利用化学发光的化妆美容方法,照射皮肤美容用的发光体及化妆、美容用品
阅读：797发布：2020-12-08
专利汇可以提供利用化学发光的化妆美容方法,照射皮肤美容用的发光体及化妆、美容用品专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种使用 化学发光 的美容法、化妆法、以及照射 皮肤 从而美容用的发光体以及美容用品。，下面是利用化学发光的化妆美容方法,照射皮肤美容用的发光体及化妆、美容用品专利的具体信息内容。
1.一种以化学发光反应发出的光对皮肤进行照射的美容和化妆方法。
2.如权利要求1所述的美容和化妆方法，其特征是，所述的光波长在300～ 1200nm范围内。
3.如权利要求1和2所述的美容和化妆方法，其特征是，所述皮肤是指脸部 和躯体皮肤。
4.如权利要求1～3任一项所述的美容和化妆方法，其特征是，化学发光反应 发出的光通过将两种液体成分混合后产生。
5.如权利要求1～4任一项所述的美容和化妆方法，其特征是，在涂抹皮肤外 用剂之后，或者在敷上涂敷剂的同时，以光照射涂抹处。
6.如权利要求5所述的美容和化妆方法，其特征是，皮肤外用剂或者涂敷剂 是指化妆组合物或美容组合物。
7.一种照射皮肤美容和化妆用的发光体，其特征是，其含有化学发光剂。
8.如权利要求7所述的照射皮肤美容和化妆用的发光体，其特征是，所述化学 发光剂是混合后会产生发光的双液性化学发光剂，其以隔离状态存储于一个容器 内，使用时将其混合后再照射皮肤。
9.如权利要求7和8所述的照射皮肤美容和化妆用的发光体，其特征是，照 射皮肤的光波长在300～1200nm的范围内。
10.一种美容及化妆用品，其特征是，其由皮肤外用剂或口服剂与权利要求7～ 9任一项所述的照射皮肤美容和化妆用的发光体所组合而成。
11.一种以化学发光反应发出的光对皮肤进行照射的美白化妆及美白美容方 法。
12.如权利要求11所述的美白化妆及美白美容方法，其特征是，以化学发光反 应发出的光对皮肤照射，进而抑制黑色素细胞增加和/或抑制黑色素合成。
13.如权利要求11和12所述的美白化妆及美白美容方法，其特征是，该化学 发光反应发出的光是选自蓝荧光、黄荧光、绿荧光、橘荧光、红荧光中的1种或 2种以上的组合。
14.一种美白用发光体，其含有发光剂，能以化学发光反应发出的光对皮肤进 行照射。
15.如权利要求14所述的发光体，其特征是，该发光剂能以化学发光反应发出 的光对皮肤进行照射，进而抑制黑色素细胞增加和/或抑制黑色素合成。
16.如权利要求14和15所述的发光体，其特征是，该发光剂可发出选自蓝荧 光、黄荧光、绿荧光、橘荧光、红荧光中的1种或2种以上的荧光。
17.如权利要求11～13任一项所述的美白化妆及美白美容方法，其特征是，将橄 榄叶萃取物涂抹于皮肤表面，或作为涂敷剂敷用，亦或口服后，以化学发光反应 发出的蓝荧光对皮肤照射。
18.一种美白化妆及美白美容用品，其特征是，其由含有蓝色化学发光反应荧 光剂的美白用发光体与含有橄榄叶萃取物的皮肤外用剂或涂敷剂和/或口服剂组 成。
19.一种化妆及美容方法，其特征是以橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光4种 中1种或多种化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，进而促进纤维母细胞增殖 和/或胶原蛋白的合成。
20.如权利要求19所述的化妆及美白方法，其特征是，将抗坏血酸或其盐和/ 或抗坏血酸衍生物涂抹于皮肤表面，或作为涂敷剂敷用，亦或口服后，再以橘荧 光、红荧光、绿荧光、黄荧光4种中的1种或多种化学发光反应发出的光对皮肤 进行照射，进而促进纤维母细胞增殖和/或胶原蛋白的合成。
21.一种发光体，其特征是含有发光剂，可发出橘荧光、红荧光、绿荧光、黄 荧光4种中的1种或多种荧光的化学发光反应发出的光，对皮肤进行照射可促进 纤维母细胞增殖和/或胶原蛋白的合成。
22.一种化妆及美白用品，其特征是由权利要求21所述的发光体与含有抗坏血 酸或其盐和/或抗坏血酸衍生物的皮肤外用剂，或涂敷剂及/或口服剂组成。
23.一种以蓝荧光对皮肤照射的光老化抑制方法。
24.如权利要求23所述的光老化抑制方法，其特征是，以化学发光反应发出的 蓝荧光对皮肤进行照射，进而抑制吡啶二聚物(pyridine dimer)生成。
25.如权利要求23和24所述的光老化抑制方法，其特征是，以光解酶涂抹于 皮肤表面，或者作为涂敷剂敷用和/或口服后，以蓝荧光对皮肤照射。
26.一种抑制光老化用的发光体，其特征是含有能以蓝荧光对皮肤进行照射的 化学发光剂。
27.一种抑制光老化用化妆及美容用品，其特征是，其由含有能以蓝荧光对皮 肤照射的化学发光剂与含有光解酶的皮肤外用剂或涂敷剂和/或口服剂组成。
28.一种以化学发光反应发出的荧光和/或化学发光反应发出的近红外线对皮肤 进行照射以增加血流量的方法。
29.如权利要求28所述的增加血流量的方法，其特征是，所述化学发光反应发 出的荧光为橘荧光。
30.一种增加血流量用的发光体，含有可发出荧光和/或近红外线的化学发光剂。
31.如权利要求30所述的增加血流量用的发光体，其特征是，所述荧光为橘荧 光。
32.一种化妆及美容用品，其特征是由权利要求30或31所述的增加血流量用的 发光体与皮肤外用剂组成。
33.如权利要求10、18、22、27、32项任一项所述的化妆及美容用品，其特 征是，所述皮肤外用剂为护肤化妆料、脸部涂敷剂、热敷剂、贴布、经皮吸收剂 中的任一种。
34.一种皮肤覆盖材料，其特征是如申请专利范围第7、8、9、10、14、15、16、 18、21、22、26、27、30、31、32所记载之发光体、美容及化妆用品，其中任一 项，是用于涂抹覆盖脸部、身体。
技术领域
本发明涉及一种利用低功率的化学发光的美容、化妆方法，还涉及照射皮肤 从而用于美容的发光体和化妆用品、美容用品。
背景技术
以往，并没有人提出以护肤或活化皮肤为目的而利用光的技术构想。特别是 在美容或化妆领域，一直没有广泛运用到化学发光。
在化妆的技术领域中，其一的原因乃是，光被认为会对皮肤产生伤害从而必 须要避免其照射，故市面上有许多隔离光线或者防护的化妆品问世。唯一例外的 运用是，为了拥有麦色皮肤因而产生的日晒沙龙等场所。
又，在医疗使用方面，也有利用激光光对皮肤局部使用的方法。
关于利用激光之类强光的技术，内容如以下所述。
专利文献1(特开2004-733号公报)揭示一种激光除毛装置；专利文献2(特 开2003-12487号公报)揭示一种将美容液涂抹在皮肤上，再以激光照射涂抹处进 行除毛等激光治疗的技术：专利文献3(特开平11-342213号公报)揭示一种肌肤 美白的激光吸收辅助带及其美容方法，其使用在肌肤，特别是脸部肌肤着重之处， 可以提高激光的吸收率且达到一定的吸收效果，可促进新陈代谢而有极佳的美容 效果。
除了有助于晒黑的目的外，大多数情况下光用于治疗用途，而如阳光一样的 强光会造成皮肤癌、日晒后的色素沉淀或者加速皮肤老化，故一般很少用于美容 或化妆用途。
在化妆的技术领域中，其一的原因乃是，光被认为会对皮肤产生伤害从而必 须要避免其照射，故市面上有许多隔离光线或者防护的化妆品问世。唯一例外的 运用是，为了拥有麦色皮肤因而产生的日晒沙龙等场所。
又，在医疗使用方面，也有利用激光光对皮肤局部使用的方法。
关于利用激光之类强光的技术，内容如以下所述。
专利文献1(特开2004-733号公报)揭示一种激光除毛装置；专利文献2(特 开2003-12487号公报)揭示一种将美容液涂抹在皮肤上，再以激光照射涂抹处进 行除毛等激光治疗的技术：专利文献3(特开平11-342213号公报)揭示一种肌肤 美白的激光吸收辅助带及其美容方法，其使用在肌肤，特别是脸部肌肤着重之处， 可以提高激光的吸收率且达到一定的吸收效果，可促进新陈代谢而有极佳的美容 效果。
除了有助于晒黑的目的外，大多数情况下光用于治疗用途，而如阳光一样的 强光会造成皮肤癌、日晒后的色素沉淀或者加速皮肤老化，故一般很少用于美容 或化妆用途。
发明内容
本案发明人，在研究开发新的美容、化妆方法的过程中，发现通过化学发光 反应发出的光对皮肤产生的作用，进而实现本发明。本发明提供一种利用化学发 光的新型美容及化妆方法，且提供相关的美容用品、化妆用品、化妆剂、美容剂。
本发明将一种将两种液体成分混合后能产生光达数分至数小时且无高温发热 现象之化学发光体，靠近或者接触皮肤，再利用此方法来施行美容、化妆作用。 (这段话意思是否为：本发明通过将两种液体混合产生一种无高温发热现象的发 光体，其可以在几分钟～几小时内产生光，将该发光体靠近或者接触皮肤，从而 利用此方法来进行美容、化妆)
(1)一种通过化学发光(chemiluminescence)反应发出的光对皮肤进行照射的 美容和化妆方法。
(2)如(1)所述的美容和化妆方法，该光波长为300～1200nm。
(3)如(1)或(2)所述的美容和化妆方法，所述皮肤是指脸部及躯体的皮 肤。
(4)如(1)至(3)任一项所述的美容和化妆方法，化学发光反应发出的光 是通过将两种液体混合后而产生的。
(5)如(1)至(4)任一项所述的美容和化妆方法，在涂抹皮肤外用剂之后， 或者在敷上涂敷剂(pack agent)的同时，以光照射涂抹之处。
(6)如(5)所述的美容和化妆方法，皮肤外用剂或者涂敷剂是指化妆用的组 合物或美容组合物。
(7)一种照射皮肤从而美容和化妆用的发光体，其含有化学发光剂。
(8)如(7)所述的照射皮肤从而美容和化妆用的发光体，所述化学发光剂是 混合后会发光的双液性化学发光剂，其以互相隔离状态收纳于容器内，使用时将 其混合后再照射皮肤。
(9)如(7)或(8)所述的照射皮肤从而美容和化妆用的发光体，所述照射 皮肤的光波长为300～1200nm。
(10)一种美容和化妆用品，由皮肤外用剂或口服剂，与(7)至(9)任一项 所述的照射皮肤从而美容和化妆用的发光体组合而成。
(11)一种以化学发光反应发出的光对皮肤照射的美白化妆和美白美容方法。
(12)如(141)所述的美白化妆及美白美容方法，其以化学发光反应发出的光 对皮肤进行照射，进而抑制黑色素细胞增加和/或抑制黑色素合成。
(13)如(11)或(12)所述的美白化妆及美白美容方法，该化学发光反应发 出的光是蓝荧光、黄荧光、绿荧光、橘荧光、红荧光中的一种或由两种以上组合 而成的。
(14)一种美白用发光体，含有发光剂，能以化学发光反应发出的光对皮肤进 行照射。
(15)如(14)所述的美白用发光体，该发光剂能以化学发光反应发出的光对 皮肤进行照射，进而抑制黑色素细胞增加和/或抑制黑色素合成。
(16)如(14)或(15)所述的发光体，该发光剂可发出蓝荧光、黄荧光、绿 荧光、橘荧光、红荧光中的1种或2种以上的荧光。
(17)如(11)至(13)任一项所述的美白化妆及美白美容方法，将橄榄叶萃 取物涂抹于皮肤表面，或作为涂敷剂敷用，亦或口服后，以化学发光反应发出的 蓝荧光对皮肤进行照射。
(18)一种美白化妆及美白美容用品，由含有蓝色化学发光反应荧光剂(blue fluorescent light)的美白用发光体，与含有橄榄叶萃取物的皮肤外用剂或涂敷剂和 /或口服剂组成。
(19)一种化妆及美容方法，以橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光4种中的1 种或多种化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，进而促进纤维母细胞 (fibroblast)增殖和/或胶原蛋白的合成。
(20)一种如(19)所述的化妆及美白方法，将抗坏血酸(ascorbic acid)或其 盐和/或抗坏血酸衍生物涂抹于皮肤表面，或作为涂敷剂敷用，亦或口服后，再以 橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光4种中的1种或多种化学发光反应发出的光对 皮肤进行照射，进而促进纤维母细胞增殖和/或胶原蛋白的合成。
(21)一种发光体，含有发光剂，其可发出橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光 4种中的1种或多种荧光的化学发光反应发出的光，对皮肤照射可促进纤维母细 胞增殖和/或胶原蛋白的合成，
(22)一种化妆及美白用品，由(21)所述的发光体，与含有抗坏血酸或其盐 和/或抗坏血酸衍生物的皮肤外用剂，或涂敷剂及/或口服剂组成。
(23)一种以蓝荧光照射皮肤的光老化(photoaging)抑制方法。
(24)如(23)所述的光老化抑制方法，以化学发光反应发出的蓝荧光对皮肤 进行照射，进而抑制吡啶二聚物(pyridine dimer)生成。
(25)如(23)或(24)所述的光老化抑制方法，以光解酶(photolyase)涂抹 于皮肤表面，或者作为涂敷剂敷用和/或口服后，以蓝荧光对皮肤进行照射。
(26)一种抑制光老化用的发光体，含有能以蓝荧光对皮肤进行照射的化学发 光剂。
(27)一种抑制光老化用的化妆及美容用品，是由含有能以蓝荧光对皮肤进行 照射的化学发光剂与含有光解酶的皮肤外用剂或涂敷剂和/或口服剂组成。
(28)一种以化学发光反应发出的荧光和/或化学发光反应发出的近红外线对 皮肤照射从而增加血流量的方法。
(29)如(28)所述的增加血流量的方法，所述化学发光反应发出的荧光为橘 荧光。
(30)一种增加血流量用的发光体，含有可发出荧光和/或近红外线的化学发 光剂。
(31)如(30)所述的增加血流量用的发光体，该荧光为橘荧光。
(32)一种化妆及美容用品，其由(30)或(31)所述的增加血流量用的发光 体与皮肤外用剂组成。
(33)如(10)、(18)、(22)、(27)、(32)任一项所述的化妆及美容 用品，该皮肤外用剂为护肤化妆料、脸部涂敷剂、热敷剂、贴布和经皮吸收剂中 的任一项。
(34)一种皮肤覆盖材料，如(7)、(8)、(9)、(10)、(14)、(15)、 (16)、(18)、(21)、(22)、(26)、(27)、(30)、(31)、(32)所 述的发光体、美容及化妆用品，其中任一项，是用于涂抹覆盖脸部、身体。
