沙利度胺(N-α-苯二酰亚氨基戊二酰亚胺)是谷氨酸衍生物，在1956 年作为镇静催眠药被引入市场，但因为在由用它治疗早孕反应的母亲 生育的婴儿中产生严重的先天异常，沙利度胺在1961年退出了市场。 在临床上发现沙利度胺能有效治疗麻风结节性红斑(ENL)和治疗HIV 消耗综合征和各种癌症以后，再次引起对该药物的关注。对其ENL活 性的机理研究证明是抗肿瘤坏死因子α(抗-TNF-α)作用。具体地，沙利 度胺能增强TNF-αRNA的降解，因而降低其合成和分泌。进一步的研 究说明它是CD8+和CD4+T细胞两者的共刺激物(co-stimulator)，通过 其对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的抑 制作用来作为血管生成抑制剂，并且是转录因子NFκB的抑制剂。
TNF-α及其族系成员在各种生理和病理过程中起着重要的作用， 这些生理和病理过程包括：细胞增殖和分化、凋亡、免疫响应调节和 炎症诱导。TNF-α通过两个受体TNFR1和TNFR2起作用。前者在所 有组织中被表达，是TNF-α的主要信号受体。后者主要在免疫细胞中 表达，介导更有限的生物反应。将细胞暴露于TNF-α会导致激活caspase 级联，通过凋亡引起细胞死亡。实际上，能引发凋亡的主要细胞表面 分子是配体和受体的TNF族成员。例如，TNF受体族系的死亡诱导成 员各自包含胞质“死亡域”(DD)，它是蛋白质-蛋白质相互作用基元， 对结合信号转导器的下游组分很重要。
近期，显示与肿瘤坏死因子相关的凋亡-诱导配体TRAIL能选择 性地诱导肿瘤细胞的凋亡，而不会诱导大多数正常细胞的凋亡。说明 TRAIL能介导胸腺细胞凋亡，在诱导自身免疫病时很重要。但是，更 经常地，TNF-α受体结合能诱导转录因子AP-1和NFκB的激活，然后 它们诱导涉及急性和慢性炎性反应的基因。因此已经在许多炎性疾病 如风湿性关节炎、移植物-对-宿主疾病和克罗恩病中证明TNF-α的超量 产生，它还能恶化ENL、脓毒性休克、AIDS和与阿尔茨海默病(AD) 相关的痴呆。
已经设计并合成了许多沙利度胺类似物，它们被能最优化以减少 TNF-α的合成。基本上，这些类似物包括对沙利度胺的邻苯二甲酰环 或戊二酰亚胺环的结构修饰。此外，在证明沙利度胺的抗血管生成性 质与其羟基化的开环代谢物有关后，报道了合成羟基化和水解代谢物 作为血管生成或肿瘤转移抑制剂。虽然存在关于沙利度胺和TNF-α之 间的结构-活性关系的大量研究，但关于沙利度胺的四个酰胺羰基对其 生物活性的作用却知之甚少。
发明概述
本发明公开了具有血管生成调节活性和TNF-α调节活性的沙利度 胺类似物。在一些实施方案中，所公开的沙利度胺类似物为其中一个 或多个羰基被硫代羰基取代的沙利度胺的硫-类似物、其开环代谢物和 其衍生物(例如其羟基化衍生物)。例如，在一些实施方案中，在沙利度 胺类似物中，沙利度胺或沙利度胺类似物的邻苯二甲酰(pthaloyl)部分 上或戊二酰胺部分上(或其开环状式)的至少一个羰基被硫代羰基取代。 在具体实施方案中，用硫代羰基连续取代沙利度胺中的羰基，这提供 了具有增强的TNF-α抑制活性的硫代沙利度胺类似物。令人惊讶地， 由于用硫代羰基取代沙利度胺的羰基所致的TNF-α抑制增加并未伴有 毒性。
本发明还公开了制备沙利度胺和沙利度胺类似物的改进方法，即 将沙利度胺类似物转化为硫代沙利度胺的方法。由于它们的血管生成 和TNF-α调节活性，所公开的沙利度胺类似物、尤其是所公开的硫代 沙利度胺能用于治疗如下患者，其患有与血管生成或TNF-α活性相关 的疾病或病症，如肿瘤或有害的新血管生成。此外，所公开的硫代沙 利度胺类似物的物理性质和毒理学性质使它们无需注射，例如通过口 服给药，就能适于有效和安全地调节血管生成和TNF-α活性。这与用 于这类目的的许多现有药物相反。
附图简述
图1的柱状图显示，几种所公开的沙利度胺类似物在含荧光素酶 报道基因成分加人TNF-α的3′-UTR的鼠细胞中抑制TNF-α的作用相 对于它们在不含3′-UTR的细胞中的作用。
图2的柱状图显示，1，3-二氧代-2-(2-羟基-6-甲氧基吡啶-3-基)-异 吲哚啉氢溴酸盐在几种浓度下调节血管生成的相对活性。
