以及包含上述聚合物的任
意组合的共聚物。
[0336] 61.如段58-60中任一项所述的方法，其中，所述期望的聚集体尺寸为≤50μm。
[0337] 62.如段58-61中任一项所述的方法，其中，所述微尺寸粒子进一步包含选自于由以下分子所组成的组中的分子：有机或无机小分子或大分子、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、
糖胺聚糖、生物大分子，例如，肽、蛋白质、肽类似物及它们的衍生物、肽模拟物、脂类、碳水
化合物、核酸、多核苷酸、寡核苷酸、基因、包括控制和终止区域的基因、自我复制体系如病
毒DNA或质粒DNA、单链和双链siRNA以及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA
（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、microRNA、microRNA模拟物、适配子、antimirs、antagomirs、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸、多核苷酸、siRNA、
核酸类似物和衍生物、由生物材料如细菌、植物、真菌、或动物细胞或组织制备而得的提取
物、天然存在的或合成的组合物，或上述分子的任意组合。
糖胺聚糖、生物大分子，例如，肽、蛋白质、肽类似物及它们的衍生物、肽模拟物、脂类、碳水
化合物、核酸、多核苷酸、寡核苷酸、基因、包括控制和终止区域的基因、自我复制体系如病
毒DNA或质粒DNA、单链和双链siRNA以及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA
（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、microRNA、microRNA模拟物、适配子、antimirs、antagomirs、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸、多核苷酸、siRNA、
核酸类似物和衍生物、由生物材料如细菌、植物、真菌、或动物细胞或组织制备而得的提取
物、天然存在的或合成的组合物，或上述分子的任意组合。
[0338] 63.如段62所述的方法，其中，所述分子封装于所述纳米粒子中、或所述分子吸收/吸附于所述纳米粒子的表面。
[0339] 64.如段62-63中任一项所述的方法，其中，所述分子共价连接至所述纳米粒子。
[0340] 65.如段62-64中任一项所述的方法，其中，所述分子具有生物活性。
[0341] 66.如段65所述的方法，其中，所述生物活性选自于由以下生物活性所组成的组：在生物分析中的酶促、刺激、抑制、调节、毒性或致死响应。
[0342] 67.如段65-66中任一项所述的方法，其中，所述生物活性选自于由以下活性所组成的组：显示出或调节酶活性、阻断受体、刺激受体、调节一个或多个基因的表达水平、调节
细胞增殖、调节细胞分裂、调节细胞分化、调节细胞运动性、调节细胞形态，以及上述生物活
性的任意组合。
细胞增殖、调节细胞分裂、调节细胞分化、调节细胞运动性、调节细胞形态，以及上述生物活
性的任意组合。
[0343] 68.如段62-67中任一项所述的方法，其中，所述分子是疏水分子、亲水分子或两亲分子。
[0344] 69.如段62-68中任一项所述的方法，其中，所述分子为治疗剂，或其类似物、衍生物、前药或药学上可接受的盐。
[0345] 70.如段69所述的方法，其中，所述治疗剂是抗血栓形成剂和/或血栓溶解剂或纤维蛋白溶解剂。
[0346] 71.如段70所述的方法，其中，所述抗血栓形成剂、血栓溶解剂或纤维蛋白溶解剂选自于由以下抗血栓形成剂、血栓溶解剂或纤维蛋白溶解剂所组成的组：抗凝血剂、促凝血
剂拮抗剂、抗血小板剂、血栓溶解剂、抗血栓溶解剂拮抗剂，以及上述抗血栓形成剂、血栓溶
解剂或纤维蛋白溶解剂的任意组合。
剂拮抗剂、抗血小板剂、血栓溶解剂、抗血栓溶解剂拮抗剂，以及上述抗血栓形成剂、血栓溶
解剂或纤维蛋白溶解剂的任意组合。
[0347] 72.如段69所述的方法，其中，所述治疗剂是血栓形成剂。
[0348] 73.如段72所述的方法，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：血栓溶解剂拮抗剂、抗凝血剂拮抗剂、促凝血酶、促凝血分子，以及上述血栓形成剂的任
意组合。
意组合。
[0349] 74.如段72-73中任一项所述的方法，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：鱼精蛋白、维生素K1、氨基己酸（amicar）、氨甲环酸（amstat）、阿那格雷、阿加曲班、西洛他唑、达曲班、去纤苷酸、依诺肝素、速避凝、吲哚布芬、lamoparan、奥扎格
雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上述
血栓形成剂的任意组合。
雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上述
血栓形成剂的任意组合。
[0350] 75.如段69所述的方法，其中，所述治疗剂为选自于由以下血栓溶解剂所组成的组中的血栓溶解剂：组织纤溶酶原激活物（t-PA）、链激酶（SK）、尿激酶原、尿激酶（uPA）、阿替普酶（又名 Genentech，Inc.）、瑞替普酶（又名r-PA或 Centocor，
Inc.）、替奈普酶（又名TNKTM，Genentech，Inc.）、 （AstraZeneca，LP）、拉诺替普
酶（Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（Eisai Company，Ltd.）、沙芦普酶（又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶
激活剂复合物（又名APSAC、Anistreplase和 SmithKline Beecham Corp.），以
及上述血栓溶解剂的任意组合。
Inc.）、替奈普酶（又名TNKTM，Genentech，Inc.）、 （AstraZeneca，LP）、拉诺替普
酶（Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（Eisai Company，Ltd.）、沙芦普酶（又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶
激活剂复合物（又名APSAC、Anistreplase和 SmithKline Beecham Corp.），以
及上述血栓溶解剂的任意组合。
[0351] 76.如段69所述的方法，其中，所述治疗剂是抗炎剂。
[0352] 77.如段76所述的方法，其中，所述抗炎剂选自于由以下抗炎剂所组成的组：非甾体类抗炎药物（NSAID）、皮质类固醇（如泼尼松）、抗疟疾药物（如羟氯喹）、甲氨蝶呤、柳氮磺吡啶、来氟米特、抗TNF药物、环磷酰胺、麦考酚酯、地塞米松、罗格列酮、泼尼松龙、皮质酮、布地奈德、雌激素、雌二醇、柳氮磺吡啶、非诺贝特、普伐他汀、辛伐他汀、匹格列酮、乙酰水
杨酸、麦考酚酸、5-氨基水杨酸、羟基脲，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受
的盐。
杨酸、麦考酚酸、5-氨基水杨酸、羟基脲，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受
的盐。
[0353] 78.如段69所述的方法，其中，所述治疗剂是血管扩张剂。
[0354] 79.如段78所述的方法，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：α-肾上腺素受体拮抗剂（α-阻断剂）、血管紧张素转化酶（ACE）抑制剂、血管紧张素受体阻断剂（ARB）、β2-肾上腺素受体激动剂（β2-激动剂）、钙通道阻断剂（CCB）、中枢性交感神经阻滞剂、直接作用的血管扩张剂、内皮素受体拮抗剂、神经节阻断剂、硝基扩张剂、磷酸二酯
酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
[0355] 80.如段78-79任一项所述的方法，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：哌唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪、曲马唑嗪、酚妥拉明、酚苄明、贝那普利、卡托
普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普罗沙
坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地平、尼
群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农（旧称
amrinone）、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的类似物、衍生
物、前药和药学上可接受的盐。
普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普罗沙
坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地平、尼
群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农（旧称
amrinone）、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的类似物、衍生
物、前药和药学上可接受的盐。
[0356] 81.如段69所述的方法，其中，所述治疗剂是抗肿瘤剂、抗增殖剂、和/或抗有丝分裂剂、和/或抗迁移剂。
[0357] 82.如段81所述的方法，其中，所述抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分裂剂/抗迁移剂选自于由以下抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分裂剂/抗迁移剂所组成的组：紫杉醇、5-氟尿嘧
啶、多柔比星、柔红霉素、环孢素、顺铂、长春碱、长春新碱、埃坡霉素、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、阿霉素和自力霉素、内皮抑素、血管抑素和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨、紫杉酚、曲匹地尔、
卤夫酮，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
啶、多柔比星、柔红霉素、环孢素、顺铂、长春碱、长春新碱、埃坡霉素、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、阿霉素和自力霉素、内皮抑素、血管抑素和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨、紫杉酚、曲匹地尔、
卤夫酮，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0358] 83.如段69-82中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由以下治疗剂所组成的组：阿斯匹林、华法林（香豆素）、醋硝香豆素、安克洛酶、茴茚二酮、溴茚二酮、氯茚二
酮、库美香豆素、环香豆素、葡聚糖、葡聚糖硫酸酯钠、双香豆素、二苯茚酮、双香豆乙酯、乙
双香豆素、氟茚二酮、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠、奥沙二酮、多硫酸戊聚糖、苯茚二酮、苯丙
香豆素、卵黄高磷蛋白、吡考他胺、噻氯香豆素、双嘧达莫（潘生丁）、磺吡酮（苯磺唑酮）、噻氯匹定（抵克立得）、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶
（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶/ASPAC（依米那酶），以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
酮、库美香豆素、环香豆素、葡聚糖、葡聚糖硫酸酯钠、双香豆素、二苯茚酮、双香豆乙酯、乙
双香豆素、氟茚二酮、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠、奥沙二酮、多硫酸戊聚糖、苯茚二酮、苯丙
香豆素、卵黄高磷蛋白、吡考他胺、噻氯香豆素、双嘧达莫（潘生丁）、磺吡酮（苯磺唑酮）、噻氯匹定（抵克立得）、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶
（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶/ASPAC（依米那酶），以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0359] 84.如段62-83中任一项所述的方法，其中，相对于非解聚聚集体而言，所述分子以更高的释放速率和/或更高的释放量由解聚聚集体释放。
[0360] 85.如段84所述的方法，其中，相对于非解聚聚集体而言，所述解聚聚集体的释放速率至少高出10%。
[0361] 86.如段58-85中任一项所述的方法，其中，所述多个纳米粒子中的至少一个纳米粒子包含配体。
[0362] 87.如段86所述的方法，其中，所述配体是靶向配体。
[0363] 88.如段86-87中任一项所述的方法，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：肽、多肽、蛋白质、肽模拟物、糖蛋白、凝集素、核苷、核苷酸、核酸、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、糖胺聚糖、脂多糖、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体、受体配体，以及它们的类似物和衍生物。
[0364] 89.如段86-88中任一项所述的方法，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：聚赖氨酸（PLL）、聚L-天冬氨酸、聚L-谷氨酸、苯乙烯-顺丁烯二酸酐共聚物、聚(L-丙交
酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺共
聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前胶
原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、
1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,3-丙二醇、十
七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、二甲氧三苯甲
基、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、swinholide A、
indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及上述配体的任意组
合。
酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺共
聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前胶
原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、
1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,3-丙二醇、十
七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、二甲氧三苯甲
基、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、swinholide A、
indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及上述配体的任意组
合。
[0365] 90.如段86-89中任一项所述的方法，其中，所述配体是选自于由以下肽所组成的组中的肽：CREKA、CRKRLDRNK、CHVLWSTRC、ALEALAEALEALAEA、KFFKFFKFFK（细菌细胞壁渗透
肽）、AALEALAEALEALAEALEALAEAAAAGGC（GALA）、ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA）、
GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-7）、GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2）、GLF EAI EGFI
ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7）、GLF EAI EGFI ENGW
EGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC（diINF-3）、GLFGALAEALAEALAEHLAEALAEALEAL
AAGGSC（GLF）、GLFEAIEGFIENGWEGLAEALAEALEALAAGGSC（GALA-INF3）以及GLF EAI EGFI
ENGW EGnI DG K GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG（INF-5，n为正亮氨酸）、RQIKIWFQNRRMKWKK
（穿膜肽）、GRKKRRQRRRPPQC（Tat片段48-60）、GALFLGWLGAAGSTMGAWSQPKKKRKV（基于信号序
列的肽）、LLIILRRRIRKQAHAHSK（PVEC）、WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL（细胞穿透肽）、
KLALKLALKALKAALKLA（两亲模型肽）、RRRRRRRRR（Arg9）、LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLR
NLVPRTES（LL-37）、SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素P1）、
ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC（α-防卫素）、DHYNCVSSGGQCLYSACPIFTKIQGTCYRGKAKCCK
（β-防卫素）、RRRPRPPYLPRPRPPPFFPPRLPPRIPPGFPPRFPPRFPGKR-NH2（PR-39）、
ILPWKWPWWPWRR-NH2（indolicidin）、AAVALLPAVLLALLAP（RFGF）、AALLPVLLAAP（RFGF类似
物）、RKCRIVVIRVCR（bactenecin）、天蚕素、lycotoxins、paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽（BLP）、cathelicidins、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗肠道抗菌肽（HFIAP）、
magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、
esculentinis-1、caerins，以及它们的任何类似物与衍生物。
肽）、AALEALAEALEALAEALEALAEAAAAGGC（GALA）、ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA）、
GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-7）、GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2）、GLF EAI EGFI
ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7）、GLF EAI EGFI ENGW
EGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC（diINF-3）、GLFGALAEALAEALAEHLAEALAEALEAL
AAGGSC（GLF）、GLFEAIEGFIENGWEGLAEALAEALEALAAGGSC（GALA-INF3）以及GLF EAI EGFI
ENGW EGnI DG K GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG（INF-5，n为正亮氨酸）、RQIKIWFQNRRMKWKK
（穿膜肽）、GRKKRRQRRRPPQC（Tat片段48-60）、GALFLGWLGAAGSTMGAWSQPKKKRKV（基于信号序
列的肽）、LLIILRRRIRKQAHAHSK（PVEC）、WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL（细胞穿透肽）、
KLALKLALKALKAALKLA（两亲模型肽）、RRRRRRRRR（Arg9）、LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLR
NLVPRTES（LL-37）、SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素P1）、
ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC（α-防卫素）、DHYNCVSSGGQCLYSACPIFTKIQGTCYRGKAKCCK
（β-防卫素）、RRRPRPPYLPRPRPPPFFPPRLPPRIPPGFPPRFPPRFPGKR-NH2（PR-39）、
ILPWKWPWWPWRR-NH2（indolicidin）、AAVALLPAVLLALLAP（RFGF）、AALLPVLLAAP（RFGF类似
物）、RKCRIVVIRVCR（bactenecin）、天蚕素、lycotoxins、paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽（BLP）、cathelicidins、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗肠道抗菌肽（HFIAP）、
magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、
esculentinis-1、caerins，以及它们的任何类似物与衍生物。
[0366] 91.如段86-90中任一项所述的方法，其中，相比于对照而言，所述配体将解聚速率降低至少10%。
[0367] 92.如段58-91中任一项所述的方法，其中，相对于非狭窄区域而言，所述聚集体在狭窄区域中解聚至少10%。
[0368] 93.如段92所述的方法，其中，相对于非狭窄区域而言，所述狭窄区域中的切应力高出至少一倍。
[0369] 94.如段92-93中任一项所述的方法，其中，所述非狭窄区域中的切应力为正常生理学切应力。
[0370] 95.如段92-94中任一项所述的方法，其中，所述狭窄区域中的切应力为至少2
70dyn/cm。
70dyn/cm。
[0371] 96.如段58-95中任一项所述的方法，其中，所述聚集体为球体、圆柱体、盘状、长方体、立方体、或不规则形状。
[0372] 97.如段58-96中任一项所述的方法，其中，所述纳米粒子为球体、圆柱体、盘状、长方体、立方体、或不规则形状。
[0373] 98.如段58-97中任一项所述的方法，其中，对所述纳米粒子的表面进行修饰，以调节两个以上纳米粒子间的分子间静电相互作用、氢键相互作用、偶极-偶极相互作用、亲水
相互作用、疏水相互作用、范德华力、以及上述作用的任意组合。
相互作用、疏水相互作用、范德华力、以及上述作用的任意组合。
[0374] 99.如段58-98中任一项所述的方法，其中，所述聚集体的尺寸为1μm至3μm。
[0375] 100.如段62所述的方法，其中，所述分子是显像剂。
[0376] 101.如段100所述的方法，其中，所述显像剂选自于由以下显像剂所组成的组：染料（Invitrogen Corp.；Carlsbad，Calif）、荧光素、异硫氰酸荧光素
（FITC）、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）、在α位或β位上具有氨基的萘胺染
料（如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-6-
萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物）、香豆素（如
3-苯基-7-异氰酸香豆素）、吖啶（如9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙）、N-(p(2-苯并噁唑基)苯基)
顺丁烯二酰亚胺、青色素（如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA））、1H,5H,11H,
15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡
咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-
内盐（TR或德克萨斯红）、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白（如绿色荧光
蛋白、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、去稳定EGFP、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、DsRed变体
mRFPmars和mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、天蓝色荧光蛋白，以及
它们的变体）、放射性同位素（如99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga、153Gd、18F、124I、125I、
131I、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re
188 211 212
、 Re、 At、 Bi）、顺磁性金属离子（如Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)）、X射线吸收
剂（如Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir），以及上述显像剂的任意组合。
（FITC）、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）、在α位或β位上具有氨基的萘胺染
料（如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-6-
萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物）、香豆素（如
3-苯基-7-异氰酸香豆素）、吖啶（如9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙）、N-(p(2-苯并噁唑基)苯基)
顺丁烯二酰亚胺、青色素（如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA））、1H,5H,11H,
15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡
咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-
内盐（TR或德克萨斯红）、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白（如绿色荧光
蛋白、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、去稳定EGFP、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、DsRed变体
mRFPmars和mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、天蓝色荧光蛋白，以及
它们的变体）、放射性同位素（如99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga、153Gd、18F、124I、125I、
131I、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re
188 211 212
、 Re、 At、 Bi）、顺磁性金属离子（如Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)）、X射线吸收
剂（如Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir），以及上述显像剂的任意组合。
[0377] 102.如段58-101中任一项所述的方法，其中，所述纳米粒子包含至少一个延长所述聚集体体内寿命的部分。
[0378] 103.如段102所述的方法，其中，所述至少一个部分是聚乙二醇。
[0379] 104.如段69所述的方法，其中，所述治疗剂是血管收缩剂。
[0380] 105.如段104所述的方法，其中，所述血管收缩剂选自于由以下血管收缩剂所组成的组：α-肾上腺素受体激动剂、儿茶酚胺、加压素、加压素受体调节剂、以及钙通道激动剂。
[0381] 106.如段104-105中任一项所述的方法，其中，所述血管收缩剂选自于由以下血管收缩剂所组成的组：硫酸铝、阿米福林、安非他明、血管紧张素、抗组胺剂、精氨酸加压素、碱
式没食子酸铋、咖啡胺醇、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明、脱氧肾上腺素、多巴胺、麻黄素、肾
上腺素、苯赖加压素、茚唑啉、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸、甲氧麻黄酮、甲氧明、哌甲酯、美替唑啉、metraminol、米多君、萘甲唑啉、异肾上腺素、去甲
肾上腺素、二甲己胺、鸟氨酸加压素、羟甲唑啉、苯乙醇胺、苯肾上腺素、苯异丙胺、苯丙醇
胺、苯加压素、丙己君、伪麻黄碱、塞洛西宾、四肼屈嗪、四氢唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢
唑啉与硫酸锌、曲马唑啉、异庚胺、泰马唑啉、加压素、加压催产素、赛洛唑啉、氧化锌，以及
上述血管收缩剂的任意组合。
式没食子酸铋、咖啡胺醇、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明、脱氧肾上腺素、多巴胺、麻黄素、肾
上腺素、苯赖加压素、茚唑啉、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸、甲氧麻黄酮、甲氧明、哌甲酯、美替唑啉、metraminol、米多君、萘甲唑啉、异肾上腺素、去甲
肾上腺素、二甲己胺、鸟氨酸加压素、羟甲唑啉、苯乙醇胺、苯肾上腺素、苯异丙胺、苯丙醇
胺、苯加压素、丙己君、伪麻黄碱、塞洛西宾、四肼屈嗪、四氢唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢
唑啉与硫酸锌、曲马唑啉、异庚胺、泰马唑啉、加压素、加压催产素、赛洛唑啉、氧化锌，以及
上述血管收缩剂的任意组合。
[0382] 107.一种用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变和/或闭塞病变和/或内出血进行治疗的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予血红细胞，其中，所述血红细胞包含治疗
剂；其中，所述治疗剂封装于所述血红细胞中；其中，当暴露至预先确定的切应力时，在所述
预先确定的切应力以上从所述血红细胞中释放所述治疗剂。
剂；其中，所述治疗剂封装于所述血红细胞中；其中，当暴露至预先确定的切应力时，在所述
预先确定的切应力以上从所述血红细胞中释放所述治疗剂。
[0383] 108.一种用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变和/或闭塞病变和/或内出血进行成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予血红细胞；其中，所述血红细胞包含显像
剂；其中，所述显像剂封装于所述血红细胞中；其中，当暴露至预先确定的切应力时，在所述
预先确定的切应力以上从所述血红细胞中释放所述显像剂。
剂；其中，所述显像剂封装于所述血红细胞中；其中，当暴露至预先确定的切应力时，在所述
预先确定的切应力以上从所述血红细胞中释放所述显像剂。
[0384] 109.如段107-108中任一项所述的方法，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变选自于由以下狭窄、狭窄病变或闭塞病变所组成的组：间歇性跛行（外周动脉狭窄）、心绞痛
（冠状动脉狭窄）、颈动脉狭窄、主动脉狭窄、钮孔狭窄、钙化结节性狭窄、冠状动脉或静脉口
狭窄、双侧主动脉狭窄、鱼嘴二尖瓣狭窄、特发性肥厚性主动脉瓣下狭窄、漏斗部狭窄、二尖
瓣狭窄、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭窄、肺栓塞、肺高血压、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄、瓣
上狭窄、三尖瓣狭窄、肾动脉狭窄、幽门狭窄（胃流出阻塞）、阻塞性黄疸（胆道狭窄）、肠阻
塞、包茎、脑积水、狭窄性腱鞘炎、椎管狭窄、声门下狭窄（SGS）、高血压、镰状细胞贫血，以及它们的任意组合。
（冠状动脉狭窄）、颈动脉狭窄、主动脉狭窄、钮孔狭窄、钙化结节性狭窄、冠状动脉或静脉口
狭窄、双侧主动脉狭窄、鱼嘴二尖瓣狭窄、特发性肥厚性主动脉瓣下狭窄、漏斗部狭窄、二尖
瓣狭窄、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭窄、肺栓塞、肺高血压、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄、瓣
上狭窄、三尖瓣狭窄、肾动脉狭窄、幽门狭窄（胃流出阻塞）、阻塞性黄疸（胆道狭窄）、肠阻
塞、包茎、脑积水、狭窄性腱鞘炎、椎管狭窄、声门下狭窄（SGS）、高血压、镰状细胞贫血，以及它们的任意组合。
[0385] 110.如段107-108中任一项所述的方法，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变的起因为：外伤或损伤、动脉粥样硬化、先天缺陷、糖尿病、医源性、感染、炎症、局部缺血、肿
瘤、血管痉挛、冠状动脉或静脉痉挛、Raynaud现象、中风、血液凝结、Moyamoya病、Takayasu
病、结节性多动脉炎、播散性红斑狼疮、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒、血
液透析、镰状细胞贫血，以及以上起因的任意组合。
瘤、血管痉挛、冠状动脉或静脉痉挛、Raynaud现象、中风、血液凝结、Moyamoya病、Takayasu
病、结节性多动脉炎、播散性红斑狼疮、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒、血
液透析、镰状细胞贫血，以及以上起因的任意组合。
[0386] 111.如段107-108中任一项所述的方法，其中，所述内出血的起因为：外伤、高血压导致的血管破裂、感染（例如，Ebola或Marburg）、癌症、坏血病、肝细胞癌、自身免疫性血小
板减少症、异位妊娠、恶性体温过低、卵巢囊肿、肝癌、维生素K缺乏症、血友病、药物副作用。
板减少症、异位妊娠、恶性体温过低、卵巢囊肿、肝癌、维生素K缺乏症、血友病、药物副作用。
[0387] 112.如段107-111中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是抗血栓形成剂和/或血栓溶解剂。
[0388] 113.如段112所述的方法，其中，所述抗血栓形成剂或血栓溶解剂选自于由以下抗血栓形成剂或血栓溶解剂所组成的组：抗凝血剂、促凝血剂拮抗剂、抗血小板剂、血栓溶解
剂、抗血栓溶解剂拮抗剂、纤维蛋白溶解酶，以及上述抗血栓形成剂或血栓溶解剂的任意组
合。
剂、抗血栓溶解剂拮抗剂、纤维蛋白溶解酶，以及上述抗血栓形成剂或血栓溶解剂的任意组
合。
[0389] 114.如段107-111中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是血栓形成剂。
[0390] 115.如段114所述的方法，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：血栓溶解剂拮抗剂、抗凝血剂拮抗剂、促凝血酶、促凝血分子，以及上述血栓形成剂的
任意组合。
任意组合。
[0391] 116.如段114-115中任一项所述的方法，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：鱼精蛋白、维生素K1、氨基己酸（amicar）、氨甲环酸（amstat）、阿那格
雷、阿加曲班、西洛他唑、达曲班、去纤苷酸、依诺肝素、速避凝、吲哚布芬、lamoparan、奥扎格雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上
述血栓形成剂的任意组合。
雷、阿加曲班、西洛他唑、达曲班、去纤苷酸、依诺肝素、速避凝、吲哚布芬、lamoparan、奥扎格雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上
述血栓形成剂的任意组合。
[0392] 117.如段107-111中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂为选自于由以下血栓溶解剂所组成的组中的血栓溶解剂：组织纤溶酶原激活物（t-PA）、链激酶（SK）、尿激酶原、尿
激酶（uPA）、阿替普酶（又名 Genentech，Inc.）、瑞替普酶（又名r-PA或
Centocor，Inc.）、替奈普酶（又名TNKTM，Genentech，Inc.）、
（AstraZeneca，LP）、拉诺替普酶（Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（Eisai
Company，Ltd.）、沙芦普酶（又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激
酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶激活剂复合物（又名APSAC、Anistreplase和
SmithKline Beecham Corp.），以及上述血栓溶解剂的任意组合。
激酶（uPA）、阿替普酶（又名 Genentech，Inc.）、瑞替普酶（又名r-PA或
Centocor，Inc.）、替奈普酶（又名TNKTM，Genentech，Inc.）、
（AstraZeneca，LP）、拉诺替普酶（Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（Eisai
Company，Ltd.）、沙芦普酶（又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激
酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶激活剂复合物（又名APSAC、Anistreplase和
SmithKline Beecham Corp.），以及上述血栓溶解剂的任意组合。
[0393] 118.如段107-111中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是抗炎剂。
[0394] 119.如段118所述的方法，其中，所述抗炎剂选自于由以下抗炎剂所组成的组：非甾体类抗炎药物（NSAID，如阿斯匹林、布洛芬或萘普生）、皮质类固醇（如泼尼松）、抗疟疾药物（如羟氯喹）、甲氨蝶呤、柳氮磺吡啶、来氟米特、抗TNF药物、环磷酰胺、麦考酚酯、地塞米松、罗格列酮、泼尼松龙、皮质酮、布地奈德、雌激素、雌二醇、柳氮磺吡啶、非诺贝特、普伐他汀、辛伐他汀、匹格列酮、乙酰水杨酸、麦考酚酸、5-氨基水杨酸、羟基脲，以及它们的类似
物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0395] 120.如段107-111中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是血管扩张剂。
[0396] 121.如段120所述的方法，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：α-肾上腺素受体拮抗剂（α-阻断剂）、血管紧张素转化酶（ACE）抑制剂、血管紧张素受体阻断剂（ARB）、β2-肾上腺素受体激动剂（β2-激动剂）、钙通道阻断剂（CCB）、中枢性交感神经阻滞剂、直接作用的血管扩张剂、内皮素受体拮抗剂、神经节阻断剂、硝基扩张剂、磷酸二
酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
[0397] 122.如段120-121中任一项所述的方法，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：哌唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪、曲马唑嗪、酚妥拉明、酚苄明、贝那普利、
卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普
罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地
平、尼群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农
（旧称amrinone）、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普
罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地
平、尼群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农
（旧称amrinone）、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0398] 123.如段107-111中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是抗肿瘤剂、抗增殖剂、和/或抗有丝分裂剂、和/或抗迁移剂。
[0399] 124.如段123所述的方法，其中，所述抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分裂剂/抗迁移剂选自于由以下抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分裂剂/抗迁移剂所组成的组：紫杉醇、5-氟尿
嘧啶、多柔比星、柔红霉素、环孢素、顺铂、长春碱、长春新碱、埃坡霉素、甲氨蝶呤、硫唑嘌