本发明可达到以下效果
(1)因为是利用化学发光反应发出的光，由于其能量低，对皮肤或人体不会 造成伤害且不会发热，因此使用上相当安全。
(2)使用双液性的化学发光剂，可在使用时通过混含而发光，所以携带方便， 不受使用地点或时间的限制，便利性高。
(3)能控制化学发光的波长，可利用从紫外线至红外线之间宽广波长范围内 的特定波长。又，也可利用高亮度的发光。
(4)化学发光体可设计为涵盖从点到面的尺寸，从而可随适当的场所、面积 而利用。
(5)可控制发光时间为数分钟至10小时以上，应用性广。
(6)具有细胞活化作用、效果。
(7)可与化妆品、外部医药用品、经皮吸收剂、口服剂(经口口服剂)等组 合使用，根据组合对象可达到倍增的作用、效果。
(8)与调配美容成分或化学成分的物品合并使用，可获得倍增的效果。
(9)具有美白效果，特别是通过抑制黑色素产生细胞的增殖或黑色素合成的 作用，可达到美白作用。蓝荧光、绿荧光、黄荧光、橘荧光、红荧光具有最佳的 美白效果。
(10)即使皮肤暴露在阳光等紫外线的环境下，之后再以荧光对皮肤进行照射， 即可抑制黑色素的合成、皮肤变黑，以及抑制斑点、雀斑形成。
(11)将蓝色荧光的照射与橄榄叶萃取液组合使用，对降低人体表皮黑色素细 胞的增殖率而言，效果是协调倍增的。
(12)通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，可达到抗老化的效果。尤 其是用橘荧光、红荧光、绿荧光进行照射，可促进纤维母细胞的增殖、胶原蛋白 的合成，与抗坏血酸或其衍生物组合使用时，更可发挥倍增的改善效果。
(13)通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，可达到抑制光老化的效果。 尤其是以蓝色荧光进行照射，可抑制紫外线对皮肤细胞DNA的损伤，从而抑制光 老化。与光解酶组合使用时，其作用效果更好。
(14)通过化学发光反应发出的光对皮肤照射，具有改善血液流通的作用、效 果。尤其是以近红外线、橘荧光对皮肤进行照射，可增加血液流通量。
(15)本发明化学发光体的重量轻、体积小，在形状、大小、厚度、柔软度方 面可自由设计，使用的限制少。本发明的化学发光照射体可配合脸部或身体各部 位所欲使用的部位来设计其形状、大小。其可设计为重量轻体积小且具柔软性的 型态，可通过使用粘合剂从而贴附于皮肤上。
附图说明
图1(a)为红荧光分光放射亮度的曲线图。
图1(b)为绿荧光分光放射亮度的曲线图。
图1(c)为蓝荧光分光放射亮度的曲线图。
图1(d)为黄荧光分光放射亮度的曲线图。
图2为高亮度型荧光分光亮度放射亮度的曲线图。
图3为一般荧光型的照度变化曲线图。
图4为高亮度荧光型的照度变化曲线图。
图5为血管宽度的流通观察曲线图。
图6为细胞增殖率的曲线图。
图7为荧光照射对B16细胞增殖的影响的曲线图。
图8为荧光照射对黑色素合成率的影响的曲线图。
图9为高亮度蓝色荧光照射对三维皮肤模型黑色素合成抑制效果的长条图。
图10为高亮度蓝色荧光照射对人体表皮黑色素细胞增殖率影响的曲线图。
图11为纤维母细胞增殖率的曲线图。
图12为胶原蛋白合成率的曲线图。
图13为各色荧光照射下纤维母细胞增殖率(含1％血清培养基)的曲线图。
图14为各色荧光照射下纤维母细胞增殖率(含5％血清培养基)的曲线图。
图15为高亮度荧光照射下纤维母细胞增殖率的曲线图。
图16为高亮度蓝色荧光照射下促进光解酶活化效果的曲线图。
图17为近红外线(IR)化学发光体的发光谱曲线图。
图18为近红外线(IR)化学发光体的功率曲线图。
图19为血流量的示意图。
图20为近红外线(IR)荧光照射下血流量的曲线图。
本发明将一种将两种液体成分混合后能产生光达数分至数小时且无高温发热 现象之化学发光体，靠近或者接触皮肤，再利用此方法来施行美容、化妆作用。 (这段话意思是否为：本发明通过将两种液体混合产生一种无高温发热现象的发 光体，其可以在几分钟～几小时内产生光，将该发光体靠近或者接触皮肤，从而 利用此方法来进行美容、化妆)
(1)一种通过化学发光(chemiluminescence)反应发出的光对皮肤进行照射的 美容和化妆方法。
(2)如(1)所述的美容和化妆方法，该光波长为300～1200nm。
(3)如(1)或(2)所述的美容和化妆方法，所述皮肤是指脸部及躯体的皮 肤。
(4)如(1)至(3)任一项所述的美容和化妆方法，化学发光反应发出的光 是通过将两种液体混合后而产生的。
(5)如(1)至(4)任一项所述的美容和化妆方法，在涂抹皮肤外用剂之后， 或者在敷上涂敷剂(pack agent)的同时，以光照射涂抹之处。
(6)如(5)所述的美容和化妆方法，皮肤外用剂或者涂敷剂是指化妆用的组 合物或美容组合物。
(7)一种照射皮肤从而美容和化妆用的发光体，其含有化学发光剂。
(8)如(7)所述的照射皮肤从而美容和化妆用的发光体，所述化学发光剂是 混合后会发光的双液性化学发光剂，其以互相隔离状态收纳于容器内，使用时将 其混合后再照射皮肤。
(9)如(7)或(8)所述的照射皮肤从而美容和化妆用的发光体，所述照射 皮肤的光波长为300～1200nm。
(10)一种美容和化妆用品，由皮肤外用剂或口服剂，与(7)至(9)任一项 所述的照射皮肤从而美容和化妆用的发光体组合而成。
(11)一种以化学发光反应发出的光对皮肤照射的美白化妆和美白美容方法。
(12)如(141)所述的美白化妆及美白美容方法，其以化学发光反应发出的光 对皮肤进行照射，进而抑制黑色素细胞增加和/或抑制黑色素合成。
(13)如(11)或(12)所述的美白化妆及美白美容方法，该化学发光反应发 出的光是蓝荧光、黄荧光、绿荧光、橘荧光、红荧光中的一种或由两种以上组合 而成的。
(14)一种美白用发光体，含有发光剂，能以化学发光反应发出的光对皮肤进 行照射。
(15)如(14)所述的美白用发光体，该发光剂能以化学发光反应发出的光对 皮肤进行照射，进而抑制黑色素细胞增加和/或抑制黑色素合成。
(16)如(14)或(15)所述的发光体，该发光剂可发出蓝荧光、黄荧光、绿 荧光、橘荧光、红荧光中的1种或2种以上的荧光。
(17)如(11)至(13)任一项所述的美白化妆及美白美容方法，将橄榄叶萃 取物涂抹于皮肤表面，或作为涂敷剂敷用，亦或口服后，以化学发光反应发出的 蓝荧光对皮肤进行照射。
(18)一种美白化妆及美白美容用品，由含有蓝色化学发光反应荧光剂(blue fluorescent light)的美白用发光体，与含有橄榄叶萃取物的皮肤外用剂或涂敷剂和 /或口服剂组成。
(19)一种化妆及美容方法，以橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光4种中的1 种或多种化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，进而促进纤维母细胞 (fibroblast)增殖和/或胶原蛋白的合成。
(20)一种如(19)所述的化妆及美白方法，将抗坏血酸(ascorbic acid)或其 盐和/或抗坏血酸衍生物涂抹于皮肤表面，或作为涂敷剂敷用，亦或口服后，再以 橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光4种中的1种或多种化学发光反应发出的光对 皮肤进行照射，进而促进纤维母细胞增殖和/或胶原蛋白的合成。
(21)一种发光体，含有发光剂，其可发出橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光 4种中的1种或多种荧光的化学发光反应发出的光，对皮肤照射可促进纤维母细 胞增殖和/或胶原蛋白的合成，
(22)一种化妆及美白用品，由(21)所述的发光体，与含有抗坏血酸或其盐 和/或抗坏血酸衍生物的皮肤外用剂，或涂敷剂及/或口服剂组成。
(23)一种以蓝荧光照射皮肤的光老化(photoaging)抑制方法。
(24)如(23)所述的光老化抑制方法，以化学发光反应发出的蓝荧光对皮肤 进行照射，进而抑制吡啶二聚物(pyridine dimer)生成。
(25)如(23)或(24)所述的光老化抑制方法，以光解酶(photolyase)涂抹 于皮肤表面，或者作为涂敷剂敷用和/或口服后，以蓝荧光对皮肤进行照射。
(26)一种抑制光老化用的发光体，含有能以蓝荧光对皮肤进行照射的化学发 光剂。
(27)一种抑制光老化用的化妆及美容用品，是由含有能以蓝荧光对皮肤进行 照射的化学发光剂与含有光解酶的皮肤外用剂或涂敷剂和/或口服剂组成。
(28)一种以化学发光反应发出的荧光和/或化学发光反应发出的近红外线对 皮肤照射从而增加血流量的方法。
(29)如(28)所述的增加血流量的方法，所述化学发光反应发出的荧光为橘 荧光。
(30)一种增加血流量用的发光体，含有可发出荧光和/或近红外线的化学发 光剂。
(31)如(30)所述的增加血流量用的发光体，该荧光为橘荧光。
(32)一种化妆及美容用品，其由(30)或(31)所述的增加血流量用的发光 体与皮肤外用剂组成。
(33)如(10)、(18)、(22)、(27)、(32)任一项所述的化妆及美容 用品，该皮肤外用剂为护肤化妆料、脸部涂敷剂、热敷剂、贴布和经皮吸收剂中 的任一项。
(34)一种皮肤覆盖材料，如(7)、(8)、(9)、(10)、(14)、(15)、 (16)、(18)、(21)、(22)、(26)、(27)、(30)、(31)、(32)所 述的发光体、美容及化妆用品，其中任一项，是用于涂抹覆盖脸部、身体。
本发明可达到以下效果
(1)因为是利用化学发光反应发出的光，由于其能量低，对皮肤或人体不会 造成伤害且不会发热，因此使用上相当安全。
(2)使用双液性的化学发光剂，可在使用时通过混含而发光，所以携带方便， 不受使用地点或时间的限制，便利性高。
(3)能控制化学发光的波长，可利用从紫外线至红外线之间宽广波长范围内 的特定波长。又，也可利用高亮度的发光。
(4)化学发光体可设计为涵盖从点到面的尺寸，从而可随适当的场所、面积 而利用。
(5)可控制发光时间为数分钟至10小时以上，应用性广。
(6)具有细胞活化作用、效果。
(7)可与化妆品、外部医药用品、经皮吸收剂、口服剂(经口口服剂)等组 合使用，根据组合对象可达到倍增的作用、效果。
(8)与调配美容成分或化学成分的物品合并使用，可获得倍增的效果。
(9)具有美白效果，特别是通过抑制黑色素产生细胞的增殖或黑色素合成的 作用，可达到美白作用。蓝荧光、绿荧光、黄荧光、橘荧光、红荧光具有最佳的 美白效果。
(10)即使皮肤暴露在阳光等紫外线的环境下，之后再以荧光对皮肤进行照射， 即可抑制黑色素的合成、皮肤变黑，以及抑制斑点、雀斑形成。
(11)将蓝色荧光的照射与橄榄叶萃取液组合使用，对降低人体表皮黑色素细 胞的增殖率而言，效果是协调倍增的。
(12)通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，可达到抗老化的效果。尤 其是用橘荧光、红荧光、绿荧光进行照射，可促进纤维母细胞的增殖、胶原蛋白 的合成，与抗坏血酸或其衍生物组合使用时，更可发挥倍增的改善效果。
(13)通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，可达到抑制光老化的效果。 尤其是以蓝色荧光进行照射，可抑制紫外线对皮肤细胞DNA的损伤，从而抑制光 老化。与光解酶组合使用时，其作用效果更好。
(14)通过化学发光反应发出的光对皮肤照射，具有改善血液流通的作用、效 果。尤其是以近红外线、橘荧光对皮肤进行照射，可增加血液流通量。
(15)本发明化学发光体的重量轻、体积小，在形状、大小、厚度、柔软度方 面可自由设计，使用的限制少。本发明的化学发光照射体可配合脸部或身体各部 位所欲使用的部位来设计其形状、大小。其可设计为重量轻体积小且具柔软性的 型态，可通过使用粘合剂从而贴附于皮肤上。
附图说明
图1(a)为红荧光分光放射亮度的曲线图。
图1(b)为绿荧光分光放射亮度的曲线图。
图1(c)为蓝荧光分光放射亮度的曲线图。
图1(d)为黄荧光分光放射亮度的曲线图。
图2为高亮度型荧光分光亮度放射亮度的曲线图。
图3为一般荧光型的照度变化曲线图。
图4为高亮度荧光型的照度变化曲线图。
图5为血管宽度的流通观察曲线图。
图6为细胞增殖率的曲线图。
图7为荧光照射对B16细胞增殖的影响的曲线图。
图8为荧光照射对黑色素合成率的影响的曲线图。
图9为高亮度蓝色荧光照射对三维皮肤模型黑色素合成抑制效果的长条图。
图10为高亮度蓝色荧光照射对人体表皮黑色素细胞增殖率影响的曲线图。
图11为纤维母细胞增殖率的曲线图。
图12为胶原蛋白合成率的曲线图。
图13为各色荧光照射下纤维母细胞增殖率(含1％血清培养基)的曲线图。
图14为各色荧光照射下纤维母细胞增殖率(含5％血清培养基)的曲线图。
图15为高亮度荧光照射下纤维母细胞增殖率的曲线图。
图16为高亮度蓝色荧光照射下促进光解酶活化效果的曲线图。
图17为近红外线(IR)化学发光体的发光谱曲线图。
图18为近红外线(IR)化学发光体的功率曲线图。
图19为血流量的示意图。
图20为近红外线(IR)荧光照射下血流量的曲线图。
具体实施方式
本发明通过化学发光反应发出的光进行照射，具有美白、抗老化、抗光老化、 改善血液流通、提高照射部位及周围皮肤的温度、细胞增殖的作用效果。另，根 据照射波长或亮度的不同，上述作用效果也有随之不同。
上述作用效果，也可单独用于美容或化妆乃至于医疗用途，且可与经皮吸收 剂或口服剂组合从而有助于促进其吸收。
化学发光反应发出的光，是无发热现象的光，因为具有对于有形状、大小、 凹凸的皮肤表面的适应性，以及使用时间、保存性等特性，故十分安全、便利。 此化学发光可配合发光剂，以及调整波长或强度、时间，进而控制其作用效果。 发出的光则有各种颜色的荧光、红外线类型的光。
在美容用途上，对于解决老化现象而带来的明显班点、雀斑、肤色暗沉、黑 眼圈、肌肤亮度减少、肌肤活性降低、细纹、皱纹、皮肤松弛这些问题相当有成 效。
