口服奥昔布宁治疗被普遍用于治疗各种形式的膀胱活动过度症和 尿失禁。特别地，奥昔布宁有效地治疗神经性原因引起的膀胱障碍。 这类障碍的减轻归结于奥昔布宁使副交感神经系统和膀胱逼尿肌具有 抗胆碱能和抗痉挛作用。
一般认为，尽管这种抗胆碱能的活性促成了奥昔布宁具有临床有 用性，但是它也促成了某些不适的不利药品感受，例如口干、头昏、 视力模糊和便秘。更具体地，人们通常将这些感受归因于奥昔布宁活 性代谢物例如N-去乙基奥昔布宁的存在和数量。在使用现有奥昔布宁 制剂的多数病人中可观察到上述不利药品感受。在某些情况下，这些 不利感受甚至严重到使病人中断治疗的程度。
综上所述，迫切需要用于奥昔布宁给药的组合物和方法以促使将 上述不利药品感受的发生率和/或严重性降至最低程度。
发明概述
因此，本发明提供了将与奥昔布宁治疗有关的不利药品感受降至 最低的方法，该方法包括下列步骤：采用包括奥昔布宁的药物组合物 向患者给药，使奥昔布宁与奥昔布宁代谢物的血浆浓度-时间曲线(AUC) 下面积比为约0.5∶1到约5∶1。不利药品感受可以是奥昔布宁给药引起 的任何不利感受，例如本质上是抗胆碱能的和/或抗蕈毒碱的作用。
尤其是，已知的奥昔布宁不利感受的特例包括但不限于：肠胃/泌 尿生殖系统的感受，神经系统感受，心血管感受，皮肤病学感受以及 眼部感受。
奥昔布宁具有手性分子中心，因而存在(R)-和(S)-异构体。当被代 谢时，奥昔布宁产生了代谢物如N-去乙基奥昔布宁，该代谢物也可存 在为(R)-和(S)-异构体或它们的组合。本发明的方法具体包括奥昔布宁 及其任何相应代谢物的每种异构体。例如，在一个方面，(R)-奥昔布宁 与(S)-奥昔布宁的平均血浆AUC比为约0.7∶1。在另一方面中，(R)-N- 去乙基奥昔布宁与(R)-奥昔布宁平均AUC比的范围为约0.4∶1至约 1.6∶1。在另一个方面中，该平均AUC比可为约1∶1。在另一个方面中， (R)-N-去乙基奥昔布宁与(S)-N-去乙基奥昔布宁的平均AUC比的范围 为约0.5∶1至约1.3∶1。例如，该平均AUC比可为约0.9∶1。在另一个方 面中，代谢物的平均峰值血浆浓度小于约8ng/ml(纳克/毫升)。
本发明还提供了一种用于向患者进行奥昔布宁给药的药物组合 物，该药物组合物包括有使奥昔布宁与奥昔布宁代谢物的AUC比为约 0.5∶1到约5∶1的奥昔布宁。
与本发明方法共同使用的传送制剂包括但不限于：口服制剂，注 射制剂，经皮给药制剂，吸入制剂，或可植入制剂。在本发明的一个 方式中，传递制剂可以是经皮传递制剂。在一个更具体的方式中，传 送制剂可以是以非封闭形式的或自由形式的方式向皮肤局部给药的凝 胶制剂。
本发明的组合物可包括药学上可接受的载体，以及根据特定剂量 制剂的具体需求所需的其他成分。这样的成分是本领域技术人员熟知 的。参见，例如Gennaro， A.Remington：The Science and Practice of Pharmacy 19 th ed.(1995)(Remington：药学科学与实践，第19版)，在此 以引用的方式将其全部内容并入本文。例如，一种经皮给药制剂可包 括但不限于，渗透增强剂、抗刺激剂、粘性调节剂及其组合。
在一种方式中，本发明的制剂可以是一种用于局部应用的奥昔布 宁凝胶制剂。这种凝胶可包括治疗有效量的奥昔布宁和凝胶载体，其 中该制剂的pH值范围为从约4到约11，且其中奥昔布宁存在为奥昔 布宁游离碱、药学上可接受的奥昔布宁盐或它们的混合物，且其中该 制剂被制备成用于以非封留形式局部应用到皮肤表面。在另一种方式 中，该制剂的pH值范围可以是从约4到约11。在又一种方式中，该 制剂的pH值范围可以是从约5到约11。在又一种方式中，该制剂的 pH值范围可以是从约6到约11。在另一种方式中，该制剂的pH值范 围可以是约4-约10。另一种方式中，该制剂的pH值范围可以是约5- 约10。另一种方式中，该制剂的pH值范围可以是约6-约10。在一个 更加具体的方式中，该制剂的pH值可以是约6。在本发明又一另外的 具体方式中，该制剂的pH值约为9。
根据本发明的另一个方面，提供了一种用于局部应用的凝胶制剂， 其包括存在于凝胶载体中的治疗有效量的奥昔布宁，当以非封留形式 进行局部给药(非吸留形式进行局部给药，unoccluded topical administration)时，其足以使奥昔布宁的皮肤渗透速率在至少约24小 时的周期内为至少约10ug/cm2。
在本发明的又一种方式中，提供了一种用于局部应用的凝胶制剂， 其包括存在于凝胶载体中的治疗有效量的奥昔布宁，当以非封留形式 进行局部给药时，其足以使奥昔布宁的血浆浓度在给药开始后至少约3 小时内达到至少约0.5ng/ml。
在本发明的另一种方式中，提供了一种用于局部应用的凝胶制剂， 其包括存在于凝胶载体中的治疗有效量的奥昔布宁，当以非封留形式 进行局部给药时，其足以使奥昔布宁的血浆浓度达到奥昔布宁代谢物 血浆浓度的约0.5到约5倍。
在本发明的另一种方式中，提供了一种用于局部应用的凝胶制剂， 其包括存在于凝胶载体中的治疗有效量的奥昔布宁，当以非封留形式 进行局部给药时，其足以达到对治疗有效的奥昔布宁浓度，而奥昔布 宁代谢物的最大血浆浓度小于约8ng/ml。
除了本文所述的组合物之外，本发明还包括一种用于治疗患者神 经性膀胱障碍的方法，其包括将本文所述的凝胶制剂局部应用到患者 的皮肤表面上。此外，本发明包括一种使与奥昔布宁治疗有关的不良 副作用降至最低的方法，其包括将本文所述的奥昔布宁凝胶制剂涂敷 到患者的皮肤表面。
至此已在相当广泛的程度上概括地归纳出本发明中较重要的特 征，这使得人们不但可以更好地理解其后的详细描述，而且可以更好 地认识到本发明对该技术领域的贡献。通过随后结合附图和权利要求 书进行的详细描述，本发明的其他特征将变得更加清楚，或者可以通 过实践本发明而认识到本发明的其他特征。
附图简述
图1是奥昔布宁和N-去乙基奥昔布宁的总血浆浓度的图示，该总 血浆浓度是在以5mg奥昔布宁的即时释放口服剂量制剂给药之后测量 的。
图2是奥昔布宁和N-去乙基奥昔布宁的总血浆浓度的图示，该总 血浆浓度是在根据本发明进行经皮给药的情况下测量的，时间跨度为 从开始奥昔布宁给药至给药后24小时。
图3是奥昔布宁和N-去乙基奥昔布宁的总血浆浓度的图示，该总 血浆浓度是在根据本发明进行经皮给药的情况下测量的，时间跨度为 从开始奥昔布宁给药至给药后96小时，以及在96小时时除去经皮系 统之后的另外12小时。
图4是根据本发明所述的奥昔布宁经皮给药而治疗患者膀胱活动 过度症的结果的图示，图中通过记录尿失禁事件的次数，将奥昔布宁 的经皮给药治疗与利用5mg即时释放的奥昔布宁口服片剂的治疗进行 比较。
图5是接受本发明所述的奥昔布宁经皮给药而治疗膀胱活动过度 症的患者所报告的抗胆碱能不利感受的图示，图中将奥昔布宁的经皮 给药治疗与利用5mg即时释放的奥昔布宁口服片剂的治疗进行比较。
图6是在采用5mg即时释放口服片剂给药的情况下，奥昔布宁和 N-去乙基奥昔布宁的(R)和(S)异构体的血浆浓度的图示。
图7是本发明所述的经皮给药所导致的奥昔布宁和N-去乙基奥昔 布宁的(R)和(S)异构体的血浆浓度图示。
详细描述
A.定义
在本发明的说明书和权利要求书中，所使用的下列术语的定义如 下所示。
单数形式的“一个(a)”，“一种(an)”以及“该(the)”，除非上 下文清楚指示，否则均包括其复数对象。因此，例如，谈及“一种粘 合剂”，包括一种或多种这样的粘合剂；而谈及“一种赋形剂”，包括 一种或多种这样的赋形剂。
“奥昔布宁(oxybutynin)”是指具有如下通式结构的化合物：

在第12版((1996)Merck索引的第1193页中，条目号7089列出 了奥昔布宁加成盐，奥昔布宁.HCl，该化合物的几种IUPAC命名为例 如α-环己基-羟基-苯乙酸4-(二乙基氨基)-2-丁炔酯盐酸盐；α-苯基环己 烷羟基乙酸4-(二乙基氨基)-2-丁炔酯盐酸盐；以及4-二乙基氨基-2-丁 炔基苯基环己基羟基乙酸酯盐酸盐。本文中所采用的“奥昔布宁”包 括奥昔布宁游离碱，其酸加成盐例如奥昔布宁.HCl，其类似物及相关 化合物，异构体，同质多形体，及其前体药物。众所周知，奥昔布宁 可以存在为一种或两种同分异构形式，称为(R)-和(S)-异构体，或这两 种异构体的混合物。这些同分异构形式及其混合物均在本发明的范围 内。特别地，在本申请的某些部分中，虽然仅仅使用了“奥昔布宁”， 但上下文清楚地指示出奥昔布宁的具体形式，例如氯化奥昔布宁。
“给药(administration)”以及“进行给药(administrating)”是指 向患者提供药的方式。可以通过本领域已知途径来进行给药，例如口 服给药，肠胃外给药，经皮给药，吸入给药，植入给药等。因此，口 服给药可以通过吞咽、咀嚼、吮吸包括药物的口服剂型来实现。肠胃 外给药可以通过静脉内，动脉内，肌肉内，鞘内或皮下注射药物组合 物等来实现。经皮给药通过将经皮制剂涂敷，裱糊，辊压，粘贴，喷 洒，按压，摩擦等方式施加到皮肤表面来实现。这些和其他给药方法 是本领域公知的。
术语“非口服给药(non-oral administration)”是指药物组合物并 非是以固体或液体口服剂型提供的任何给药方法，其中这样的固体或 液体口服剂型通常基本上是在除了嘴和/或口腔之外的胃肠道中释放和 /或传递的。这样的固体剂型包括常规的片剂，胶囊，囊片等等，它们 在嘴和/或口腔中基本上不释放药物。
应该意识到的是，许多口服液体剂型例如溶液，悬浮液，乳化液 等等，以及某些口服固体剂型在吞咽这些制剂期间可能会在嘴和/或口 腔中释放出一些药物。然而，由于它们通过嘴和/或口腔的时间非常短， 在嘴和/或口腔中从这些制剂中释放出的药物被认为是微量的，不具实 际作用。因此，设计用于在嘴中释放药物的口腔贴片、胶粘薄膜、舌 下片剂以及锭剂是用于本发明目的的非口服组合物。
此外，应该理解的是，术语“非口服(non-oral)”包括肠胃外的， 经皮的，吸入，植入物，以及阴道或直肠的制剂和给药。此外，不管 植入的身体部位，植入制剂均包括于术语“非口服”中。特别地，植 入制剂被特别地设计为用于植入和滞留在胃肠道中，这是已知的。这 样的植入物也被认为是非口服传递制剂，因而属于术语“非口服”。
术语“患者(subject)”是指从本发明的某种药物组合物或方法的 给药中受益的哺乳动物。患者的例子包括人类或其他动物，例如马， 猪，牛，狗，猫，兔，以及水生哺乳动物。
本文中采用的术语“制剂(formulation)”和“组合物(composition)” 是可互换使用的。术语“药物(drug)”和“药品(pharmaceutical)” 也是可互换使用的，用于指具有药学活性的物质或组合物。这些技术 术语在药品和医疗领域中是公知的。
术语“经皮(transdermal)”是指促进药物通过皮肤表面输送的给 药途径，其中经皮组合物的给药部位是皮肤表面。
术语“皮肤(skin)”或“皮肤表面(skin surface)”的含义不仅包 括患者的含有一个或多个表皮层的外部皮肤，而且还包括可作为药物 组合物给药部位的粘膜表面。粘膜表面的例子包括以下器官的粘膜： 呼吸器官(包括鼻和肺)，口(嘴和口腔)，阴道以及直肠腔。因此术语“经 皮(transdermal)”可包括“经粘膜(transmucosal)”在内。
术语“增强(enhancement)”或“渗透增强(permeation enhancement)” 的意思是提高皮肤对药物的渗透性，从而提高药物渗过皮肤的比率。 因而，“渗透增强剂(permeation enhancer)”或简称“增强剂(enhancer)” 是指实现这种渗透增强的制剂或制剂混合物。