图3的柱状图显示，2-(3-环己烯基)-H-异吲哚-1，3(2H)-二硫酮在几 种浓度下调节血管生成的相对活性。
图4的柱状图显示，1-(2，6-二硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1，3(2H)- 二酮在几种浓度下调节血管生成的相对活性。
图5的柱状图显示，3-莰基(camphanic)氨基-2，6-哌啶二酮在几种 浓度下调节血管生成的相对活性。
图6的柱状图显示，二硫代邻苯二甲酰亚胺在几种浓度下调节血 管生成的相对活性。
图7的柱状图显示，2-(1，3-二氢-1-氧代-3-硫代-2H-异吲哚-2-基)- 戊二酸在几种浓度下调节血管生成的相对活性。
图8的柱状图显示，2-(2-氧代-6-硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚 -1，3(2H)-二酮在几种浓度下调节血管生成的相对活性。
图9的柱状图显示，2，3-二氢-3-硫代-2-(2，6-二硫代-3-哌啶基)-1H- 异吲哚-1-酮在几种浓度下调节血管生成的相对活性。
图10的柱状图显示，2-乙酸基-N-(2，6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰胺 在几种浓度下调节血管生成的相对活性。
图11的柱状图显示，1，3-二氧代-2-(2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-异吲 哚啉在几种浓度下调节血管生成的相对活性。
特别公开的实施方案的详述
I.缩写
TNF-α-肿瘤坏死因子α
CDI-羧基酰氨基三唑
ARE-富含腺苷酸/尿苷酸(AU)的成分(element)
UTR-非翻译区
THF-四氢呋喃
NMR-核磁共振
LR-Lawesson试剂
II.术语
为了便于理解所提出的实施方案，提供下列解释。
除非上下文另外清楚地说明，单数术语“一个”、“该”和“所 述”包括复数指代物。类似地，除非上下文另外清楚地说明，单词“或 者”用于包括“和”。术语“包括”是指“包含”。另外，除非上下 文另外清楚地说明，“包括A或B”是指包括A或B、或A和B。还 应该理解，为化合物给出的所有分子量或分子质量值是近似的，是为 了描述而提供的。在实施或测试本发明时，虽然可以使用与本文所述 那些方法和材料类似或等同的方法和材料，但仍在下面描述了合适的 方法和材料。此外，材料、方法、和实施例仅是说明性的，并非用于 限制。
术语“患者”是指动物，包括哺乳动物(例如人和兽类动物如犬、 猫、猪、马、羊、和牛)。
“R-基”或“取代基”是指单个原子(例如卤素原子)或由彼此共价 键合的两个或多个原子组成的基团，它们典型地代替氢原子与分子中 的一个或多个原子共价键合，以满足分子中一个或多个原子的化合价 要求。R-基/取代基的例子包括：烷基、羟基、烷氧基、酰氧基、巯基、 和芳基。
“取代的”或“取代”是指用一个或多个另外的R-基来取代分子 中的氢原子或R-基，所述另外的R-基为例如：卤素、烷基、烷氧基、 烷硫基、三氟甲基、酰氧基、羟基、巯基、羧基、芳氧基、芳基、芳 基烷基、杂芳基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、吗啉代基、哌啶子 基、吡咯烷-1-基、哌嗪-1-基、硝基、硫酸根合或其它R-基。
“烷基”是指仅含碳和氢的环状、支链、或直链基团，除非另有 说明，烷基典型地包含一至十二个碳原子。该术语的进一步示例性的 基团为例如甲基、乙基、正丙基、异丁基、叔丁基、戊基、新戊酰、 庚基、金刚烷基、和环戊基等。烷基可以是未取代的或取代的。“低 级烷基”是指那些包含一至六个碳原子的基团。
“酰基”是指具有RCO-结构的基团，其中R可以是烷基或取代 烷基。“低级酰基”是指那些包含一至六个碳原子的基团。
“酰氧基”是指具有RCOO-结构的基团，其中R可以是烷基或取 代烷基。“低级酰氧基”包含一至六个碳原子。
“烯基”是指仅含碳和氢的环状、支链或直链基团，除非另有说 明，烯基典型地包含一至十二个碳原子，包含一个或多个共轭或不共 轭的双键。烯基可以是未取代的或取代的。“低级烯基”包含一至六 个碳原子。