关于老化现象的原因，有例如血液循环不良使肤色不够红润、黑色素沉淀累 积、肌肤弹性降低而造成皮肤表面凹凸不平产生阴影、角层肥厚使肌肤透明感降 低、皮肤表面的不规则反射使光泽降低、随年龄增长肤色发黄等。这些现象的直 接表现即是出现“肌肤暗沉”的现象，在不了解其发生原因的情况下，仅仅通过 化妆来掩饰有难度。
通过上述化学发光反应发出的光进行照射，可促进血液流通而提高透明感及 光泽、促进新陈代谢，以及激活细胞，故能够轻松应对暗沉到老化现象的问题。
此化学发光对皮肤的照射，可应用于化妆领域、医药外部用品、化妆剂、美 容剂、化妆用品、美容用品、医疗用品、美容皮肤科、运动伤害治疗、肌肉疲劳 治疗等多方面。
在其它应用方面，利用高亮度发光体，可用于调整日常节律(生理时钟)及 自律神经；利用其促进细胞增殖的优点，可用于促进伤口快速恢复的用品上；可 应用于发光创伤带或治痘修护化妆用具等；其使皮肤温度上升和改善血液流通的 作用，具有促进代谢、除去皮肤的老旧废物、或促进毛发生长的效果；另将此功 能与经皮吸收剂组合，可促进经皮吸收剂的效果。例如与面膜等护肤产品或热敷 贴药等组合，可发挥极大效用。
此化学发光剂可存储于轻薄柔软的包装体内，包装体一侧设有发光面，其可 与皮肤直接接触，发光面以透光性的材质为佳，且存储化学发光剂的包装体的体 积大小可随使用部位而制作。又，发光体的载体可使用无纺布或海绵，设定其整 体或仅有其与皮肤的接触面为柔软材质，使其能给皮肤好的触感。对于柔软性材 质，可使用硅树脂等柔软透明的合成树脂薄膜。
认为以化学发光反应发出的光对皮肤进行照射可达到美白作用的效果。化学 发光与紫外线不同，以荧光进行照射并不会促进黑色素合成，反而可抑制黑色素 产生细胞的增殖，具有抑制细胞内黑色素合成的功效。，例如蓝荧光、黄荧光、 绿荧光、橘荧光、红荧光，进行照射具有不同的效果。
蓝色荧光与黄色荧光具有抑制黑色素合成的效果，尤其是只用蓝色荧光照射， 就可达到20％抑制黑色素合成的效果。
红荧光、高亮度型的绿荧光、高亮度型的橘荧光则可以抑制黑色素细胞增殖， 在细胞数目减少的时，黑色素整体的量也同时减少。
荧光的照射可选择性地抑制活性黑色素细胞，使黑色素产生细胞无法增殖， 且抑制各细胞中黑色素的合成，进而达到美白效果，故可利用化学发光来进行美 白化妆或美白美容。
化学发光反应发出的光与经皮吸收剂组合使用后的效果，可以通过橄榄叶萃 取物、蓝色荧光的实验结果来证实。
在经皮吸收或经口吸收橄榄叶萃取物的状态下，以高亮度型蓝色荧光照射后， 人体表皮黑色素细胞的增殖率降低，故涂抹或口服橄榄叶萃取物与高亮度型蓝色 荧光的照射两者并用能降低人体表皮黑色素细胞的增殖率，进而达到美白效果。
橄榄叶萃取物当作为经皮吸收剂使用时，具体有液体化妆料成分或涂敷剂成 分等使用方式。
以化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，可抑制因紫外线照射所造成的黑 色素合成以及暴露在紫外线下所造成的皮肤变黑，发挥美白、美容的功能。
UVB(紫外线B)照射虽然会促进黑色素合成，但以高亮度蓝色荧光照射后， 证实其可抑制UVB照射对黑色素合成的促进。因此，皮肤即使暴露在阳光等紫外 线的环境下，之后再以高亮度蓝色荧光等化学发光反应发出的荧光对皮肤进行照 射，就可抑制黑色素的合成、皮肤变黑，以及斑点、雀斑的形成。
通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，发现可达到预防皮肤老化的效 果。关于皮肤老化的原因有，纤维母细胞再生能力衰退、胶原蛋白合成效果变差。 通化学发光对皮肤进行照射，证实具有促进纤维母细胞增殖、胶原蛋白合成的功 能。此处的化学发光，例如为橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光。
例如，以橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光、高亮度型橘荧光、高亮度型绿 荧光进行照射，可帮助纤维母细胞增殖，促进纤维母细胞的胶原蛋白合成。
化学发光与经皮吸收剂或经口吸收剂组合使用后，证实其可促进纤维母细胞 增殖及胶原蛋白合成。其中可使用抗坏血酸衍生物作为其组合使用剂。
通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，皮肤中的胶原蛋白量会增加、 肌肤恢复紧致、抚平皱纹、改善肌肤弹性及柔软度等，可达到预防老化的效果。 此外，与含有坏血酸衍生物等试剂组合使用时，更可发挥倍增的改善效果。在此 可利用液体化妆料或面膜霜、口服剂作为组合用剂。
通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，发现可抑制皮肤光老化。
细胞在UVB照射下，会使DNA受到损伤而产生吡啶二聚物。此情况反复进 行就成为所谓的光老化。在拥有光合成能力的原核生物中，存在有修复此DNA盐 基之二聚作用(dimerization)的光解酶，通过化学发光反应发出的光进行照射，证实 可实现此光解酶的活化。
例如，以高亮度型蓝色荧光照射，可降低吡啶二聚物含有率。此外，将可有 助于降低吡啶二聚物含有率的光解酶与高亮度型蓝色荧光合并使用时，更可加倍 降低吡啶二聚物含有率，增强抑制光老化的效果。
以各种荧光照射，发现可促进纤维母细胞增殖。
贫营养化状况下以化学发光照射，可促进纤维母细胞增殖，证实化学发光的 功能。例如，使用一般型的红荧光、绿荧光、黄荧光、高亮度型橘荧光、高亮度 型绿荧光进行照射，发现具有细胞活化效果。其中活性最佳的乃是绿色荧光。
通过化学发光反应发出的光进行照射，可增加血液流通量。
通过化学发光反应发出的光对皮肤机械能照射，可增加血液流通量，可直接 改善血液流通状况、提高皮肤温度，对于促进新陈代谢、促进经皮吸收效果、增 进照射处对口服剂的功用，都可通过改善血液流通而达成。
有关化学发光反应发出的光，例如可使用近红外线或橘荧光。
<化学发光体>
化学发光系利用在化学上会产生光的二元系统(two component system)来进 行，一般，系使被称为「草酸盐(oxa1ate)」(草酸盐或草酸盐酯)及「活化剂 (activator)」之两种化学溶液成分产生化学反应。然后产生化学荧光。
上述双成分，可以使用各种方法在活化前进行物理分离。大部分情况下，将 含有一种成分的封闭易碎玻璃容器，收容在含有另一种成分外侧为柔软的容器内。 此外部容器为内包有第2成分及充填易碎玻璃容器而使其封闭，其与内侧玻璃容 器的密接，例如弯曲外部容器所产生的力量造成玻璃容器被破坏，则第1成分就 被释放出来，使第1和第2成分混合后发光。化学荧光发光装置的目的在于使得 可使用的光传送出来，所以外部容器通常都使用聚乙烯、聚丙烯、硅树脂等透明 或半透明材料来构成，让化学荧光系统所产生的光可透过其容器壁。又，根据化 学荧光用组合物不同，可产生各种色彩的光。此装置也可设计成让光只从特别选 择的部位透过，且于构成容器的包装要素上，为适应照射部位其材质可使用柔软 性薄膜。
有关化学发光，过去已有各种相关发明被揭示。例如，日本特开2003-238823 号公报(化学荧光组合物)、日本特开2002-138278号公报(化学发光系统)、日 本特开平11-045602号公报(化学发光体)、日本特表2003-532253号公报(化学 发光法的发光单元)等发明。
化学发光体之组合物，系以调配出荧光剂的A溶液，与调配出氧化剂的B溶 液所构成。A溶液是由酯溶液与荧光物质(fluorescent substance)、邻苯二甲酸二 丁酯(dibutyl phthalate)等所构成；B溶液是由过氧化氢、催化剂、邻苯二甲酸丁 酯(butyl phthalate)等所构成。此A溶液与B溶液在使用前各自分开存储同一个 容器内，使用时再混合而产生发光反应。
关于两种成分，举例来说，可使用过氧化氢成分与草酸盐酯成分作为荧光体 成分，化学发光催化剂媒(catalyst)则可使用水杨酸锂(Lithium Salicylate)等羧 酸锂盐(Lithium Carboxylate)催化剂等二元发光系统用催化剂(catalyst)。通过二元 发光系统用催化剂(catalyst)，可降低反应时的活化性能量，也能减少发光过程的温 度依赖性。
其中之一的成分可浸渍于无纺布或海绵等后使用，可提高柔软性与对身体凹 凸的适应性。
此外关于具体的成分，可使用以下日本特开2003-238823号公报中所揭示的成 分。化学发光反应之成分溶液含有作为化学发光反应成分之草酸盐或活化剂。草 酸盐(草酸盐或草酸盐酯)若是一般化学发光反应所使用则没有特别限制，可为 双(2，6-二氯(dichloro)-4-硝基苯(nitrophenyl))草酸盐、双(2，4，6-三氯苯基 (trichlorophenyl))草酸盐、双(3-三氟甲基(trifluoromethyl)-4-硝基苯(nitrophenyl)) 草酸盐、双(2-甲基(methyl)-4，6-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸盐、双(1，2- 二甲基(dimethyl)-4，6-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸盐、双(2，4-二氯苯基 (dichlorophenyl))草酸盐、双(2，5-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸盐、双(2- 甲酰基(formyl)-4-硝基苯(nitrophenyl))草酸盐、双(五氯苯(pentachlorophenyl)) 草酸盐、双(1，2-二氢(dihydoro)-2-羰基(oxo)-1-啶基(pyridyl))乙二醛(glyoxal)、 双-N-phthalmydil oxalate)、双(2，4，5-三氯(trichloro)-6-carbopentoxyphenyl)草酸 盐、双(2，4，5-三氯(trichloro)-6-carbobutoxyphenyl)草酸盐、双(2，4，6-三氯苯基 (trichlorophenyl))草酸盐、双(2，4，5-三氯(trichloro)-6-pentoxyphenyl)草酸盐。
活化剂则使用一般过氧化物成分。过氧化物成分包含过氧化氢化合物溶液、 过氧化氢化合物、或以稀释剂稀释过的过氧化化合物。上述过氧化氢化合物，包 含过氧化氢与产生过氧化氢的化合物。过氧化物成分中，以过氧化氢为佳、过氧 化氢与溶剂(solvent)的溶液，亦可使用过硼酸钠、过氧化钠等无水过氧化氢化合物。 又，能产生过氧化氢的任何化合物皆可使用。形成活化剂溶液的溶剂(solvent)虽没 有特别限制，但以柠檬酸三乙酯(triethyl citrate)和邻苯二甲酸二甲酯(dimethyl phthalate)为佳。
第1聚合物树脂粒子和第2聚合物树脂粒子可使用各种聚合物，一般没有限 定，但可为聚乙烯(polyethylene)、聚丙烯(polypropylene)、聚氯乙烯(polyvinyl chlorie)、聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate)、聚乙烯苯甲酸(polyvinyl benzoate)、聚醋酸乙烯(polyvinyl acetate)、聚乙烯吡咯烷酮纤维素(cellulose polyvinylpyrrolidone)、聚丙烯酰氨(polyacrylamide)、环氧化物(epoxide)、硅 类、聚乙烯丁醛(polyvinyl butyral)、聚氨酯(polyurethane)、尼龙、聚甲醛(polyacetal)、 聚碳酸酯(polycarbonate)、聚酯(polyester)及聚醚(polyether)。又，可使用架 桥聚合物(cross polymer)，例如聚苯乙烯(polystyrene)-聚乙烯苯(polyvinyl benzene)、聚丙烯酰氨-聚甲烯双丙烯酰胺(polymethylene bisacrylamide)、聚丁 二烯(polybutadiene)共聚物等。其中以聚氯乙烯树脂为佳。
关于荧光体的成分，可使用以下如日本特开2002-138279号公报中所揭示的成 分。例如，蒽(anthracene)、取代的蒽、苯并蒽(benzo anthracene)、菲(phenanthrene)、 取代的菲、四并苯(naphthacene)、取代的四并苯、五并苯(penthacene)、取代 的五并苯、芘(perylene)、取代的芘、酮紫(Violanthrone)、取代的酮紫取代基 等至少具有3个缩合环的共轭多环芳香族化合物(conjugated polycyclic aromatic compounds)。上述化合物的取代基为苯基、低级烷基(C1～C16)、氯基(chloro)、 溴基(bromo)、氰基(cyano)、烷氧基(alkoxy)(C1～C16)。较佳荧光物质为 9，10-双(苯乙炔(phenylethynyl))葱、1-甲氧基(methoxy)-9，10-双(苯乙炔) 葱、芘、1，5-二氯-9，10-双(苯乙炔)葱、1，8-二氯-9，10-双(苯乙炔)葱、红萤烯 红荧烯(mbrene)、一单氯及二氯取代9，10-双(苯乙炔)葱、5，12-(苯乙炔) 四苯(tetracene)、9，10-双苯基恩双苯基蒽(diphenylanthracene)、16，17-羟二己基 蒽酮紫(dihexyloxy violanthrone)，2-甲基-9，10-bis-(苯乙炔)葱、9，10-双-(4-甲 氧基苯(methoxyphenyl))-2-氯蒽(chloroanthracene)、9，10-双-(4-乙氧基苯 (ethoxyphenyl))-2-氯蒽(chloroanthracene)、16，17-蒽酮紫(didecichloxy violanthrone)、路玛近·红(LUMOGEN RED、发出红色的芘二甲酰亚胺(perylene dicarboximide)荧光剂)、路玛近·黄(LUMOGEN YELLOW、发出黄色的芘二甲 酰亚胺(perylene dicarboximide)荧光剂)、路玛近·橘(LUMOGEN ORANGE、 发出橘色的芘二甲酰亚胺(perylne dicarboximide)荧光剂)、5，12-双-(苯乙炔) 并四苯、5，6，11，12-四苯基并四苯(tetraphenyl naphthacene)及其混合物。