呤、阿霉素和自力霉素、内皮抑素、血管抑素和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨、紫杉酚、曲匹地
尔、卤夫酮，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
嘧啶、多柔比星、柔红霉素、环孢素、顺铂、长春碱、长春新碱、埃坡霉素、甲氨蝶呤、硫唑嘌
呤、阿霉素和自力霉素、内皮抑素、血管抑素和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨、紫杉酚、曲匹地
尔、卤夫酮，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0400] 125.如段107-111中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由以下治疗剂所组成的组：阿斯匹林、华法林（香豆素）、醋硝香豆素、安克洛酶、茴茚二酮、溴茚二酮、氯茚二酮、库美香豆素、环香豆素、葡聚糖、葡聚糖硫酸酯钠、双香豆素、二苯茚酮、双香豆乙酯、乙
双香豆素、氟茚二酮、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠、奥沙二酮、多硫酸戊聚糖、苯茚二酮、苯丙
香豆素、卵黄高磷蛋白、吡考他胺、噻氯香豆素、双嘧达莫（潘生丁）、磺吡酮（苯磺唑酮）、噻氯匹定（抵克立得）、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶
（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶/ASPAC（依米那酶），以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
双香豆素、氟茚二酮、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠、奥沙二酮、多硫酸戊聚糖、苯茚二酮、苯丙
香豆素、卵黄高磷蛋白、吡考他胺、噻氯香豆素、双嘧达莫（潘生丁）、磺吡酮（苯磺唑酮）、噻氯匹定（抵克立得）、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶
（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶/ASPAC（依米那酶），以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0401] 126.如段107-111中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是血管收缩剂。
[0402] 127.如段126所述的方法，其中，所述血管收缩剂选自于由以下血管收缩剂所组成的组：α-肾上腺素受体激动剂、儿茶酚胺、加压素、加压素受体调节剂、以及钙通道激动剂。
[0403] 128.如段126-127中任一项所述的方法，其中，所述血管收缩剂选自于由以下血管收缩剂所组成的组：硫酸铝、阿米福林、安非他明、血管紧张素、抗组胺剂、精氨酸加压素、碱
式没食子酸铋、咖啡胺醇、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明、脱氧肾上腺素、多巴胺、麻黄素、肾
上腺素、苯赖加压素、茚唑啉、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸、甲氧麻黄酮、甲氧明、哌甲酯、美替唑啉、metraminol、米多君、萘甲唑啉、异肾上腺素、去甲
肾上腺素、二甲己胺、鸟氨酸加压素、羟甲唑啉、苯乙醇胺、苯肾上腺素、苯异丙胺、苯丙醇
胺、苯加压素、丙己君、伪麻黄碱、塞洛西宾、四肼屈嗪、四氢唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢
唑啉与硫酸锌、曲马唑啉、异庚胺、泰马唑啉、加压素、加压催产素、赛洛唑啉、氧化锌，以及
上述血管收缩剂的任意组合。
式没食子酸铋、咖啡胺醇、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明、脱氧肾上腺素、多巴胺、麻黄素、肾
上腺素、苯赖加压素、茚唑啉、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸、甲氧麻黄酮、甲氧明、哌甲酯、美替唑啉、metraminol、米多君、萘甲唑啉、异肾上腺素、去甲
肾上腺素、二甲己胺、鸟氨酸加压素、羟甲唑啉、苯乙醇胺、苯肾上腺素、苯异丙胺、苯丙醇
胺、苯加压素、丙己君、伪麻黄碱、塞洛西宾、四肼屈嗪、四氢唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢
唑啉与硫酸锌、曲马唑啉、异庚胺、泰马唑啉、加压素、加压催产素、赛洛唑啉、氧化锌，以及
上述血管收缩剂的任意组合。
[0404] 129.如段108-111中任一项所述的方法，其中，所述显像剂选自于由以下显像剂所组成的组：Alexa 染料（Invitrogen Corp.；Carlsbad，Calif）、荧光素、异硫氰酸荧
光素（FITC）、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）、在α位或β位上具有氨基的萘胺染料（如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-
6-萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物）、香豆素
（如3-苯基-7-异氰酸香豆素）、吖啶（如9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙）、N-(p(2-苯并噁唑基)苯
基)顺丁烯二酰亚胺、青色素（如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA））、1H,5H,11H,
15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡
咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-
内盐（TR或德克萨斯红）、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白（如绿色荧光
蛋白、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、去稳定EGFP、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、DsRed变体
mRFPmars和mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、天蓝色荧光蛋白，以及
它们的变体）、放射性同位素（如99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga、153Gd、18F、124I、125I、
131I、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At、212Bi）、顺磁性金属离子（如Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)）、X射线吸收剂（如Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir），以及上述显像剂的任意组合。
光素（FITC）、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）、在α位或β位上具有氨基的萘胺染料（如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-
6-萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物）、香豆素
（如3-苯基-7-异氰酸香豆素）、吖啶（如9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙）、N-(p(2-苯并噁唑基)苯
基)顺丁烯二酰亚胺、青色素（如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA））、1H,5H,11H,
15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡
咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-
内盐（TR或德克萨斯红）、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白（如绿色荧光
蛋白、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、去稳定EGFP、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、DsRed变体
mRFPmars和mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、天蓝色荧光蛋白，以及
它们的变体）、放射性同位素（如99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga、153Gd、18F、124I、125I、
131I、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At、212Bi）、顺磁性金属离子（如Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)）、X射线吸收剂（如Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir），以及上述显像剂的任意组合。
[0405] 130.如段107-129中任一项所述的方法，其中，所述RBC包含配体。
[0406] 131.如段130所述的方法，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：肽、多肽、蛋白质、肽模拟物、糖蛋白、凝血素、核苷、核苷酸、核酸（例如，多核苷酸、寡核苷酸、基因、包括控制和终止区域的基因、自我复制体系如病毒DNA或质粒DNA、单链和双链siRNA以
及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、
microRNA、microRNA模拟物、supermirs、适配子、antimirs、antimirs、antagomirs、U1衔接
头、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸）、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、糖胺聚糖、脂多糖、脂类、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体、受体配体，以及它们的类似物和衍生物。
及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、
microRNA、microRNA模拟物、supermirs、适配子、antimirs、antimirs、antagomirs、U1衔接
头、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸）、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、糖胺聚糖、脂多糖、脂类、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体、受体配体，以及它们的类似物和衍生物。
[0407] 132.如段130-131中任一项所述的方法，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：聚赖氨酸（PLL）、聚L-天冬氨酸、聚L-谷氨酸、苯乙烯-顺丁烯二酸酐共聚物、聚(L-丙
交酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺
共聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚
胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前
胶原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、
Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,
3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、
二甲氧三苯甲基、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、
swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、
GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及
上述配体的任意组合。
交酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺
共聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚
胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前
胶原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、
Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,
3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、
二甲氧三苯甲基、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、
swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、
GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及
上述配体的任意组合。
[0408] 133.如段130-132中任一项所述的方法，其中，所述配体是选自于由以下肽所组成的组中的肽：SEQ ID NO：1（CREKA）、SEQ ID NO：2（CRKRLDRNK）、SEQ ID NO：3（CHVLWSTRC）、SEQ ID NO：4（ALEALAEALEALAEA）、SEQ ID NO：5（KFFKFFKFFK（细菌细胞壁渗透肽））、SEQ ID NO：6（AALEALAEALEALAEALEALAEAAAAGGC（GALA））、SEQ ID NO：7
（ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA））、SEQ ID NO：8（GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-
7））、SEQ ID NO：9（GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2））、SEQ ID NO:10（GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7））、SEQ ID NO:11（GLF EAI
EGFI ENGW EGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC（diINF-3））、SEQ ID NO:12（GLFGA
LAEALAEALAEHLAEALAEALEALAAGGSC（GLF））、SEQ ID NO:13（GLFEAIEGFIENGWEGLAEALAEALE
ALAAGGSC（GALA-INF3））、SEQ ID NO:14（GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG K GLF EAI EGFI
ENGW EGnI DG（INF-5，n为正亮氨酸））、SEQ ID NO:15（RQIKIWFQNRRMKWKK（穿膜肽））、SEQ ID NO:16（GRKKRRQRRRPPQC（Tat片段48-60））、SEQ ID NO:17
（GALFLGWLGAAGSTMGAWSQPKKKRKV（基于信号序列的肽））、SEQ ID NO:18
（LLIILRRRIRKQAHAHSK（PVEC））、SEQ ID NO:19（WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL（细胞穿透
肽））、SEQ ID NO:20（KLALKLALKALKAALKLA（两亲模型肽））、SEQ ID NO:21（RRRRRRRRR
（Arg9））、SEQ ID NO:22（LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES（LL-37））、SEQ ID NO:
23（SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素P1））、SEQ ID NO:24
（ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC（α-防卫素））、SEQ ID NO:25（DHYNCVSSGGQCLYSACPIF
TKIQGTCYRGKAKCCK（β-防卫素））、SEQ ID NO:26（RRRPRPPYLPRPRPPPFFPPRLPPRIPPGFPPRFP
PRFPGKR-NH2（PR-39））、SEQ ID NO:27（ILPWKWPWWPWRR-NH2（indolicidin））、SEQ ID NO:28（AAVALLPAVLLALLAP（RFGF））、SEQ ID NO:29（AALLPVLLAAP（RFGF类似物））、SEQ ID NO:30（RKCRIVVIRVCR（bactenecin））、天蚕素、lycotoxins、paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽（BLP）、cathelicidins、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗肠道抗菌肽（HFIAP）、
magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、
esculentinis-1、caerins，以及它们的任何类似物与衍生物。
（ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA））、SEQ ID NO：8（GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-
7））、SEQ ID NO：9（GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2））、SEQ ID NO:10（GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7））、SEQ ID NO:11（GLF EAI
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（LLIILRRRIRKQAHAHSK（PVEC））、SEQ ID NO:19（WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL（细胞穿透
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23（SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素P1））、SEQ ID NO:24
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magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、
esculentinis-1、caerins，以及它们的任何类似物与衍生物。
[0409] 134.如段107-133中任一项所述的方法，其中，所述RBC是人血红细胞。
[0410] 135.如段107-134中任一项所述的方法，其中，所述RBC是自体血红细胞。
[0411] 136.如段107-135中任一项所述的方法，其中，所述预先确定的切应力为至少70dyn/cm2。
[0412] 137.如段107-136中任一项所述的方法，其中，所述给予通过注射、输液、滴注、吸入或摄食进行。
[0413] 138.一种用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变和/或闭塞病变和/或内出血进行治疗的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予微胶囊，其中，所述微胶囊包含治疗剂；
其中，所述治疗剂封装于所述微胶囊中；其中，当暴露至预先确定的切应力时，在所述预先
确定的切应力以上所述微胶囊分裂。
其中，所述治疗剂封装于所述微胶囊中；其中，当暴露至预先确定的切应力时，在所述预先
确定的切应力以上所述微胶囊分裂。
[0414] 139.一种用于对受试者中的狭窄和/或狭窄病变和/或闭塞病变和/或内出血进行成像的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予微胶囊，其中，所述微胶囊包含显像剂；
其中，所述显像剂封装于所述微胶囊中；其中，当暴露至预先确定的切应力时，在所述预先