增强剂的“有效量(effective amount)”是指有效地使药物透过皮 肤的渗透率提高到一个选定程度的用量。分析渗透增强剂特性的方法 在本领域是公知的。参见，例如Merritt等，Diffusion Apparatus for Skin Penetration，J.of Controlled Release 61(1984)，在此以引用方式将该文的 全部内容并入本文。“有效量(effective amount)”或“治疗有效量 (therapeutically effective amount)”或类似术语的意思是指在已知药物 对其有效的疾病的治疗中，所采用的无毒的但足以达到治疗效果的药 物用量。对于药品和医疗领域中的普通技术人员而言，有效量的确定 是公知的。参见，例如Curtis L.Meinert & Susan Tonascia，Clinical Trials： Design，Conduct，and Analysis，Monographs in Epidemiology and Biostatistics，vol.8(1986)。
当术语“平均(mean)”、“数学平均(mathematical mean)”或“平 均值(average)”或类似术语，与一个或多个数值连用时，它们的意思 是指样品的各个观测值或项目的总和除以该样品中的项目数所得的 值。
术语“基体(matrix)”，“基体系统(matrix system)”或“基体贴 (matrix patch)”指的是一种组合物，该组合物包括溶解或分散于聚合 物相中的有效量药物，该组合物还可包括其他成分，例如渗透增强剂 和其他任选的成分。这一定义是为了包括这样的实施方式，其中这种 聚合物相被层压到压敏粘合剂上或用于覆层粘合剂中。
基体系统(matrix system)还可包括粘合层，该粘合层具有一个附 于其远端面的非渗透性薄膜背衬，而在粘合层的近端面上具有一个释 放衬垫(在经皮运用之前)。薄膜背衬保护基体贴的聚合物相，并且防 止药物和/或任选成分释放到环境中。释放衬垫的功能类似于非渗透性 的背衬，但是在将该基体贴应用到如上所定义的皮肤之前，可将该释 放衬垫从该基体贴中移除。具有上述总体特性的基体贴在经皮传递领 域是公知的。参见，例如美国专利号5,985,317、5,783,208、5,626,866、 5,227,169，在此以引用方式将这些专利的全部内容并入本文中。
“局部制剂(topical formulation)”是指一种组合物，在该组合物 中的药物可被直接应用到皮肤表面，并且可从该组合物中释放出有效 量的药物。这样的制剂可包括涂敷至皮肤上的凝胶，洗剂，乳膏。在 一些方式中，可以将这样的制剂以非封留形式(unoccluded form)涂敷 到皮肤上，而不需要其它的背衬、结构或装置。
本文中所采用的“非封留的(unoccluded)”和“不封留的 (non-occluded)”可以被互换使用，并且是指将局部制剂应用到皮肤 上，而不需要采用支持性或其他相关的结构。也就是说，是以一种自 由形式将局部制剂运用在皮肤上，这足以使奥昔布宁的经皮传递有效 进行，而不需要使用诸如背衬部件等结构。
如同本文中所使用的，“凝胶(gel)”是指一种组合物，其包括一 种用作增稠剂的高分子量化合物而获得半固体或悬浮型制剂。增稠剂 或胶凝剂可以是疏水性的或亲水性的，并且其性质通常是聚合的。掺 有亲水性聚合物的凝胶在本领域一般被称为水凝胶。凝胶可包括各种 其他成分，例如但不限于，活性剂，赋形剂，溶剂，乳化剂，螯合剂， 表面活性剂，软化剂，渗透增强剂，防腐剂，抗氧化剂，润滑剂，pH 调节剂，佐剂，染料以及香料。
“不利药品感受(adverse drug experience)”是指与患者使用药物 有关的任何不利现象，包括以下现象：在医师实践中使用药品的过程 中产生的不利现象；由于意外的或有意的药物过量而产生的不利现象； 由于药物滥用而产生的不利现象；由于停止用药而产生的不利现象； 以及任何预期药理学作用的失效。不利药品感受可导致管理正常生命 机能的身体能力基本瓦解。在某些情况下，不利药品感受可能是严重 的或具有生命危险。
虽然一些不利药品感受是可以预料的，但是在某些情况下，这样 的感受却是不可预料的。“不可预料(unexpected)”是指一项未被政府 职能机构(例如美国食品药品管理局)事先列出和/或未在药物产品的当 前标签中指出的。
不可预料的不利感受(unexpected adverse experiences)，可以包括 那些与一个已知现象在症状上以及在病理上可能有关的现象，但是不 同于由于较大的严重性或特异性所产生的现象。例如，根据这一定义， 如果已知现象是肝酶增加或是肝炎，那么肝坏死将是不可预料的(由于 较大的严重性)。类似地，如果已知现象是脑血管意外，那么脑血栓栓 塞和脑血管炎将是不可预料的(由于较大的特异性)。对于不利药品感受 的更全面的定义和描述，请参见21 C.F.R.314.80，在此以引用方式将 其全部内容并入本文。
与奥昔布宁治疗有关的主要不利感受可被分类为抗胆碱能的和/或 抗蕈毒碱的作用。与奥昔布宁有关的某些不利感受在Physician′s Desk Reference中，尤其被分类为心血管感受，肠胃/泌尿生殖系统感受，皮 肤病学感受，神经系统感受，以及眼科感受。
心血管不利感受的例子包括，但不限于：心悸，心动过速，血管 舒张以及它们的组合。皮肤病学不利感受的例子包括但不限于：排汗 量下降，皮疹及其组合。肠胃/泌尿生殖系统不利感受的例子包括但不 限于：便秘，肠胃动力下降，口干，恶心，尿滞潴留及其组合。神经 系统不利感受的例子包括但不限于：神经衰弱，头昏，瞌睡，幻觉， 失眠，烦躁及其组合。眼科不利感受的例子包括但不限于：弱视，睫 状肌麻痹，流泪量降低，瞳孔散大及其组合。其他不利感受的例子包 括但不限于：阳萎和抑制泌乳。在管理机构提供的奥昔布宁制剂的标 签中列出了更全面的不利感受。
术语“降至最低(minimize)”及其语法上的等效用语是指降低了 患者或患者群体的一种或多种不利药品感受的频率和/或严重性。应该 意识到的是，与可能受到该药物和/或其不利感受作用的总人数相比， 患者群人数必然地可能非常小。
还应该意识到的是，由确定不利药品感受的频率和/或严重性的降 低程度这种方法所获得的结果受到变量如患者内和患者间因子的影 响。然而，还应该意识到的是，可采用某些学术上接受的方法进行这 些研究，并且这类研究的结果在统计学上是可靠的。这类方法以及对 这类方法的结果的解释在本领域内是公知的。参见，例如Robert R. Sokal & F.James Rohlf，Biometry：The Principles and Practice of Statistics in Biological Research，2 ed.(1969)，在此以引用方式将该文献的全部内 容并入本文。
短语“曲线下的面积(area under the curve)”，“血浆浓度-时间曲 线下的面积(area under the plasma concentration-time curve)”或类似术 语在药品领域是公知的。通过将来自给定药物或其代谢物血浆浓度的 数据绘制成时间函数的曲线来计算出这些数值，在该曲线中X轴通常 表示时间，Y轴通常表示血浆浓度。然后将各个数据点连接而成的直 线下的面积积分成一个数值。例如参见Milo Gibaldi & Donald Perrier， 药代动力学，2nd ed.(1982)。然后，将AUC乘以被测量物质的清除率或 总的体清除率(CL)，就得到了被测量物质(药物或其一种或多种代谢物) 的总量或剂量的估计值。由于采用各种制剂和/或组合物中的药用试剂 (例如奥昔布宁)进行给药期间，各个患者中存在生理和/或环境因素， 因此血浆浓度、AUC和CL可能会发生患者内和患者间的变化。因此， 个体值和平均值可能是不同的，但其总体趋势和关系得到保持并具有 重现性。
本文中的浓度，数量，溶解性以及其他数值数据都可以范围形式 给出。应该理解的是，使用这样的范围形式仅仅是为了方便简明，它 们应该被解释成不仅包括该范围明确所述的数字值，而且还应包括该 范围所涵盖的所有单独的数字值或子范围，就像每个数字值和子范围 均被明确示出一样。
例如，0.1到5ng/ml的浓度范围应该被解释为不仅包括明确所述 的0.1ng/ml和5ng/ml的浓度界限，而且还包括各个单独的浓度，例 如0.2ng/ml，0.7ng/ml，1.0ng/ml，2.2ng/ml，3.6ng/ml，4.2ng/ml， 以及子范围，例如0.3-2.5ng/ml，1.8-3.2ng/ml，2.6-4.9ng/ml等等。无 论范围宽度或被描述的特性如何，这种解释都应该是适用的。
B.本发明
如上所述，本发明提供了用于奥昔布宁给药的组合物和方法。这 些组合物和方法使与奥昔布宁给药有关的不利感受的发生率和/或严重 性降至最低，同时提供足量的奥昔布宁来保证疗效。在无意局限于任 何特定理论的情况下，认为不利感受降至最低的至少部分原因在于： 与传统口服给药相比，采用本发明的组合物和方法降低了奥昔布宁代 谢物(例如N-去乙基奥昔布宁)的血浆浓度。短语“传统口服给药 (conventional oral administration)”的含义不仅包括上文所定义的口服 制剂，而且还包括例如含有奥昔布宁的即时释放或持续释放的口服片 剂。这样的传统口服制剂中的一种是5mg的即时释放口服片剂。
1)与总药物和代谢物有关的药代动力学方面
血浆浓度
预期的药代动力学特征，如降低的奥昔布宁代谢物血浆浓度可通 过以下方式实现，尤其是：1)减少奥昔布宁的给药量，2)降低奥昔布 宁变成可被身体代谢利用的速率，和/或3)避免奥昔布宁的首过 (first-pass)肝和/或肠代谢，或将奥昔布宁的首过肝和/或肠代谢降至 最低。采用非口服的给药路径是实现一个或多个这些目标的一种方式。 或者，可设计模拟非口服的给药方式的口服剂型，以达到本文中所述 的血浆浓度和其它药代动力学数据。
已进行了证明本发明一种实施方式的临床研究。对16位健康的志 愿者进行交叉临床研究，以比较奥昔布宁和其一种代谢物N-去乙基奥 昔布宁，以及它们各自的(R)-和(S)-对映体成分的血浆浓度和药代动力 学。
奥昔布宁的传统口服剂型，例如本研究中采用的5mg奥昔布宁片 剂产生了血浆浓度比母体药物高得多的奥昔布宁代谢物，如N-去乙基 奥昔布宁(参见图1)。在多数情况下，代谢物浓度与奥昔布宁浓度的平 均AUC比为约10∶1，且通常都大于5∶1。
相反，当奥昔布宁的给药方式是非口服的缓释组合物，例如本发 明实施方式的经皮给药组合物时，代谢物(N-去乙基奥昔布宁)与奥昔 布宁的平均AUC比则低得多。一般来说，奥昔布宁代谢物(N-去乙基 奥昔布宁)与奥昔布宁的平均AUC比小于约2∶1。而且，在多数情 况下，该比率小于约1.2∶1，通常为约0.9∶1。(参见图3)。
另外，N-去乙基奥昔布宁的平均血浆浓度通常低于约8ng/ml，在 大多数情况下低于约5ng/ml。通常该平均浓度小于约3ng/ml。
2).异构体的药代动力学方面
本发明人进一步研究了上述的各个方面，并发现了本发明的制剂 和方法显著降低了某些奥昔布宁代谢物特定异构体的水平，这些代谢 物异构体的水平降低与上述将不利药品感受降至最低有关。