“炔基”是指仅含碳和氢的环状、支链或直链基团，除非另有说 明，炔基典型地包含一至十二个碳原子，包含一个或多个三键。炔基 可以是未取代的或取代的。“低级炔基”是指那些包含一至六个碳原 子的基团。
“烷氧基”是指具有R-O-结构的基团，其中R可以是烷基或取代 烷基。烷氧基的例子包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基。“低 级烷氧基”是指那些包含一至六个碳原子的基团。
术语“卤素”是指氟、溴、氯和碘取代基。
“芳基”是指具有单环(例如苯基)或多个稠环(例如萘基或蒽基)的 一价不饱和芳族碳环基团，其可以任选地为未取代的或取代的。
术语“氨基”是指具有-NH2结构的R-基，其可以任选地被例如低 级烷基取代，以获得具有一般结构-NHR或-NR2的氨基。
“硝基”是指具有-NO2结构的R-基。
当用于环状基团时，术语“脂族的”是指如下环状结构，其中存 在于环内的任何双键都没有围绕整个环状结构共轭。
当用于环状基团时，术语“芳族的”是指包含双键的环状结构， 所述双键可能通过杂原子如氧原子或氮原子围绕整个环状结构共轭。 芳基、吡啶基和呋喃基是芳族基团的例子。芳族基团的共轭体系包含 特征数量的电子，例如6或10个电子，这些电子占据了组成共轭体系 的电子轨道，典型地为未杂化的p-轨道。
“药物组合物”是指如下组合物，其包括一定量(例如单位剂量) 的一种或多种所公开的化合物和一种或多种无毒的可药用赋形剂，包 括载体、稀释剂、和/或佐剂，和任选的其它生物学活性成分。可以通 过标准药物配制技术如Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，PA(19th Edition)中公开的那些技术来制备这些 药物组合物。
所公开化合物的“治疗有效量”是指化合物的剂量足以实现所需 治疗效果，例如抑制血管生成或抗肿瘤或抗转移效果，或抑制TNF-α 的活性。在一些例子中，治疗有效量是指该量足以在作用部位实现组 织浓度，该浓度与在体外、或体内组织培养中显示能调节血管生成或 TNF-α活性的那些浓度类似。例如，化合物的治疗有效量可以是患者 接受约0.1μg/kg体重/天至约1000mg/kg体重/天的剂量，例如约1μg/kg 体重/天至约1000μg/kg体重/天的剂量，例如约5μg/kg体重/天至约 500μg/kg体重/天的剂量。
术语“立体异构体”是指该分子为分子的对映异构体、非对映异 构体或几何异构体。不像结构异构体，立体异构体在分子结构中原子 的数量和种类上没有不同，但在分子原子的空间排列上不同。立体异 构体的例子包括旋光分子的(+)和(-)形式。
术语“调节”是指所公开的化合物能够改变生物功能的量、程度 或速率，改变疾病的进展，或改变病症的改善。例如，调节可以指化 合物能够引起血管生成的增加或减少，能抑制TNF-α活性，或能抑制 肿瘤转移或肿瘤发生。
术语“血管生成活性”是指所公开的化合物或所公开化合物的特 定浓度能够刺激血管生成。可以在体内或体外检测血管生成活性。血 管生成化合物或所公开化合物的血管生成浓度能刺激血管生成，本领 域的普通技术人员可以通过使用例如下面实施例中所述的方法容易地 鉴别这些化合物和/或浓度。
术语“抗血管生成活性”是指化合物或所公开化合物的特定浓度 能够抑制血管生成。可以在体内或体外检测抗血管生成活性。抗血管 生成化合物或所公开化合物的抗血管生成浓度能抑制血管生成，本领 域的普通技术人员可以通过使用例如下面实施例中所述的方法容易地 鉴别这些化合物和/或浓度。
III.特别公开实施方案的概述
本发明公开了能调节TNF-α活性和/或血管生成的沙利度胺类似 物，它们可以用于治疗与血管生成和/或TNF-α活性相关的广泛多样的 病理学症状。本发明还预期了所有公开化合物的可药用盐、立体异构 体和代谢物。在一些实施方案中，沙利度胺类似物为如下硫代沙利度 胺衍生物，其中对应的不含硫的沙利度胺衍生物中的羰基被一个或多 个硫代羰基所取代。
在下面的结构中，应理解满足了所有的化合价需要。因此，例如， 碳原子有连接至其它原子的四个键，即使没有显示所有的这些键。本 领域的普通技术人员会理解，当连接至碳原子的所有四个键均未被显 示时，意味着连接至氢原子的额外键。进一步取代这些隐含的氢原子 是可能的。
在其它实施方案中，所公开的化合物包括具有下列化学式的化合 物：