确定的切应力以上所述微胶囊分裂。
其中，所述显像剂封装于所述微胶囊中；其中，当暴露至预先确定的切应力时，在所述预先
确定的切应力以上所述微胶囊分裂。
[0415] 140.如段138-139中任一项所述的方法，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变选自于由以下狭窄、狭窄病变或闭塞病变所组成的组：间歇性跛行（外周动脉狭窄）、心绞痛
（冠状动脉狭窄）、颈动脉狭窄、主动脉狭窄、钮孔狭窄、钙化结节性狭窄、冠状动脉或静脉口
狭窄、双侧主动脉狭窄、鱼嘴二尖瓣狭窄、特发性肥厚性主动脉瓣下狭窄、漏斗部狭窄、二尖
瓣狭窄、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭窄、肺栓塞、肺高血压、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄、瓣
上狭窄、三尖瓣狭窄、肾动脉狭窄、幽门狭窄（胃流出阻塞）、阻塞性黄疸（胆道狭窄）、肠阻
塞、包茎、脑积水、狭窄性腱鞘炎、椎管狭窄、声门下狭窄（SGS）、高血压、镰状细胞贫血，以及它们的任意组合。
（冠状动脉狭窄）、颈动脉狭窄、主动脉狭窄、钮孔狭窄、钙化结节性狭窄、冠状动脉或静脉口
狭窄、双侧主动脉狭窄、鱼嘴二尖瓣狭窄、特发性肥厚性主动脉瓣下狭窄、漏斗部狭窄、二尖
瓣狭窄、肌性主动脉瓣下狭窄、肺部狭窄、肺栓塞、肺高血压、主动脉瓣下狭窄、瓣下狭窄、瓣
上狭窄、三尖瓣狭窄、肾动脉狭窄、幽门狭窄（胃流出阻塞）、阻塞性黄疸（胆道狭窄）、肠阻
塞、包茎、脑积水、狭窄性腱鞘炎、椎管狭窄、声门下狭窄（SGS）、高血压、镰状细胞贫血，以及它们的任意组合。
[0416] 141.如段138-140中任一项所述的方法，其中，所述狭窄、狭窄病变或闭塞病变的起因为：外伤或损伤、动脉粥样硬化、先天缺陷、糖尿病、医源性、感染、炎症、局部缺血、肿
瘤、血管痉挛、冠状动脉或静脉痉挛、Raynaud现象、中风、血液凝结、Moyamoya病、Takayasu
病、结节性多动脉炎、播散性红斑狼疮、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒、血
液透析、镰状细胞贫血，以及以上起因的任意组合。
瘤、血管痉挛、冠状动脉或静脉痉挛、Raynaud现象、中风、血液凝结、Moyamoya病、Takayasu
病、结节性多动脉炎、播散性红斑狼疮、类风湿性关节炎、脊柱肿瘤、Paget骨病、氟中毒、血
液透析、镰状细胞贫血，以及以上起因的任意组合。
[0417] 142.如段138-141中任一项所述的方法，其中，所述内出血的起因为：外伤、高血压导致的血管破裂、感染（例如，Ebola或Marburg）、癌症、坏血病、肝细胞癌、自身免疫性血小
板减少症、异位妊娠、恶性体温过低、卵巢囊肿、肝癌、维生素K缺乏症、血友病、药物副作用。
板减少症、异位妊娠、恶性体温过低、卵巢囊肿、肝癌、维生素K缺乏症、血友病、药物副作用。
[0418] 143.如段138-142中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是抗血栓形成剂和/或血栓溶解剂。
[0419] 144.如段143所述的方法，其中，所述抗血栓形成剂或血栓溶解剂选自于由以下抗血栓形成剂或血栓溶解剂所组成的组：抗凝血剂、促凝血剂拮抗剂、抗血小板剂、血栓溶解
剂、抗血栓溶解剂拮抗剂、纤维蛋白溶解酶，以及上述抗血栓形成剂或血栓溶解剂的任意组
合。
剂、抗血栓溶解剂拮抗剂、纤维蛋白溶解酶，以及上述抗血栓形成剂或血栓溶解剂的任意组
合。
[0420] 145.如段138-142中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是血栓形成剂。
[0421] 146.如段145所述的方法，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：血栓溶解剂拮抗剂、抗凝血剂拮抗剂、促凝血酶、促凝血分子，以及上述血栓形成剂的
任意组合。
任意组合。
[0422] 147.如段145-146中任一项所述的方法，其中，所述血栓形成剂选自于由以下血栓形成剂所组成的组：鱼精蛋白、维生素K1、氨基己酸（amicar）、氨甲环酸（amstat）、阿那格
雷、阿加曲班、西洛他唑、达曲班、去纤苷酸、依诺肝素、速避凝、吲哚布芬、lamoparan、奥扎格雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上
述血栓形成剂的任意组合。
雷、阿加曲班、西洛他唑、达曲班、去纤苷酸、依诺肝素、速避凝、吲哚布芬、lamoparan、奥扎格雷、吡考他胺、普拉贝脲、替地肝素、噻氯匹定、三氟柳、胶原、包覆有胶原的粒子，以及上
述血栓形成剂的任意组合。
[0423] 148.如段138-142中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂为选自于由以下血栓溶解剂所组成的组中的血栓溶解剂：组织纤溶酶原激活物（t-PA）、链激酶（SK）、尿激酶原、尿
激酶（uPA）、阿替普酶（又名 Genentech，Inc.）、瑞替普酶（又名r-PA或
Centocor，Inc.）、替奈普酶（又名TNKTM，Genentech，Inc.）、
（AstraZeneca，LP）、拉诺替普酶（Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（Eisai
Company，Ltd.）、沙芦普酶（又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激
酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶激活剂复合物（又名APSAC、Anistreplase和
SmithKline Beecham Corp.），以及上述血栓溶解剂的任意组合。
激酶（uPA）、阿替普酶（又名 Genentech，Inc.）、瑞替普酶（又名r-PA或
Centocor，Inc.）、替奈普酶（又名TNKTM，Genentech，Inc.）、
（AstraZeneca，LP）、拉诺替普酶（Bristol-Myers Squibb Company）、孟替普酶（Eisai
Company，Ltd.）、沙芦普酶（又名r-scu-PA和rescupaseTM，Grunenthal GmbH，Corp.）、葡激
酶、以及茴香酰化纤溶酶原-链激酶激活剂复合物（又名APSAC、Anistreplase和
SmithKline Beecham Corp.），以及上述血栓溶解剂的任意组合。
[0424] 149.如段138-142中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是抗炎剂。
[0425] 150.如段149所述的方法，其中，所述抗炎剂选自于由以下抗炎剂所组成的组：非甾体类抗炎药物（NSAID，如阿斯匹林、布洛芬或萘普生）、皮质类固醇（如泼尼松）、抗疟疾药物（如羟氯喹）、甲氨蝶呤、柳氮磺吡啶、来氟米特、抗TNF药物、环磷酰胺、麦考酚酯、地塞米松、罗格列酮、泼尼松龙、皮质酮、布地奈德、雌激素、雌二醇、柳氮磺吡啶、非诺贝特、普伐他汀、辛伐他汀、匹格列酮、乙酰水杨酸、麦考酚酸、5-氨基水杨酸、羟基脲，以及它们的类似
物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0426] 151.如段138-142中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是血管扩张剂。
[0427] 152.如段151所述的方法，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：α-肾上腺素受体拮抗剂（α-阻断剂）、血管紧张素转化酶（ACE）抑制剂、血管紧张素受体阻断剂（ARB）、β2-肾上腺素受体激动剂（β2-激动剂）、钙通道阻断剂（CCB）、中枢性交感神经阻滞剂、直接作用的血管扩张剂、内皮素受体拮抗剂、神经节阻断剂、硝基扩张剂、磷酸二
酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
酯酶抑制剂、钾通道开放剂、肾素抑制剂，以及上述血管扩张剂的任意组合。
[0428] 153.如段151-152中任一项所述的方法，其中，所述血管扩张剂选自于由以下血管扩张剂所组成的组：哌唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪、曲马唑嗪、酚妥拉明、酚苄明、贝那普利、
卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普
罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地
平、尼群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农
（旧称amrinone）、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、坎地沙坦、依普
罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦、替米沙坦、缬沙坦、肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、多巴酚丁胺、异丙肾上腺素、氨氯地平、非洛地平、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地
平、尼群地平、可乐定、胍那苄、胍法辛、α-甲基多巴、肼屈嗪、波生坦、樟磺咪芬、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝化甘油、丁四硝酯、季戊四醇四硝酸酯、硝普酸钠、米力农、氨力农
（旧称amrinone）、西洛他唑、西地那非、他达拉非、米诺地尔、阿利吉仑，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0429] 154.如段138-142中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是抗肿瘤剂、抗增殖剂、和/或抗有丝分裂剂、和/或抗迁移剂。
[0430] 155.如段154所述的方法，其中，所述抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分裂剂/抗迁移剂选自于由以下抗肿瘤剂/抗增殖剂/抗有丝分裂剂/抗迁移剂所组成的组：紫杉醇、5-氟尿
嘧啶、多柔比星、柔红霉素、环孢素、顺铂、长春碱、长春新碱、埃坡霉素、甲氨蝶呤、硫唑嘌
呤、阿霉素和自力霉素、内皮抑素、血管抑素和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨、紫杉酚、曲匹地
尔、卤夫酮，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
嘧啶、多柔比星、柔红霉素、环孢素、顺铂、长春碱、长春新碱、埃坡霉素、甲氨蝶呤、硫唑嘌
呤、阿霉素和自力霉素、内皮抑素、血管抑素和胸苷激酶抑制剂、克拉屈滨、紫杉酚、曲匹地
尔、卤夫酮，以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0431] 156.如段138-142中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由以下治疗剂所组成的组：阿斯匹林、华法林（香豆素）、醋硝香豆素、安克洛酶、茴茚二酮、溴茚二酮、氯茚二酮、库美香豆素、环香豆素、葡聚糖、葡聚糖硫酸酯钠、双香豆素、二苯茚酮、双香豆乙酯、乙
双香豆素、氟茚二酮、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠、奥沙二酮、多硫酸戊聚糖、苯茚二酮、苯丙
香豆素、卵黄高磷蛋白、吡考他胺、噻氯香豆素、双嘧达莫（潘生丁）、磺吡酮（苯磺唑酮）、噻氯匹定（抵克立得）、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶
（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶/ASPAC（依米那酶），以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
双香豆素、氟茚二酮、肝素、水蛭素、聚烯磺酸钠、奥沙二酮、多硫酸戊聚糖、苯茚二酮、苯丙
香豆素、卵黄高磷蛋白、吡考他胺、噻氯香豆素、双嘧达莫（潘生丁）、磺吡酮（苯磺唑酮）、噻氯匹定（抵克立得）、组织纤溶酶原激活物（activase）、血纤维蛋白溶酶、尿激酶原、尿激酶
（abbokinase）、链激酶（streptase）、阿尼普酶/ASPAC（依米那酶），以及它们的类似物、衍生物、前药和药学上可接受的盐。
[0432] 157.如段138-142中任一项所述的方法，其中，所述治疗剂是血管收缩剂。
[0433] 158.如段157所述的方法，其中，所述血管收缩剂选自于由以下血管收缩剂所组成的组：α-肾上腺素受体激动剂、儿茶酚胺、加压素、加压素受体调节剂、以及钙通道激动剂。
[0434] 159.如段157-158中任一项所述的方法，其中，所述血管收缩剂选自于由以下血管收缩剂所组成的组：硫酸铝、阿米福林、安非他明、血管紧张素、抗组胺剂、精氨酸加压素、碱
式没食子酸铋、咖啡胺醇、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明、脱氧肾上腺素、多巴胺、麻黄素、肾
上腺素、苯赖加压素、茚唑啉、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸、甲氧麻黄酮、甲氧明、哌甲酯、美替唑啉、metraminol、米多君、萘甲唑啉、异肾上腺素、去甲
肾上腺素、二甲己胺、鸟氨酸加压素、羟甲唑啉、苯乙醇胺、苯肾上腺素、苯异丙胺、苯丙醇
胺、苯加压素、丙己君、伪麻黄碱、塞洛西宾、四肼屈嗪、四氢唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢
唑啉与硫酸锌、曲马唑啉、异庚胺、泰马唑啉、加压素、加压催产素、赛洛唑啉、氧化锌，以及
上述血管收缩剂的任意组合。
式没食子酸铋、咖啡胺醇、咖啡因、儿茶酚胺、环喷他明、脱氧肾上腺素、多巴胺、麻黄素、肾
上腺素、苯赖加压素、茚唑啉、异丙肾上腺素、麦角酸二乙胺、赖氨酸加压素（LVP）、麦角酸、甲氧麻黄酮、甲氧明、哌甲酯、美替唑啉、metraminol、米多君、萘甲唑啉、异肾上腺素、去甲
肾上腺素、二甲己胺、鸟氨酸加压素、羟甲唑啉、苯乙醇胺、苯肾上腺素、苯异丙胺、苯丙醇
胺、苯加压素、丙己君、伪麻黄碱、塞洛西宾、四肼屈嗪、四氢唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸四氢
唑啉与硫酸锌、曲马唑啉、异庚胺、泰马唑啉、加压素、加压催产素、赛洛唑啉、氧化锌，以及
上述血管收缩剂的任意组合。
[0435] 160.如段139-142中任一项所述的方法，其中，所述显像剂选自于由以下显像剂所组成的组： 染料（Invitrogen Corp.；Carlsbad，Calif）、荧光素、异硫氰酸荧
光素（FITC）、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）、在α位或β位上具有氨基的萘胺染料（如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-
6-萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物）、香豆素
（如3-苯基-7-异氰酸香豆素）、吖啶（如9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙）、N-(p(2-苯并噁唑基)苯
基)顺丁烯二酰亚胺、青色素（如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA））、1H,5H,11H,
15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡
咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-
内盐（TR或德克萨斯红）、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白（如绿色荧光
蛋白、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、去稳定EGFP、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、DsRed变体
mRFPmars和mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、天蓝色荧光蛋白，以及
它们的变体）、放射性同位素（如99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga、153Gd、18F、124I、125I、
131I、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At、212Bi）、顺磁性金属离子（如Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)）、X射线吸收剂（如Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir），以及上述显像剂的任意组合。
光素（FITC）、Oregon GreenTM、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、5-羧基荧光素（FAM）、2’7’-二甲氧基-4’5’-二氯-6-羧基荧光素（JOE）、四氯荧光素（TET）、6-羧基罗丹明（R6G）、N,N,N,N’-四甲基-6-羧基罗丹明（TAMRA）、6-羧基-X-罗丹明（ROX）、在α位或β位上具有氨基的萘胺染料（如，包括1-二甲氨基-萘基-5-磺酸盐/酯、1-苯胺基-8-萘磺酸盐/酯、2-p-甲苯胺基-
6-萘磺酸盐/酯、以及5-(2’-氨乙基)氨基萘-1-磺酸（EDANS）在内的萘胺化合物）、香豆素
（如3-苯基-7-异氰酸香豆素）、吖啶（如9-异硫氰酸吖啶和吖啶橙）、N-(p(2-苯并噁唑基)苯
基)顺丁烯二酰亚胺、青色素（如Cy2、吲哚二羰花青3（Cy3）、吲哚二羰花青5（Cy5）、吲哚二羰花青5.5（Cy5.5）、3-(ε-羧基-戊基)-3’乙基-5,5’-二甲基氧杂羰花青（CyA））、1H,5H,11H,
15H-占吨并[2,3,4-ij:5,6,7-i’j’]二喹嗪-18-ium；9-[2(或4)-[[[6-[(2,5-二氧代-1-吡
咯烷基)氧基]-6-氧代己基]氨基]磺酰基]-4(或2)-磺苯基]-2,3,6,7,12,13,16,17八氢-
内盐（TR或德克萨斯红）、BODIPYTM染料、苯并噁二唑、二苯乙烯、芘、荧光蛋白（如绿色荧光
蛋白、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、去稳定EGFP、红色荧光蛋白（例如，DsRed）、DsRed变体
mRFPmars和mRFPruby、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、天蓝色荧光蛋白，以及
它们的变体）、放射性同位素（如99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、Ga、68Ga、153Gd、18F、124I、125I、
131I、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、86Y、87Y、90Y、105Rh、111Ag、111In、117mSn、149Pm、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、211At、212Bi）、顺磁性金属离子（如Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)）、X射线吸收剂（如Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir），以及上述显像剂的任意组合。
[0436] 161.如段138-160中任一项所述的方法，其中，所述微胶囊包含配体。
[0437] 162.如段161所述的方法，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：肽、多肽、蛋白质、肽模拟物、糖蛋白、凝血素、核苷、核苷酸、核酸（例如，多核苷酸、寡核苷酸、基因、包括控制和终止区域的基因、自我复制体系如病毒DNA或质粒DNA、单链和双链siRNA以
及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、
microRNA、microRNA模拟物、supermirs、适配子、antimirs、antimirs、antagomirs、U1衔接
头、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸）、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、糖胺聚糖、脂多糖、脂类、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体、受体配体，以及它们的类似物和衍生物。
及其它RNA干扰剂（RNAi试剂或iRNA试剂）、短发卡RNA（shRNA）、反义寡核苷酸、核酶、
microRNA、microRNA模拟物、supermirs、适配子、antimirs、antimirs、antagomirs、U1衔接
头、三链形成寡核苷酸、RNA激活剂、免疫刺激寡核苷酸、以及诱饵寡核苷酸）、单糖、二糖、三糖、寡糖、多糖、糖胺聚糖、脂多糖、脂类、维生素、类固醇、激素、辅因子、受体、受体配体，以及它们的类似物和衍生物。