奥昔布宁作为(R)-或(S)-异构体或其组合存在通常是已知的。尤其 是，如采用分离的组织进行的动物药理学研究所表明的一样，认为两 种异构体中(R)-奥昔布宁的活性更高。例如参见Kachur JF，Peterson JS， Carter JP等，J.PharmExper.Ther.1988；247：867-872；另外也参见 Noronha-Blob L，Kachur JF.J.Pharm.Exper.Ther.1990；256：56-567。 就这点而论，与活性较低的(S)-N-去乙基奥昔布宁相比，总代谢物中 活性更高的组分(R)-N-去乙基奥昔布宁对不利药品感受，如抗胆碱能的 副作用的贡献更大。例如参见美国专利号5,677,346，以引用方式将该 文献并入本文。
因此，在上述的临床研究期间测定(R)-和(S)-奥昔布宁及其一种代 谢物N-去乙基奥昔布宁的相应异构体。进行的测定表明：与传统的口 服剂型和给药方法相比，本发明显著地降低了(R)-N-去乙基奥昔布宁的 血浆浓度。
图6示出了由传统的奥昔布宁，即5mg奥昔布宁口服片剂导致的 血浆浓度曲线。可以看出，(R)-N-去乙基奥昔布宁的浓度最大，是(R)- 和(S)-奥昔布宁两种物质各自浓度的几倍。口服给药后，(R)-N-去乙基 奥昔布宁与(R)-奥昔布宁这两种活性最大的异构体的平均AUC比为 约17∶1。此外，(R)-N-去乙基奥昔布宁与(S)-N-去乙基奥昔布宁的平均 AUC比为约1.5∶1，而(R)-奥昔布宁与(S)-奥昔布宁的平均AUC比为约 0.6∶1。这些AUC比始终如一地表明了采用较大总剂量的外消旋奥昔布 宁时，进行口服给药的奥昔布宁导致了较低量的治疗活性(R)-奥昔布 宁。另外，口服剂导致了较大量的(R)-N-去乙基奥昔布宁这一最可能引 起一些或许多不利药品感受的部分。
相反，图7示出了本发明的(R)-和(S)-异构体的血浆曲线，该曲线 是在采用非口服传递的奥昔布宁进行的临床研究期间获得的。(R)-奥昔 布宁与(S)-奥昔布宁的平均AUC比为约0.7∶1，而(R)-奥昔布宁持续不 变的血浆浓度与口服给药后得到的峰浓度相似。这种类似地暴露到治 疗活性的(R)-奥昔布宁部分的方式与本发明是一致的。
因此，采用经皮给药的方式，发现降低了(R)-N-去乙基奥昔布宁与 (R)-奥昔布宁的平均AUC比，这使得大幅降低了奥昔布宁活性代谢物 的含量，但同时提供了治疗有效量的奥昔布宁。
通过比较图4，5和7，很清楚的是本发明的组合物和方法提供了代 谢物如(R)-N-去乙基奥昔布宁与奥昔布宁的最优血浆浓度比，因而与传 统的口服制剂相比，这些方法和组合物将与奥昔布宁给药有关的不利 感受降至最低，同时保持了治疗有效浓度的(R)-奥昔布宁，以达到奥昔 布宁治疗的效果。如上所述，这些组合物和方法显著改进了奥昔布宁 的治疗。
3)治疗方面
对患有膀胱过度活动症的72名人类患者(病人)进行疗效以及使 与非口服给药的奥昔布宁有关的不利药品感受的发生率和严重性降至 最低方面的研究。采用口服制剂中的奥昔布宁向大约一半的病人给药。 在约6个星期的期间内，采用非口服的传递路径，如经皮的粘性基体 贴向其余的病人给药。结果以图表方式示于图4和图5中。
比较本发明的非口服持续释放组合物和奥昔布宁的传统5mg口 服片剂的疗效。采用从病人多日的排尿记录得到的每日失禁事件的平 均数作为预期疗效的指标。该数据表明用本发明的非口服方法治疗的 病人发生的失禁次数与用口服制剂治疗的病人发生的失禁次数几乎相 等(参见图4)。
然后，比较本发明的非口服持续释放制剂与传统的即时释放口服 片剂引起的不利药品感受的发生率和严重性。实验中选择口干(dry mouth)这一不利感受作为指标。可以看到，仅有6％接受传统口服奥 昔布宁片剂的参与者报道无口干感受。相反，有这些参与者中有94％ 报道有一定程度的口干感受。
与此相反的是，接受本发明经皮粘性基体贴片治疗的参与者中有 62％报道没有口干感受。因此，这些参与者中仅有38％报道有一定程 度的口干感受，并且没有任何口干感受是不能忍受的。
这些数据表明：与奥昔布宁给药有关的不利感受可被显著降低， 同时完全保持了通过奥昔布宁给药而获得的奥昔布宁疗效，从而获得 了奥昔布宁代谢物与奥昔布宁的最优AUC比。
4)本发明药代动力学方面的概述
从上述的药代动力学数据，可以得到本发明的以下方式。一种方 式中，奥昔布宁代谢物的平均峰值血浆浓度小于约8ng/ml。另一方式 中，该代谢物的平均峰值血浆浓度为从约0.5ng/ml到约8ng/ml；另一 方式中，该浓度小于约5ng/ml；又一方式中，该浓度为约1.0ng/ml 到约3ng/ml。在一些方式中，奥昔布宁的代谢物是N-去乙基奥昔布宁。
在一些实施方式中，奥昔布宁代谢物的平均AUC值降低至奥昔布 宁AUC的1/2以下。在一些实施方式中，奥昔布宁代谢物的平均AUC 值降低至约0.9∶1ng/ml以下。
一些方式中，本发明提供了向患者进行奥昔布宁给药的组合物和 方法，从而使奥昔布宁与奥昔布宁代谢物的平均AUC比为约0.5∶1-约 5∶1。在一些方式中，该比率为约0.5∶1-约4∶1；在另一些方式中，该比 率为从约1∶1到5∶1；在另一些方式中，该比率为约0.8∶1到约2.5∶1； 还有另外一些实施方式中，该比率为约0.8∶1到约1.5∶1。所有上述方式 中，代谢物可为N-去乙基奥昔布宁(N-脱乙基奥昔布宁， N-desethyloxybutynin)。
另一种表征本发明方法的方式是在开始治疗后，测定某些时间间 隔点处奥昔布宁的特定血浆浓度和代谢物浓度。因此，在一个方面， 奥昔布宁治疗开始后的约6小时时，奥昔布宁的血浆浓度低于约2.0 ng/ml。在另一个方面，治疗开始后的约6小时时，代谢物的血浆浓度 也低于约2.0ng/ml。
仍然在另一个方面，奥昔布宁和其代谢物的血浆浓度在奥昔布宁 开始给药后的约24小时时为8ng/ml。此外，稳态奥昔布宁和其代谢物 的平均血浆浓度在整个奥昔布宁治疗期间都低于约8 ng/ml。
在一个方面，(R)-N-去乙基奥昔布宁的平均峰值和平均AUC值等 于或小于(S)-N-去乙基奥昔布宁的平均峰值和平均AUC值。在另一个 方面，(R)-N-去乙基奥昔布宁与(S)-N-去乙基奥昔布宁的平均AUC比 为约0.9∶1。仍然在另一个方面，(R)-奥昔布宁与(R)-N-去乙基奥昔布宁 的平均峰值和平均AUC值大约相等。在另一个方面，(R)-N-去乙基奥 昔布宁与(S)-N-去乙基奥昔布宁的比例为约1∶1。
在另一方式中，(R)-N-去乙基奥昔布宁的平均峰值血浆浓度小于约 4ng/mL。另一种方式中，(R)-N-去乙基奥昔布宁的平均峰值血浆浓度 为约0.25到约4nm/ml，以及约为1.5ng/ml。
在一种方式中，(R)-N-去乙基奥昔布宁的平均AUC值为约100ng  x hr/ml。另一种方式中，(R)-N-去乙基奥昔布宁的平均AUC值为约 30ng x hr/ml到约170ng x hr/ml。
另一种方式中，(R)-N-去乙基奥昔布宁的血浆浓度在奥昔布宁给药 后的约6小时时小于约1ng/ml。在又一种方式中中，(R)-N-去乙基奥 昔布宁的血浆浓度在奥昔布宁起始给药后的约24小时时小于约2 ng/ml。
奥昔布宁的治疗血浆浓度随着失禁的严重性变化而有所不同。一 般来说，可由低到0.5ng/ml的奥昔布宁血浆浓度获得治疗效果。采用 本发明的方法在开始治疗后的短短3小时内就可达到治疗血液水平， 约24小时内就可达到奥昔布宁的峰值血浆浓度。
然而，这些一般性参数并不受限于可达到预期血浆水平的方式。 通过利用产生不同参数的制剂，可采用不同的传递方法、速率和用量 而获得预期的血浆浓度。
5)组合物方面
可采用任何药学上可接受的组合物和这类组合物的给药方法而达 到本发明的预期方面。
例如，可采用口服和非口服的组合物和给药方法。非口服的组合 物和给药方法包括肠胃外给药的、植入给药的、吸入给药的和经皮给 药的组合物和方法。
口服组合物和给药方法可包括设计为缓释组合物，该缓释组合物 模拟上述药代动力学特征在本文中被特别公开的非口服组合物和给药 方式。本领域的普通技术人员将易于理解如何制备这类缓释口服制剂， 以及如何采用这类缓释口服制剂进行给药。这些制剂的形式可以是片 剂、胶囊剂、囊片、颗粒剂或有包膜的颗粒剂等，或者是液体制剂如 溶液或悬浮液。例如参见美国专利号5,840,754和WO 99/48494，以引 用方式将上述专利并入本文中。
肠胃外给药的组合物和给药方式可包括静脉内、动脉内、肌肉内、 鞘内、皮下给药等。可制备这些组合物，以这些组合物进行给药而缓 慢释放奥昔布宁，从而获得上述的药代动力学曲线和治疗效果。本文 中提供了制备用于肠胃外给药的储存制剂的一个特例。制备肠胃外使 用的持续释放药物(包括微球体)的一般性方法在本领域内是已知的。 例如参见美国专利号5,575,987；5,759,583；5,028，430；4,959,217；以 及4,652,441，以引用方式将这些专利的全文并入本文中。
已知植入是使药物在一段长时间内进行可控释放的一种技术。本 领域的技术中已经公开了几种皮下可植入设备。例如参见美国专利号 5,985,305，5,972,369和5,922,342，将上述专利的全文以引用方式并 入本文。利用这些通常的技术，本领域的普通技术人员可制备得到可 植入的奥昔布宁组合物，并利用其进行给药，从而实现本发明的药代 动力学和疗效。
奥昔布宁经皮给药制剂的例子包括但不限于：1)局部制剂，例如 油膏、洗剂、凝胶、糊剂、摩丝(mousses)、气溶胶和护肤霜；2)经 皮贴片，例如粘性基体贴片和贮液系统。其它的非口服制剂的例子包 括经粘膜的片剂例如口含片剂或锭剂，或舌下片剂或锭剂，以及栓剂。
除了需要量的奥昔布宁之外，经皮给药的奥昔布宁制剂还可包括 渗透增强剂，或多种渗透增强剂的混合物，以提高皮肤对奥昔布宁的 渗透性。渗透增强剂的索引在作者是David W.Osborne and Jill J. Henke，题目为 Skin Penetration Enhancers Cited in the Technical Literature，公开于“Pharmaceutical Technology”(June 1998)中的文献 中有所公开，该文献也可在已知网址为 pharmtech.com/technical/osbome/osbome.htm的网页上找到，将该文献 以引用方式并入本文。
更具体地，已知增强奥昔布宁传递的渗透增强剂包括但不限于： 脂肪酸、脂肪酸酯、脂肪醇、乳酸或羟基乙酸的脂肪酸酯、甘油三酯、 甘油二酯、甘油单酯、甘油三醋酸酯(甘油三乙酸酯，三醋精，triacetin)、 短链醇，及它们的混合物。为优化所采用的特殊奥昔布宁组合物的增 强性能，本领域的技术人员可从上述所列各类特殊化合物中选择出特 定的种类或种类组合。
本发明的经皮给药制剂可为非封留形式的局部制剂，如凝胶，油 膏如洗剂，乳膏或糊剂；或者为封留的装置，如经皮贴片。本发明的 经皮贴片可为粘性基体贴片、贮液系统型的贴片、口含片剂或类似物。 任选的组分，如粘合剂、赋形剂、背衬膜等，以及每一种的需要量在 很大程度上随着所需要的贴片类型而发生很大变化，并且根据需要由 本领域的技术人员确定。制备具有上述特征的经皮给药制剂的方法， 以及采用该制剂进行给药的方法在本领域是公知的。例如参见美国专 利号5,762,953和5,152,997，将上述两篇专利的全文以引用方式并入本 文。