根据这些组合，可得到波长为300～1200nm的发射光，此外根据与催化剂等 的配合，也可控制发光反应的速度。而发光波长或发光强度，也可通过其剂量的 调整加以改变。本发明实施例中，使用两种强弱不同的荧光强度与近红外线来进 行实验。为方便叙述，较强的一方就以高亮度型称呼。
现今在治疗等方面所使用的激光波长为560～1200nm，所以化学发光反应所 得到的光的波长，乃足以涵盖上述激光的波长。其中以下列几种最为实用，IPL (Intense Pulsed Light)：560～1200nm、LLLT(低功率激光治疗：lower reactivelevel laser therapy)：830nm、用于运动伤害治疗等的激光波长：630nm、780nm、800nm、 830nm、904nm。
<化学发光剂>
本实施例使用强弱2种荧光，为方便叙述，亮度高的称为“高亮度型”、低 的称为“一般型”。荧光的发光力根据发光剂的设计而可以改变，故本实施例使 用品以下特征的发射光。
本实施例中使用日本奥美尼株式会社(OMNIGLOWJAPAN CO.LTD.)制 (CYALUME Light shape)blue(以下称为蓝荧光)、Light shape green(以下称绿 荧光)、Light shape yellow(以下称黄荧光)、Light shape orange(以下称橘荧光)、 Light shape red(以下称红荧光)5种一般型与高亮度型荧光体“高亮度型蓝荧光”、 “高亮度型绿荧光”、“高亮度型黄荧光”、“高亮度型橘荧光”、“高亮度型 红荧光”5种高亮度型荧光体。
上述5种一般型，其分光放射亮度是，红荧光为波长605nm，亮度800×10-5W/ (sr·m2·nm)以上，黄荧光为波长550nm，亮度260×10-5W/(sr·m2·nm)以 上，绿荧光为波长510nm，亮度450×10-5W/(sr·m2·nm)以上，蓝荧光为波长 450nm，亮度260×10-5W/(sr·m2·nm)以上的最高值(peak)。
上述5种高亮度型，其分光放射亮度是，高亮度型红荧光为波长660nm，亮 度0.006W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型橘荧光为波长625nm，亮度0.009W/ (sr·m2·nm)，波长525nm，亮度0.004W/(sr·m2·nm)以上、高亮度型黄荧 光为波长555nm，亮度0.011W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型绿荧光为波长520nm， 亮度0.015W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型蓝荧光为波长450nm，亮度0.007W/ (sr·m2·nm)以上的最高值。
将这些荧光测量例以图表呈现，图1(a)～图1(d)为一般型荧光，图2为 高亮度型。
<照射荧光特性>
荧光的照度随时间变化的特性以表1、表2、图3及图4表示。表1及图3表 示一般型绿荧光、蓝荧光、橘荧光、红荧光的数值。表2及图4表示高亮度型绿 荧光、橘荧光、蓝荧光、红荧光分数值。这些都将使用在实施例2至实施例7中。
表1 一般型荧光照度随时间的变化 经过时间(分) 照度单位1x 刚发光 1分钟后 5分钟后 10分钟后 15分钟后 20分钟后 25分钟后 30分钟后 一般绿 651.0 295.0 195.0 162.0 134.0 115.0 100.0 100.0 一般黄 351.3 310.0 152.0 117.7 98.3 92.3 91.7 77.3 一般蓝 268.0 141.0 74.4 54.2 45.2 40.5 36.8 33.7 一般橘 221.0 60.1 22.1 22.1 22.0 19.0 17.0 17.0 一般红 50.9 40.1 22.1 15.4 13.1 12.5 11.5 10.7
表2 高亮度型荧光照度随时间的变化 经过时间(分) 照度单位1x 刚发光 1分钟后 5分钟后 10分钟后 15分钟后 20分钟后 25分钟后 30分钟后 高亮 度绿 2940 1319 671 482 378 311 253 219 高亮 度黄 1900 1063.3 505.3 313.3 248.0 214.3 182.5 160.0 高亮 度橘 1633 403 217 180 136 106 88 75 高亮 度蓝 1166.7 260.3 157.0 117.3 89.3 76.3 62.4 55.2
实施例1
<改善血液流通>
通过化学发光反应发出的光进行照射，可扩张血管宽度，具有改善血液流通 的作用。
本实施例中使用橘荧光化学发光体。
观察实验，从15分至65分的50分钟用橘荧光照射，经过100分钟后从185 分至205分的20分钟再以橘荧光照射，血管宽度的观察以图5表示，包含其前后 共235分钟内观察的血管宽度变化。通过上述步骤可观察到，照射开始15分钟后， 血管宽度开始扩张，照射30分钟后停止照射，从45分至65分保持扩张的状态， 照射停止80分钟以上就回复到实验开始前的血管宽度，再照射后从185分至扩张 停止为止，保持扩张40分钟，停止(205分)后经过30分钟逐渐恢复到大约平常 的状态。
血管宽度的测量如以下所示。
测量方法
在恒温恒湿度的测量室内，室温23℃，湿度30％的条件下进行测量。
1.在测量室内保持10分～15分的稳定状态(稳定tranquil state)，测量左手中 指的一处固定位置。
2.在固定的部位，以橘荧光照射50分钟，间隔10分钟测量数次。
3.之后，间隔1小时后再度恢复稳定后，进行橘荧光照射。
4.照射20分钟内间隔10分钟进行测量。
使用红色荧光的化学发光体来照射前臂内侧部2个地方的皮肤后，观察照射 区域的手肘侧A部位与非照射区域的手腕侧B部位的皮肤温度变化，可发现皮肤 温度会上升而改善血液流通，同时与皮肤外用剂合并使用，可得到促进经皮吸收 的结果。其测量结果如表3所示。
5次观察的平均结果发现，在被照射区域A部位，由于红色照射温度会有0.4 ℃的上升，在照射区域周围的手腕部位，由于红色荧光的照射温度会有0.7℃的上 升。
表3 观察 A 照射部位之 测量温度℃ B 未照射部位 之测量温度℃ 照射前 1 31.9 31.7 2 32.1 31.7 3 32.1 31.7 4 32.0 31.6 5 32.1 31.8 平均 32.0 31.7 红色发光照 射5分钟后之测 量 1 32.4 32.5 2 32.4 32.5 3 32.6 32.4 4 32.3 32.3 5 32.3 32.4 平均 32.4 32.4
因此，以无发热现象的化学反应发出的光对皮肤进行照射，可发现血管宽度 会扩张，同时使照射部位及其周围部位的皮肤温度上升。
<细胞增殖>
以红荧光、蓝荧光、橘荧光3种化学反应发出的光对皮肤细胞照射之后，观 察细胞增殖的现象。其结果以图6表示。
使用橘荧光与红荧光可观察PMG(作为细胞增殖实验的指标)与同等的增殖 率。
又，PMG为左旋维生素C磷酸镁盐(L-Ascorbic Acid Phosphate Magnesium Salt N-Hydrate)的简称。
与对照组比较，PMG添加组与橘荧光照射组对细胞增殖有促进意义。
实验如以下方法进行。
1.细胞：正常人体皮肤纤维母细胞(NHF)
2.化学发光体：CYALUME Light shape blue(蓝荧光)、orange(橘荧光)、red (红荧光)发售公司；日本奥美尼株式会社
3.检验方法：
(1)将NHF2.0×104cells/well，以DMEM·10％S(+)培养基植入24孔培养 皿(24well plate)。
(2)培养5天汇合(confluence)后，交换为无色无血清DMEM培养基。
(3)以荧光照射(4小时)。正向对照为100nM PMG添加组。
(4)观察细胞型态(×40)。
(5)使用MTT试验法，以测量波长540nm、对照波长655nm进行比色分析法。 细胞增殖率以未经实验处理的对照组为100％，以下列计算式计算。
4.计算式
细胞增殖率(％)＝(〔样本添加光学浓度值(以下简称OD)(540nm)〕 -〔样本添加OD(655nm)〕)/(〔对照组OD(540nm)〕-〔对照组OD(655nm)〕) ×100
实施例2
<荧光照射下黑色素的合成>
通过荧光对细胞的照射可抑制黑色素细胞的增殖与黑色素的合成。对黑色素 细胞增殖的影响如表4及图7所示，对细胞黑色素合成的影响如表5及图8所示。
(实验方法)
1.细胞：老鼠的黑色细胞种(B16细胞)
2.化学发光体：(日本奥美尼株式会社制)一般型blue(蓝荧光)、orange(橘 荧光)、red(红荧光)、green(绿荧光)、yellow(黄荧光)；高亮度类型橘色 (橘色荧光)、红色(红色荧光)、绿色(绿色荧光)
3.检验方法：
(1)将B16细胞3.6×103cells/well，以MEM·10％S(+)．葡萄糖胺培养基 植入24孔培养皿(24well plate)。n＝8
(2)培养5天之后，以MEM·10％S(+)·茶碱(theophylline)培养基交换。
(3)将荧光发光体与培养皿接触并照射荧光，一般型为4小时，高亮度型为 30分钟。对照组为非荧光照射组，正向对照组为1mM维生素C(抗坏血酸)添 加组。
(4)照射3天后回收细胞，用0.1％SDS的生理食盐水将细胞溶解，测量260nm (细胞量的指标)和475nm(黑色素量的指标)的吸光度，算出细胞增殖率和每 单位细胞的黑色素合成率。
B16细胞增殖率如表4及图7所示，每单位细胞的黑色素合成率如表5及图 8所示。
4.计算式
B16细胞增殖率(％)＝样本吸光值(以下简称Abs)(260nm)/对照组 Abs(260nm)×100
每单位细胞的黑色素合成率(％)＝〔样本(475nm)/样本(260nm)〕 /〔对照组Abs(475nm)/对照组Abs(260nm)〕×100
表4 处理 对照 1mM维 生素C 一般蓝 一般绿 一般 橘 一般 红 一般 黄 高亮度 绿 高亮度橘 B16 细胞增殖 率(％) 100 21.42 97.40 105.78 98.30 67.21 97.25 93.28 80.86 S.D. 2.78 18.87 7.42 10.37 8.99 36.38 7.17 4.75 11.10 明显差异 - p＜0.001 无 无 无 p＜ 0.05 无 p＜0.01 p＜0.01
表5 处理 对照 1mM维 生素C 一般蓝 一般 绿 一般 橘 一般红 一般黄 高亮 度绿 高亮度 橘 黑色素合 成率(％) 100 65.28 85.12 92.77 93.88 94.08 92.62 92.48 103.86 S.D. 6.77 14.91 12.53 7.71 6.10 5.91 4.72 8.37 4.66 明显差异 - p＜0.001 p＜0.05 无 无 无 p＜0.05 无 无
从表4及图7的结果显示，以一般型红荧光、高亮度型的绿荧光、高亮度型 橘荧光照射，可明显达到抑制黑色素细胞增加的效果。
以红荧光、高亮度型绿荧光、橘荧光对皮肤照射，可清楚了解其抑制黑色素 瘤细胞增殖、黑色素细胞增殖的效果。从以上本发明的实施例，可获得美白效果。
从表5及图8的结果显示，蓝荧光、黄荧光照射群，可明显抑制每单位细胞 黑色素的合成。
和紫外线不同，以荧光照射不会促进黑色素合成，而蓝、黄荧光则可达到明 显抑制黑色素合成的效果。尤其是照射蓝色荧光，可达到20％抑制黑色素合成的 效果。
以一般型红荧光、高亮度型绿荧光、高亮度型橘荧光照射，可抑制黑色素细 胞的增殖。由于细胞数目减少，全体的黑色素量也因而减少。
因为照射荧光不会抑制纤维母细胞的增殖，反而可选择性地抑制活性化黑色 素细胞增殖，而达到美白效果。
实施例3
<黑色索合成实验>
(实验方法)
对三维皮肤模型(黑色素调光器(MEL-300A))(MatTek公司制)照射紫外 线0、48、96小时后，分别以1W/m2的强度照射1J/m2的UVB及/或高亮度型蓝色 应关(日本奥美尼株式会社制)1小时，培养7天。
将三维皮肤模型以1N(标准溶液浓度)氢氧化钠煮沸溶解，测出黑色素量的 指标为350nm的吸光度，以下列算式算出黑色素合成率，其结果如图9所示。
以未照射UVB、高亮度型蓝荧光中任何一种的组织的溶解液为对照组。
算式：〔黑色素合成率〕＝〔各处理时组织溶解液在350nm的吸光度〕/〔对 照组组织溶解液在350nm的吸光度〕×100
对于人体三维皮肤模型，以UVB照射会促进黑色素合成，但以高亮度蓝荧光 照射可达到抑制因UVB照射所造成的黑色素合成。因此，即使皮肤暴露在阳光等 紫外线的环境下，之后再以蓝色荧光等对皮肤进行照射，就可抑制黑色素的合成、 皮肤变黑，及斑点、雀斑的形成，达到美白效果，使皮肤可达到抗光老化。
实施例4
<人体表皮黑色素细胞增殖实验>
(实验方法)
将人体表皮黑色素细胞20000cells/cm2使用添加HMGS(黑色素细胞生长成分) 的人体表皮黑色素细胞用基础培养基medium154S(仓敷纺织株式会社制)植入24 孔培养皿。
经过24小时培养后，将样本替换至为添加有橄榄叶萃取物的培养基(如下记 制造例所述)，或作为空白样本的50％丁二醇水溶液的培养基，以高亮度蓝荧光 (日本奥美尼株式会社制)照射1小時后，放置培养72小时。
用磷酸生理食盐水(以下称PBS(-))洗净细胞后，对含有1W/W％的月 桂基(dodecyl)硫酸钠且以PBS(-)溶解得到的细胞溶解液，测量260nm的吸 光度，以下列算式计算出细胞增殖率。
以添加空白样本、不照射高亮度蓝荧光的细胞溶解液为对照组。
橄榄叶萃取物的添加浓度与黑色素细胞的增殖率两者的关系，该结果如图10 中所示。
橄榄叶萃取物
(橄榄叶萃取物制造例)