[0438] 163.如段161-162中任一项所述的方法，其中，所述配体选自于由以下配体所组成的组：聚赖氨酸（PLL）、聚L-天冬氨酸、聚L-谷氨酸、苯乙烯-顺丁烯二酸酐共聚物、聚(L-丙
交酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺
共聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚
胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前
胶原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、
Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,
3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、
二甲氧三苯甲基、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、
swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、
GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及
上述配体的任意组合。
交酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-顺丁烯二酸酐共聚物、N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺
共聚物（HMPA）、聚乙二醇（PEG）、聚乙烯醇（PVA）、聚氨酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-异丙基丙烯酰胺聚合物、聚磷腈、聚乙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚胺、伪肽-聚胺、肽模拟物聚胺、树状聚
胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、促甲状腺素、促黑素、凝集素、表面活性蛋白A、粘蛋白、转铁蛋白、二膦酸盐/酯、聚谷氨酸盐/酯、聚天冬氨酸盐/酯、适配子、去唾液酸胎球蛋白、透明质酸、前
胶原、胰岛素、转铁蛋白、白蛋白、吖啶、交联补骨脂素、丝裂霉素C、TPPC4、替沙林、
Sapphyrin、多环芳烃（例如，吩嗪、二氢吩嗪）、胆汁酸、胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睾酮、1,3-双-O(十六烷基)甘油、香叶氧己基基团、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,
3-丙二醇、十七烷基基团、棕榈酸、肉豆蔻酸、O-3-(油酰基)石胆酸、O-3-(油酰基)胆烯酸、
二甲氧三苯甲基、或吩噁嗪、RGD肽、放射性标记物、半抗原、萘普生、阿斯匹林、二硝基苯基、HRP、AP、凝集素、维生素A、维生素E、维生素K、维生素B、叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑、japlakinolide、拉春库林A、鬼笔环肽、
swinholide A、indanocine、myoservin、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1β、γ干扰素、
GalNAc、半乳糖、甘露糖、甘露糖-6P、糖簇（如GalNAc簇、甘露糖簇、半乳糖簇）、适配子、整联蛋白受体配体、趋化因子受体配体、血清素受体配体、PSMA、内皮素、GCPII、生长抑素，以及
上述配体的任意组合。
[0439] 164.如段161-163中任一项所述的方法，其中，所述配体是选自于由以下肽所组成的组中的肽：SEQ ID NO：1（CREKA）、SEQ ID NO：2（CRKRLDRNK）、SEQ ID NO：3（CHVLWSTRC）、SEQ ID NO：4（ALEALAEALEALAEA）、SEQ ID NO：5（KFFKFFKFFK（细菌细胞壁渗透肽））、SEQ ID NO：6（AALEALAEALEALAEALEALAEAAAAGGC（GALA））、SEQ ID NO：7
（ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA））、SEQ ID NO：8（GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-
7））、SEQ ID NO：9（GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2））、SEQ ID NO:10（GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7））、SEQ ID NO:11（GLF EAI
EGFI ENGW EGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC（diINF-3））、SEQ ID NO:12（GLFGA
LAEALAEALAEHLAEALAEALEALAAGGSC（GLF））、SEQ ID NO:13（GLFEAIEGFIENGWEGLAEALAEALE
ALAAGGSC（GALA-INF3））、SEQ ID NO:14（GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG K GLF EAI EGFI
ENGW EGnI DG（INF-5，n为正亮氨酸））、SEQ ID NO:15（RQIKIWFQNRRMKWKK（穿膜肽））、SEQ ID NO:16（GRKKRRQRRRPPQC（Tat片段48-60））、SEQ ID NO:17
（GALFLGWLGAAGSTMGAWSQPKKKRKV（基于信号序列的肽））、SEQ ID NO:18
（LLIILRRRIRKQAHAHSK（PVEC））、SEQ ID NO:19（WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL（细胞穿透
肽））、SEQ ID NO:20（KLALKLALKALKAALKLA（两亲模型肽））、SEQ ID NO:21（RRRRRRRRR
（Arg9））、SEQ ID NO:22（LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES（LL-37））、SEQ ID NO:
23（SWLSKTAKKLENSAKKRISEGIAIAIQGGPR（天蚕素P1））、SEQ ID NO:24
（ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC（α-防卫素））、SEQ ID NO:25（DHYNCVSSGGQCLYSACPIF
TKIQGTCYRGKAKCCK（β-防卫素））、SEQ ID NO:26（RRRPRPPYLPRPRPPPFFPPRLPPRIPPGFPPRFP
PRFPGKR-NH2（PR-39））、SEQ ID NO:27（ILPWKWPWWPWRR-NH2（indolicidin））、SEQ ID NO:28（AAVALLPAVLLALLAP（RFGF））、SEQ ID NO:29（AALLPVLLAAP（RFGF类似物））、SEQ ID NO:30（RKCRIVVIRVCR（bactenecin））、天蚕素、lycotoxins、paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽（BLP）、cathelicidins、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗肠道抗菌肽（HFIAP）、
magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、
esculentinis-1、caerins，以及它们的任何类似物与衍生物。
（ALAEALAEALAEALAEALAEALAAAAGGC（EALA））、SEQ ID NO：8（GLFEAIEGFIENGWEGMIWDYG（INF-
7））、SEQ ID NO：9（GLFGAIAGFIENGWEGMIDGWYG（Inf HA-2））、SEQ ID NO:10（GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGWYGC（diINF-7））、SEQ ID NO:11（GLF EAI
EGFI ENGW EGMI DGGC GLF EAI EGFI ENGW EGMI DGGC（diINF-3））、SEQ ID NO:12（GLFGA
LAEALAEALAEHLAEALAEALEALAAGGSC（GLF））、SEQ ID NO:13（GLFEAIEGFIENGWEGLAEALAEALE
ALAAGGSC（GALA-INF3））、SEQ ID NO:14（GLF EAI EGFI ENGW EGnI DG K GLF EAI EGFI
ENGW EGnI DG（INF-5，n为正亮氨酸））、SEQ ID NO:15（RQIKIWFQNRRMKWKK（穿膜肽））、SEQ ID NO:16（GRKKRRQRRRPPQC（Tat片段48-60））、SEQ ID NO:17
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（LLIILRRRIRKQAHAHSK（PVEC））、SEQ ID NO:19（WTLNSAGYLLKINLKALAALAKKIL（细胞穿透
肽））、SEQ ID NO:20（KLALKLALKALKAALKLA（两亲模型肽））、SEQ ID NO:21（RRRRRRRRR
（Arg9））、SEQ ID NO:22（LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES（LL-37））、SEQ ID NO:
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（ACYCRIPACIAGERRYGTCIYQGRLWAFCC（α-防卫素））、SEQ ID NO:25（DHYNCVSSGGQCLYSACPIF
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PRFPGKR-NH2（PR-39））、SEQ ID NO:27（ILPWKWPWWPWRR-NH2（indolicidin））、SEQ ID NO:28（AAVALLPAVLLALLAP（RFGF））、SEQ ID NO:29（AALLPVLLAAP（RFGF类似物））、SEQ ID NO:30（RKCRIVVIRVCR（bactenecin））、天蚕素、lycotoxins、paradaxins、buforin、CPF、类铃蟾抗菌肽（BLP）、cathelicidins、ceratotoxins、S.clava肽、八目鳗肠道抗菌肽（HFIAP）、
magainines、brevinins-2、dermaseptins、蜂毒肽、pleurocidin、H2A肽、爪蟾肽、
esculentinis-1、caerins，以及它们的任何类似物与衍生物。
[0440] 165.如段138-164中任一项所述的方法，其中，所述预先确定的切应力为至少2
70dyn/cm。
70dyn/cm。
[0441] 166.如段138-165中任一项所述的方法，其中，所述给予通过注射、输液、滴注、吸入或摄食进行。
[0442] 167.如段138-166中任一项所述的方法，其中，所述微胶囊为单层微胶囊。
[0443] 168.如段138-166中任一项所述的方法，其中，所述微胶囊为多层微胶囊。
[0444] 169.如段138-168中任一项所述的方法，其中，所述微胶囊的尺寸为约1微米至约5,000微米。
[0445] 170.如段138-169中任一项所述的方法，其中，所述微胶囊的聚合物壳包含生物相容聚合物。
[0446] 171.如段138-170中任一项所述的方法，其中，所述微胶囊的聚合物壳包含选自于由以下聚合物所组成的组中的聚合物：泊洛沙姆、聚丙交酯、聚乙交酯、聚己内酯、聚乳酸和
聚乙醇酸共聚物、聚酸酐、聚ε-己内酯、聚酰胺、聚氨酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二氧环己
酮、聚缩醛、聚缩酮、聚碳酸酯、聚原碳酸酯、聚二氢吡喃、聚磷腈、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊
酸酯、聚亚烷基草酸酯、聚亚烷基琥珀酸酯、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二
醇、聚羟基纤维素、聚甲基丙烯酸甲酯、壳多糖、壳聚糖、聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚甘油
癸二酸酯（PGS）、明胶、胶原、丝、壳聚糖、藻酸盐/酯、纤维素、聚核酸、醋酸纤维素（包括双醋酸纤维素）、聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、尼龙、聚碳酸酯、聚硫化物、聚砜、水凝胶（例如，丙烯酸水凝胶）、聚丙烯腈、聚乙酸乙烯酯、醋酸丁酸纤维素、硝化纤维素、氨酯/碳酸酯共聚物、苯乙烯/马来酸共聚物、聚乙烯亚
胺、透明质酸酶、肝素、琼脂糖、普鲁兰多糖，以及上述聚合物的共聚物、三元共聚物，以及包
含上述聚合物的任意组合的共聚物。
聚乙醇酸共聚物、聚酸酐、聚ε-己内酯、聚酰胺、聚氨酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二氧环己
酮、聚缩醛、聚缩酮、聚碳酸酯、聚原碳酸酯、聚二氢吡喃、聚磷腈、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊
酸酯、聚亚烷基草酸酯、聚亚烷基琥珀酸酯、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二
醇、聚羟基纤维素、聚甲基丙烯酸甲酯、壳多糖、壳聚糖、聚乳酸和聚乙醇酸共聚物、聚甘油
癸二酸酯（PGS）、明胶、胶原、丝、壳聚糖、藻酸盐/酯、纤维素、聚核酸、醋酸纤维素（包括双醋酸纤维素）、聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯、聚对苯二甲酸乙二酯（PET）、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、尼龙、聚碳酸酯、聚硫化物、聚砜、水凝胶（例如，丙烯酸水凝胶）、聚丙烯腈、聚乙酸乙烯酯、醋酸丁酸纤维素、硝化纤维素、氨酯/碳酸酯共聚物、苯乙烯/马来酸共聚物、聚乙烯亚
胺、透明质酸酶、肝素、琼脂糖、普鲁兰多糖，以及上述聚合物的共聚物、三元共聚物，以及包
含上述聚合物的任意组合的共聚物。
[0447] 172.如段138-171中任一项所述的方法，其中，相对于正常血管切应力下的释放速率，在预先确定的切应力下或更高的切应力下，从所述微胶囊释放所述治疗剂或所述显像
剂的速率高出至少10%。
剂的速率高出至少10%。
[0449] 下列实施例阐明了本发明的一些实施方式和一些方面。对本领域技术人员来说显而易见的是，可以在不改变本发明的精神或范围的情况下进行各种修改、增加、替换等，这
些修改和变化都包含在所附权利要求书中限定的本发明的范围之内。本发明在任何情况下
都不局限于下述实施例。
些修改和变化都包含在所附权利要求书中限定的本发明的范围之内。本发明在任何情况下
都不局限于下述实施例。
[0450] 实施例
[0451] 实施例1：
[0452] 依照如下方式制备PEG-PLGA（50:50MW4:17kDA）或PLGA（50:50MW17kDa）纳米粒子。利用顺丁烯二酰亚胺-PEG-NH2接头，将COOH-PEG-PLGA或COOH-PLGA聚合物与结合肽（CREKA
（SEQ ID NO:1）或CRKRLDRNK（SEQ ID NO:3））相缀合。首先，在pH为6.5时，在PBS缓冲液中将肽的半胱氨酸末端缀合至PEG接头的顺丁烯二酰亚胺末端。其次，使用1-乙基-3-(3-二甲基
氨基丙基)（EDC）与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）将羧基官能化的PEG-PLGA聚合物预活化，随后
与相应的PEG修饰的肽在PBS/DMSO混合液中于室温下反应约4小时。将最终产品通过透析纯
1
化，并获得冻干粉末。缀合反应由 H NMR确认。随后将该缀合有肽的聚合物与香豆素（疏水
染料）溶于乙酸乙酯或DMSO中，并通过w/o/w乳液法或简单溶剂置换法制得所述纳米粒子。
（SEQ ID NO:1）或CRKRLDRNK（SEQ ID NO:3））相缀合。首先，在pH为6.5时，在PBS缓冲液中将肽的半胱氨酸末端缀合至PEG接头的顺丁烯二酰亚胺末端。其次，使用1-乙基-3-(3-二甲基
氨基丙基)（EDC）与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）将羧基官能化的PEG-PLGA聚合物预活化，随后
与相应的PEG修饰的肽在PBS/DMSO混合液中于室温下反应约4小时。将最终产品通过透析纯
1
化，并获得冻干粉末。缀合反应由 H NMR确认。随后将该缀合有肽的聚合物与香豆素（疏水
染料）溶于乙酸乙酯或DMSO中，并通过w/o/w乳液法或简单溶剂置换法制得所述纳米粒子。
[0453] 基于通过将5mg/ml的浓溶液在4℃下放置多于3天的时间而增强的自发自聚集（spontaneous self aggregation）获得纳米粒子聚集体。以5微米过滤器过滤聚集体悬浮
液，以选出任何尺寸较大的聚集体。另外，通过离心（×2000g，5分钟）并继以洗涤，以降低单
个未结合纳米粒子的浓度。
液，以选出任何尺寸较大的聚集体。另外，通过离心（×2000g，5分钟）并继以洗涤，以降低单
个未结合纳米粒子的浓度。
[0454] 使用标准N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯化学，将COOH-PEG-PLGA（50:50MW4:17kDA）聚合物与结合肽（CHVLWSTRC）相缀合。简言之，以1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)（EDC）与NHS
将羧基官能化的PEG-PLGA聚合物预活化，并随后与相应的肽在DMSO中于室温下反应约4小
时。将产品通过透析纯化，并获得冻干粉末。这一结合肽靶向胰岛内皮细胞。随后将该缀合
有肽的聚合物与香豆素（疏水染料）溶于DMSO，并通过简单溶剂置换法制备所述纳米粒子。
所述纳米粒子制备为5mg/ml的溶液，并使其依照如上文所述的方式聚集。
将羧基官能化的PEG-PLGA聚合物预活化，并随后与相应的肽在DMSO中于室温下反应约4小
时。将产品通过透析纯化，并获得冻干粉末。这一结合肽靶向胰岛内皮细胞。随后将该缀合
有肽的聚合物与香豆素（疏水染料）溶于DMSO，并通过简单溶剂置换法制备所述纳米粒子。
所述纳米粒子制备为5mg/ml的溶液，并使其依照如上文所述的方式聚集。
[0455] 使用传统的软刻蚀技术（soft lithography）由PDMS制备模拟狭窄的微通道。所述微通道的高度为300微米，并具有分隔于狭窄前区域和狭窄后区域之间的90%狭窄的区段
（高度为30微米）。利用等离子粘接（plasma bonding）以玻璃微片（170微米厚）对所述PDMS
通道进行密封。所述通道使用氧等离子灭菌，并包覆有纤连蛋白（50μg/ml@30min）以改善细
胞粘着。将小鼠胰岛内皮细胞引入所述微通道并使其在静止条件下粘着（培育器中2hr）。将
管道（tubing）连接至所述通道，并将所述通道置于组织培养培育器中，并使用注射泵注入
培养基。在所述通道中培养胰岛内皮细胞3-4天，直至形成单层。
（高度为30微米）。利用等离子粘接（plasma bonding）以玻璃微片（170微米厚）对所述PDMS
通道进行密封。所述通道使用氧等离子灭菌，并包覆有纤连蛋白（50μg/ml@30min）以改善细
胞粘着。将小鼠胰岛内皮细胞引入所述微通道并使其在静止条件下粘着（培育器中2hr）。将
管道（tubing）连接至所述通道，并将所述通道置于组织培养培育器中，并使用注射泵注入
培养基。在所述通道中培养胰岛内皮细胞3-4天，直至形成单层。
[0456] 将含有纳米粒子聚集体的溶液（100μg/ml）以相当于估算为主通道内1dyne/cm2的壁切应力的流速沿所述通道注入，持续10分钟。这一步骤之后，为了洗去未附着的粒子，将
水以同一流速沿所述通道注入，持续5分钟。使用Zeiss显微镜获取狭窄前位点和狭窄后位
点处细胞的相位图像和纳米粒子的荧光图像。将纳米粒子的荧光图像叠加在相位图像之
上，以显示所述纳米粒子的位置（通常遍及细胞，但核区除外）。与狭窄前位点相比，狭窄后
位点积累（粘着和细胞内吞（endocytosed））了更多的纳米粒子（数据未示出）。这表示纳米
粒子聚集体在狭窄位点解体，分散成为单个纳米粒子并粘着至靶向位点。
水以同一流速沿所述通道注入，持续5分钟。使用Zeiss显微镜获取狭窄前位点和狭窄后位
点处细胞的相位图像和纳米粒子的荧光图像。将纳米粒子的荧光图像叠加在相位图像之
上，以显示所述纳米粒子的位置（通常遍及细胞，但核区除外）。与狭窄前位点相比，狭窄后
位点积累（粘着和细胞内吞（endocytosed））了更多的纳米粒子（数据未示出）。这表示纳米
粒子聚集体在狭窄位点解体，分散成为单个纳米粒子并粘着至靶向位点。
[0457] 实施例2：用于靶向至阻塞血管的药物的切变活化的血小板模拟物
[0458] 材料和方法
[0459] 纳米粒子制备：使用简单溶剂置换法由PLGA（50:50，17kDa，酸末端；Lakeshore Biomaterials，AL）制备纳米粒子（NP）（C.E.Astete&C.M.Sabliov，Journal of
Biomaterials Science，Polymer Edition17，247(2006)）。将荧光疏水染料香豆素包含入