在本发明的一种方式中，可按照此处的讨论制备用于局部施用的 自由形式的奥昔布宁油膏。油膏是基于已知材料如油性基质、羊毛脂、 乳剂或水溶性基质的半固体药物制剂(semisolid pharmaceutical preparation)。油膏的制备方法是本领域公知的，如在Remington，supra (见上文)，vol.2，pp.1585-1591中所述。这类制剂中通常含有矿脂 (petrolatum)或氧化锌以及活性剂。适用于本发明的油脂性油膏基质 通常包括但不限于植物油、动物脂肪，以及由石油制得的半固体烃。 本发明的吸收性油膏基质可包括少量的水或不包含水，还可包含的组 分包括但不限于羟基硬脂酸甘油酯硫酸酯、无水羊毛脂和亲水性矿脂。 本发明的乳液油膏基质是油包水(W/O)乳液或水包油(O/W)乳液，可包 括但不限于鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯、羊毛脂、多烷基硅氧烷和硬脂 酸。适于本发明的水溶性的油膏基质可从各种分子量的聚乙二醇制备 得到。
在另一种方式中，本发明的油膏可包括其它组分，包括但不限于 其它活性剂、赋形剂、溶剂、乳化剂、螯合剂、表面活性剂、缓和剂、 渗透增强剂、防腐剂、抗氧化剂、润滑剂、pH调节剂、佐剂、染料和 香料。本领域的技术人员可根据本发明的原则作出特定选择并制备这 类其它组分的组合物。
在本发明的另一种方式中，可根据本发明的原则制备得到自由形 式的奥昔布宁。正如本领域所公知的，乳膏是油膏的一种形式，是水 包油或油包水的粘性液体或半固体乳液。乳膏基质可以是水溶性的， 并含有油相、乳化剂、水相和活性剂。在本发明的一种详细方式中， 油相可包括矿脂和脂肪醇如鲸腊醇或硬脂醇。在另一种本发明的详细 方式中，水相的体积可超出油相体积，并且可含有润湿剂。在本发明 的又一个详细方式中，乳膏制剂中的乳化剂可以是非离子型的、阴离 子型的、阳离子型的或两性的表面活性剂。
在本发明一种更加详细的方式中，自由形式的奥昔布宁乳膏是水 包油型的乳液。奥昔布宁乳膏的水相可含有在约20和约60％w/w之 间的水，约1到约15％w/w的至少一种乳化剂，最多达约50％w/w 的油相，以及最多达1％w/w的防腐剂如对羟基苯甲酸酯类(paraben)。 自由形式奥昔布宁乳膏的油相可包含最多达约40％w/w的溶剂，最多 达约15％w/w的至少一种乳化剂，最多达约40％w/w的油相，以及最 多达1％w/w的防腐剂如对羟基苯甲酸酯类。
在本发明的另一种方式中，可根据本发明的原则制备自由形式的 奥昔布宁洗液。洗液是一种油膏，其可以是液体或半固体制剂，其中 在水或醇基质中存在包括活性剂在内的固体颗粒。适用于本发明的洗 液可以是固体悬浮液，也可以是水包油乳液。在本发明的另一方式中， 洗液也可包括提高分散性的悬浮剂，和增加活性剂与皮肤接触的其它 化合物，如甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或类似的化合物。
在另一方式中，本发明的奥昔布宁洗液可包括其它的组分，例如 但不限于其它活性剂、赋形剂、溶剂、乳化剂、螯合剂、表面活性剂、 缓和剂、渗透增强剂、防腐剂、抗氧化剂、润滑剂、pH调节剂、佐剂、 染料和香料。本领域的技术人员可根据本发明的原则作出特定选择并 制备这类其它组分的组合物，这些特殊选择和组分可与为本发明其它 的局部制剂而选用的组分有所不同。
在本发明另一个更详细的方式中，自由形式的奥昔布宁洗液可以 是水相和油相的乳液。奥昔布宁洗液的水相可含有约20％w/w到约 90％w/w的赋形剂如水，最多达约5％w/w的表面活性剂，最多达5％ w/w的氯化钠或类似物，以及最多达约1％w/w的防腐剂如对羟基苯甲 酸酯类。奥昔布宁洗液的油相可包括最多达40％w/w的至少一种溶剂 如甘油或鲸腊醇，最多达约10％w/w的吸收基质如矿脂，最多达约5％ w/w的抗氧化剂如棕榈酸异丙基酯，最多达约5％w/w的油相如二甲基 硅氧烷，以及最多达约1％w/w的防腐剂如对羟基苯甲酸酯。
在本发明的又一种方式中，可根据本发明制备自由形式的奥昔布 宁糊剂。本发明的糊剂是其中存在形成半固体制剂的大量固体的油膏， 半固体制剂中的活性剂悬浮在合适的基质中。在本发明的一个详细方 式中，糊剂可由基质形成而成为脂肪状的糊剂，或者由单相的水凝胶 制成。适用于本发明的脂肪装糊剂可由基质如矿脂、亲水性矿脂等形 成。适用于本发明，由单相水凝胶制成的糊剂可含有基于纤维素的聚 合物如羧甲基纤维素或类似物作为基质。
在另一种方式中，本发明的奥昔布宁可包括其它组分，例如但不 限于其它活性剂、赋形剂、溶剂、乳化剂、螯合剂、表面活性剂、缓 和剂、渗透增强剂、防腐剂、抗氧化剂、润滑剂、pH调节剂、佐剂、 染料和香料。
在本发明的另一种方式中，可制备得到自由形式的奥昔布宁凝胶。 根据本发明制备得到的奥昔布宁凝胶可为胶体制剂，其中的分散相和 连续相结合产生了粘性产物。凝胶化试剂可形成在空隙中保留有溶剂 的亚微观晶体颗粒团。本领域技术人员将理解的是，凝胶是本固体的 悬浮液型体系。单相凝胶包含基本均匀分散遍布在液体载体中的有机 大分子，其中的液体载体可为水性的或非水性的，并可含有醇或油。
另一种方式中，本发明经皮给药的制剂可为局部凝胶，其中含有 向皮肤进行以非吸留形式给药的奥昔布宁。各种特殊的凝胶载体对本 领域的普通技术人员来说是公知的。特殊凝胶类型的例子，其制造方 法和应用可在例如美国专利号2,909,462；4,340,706；4,652,441；5,516, 808；5,643,584；5,840,338；5,912,009以及6,258,830中找到，将每一 个上述专利以引用方式全文并入本文。
然而，在一些方式中，可通过提供通常为粉末形式的凝胶化试剂， 以及加入赋形剂(例如，在采用亲水性凝胶剂的情况下为水，而在采 用憎水性凝胶化试剂的情况下为矿物油)，从而制备得到凝胶制剂。该 凝胶然后发生膨胀，任选地，该凝胶可被中和。在单独的容器中，可 将奥昔布宁溶解于合适的溶剂中。然后将溶解后的奥昔布宁和凝胶混 合形成最终的凝胶制剂。本领域普通技术人员应该认识到制备含药凝 胶的其它方法。
尽管用在储存装置中的凝胶可具有类似的组分，但在涉及自由形 式的凝胶时其它因素可能是重要的。例如，自由形式的凝胶可能具有 许多优点，例如易于给药，提高病人的顺应性，简化剂量调整，降低 制造成本，以及降低皮肤刺激性。而且，由于多种性能因素，如皮肤 刺激性等原因，有利于实现奥昔布宁给药的某些赋形剂在自由形式凝 胶中的含量高于封留性凝胶如LRS贴片中的含量。
本发明一种更详细的方式中，自由形式的凝胶可包括各种其它的 组分，例如但不限于其它活性剂、赋形剂、溶剂、乳化剂、螯合剂、 表面活性剂、缓和剂、渗透增强剂、防腐剂、抗氧化剂、润滑剂、pH 调节剂、佐剂、染料和香料。这些其它的组分可在与凝胶相混合之前 或之后添加到溶解的奥昔布宁中。此外，为制备得到均匀的凝胶，可 加入分散剂如醇或甘油，或者可通过研磨、机械混合或搅拌，或其组 合方法而分散凝胶化试剂。然而本领域的技术人员应该认识到与本发 明的教导相一致地，可采用将奥昔布宁和其它组分并入到凝胶中的其 它方法和设备。
根据本发明，自由形式的凝胶可为基于水性的或基于非水性的。 在上述任何一种情况下，制剂都应该被设计为按照本文所述的释放速 率和血浆浓度来传递奥昔布宁。在本发明的一种方式中，水性凝胶科 包括水或水/乙醇，以及约1-5wt％的凝胶化试剂。在本发明的另一种 方式中，非水性凝胶可包括硅酮流体如胶体二氧化硅，或矿物油。特 殊凝胶的溶解性取决于其成分和奥昔布宁、渗透增强剂(使用时)，还 有制剂中的任何其它组分之间的相容性。
根据本发明，以自由形式的凝胶使用的奥昔布宁可以是奥昔布宁 的游离碱，酸加成盐如奥昔布宁.HCl，它们的类似物和相关化合物， 异构体，同质多形体，前体药，任选的纯(R)或(S)异构体，外消旋 混合物，及其组合。奥昔布宁可以为微粉化形式或其它粉末化形式。 在本发明的一种方式中，在自由形式的凝胶中，奥昔布宁占约0.1wt％ 到约10wt％。在本发明的一种方式中，奥昔布宁的存在量可在约5到 约20毫克/克之间。
根据本发明，凝胶化试剂可为用作增稠剂的高分子量化合物，以 得到半固体或悬浮液型的制剂。如上所述，凝胶化试剂可为憎水性的， 也可为亲水性的，且通常都是聚合物。正如本领域技术人员所理解的 一样，含有亲水性聚合物的凝胶被称为水凝胶。
适用于本发明的凝胶化试剂的例子可包括合成的聚合物，例如但 不限于聚丙烯酸或聚(1-羧基亚乙基)化合物，羧基聚亚甲基化合物(由 与(聚烷基)蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚相交联的丙烯酸制得(例如 CARBOPOL 940/941/980/981/1342/1382和卡波姆聚合物例如卡波姆 934P/974P))，丙烯酸钠聚合物(例如AQUAKEEP J-550/J-400)，其他 的聚羧酸，丙烯酸烷基酯聚合物(例如PEMULEN)，及其混合物或共 聚物。在本发明的另一方式中，凝胶化试剂是CARBOPOL。在本发明 的一个更详细的方式中，凝胶化试剂是丙烯酸烷基酯聚合物。在本发 明的另一种方式中，凝胶化试剂是CARBOPOL和丙烯酸烷基酯聚合物 的混合物。
在本发明的另一方式中，适合的凝胶化试剂可包括乙烯基聚合物， 例如但不限于羧基乙烯基聚合物、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚 乙烯基甲基醚、聚乙烯基醚、磺酸聚乙烯基酯，及其混合物或共聚物。
在本发明的另一种方式中，合适的凝胶化试剂可包括聚合物，例 如但不限于聚亚乙基化合物(例如聚乙二醇等)、多糖(例如多聚蔗糖、 多聚葡萄糖、多聚乳糖等)及其盐、丙烯酸酯、alkoxybutynin聚合物(例 如聚氧亚乙基-聚氧亚丙基共聚物如BASF，Parsippany，N.J.的 PLURONIC系列)，聚亚乙基的氧化物聚合物，聚醚，明胶琥珀酸酯， 胶体硅酸镁铝(当与其它凝胶化试剂联用时，可用作凝胶稳定剂)，矿 脂，及其共聚物的混合物。
合适的凝胶化试剂还包括纤维素聚合物，例如羟丙基纤维素(如 KLUCEL)、羟丙基甲基纤维素(如KLUCEL HF，METHOCEL)、羟丙 基乙基纤维素、羟丙基丁基纤维素、羟丙基戊基纤维素、羟乙基纤维 素(NATROSOL)、乙基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素， 以及纤维素醋酸酯。在本发明的一种更详细的方式中，凝胶化试剂是 羟丙基纤维素。在本发明的一种更加详细的方式中，凝胶化试剂是羟 乙基纤维素。在本发明的另一种方式中，凝胶化试剂是羟乙基纤维素 和丙烯酸烷基酯聚合物的混合物。在本发明的又一个方式中，凝胶化 试剂是羟丙基纤维素和CARBOPOL的混合物。
在本发明的另外一个更详细的方式中，合适的凝胶化试剂包括右 旋糖苷、瓜尔胶、黄芪胶、黄原胶、藻酸钠、果胶酯酸钠、藻酸钠、 阿拉伯胶、爱尔兰苔藓、梧桐胶、通卡豆胶、槐树豆胶等，而天然高 分子量的化合物尤其包括各种蛋白质，如酪蛋白、百明胶、胶原质、白 蛋白(例如人类血清白蛋白)、球蛋白、纤维蛋白等，以及各种碳水化 合物，如纤维素、糊精、胶质、淀粉、琼脂、甘露聚糖等。这些物质 可是经过化学改性的，如酯化或醚化形式，水解形式(例如藻酸钠，果 胶酯酸钠等)或其盐。
本发明凝胶中的凝胶化试剂含量可随着将要达到的特定结果而变 化。然而，一种方式中，凝胶化试剂的含量可为占凝胶制剂的约0.05- 约10wt％。在一种更加详细的方式中，在引入溶解的奥昔布宁和任何 伴随的组分之前，凝胶化试剂的含量可占凝胶制剂的0.1-5wt％。在又 一种详细的方式中，自由形式的凝胶可含有占凝胶制剂的约0.1-约3 wt％的凝胶化试剂。