其中X和Y独立地为CH2、氧或硫，如果R1不包括硫原子，则X 和Y中的至少一个为硫；R2-R5各自独立地为氢、羟基、酰基、取代的 酰基、酰氧基、取代的酰氧基、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯 基、炔基、取代的炔基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、 氨基、取代的氨基、卤素、硝基，或连接形成五元或六元的未取代或 取代的脂族环、芳族环或杂环，例如氢、低级烷基、酰氧基、卤素、 羟基、氨基或硝基，例如氢、酰氧基或羟基；R1为未取代或取代的脂 族或芳族杂环、未取代或取代的环烯环、或

其中W和Z各自独立地为氧或硫，R6和R7各自独立地为羟基、 烷氧基或取代的烷氧基，R8-R12各自独立地为氢、羟基、酰基、取代的 酰基、酰氧基、取代的酰氧基、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯 基、炔基、取代的炔基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、 氨基、取代的氨基、卤素或硝基，例如氢、低级烷基、酰氧基、卤素、 羟基、氨基或硝基，例如氢、酰氧基或羟基。
在特别的实施方案中，R1为

其中W和Z各自独立地为氧或硫，R13和R14各自独立地为氢、 烷基或取代的烷基；R20为氢、羟基、烷基或取代的烷基如芳基取代的 烷基；R15和R19各自独立地为氢、羟基、酰基、取代的酰基、酰氧基、 取代的酰氧基、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代 的炔基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、氨基、取代的 氨基、卤素或硝基，例如氢、低级烷基、酰氧基、卤素、羟基、氨基 或硝基，例如氢、酰氧基或羟基。在一些实施方案中，R2、R3、R4、 R5、R8、R9、R10、R11、R15、R16、R17、R18和R19中的至少一个为羟基。 在其他实施方案中，X、Y、W和Z中的至少一个为硫，X、Y、W和 Z中的至少两个为硫，或X、Y、W和Z中的至少三个为硫。例如，在 更特别的实施方案中，X或Y为硫，如果存在W和Z，则W和Z两 者都为氧；X和Y两者都为硫，如果存在W和Z，则W和Z两者都 为氧；X和Y两者都为氧，如果存在W或Z，则W或Z为硫；X和Y 两者都为硫，如果存在W或Z，则W或Z为硫；或者X或Y为硫， 如果存在W和Z，则W和Z两者都为硫。或者，当存在W和Z时， 下列是可能的：X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝O； X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O， Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O， W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S， Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S； X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝S；或X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝S。在其他特别的 实施方案中，X＝S，Y＝CH2。
在更特别的实施方案中，所公开的化合物具有下式：