所述NP中，以使得能在这一研究中实现可视化与定量化。简言之，将1mg/ml聚合物与香豆素
溶于二甲亚砜（DMSO，Sigma，MO）中，在室温下以水透析，并通过溶剂置换使得形成所述纳米
粒子。所形成的NP的尺寸分布和形态使用动态光散射（DLS）、扫描电子显微镜（SEM）和透射
电子显微镜（TEM）进行表征。
Biomaterials Science，Polymer Edition17，247(2006)）。将荧光疏水染料香豆素包含入
所述NP中，以使得能在这一研究中实现可视化与定量化。简言之，将1mg/ml聚合物与香豆素
溶于二甲亚砜（DMSO，Sigma，MO）中，在室温下以水透析，并通过溶剂置换使得形成所述纳米
粒子。所形成的NP的尺寸分布和形态使用动态光散射（DLS）、扫描电子显微镜（SEM）和透射
电子显微镜（TEM）进行表征。
[0460] 血小板模拟物的制造-将PLGA NP离心并浓缩至10mg/ml的在水中的悬浮液，并添加1mg/ml的L-亮氨酸（Spectrum Chemicals & Laboratory Products，CA）。使用Mobile
Minor喷雾干燥器（Nitro，Inc.；Columbia，MD），通过喷雾干燥技术制备NP聚集体（血小板模
拟物）。将水性亮氨酸-NP悬浮液与有机相（乙醇）以1.5:1的比例分别输注，并在即将进行雾
化之前进行管内（in-line）混合（J.C.Sung等，Pharmaceutical research26，1847(2009)）。
入口温度为80℃，液体进料速率为50ml/min；气体流速设定为25g/min且喷嘴压力为40psi。
将喷雾干燥的粉末收集于位于旋风分离器（cyclone）出口的容器中。通过在期望的浓度下
将所述粉末在水中复水而形成血小板模拟物悬浮液。经5μm过滤器过滤聚集体悬浮液以选
出任何尺寸较大的聚集体；还使用了离心（2000g离心5min）继以洗涤，以去除单个未结合纳
米粒子。通过使用zeta粒度分析仪（Malven instruments，UK）并与HeNe激光器、173°背散射
检测器共同运行，使用DLS以确定稀释溶液中NP的尺寸。样品制备为PBS缓冲液中、pH7.4、浓
度为1mg/ml。以Malven instrument软件进行数据收集与分析。
Minor喷雾干燥器（Nitro，Inc.；Columbia，MD），通过喷雾干燥技术制备NP聚集体（血小板模
拟物）。将水性亮氨酸-NP悬浮液与有机相（乙醇）以1.5:1的比例分别输注，并在即将进行雾
化之前进行管内（in-line）混合（J.C.Sung等，Pharmaceutical research26，1847(2009)）。
入口温度为80℃，液体进料速率为50ml/min；气体流速设定为25g/min且喷嘴压力为40psi。
将喷雾干燥的粉末收集于位于旋风分离器（cyclone）出口的容器中。通过在期望的浓度下
将所述粉末在水中复水而形成血小板模拟物悬浮液。经5μm过滤器过滤聚集体悬浮液以选
出任何尺寸较大的聚集体；还使用了离心（2000g离心5min）继以洗涤，以去除单个未结合纳
米粒子。通过使用zeta粒度分析仪（Malven instruments，UK）并与HeNe激光器、173°背散射
检测器共同运行，使用DLS以确定稀释溶液中NP的尺寸。样品制备为PBS缓冲液中、pH7.4、浓
度为1mg/ml。以Malven instrument软件进行数据收集与分析。
[0461] 利用tPA功能化-以1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）预活化NP聚集体（1mg/ml），摩尔比为1:5:10（PLGA：EDC：NHS），随后与接头NH2-PEG-生物素（Thermofisher Scientific，Rockford，IL）在PBS中（pH7.4）于室温下反应2小时，摩尔
比为1:10。随后将所述聚集体离心并洗涤两次，并与链霉亲和素（Thermofisher
Scientific）在室温下反应15min。通过重复离心并洗涤以移除未反应的试剂而纯化所述聚
集体。独立地，使用NHS-PEG-生物素以生物素功能化人组织纤溶酶原激活物（tPA，Cell
Sciences，MA），反应在PBS中以1:10的摩尔比在室温下进行2小时（J.C.Murciano等，Nature
biotechnology21，891(2003)）。随后将所述功能化的tPA与链霉亲和素-生物素-聚集体在
室温下反应30min。随后将所述以tPA功能化的tPA功能化NP聚集体通过离心和洗涤纯化；缀
合至聚集体的tPA的量通过荧光光谱法确定。简言之，将聚集体在37℃下搅拌约6h以溶于1M
NaOH，直至获得澄清聚合物溶液。随后在594nm下测量聚合物溶液中tPA（TRITC标记的tPA，
Cell Science，MA）的量。使用荧光测定tPA活性分析（SensoLyte，AnaSpec，CA）确认包覆有
t-PA的粒子的活性。使用Zeiss FESEM Supra55vp（Center for Nanosystems（CNS），
Harvard University）对聚集的纳米粒子进行SEM。将样品设置于碳带粘性基底上，并在真
空下使用溅射涂布器（sputter coater）镀金。在4kV下使用in-lens探测器在9mm的工作距
离下对镀过的NP聚集体进行成像。
比为1:10。随后将所述聚集体离心并洗涤两次，并与链霉亲和素（Thermofisher
Scientific）在室温下反应15min。通过重复离心并洗涤以移除未反应的试剂而纯化所述聚
集体。独立地，使用NHS-PEG-生物素以生物素功能化人组织纤溶酶原激活物（tPA，Cell
Sciences，MA），反应在PBS中以1:10的摩尔比在室温下进行2小时（J.C.Murciano等，Nature
biotechnology21，891(2003)）。随后将所述功能化的tPA与链霉亲和素-生物素-聚集体在
室温下反应30min。随后将所述以tPA功能化的tPA功能化NP聚集体通过离心和洗涤纯化；缀
合至聚集体的tPA的量通过荧光光谱法确定。简言之，将聚集体在37℃下搅拌约6h以溶于1M
NaOH，直至获得澄清聚合物溶液。随后在594nm下测量聚合物溶液中tPA（TRITC标记的tPA，
Cell Science，MA）的量。使用荧光测定tPA活性分析（SensoLyte，AnaSpec，CA）确认包覆有
t-PA的粒子的活性。使用Zeiss FESEM Supra55vp（Center for Nanosystems（CNS），
Harvard University）对聚集的纳米粒子进行SEM。将样品设置于碳带粘性基底上，并在真
空下使用溅射涂布器（sputter coater）镀金。在4kV下使用in-lens探测器在9mm的工作距
离下对镀过的NP聚集体进行成像。
[0462] 流变仪切变分析-在流变仪（AR-G2TA Instruments，DE）中，使用20mm盘对血小板模拟物溶液（5mg/ml，8%聚乙烯基吡咯烷酮溶液中）进行切变，持续1min。随后收集所述溶
液、使用0.45微米过滤器（Millipore，MA）以从大型微尺度聚集体中移出NP，并以水进行1:3
稀释。使用分光计（Photon Technology International，NJ）对这些NP悬浮液的荧光强度进
行测量，并相对于最高切变水平（1,000dyne/cm2）值归一化。
液、使用0.45微米过滤器（Millipore，MA）以从大型微尺度聚集体中移出NP，并以水进行1:3
稀释。使用分光计（Photon Technology International，NJ）对这些NP悬浮液的荧光强度进
行测量，并相对于最高切变水平（1,000dyne/cm2）值归一化。
[0463] 计算流体动力学（CFD）模拟-使用软件包Comsol3.5（Comsol，USA），基于有限元法（finite element method）对微流通道进行CFD模拟。认为流稳定且不可压缩，并假设在壁
处具有非滑移边界条件（no-slip boundary condition）、且流体介质（PBS）具有恒定的
1000kg/m3的密度与1mPa·秒的粘性。如之前描述的方法对IVUS重建血管进行CFD模拟
（A.U.Coskun等，Catheterization and cardiovascular interventions60，67(2003)）。
处具有非滑移边界条件（no-slip boundary condition）、且流体介质（PBS）具有恒定的
1000kg/m3的密度与1mPa·秒的粘性。如之前描述的方法对IVUS重建血管进行CFD模拟
（A.U.Coskun等，Catheterization and cardiovascular interventions60，67(2003)）。
[0464] 血管狭窄的微流模型-使用传统的软刻蚀法由聚二甲基硅氧烷（PDMS）制备用于研究微栓塞形成的模拟血管紧缩的微通道（Y.Xia，G.M.Whitesides，Annual review of
materials science28，153(1998)）。通过对使用CAD程序设计并使用刻印机（cutter
plotter）（CE5000，Graphtec，CA）成形的80微米层进行校准而制备主模（master mold）。所
述装置包含相对于上游和下游通道区域（各：640μm高×2mm宽×20mm长）而言90%紧缩的区
域（160μm高×400μm宽×10mm长）。将所述PDMS通道以玻璃微片（厚170μm）利用等离子粘接
密封。在某些研究中，使用蠕动泵（ISM834C，Ismatec SA，Switzerland）将血小板模拟物溶
液（5ml，100μg/ml）再循环流经微流装置（具有90%闭塞或不具有任何紧缩）。调整流速以在
未紧缩的通道处获得10dyne/cm2的壁切应力。在流动20分钟后收集悬浮液并经亚微米过滤
器（0.45μm）过滤。使用分光计（Photon Technology International，NJ）测量所收集的NP悬
浮液的荧光强度，并相对于未紧缩的通道的值归一化。为了研究狭窄区域中NP的释放和它
们与内皮细胞的结合，将所述微流装置使用氧等离子灭菌，并包覆纤连蛋白（50μg/ml@
30min）以支持细胞粘着。将牛主动脉内皮细胞（Lonza，MD）引入所述微通道，并使其在静止
条件下粘着（37℃，2小时）。随后将所述装置置于组织培养培育器，并使用注射泵
（Braintree Scientific，Braintree，MA）注入（50μL/h小时）培养基（ MV
BulletKit，Lonza，MD）。在装置内培育内皮细胞3-4天，直至形成连续的细胞单层。随后以在
非紧缩通道内产生～10dyne/cm2的壁切应力的流速将含有血小板模拟物的溶液（10μg/ml）
沿所述装置注入，持续10min。以相同流速将水沿所述通道注入，持续5min，以冲走未粘着的
粒子。使用Zeiss显微镜获得细胞和邻近紧缩区的上游区域和下游区域结合的NP的相衬图
像与荧光显微图像。将由这些视图中获得的与细胞相结合的装载有香豆素的NP的平均荧光
强度用于评价狭窄区域前区域和狭窄后区域之间NP积累的差异。
materials science28，153(1998)）。通过对使用CAD程序设计并使用刻印机（cutter
plotter）（CE5000，Graphtec，CA）成形的80微米层进行校准而制备主模（master mold）。所
述装置包含相对于上游和下游通道区域（各：640μm高×2mm宽×20mm长）而言90%紧缩的区
域（160μm高×400μm宽×10mm长）。将所述PDMS通道以玻璃微片（厚170μm）利用等离子粘接
密封。在某些研究中，使用蠕动泵（ISM834C，Ismatec SA，Switzerland）将血小板模拟物溶
液（5ml，100μg/ml）再循环流经微流装置（具有90%闭塞或不具有任何紧缩）。调整流速以在
未紧缩的通道处获得10dyne/cm2的壁切应力。在流动20分钟后收集悬浮液并经亚微米过滤
器（0.45μm）过滤。使用分光计（Photon Technology International，NJ）测量所收集的NP悬
浮液的荧光强度，并相对于未紧缩的通道的值归一化。为了研究狭窄区域中NP的释放和它
们与内皮细胞的结合，将所述微流装置使用氧等离子灭菌，并包覆纤连蛋白（50μg/ml@
30min）以支持细胞粘着。将牛主动脉内皮细胞（Lonza，MD）引入所述微通道，并使其在静止
条件下粘着（37℃，2小时）。随后将所述装置置于组织培养培育器，并使用注射泵
（Braintree Scientific，Braintree，MA）注入（50μL/h小时）培养基（ MV
BulletKit，Lonza，MD）。在装置内培育内皮细胞3-4天，直至形成连续的细胞单层。随后以在
非紧缩通道内产生～10dyne/cm2的壁切应力的流速将含有血小板模拟物的溶液（10μg/ml）
沿所述装置注入，持续10min。以相同流速将水沿所述通道注入，持续5min，以冲走未粘着的
粒子。使用Zeiss显微镜获得细胞和邻近紧缩区的上游区域和下游区域结合的NP的相衬图
像与荧光显微图像。将由这些视图中获得的与细胞相结合的装载有香豆素的NP的平均荧光
强度用于评价狭窄区域前区域和狭窄后区域之间NP积累的差异。
[0465] 血管栓塞的微流模型-如上文所述，使用软刻蚀法制造具有收缩的横截面积（80μm高×0.5mm宽×200mm长）的微流装置。注入主通道中的如下述方式形成的纤维蛋白凝块进
入并阻塞了这些较小通道中的流动。将t-PA溶液或包覆有t-PA的微聚集体溶液以相当于非
阻塞通道中切应力为10dyne/cm2的流速注入。在注入所述t-PA溶液前，添加牛血纤维蛋白
溶酶原（plasminogen）（Cell Sciences，MA）至最终浓度为2.2μM（S.L.Diamond，Annual
review of biomedical engineering1，427(1999)）。在纤维蛋白溶解过程中，以倒置Zeiss
显微镜实时（每30秒获取图像）监测纤维蛋白凝块的尺寸。
入并阻塞了这些较小通道中的流动。将t-PA溶液或包覆有t-PA的微聚集体溶液以相当于非
阻塞通道中切应力为10dyne/cm2的流速注入。在注入所述t-PA溶液前，添加牛血纤维蛋白
溶酶原（plasminogen）（Cell Sciences，MA）至最终浓度为2.2μM（S.L.Diamond，Annual
review of biomedical engineering1，427(1999)）。在纤维蛋白溶解过程中，以倒置Zeiss
显微镜实时（每30秒获取图像）监测纤维蛋白凝块的尺寸。
[0466] 实验性纤维蛋白栓塞-如在先所述的方法，通过向人纤维蛋白酶原（fibrinogen）（5mg/ml，Enzyme Research Laboratories，IN）添加CaCl（2 20mM）和人α凝血酶（最终浓度1单位/ml，Enzyme Research Laboratories，IN），形成纤维蛋白凝块（J.C.Murciano等，
Nature biotechnology21，891(2003)以及C.K.Lam，T.Yoo，B.Hiner，Z.Liu，
J.Grutzendler，Nature465，478(2010)）。将这一溶液立即逐滴加入至含Span-80（0.05%）的
芥花油（Canola oil）溶液中。将所述乳状液在350rpm下混合4小时并离心（500g，5min），随
后以乙醇和水重复洗涤。产生的纤维蛋白珠的直径通过光学显微镜确定为～200μm。
Nature biotechnology21，891(2003)以及C.K.Lam，T.Yoo，B.Hiner，Z.Liu，
J.Grutzendler，Nature465，478(2010)）。将这一溶液立即逐滴加入至含Span-80（0.05%）的
芥花油（Canola oil）溶液中。将所述乳状液在350rpm下混合4小时并离心（500g，5min），随
后以乙醇和水重复洗涤。产生的纤维蛋白珠的直径通过光学显微镜确定为～200μm。
[0467] 小鼠肺栓塞模型-将雄性6-8周大的C57BL/6小鼠（Jackson Laboratory，Bar Harbor，ME）称重并以Avertin麻醉（200mg/kg IP）。经外科气管切开术切开气管，并利用22G
不锈钢钝针头插管。随后使用小鼠呼吸机（mouse ventilator，VCM-R，Hugo Sachs
Elektroniks，Germany），以通气速率为60次呼吸/分、吸气峰压（Peak Inspiratory
Pressure，Pip）为10cm H2O、呼气末正压（Positive End Expiratory Pressure，Peep）为
3cm H2O，利用压缩空气对肺进行通气。通过使用IL1离体小鼠肺通气-灌注系统（Harvard
Apparatus，Natick，MA）对小鼠肺部进行离体通气与灌注（D.Huh等，Science328，1662
(2010)）。机械通气开始后，经胸廓切开术打开胸腔，将肝素（100IU）注射入右心室。30秒后，切开胸主动脉和上腔静脉并放血处死动物。在肺动脉和主动脉周围进行缝合。将由聚乙烯
管制成的插管（cannulae）（PE90（0.86mm ID，1.7mm OD））置于肺动脉（PA）和左心房（LA）中，并经滚轮泵（roller pump）（ISM834C，Ismatec SA，Switzerland）将含4%牛白蛋白的RPMI-
1640（ProbuminTM Reagent Grade，Billerica，MA）和0.7g NaCl/500mL灌入肺中，将系统体
积为6mL的再循环系统中的流速设为恒定的0.5mL/min。通过将整个离体通气灌注系统置于
不含CO2的标准细胞培育器（Forma Scientific，Ohio）内，保持灌注液和肺的温度为37℃。
湿度保持在90%-95%的范围内。使用专用的379型血压、DLP2.5流动以及MPX399/2型气道压
力传感器以及TAM-A放大器（Hugo Sachs Elektroniks，Germany）记录肺动脉压和静脉压以
及气道流动和气道压力。在各实验前将肺中间水平处的血管压力定为零点，并使用运行
Windows XP SP2系统（Microsoft Corporation，Redmond，WA）的桌面电脑运行的
软件（Grass Technologies，West Warwick，RI）记录。
不锈钢钝针头插管。随后使用小鼠呼吸机（mouse ventilator，VCM-R，Hugo Sachs
Elektroniks，Germany），以通气速率为60次呼吸/分、吸气峰压（Peak Inspiratory
Pressure，Pip）为10cm H2O、呼气末正压（Positive End Expiratory Pressure，Peep）为
3cm H2O，利用压缩空气对肺进行通气。通过使用IL1离体小鼠肺通气-灌注系统（Harvard
Apparatus，Natick，MA）对小鼠肺部进行离体通气与灌注（D.Huh等，Science328，1662
(2010)）。机械通气开始后，经胸廓切开术打开胸腔，将肝素（100IU）注射入右心室。30秒后，切开胸主动脉和上腔静脉并放血处死动物。在肺动脉和主动脉周围进行缝合。将由聚乙烯
管制成的插管（cannulae）（PE90（0.86mm ID，1.7mm OD））置于肺动脉（PA）和左心房（LA）中，并经滚轮泵（roller pump）（ISM834C，Ismatec SA，Switzerland）将含4%牛白蛋白的RPMI-
1640（ProbuminTM Reagent Grade，Billerica，MA）和0.7g NaCl/500mL灌入肺中，将系统体
积为6mL的再循环系统中的流速设为恒定的0.5mL/min。通过将整个离体通气灌注系统置于
不含CO2的标准细胞培育器（Forma Scientific，Ohio）内，保持灌注液和肺的温度为37℃。
湿度保持在90%-95%的范围内。使用专用的379型血压、DLP2.5流动以及MPX399/2型气道压
力传感器以及TAM-A放大器（Hugo Sachs Elektroniks，Germany）记录肺动脉压和静脉压以
及气道流动和气道压力。在各实验前将肺中间水平处的血管压力定为零点，并使用运行
Windows XP SP2系统（Microsoft Corporation，Redmond，WA）的桌面电脑运行的
软件（Grass Technologies，West Warwick，RI）记录。
[0468] 在注射实验性纤维蛋白凝块（如上文所述的方法制备）之前，使待测量的参数稳定并在多于10分钟的时期内保持稳定。将悬浮于灌注介质中的纤维蛋白凝块溶液以0.1ml/
min的流速注入并与进入肺动脉的常规灌注线路（perfusion line）混合。注入所述纤维蛋
白凝块悬浮液直至肺动脉压力升高至基线的～3倍。随后使该体系平衡并保持稳定至少10
分钟。然后，将包覆有tPA的血小板模拟物或游离的可溶tPA添加至主灌注线路并循环流经
灌注系统。与微流装置实验中相同，当灌注tPA时，添加血纤维蛋白溶酶原以获得2.2μM的最
终浓度。在灌注期间持续获取肺动脉压和静脉压。在各实验结束时，以4%多聚甲醛
（paraformaldehyde）灌注肺，并通过在4%多聚甲醛中、随后在蔗糖和OCT中孵育以准备切
片。所有实验动物协议均经波士顿儿童医院（Children’s Hospital Boston）与哈佛医学院
（Harvard Medical School）的实验动物管理与使用委员会（Institutional Animal Care
and Use Committee）批准。
min的流速注入并与进入肺动脉的常规灌注线路（perfusion line）混合。注入所述纤维蛋
白凝块悬浮液直至肺动脉压力升高至基线的～3倍。随后使该体系平衡并保持稳定至少10
分钟。然后，将包覆有tPA的血小板模拟物或游离的可溶tPA添加至主灌注线路并循环流经
灌注系统。与微流装置实验中相同，当灌注tPA时，添加血纤维蛋白溶酶原以获得2.2μM的最
终浓度。在灌注期间持续获取肺动脉压和静脉压。在各实验结束时，以4%多聚甲醛
（paraformaldehyde）灌注肺，并通过在4%多聚甲醛中、随后在蔗糖和OCT中孵育以准备切
片。所有实验动物协议均经波士顿儿童医院（Children’s Hospital Boston）与哈佛医学院