将1公斤干燥的橄榄叶以90W/W％乙醇浸泡1周后，再浓缩、冷冻干燥后， 用50W/W％丁二醇水溶液溶解为1W/W％。
算式：〔细胞增殖率〕＝〔样本添加时吸光度(260nm)〕/〔对照组吸光度 (260nm)〕×100
对于人体表皮黑色素细胞的增殖，以高亮度蓝荧光照射1小时后虽还看不出 改变，但添加橄榄叶萃取物后再以高亮度蓝荧光照射，人体表皮黑色素细胞的增 殖率会明显(添加0.5％橄榄叶萃取物时)降低。
与高亮度蓝荧光照射合并使用时，橄榄叶萃取物对降低人体表皮黑色素细胞 增殖率具有加倍的效果。因此，以蓝荧光照射皮肤，可抑制人体表皮黑色素细胞 的增殖，进而可达到美白的效果。
实施例5
<促进纤维母细胞增殖及胶原蛋白合成实验>
使用一般型红荧光、高亮度型橘荧光照射纤维母细胞，可促进纤维母细胞的 增殖及纤维母细胞中胶原蛋白的合成。关于纤维母细胞的实验结果，如表6及图 11所示，关于胶原蛋自的合成的实验结果，如表7及图12所示。
(实验方法)
1.细胞；纤维母细胞(NHF)
2.化学发光体：(日本奥美尼株式会社制)一般型红(红荧光)、高亮度型 橘((橘荧光)
3.胶原蛋白数量测量：以Takara PIP kit工具(宝生物工程株式会社制)测量I 型胶原蛋白碳端原胜肽(以下称PIP)数量。
4.检验方法：
(1)将NHF2.0×104cells/well以DMEM·10％S(+)培养基植入24孔培养皿
(2)培养5日后，替换为无色无血清DMEM培养基。
(3)以荧光发光体接触24孔培养皿，照射荧光(30分钟)。正向对照组为 100mM PMG添加组。
(4)开始照射24小时后，回收培养上清液。
以Takara PIP kit工具(宝生物工程株式会社制)测量PIP数量，接着使用MTT 试验法，以测量波长540nm、对照波长655nm进行比色分析法。细胞增殖率以未 经实验处理的对照组为100％，以下列计算式计算。
细胞增殖率(％)＝(〔样本添加OD(540nm)〕-〔样本添加OD(655nm)〕) /(〔对照组OD(540nm)〕-〔对照组OD(655nm)〕)×100
胶原蛋白合成率使用PIP数量与MTT试验法的结果，以下列算式计算。
胶原蛋白合成率(％)＝{样本PIP数量/(〔样本添加OD(540nm)〕- 〔样本添加OD(655nm)〕)}/{对照组PIP数量/(〔对照组OD(540nm)〕 -〔对照组OD(655nm)〕)}×100
表6 处理 对照 100mM PMG 高亮度橘 荧光 红荧光 100mM PMG +高亮度橘荧 光 100mMPMG+ 红荧光 纤维母 细胞增 殖率 (％) 98.3 138.2 122.2 126.7 168.6 153.0 S.D. 8.6 23.0 6.4 3.4 4.0 2.3 明显差 异 VS对照 p＜0.01 p＜0.01 p＜0.01 p＜0.001 p＜0.01 VSPMG - - - p＜0.001 p＜0.01
由表6及图11的纤维母细胞增殖实验结果显示，用一般型红荧光、高亮度型 橘荧光照射24小时后，在测量细胞增殖率的促进胶原蛋白合成群中，一般型红荧 光、高亮度型橘荧光同样都具有明显促进纤维母细胞增殖的效果。和PMG合并使 用时，一般型红荧光、高亮度型橘荧光的照射下，纤维母细胞也有明显增殖现象。
表7 处理 对照 PMG100mM 高亮度橘荧光 红荧光 PMG 100mM+高亮 度橘荧光 PMG 100mM +红荧光 胶原 蛋白合成 率(％) 100.0 127.6 127.8 129.0 119.4 139.1 S.D. 6.2 35.8 12.9 15.5 3.4 12.2 明显差异 VS对照 p＜0.05 p＜0.001 p＜0.05 p＜0.001 p＜0.001 VS PMG - - - 无 无
由表7及图12的测量数据显示，每单位细胞的胶原蛋白合成率中，在一般型 红荧光、高亮度型橘荧光照射群具有明显促进PMG与相同程度的胶原蛋白合成的 效果。
以一般型红荧光、高亮度型橘荧光照射纤维母细胞，可促进纤维母细胞的增 殖及胶原蛋白的合成。又，和PMG合并使用时，更加能促进纤维母细胞的增殖、 胶原蛋白的合成。因此，以一般型红荧光、高亮度型橘荧光等化学发光荧光对皮 肤照射，可增加肌肤中胶原蛋白的数量、增加肌肤活性、抚平皱纹、改善弹性与 柔软度、达到防止老化的效果。又，与含有PMG的皮肤外用剂合并使用，则可获 得加倍的改善效果。
实施例6
<荧光照射下纤维母细胞的增殖>
以各种荧光对纤维母细胞进行照射，可了解其对纤维母细胞具有增殖 (proliferation)作用。然后进行以下实验，测量结果如图13、14、15所示。总结 的评价结果如表8所示。(实验方法)
1.细胞：纤维母细胞(NHF)
2.化学发光体：(日本奥美尼株式会社制)一般型荧光blue(蓝荧光)、orange (橘荧光)、red(红荧光)、yellow(黄荧光)、green(绿荧光)、高亮度型荧 光orange(橘荧光)、高亮度型荧光green(绿荧光)
3.检验方法：
(1)将NHF2.5×104cells/well以DMEM·10％S培养基植入96孔培养皿。
(2)次日，制备无色DEME 5％，并替换为含有1％FBS的培养基。
(3)以化学发光体接触培养皿并照射荧光。以荧光照射0.5、1、2、4小时， 高亮度型则只照射0.5小时。以5％CO2、37℃的状态培养5天。
(4)使用MTT试验法，以测量波长540nm、对照波长655nm进行比色分析法。 细胞增殖率以未经实验处理的对照组为100％，以下列计算式计算。
细胞增殖率(％)＝(〔样本添加OD(540nm)〕-〔样本添加OD(655nm)〕) /(〔控制组OD(540nm)〕-〔控制组OD(655nm)〕)×100
表8 DMEM培 养基 1％FBS 5％FBS 照射时间 (小时) 0.5 1 2 4 0.5 1 2 4 一般 青 橘 (*) (**) 红 * 绿 *** *** ** ** ** 黄 *** * 高亮 度 橘 * 绿 ** ***
明显差异(()内为负的明显差异)
由图13、图14及表8中一般型荧光照射的统计结果显示，在5％FBS培养基 以绿荧光照射1小时、4小时，以黄荧光照射2小时，都有明显促进细胞增殖的 效果。
在1％FBS培养基以红荧光照射2小时，以绿荧光照射0.5小时、1小时、4 小时，以黄荧光照射2小时，都有明显促进细胞增殖的效果。
在黄色荧光照射组可观察得出，到2小时为止有随照射时间增长而效果增加 的倾向。
由图15及表8中以高亮度型(0.5小时照射群)荧光照射的测量结果数据显 示，在使用高亮度型、1％FBS·DMEM培养基的组别中，以橘荧光与绿荧光照射 组具有明显促进细胞增殖的效果。尤其是以绿色荧光照射，约有1.5倍的增殖效 果。
添加5％FBS培养基，只照射绿荧光则具有明显促进细胞增殖的效果。
本实验组中，FBS浓度越低，则越容易出现促进细胞增殖的效果。
使用一般型红荧光、绿荧光、黄荧光，具有细胞活化效果，而对于绿荧光而 言，不论FBS浓度的高低，都具有细胞活化效果。
又，高亮度型中橘荧光、绿荧光具细胞活化效果，同样的在高浓度FBS的情 形下，以绿色荧光最具活性。根据以上的结果，可推断出最具活性的荧光色为绿 色。
实施例7
<增进光解酶活性实验>
细胞因UVB的照射而使DNA受损，产生嘧啶二聚物(pyrimidine dimer)。 如此反复累积下，就成为所谓的光老化。拥有光合成作用的原核生物，存有修复 这种DNA盐基之二聚作用的光解酶(photolyase)，已发现该光解酶会由于可见 光而活化(香妆品科学研究开发专门志期刊2002年6月号，49～53页)，但在 荧光发光体照射下会提高其活性的报告则尚未有人提出。
探讨高亮度蓝色荧光照射对光解酶活性的作用，并探讨荧光发光体与化妆品 有效成份合并使用下的效果。
(实验方法)
将人体表皮硬蛋白质细胞7.0×105cells/well植入φ60mm培养皿(dish)，经 一晚的培养后替换为Hanks(-)培养基，以0.5J/m2(1W/m2)UVB照射。再替换 为添加Humedia-KG的Epilife培养基(仓敷纺织株式会社制)，添加样本(空白 样本为50％丁二醇，添加光解酶0.04Units、0.4Units(嘧啶二聚物修复活力))后， 以高亮度蓝荧光(奥美尼株式会社制)照射1小时。以不添加光解酶、不照射高 亮度型蓝荧光为对照组。
以UVB照射6小时后，使用DNA提取试剂(DNAzol reagent)(Invitrogen公 司制)根据规定方法从细胞回收DNA。
嘧啶二聚物数量的测量结果如图16所示。
(测量嘧啶二聚物数量的方法)
用该DNA以下列所示的方法测量嘧啶二聚物的数量。
将1％硫酸鱼精蛋白(protamine sulfate)液植入96孔培养皿，在37℃下培养 2小时。用无菌水洗净培养皿，干燥后将提取的DNA分别以2μg植入各培养皿， 在于37℃下培养20小时。接着以含有0.05％Tween20的PBS(PBS-T)液洗净后， 放入以含有2％脱脂乳的PBS所制备的胸线嘧啶二聚体单株抗体中，在37℃下培 养1小时。然后用PBS-T洗净，植入HPR结合山羊抗鼠标IgGd抗体，在37℃下 培养1小时。继续用PBS(PBS-T)洗净后，另外以PBS(-)洗净，添加3，3’，5，5’ 四甲基联苯胺(tetramethylbenzidine)溶液(1-StepTMTurbo TMB-ELISA(pierce公 司制))，以室温培养后，以2N硫酸使其停止反应。测量在450nm的吸光度， 以下列算式算出每2μg DNA的嘧啶二聚物含有率。
光解酶使用蓝绿藻(cyanobacteria)属的蓝细菌(anacystic nidulans)，添加 AGI Dermatics公司制PHOTOSOMES(R)，其中含有41Units/mL的光解酶。
算式：〔嘧啶二聚物含有率(％)〕＝〔样本添加时吸光度(450nm)〕/ 〔对照组吸光度(450nm)〕×100
图16为表示测量的嘧啶二聚物含有率。
未添加光解酶、以高亮度蓝荧光照射组的嘧啶二聚物的含有率约为对照组的 1/2。
添加0.04Units、0.4Unit光解酶时，嘧啶二聚物的含有率与对照组相比，也约 为1/2，但光解酶的添加量即使从0.04Units增加为10倍的0.4Units，在降低嘧啶 二聚物含有率的效果上并无差异。然而，高亮度蓝色荧光与光解酶合并使用时， 则嘧啶二聚物的含有率会降低，尤其是，以0.4Units与高亮度型蓝色荧光合并使 用时，嘧啶二聚物的含有率可降低至约为对照组的1/4。和对照组相比，可以明显 降低嘧啶二聚物含有率的是以高亮度蓝荧光照射、0.04Units光解酶与高亮度型蓝 荧光合并使用组、及0.4Units光解酶与高亮度型蓝荧光合并使用组，而光解酶与 高亮度蓝荧光合并使用时，可达到加倍抑制光老化的效果。
特别地，化学发光的照射或光解酶的作用可达到抑制光老化的效果。高亮度 型蓝荧光的照射，或与光解酶合并使用下照射高亮度蓝荧光，可抑制因紫外线照 射造成皮肤细胞的DNA损伤，进而抑制光老化。
实施例8
<化学发光的近红外线照射下血流增加实验>
以化学发光反应得到的近红外线对皮肤照射，观察血流量的变化。
以化学发光得到的近红外线，其测量例表示时如图17、18所示。
其实验条件如表9所示，影像例如图19所示，各受验者的血流量变化状态如 图20所示。
表9 近红外线发光体对人体照射实验 测量条件 使用全天候室 湿度 35％ 室温 24℃±3 室外光 尽可能的遮蔽住 (测量时不使用照明) IR化学发光体 空白样本样品 日本奥美尼株式会社 特别订制品 CYALUME 6英吋 棒状型 未发光之 日本奥美尼株式会社CYALUME 6英吋 棒 状型 照射方法 棒状物发光后 上下摇动5次 接触肌肤进行照射 受验者人数 5名 在测量10分钟前使全天候室内抱持稳定 测量机器 Permied公司PIM ∏激光杜卜勒血流监视计 (Laser Doppler Blood-Flow Monitor) 测量位置 左前臂 从测量用探头开始5cm距离 测量范围3cm×3cm IR化学发光体 近红外线 测量次数 测量3次 1：测量前 2：近红外线化学发光体照射15分钟后 3：照射完10分钟后 影像处理 根据测量者调整初期数值 在第2、3次测量时调整初期数值以观察影 像变化 影像判定 血流量越大，可表示出亮度越高的影像 影像解析 求出影像亮度的平均值 以近红外线照射前的亮度为1，算出近红外 线照射后的亮度，再比较两者
例如受验者其中一人在测量前，照射15分钟后，照射15分钟后再经过10 分钟的影像，如图19(a)(b)(c)所示，从图中可观察出影像的明亮部份增加， 并可看出即使照射结束经过10分钟，血流量依旧为增加的情况。
从图20中将影像数值化而表示各受验者血流量的变化表，可发现照射后比照 射前血流量增加1.5倍至3倍。甚至照射结束10分钟后所有人依旧没有下降而为 增加的情况，故可得知其短期的照射而可达到长期的效果。
实施例9
<使用经验实验>
使用短边为50mm、长边为70mm的椭圆形、且中央部份厚度为8mm的光透 过性薄膜制的绿荧光袋，使用同形状的非荧光袋为对照物。
受验者的5人，右边脸颊使用非荧光袋(空白样本)，左边脸颊使用发出绿 光的绿荧光袋，1天1次，于晚上进行30分钟对左右两边脸颊的接触，持续进行 5天，由实验结果可得知其对肌肤活性的效果，结果如表10所示。
其结果为，从第1天开始所有人都能感受到肌肤活性的改善，第3天有3人、 第5天有4人感到活性改善。没有感觉变化的为0人，因此可确定以化学发光反 应的荧光照射对肌肤活性的改善具有效果。
以绿荧光照射，并没有感觉不适的人。
表10 有感觉 一点点感觉 没有感觉 第1天 5 第3天 3 2 第5天 4 1
【专利文献1】特开2004-733号公报
【专利文献2】特开2003-12487号公报
【专利文献3】特开平11-342213号公报
上述作用效果，也可单独用于美容或化妆乃至于医疗用途，且可与经皮吸收 剂或口服剂组合从而有助于促进其吸收。
化学发光反应发出的光，是无发热现象的光，因为具有对于有形状、大小、 凹凸的皮肤表面的适应性，以及使用时间、保存性等特性，故十分安全、便利。 此化学发光可配合发光剂，以及调整波长或强度、时间，进而控制其作用效果。 发出的光则有各种颜色的荧光、红外线类型的光。