在本发明的另一种方式中，自由形式的凝胶中也可采用溶剂或溶 解试剂。当药物不溶于所选择的凝胶化试剂时，这类溶剂可能是必须 的。适用于本发明的溶剂包括但不限于低级醇类、乙醇、异丙醇、苯 甲基醇、丙醇、甲醇、其它C4-C10的一元醇，及其混合物。适用于本 发明另一种方式中的溶剂可包括白蛋白、百明胶、柠檬酸、乙二胺四 乙酸钠、糊精、DMSO(二甲基亚砜)、二甲基甲酰胺、2-吡咯烷酮、 N-(2-羟乙基)吡咯烷酮、N-甲基吡咯烷酮、1-十二烷基氮杂环庚-2-酮 和其它n-取代的烷基-氮杂环烷基-2-酮(氮酮)、亚硫酸氢钠，及其混合 物。
一种方式中，制剂中乙醇的含量可为约60％-约85％w/w。另一种 方式中，制剂中乙醇的含量可为约65％-约80％w/w。另一种方式中， 制剂中乙醇的含量可为约70％-约85％w/w。另一种方式中，制剂中乙 醇的含量可为约70％-约75％w/w。
一种方式中，制剂中水的含量为约1％-约30％w/w。另一种方式 中，制剂中水的含量为约5％-30％w/w。另一种方式中，制剂中水的 含量为约5％到20％w/w。又一种方式中，制剂中水的含量为约10％ -30％w/w。另一种方式中，制剂中水的含量为约10％-约25％w/w。又 一种方式中，制剂中水的含量为约10％-20％w/w。再一种方式中，制 剂中水的含量为约15％-约25％w/w。另一种方式中，制剂中水的含量 为约20％-约25％w/w。
本领域的普通技术人员应该理解可以根据将要达到的特殊结果以 确定所选择溶剂的特定量和类型。然而，一种方式中，制剂中溶剂的 含量为至少25％w/w。另一种方式中，制剂中溶剂的含量为至少30％ w/w。在又一种方式中，制剂中溶剂的含量为至少40％w/w。再一种方 式中，制剂中溶剂的含量为至少70％w/w。
在本发明另一种更详细的方式中，也可加入赋形剂例如但不限于 水、矿物油或硅酮流体，这相当大程度上取决于对凝胶化试剂的选择。 赋形剂可包括占主要部分的凝胶剂，即凝胶剂的含量大于约50％。在 本发明的一种方式中，自由形式的凝胶中所包含的赋形剂含量为约0％- 75％。
在本发明另一更详细的方式中，也可采用乳化剂，尤其是在采用 溶剂时。适用于本发明的乳化剂包括但不限于多元醇和其酯类，例如 二醇类、丙二醇、聚乙二醇、己二醇、乙二醇、甘油、丁二醇、聚乙 二醇单月桂酸酯，以及褐藻酸的丙二醇酯。可采用常规的分散技术而 实现乳化。例如，可采用间歇式摇动，由螺旋桨混合器、涡轮式混合 器等进行混合，胶体磨操作，机械匀化，超声破碎或其它已知的方法。 乳化剂可形成稳定的水包油乳液，而这类乳化剂的典型例子有阴离子 型表面活性剂(例如油酸钠、硬脂酸钠、十二烷基磺酸钠等)，非离子 型表面活性剂(例如聚氧化乙烯山梨聚糖脂肪酸酯(Tween 80和Tween 60，Atlas Powder，U.S.A)，聚氧化乙烯蓖麻油衍生物(HCO-60和 HCO-50，Nikko Chemicals，Japan等)，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇， 羧甲基纤维素，卵磷脂，百明胶，及其混合物。乳化剂的可选择浓度 范围为约0.01％-约20％。应该注意到许多这类的乳化剂也可充当凝胶 化试剂。
在本发明的又一方式中，可采用螯合剂以防止奥昔布宁发生沉降 或分解。适用于本发明的螯合剂可包括但不限于EDTA(乙二胺四乙酸) 的钠盐和钙盐，以及乙二胺四乙酸二钠。
在本发明的又一种方式中，可能会需要表面活性剂，原因是包含 表面活性剂即有利于使活性成分在凝胶制剂内保持为均匀的悬浮液， 同时又提高奥昔布宁的生物可利用度的双重作用。另外，许多表面活 性剂也可充当渗透增强剂。适用于本发明的表面活性剂可包括，但不 限于卵磷脂；山梨聚糖单酯，如山梨聚糖单油酸酯、山梨聚糖单月桂 酸酯、山梨聚糖单棕榈酸酯、山梨聚糖单硬脂酸酯；聚山梨醇酯，例 如从月桂酸、棕榈酸、硬脂酸和油酸制备得到的聚山梨醇酯(聚山梨醇 酯20和聚山梨醇酯40)；聚乙二醇的mononylphenyl ether，例如 monoxynols(例如辛苯聚醇(octoxynol)和壬苯聚醇(nonoxynol))；聚氧 化乙烯单酯，例如聚氧化乙烯单硬脂酸酯、聚氧化乙烯单月桂酸酯、 聚氧化乙烯单油酸酯；二辛基磺基琥珀酸钠；十二烷基硫酸钠；月桂 醇钠；月桂酸钠；聚氧化乙烯-山梨聚糖单月桂酸酯；以及分子量为 2,000-8,000的聚肟；泊洛沙姆(poloxamer)(182，184，231，407)；及其 混合物。
在本发明的另一方式中，适用于本发明的其它溶剂可包括但不限 于乙醇、甘油、三乙醇胺；脲类，例如双咪唑烷基脲(diazolidinyl urea)； 阴离子型、氧离子型、两性型和非离子型表面活性剂，包括二烷基磺 化琥珀酸钠、聚氧化乙烯甘油、聚乙二醇甘油基硬脂酸酯、聚氧化乙 烯硬脂酰醚、丙氧基-ethoxybutynin共聚物、聚氧化乙烯脂肪醇酯、聚 氧化乙烯脂肪酸酯、水杨酸乙二醇酯、克罗他米通(crotamiton)、乙氧 基化的氢化蓖麻油、丁氧基化的氢化蓖麻油、柠檬烯、薄荷油、桉叶 油、溴化十六烷基三甲基胺、杀藻胺，以及Tween(20，40，60，80)。在 本发明的一种方式中，如果自由形式凝胶中可氧化成份的稳定性受到 制剂中离子强度的影响，则可采用非离子型表面活性剂。在本发明的 一种方式中，采用乙醇作为溶剂。在本发明的另一方式中，采用甘油 作为溶剂。在本发明的另一种方式中，自由形式的凝胶中溶剂或表面 活性剂的含量为约30wt％-约100％。自由形式的凝胶中表面活性剂或 溶剂的含量最多为约30％。
在本发明的另一种方式中，自由形式的凝胶可包含最多达约10 wt％的亲脂性或憎水性试剂，当存在由奥昔布宁或其它制剂组分所导致 的刺激时，该亲脂性或憎水性的试剂由于具有减轻刺激性的作用而可 充当缓和剂或抗刺激剂。适用于本发明的缓和剂可包括亲脂性试剂， 例如但不限于，脂肪材料如具有12到20个碳原子的脂肪醇，脂肪酸 部分具有12到20个碳原子的脂肪酸酯，矿脂，矿物油，以及植物油 如大豆油、芝麻油、杏仁油、芦荟凝胶、甘油和尿囊素。本发明另一 种方式中采用的甘油用作缓和剂。
在本发明的又一种方式中，可采用其它的添加剂以调节自由形式 凝胶的pH值，从而减少刺激性和/或帮助获得适当的凝胶。可能需要 的pH添加剂例如有但不限于有机胺(例如甲基胺、乙基胺、二/三烷基 胺、烷醇基胺、二烷醇基胺、三乙醇胺)、碳酸、乙酸、草酸、柠檬酸、 酒石酸、琥珀酸或磷酸，其钠或钾盐，盐酸，氢氧化钠，氢氧化铵， 及其混合物。
令人惊奇的是，已经发现在一些实施方式中，与其它pH值相比， 制剂的特定pH值可提高奥昔布宁透过皮肤的渗透率。结果是，本发明 的一种方式中，与在其它pH值下达到的渗透率相比，奥昔布宁凝胶制 剂的pH值提高了奥昔布宁透过皮肤的渗透率。在一些方式中，有助于 提高渗透率的pH值可能比对提高渗透性无帮助作用的pH值更高。在 一些方式中，pH值可以是碱性pH值。在另一些方式中，pH值可能是 中性pH值。在另一种方式中，pH值可能与所采用的特定类型奥昔布 宁的内在pH值相等。另一种方式中，特定pH值的渗透增强作用超出 由不同pH值获得的渗透增强作用的程度为至少20％。提高奥昔布宁渗 透性的特定制剂和pH值的例子如下所述。
在本发明有一种详细的方式中，可加入渗透增强剂以增加活性剂， 例如奥昔布宁透过表皮层的渗透率。有利的渗透增强剂允许在合力大 小的皮肤面积上达到预期的传递速率，是无毒的，具有最小的刺激性， 并且也不会导致过敏作用。尽管上述的一些溶剂也充当渗透增强剂， 但其它适用于本发明的渗透增强剂包括但不限于甘油三醋酸酯(三醋 精，triacetin)、单甘油酯、单油酸甘油脂、单月桂酸甘油酯、单亚油酸 甘油酯、二油酸甘油酯、三油酸甘油酯；脂肪酸酯，例如豆蔻酸异丙 基酯、己二酸异丙基酯、甲基丙酸酯和油酸乙酯；硫代甘油、硫代甘 油钙、月桂酸、豆蔻酸、硬脂酸、油酸、油醇、亚油酸、棕榈酸、戊 酸、异丙醇、异丁醇，及其混合物。在本发明的一种方式中，增强剂 是单甘油酯。在本发明的另一方式中，增强剂是甘油三醋酸酯。
适用于本发明的其它增强剂可包括但不限于N-甲基吡咯烷酮；N- 十二烷基吡咯烷酮；羟丙基-β-环糊精；月桂醇；亚砜如二甲基亚砜和 十二烷基甲基亚砜；醚类如二乙二醇单乙基醚和二乙二醇但甲基醚； 1-取代的氮杂环庚-2-酮，尤其是1-n-十二烷基氮杂环庚-2-酮(如参见美 国专利3,989,816，4,316,893，4,405,616和4,557,934，将上述每个专利 以引用方式并入本文)；醇类如乙醇、丙醇、辛醇、苯甲醇等；酰胺和 其它含氮化合物，如脲、二甲基乙酰胺、二甲基加酰胺、2-吡咯烷酮、 1-甲基-2-吡咯烷酮、乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺；萜烯；烷基酮； 有机酸，例如水杨酸和水杨酸酯、柠檬酸和琥珀酸；某些肽，例如N- 末端上具有Pro-Leu，紧接着具有保护基团的肽(例如参见美国专利号 5,534,496，将该文献以引用方式并入本文)；及其混合物。
另一种方式中，本发明自由形式的凝胶还可包括约0.05-2wt％的 防腐剂，杀微生物剂或杀菌剂，其用于防止细菌或微生物在凝胶制剂 生长。适用于本发明的防腐剂可包括但不限于山梨糖醇、对氧化苯甲 酸酯(例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯 等)、苯甲醇、氯丁醇、β羟基甲苯，以及硫柳汞。然而，本领域的技 术人员将易于辨别出其它常用于组合物中的常规防腐剂。在本发明的 一种方式中，防腐剂是对羟基苯甲酸酯类。
在本发明的又一方式中，自由形式的凝胶可包括抗氧化剂。适用 于本发明的抗氧化剂可包括但不限于dl-α-生育酚，d-α-生育酚，d-α- 生育酚乙酸酯，d-α-生育酚酸琥珀酸酯，dl-α-生育酚酸琥珀酸酯，dl-α- 生育酚棕榈酸酯，丁基化的羟基苯甲醚(BHA)，丁基化的羟基甲苯 (BHT)，丁基化的羟基苯醌，五倍子酸乙酯，五倍子酸丙酯，五倍子酸 月桂酯，cephalm，抗坏血酸，维生素C，油酸维生素C酯，棕榈酸维 生素C酯，抗坏血酸钠，抗坏血酸钙，羟基香豆素，丙基羟基苯甲酸 酯，三羟基丙基苯基酮，二甲基苯酚，diterlbulylphenol，维生素E，卵 磷脂和乙醇胺。在本发明的一种方式中，抗氧化剂含有生育酚基团。 本领域的技术人员将易于识别出适用于奥昔布宁的其它抗氧化剂。
在本发明的另一种方式中，可向本发明自由形式的凝胶中加入润 滑剂。典型的润滑剂包括硬脂酸镁，硬脂酸钙，硬脂酸锌，油酸镁， 棕榈酸镁，棕榈酸钙，辛二酸钠，月桂酸钾，玉米淀粉，马铃薯淀粉， 膨润土，柑桔果肉，硬脂酸，油酸，以及棕榈酸。
在本发明的另一种方式中，也采用脂质体、胶束或微球体制备本 文中所述的局部制剂。脂质体是具有包括液体双层的液体壁的微观载 体。适用于本发明的脂质体制剂包括阳离子型、阴离子型和中性的制 剂。适用于本发明的阳离子型脂质体可包括但不限于N[1-2，3-二油烯基 氧基)丙基]-N，N，N-三乙基胺(LIPOFECTIN)。类似地，可采用阴离子型 和中性的脂质体，如磷脂酰胆碱、胆固醇、磷脂酰乙醇胺、二油酰基 磷脂酰胆碱，以及二油酰基磷脂酰乙醇胺。采用这些材料和其它材料 制备脂质体的方法是本领域公知的。