（Harvard Medical School）的实验动物管理与使用委员会（Institutional Animal Care
and Use Committee）批准。
[0469] 流动下的微聚集体和NP的粘着-如上文所述，使用软刻蚀法制造包含收缩的通道（80μm高×2mm宽×200mm长）的微流装置。将包覆有纤维蛋白薄干层（<1μm厚）的玻璃片粘接
至所述通道底部。如上文所详述的，将荧光NP（200nm）和微粒子（2μm）以tPA包覆。将所述包
覆的NP或微聚集体的溶液（100mg/ml）以相当于壁切应力为10dyne/cm2的流速注入所述通
道15min。在实验结束时，用水以相同流速洗涤所述通道>10分钟。获取并分析荧光显微图像
以评价由粒子覆盖的区域。
至所述通道底部。如上文所详述的，将荧光NP（200nm）和微粒子（2μm）以tPA包覆。将所述包
覆的NP或微聚集体的溶液（100mg/ml）以相当于壁切应力为10dyne/cm2的流速注入所述通
道15min。在实验结束时，用水以相同流速洗涤所述通道>10分钟。获取并分析荧光显微图像
以评价由粒子覆盖的区域。
[0470] 结果与讨论
[0471] 正常流至心、肺和脑的血流的紊乱是西方国家中导致死亡和长期成人残疾的主要原因（C.J.L.Murray，A.D.Lopez，The Lancet349，1269(1997)）。目前用于冠状动脉或静脉
梗塞、肺栓塞和中风的紧急治疗方法要求连续递送血栓溶解药物数小时，需要通常进行全
身给药或经置于阻塞血管内的导管进行给药，这通常在医院设置（hospital setting）中进
行（T.J.Ingall等，Stroke35，2418(2004)以及T.G.Kwiatkowski等，New England Journal
of Medicine340，1781(1999)）。为了产生疗效，患者必须在症状产生后数小时以内就接受
治疗，且由于药物自由分布于整个体内，可给予的凝块溶解药物的剂量受潜在的流血风险
限制。为了克服这些限制并开发可在观测到急性血管闭塞症状后立即原位静脉内给药的潜
在治疗方法，本发明人着手设计了在流动阻塞位点处选择性释放药物的血栓溶解剂递送系
统。
梗塞、肺栓塞和中风的紧急治疗方法要求连续递送血栓溶解药物数小时，需要通常进行全
身给药或经置于阻塞血管内的导管进行给药，这通常在医院设置（hospital setting）中进
行（T.J.Ingall等，Stroke35，2418(2004)以及T.G.Kwiatkowski等，New England Journal
of Medicine340，1781(1999)）。为了产生疗效，患者必须在症状产生后数小时以内就接受
治疗，且由于药物自由分布于整个体内，可给予的凝块溶解药物的剂量受潜在的流血风险
限制。为了克服这些限制并开发可在观测到急性血管闭塞症状后立即原位静脉内给药的潜
在治疗方法，本发明人着手设计了在流动阻塞位点处选择性释放药物的血栓溶解剂递送系
统。
[0472] 阻塞和狭窄的血管显示出将其与相邻的正常血管区别开来的独特物理特性，其中，流体切应力可局部增强1至2个数量级，即由正常血管中约为70dyne/cm2以下增至高度
紧缩的动脉中高于1,000dyne/cm2（J.Strony等，American Journal of Physiology-Heart
and Circulatory Physiology265，H1787(1993)；D.M.Wootton&D.N.Ku，Annual review of
biomedical engineering1，299(1999)；以及J.M.Siegel，C.P.Markou，D.N.Ku，S.Hanson，
Journal of biomechanical engineering116，446(1994)）。循环血小板在这些区域内通过
高切应力局部活化，并快速粘着至收缩血管的相邻表面内层（Z.M.Ruggeri等，Blood108，
1903(2006)；W.S.Nesbitt等，Nature medicine15，665(2009)；以及S.Goto等，
Circulation99，608(1999)）。与关注于不同分子种类的表达的药物靶向机制可在组织间或
患者间变化不同，切应力在所有患者中均作为内腔直径收缩的函数而增加，而与阻塞的起
因或位置无关。受这一血小板靶向的天然物理机制启发，本发明人开发了如下策略：使用局
部高切应力作为将药物靶向递送至由凝块、狭窄或发育异常而紧缩的血管区域的普遍机
制。
紧缩的动脉中高于1,000dyne/cm2（J.Strony等，American Journal of Physiology-Heart
and Circulatory Physiology265，H1787(1993)；D.M.Wootton&D.N.Ku，Annual review of
biomedical engineering1，299(1999)；以及J.M.Siegel，C.P.Markou，D.N.Ku，S.Hanson，
Journal of biomechanical engineering116，446(1994)）。循环血小板在这些区域内通过
高切应力局部活化，并快速粘着至收缩血管的相邻表面内层（Z.M.Ruggeri等，Blood108，
1903(2006)；W.S.Nesbitt等，Nature medicine15，665(2009)；以及S.Goto等，
Circulation99，608(1999)）。与关注于不同分子种类的表达的药物靶向机制可在组织间或
患者间变化不同，切应力在所有患者中均作为内腔直径收缩的函数而增加，而与阻塞的起
因或位置无关。受这一血小板靶向的天然物理机制启发，本发明人开发了如下策略：使用局
部高切应力作为将药物靶向递送至由凝块、狭窄或发育异常而紧缩的血管区域的普遍机
制。
[0473] 本发明的血小板模拟物在尺寸上类似于天然血小板（直径1至5μm）；然而，该血小板模拟物被制成多个较小的纳米粒子（NP）的聚集体。当在生理学流动条件下在血液中流动
时，该微尺度聚集体保持完整；但当暴露至高局部切应力时，该聚集体解体为单个纳米尺度
的组分并快速粘着至血管表面。通过将相关的药物或酶固定至纳米粒子（基于切应力依赖
性的NP-NP粘着物解体而特异性布置于血管闭塞位点）上，可将高浓度的期望的化学活性或
酶活性直接递送至这些区域。
时，该微尺度聚集体保持完整；但当暴露至高局部切应力时，该聚集体解体为单个纳米尺度
的组分并快速粘着至血管表面。通过将相关的药物或酶固定至纳米粒子（基于切应力依赖
性的NP-NP粘着物解体而特异性布置于血管闭塞位点）上，可将高浓度的期望的化学活性或
酶活性直接递送至这些区域。
[0474] 通过将生物相容的、可生物降解的聚乳酸-共-乙醇酸（PLGA50:50，MW17kDa）浓溶液喷雾-干燥以形成小（180±70nm）NP的微米尺寸（3.8±1.6μm）的聚集体，从而制得血小板
模拟物。参见“方法和材料”，以及J.C.Sung，Pharma.Res.，26:1847(2009)以及N.Tsapis等，
Proc.Natl.Acad.Sci.USA，99:12001(2002)，图2A，由于其疏水性而在水溶液中稳定
（R.C.Sonntag&W.B.Russel，Journal of colloid and interface science113，399
(1986)；H.A.Stone，Annual Review of Fluid Mechanics26，65(1994)；以及R.Gref等，
Science263，1600(1994)）。当暴露至克服将所述NP维持在一起的引力的机械力（如血液动
力学切应力）时，所述聚集体分裂（图2B），这与湿沙球在手中摩擦时分散成单独的颗粒非常
相似（R.C.Sonntag&W.B.Russel，Journal of colloid and interface science113，399
(1986)以及H.A.Stone，Annual Review of Fluid Mechanics26，65(1994)）。
模拟物。参见“方法和材料”，以及J.C.Sung，Pharma.Res.，26:1847(2009)以及N.Tsapis等，
Proc.Natl.Acad.Sci.USA，99:12001(2002)，图2A，由于其疏水性而在水溶液中稳定
（R.C.Sonntag&W.B.Russel，Journal of colloid and interface science113，399
(1986)；H.A.Stone，Annual Review of Fluid Mechanics26，65(1994)；以及R.Gref等，
Science263，1600(1994)）。当暴露至克服将所述NP维持在一起的引力的机械力（如血液动
力学切应力）时，所述聚集体分裂（图2B），这与湿沙球在手中摩擦时分散成单独的颗粒非常
相似（R.C.Sonntag&W.B.Russel，Journal of colloid and interface science113，399
(1986)以及H.A.Stone，Annual Review of Fluid Mechanics26，65(1994)）。
[0475] 所述聚集体的稳定性和机械完整性通过粒子-粒子分子粘着力控制。基于PLGA的NP在本质上是疏水性的，并在水溶液中自聚集（C.E.Astete与C.M.Sabliov，
J.Biomater.Sci.，Polymer Ed.，17:247(2006)）。在基于PLGA的NP的常规应用中，声波法用
于使这些非期望的聚集体去稳定并解体（K.Avgoustakis，Current Drug Delivery，1:321
(2004)）。本发明人利用这一观察，更有效地设计了当受流体切应力搅动时解体的纳米载体
聚集体。当水动力克服粒子间的引力时，所述粒子分散。
J.Biomater.Sci.，Polymer Ed.，17:247(2006)）。在基于PLGA的NP的常规应用中，声波法用
于使这些非期望的聚集体去稳定并解体（K.Avgoustakis，Current Drug Delivery，1:321
(2004)）。本发明人利用这一观察，更有效地设计了当受流体切应力搅动时解体的纳米载体
聚集体。当水动力克服粒子间的引力时，所述粒子分散。
[0476] 为了检验切变诱导的NP聚集体的解体，本发明人使用流变仪以不同切变水平对聚集体悬浮液进行切变。图2C显示在经亚微米过滤器（0.45μm）过滤后的切变后溶液中的NP浓
度。当切应力超过10dyne/cm2时，NP浓度显著增加。当切应力水平达到100dyne/cm2时，观察
到释放的NP浓度产生8倍-12倍的切变依赖性的增加（图2C）；100dyne/cm2的切应力范围与
许多血管疾病有关。如狭窄血管几何学的计算流体动力学（CFD）建模所示，这些切应力水平
与病理性狭窄位点处的切应力相关联。图2E显示了由人患者血管内超声重建几何学的CFD
模拟获得的正常右冠状动脉与狭窄右冠状动脉（60%内腔阻塞）的壁切应力。例如，基于超声
成像对正常的人左冠状动脉和狭窄的人左冠状动脉中的流动进行的计算流体动力学（CFD）
建模（参见“方法”以及B.E.Figueroa等，Stroke29，1202(1998)以及C.D.Murray，The
Journal of General Physiology9，835(1926)）显示出，诱导NP释放的切变水平类似于由
60%内腔阻塞产生的切变水平（图2D、图2E），而正常冠状血管经受的是低5倍的切应力水平
（～10至30dyne/cm2）。
度。当切应力超过10dyne/cm2时，NP浓度显著增加。当切应力水平达到100dyne/cm2时，观察
到释放的NP浓度产生8倍-12倍的切变依赖性的增加（图2C）；100dyne/cm2的切应力范围与
许多血管疾病有关。如狭窄血管几何学的计算流体动力学（CFD）建模所示，这些切应力水平
与病理性狭窄位点处的切应力相关联。图2E显示了由人患者血管内超声重建几何学的CFD
模拟获得的正常右冠状动脉与狭窄右冠状动脉（60%内腔阻塞）的壁切应力。例如，基于超声
成像对正常的人左冠状动脉和狭窄的人左冠状动脉中的流动进行的计算流体动力学（CFD）
建模（参见“方法”以及B.E.Figueroa等，Stroke29，1202(1998)以及C.D.Murray，The
Journal of General Physiology9，835(1926)）显示出，诱导NP释放的切变水平类似于由
60%内腔阻塞产生的切变水平（图2D、图2E），而正常冠状血管经受的是低5倍的切应力水平
（～10至30dyne/cm2）。
[0477] 为了确定这些血小板模拟物是否可在相关的血液动力学流动条件下释放NP，在由聚二甲基硅氧烷（PDMS）制造的血管收缩的三维（3D）微流模型中，在血液动力学条件下对该
方法进行了测试，所述模型经设计用于模拟具有90%内腔阻塞的活体血管区域（图3A，图
3B）。基于CFD建模，这种紧缩使得在狭窄位点处的切变产生～100倍的增加（图3C）。如相比
于流经未阻塞的具有相似维度的微流通道的流体而在阻塞下游流动的溶液中所测定的，流
经这些微流装置的血小板模拟物溶液（PBS中100μg/ml）的灌注导致游离NP的释放增加了16
倍（图3D）。荧光显微成像证实释放的NP积累于刚好处于收缩区域末端的人工微流管道内表
面上培育的内皮细胞中，而衬于紧缩前的通道内的细胞则发生最小限度的摄取（图3E）。
方法进行了测试，所述模型经设计用于模拟具有90%内腔阻塞的活体血管区域（图3A，图
3B）。基于CFD建模，这种紧缩使得在狭窄位点处的切变产生～100倍的增加（图3C）。如相比
于流经未阻塞的具有相似维度的微流通道的流体而在阻塞下游流动的溶液中所测定的，流
经这些微流装置的血小板模拟物溶液（PBS中100μg/ml）的灌注导致游离NP的释放增加了16
倍（图3D）。荧光显微成像证实释放的NP积累于刚好处于收缩区域末端的人工微流管道内表
面上培育的内皮细胞中，而衬于紧缩前的通道内的细胞则发生最小限度的摄取（图3E）。
[0478] 本发明人进一步测试了利用切变靶向策略的用于血栓溶解的治疗策略。目前使用的血栓溶解疗法基于在医院设置中，由必须精确设置于凝块位点处的导管局部给予、或基
于全身给予溶解所述凝块的纤维蛋白溶解剂（如组织纤溶酶原激活物（tPA））数小时。不幸
的是，这两种治疗方法的主要顾虑和限制为严重的副作用：流血（例如，颅内出血）和由循环
药物产生的神经毒性（T.G.Kwiatkowski等，New England Journal of Medicine，340:1781
(1999)）。以如下形式给予血栓溶解药物对于这种治疗方法可具有很高价值：具有较低水平
的全身活性，但仍将治疗定位于所期望的位点。本发明提供了利用部分闭合血管的凝块附
近或在再疏通过程中异常升高的切应力以在这些位点处局部增强血栓溶解的方法（图4）。
这一方法既可显著降低循环药物的水平，又能减少药物的血管外渗漏（例如，扩散至脑组
织）。
于全身给予溶解所述凝块的纤维蛋白溶解剂（如组织纤溶酶原激活物（tPA））数小时。不幸
的是，这两种治疗方法的主要顾虑和限制为严重的副作用：流血（例如，颅内出血）和由循环
药物产生的神经毒性（T.G.Kwiatkowski等，New England Journal of Medicine，340:1781
(1999)）。以如下形式给予血栓溶解药物对于这种治疗方法可具有很高价值：具有较低水平
的全身活性，但仍将治疗定位于所期望的位点。本发明提供了利用部分闭合血管的凝块附
近或在再疏通过程中异常升高的切应力以在这些位点处局部增强血栓溶解的方法（图4）。
这一方法既可显著降低循环药物的水平，又能减少药物的血管外渗漏（例如，扩散至脑组
织）。
[0479] 为了评价其功能性潜质，本发明人以FDA批准的血栓溶解药物（组织纤溶酶原激活物（tPA））包覆含有荧光NP的血小板模拟物，并测试了其在体外和体内溶解血液凝块的能力
（图5）。基于切变靶向策略（图5A），所述血小板模拟物在血流异常紧缩的区域选择性解聚
（图5B）。因此，解聚的含血栓溶解药物的NP在栓塞位点处积累，并局部起效以溶解阻塞。当
将由油包水乳液技术制造的规定尺寸（直径250±150μm）的人造纤维蛋白凝块（R.Gref等，
Science263，1600(1994)）注入具有收缩至80μm高×500μm宽紧缩度的区域的微流通道时，
这些纤维蛋白栓塞停留于所述装置中，并部分阻塞通道中的流动（图5C）。当将载有tPA
（50ng/ml）的血小板模拟物（100μg/ml）以生理学流速注入这些相同装置时，所述微聚集体
在切变提高的阻塞区域中分裂，导致释放包覆有t-PA的NP。重要的是，该包覆有tPA的荧光
NP在人造栓塞表面处积累，在不到一小时的治疗期间内逐渐溶解所述凝块并将其尺寸减半
（图5C）。与之不同，以相同浓度和流动条件的可溶性t-PA酶进行的治疗对凝块尺寸的效果
则是可忽略的（<5%降低）（图5D）。
（图5）。基于切变靶向策略（图5A），所述血小板模拟物在血流异常紧缩的区域选择性解聚
（图5B）。因此，解聚的含血栓溶解药物的NP在栓塞位点处积累，并局部起效以溶解阻塞。当
将由油包水乳液技术制造的规定尺寸（直径250±150μm）的人造纤维蛋白凝块（R.Gref等，
Science263，1600(1994)）注入具有收缩至80μm高×500μm宽紧缩度的区域的微流通道时，
这些纤维蛋白栓塞停留于所述装置中，并部分阻塞通道中的流动（图5C）。当将载有tPA
（50ng/ml）的血小板模拟物（100μg/ml）以生理学流速注入这些相同装置时，所述微聚集体
在切变提高的阻塞区域中分裂，导致释放包覆有t-PA的NP。重要的是，该包覆有tPA的荧光
NP在人造栓塞表面处积累，在不到一小时的治疗期间内逐渐溶解所述凝块并将其尺寸减半
（图5C）。与之不同，以相同浓度和流动条件的可溶性t-PA酶进行的治疗对凝块尺寸的效果
则是可忽略的（<5%降低）（图5D）。
[0480] 基于上述结果，本发明人在离体小鼠全肺通气-灌注模型中测试了逆转栓塞导致的急性肺血管闭塞效果的治疗策略。将含有预先形成的纤维蛋白凝块（1×105/ml，尺寸上
与在微流通道中测试的凝块相似（图5C））的溶液注入经灌注的肺的肺动脉（0.1mL/min，持
续～5min）。由多个微栓塞引发的肺部微血管闭塞（图5E）导致肺动脉压与其正常值相比增
加了约3倍（30mmHg对8mmHg）（图5H）。本发明人随后将包覆有tPA的血小板模拟物（100μg/ml
血小板模拟物，包含包覆有50ng/ml tPA的NP）以生理学流速（0.5ml/min）灌注入肺动脉。组
织切片的荧光显微分析证实tPA-NP在血管闭塞区域选择性释放，在这些位点处的NP积累产
生25倍的增加，并且荧光NP高密度地结合至阻塞的肺栓塞表面（图5E、图5F）。在这一全肺模
型中，由tPA-NP诱导的栓塞逐渐溶解使得肺动脉压力水平在约1小时的时期后趋于正常（图
5G、图5H）。重要的是，在这一模型中，灌注与注入的包覆有tPA的NP上所递送的tPA相同浓度
（50ng/ml）的可溶性tPA未能产生任何显著性临床响应（图5G）。事实上，在同一流动条件下，
仅在给予高出100倍的浓度（5000ng/ml）的可溶性tPA时才能观测到类似的凝块溶解效果
（图5G）。因此，当使用血小板模拟物进行给药时，仅用可溶性tPA剂量的一小部分，即可实现
肺栓塞的生理表现的逆转和凝块溶解。另外，全身灌注相同浓度的介质中的t-PA并不降低
压力，因此证明本文所述的治疗策略提高了效力。
与在微流通道中测试的凝块相似（图5C））的溶液注入经灌注的肺的肺动脉（0.1mL/min，持
续～5min）。由多个微栓塞引发的肺部微血管闭塞（图5E）导致肺动脉压与其正常值相比增
加了约3倍（30mmHg对8mmHg）（图5H）。本发明人随后将包覆有tPA的血小板模拟物（100μg/ml
血小板模拟物，包含包覆有50ng/ml tPA的NP）以生理学流速（0.5ml/min）灌注入肺动脉。组
织切片的荧光显微分析证实tPA-NP在血管闭塞区域选择性释放，在这些位点处的NP积累产
生25倍的增加，并且荧光NP高密度地结合至阻塞的肺栓塞表面（图5E、图5F）。在这一全肺模
型中，由tPA-NP诱导的栓塞逐渐溶解使得肺动脉压力水平在约1小时的时期后趋于正常（图
5G、图5H）。重要的是，在这一模型中，灌注与注入的包覆有tPA的NP上所递送的tPA相同浓度
（50ng/ml）的可溶性tPA未能产生任何显著性临床响应（图5G）。事实上，在同一流动条件下，
仅在给予高出100倍的浓度（5000ng/ml）的可溶性tPA时才能观测到类似的凝块溶解效果
（图5G）。因此，当使用血小板模拟物进行给药时，仅用可溶性tPA剂量的一小部分，即可实现
肺栓塞的生理表现的逆转和凝块溶解。另外，全身灌注相同浓度的介质中的t-PA并不降低
压力，因此证明本文所述的治疗策略提高了效力。
[0481] 在人类中，由于肺栓塞引起的血管阻塞与高水平的发病率和死亡率相关（V.F.Tapson，New England Journal of Medicine358，1037(2008)）。血栓溶解疗法目前基
于团注（bolus injection）和/或在医院设置中经血管内导管持续数小时地持续递送纤维
蛋白溶解剂（如可溶性tPA），其主要副作用包括流血、颅内出血和神经毒性
（T.G.Kwiatkowski等，New England Journal of Medicine340，1781(1999)；S.G.Soriano&
S.A.Lipton，Nature medicine4，(1998)；以及B.E.Figueroa等，Stroke29，1202(1998)）。由
于靶向至血管中因闭塞性栓塞而异常紧缩的区域，这一新型切变活化的tPA靶向方法可显
著降低循环药物水平。由于活性试剂结合至NP，而NP又是大得多的（微米尺寸）、不易扩散穿
越内皮渗透屏障的聚集体的组分，因而血小板模拟物还可大幅减少所述药物的血管外渗
（例如，扩散至脑组织）。因此，这一基于物理作用的药物布置策略可改善使用tPA或其它治
疗剂进行治疗的安全性和有效性。
于团注（bolus injection）和/或在医院设置中经血管内导管持续数小时地持续递送纤维
蛋白溶解剂（如可溶性tPA），其主要副作用包括流血、颅内出血和神经毒性
（T.G.Kwiatkowski等，New England Journal of Medicine340，1781(1999)；S.G.Soriano&