在美容用途上，对于解决老化现象而带来的明显班点、雀斑、肤色暗沉、黑 眼圈、肌肤亮度减少、肌肤活性降低、细纹、皱纹、皮肤松弛这些问题相当有成 效。
关于老化现象的原因，有例如血液循环不良使肤色不够红润、黑色素沉淀累 积、肌肤弹性降低而造成皮肤表面凹凸不平产生阴影、角层肥厚使肌肤透明感降 低、皮肤表面的不规则反射使光泽降低、随年龄增长肤色发黄等。这些现象的直 接表现即是出现“肌肤暗沉”的现象，在不了解其发生原因的情况下，仅仅通过 化妆来掩饰有难度。
通过上述化学发光反应发出的光进行照射，可促进血液流通而提高透明感及 光泽、促进新陈代谢，以及激活细胞，故能够轻松应对暗沉到老化现象的问题。
此化学发光对皮肤的照射，可应用于化妆领域、医药外部用品、化妆剂、美 容剂、化妆用品、美容用品、医疗用品、美容皮肤科、运动伤害治疗、肌肉疲劳 治疗等多方面。
在其它应用方面，利用高亮度发光体，可用于调整日常节律(生理时钟)及 自律神经；利用其促进细胞增殖的优点，可用于促进伤口快速恢复的用品上；可 应用于发光创伤带或治痘修护化妆用具等；其使皮肤温度上升和改善血液流通的 作用，具有促进代谢、除去皮肤的老旧废物、或促进毛发生长的效果；另将此功 能与经皮吸收剂组合，可促进经皮吸收剂的效果。例如与面膜等护肤产品或热敷 贴药等组合，可发挥极大效用。
此化学发光剂可存储于轻薄柔软的包装体内，包装体一侧设有发光面，其可 与皮肤直接接触，发光面以透光性的材质为佳，且存储化学发光剂的包装体的体 积大小可随使用部位而制作。又，发光体的载体可使用无纺布或海绵，设定其整 体或仅有其与皮肤的接触面为柔软材质，使其能给皮肤好的触感。对于柔软性材 质，可使用硅树脂等柔软透明的合成树脂薄膜。
认为以化学发光反应发出的光对皮肤进行照射可达到美白作用的效果。化学 发光与紫外线不同，以荧光进行照射并不会促进黑色素合成，反而可抑制黑色素 产生细胞的增殖，具有抑制细胞内黑色素合成的功效。，例如蓝荧光、黄荧光、 绿荧光、橘荧光、红荧光，进行照射具有不同的效果。
蓝色荧光与黄色荧光具有抑制黑色素合成的效果，尤其是只用蓝色荧光照射， 就可达到20％抑制黑色素合成的效果。
红荧光、高亮度型的绿荧光、高亮度型的橘荧光则可以抑制黑色素细胞增殖， 在细胞数目减少的时，黑色素整体的量也同时减少。
荧光的照射可选择性地抑制活性黑色素细胞，使黑色素产生细胞无法增殖， 且抑制各细胞中黑色素的合成，进而达到美白效果，故可利用化学发光来进行美 白化妆或美白美容。
化学发光反应发出的光与经皮吸收剂组合使用后的效果，可以通过橄榄叶萃 取物、蓝色荧光的实验结果来证实。
在经皮吸收或经口吸收橄榄叶萃取物的状态下，以高亮度型蓝色荧光照射后， 人体表皮黑色素细胞的增殖率降低，故涂抹或口服橄榄叶萃取物与高亮度型蓝色 荧光的照射两者并用能降低人体表皮黑色素细胞的增殖率，进而达到美白效果。
橄榄叶萃取物当作为经皮吸收剂使用时，具体有液体化妆料成分或涂敷剂成 分等使用方式。
以化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，可抑制因紫外线照射所造成的黑 色素合成以及暴露在紫外线下所造成的皮肤变黑，发挥美白、美容的功能。
UVB(紫外线B)照射虽然会促进黑色素合成，但以高亮度蓝色荧光照射后， 证实其可抑制UVB照射对黑色素合成的促进。因此，皮肤即使暴露在阳光等紫外 线的环境下，之后再以高亮度蓝色荧光等化学发光反应发出的荧光对皮肤进行照 射，就可抑制黑色素的合成、皮肤变黑，以及斑点、雀斑的形成。
通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，发现可达到预防皮肤老化的效 果。关于皮肤老化的原因有，纤维母细胞再生能力衰退、胶原蛋白合成效果变差。 通化学发光对皮肤进行照射，证实具有促进纤维母细胞增殖、胶原蛋白合成的功 能。此处的化学发光，例如为橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光。
例如，以橘荧光、红荧光、绿荧光、黄荧光、高亮度型橘荧光、高亮度型绿 荧光进行照射，可帮助纤维母细胞增殖，促进纤维母细胞的胶原蛋白合成。
化学发光与经皮吸收剂或经口吸收剂组合使用后，证实其可促进纤维母细胞 增殖及胶原蛋白合成。其中可使用抗坏血酸衍生物作为其组合使用剂。
通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，皮肤中的胶原蛋白量会增加、 肌肤恢复紧致、抚平皱纹、改善肌肤弹性及柔软度等，可达到预防老化的效果。 此外，与含有坏血酸衍生物等试剂组合使用时，更可发挥倍增的改善效果。在此 可利用液体化妆料或面膜霜、口服剂作为组合用剂。
通过化学发光反应发出的光对皮肤进行照射，发现可抑制皮肤光老化。
细胞在UVB照射下，会使DNA受到损伤而产生吡啶二聚物。此情况反复进 行就成为所谓的光老化。在拥有光合成能力的原核生物中，存在有修复此DNA盐 基之二聚作用(dimerization)的光解酶，通过化学发光反应发出的光进行照射，证实 可实现此光解酶的活化。
例如，以高亮度型蓝色荧光照射，可降低吡啶二聚物含有率。此外，将可有 助于降低吡啶二聚物含有率的光解酶与高亮度型蓝色荧光合并使用时，更可加倍 降低吡啶二聚物含有率，增强抑制光老化的效果。
以各种荧光照射，发现可促进纤维母细胞增殖。
贫营养化状况下以化学发光照射，可促进纤维母细胞增殖，证实化学发光的 功能。例如，使用一般型的红荧光、绿荧光、黄荧光、高亮度型橘荧光、高亮度 型绿荧光进行照射，发现具有细胞活化效果。其中活性最佳的乃是绿色荧光。
通过化学发光反应发出的光进行照射，可增加血液流通量。
通过化学发光反应发出的光对皮肤机械能照射，可增加血液流通量，可直接 改善血液流通状况、提高皮肤温度，对于促进新陈代谢、促进经皮吸收效果、增 进照射处对口服剂的功用，都可通过改善血液流通而达成。
有关化学发光反应发出的光，例如可使用近红外线或橘荧光。
<化学发光体>
化学发光系利用在化学上会产生光的二元系统(two component system)来进 行，一般，系使被称为「草酸盐(oxa1ate)」(草酸盐或草酸盐酯)及「活化剂 (activator)」之两种化学溶液成分产生化学反应。然后产生化学荧光。
上述双成分，可以使用各种方法在活化前进行物理分离。大部分情况下，将 含有一种成分的封闭易碎玻璃容器，收容在含有另一种成分外侧为柔软的容器内。 此外部容器为内包有第2成分及充填易碎玻璃容器而使其封闭，其与内侧玻璃容 器的密接，例如弯曲外部容器所产生的力量造成玻璃容器被破坏，则第1成分就 被释放出来，使第1和第2成分混合后发光。化学荧光发光装置的目的在于使得 可使用的光传送出来，所以外部容器通常都使用聚乙烯、聚丙烯、硅树脂等透明 或半透明材料来构成，让化学荧光系统所产生的光可透过其容器壁。又，根据化 学荧光用组合物不同，可产生各种色彩的光。此装置也可设计成让光只从特别选 择的部位透过，且于构成容器的包装要素上，为适应照射部位其材质可使用柔软 性薄膜。
有关化学发光，过去已有各种相关发明被揭示。例如，日本特开2003-238823 号公报(化学荧光组合物)、日本特开2002-138278号公报(化学发光系统)、日 本特开平11-045602号公报(化学发光体)、日本特表2003-532253号公报(化学 发光法的发光单元)等发明。
化学发光体之组合物，系以调配出荧光剂的A溶液，与调配出氧化剂的B溶 液所构成。A溶液是由酯溶液与荧光物质(fluorescent substance)、邻苯二甲酸二 丁酯(dibutyl phthalate)等所构成；B溶液是由过氧化氢、催化剂、邻苯二甲酸丁 酯(butyl phthalate)等所构成。此A溶液与B溶液在使用前各自分开存储同一个 容器内，使用时再混合而产生发光反应。
关于两种成分，举例来说，可使用过氧化氢成分与草酸盐酯成分作为荧光体 成分，化学发光催化剂媒(catalyst)则可使用水杨酸锂(Lithium Salicylate)等羧 酸锂盐(Lithium Carboxylate)催化剂等二元发光系统用催化剂(catalyst)。通过二元 发光系统用催化剂(catalyst)，可降低反应时的活化性能量，也能减少发光过程的温 度依赖性。
其中之一的成分可浸渍于无纺布或海绵等后使用，可提高柔软性与对身体凹 凸的适应性。
此外关于具体的成分，可使用以下日本特开2003-238823号公报中所揭示的成 分。化学发光反应之成分溶液含有作为化学发光反应成分之草酸盐或活化剂。草 酸盐(草酸盐或草酸盐酯)若是一般化学发光反应所使用则没有特别限制，可为 双(2，6-二氯(dichloro)-4-硝基苯(nitrophenyl))草酸盐、双(2，4，6-三氯苯基 (trichlorophenyl))草酸盐、双(3-三氟甲基(trifluoromethyl)-4-硝基苯(nitrophenyl)) 草酸盐、双(2-甲基(methyl)-4，6-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸盐、双(1，2- 二甲基(dimethyl)-4，6-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸盐、双(2，4-二氯苯基 (dichlorophenyl))草酸盐、双(2，5-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸盐、双(2- 甲酰基(formyl)-4-硝基苯(nitrophenyl))草酸盐、双(五氯苯(pentachlorophenyl)) 草酸盐、双(1，2-二氢(dihydoro)-2-羰基(oxo)-1-啶基(pyridyl))乙二醛(glyoxal)、 双-N-phthalmydil oxalate)、双(2，4，5-三氯(trichloro)-6-carbopentoxyphenyl)草酸 盐、双(2，4，5-三氯(trichloro)-6-carbobutoxyphenyl)草酸盐、双(2，4，6-三氯苯基 (trichlorophenyl))草酸盐、双(2，4，5-三氯(trichloro)-6-pentoxyphenyl)草酸盐。
活化剂则使用一般过氧化物成分。过氧化物成分包含过氧化氢化合物溶液、 过氧化氢化合物、或以稀释剂稀释过的过氧化化合物。上述过氧化氢化合物，包 含过氧化氢与产生过氧化氢的化合物。过氧化物成分中，以过氧化氢为佳、过氧 化氢与溶剂(solvent)的溶液，亦可使用过硼酸钠、过氧化钠等无水过氧化氢化合物。 又，能产生过氧化氢的任何化合物皆可使用。形成活化剂溶液的溶剂(solvent)虽没 有特别限制，但以柠檬酸三乙酯(triethyl citrate)和邻苯二甲酸二甲酯(dimethyl phthalate)为佳。
第1聚合物树脂粒子和第2聚合物树脂粒子可使用各种聚合物，一般没有限 定，但可为聚乙烯(polyethylene)、聚丙烯(polypropylene)、聚氯乙烯(polyvinyl chlorie)、聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate)、聚乙烯苯甲酸(polyvinyl benzoate)、聚醋酸乙烯(polyvinyl acetate)、聚乙烯吡咯烷酮纤维素(cellulose polyvinylpyrrolidone)、聚丙烯酰氨(polyacrylamide)、环氧化物(epoxide)、硅 类、聚乙烯丁醛(polyvinyl butyral)、聚氨酯(polyurethane)、尼龙、聚甲醛(polyacetal)、 聚碳酸酯(polycarbonate)、聚酯(polyester)及聚醚(polyether)。又，可使用架 桥聚合物(cross polymer)，例如聚苯乙烯(polystyrene)-聚乙烯苯(polyvinyl benzene)、聚丙烯酰氨-聚甲烯双丙烯酰胺(polymethylene bisacrylamide)、聚丁 二烯(polybutadiene)共聚物等。其中以聚氯乙烯树脂为佳。
关于荧光体的成分，可使用以下如日本特开2002-138279号公报中所揭示的成 分。例如，蒽(anthracene)、取代的蒽、苯并蒽(benzo anthracene)、菲(phenanthrene)、 取代的菲、四并苯(naphthacene)、取代的四并苯、五并苯(penthacene)、取代 的五并苯、芘(perylene)、取代的芘、酮紫(Violanthrone)、取代的酮紫取代基 等至少具有3个缩合环的共轭多环芳香族化合物(conjugated polycyclic aromatic compounds)。上述化合物的取代基为苯基、低级烷基(C1～C16)、氯基(chloro)、 溴基(bromo)、氰基(cyano)、烷氧基(alkoxy)(C1～C16)。较佳荧光物质为 9，10-双(苯乙炔(phenylethynyl))葱、1-甲氧基(methoxy)-9，10-双(苯乙炔) 葱、芘、1，5-二氯-9，10-双(苯乙炔)葱、1，8-二氯-9，10-双(苯乙炔)葱、红萤烯 红荧烯(mbrene)、一单氯及二氯取代9，10-双(苯乙炔)葱、5，12-(苯乙炔) 四苯(tetracene)、9，10-双苯基恩双苯基蒽(diphenylanthracene)、16，17-羟二己基 蒽酮紫(dihexyloxy violanthrone)，2-甲基-9，10-bis-(苯乙炔)葱、9，10-双-(4-甲 氧基苯(methoxyphenyl))-2-氯蒽(chloroanthracene)、9，10-双-(4-乙氧基苯 (ethoxyphenyl))-2-氯蒽(chloroanthracene)、16，17-蒽酮紫(didecichloxy violanthrone)、路玛近·红(LUMOGEN RED、发出红色的芘二甲酰亚胺(perylene dicarboximide)荧光剂)、路玛近·黄(LUMOGEN YELLOW、发出黄色的芘二甲 酰亚胺(perylene dicarboximide)荧光剂)、路玛近·橘(LUMOGEN ORANGE、 发出橘色的芘二甲酰亚胺(perylne dicarboximide)荧光剂)、5，12-双-(苯乙炔) 并四苯、5，6，11，12-四苯基并四苯(tetraphenyl naphthacene)及其混合物。