本发明的另一详细实施方式中，可根据本发明的方法制备传递奥 昔布宁的胶束。适用于本发明的胶束中，表面活性剂分子排列为极性 端形成外部球形壳，而憎水性的烃基链端朝向球体的中心，形成核。 本发明中所采用的有利于形成胶束的表面活性剂包括但不限于月桂酸 钾，辛基磺酸钠，癸基磺酸钠，十二烷基磺酸钠，月桂基硫酸钠，多 库酯钠，溴化三甲基胺，溴化十二烷基三甲基胺，溴化十四烷基三甲 基胺，氯化十四烷基三甲基胺，氯化十二烷基胺，聚羟氧基8十二烷 基醚，聚羟氧基12十二烷基醚，壬苯聚醇10和壬苯聚醇30。制备胶 束的其它方法是本领域技术人员已知的。
在本发明的又一种方式中，本发明可包括微球体，该微球体用于 封装奥昔布宁和/或其他组分。可从脂质，如磷脂制备微球体，而微球 体的制备方法通常是本领域中公知的。
最后，在本发明的又一种方式中，本发明的载体和制剂中可任选 包括通常用作化妆品佐剂或其它添加剂如染料，香料，抚慰剂，遮光 剂等本发明技术人员易于识别的少量其它组分。此外，应该预料到本 发明自由形式的凝胶还可包含其它组分，如维生素，脂质，激素，其 它活性剂，或抗炎剂如皮质类固醇。
本领域技术人员应该理解的是，每一特定类型的制剂可能会影响 传递速率，也可能会体现出设计此类制剂组合物中的其它变量。添加 各种组分也可能会影响最终局部制剂的药物传递性质。传递系统中每 种组分的作用可以是独立的，也可以是与其它组分的联合作用，并可 能会随着所采用的局部制剂而发生变化。
在所列出的各种组分中，其作用可能不只一个。因此，尽管在一 个类别中列出，但某些化合物所具有的已知有益性质可能是其它类别 的特征。以上提供类别划分仅用于增加组织性，而并不意味着对所列 化合物的确定分类。然而，这些一般性的参数并不限制实现预期血浆 水平的方式。通过利用产生不同参数的制剂，可采用不同的传递方法， 速率以及用量来达到预期的血浆水平。
实施例
本发明提供了以下非口服传递制剂的实施例，该非口服传递制剂 具有各种含奥昔布宁的组合物，以促进更清楚地理解本发明可能的组 合，但这些实施例并非用于限制本发明。本发明采用的材料从以下列 出的特殊来源获得。当材料可以从各种商业来源获得的情况下，不提 供具体来源。奥昔布宁游离碱由Ceres Chemical Co.Inc.，White Plains， NY(USA)购得。奥昔布宁的对映体，即(R)-和(S)-异构体购自Sepracor. Sepracor，Marlborough，MA(USA)。
实施例1：制备奥昔布宁粘性基体贴片
用于上述临床研究中的非口服奥昔布宁传递装置是13和/或39cm2 的经皮粘性基体贴片。制备经皮粘性基体贴片的一般方法在美国专利 号5,227,169和5,212,199中有所描述，将该文献以引用方式全文并入 本文。根据这种一般方法，本发明奥昔布宁贴片的制备如下：
将奥昔布宁游离碱，甘油三醋酸酯(Eastman Chemical Co.， Kingsport，NY)和87-2888丙烯酰类共聚物粘合剂(National Starch and Chemical Co.，Bridgewater，NJ)混合到均匀的溶剂中，并采用两区涂 覆/干燥/层压烘箱(Kraemer Koating，Lakewood，NJ)以6mg/cm2(干重) 的涂覆率涂覆到硅酮处理的聚酯纺粘衬底上(Rexham Release，Chicago， IL)，得到最终的奥昔布宁粘性基体，其含有分别为15.4％，9.0％和 75.6wt％的奥昔布宁，三醋精和丙烯酰类共聚物粘合剂。随后将厚度为 15微米的聚乙烯衬背膜(3M，St.Paul，MN)层压到含有奥昔布宁的粘 性基体的干燥粘性表面上，冲切最终的层结构，得到尺寸范围为13cm2 -39cm2的贴片。
实施例2：制备奥昔布宁的可生物降解微球体贮存注射剂
根据本发明的方法，可采用能实现持续释放贮存注射的可生物降 解微球体以传递奥昔布宁。微球体由下列方法制备：
将分子量为12,000的聚-d，l乳酸(″PLA″，Birmingham Polymers， Birmingham，Alabama)溶解于二氯甲烷中，至最终浓度为20wt％。将 奥昔布宁游离碱溶解于PLA溶液中，至最终浓度为4wt％。向配备有 水套的反应容器(将温度控制在5℃)中装入含有0.1％ Tween 80的去 离子水，该反应器上装配有真镗搅拌器，配置有特氟纶涡轮叶轮(Teflon turbine impeller)。
将奥昔布宁/PLA/二氯甲烷溶液滴加到反应容器中，在搅拌下使有 机聚合物相在水相内分散为微细颗粒。过滤得到的悬浮液，用去离子 水洗涤一次，最后在旋转蒸发器上干燥，除去二氯甲烷。得到的微球 体可通过经皮或皮下注射，从而使奥昔布宁发生延长的系统性释放。
实施例3：制备局部奥昔布宁制剂
根据本发明的方法，可采用局部应用的含奥昔布宁凝胶而传递奥 昔布宁。制备局部凝胶的一般方法是本领域公知的。根据这种一般性 方法，含奥昔布宁的局部凝胶制备如下：
采用水(USP，美国药典)，甘油(USP)和单油酸甘油酯(Eastman Chemical，Kingsport NY)稀释95％乙醇(USP)，得到乙醇/水/甘油/单油 酸甘油酯的百分比为35/59/5/1的最终溶液。然后将奥昔布宁游离碱溶 解在上述的溶液中，至浓度为10mg/g(毫克/克)。然后采用1％的羟 丙基纤维素(Aqualon，Wilmington，Delaware)对得到的溶液进行凝胶化 处理，得到最终的奥昔布宁凝胶。将1-2g上述凝胶局部应用到胸部、 躯干和/或手臂的约200cm2的体表面积上，从而进行奥昔布宁的局部 给药。
实施例4：与采用外消旋奥昔布宁进行经皮给药相比，采用外消旋奥昔 布宁进行口服给药之后，为确定奥昔布宁、N-去乙基奥昔布宁和其各 自的(R)和(S)异构体的药代动力学而进行的临床研究：
在采用交换方式中，在16个健康自愿者中进行临床研究，比较 奥昔布宁、N-去乙基奥昔布宁和其各自的(R)和(S)异构体的可比较血浆 浓度和药代动力学。
从当地居民中征集健康的志愿者，包括年龄从19到45岁范围中 的男性和女性。对所有的志愿者进行研究前检查之后，确定处于健康 状态下，每个志愿者对象参加2个研究期，在研究期间采用测试药物 进行给药，所述的测试药物为施用为期4天的经皮奥昔布宁系统，或 者是单独的5mg口服的奥昔布宁即时释放剂。在整个研究期间定期采 集血液样品。按照标准方法从样品中收集血浆。通过有效的质谱方法 与分离各个组分的液相色谱相联合，测定血浆样品中(R)和(S)奥昔布 宁，以及(R)和(S)N-去乙基奥昔布宁的含量。Perkin Elmer高性能液 相色谱泵和Chrom Tech AGP 150.2色谱柱相联用。质谱测定仪是API 300，是采用电喷离子化方法在MRM扫描模式下进行操作的。采用标 准溶液证实分析物定量的线性响应，采用与研究样品联用进行分析的 质量控制样品来控制试验的性能。线性度的范围为0.5-75ng/ml，对 所有分析物的线性相关系数大于0.99。
图1，2，3，6和7示出了这些数据的图示。图1中示出了采用5mg 即时释放口服剂量的盐酸奥昔布宁(oxybutynin hydrochloride)片剂 (DitropanAlza Corporation)进行给药之后，奥昔布宁和N-去乙基奥昔 布宁的血浆浓度。这些片剂可商购，可从多个普通的制造商得到。纵 轴上示出了血浆浓度，横轴上示出了时间。可以看到，N-去乙基奥昔 布宁的血浆浓度显著高于奥昔布宁的血浆浓度。N-去乙基奥昔布宁与 奥昔布宁的平均AUC比为约10∶1。
图3示出了施用经皮系统的期间和之后，奥昔布宁和N-去乙基奥 昔布宁的血浆浓度曲线。可以看到，在粘性基体贴片实施方式中，N- 去乙基奥昔布宁的血浆浓度较好地落入了本发明所述的参数范围内。 N-去乙基奥昔布宁与奥昔布宁的平均AUC比为约0.9∶1，N-去乙基奥 昔布宁的平均血浆浓度小于约2.5ng/ml。
图6和7示出了上述临床试验期间测得的奥昔布宁和N-去乙基奥 昔布宁各个异构体的血浆浓度。如图6所示，奥昔布宁的口服给药导 致了(R)-N-去乙基奥昔布宁的浓度较高。这一活性代谢物部分存在的浓 度最高，是(R)和(S)奥昔布宁浓度的几倍。(R)-N-去乙基奥昔布宁与 (R)-奥昔布宁的平均AUC比为约17∶1，而(R)-N-去乙基奥昔布宁与 (S)-N-去乙基奥昔布宁的平均AUC比为约1.5∶1。
施用经皮奥昔布宁系统之后，活性部分(R)-N-去乙基奥昔布宁与 (R)-奥昔布宁的平均AUC比为约1∶1，这比以下的口服给药方式低得 多。此外，(R)-N-去乙基奥昔布宁与(S)-N-去乙基奥昔布宁的平均AUC 比为约0.9∶1，这与从活性(R)-奥昔布宁到(R)-N-去乙基奥昔布宁的代谢 性首过转化明显更低相一致。(R)-奥昔布宁与(S)-奥昔布宁的平均 AUC比为约0.7∶1，这与下列口服给药中所表现出的相类似。
根据从未使用的经皮系统中的奥昔布宁含量减去施用4天之后经 皮系统中的奥昔布宁残留量，从而测定奥昔布宁经皮传递期间所传递 的奥昔布宁的较低总量。4天内所传递的量约为12mg，或者说平均值 为约3mg/天。研究中奥昔布宁的口服剂量是5mg，在采用该产品进行 治疗期间，该剂量可以每12小时给药一次，或者每天给药两次。这样 做可以比较每12小时以5mg剂量进行的口服治疗与每12小时以约1.5 mg剂量进行的经皮治疗。
总之，经皮的、非口服奥昔布宁给药的药代动力学阐释了本发明 以下的方式，该方式中奥昔布宁以持续较低速率给药，奥昔布宁给药 的剂量和总量较低。
实施例5：对传统的口服片剂和本发明的经皮制剂的疗效以及抗胆碱能 副作用，主要是口干的发生率和严重性的比较分析
对72位患有膀胱活动过度症的病人进行疗效和副作用发生率临床 研究。这些病人由独立的临床调查者从美国的各个区域征集。采用即 时释放口服剂量的制剂中的盐酸奥昔布宁对大约一半的病人进行给 药。采用13cm2含奥昔布宁的经皮粘性基体贴片向其余的病人给药， 每位采用1片或多片。在每个治疗组中，采用匹配的安慰剂形式进行 相伴性给药，从而盲式药物治疗。在采用活性口服治疗的情况下，给 病人施用安慰剂经皮系统(含有活性系统中除活性药物奥昔布宁之外的 所有成分)。在类似形式下，活性经皮治疗组接收相配的口服制剂(其 中不含活性奥昔布宁成分)。
在该研究中，病人包括男性和女性，大多数是年龄为63-64岁的女 性。所有的病人都有与膀胱活动过度症有关的尿失禁病史，在未采用 治疗失禁的药物的清除期间，平局每天出现至少3次失禁事件。
从多日的病人每日尿失禁记录得到每日的失禁事件平均数，从而 确定疗效。数据见图4中的图示。
可以看到，由本发明的非口服方法治疗的个体所发生的失禁事件 与用口服制剂治疗的病人基本相等。这清楚地表明了本发明的方法和 组合物所提供的对尿失禁和膀胱过度活动症的疗效可与传统口服制剂 如5mg口服奥昔布宁片剂的疗效相媲美。此外，也可比较如上述给药 的传统奥昔布宁口服片剂与经皮制剂两者的不利药品感受的发生率和/ 或严重性。采用抗胆碱能的不利感受，例如口干的发生率和严重性作 为与任何一种制剂的给药有关的不利感受指标，表示抗胆碱能的副作 用。要求临床研究参与者按照标准问卷报告这一感受。从问卷获得的 数据在图5中以图示方式给出。纵轴表示报告口干的病人的百分比， 而横轴表示口干严重性。
可以看出，在接受口服剂型的病人中，仅有6％报告无口干影响。 相反，这些病人中有94％报告有一些口干感受。与此相反的是，在接 受13cm2经皮粘性基体贴片的病人中，有62％报告无口干感受。因此， 这些病人中仅有38％报道有一些口干的感受。因此，这些临床数据表 明本发明方法的基体贴片实施方式提供了对膀胱活动过度症的治疗方 法，所达到的疗效与口服剂型的疗效基本相等，同时显著降低了与奥 昔布宁给药有关的不利感受的发生率和/或严重性。