S.A.Lipton，Nature medicine4，(1998)；以及B.E.Figueroa等，Stroke29，1202(1998)）。由
于靶向至血管中因闭塞性栓塞而异常紧缩的区域，这一新型切变活化的tPA靶向方法可显
著降低循环药物水平。由于活性试剂结合至NP，而NP又是大得多的（微米尺寸）、不易扩散穿
越内皮渗透屏障的聚集体的组分，因而血小板模拟物还可大幅减少所述药物的血管外渗
（例如，扩散至脑组织）。因此，这一基于物理作用的药物布置策略可改善使用tPA或其它治
疗剂进行治疗的安全性和有效性。
[0482] 在这一实施例中使用的模型（肺栓塞）是一种与高水平的发病率和死亡率相关的疾病（V.F.Tapson，New England Journal of Medicine，358:1037(2008)），其仅代表了本
文所述的治疗策略的潜在大量治疗应用之一。例如，中风、急性冠状动脉或静脉综合症、心
肌梗死、动脉粥样硬化、外周血管疾病、血管内膜增生、血管痉挛以及发育异常（例如
MoyaMoya病）都具备在疾病位点处血管收缩这一共同特征。因此，由于生理条件下活体血管
的设计倾向于将壁切应力限制至一个几乎是常数的窄范围内以最小化工作量，因而切变活
化的药物递送系统可用于所有这些疾病（C.D.Murray，The Journal of General
Physiology9，835(1926)以及M.Zamir，The Journal of General Physiology69，449
(1977)）。严格调节这一物理参数对于调节内皮细胞表现型、基因表达、血小板和红细胞聚
集、动脉形成和血管壁重建很重要（N.Resnick等，Endothelium10，197(2003)；
J.J.Hathcock，Arteriosclerosis，thrombosis，and vascular biology26，1729(2006)；
O.K.Baskurt，Biorheology45，629(2008)；以及J.N.Topper & M.A.Gimbrone Jr，
Molecular medicine today5，40(1999)）。切应力严格对应于血管直径（图1A），因此狭窄或
阻塞区域产生异常的切应力水平，其数量级高于任何正常切应力。在正常血管中，切应力远
低于70dyne/cm2（J.A.Champion，A.Walker，S.Mitragotri，Pharmaceutical research25，
1815(2008)），其并不活化本文的血小板模拟物。与之不同，在狭窄位点处，切应力显著增加
至超过这一数值，有时达到高至3,000dyne/cm2的值（J.Strony等，American Journal of
Physiology-Heart and Circulatory Physiology265，H1787(1993)）。这些提高的切变水
平破坏微尺度NP聚集体中的NP-NP相互作用，并由此“活化”所述血小板模拟物以释放其NP
组分（图1A）。
文所述的治疗策略的潜在大量治疗应用之一。例如，中风、急性冠状动脉或静脉综合症、心
肌梗死、动脉粥样硬化、外周血管疾病、血管内膜增生、血管痉挛以及发育异常（例如
MoyaMoya病）都具备在疾病位点处血管收缩这一共同特征。因此，由于生理条件下活体血管
的设计倾向于将壁切应力限制至一个几乎是常数的窄范围内以最小化工作量，因而切变活
化的药物递送系统可用于所有这些疾病（C.D.Murray，The Journal of General
Physiology9，835(1926)以及M.Zamir，The Journal of General Physiology69，449
(1977)）。严格调节这一物理参数对于调节内皮细胞表现型、基因表达、血小板和红细胞聚
集、动脉形成和血管壁重建很重要（N.Resnick等，Endothelium10，197(2003)；
J.J.Hathcock，Arteriosclerosis，thrombosis，and vascular biology26，1729(2006)；
O.K.Baskurt，Biorheology45，629(2008)；以及J.N.Topper & M.A.Gimbrone Jr，
Molecular medicine today5，40(1999)）。切应力严格对应于血管直径（图1A），因此狭窄或
阻塞区域产生异常的切应力水平，其数量级高于任何正常切应力。在正常血管中，切应力远
低于70dyne/cm2（J.A.Champion，A.Walker，S.Mitragotri，Pharmaceutical research25，
1815(2008)），其并不活化本文的血小板模拟物。与之不同，在狭窄位点处，切应力显著增加
至超过这一数值，有时达到高至3,000dyne/cm2的值（J.Strony等，American Journal of
Physiology-Heart and Circulatory Physiology265，H1787(1993)）。这些提高的切变水
平破坏微尺度NP聚集体中的NP-NP相互作用，并由此“活化”所述血小板模拟物以释放其NP
组分（图1A）。
[0483] 本发明针对基于增高的血液动力学切应力的、用于治疗和药物递送的新型组合物和方法。这一发现开启了在动脉粥样硬化（西方国家中的主要致死原因）治疗中、在血栓溶
解疗法中和在其它存在狭窄区域的血管病理学（如血管痉挛、Moya-Moya病）的治疗中的新
契机。本文所述的组合物和方法同样可用于使体外装置（如血液透析）中切变诱导的凝结事
件最小化，并且可用于在血液透过受损的大血管中的小裂口渗出的情况下靶向内出血。
解疗法中和在其它存在狭窄区域的血管病理学（如血管痉挛、Moya-Moya病）的治疗中的新
契机。本文所述的组合物和方法同样可用于使体外装置（如血液透析）中切变诱导的凝结事
件最小化，并且可用于在血液透过受损的大血管中的小裂口渗出的情况下靶向内出血。
[0484] 作为驱动力，切变可导致不同长度尺度的单一和集合元素在形态和结构上的变化。已广泛研究了切应力和不同形式的潜在药物载体间的相互作用，所述药物载体包括：纳
米球/微球、微胶囊和微凝胶。随着切变增加，单个粒子变形并最终破裂。切变触发的微胶
囊/纳米胶囊解体正成功应用于美容产品中，使得在与皮肤摩擦时释放活性成分。然而，还
未曾建议或开发这些方法或替代方法以用于医学应用。
米球/微球、微胶囊和微凝胶。随着切变增加，单个粒子变形并最终破裂。切变触发的微胶
囊/纳米胶囊解体正成功应用于美容产品中，使得在与皮肤摩擦时释放活性成分。然而，还
未曾建议或开发这些方法或替代方法以用于医学应用。
[0485] 在一方面，本发明针对在正常生理学流动下保持完好、而在流经狭窄区域时解体为纳米粒子的微米尺寸聚集体（图1A）；因此允许由生理异常（在狭窄区域或部分闭塞区域
局部增高的血液动力学切应力）驱动的局部递送机制。所述靶向策略基于三个步骤。在第一
步骤中，增高的切应力诱导聚集体解体为纳米粒子（图1A）。在Hagen-Poiseuille流动条件
下，切应力（τ）为血管直径（d）的强函数，τ≈d3；因此，狭窄位点产生异常的切应力水平，其数量级高于任何正常切应力（J.Strony等，American Journal of Physiology-Heart and
Circulatory Physiology265，H1787(1993)）。这些增高的切应力水平使NP聚集体分裂，因
此活化所述“血小板模拟物”。在第二步骤中，一旦聚集体分散，分散的纳米粒子在靶位点处
显示出增强的粘着和摄取。在流动下，由于施加在NP上的水动力（Fhydro）低（Fhydro≈r2），NP粘着至靶区域而微米尺寸粒子则不粘着（图1B）。还参见O.C.Farokhzad等，Anal.Chem.，77:
5453(2005)。此外，NP容易经受内吞作用，因此进一步提高其对细胞组分的有效靶向。在第
三步骤中，通过在靶位点处积累的纳米尺度粒子和NP释放动力学支配的可控方式局部递送
药物（图1C）。微米尺寸的聚集体解体为NP增大了表面积（S，S≈r2），并随后能够增强药物释
放。此外，可调节NP释放动力学：用于急性介入的快速或主动释放；或用于长效治疗的被动
持续释放。总而言之，这使得能将所规定的药物或显像剂局部递送至狭窄位点处。
局部增高的血液动力学切应力）驱动的局部递送机制。所述靶向策略基于三个步骤。在第一
步骤中，增高的切应力诱导聚集体解体为纳米粒子（图1A）。在Hagen-Poiseuille流动条件
下，切应力（τ）为血管直径（d）的强函数，τ≈d3；因此，狭窄位点产生异常的切应力水平，其数量级高于任何正常切应力（J.Strony等，American Journal of Physiology-Heart and
Circulatory Physiology265，H1787(1993)）。这些增高的切应力水平使NP聚集体分裂，因
此活化所述“血小板模拟物”。在第二步骤中，一旦聚集体分散，分散的纳米粒子在靶位点处
显示出增强的粘着和摄取。在流动下，由于施加在NP上的水动力（Fhydro）低（Fhydro≈r2），NP粘着至靶区域而微米尺寸粒子则不粘着（图1B）。还参见O.C.Farokhzad等，Anal.Chem.，77:
5453(2005)。此外，NP容易经受内吞作用，因此进一步提高其对细胞组分的有效靶向。在第
三步骤中，通过在靶位点处积累的纳米尺度粒子和NP释放动力学支配的可控方式局部递送
药物（图1C）。微米尺寸的聚集体解体为NP增大了表面积（S，S≈r2），并随后能够增强药物释
放。此外，可调节NP释放动力学：用于急性介入的快速或主动释放；或用于长效治疗的被动
持续释放。总而言之，这使得能将所规定的药物或显像剂局部递送至狭窄位点处。
[0486] 所述血小板模拟物还提供许多其它优点。例如，由于其尺寸较小，NP受到的水动力（Fhydro）作用较小（图1B），并因此快速粘着至附近的内皮表面或血管壁，而较大的微米尺寸
粒子则趋向于继续随着流动而移动（图1B）（O.C.Farokhzad等，Anal.Chem77，5453(2005)）。
与较大粒子相比，较小的NP还更容易被细胞吞噬，并因此能用于将药物以细胞内的方式选
择性递送入周围的内皮（R.Wiewrodt等，Blood99，912(2002)）。虽然在目前的研究中是以药
物包覆微尺度聚集体的表面，然而，也可通过在形成较大聚集体前将单个NP以药物包覆（可
提供能用于药物装载的总面积的大幅净增）而进一步增强在高切变下局部布署的药物的空
间选择性和活性（图1C）。
粒子则趋向于继续随着流动而移动（图1B）（O.C.Farokhzad等，Anal.Chem77，5453(2005)）。
与较大粒子相比，较小的NP还更容易被细胞吞噬，并因此能用于将药物以细胞内的方式选
择性递送入周围的内皮（R.Wiewrodt等，Blood99，912(2002)）。虽然在目前的研究中是以药
物包覆微尺度聚集体的表面，然而，也可通过在形成较大聚集体前将单个NP以药物包覆（可
提供能用于药物装载的总面积的大幅净增）而进一步增强在高切变下局部布署的药物的空
间选择性和活性（图1C）。
[0487] PLGA或PEG-PLGA纳米粒子的微米尺寸的纳米粒子聚集体可通过PLGA纳米粒子的浓溶液的自发自聚集、继以过滤得到尺寸较大的聚集体（>5微米）而制备。基于PLGA的纳米
粒子在本质上是疏水性的，并在水溶液中自聚集。所述聚集体的稳定性和机械完整性通过
粒子-粒子分子粘着力控制。在基于PLGA的纳米粒子的常规应用中，使用声波法以使这些非
期望的聚集体去稳定并解体。相似地，流体切应力的搅动也能够驱动纳米载体聚集体的解
聚。
粒子在本质上是疏水性的，并在水溶液中自聚集。所述聚集体的稳定性和机械完整性通过
粒子-粒子分子粘着力控制。在基于PLGA的纳米粒子的常规应用中，使用声波法以使这些非
期望的聚集体去稳定并解体。相似地，流体切应力的搅动也能够驱动纳米载体聚集体的解
聚。
[0488] 不希望受理论限制，狭窄位点处的异常切应力可使微米尺寸的聚集体解体，并分散纳米粒子。本发明人将纳米聚集体溶液注入模拟血管狭窄条件的微流装置。图7显示经
0.22微米过滤器过滤的溶液的荧光强度；因此与溶液中纳米粒子的浓度相关。图7显示了与
对照和正常生理条件下的流动相比，流经狭窄模拟位点显著增加了纳米粒子的浓度。
0.22微米过滤器过滤的溶液的荧光强度；因此与溶液中纳米粒子的浓度相关。图7显示了与
对照和正常生理条件下的流动相比，流经狭窄模拟位点显著增加了纳米粒子的浓度。
[0489] 一旦聚集体分散，第二步骤对纳米粒子在靶位点处增强的粘着和被摄取的能力进行利用。在流动下，由于施加的水动力低，纳米粒子粘着至靶区域而微米尺寸粒子不粘着
（图1B）。另外，纳米粒子容易经受细胞内吞，因此进一步提高了其有效靶向作用。此外，这一
方法基于PLGA纳米粒子，而所述PLGA纳米粒子可以通过利用靶向肽包覆来进一步选择性促
进粘着至限定位点。因此，本发明人已经联合切变机理与其它靶向方法证实了多功能靶向
粒子。
（图1B）。另外，纳米粒子容易经受细胞内吞，因此进一步提高了其有效靶向作用。此外，这一
方法基于PLGA纳米粒子，而所述PLGA纳米粒子可以通过利用靶向肽包覆来进一步选择性促
进粘着至限定位点。因此，本发明人已经联合切变机理与其它靶向方法证实了多功能靶向
粒子。
[0490] 在第三步骤中，一旦所述纳米粒子沉积下来（settled），就通过纳米粒子释放动力学局部递送药物。微米尺寸聚集体解体为纳米粒子增加了表面积，并因此能够增强在要求
的位点处的药物释放。所述药物随后可被位于该位点的细胞摄取；和/或所述药物可不被这
些细胞摄取、而是包覆该位点的表面。
的位点处的药物释放。所述药物随后可被位于该位点的细胞摄取；和/或所述药物可不被这
些细胞摄取、而是包覆该位点的表面。
[0491] 或者、或额外地，所述纳米粒子自身可具有治疗活性或生物活性。例如，所述纳米粒子可为血栓形成性的（例如，包覆有血栓形成剂的纳米粒子，例如包覆有胶原的粒子、或
包覆有或封装促凝血酶/蛋白质的纳米粒子）。在解体时，聚集体将仅在流血位点处（即，在
由于血液大量通过血管壁中的小孔而具有高切应力处）释放促凝血剂。然而其他情况下所
述纳米粒子是非活性的，并且，若其是可生物降解的，则随胆汁或尿液排出。
包覆有或封装促凝血酶/蛋白质的纳米粒子）。在解体时，聚集体将仅在流血位点处（即，在
由于血液大量通过血管壁中的小孔而具有高切应力处）释放促凝血剂。然而其他情况下所
述纳米粒子是非活性的，并且，若其是可生物降解的，则随胆汁或尿液排出。
[0492] 因此，本发明人已经发现切变诱导的纳米粒子聚集体解聚以及纳米粒子的生物物理学特性可用于创造用于狭窄血管的多功能靶向的新型策略。这一新型策略提供了用于对
动脉粥样硬化、中风、肺栓塞及其它血液动力学相关障碍（涉及血管或体内其它中空的填充
以流体的通道的收缩或闭塞）进行非侵入性治疗的全新治疗方法。
动脉粥样硬化、中风、肺栓塞及其它血液动力学相关障碍（涉及血管或体内其它中空的填充
以流体的通道的收缩或闭塞）进行非侵入性治疗的全新治疗方法。
[0493] 本文所述的结果提供了如何可将受病理生理学机制启示的工程方法用于开发生物模拟治疗体系的引人注目的实例。本文所述的靶向药物递送系统与传统生物化学靶向方
法（例如，使用特异性细胞表面抗原）截然不同，因为本文所述的系统基于升高的局部切应
力，这是收缩血管的物理特性，而与阻塞的起因或位置无关。切变活化的递送技术包括制造
NP微聚集体，其在正常小血管和大血管中受到的流体切应力水平下保持完好，但在以高切
应力（>100dyne/cm2）为特征的疾病区域内解聚并布置其活性NP组分，这与活体血小板的行
为很相似。与微尺度聚集体不同，由于拖曳力（drag force）较小，分散的NP快速粘着至相邻
的血管壁表面，并且这可通过NP上的表面包衣（例如，本研究中的tPA）进一步增强（结合至
内皮细胞或相关的血管靶标（如纤维蛋白凝块））。结果，可将静脉给予的高局部浓度的药物
选择性同时递送至多个血管阻塞区域，并且可将类似方法用于将显像剂浓缩至这些狭窄位
点处。这一生物模拟策略提供了治疗介入的新途径，其中，在将患者转移至医院设置前，可
由急诊技师或医师在诊断后立即通过全身注射将拯救生命的治疗给予患有肺栓塞、中风、
或其它急性闭塞性血管的患者。
法（例如，使用特异性细胞表面抗原）截然不同，因为本文所述的系统基于升高的局部切应
力，这是收缩血管的物理特性，而与阻塞的起因或位置无关。切变活化的递送技术包括制造
NP微聚集体，其在正常小血管和大血管中受到的流体切应力水平下保持完好，但在以高切
应力（>100dyne/cm2）为特征的疾病区域内解聚并布置其活性NP组分，这与活体血小板的行
为很相似。与微尺度聚集体不同，由于拖曳力（drag force）较小，分散的NP快速粘着至相邻
的血管壁表面，并且这可通过NP上的表面包衣（例如，本研究中的tPA）进一步增强（结合至
内皮细胞或相关的血管靶标（如纤维蛋白凝块））。结果，可将静脉给予的高局部浓度的药物
选择性同时递送至多个血管阻塞区域，并且可将类似方法用于将显像剂浓缩至这些狭窄位
点处。这一生物模拟策略提供了治疗介入的新途径，其中，在将患者转移至医院设置前，可
由急诊技师或医师在诊断后立即通过全身注射将拯救生命的治疗给予患有肺栓塞、中风、
或其它急性闭塞性血管的患者。
[0494] 实施例3：切应力控制的从RBC中的释放
[0495] 使用低渗溶血法制备了血红细胞影细胞。简言之，从血液中离心出RBC（2000g，10min）并重悬于无钙/镁的稀释PBS中（PBS与DD水的体积比为1:10）。使所述细胞在4℃下孵
育15分钟，并随后离心（12,000g，10min）。将这一过程重复四次。随后通过将所述细胞与
5mg/ml的葡聚糖在稀释的PBS中于4℃孵育1小时而将FITC-葡聚糖装载于所述细胞。将所述
细胞离心、悬浮于含钙/镁的PBS缓冲液中，并使其在37℃的培育器内在多于两小时内重新
闭合（reseal）。在重闭合程序后，在PBS中洗涤所述细胞四次以移除溶液中的任何残余物。
图8显示了装载有FITC-葡聚糖的RBC影细胞的荧光图像，在制备所述装载有FITC-葡聚糖的
RBC影细胞后5天时成像。
育15分钟，并随后离心（12,000g，10min）。将这一过程重复四次。随后通过将所述细胞与
5mg/ml的葡聚糖在稀释的PBS中于4℃孵育1小时而将FITC-葡聚糖装载于所述细胞。将所述
细胞离心、悬浮于含钙/镁的PBS缓冲液中，并使其在37℃的培育器内在多于两小时内重新
闭合（reseal）。在重闭合程序后，在PBS中洗涤所述细胞四次以移除溶液中的任何残余物。
图8显示了装载有FITC-葡聚糖的RBC影细胞的荧光图像，在制备所述装载有FITC-葡聚糖的
RBC影细胞后5天时成像。
[0496] 将装载有FITC-葡聚糖的RBC影细胞的悬浮液注入不具有狭窄区域的装置（640微米高的通道，壁切应力10dyne/cm2）或具有狭窄区域的装置（80%狭窄，高80微米）。随后将所
述悬浮液离心并通过0.22μm过滤器过滤以移除RBC，并测量荧光强度。如图9中所示，相比于
不具有狭窄区域的装置，流动诱导的释放在具有狭窄区域的装置中高达2倍。
述悬浮液离心并通过0.22μm过滤器过滤以移除RBC，并测量荧光强度。如图9中所示，相比于
不具有狭窄区域的装置，流动诱导的释放在具有狭窄区域的装置中高达2倍。
[0497] 实施例4：切应力控制的从微胶囊中的释放
[0498] 对于纳米胶囊，通过将之前报道的方法进行略微修改的乳化/溶剂蒸发法制备封装有罗丹明染料的Pluronic/聚乙烯亚胺（F127/PEI）纳米胶囊（S.H.Choi，S.H.Lee &
T.G.，Park，Temperature-sensitive pluronic/poly(ethylenimine)nanocapsules for
thermally triggered disruption of intracellular endosomal compartment，
Biomacromolecules.2006Jun;7(6):1864-70）。简言之，在甲苯中以氯甲酸对硝基苯酯在室
温下将Pluronic F127活化24小时。产物在乙醚中沉淀，并通过1H NMR表征。为了制备所述
纳米胶囊，将30%的活化的F127和少量疏水染料（罗丹明）溶于二氯甲烷（1ml）中，随后滴加
入10ml的水性PEI溶液（7.5w/v，pH9）中。在室温下搅拌所述混合物约1小时，以获得纳米胶
囊/微胶囊，并蒸除包埋（entrapped）的二氯甲烷。随后通过离心或中和并在pH4下以水透
析，而对获得的微胶囊进行纯化。
T.G.，Park，Temperature-sensitive pluronic/poly(ethylenimine)nanocapsules for
thermally triggered disruption of intracellular endosomal compartment，
Biomacromolecules.2006Jun;7(6):1864-70）。简言之，在甲苯中以氯甲酸对硝基苯酯在室
温下将Pluronic F127活化24小时。产物在乙醚中沉淀，并通过1H NMR表征。为了制备所述
纳米胶囊，将30%的活化的F127和少量疏水染料（罗丹明）溶于二氯甲烷（1ml）中，随后滴加
入10ml的水性PEI溶液（7.5w/v，pH9）中。在室温下搅拌所述混合物约1小时，以获得纳米胶
囊/微胶囊，并蒸除包埋（entrapped）的二氯甲烷。随后通过离心或中和并在pH4下以水透
析，而对获得的微胶囊进行纯化。
[0499] 将装载有FITC葡聚糖（70kDa）的Pluronic-PEI微胶囊的悬浮液注入不具有狭窄区域的装置（640微米高的通道，壁切应力10dyne/cm2）或具有狭窄区域的装置（80%狭窄，高80
微米）。随后将所述悬浮液离心并通过0.22μm过滤器过滤以移除微胶囊，并测量荧光强度。
如图10中所示，相比于不具有狭窄区域的装置，流动诱导的释放在具有狭窄区域的装置中
高达2倍。
微米）。随后将所述悬浮液离心并通过0.22μm过滤器过滤以移除微胶囊，并测量荧光强度。
如图10中所示，相比于不具有狭窄区域的装置，流动诱导的释放在具有狭窄区域的装置中
高达2倍。
[0500] 参考文献
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[0545] 45.S.H.Choi，S.H.Lee&T.G.，Park，Biomacromolecules，7(6):1864-70(2006).
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