根据这些组合，可得到波长为300～1200nm的发射光，此外根据与催化剂等 的配合，也可控制发光反应的速度。而发光波长或发光强度，也可通过其剂量的 调整加以改变。本发明实施例中，使用两种强弱不同的荧光强度与近红外线来进 行实验。为方便叙述，较强的一方就以高亮度型称呼。
现今在治疗等方面所使用的激光波长为560～1200nm，所以化学发光反应所 得到的光的波长，乃足以涵盖上述激光的波长。其中以下列几种最为实用，IPL (Intense Pulsed Light)：560～1200nm、LLLT(低功率激光治疗：lower reactivelevel laser therapy)：830nm、用于运动伤害治疗等的激光波长：630nm、780nm、800nm、 830nm、904nm。
<化学发光剂>
本实施例使用强弱2种荧光，为方便叙述，亮度高的称为“高亮度型”、低 的称为“一般型”。荧光的发光力根据发光剂的设计而可以改变，故本实施例使 用品以下特征的发射光。
本实施例中使用日本奥美尼株式会社(OMNIGLOWJAPAN CO.LTD.)制 (CYALUME Light shape)blue(以下称为蓝荧光)、Light shape green(以下称绿 荧光)、Light shape yellow(以下称黄荧光)、Light shape orange(以下称橘荧光)、 Light shape red(以下称红荧光)5种一般型与高亮度型荧光体“高亮度型蓝荧光”、 “高亮度型绿荧光”、“高亮度型黄荧光”、“高亮度型橘荧光”、“高亮度型 红荧光”5种高亮度型荧光体。
上述5种一般型，其分光放射亮度是，红荧光为波长605nm，亮度800×10-5W/ (sr·m2·nm)以上，黄荧光为波长550nm，亮度260×10-5W/(sr·m2·nm)以 上，绿荧光为波长510nm，亮度450×10-5W/(sr·m2·nm)以上，蓝荧光为波长 450nm，亮度260×10-5W/(sr·m2·nm)以上的最高值(peak)。
上述5种高亮度型，其分光放射亮度是，高亮度型红荧光为波长660nm，亮 度0.006W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型橘荧光为波长625nm，亮度0.009W/ (sr·m2·nm)，波长525nm，亮度0.004W/(sr·m2·nm)以上、高亮度型黄荧 光为波长555nm，亮度0.011W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型绿荧光为波长520nm， 亮度0.015W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型蓝荧光为波长450nm，亮度0.007W/ (sr·m2·nm)以上的最高值。
将这些荧光测量例以图表呈现，图1(a)～图1(d)为一般型荧光，图2为 高亮度型。
<照射荧光特性>
荧光的照度随时间变化的特性以表1、表2、图3及图4表示。表1及图3表 示一般型绿荧光、蓝荧光、橘荧光、红荧光的数值。表2及图4表示高亮度型绿 荧光、橘荧光、蓝荧光、红荧光分数值。这些都将使用在实施例2至实施例7中。
表1 一般型荧光照度随时间的变化 经过时间(分) 照度单位1x 刚发光 1分钟后 5分钟后 10分钟后 15分钟后 20分钟后 25分钟后 30分钟后 一般绿 651.0 295.0 195.0 162.0 134.0 115.0 100.0 100.0 一般黄 351.3 310.0 152.0 117.7 98.3 92.3 91.7 77.3 一般蓝 268.0 141.0 74.4 54.2 45.2 40.5 36.8 33.7 一般橘 221.0 60.1 22.1 22.1 22.0 19.0 17.0 17.0 一般红 50.9 40.1 22.1 15.4 13.1 12.5 11.5 10.7
表2 高亮度型荧光照度随时间的变化 经过时间(分) 照度单位1x 刚发光 1分钟后 5分钟后 10分钟后 15分钟后 20分钟后 25分钟后 30分钟后 高亮 度绿 2940 1319 671 482 378 311 253 219 高亮 度黄 1900 1063.3 505.3 313.3 248.0 214.3 182.5 160.0 高亮 度橘 1633 403 217 180 136 106 88 75 高亮 度蓝 1166.7 260.3 157.0 117.3 89.3 76.3 62.4 55.2
实施例1
<改善血液流通>
通过化学发光反应发出的光进行照射，可扩张血管宽度，具有改善血液流通 的作用。
本实施例中使用橘荧光化学发光体。
观察实验，从15分至65分的50分钟用橘荧光照射，经过100分钟后从185 分至205分的20分钟再以橘荧光照射，血管宽度的观察以图5表示，包含其前后 共235分钟内观察的血管宽度变化。通过上述步骤可观察到，照射开始15分钟后， 血管宽度开始扩张，照射30分钟后停止照射，从45分至65分保持扩张的状态， 照射停止80分钟以上就回复到实验开始前的血管宽度，再照射后从185分至扩张 停止为止，保持扩张40分钟，停止(205分)后经过30分钟逐渐恢复到大约平常 的状态。
血管宽度的测量如以下所示。
测量方法
在恒温恒湿度的测量室内，室温23℃，湿度30％的条件下进行测量。
1.在测量室内保持10分～15分的稳定状态(稳定tranquil state)，测量左手中 指的一处固定位置。
2.在固定的部位，以橘荧光照射50分钟，间隔10分钟测量数次。
3.之后，间隔1小时后再度恢复稳定后，进行橘荧光照射。
4.照射20分钟内间隔10分钟进行测量。
使用红色荧光的化学发光体来照射前臂内侧部2个地方的皮肤后，观察照射 区域的手肘侧A部位与非照射区域的手腕侧B部位的皮肤温度变化，可发现皮肤 温度会上升而改善血液流通，同时与皮肤外用剂合并使用，可得到促进经皮吸收 的结果。其测量结果如表3所示。
5次观察的平均结果发现，在被照射区域A部位，由于红色照射温度会有0.4 ℃的上升，在照射区域周围的手腕部位，由于红色荧光的照射温度会有0.7℃的上 升。
表3 观察 A 照射部位之 测量温度℃ B 未照射部位 之测量温度℃ 照射前 1 31.9 31.7 2 32.1 31.7 3 32.1 31.7 4 32.0 31.6 5 32.1 31.8 平均 32.0 31.7 红色发光照 射5分钟后之测 量 1 32.4 32.5 2 32.4 32.5 3 32.6 32.4 4 32.3 32.3 5 32.3 32.4 平均 32.4 32.4
因此，以无发热现象的化学反应发出的光对皮肤进行照射，可发现血管宽度 会扩张，同时使照射部位及其周围部位的皮肤温度上升。
<细胞增殖>
以红荧光、蓝荧光、橘荧光3种化学反应发出的光对皮肤细胞照射之后，观 察细胞增殖的现象。其结果以图6表示。
使用橘荧光与红荧光可观察PMG(作为细胞增殖实验的指标)与同等的增殖 率。
又，PMG为左旋维生素C磷酸镁盐(L-Ascorbic Acid Phosphate Magnesium Salt N-Hydrate)的简称。
与对照组比较，PMG添加组与橘荧光照射组对细胞增殖有促进意义。
实验如以下方法进行。
1.细胞：正常人体皮肤纤维母细胞(NHF)
2.化学发光体：CYALUME Light shape blue(蓝荧光)、orange(橘荧光)、red (红荧光)发售公司；日本奥美尼株式会社
3.检验方法：
(1)将NHF2.0×104cells/well，以DMEM·10％S(+)培养基植入24孔培养 皿(24well plate)。
(2)培养5天汇合(confluence)后，交换为无色无血清DMEM培养基。
(3)以荧光照射(4小时)。正向对照为100nM PMG添加组。
(4)观察细胞型态(×40)。
(5)使用MTT试验法，以测量波长540nm、对照波长655nm进行比色分析法。 细胞增殖率以未经实验处理的对照组为100％，以下列计算式计算。
4.计算式
细胞增殖率(％)＝(〔样本添加光学浓度值(以下简称OD)(540nm)〕 -〔样本添加OD(655nm)〕)/(〔对照组OD(540nm)〕-〔对照组OD(655nm)〕) ×100
实施例2
<荧光照射下黑色素的合成>
通过荧光对细胞的照射可抑制黑色素细胞的增殖与黑色素的合成。对黑色素 细胞增殖的影响如表4及图7所示，对细胞黑色素合成的影响如表5及图8所示。
(实验方法)
1.细胞：老鼠的黑色细胞种(B16细胞)
2.化学发光体：(日本奥美尼株式会社制)一般型blue(蓝荧光)、orange(橘 荧光)、red(红荧光)、green(绿荧光)、yellow(黄荧光)；高亮度类型橘色 (橘色荧光)、红色(红色荧光)、绿色(绿色荧光)
3.检验方法：
(1)将B16细胞3.6×103cells/well，以MEM·10％S(+)．葡萄糖胺培养基 植入24孔培养皿(24well plate)。n＝8
(2)培养5天之后，以MEM·10％S(+)·茶碱(theophylline)培养基交换。
(3)将荧光发光体与培养皿接触并照射荧光，一般型为4小时，高亮度型为 30分钟。对照组为非荧光照射组，正向对照组为1mM维生素C(抗坏血酸)添 加组。
(4)照射3天后回收细胞，用0.1％SDS的生理食盐水将细胞溶解，测量260nm (细胞量的指标)和475nm(黑色素量的指标)的吸光度，算出细胞增殖率和每 单位细胞的黑色素合成率。
B16细胞增殖率如表4及图7所示，每单位细胞的黑色素合成率如表5及图 8所示。
4.计算式
B16细胞增殖率(％)＝样本吸光值(以下简称Abs)(260nm)/对照组 Abs(260nm)×100
每单位细胞的黑色素合成率(％)＝〔样本(475nm)/样本(260nm)〕 /〔对照组Abs(475nm)/对照组Abs(260nm)〕×100
表4 处理 对照 1mM维 生素C 一般蓝 一般绿 一般 橘 一般 红 一般 黄 高亮度 绿 高亮度橘 B16 细胞增殖 率(％) 100 21.42 97.40 105.78 98.30 67.21 97.25 93.28 80.86 S.D. 2.78 18.87 7.42 10.37 8.99 36.38 7.17 4.75 11.10 明显差异 - p＜0.001 无 无 无 p＜ 0.05 无 p＜0.01 p＜0.01
表5 处理 对照 1mM维 生素C 一般蓝 一般 绿 一般 橘 一般红 一般黄 高亮 度绿 高亮度 橘 黑色素合 成率(％) 100 65.28 85.12 92.77 93.88 94.08 92.62 92.48 103.86 S.D. 6.77 14.91 12.53 7.71 6.10 5.91 4.72 8.37 4.66 明显差异 - p＜0.001 p＜0.05 无 无 无 p＜0.05 无 无
从表4及图7的结果显示，以一般型红荧光、高亮度型的绿荧光、高亮度型 橘荧光照射，可明显达到抑制黑色素细胞增加的效果。
以红荧光、高亮度型绿荧光、橘荧光对皮肤照射，可清楚了解其抑制黑色素 瘤细胞增殖、黑色素细胞增殖的效果。从以上本发明的实施例，可获得美白效果。
从表5及图8的结果显示，蓝荧光、黄荧光照射群，可明显抑制每单位细胞 黑色素的合成。
和紫外线不同，以荧光照射不会促进黑色素合成，而蓝、黄荧光则可达到明 显抑制黑色素合成的效果。尤其是照射蓝色荧光，可达到20％抑制黑色素合成的 效果。
以一般型红荧光、高亮度型绿荧光、高亮度型橘荧光照射，可抑制黑色素细 胞的增殖。由于细胞数目减少，全体的黑色素量也因而减少。
因为照射荧光不会抑制纤维母细胞的增殖，反而可选择性地抑制活性化黑色 素细胞增殖，而达到美白效果。
实施例3
<黑色索合成实验>
(实验方法)
对三维皮肤模型(黑色素调光器(MEL-300A))(MatTek公司制)照射紫外 线0、48、96小时后，分别以1W/m2的强度照射1J/m2的UVB及/或高亮度型蓝色 应关(日本奥美尼株式会社制)1小时，培养7天。
将三维皮肤模型以1N(标准溶液浓度)氢氧化钠煮沸溶解，测出黑色素量的 指标为350nm的吸光度，以下列算式算出黑色素合成率，其结果如图9所示。
以未照射UVB、高亮度型蓝荧光中任何一种的组织的溶解液为对照组。
算式：〔黑色素合成率〕＝〔各处理时组织溶解液在350nm的吸光度〕/〔对 照组组织溶解液在350nm的吸光度〕×100
对于人体三维皮肤模型，以UVB照射会促进黑色素合成，但以高亮度蓝荧光 照射可达到抑制因UVB照射所造成的黑色素合成。因此，即使皮肤暴露在阳光等 紫外线的环境下，之后再以蓝色荧光等对皮肤进行照射，就可抑制黑色素的合成、 皮肤变黑，及斑点、雀斑的形成，达到美白效果，使皮肤可达到抗光老化。
实施例4
<人体表皮黑色素细胞增殖实验>
(实验方法)
将人体表皮黑色素细胞20000cells/cm2使用添加HMGS(黑色素细胞生长成分) 的人体表皮黑色素细胞用基础培养基medium154S(仓敷纺织株式会社制)植入24 孔培养皿。
经过24小时培养后，将样本替换至为添加有橄榄叶萃取物的培养基(如下记 制造例所述)，或作为空白样本的50％丁二醇水溶液的培养基，以高亮度蓝荧光 (日本奥美尼株式会社制)照射1小時后，放置培养72小时。
用磷酸生理食盐水(以下称PBS(-))洗净细胞后，对含有1W/W％的月 桂基(dodecyl)硫酸钠且以PBS(-)溶解得到的细胞溶解液，测量260nm的吸 光度，以下列算式计算出细胞增殖率。