图7示出了(R)-N-去乙基奥昔布宁的浓度低于(S)-N-去乙基奥昔 布宁的浓度，而且，(R)-奥昔布宁的浓度缓慢增长，在整个应用贴片的 期间内大概保持恒定的水平。(R)-N-去乙基奥昔布宁的血浆浓度降低似 乎促进了使不利药品感受例如口干的发生率和严重性降至最低，而(R)- 奥昔布宁的血浆浓度保持了治疗疗效，如图4和5所示。
实施例6：制备自由形式的奥昔布宁凝胶
根据本发明的方法，可采用局部施用的含奥昔布宁凝胶来传递奥 昔布宁。本发明的凝胶以及实施例9-11的凝胶的制备方法如下：在6 盎斯广口瓶中称重甘油(或其它润湿剂或缓和剂)，然后加入预先称重 的水，然后加入预先称重的2N氢氧化钠(对奥昔布宁氯化物凝胶)或 2N盐酸盐(对奥昔布宁游离碱凝胶)。氢氧化钠或氯化钠的含量占总的 自由形式凝胶的0wt％到大约5wt％。向6盎斯广口瓶中加入预先称重 的乙醇。在分析天平的称量盘中对活性成分(奥昔布宁游离碱或奥昔布 宁氯化物)进行称重，然后将其转移到6盎斯广口瓶中。在拧紧盖子后， 用手摇动广口瓶，直到活性成分和甘油都完全溶解。然后，将预先称 重的凝胶化试剂转移到广口瓶中。(通过使凝胶化试剂缓慢分散于广口 瓶内而避免凝胶化试剂发生凝聚)。通过与转移容器的重量差值确定每 一组分的实际重量。加上广口瓶的盖子，用parafilm(石蜡膜)包装， 放在腕式摇动器(wrist shaker)上过夜，使凝胶化试剂完全溶解。
实施例7：对自由形式的奥昔布宁凝胶的实验方法和体外流动研究
采用从皮肤库得到的全厚度皮肤样品(约500μm)进行实施例9- 11的体外皮肤流动研究。在进行实验前将全厚度的皮肤样品储存在 -5℃下。在可能获得的情况下，记录每个捐献人的性别、年龄、性别和 解剖学位置信息。
用于将凝胶薄膜涂敷到皮肤表面的方法可从Chia-Ming Chiang 等，Bioavailability assessment of topical delivery systems：in vitro delivery of minoxidilfrom prototypical semi-solidformulations，IJP， 49：109-114，1989中获得，将该文献以引用方式并入本文。将一片皮肤 的角质层一侧附到粘合剂涂覆的金属垫片的一侧，其中该金属垫片的 中心处具有0.64cm2的圆孔切口。将该金属垫片-隔膜装置放到平板玻 璃表面的顶部上，将约15μL的制剂分配到中心孔中。采用显微镜载 玻片使凝胶分布在皮肤表面上，在0.64cm2的扩散表面积上载有的剂 量为约7μL。每cm2扩散表面积上的涂敷剂量为约11μL的凝胶，这是 局部应用的典型剂量。
将载有凝胶的金属垫片-隔膜装置夹在改性Franz扩散细胞的供给 容器和接收容器之间，使皮肤一侧面向接收器中的溶液。接收容器中 装有0.02％(w/v)的NaN3以保持接收器一侧在实验期间保持渗透状态。 供给容器是非封留性的，对大气是开放的。将细胞置于采用循环水加 热的水浴中，使皮肤表面温度保持在(32±1)℃。
在预定的时间点，收集接收器容器内的全部物质以确定药物的含 量，接收容器中再次装入新鲜的接收器介质，小心地除去皮肤/溶液界 面处的气泡。采用高性能液相色谱(HPLC)分析每一样品。24小时的时 间段内，任何时间点t时(Qt，μg/cm2)
单位面积上渗透的药物累计量如下：

其中，Cn是相应的时间处接收器样品中的药物浓度(μg/mL)，V是接收 器腔中流体的体积，而A是细胞的扩散面积(0.64cm2)。
为进行实施例8-10的研究，通常从每个系统的每一皮肤中获得四 个重复抽样。对从每一皮肤得到的给定系统的值进行比较，表明由于 皮肤中的差异导致了渗透性有所不同。
实施例8：局部的奥昔布宁游离碱凝胶
实施例8.1
表1 制剂a Et/E/G/D(％w/w)   Qt(t＝24小时)   (μg/cm2/t)b   Jss   (μg/cm2/t)b 84.5/10/1.5/4 80.5/10/1.5/8   29.20±20.24   44.92±18.12   1.22±0.84   1.87±0.76
aEt＝乙醇；E＝增强剂＝甘油三醋酸酯；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D＝药物＝奥昔布宁游离碱
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
这些结果表明可通过增加制剂中奥昔布宁的浓度而增加渗透率。 因此，在本发明的一个方式中，提供了通过增加制剂中奥昔布宁的浓 度而增加奥昔布宁流动速率的方法。
实施例8.2
表2   制剂a   Et/W/G/D(％w/w)   Qt(t＝24小时)   (μg/cm2/t)b     Jss     (μg/cm2/t)b   94.5/0/1.5/4.0   74.5/20/1.5/4.0   14.04±9.47   19.11±17.40     0.56±0.39     0.80±0.73
aEt＝乙醇；W＝水；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D＝药物＝奥昔布宁游离碱
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
这些结果表明可采用水性或非水性凝胶制剂而获得可接受的流动 速率。这些结果还表明可采用水性制剂来增加流动速率。因此，本发 明提供了通过增加奥昔布宁凝胶制剂中水的浓度而增加奥昔布宁流动 速率的方法。一种方式中，水的含量可增加约1％w/w-约30％w/w。 另一种方式中，水的含量可增加约5％w/w-约25％w/w。又一种方式 中，水的含量可增加约10％w/w-约20％w/w。在一种详细的方式中， 制剂中的奥昔布宁可为奥昔布宁游离碱。
实施例8.3
表3 增强剂   制剂a   Et/W/G/D(％w/w)   Qt(t＝24小时)   (μg/cm2/t)b   Jss   (μg/cm2/t)b 无 三醋精   94.5/0/1.5/4.0   84.5/10.0/1.5/4.0   10.02±5.38   14.73±6.70   0.42±0.22   0.61±0.28
aEt＝乙醇；E＝增强剂；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D＝药物＝奥昔布宁游离碱
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
实施例8.4
表4 凝胶的pH  制剂a  Et/W/G/D(％w/w)  Qt(t＝24小时)  (μg/cm2/t)b   Jss   (μg/cm2/t)b 6.0 9.8  74.5/20.0/1.5/4.0  74.5/20.0/1.5/4.0  15.90±4.16  20.71±3.42   0.66±0.17   0.86±0.14
aEt＝乙醇；W＝水；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D＝药物＝奥昔布宁游离碱
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
因此，本发明提供了通过增加制剂的pH值而增加奥昔布宁流动 速率的方法。一种方式中，制剂是凝胶制剂，pH值从约4增加到约11。 另一种方式中，pH值从约5增加到约11。在又一种方式中，pH值从 约6增加到约11。另一种方式中，pH值从约4增加到约10。在另一 种方式中，pH值从约5增加到约10。另一种方式中，pH值从约6增 加到约10。又一种方式中，pH值从约6增加到约9。一种方式中， 凝胶制剂的pH值为约6。在另一种方式中，凝胶制剂的pH值为约9。 应该理解奥昔布宁可以为游离碱形式，或者可为它的药学上可接受的 盐(例如HCl)或其混合物。另一种方式中，奥昔布宁可以为其R-或S- 异构体或其药学上可接受的盐或其混合物。而且，可采用渗透增强剂 或不采用渗透增强剂制备制剂。因此，一种方式中，提供了通过增加 基本不含渗透增强剂的局部制剂的pH值，从而增加奥昔布宁流动速率 的方法。另一种方式中，提供了通过增加含有渗透增强剂的局部制剂 的pH值，从而增加奥昔布宁流动速率的方法。当制剂中含有渗透增强 剂时，制剂流动速率高于pH增加但基本不含增强剂的制剂。在一些方 式中，流动速率可增加至少两倍。在其它的一些方式中，流动速率可 增加2-3倍，或甚至更高。在另外一些方式中，流动速率可增加5-10 倍。应该理解当采用其它局部制剂如乳膏、油膏、洗液、泡沫剂、喷 剂和经皮贴片时，由于pH值的增加也可导致流动速率增加，因此不必 限于凝胶制剂。
实施例8.5
表5 制剂a Et/W/Gl/G/D(％w/w) Qt(t＝24小时) (μg/cm2/t)b     Jss     (μg/cm2/t)b  74.0/20.0/0/2.0/4.0  74.0/19.0/1.0/2.0/4.0   13.26±10.89   11.68±10.63     0.55±0.45     0.49±0.44
aEt＝乙醇；W＝水；Gl＝甘油：G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D＝药物＝奥昔布宁游离碱
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
这些结果表明在凝胶中加入甘油未对奥昔布宁的皮肤渗透性造成 可测量的影响。因此，为减轻皮肤刺激性或其它本领域的普通技术人 员将认识到的原因，可将甘油用于局部的奥昔布宁凝胶制剂中。
实施例9：局部的奥昔布宁氯化物凝胶
实施例9.1
表6 制剂a Et/W/G/D(％w/w) Qt(t＝24小时) (μg/cm2/t)b     Jss     (μg/cm2/t)b  74.5/20.0/1.5/4.0  69.5/25.0/1.5/4.0  64.5/30.0/1.5/4.0   11.37±3.94   10.99±4.30   10.02±4.49     0.47±0.16     0.45±0.14     0.42±0.19
aEt＝乙醇；W＝水；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D＝药物＝奥昔布宁氯化物
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
这些结果表明可采用含有约65％-约75％乙醇的制剂有效传递局 部制剂中的奥昔布宁。
实施例9.2
表7 凝胶的pH 制剂a Et/W/G/D/N(％w/w) Qt(t＝24小时) (μg/cm2/t)b     Jss     (μg/cm2/t)b  6.0  4.6  74.5/18.7/1.5/4.0/1.3  74.5/20.0/1.5/4.0/0  18.94±5.12  13.18±4.96   0.79±0.21   0.55±0.21
aEt＝乙醇；W＝水；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D＝药物＝奥昔布宁氯化物(n＝4个皮肤捐赠人)N＝2N NaOH
