金磁微粒表面功能化修饰方法及其在生物分子检测中的应用
专利汇可以提供金磁微粒表面功能化修饰方法及其在生物分子检测中的应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 属于化学合成领域，尤其涉及一种对金磁微粒表面功能化修饰的方法及其经功能化修饰后的金磁微粒用于 生物 分子的检测。该修饰方法包括酸处理去除金磁微粒未包裹的 氧 化物粒子；酸处理后金磁微粒的表面功能化修饰。该方法工艺简单，操作简便快捷，经表面功能化修饰后的金磁微粒理化性质良好，通过修饰后功能基团可以进一步连接蛋白、核酸、药物等，可用于生物分子的检测，解决了现有纳米金粒子标记生物分子不方便且费时的缺点，从而将 磁性 纳米颗粒更好地应用于生物医药领域。，下面是金磁微粒表面功能化修饰方法及其在生物分子检测中的应用专利的具体信息内容。
1.一种金磁微粒表面功能化修饰方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
1)酸处理去除金磁微粒未包裹的氧化物粒子：
1.1)向烧杯中加入金磁微粒和盐酸，制得混合物；
1.2)将烧杯置于可控温控速的摇床上反应；
1.3)反应过程中取样，将取样样品放入离心管中，置于磁铁上磁性分离，弃去上清，下层沉淀物中再加入超纯水反复吹打混匀，磁性分离，去上清，反复清洗后，将沉淀物加入超纯水中保存，所得沉淀物即为经酸处理后的金磁微粒；
2)酸处理后金磁微粒的表面功能化修饰
2.1)取步骤1)得到的经酸处理后的金磁微粒加入圆底离心管中，加入十六烷基三甲基溴化铵，充分混匀后置于可控温控速的摇床上反应；
2.2)反应完后超声，边超声边摇动；
2.3)超声完毕后，加入盐酸，使反应溶液的pH值为1.0～1.5，然后加入巯基化的修饰试剂，立刻用铝箔纸将离心管包住，置于可控温控速的摇床上反应；
2.4)反应完成后，将离心管置于磁铁上磁性分离，去上清，下层沉淀物中加入超纯水反复吹打混匀，置于磁铁上磁性分离，反复清洗后，将沉淀物放入超纯水中保存，所得沉淀物即为表面功能化修饰的金磁微粒。
2.根据权利要求1所述的金磁微粒表面功能化修饰方法，其特征在于：
步骤1.1)加入金磁微粒和盐酸后用水稀释，使金磁微粒在该混合液中的最终浓度为
2mg/ml，盐酸在该混合液中的最终浓度为1.0～1.5M；
步骤1.2)摇床转速为80～120rpm，反应温度为20～25℃，反应时间为30～90min；
步骤1.3)沉淀物用超纯水至少清洗两次；
步骤2.1)十六烷基三甲基溴化铵与步骤1.1)金磁微粒的体积比为1∶1～1∶2，十六烷基三甲基溴化铵的摩尔浓度为50mM，摇床转速为150～200rpm，温度为20～25℃，反应时间为20～30min；
步骤2.2)超声时间为10～15min；
步骤2.3)所加盐酸的摩尔浓度为0.2～0.5M，所加的体积为50ul；加入巯基化的修饰试剂与步骤1.1)金磁微粒的体积比不小于1∶2；摇床转速为180rpm，温度为20～25℃，反应时间至少为4h；
步骤1.3)和步骤2.4)的磁铁为5000高斯磁铁。
3.根据权利要求1或2所述的金磁微粒表面功能化修饰方法，其特征在于：
步骤1.1)向烧杯中加入金磁微粒和盐酸，再加超纯水稀释使盐酸在该混合液中的最终浓度为1.5M；
步骤1.3)沉淀物用超纯水清洗三次；
步骤2.3)超声完毕后，加入盐酸，使反应溶液的pH值为1.0。
4.根据权利要求3所述的金磁微粒表面功能化修饰方法，其特征在于：步骤1.3)所述的取样是在放入摇床后的40～90min内的任一时间取样，取样的量为15ml。
5.根据权利要求4所述的金磁微粒表面功能化修饰方法，其特征在于：步骤1.3)所述的取样是在放入摇床后的40min时取样。
6.根据权利要求5所述的金磁微粒表面功能化修饰方法，其特征在于：步骤2.3)巯基化的修饰试剂为HS-PEG-NH2、HS-PEG-CH3、HS-PEG-COOH、HS-C2H4-CONH-PEG-O-C3H6-COOH、HS-PEG-NHCO-C2H4-CONH-NH-Boc、HS-PEG-HS、HS-DNA、硫辛酸或各种巯基末端的烷烃。
7.根据权利要求6所述的金磁微粒表面功能化修饰方法，其特征在于：所述金磁微粒为核壳型金磁微粒。
8.如权利要求1所述的方法制备出的表面功能化修饰的金磁微粒可用于生物分子的检测。
金磁微粒表面功能化修饰方法及其在生物分子检测中的应
用
技术领域
背景技术
发明内容
25℃，反应时间为20～30min。
具体实施方式
50ml离心管中，置于5000高斯磁铁上磁性分离，用5ml的微量加样器吸取上清液并弃去上清，然后用5ml的微量加样器加入10ml的超纯水并反复吹打混匀，再次置于5000高斯磁铁上磁性分离，重复上述清洗磁性分离弃去上清三遍后加入10ml的超纯水保存。这时发现经过酸处理的金磁微粒变成了蓝色，如图6(b)所示。
50ml离心管中，置于5000高斯磁铁上磁性分离，用5ml的微量加样器吸取上清液并弃去上清，然后用5ml的微量加样器加入10ml的超纯水并反复吹打混匀，再次置于5000高斯磁铁上磁性分离，重复上述清洗磁性分离弃去上清三遍后加入10ml的超纯水保存。这时发现经过酸处理的金磁微粒变成的蓝色，如图6所示。图4是经60min酸处理后的金磁微粒的TEM图。
4h以上。将离心管置于5000高斯磁铁上磁性分离，用1ml的微量加样器吸取上清液并弃去上清，然后用1ml的微量加样器加入2ml的超纯水并反复吹打混匀，再次置于置于5000高斯磁铁上磁性分离用，重复上述清洗磁性分离弃去上清三遍后加入1ml[的超纯水中。此时可明显看见经表面功能化修饰后的金磁微粒由蓝色变成的粉红色，说明修饰后的金磁微粒有了很好的分散性，如图6所示。图5是金磁微粒经过巯基化修饰试剂修饰的TEM图，从图中看到修饰后的金磁微粒有了很好的分散性。图1和图2是表面功能化修饰后的金磁微粒的平面结构图。图7是金磁微粒经60min酸处理且表面功能化修饰前后的吸收光谱的变化的图片，a线表示酸处理和表面功能化修饰前的吸收光谱，b线表面酸处理后的吸收光谱，c线表示表面功能化修饰后的吸收光谱。
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