以添加空白样本、不照射高亮度蓝荧光的细胞溶解液为对照组。
橄榄叶萃取物的添加浓度与黑色素细胞的增殖率两者的关系，该结果如图10 中所示。
橄榄叶萃取物
(橄榄叶萃取物制造例)
将1公斤干燥的橄榄叶以90W/W％乙醇浸泡1周后，再浓缩、冷冻干燥后， 用50W/W％丁二醇水溶液溶解为1W/W％。
算式：〔细胞增殖率〕＝〔样本添加时吸光度(260nm)〕/〔对照组吸光度 (260nm)〕×100
对于人体表皮黑色素细胞的增殖，以高亮度蓝荧光照射1小时后虽还看不出 改变，但添加橄榄叶萃取物后再以高亮度蓝荧光照射，人体表皮黑色素细胞的增 殖率会明显(添加0.5％橄榄叶萃取物时)降低。
与高亮度蓝荧光照射合并使用时，橄榄叶萃取物对降低人体表皮黑色素细胞 增殖率具有加倍的效果。因此，以蓝荧光照射皮肤，可抑制人体表皮黑色素细胞 的增殖，进而可达到美白的效果。
实施例5
<促进纤维母细胞增殖及胶原蛋白合成实验>
使用一般型红荧光、高亮度型橘荧光照射纤维母细胞，可促进纤维母细胞的 增殖及纤维母细胞中胶原蛋白的合成。关于纤维母细胞的实验结果，如表6及图 11所示，关于胶原蛋自的合成的实验结果，如表7及图12所示。
(实验方法)
1.细胞；纤维母细胞(NHF)
2.化学发光体：(日本奥美尼株式会社制)一般型红(红荧光)、高亮度型 橘((橘荧光)
3.胶原蛋白数量测量：以Takara PIP kit工具(宝生物工程株式会社制)测量I 型胶原蛋白碳端原胜肽(以下称PIP)数量。
4.检验方法：
(1)将NHF2.0×104cells/well以DMEM·10％S(+)培养基植入24孔培养皿
(2)培养5日后，替换为无色无血清DMEM培养基。
(3)以荧光发光体接触24孔培养皿，照射荧光(30分钟)。正向对照组为 100mM PMG添加组。
(4)开始照射24小时后，回收培养上清液。
以Takara PIP kit工具(宝生物工程株式会社制)测量PIP数量，接着使用MTT 试验法，以测量波长540nm、对照波长655nm进行比色分析法。细胞增殖率以未 经实验处理的对照组为100％，以下列计算式计算。
细胞增殖率(％)＝(〔样本添加OD(540nm)〕-〔样本添加OD(655nm)〕) /(〔对照组OD(540nm)〕-〔对照组OD(655nm)〕)×100
胶原蛋白合成率使用PIP数量与MTT试验法的结果，以下列算式计算。
胶原蛋白合成率(％)＝{样本PIP数量/(〔样本添加OD(540nm)〕- 〔样本添加OD(655nm)〕)}/{对照组PIP数量/(〔对照组OD(540nm)〕 -〔对照组OD(655nm)〕)}×100
表6 处理 对照 100mM PMG 高亮度橘 荧光 红荧光 100mM PMG +高亮度橘荧 光 100mMPMG+ 红荧光 纤维母 细胞增 殖率 (％) 98.3 138.2 122.2 126.7 168.6 153.0 S.D. 8.6 23.0 6.4 3.4 4.0 2.3 明显差 异 VS对照 p＜0.01 p＜0.01 p＜0.01 p＜0.001 p＜0.01 VSPMG - - - p＜0.001 p＜0.01
由表6及图11的纤维母细胞增殖实验结果显示，用一般型红荧光、高亮度型 橘荧光照射24小时后，在测量细胞增殖率的促进胶原蛋白合成群中，一般型红荧 光、高亮度型橘荧光同样都具有明显促进纤维母细胞增殖的效果。和PMG合并使 用时，一般型红荧光、高亮度型橘荧光的照射下，纤维母细胞也有明显增殖现象。
表7 处理 对照 PMG100mM 高亮度橘荧光 红荧光 PMG 100mM+高亮 度橘荧光 PMG 100mM +红荧光 胶原 蛋白合成 率(％) 100.0 127.6 127.8 129.0 119.4 139.1 S.D. 6.2 35.8 12.9 15.5 3.4 12.2 明显差异 VS对照 p＜0.05 p＜0.001 p＜0.05 p＜0.001 p＜0.001 VS PMG - - - 无 无
由表7及图12的测量数据显示，每单位细胞的胶原蛋白合成率中，在一般型 红荧光、高亮度型橘荧光照射群具有明显促进PMG与相同程度的胶原蛋白合成的 效果。
以一般型红荧光、高亮度型橘荧光照射纤维母细胞，可促进纤维母细胞的增 殖及胶原蛋白的合成。又，和PMG合并使用时，更加能促进纤维母细胞的增殖、 胶原蛋白的合成。因此，以一般型红荧光、高亮度型橘荧光等化学发光荧光对皮 肤照射，可增加肌肤中胶原蛋白的数量、增加肌肤活性、抚平皱纹、改善弹性与 柔软度、达到防止老化的效果。又，与含有PMG的皮肤外用剂合并使用，则可获 得加倍的改善效果。
实施例6
<荧光照射下纤维母细胞的增殖>
以各种荧光对纤维母细胞进行照射，可了解其对纤维母细胞具有增殖 (proliferation)作用。然后进行以下实验，测量结果如图13、14、15所示。总结 的评价结果如表8所示。(实验方法)
1.细胞：纤维母细胞(NHF)
2.化学发光体：(日本奥美尼株式会社制)一般型荧光blue(蓝荧光)、orange (橘荧光)、red(红荧光)、yellow(黄荧光)、green(绿荧光)、高亮度型荧 光orange(橘荧光)、高亮度型荧光green(绿荧光)
3.检验方法：
(1)将NHF2.5×104cells/well以DMEM·10％S培养基植入96孔培养皿。
(2)次日，制备无色DEME 5％，并替换为含有1％FBS的培养基。
(3)以化学发光体接触培养皿并照射荧光。以荧光照射0.5、1、2、4小时， 高亮度型则只照射0.5小时。以5％CO2、37℃的状态培养5天。
(4)使用MTT试验法，以测量波长540nm、对照波长655nm进行比色分析法。 细胞增殖率以未经实验处理的对照组为100％，以下列计算式计算。
细胞增殖率(％)＝(〔样本添加OD(540nm)〕-〔样本添加OD(655nm)〕) /(〔控制组OD(540nm)〕-〔控制组OD(655nm)〕)×100
表8 DMEM培 养基 1％FBS 5％FBS 照射时间 (小时) 0.5 1 2 4 0.5 1 2 4 一般 青 橘 (*) (**) 红 * 绿 *** *** ** ** ** 黄 *** * 高亮 度 橘 * 绿 ** ***
明显差异(()内为负的明显差异)
由图13、图14及表8中一般型荧光照射的统计结果显示，在5％FBS培养基 以绿荧光照射1小时、4小时，以黄荧光照射2小时，都有明显促进细胞增殖的 效果。
在1％FBS培养基以红荧光照射2小时，以绿荧光照射0.5小时、1小时、4 小时，以黄荧光照射2小时，都有明显促进细胞增殖的效果。
在黄色荧光照射组可观察得出，到2小时为止有随照射时间增长而效果增加 的倾向。
由图15及表8中以高亮度型(0.5小时照射群)荧光照射的测量结果数据显 示，在使用高亮度型、1％FBS·DMEM培养基的组别中，以橘荧光与绿荧光照射 组具有明显促进细胞增殖的效果。尤其是以绿色荧光照射，约有1.5倍的增殖效 果。
添加5％FBS培养基，只照射绿荧光则具有明显促进细胞增殖的效果。
本实验组中，FBS浓度越低，则越容易出现促进细胞增殖的效果。
使用一般型红荧光、绿荧光、黄荧光，具有细胞活化效果，而对于绿荧光而 言，不论FBS浓度的高低，都具有细胞活化效果。
又，高亮度型中橘荧光、绿荧光具细胞活化效果，同样的在高浓度FBS的情 形下，以绿色荧光最具活性。根据以上的结果，可推断出最具活性的荧光色为绿 色。
实施例7
<增进光解酶活性实验>
细胞因UVB的照射而使DNA受损，产生嘧啶二聚物(pyrimidine dimer)。 如此反复累积下，就成为所谓的光老化。拥有光合成作用的原核生物，存有修复 这种DNA盐基之二聚作用的光解酶(photolyase)，已发现该光解酶会由于可见 光而活化(香妆品科学研究开发专门志期刊2002年6月号，49～53页)，但在 荧光发光体照射下会提高其活性的报告则尚未有人提出。
探讨高亮度蓝色荧光照射对光解酶活性的作用，并探讨荧光发光体与化妆品 有效成份合并使用下的效果。
(实验方法)
将人体表皮硬蛋白质细胞7.0×105cells/well植入φ60mm培养皿(dish)，经 一晚的培养后替换为Hanks(-)培养基，以0.5J/m2(1W/m2)UVB照射。再替换 为添加Humedia-KG的Epilife培养基(仓敷纺织株式会社制)，添加样本(空白 样本为50％丁二醇，添加光解酶0.04Units、0.4Units(嘧啶二聚物修复活力))后， 以高亮度蓝荧光(奥美尼株式会社制)照射1小时。以不添加光解酶、不照射高 亮度型蓝荧光为对照组。
以UVB照射6小时后，使用DNA提取试剂(DNAzol reagent)(Invitrogen公 司制)根据规定方法从细胞回收DNA。
嘧啶二聚物数量的测量结果如图16所示。
(测量嘧啶二聚物数量的方法)
用该DNA以下列所示的方法测量嘧啶二聚物的数量。
将1％硫酸鱼精蛋白(protamine sulfate)液植入96孔培养皿，在37℃下培养 2小时。用无菌水洗净培养皿，干燥后将提取的DNA分别以2μg植入各培养皿， 在于37℃下培养20小时。接着以含有0.05％Tween20的PBS(PBS-T)液洗净后， 放入以含有2％脱脂乳的PBS所制备的胸线嘧啶二聚体单株抗体中，在37℃下培 养1小时。然后用PBS-T洗净，植入HPR结合山羊抗鼠标IgGd抗体，在37℃下 培养1小时。继续用PBS(PBS-T)洗净后，另外以PBS(-)洗净，添加3，3’，5，5’ 四甲基联苯胺(tetramethylbenzidine)溶液(1-StepTMTurbo TMB-ELISA(pierce公 司制))，以室温培养后，以2N硫酸使其停止反应。测量在450nm的吸光度， 以下列算式算出每2μg DNA的嘧啶二聚物含有率。
光解酶使用蓝绿藻(cyanobacteria)属的蓝细菌(anacystic nidulans)，添加 AGI Dermatics公司制PHOTOSOMES(R)，其中含有41Units/mL的光解酶。
算式：〔嘧啶二聚物含有率(％)〕＝〔样本添加时吸光度(450nm)〕/ 〔对照组吸光度(450nm)〕×100
图16为表示测量的嘧啶二聚物含有率。
未添加光解酶、以高亮度蓝荧光照射组的嘧啶二聚物的含有率约为对照组的 1/2。
添加0.04Units、0.4Unit光解酶时，嘧啶二聚物的含有率与对照组相比，也约 为1/2，但光解酶的添加量即使从0.04Units增加为10倍的0.4Units，在降低嘧啶 二聚物含有率的效果上并无差异。然而，高亮度蓝色荧光与光解酶合并使用时， 则嘧啶二聚物的含有率会降低，尤其是，以0.4Units与高亮度型蓝色荧光合并使 用时，嘧啶二聚物的含有率可降低至约为对照组的1/4。和对照组相比，可以明显 降低嘧啶二聚物含有率的是以高亮度蓝荧光照射、0.04Units光解酶与高亮度型蓝 荧光合并使用组、及0.4Units光解酶与高亮度型蓝荧光合并使用组，而光解酶与 高亮度蓝荧光合并使用时，可达到加倍抑制光老化的效果。
特别地，化学发光的照射或光解酶的作用可达到抑制光老化的效果。高亮度 型蓝荧光的照射，或与光解酶合并使用下照射高亮度蓝荧光，可抑制因紫外线照 射造成皮肤细胞的DNA损伤，进而抑制光老化。
实施例8
<化学发光的近红外线照射下血流增加实验>
以化学发光反应得到的近红外线对皮肤照射，观察血流量的变化。
以化学发光得到的近红外线，其测量例表示时如图17、18所示。
其实验条件如表9所示，影像例如图19所示，各受验者的血流量变化状态如 图20所示。
表9 近红外线发光体对人体照射实验 测量条件 使用全天候室 湿度 35％ 室温 24℃±3 室外光 尽可能的遮蔽住 (测量时不使用照明) IR化学发光体 空白样本样品 日本奥美尼株式会社 特别订制品 CYALUME 6英吋 棒状型 未发光之 日本奥美尼株式会社CYALUME 6英吋 棒 状型 照射方法 棒状物发光后 上下摇动5次 接触肌肤进行照射 受验者人数 5名 在测量10分钟前使全天候室内抱持稳定 测量机器 Permied公司PIM ∏激光杜卜勒血流监视计 (Laser Doppler Blood-Flow Monitor) 测量位置 左前臂 从测量用探头开始5cm距离 测量范围3cm×3cm IR化学发光体 近红外线 测量次数 测量3次 1：测量前 2：近红外线化学发光体照射15分钟后 3：照射完10分钟后 影像处理 根据测量者调整初期数值 在第2、3次测量时调整初期数值以观察影 像变化 影像判定 血流量越大，可表示出亮度越高的影像 影像解析 求出影像亮度的平均值 以近红外线照射前的亮度为1，算出近红外 线照射后的亮度，再比较两者
例如受验者其中一人在测量前，照射15分钟后，照射15分钟后再经过10 分钟的影像，如图19(a)(b)(c)所示，从图中可观察出影像的明亮部份增加， 并可看出即使照射结束经过10分钟，血流量依旧为增加的情况。
从图20中将影像数值化而表示各受验者血流量的变化表，可发现照射后比照 射前血流量增加1.5倍至3倍。甚至照射结束10分钟后所有人依旧没有下降而为 增加的情况，故可得知其短期的照射而可达到长期的效果。
实施例9
<使用经验实验>
使用短边为50mm、长边为70mm的椭圆形、且中央部份厚度为8mm的光透 过性薄膜制的绿荧光袋，使用同形状的非荧光袋为对照物。
受验者的5人，右边脸颊使用非荧光袋(空白样本)，左边脸颊使用发出绿 光的绿荧光袋，1天1次，于晚上进行30分钟对左右两边脸颊的接触，持续进行 5天，由实验结果可得知其对肌肤活性的效果，结果如表10所示。
其结果为，从第1天开始所有人都能感受到肌肤活性的改善，第3天有3人、 第5天有4人感到活性改善。没有感觉变化的为0人，因此可确定以化学发光反 应的荧光照射对肌肤活性的改善具有效果。
以绿荧光照射，并没有感觉不适的人。
表10 有感觉 一点点感觉 没有感觉 第1天 5 第3天 3 2 第5天 4 1
【专利文献1】特开2004-733号公报
【专利文献2】特开2003-12487号公报
【专利文献3】特开平11-342213号公报
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