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
这些结果表明pH 6.0的奥昔布宁氯化物(oxybutynin chloride)凝 胶所导致的奥昔布宁皮肤渗透性高于pH 4.6的奥昔布宁氯化物凝胶。 然而，应该认识到pH低至约4.6的制剂，在某些方式下，提供了预期 的流动速率。
实施例9.3
表8 制剂a Et/W/Gl/G/D(％w/w) Qt(t＝24小时) (μg/cm2/t)b     Jss     (μg/cm2/t)b  73.2/20.4/0/2.0/4.4   10.66±6.17     0.44±0.26  73.2/19.4/1.0/2.0/4.4   10.86±8.62     0.45±0.36
aEt＝乙醇；W＝水；Gl＝甘油；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D：药物＝奥昔布宁氯化物
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
这些结果表明在奥昔布宁氯化物凝胶中存在甘油不会影响奥昔布 宁透过皮肤的皮肤渗透性。因此，为减轻皮肤刺激性或其它本领域技 术人员将认识到的目的而在奥昔布宁氯化物凝胶中加入甘油。
实施例10：局部的奥昔布宁氯化物和游离碱凝胶
表9 增强剂   制剂a   Et/W/G/D1/D2(％w/w)  Qt(t＝24小时)  (μg/cm2/t)b     Jss     (μg/cm2/t)b 无   63.8/30.0/0/2.0/2.2/2.0  25.85±15.35     1.08±0.64 三醋精   58.8/30.0/5.0/2.0/2.2/2.0  41.77±27.99     1.74±1.17
aEt＝乙醇；E＝增强剂；W＝水；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；
D1＝药物＝奥昔布宁氯化物；D2＝奥昔布宁游离碱
b平均值±SD(n＝4个皮肤捐赠人)
这些结果表明：与未采用三醋精的凝胶制剂相比，三醋精明显提 高了总奥昔布宁的皮肤流动性。
实施例11：局部的奥昔布宁氯化物凝胶和流动-时间数据
制备自由形式的奥昔布宁氯化物凝胶，其中的组分为73.3wt％乙 醇，18.0wt％水，1.0wt％甘油，2.0wt％ KLUCELHF，4.4wt％奥昔 布宁氯化物，以及1.3wt％氢氧化钠。得到的凝胶的pH值为6。在48 小时的时间段内测试9个皮肤样品的流动性，结果如表10所示。取样 后的24小时之后，除去皮肤顶部的剩余凝胶，然后取得30小时的样 品(除去凝胶之后的6小时)和48小时样品(除去凝胶之后的24小时)。
表10   样品     平均累积渗透率   时间     6小时   24小时   30小时   48小时   1     1.42±2.01   4.57±1.53   8.20±0.40   11.95±2.14   2     9.41±0.58   19.61±6.71   31.82±7.37   46.43±8.72   3     4.59±2.68   14.12±7.17   16.15±9.81   24.77±11.83   4     3.90±1.23   9.40±4.27   14.84±6.70   26.47±14.34   5     3.90±3.28   16.17±6.05   26.43±7.89   38.35±9.74   6     1.44±0.43   3.70±0.67   5.66±1.06   8.75±1.60   7     3.03±0.45   7.39±1.89   10.03±2.66   15.17±4.25   8     6.62±1.51   17.23±3.24   27.27±8 93   42.98±18.02   9     4.20±0.95   13.73±3.06   20.49±4.52   32.19±5.50   平均值     4.29±2.50   11.77±5.72   17.84±9.20   27.45±13.65
一种方式中，提供了用于局部应用的奥昔布宁凝胶制剂，在涂敷 后的6小时时，该制剂传递奥昔布宁的平均流动速率为约1.5-约7.0 μg/cm2/hr。另一种方式中，提供了用于局部应用的奥昔布宁凝胶制剂， 在涂敷后的24小时时，该制剂传递奥昔布宁的平均流动速率为约6- 约17μg/cm2/hr。又一种方式中，提供了用于局部应用的奥昔布宁凝胶 制剂，在涂敷后的30小时时，该制剂传递奥昔布宁的平均流动速率为 约8-约27μg/cm2/hr。在另一种方式中，提供了用于局部应用的奥昔 布宁凝胶制剂，在涂敷后的48小时时，该制剂传递奥昔布宁的平均流 动速率为约14到约40μg/cm2/hr。另一种方式中，提供了用于局部应 用的奥昔布宁凝胶制剂，在涂敷后的6小时时，该制剂传递奥昔布宁 的平均流动速率为约1.5-约7.0μg/cm2/hr；在涂敷后的24小时时的平 均流动速率为约6-约17μg/cm2/hr；在涂敷后的30小时时的平均流动 速率为约8-约27μg/cm2/hr；在涂敷后的48小时时的平均流动速率为 约14-约40μg/cm2/hr。奥昔布宁可为游离碱或药学上可接受的盐(例 如HCl)或其混合物。在另一种方式中，奥昔布宁可为R-异构体或S- 异构体，或它们的药学上可接受的盐，或其混合物。当奥昔布宁是相 应的异构体时，在某些方式中，该异构体的平均流动速率可为：涂敷 后6小时时为约0.7-约5.0μg/cm2/hr；涂敷后24小时时为约3-约9 μg/cm2/hr；涂敷后30小时时为约4-约14g/cm2/hr；涂敷后48小时 时为约6-约25μg/cm2/hr。
上述的流动速率将治疗量的奥昔布宁传递给有此需要的患者。这 类质量的血浆水平可为约1.4ng/ml至约8ng/ml，在某些方式中，血浆 浓度可为约1.42ng/ml-约4ng/ml。另一种方式中，血浆浓度可为约 1.8ng/ml到约4ng/ml。又一种方式中，血浆浓度可为约1.8ng/ml-约 3ng/ml。
实施例12：局部的奥昔布宁乳膏
可制造每个相的组成如表11所示的自由形式奥昔布宁乳膏。制剂 中奥昔布宁的含量为约1至约10％w/w。
表11 相     组分     ％w/w 水相     水     20-60 油相     丙二醇     硬脂酰乳酸钠     20％ PLURONIC 270     对羟基苯甲酸甲酯     油酸     鲸腊醇     单油酸甘油酯     乙酸月桂醇酯     对羟基苯甲酸丙酯  1-10  0-5  0-50  0-0.5  0-20  0-20  0-10  0-10  0-0.5
实施例13：局部的奥昔布宁洗液
可制造每个相的组成如表12所示的自由形式奥昔布宁洗液。制剂 中奥昔布宁的含量为约1-约10％w/w。
表12 相     组分     ％w/w 水相     水     20-90 油相     氯化硬脂酰二胺     氯化钠     对羟基苯甲酸甲酯     甘油     矿脂     棕榈酸异丙基酯     鲸腊醇     二甲基硅氧烷     对羟基苯甲酸丙酯     1-5     0-5     0-0.5     0-20     0-10     0-5     0-10     0-5     0-0.5
实旅例14：局部的奥昔布宁乳化凝胶
可制造每个相的组成如表13所示的自由形式奥昔布宁凝胶。制剂 中奥昔布宁的含量为约1至约10％w/w。采用乳化的凝胶载体可制各 自由形式的奥昔布宁凝胶。奥昔布宁在制剂中的含量为约1到约20％ w/w。在前述的基础上，预期在这些制剂的某些方式中可观察到如其它 可实施的实施例中所示出的pH值的影响。而且，预期乳化的凝胶基体 将类似于上述实施例中一样，传递游离碱形式、药学上可接受的盐或 其混合物形式的奥昔布宁，且传递速率相等。此外，应该理解奥昔布 宁可为R-或S-异构体形式。
表13 相     组分     ％w/w 水     水     30-90 油     丙二醇     硬脂酰乳酸钠     20％ PLURONIC     二氧化硅     对羟基苯甲酸甲酯     CARBOPOL     油酸     鲸腊醇     单油酸甘油酯     乙酸月桂醇酯     对羟基苯甲酸丙酯     1-10     0-5     0-20     0-1     0-0.5     0.1-5     0-10     0-10     0-10     0-10     0-0.5
实施例15：局部的奥昔布宁油膏
可制造每个相的组成如表14所示的自由形式奥昔布宁油膏。
表14     组分     ％w/w     胆固醇     硬脂醇     白腊     白矿脂     奥昔布宁     0-5     0-5     0-10     70-100     1-10
实施例16：含有光学异构体的奥昔布宁自由形式凝胶
表15示出了在24小时的时间段内所测定的氯化物和游离碱形式 的每种R和S异构体的皮肤流动性。奥昔布宁游离碱和奥昔布宁氯化 物两者都是以R和S两种形式存在的手性分子，按照本发明测定其中 每一种的光学纯的形式，如表15所示。
表15
制剂a 制剂b Et/Gl/G/D1/N(％w/w) Et/Gl/G/D2/N(％w/w) 73.2/18.3/1.0/2.0/4.0/1.5 73.2/17.9/1.0/2.0/4.4/1.5                                      Qt(t＝24小时)                                       (μg/cm2/t)b  R-奥昔布宁 6.984±4.26  7.08±5.43  S-奥昔布宁 6.24±3.77  6.87±5.35
aEt＝乙醇；W＝水；G＝凝胶化试剂＝KLUCEL；Gl＝甘油
D1＝奥昔布宁氯化物；D2＝奥昔布宁游离碱
N＝2N氢氧化钠(NaOH)；H＝2H盐酸盐(HCl)
b平均值±SD(n＝3皮肤捐献者)
这些结果表明奥昔布宁游离碱凝胶和奥昔布宁氯化物凝胶的R和 S异构体两者都以相同量渗透过皮肤。而且，这些结果表明：在局部应 用的非封留性凝胶中，奥昔布宁氯化物与奥昔布宁游离碱的传递速率 相等。
应该理解上述的组合物和施用形式仅是本发明优选实施方式的示 例。本领域的技术人员可设计多种修饰和替换方式而不偏离本发明的 精神和范围，后附的权利要求书涵盖了这类修改和方式。
因此，尽管本发明已经就本发明中目前视为实践性最好和最优选 的实施方式展开了特征性的详细描述，但对于本领域的普通技术人员 来说明显的是，可进行许多修饰而不偏离本文所述的原则和概念，包 括但不限于改变尺寸、材料、形状、形式、功能和操作，装配和应用 方式。
优先权资料
本申请要求基于2002年11月1日提交的、申请序列号为 10/286,381的美国专利申请的优先权，该美国专利申请10/286,381是 2002年3月15日提交的、申请序列号为10/098,752的美国专利申请的 部分继续申请，而美国专利申请10/098,752又是2000年4月26日提 交的、申请序列号为09/559,711的美国专利申请的继续申请，在此以 引用方式将上述所有申请并入本文。