其中X、Y、W和Z独立地为硫或氧，X、Y、W和Z中的至少一 个为硫，R2-R12如前面所述。例如，在更特别的实施方案中，X或Y 为硫，如果存在W和Z，则W和Z两者都为氧；X和Y两者都为硫， 如果存在W和Z，则W和Z两者都为氧；X和Y两者都为氧，如果 存在W或Z，则W或Z为硫；X和Y两者都为硫，如果存在W或Z， 则W或Z为硫；或者X或Y为硫，如果存在W和Z，则W和Z两者 都为硫。或者，当存在W和Z时，下列是可能的：X＝S，Y＝O，W＝O， Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O， W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝S， Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝S； X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝O， Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝S；或X＝S， Y＝S，W＝S，Z＝S。在更特别的实施方案中，R2-R5和R8-R11中的至少 一个为羟基。这些化合物的具体例子包括：

在其他更特别的实施方案中，所公开的化合物具有下列化学式：

其中W、X、Y和Z各自独立地为硫或氧，W、X、Y和Z中的至 少一个为硫；R2-R5和R15-R20如前面所述。例如，在更特别的实施方案 中，X或Y为硫，W和Z两者都为氧；X和Y两者都为硫，W和Z 两者都为氧；X和Y两者都为氧，W或Z为硫；X和Y两者都为硫， W或Z为硫；或者X或Y为硫，W和Z两者都为硫。或者，下列是 可能的：X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝O， Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝O； X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O，W＝S， Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S， W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O， Y＝S，W＝S，Z＝S；或X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝S。在更特别的实施方案 中，R2-R5和R15-R19中的至少一个为羟基。这些化合物的具体例子包括：

所公开的化合物还包括具有下式的化合物：

其中T和V独立地为氧或硫，R21-R25独立地为氢、羟基、酰基、 取代的酰基、酰氧基、取代的酰氧基、烷基、取代的烷基、烯基、取 代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代 的芳基、氨基、取代的氨基、卤素或硝基，例如氢、低级烷基、酰氧 基、卤素、羟基、氨基或硝基，例如氢、酰氧基或羟基；R26为

其中W、Z和R13-R20如前所述。例如，在更特别的实施方案中， T或V为硫，如果存在W和Z，则W和Z两者都为氧；T和V两者 都为硫，如果存在W和Z，则W和Z两者都为氧；T和V两者都为氧， 如果存在W或Z，则W或Z为硫；T和V两者都为硫，如果存在W 或Z，则W或Z为硫；或者T或V为硫，如果存在W和Z，则W和 Z两者都为硫。或者，当存在W和Z时，下列是可能的：T＝O，V＝O， W＝O，Z＝O；T＝S，V＝O，W＝O，Z＝O；T＝O，V＝S，W＝O，Z＝O；T＝O， V＝O，W＝S，Z＝O；T＝O，V＝O，W＝O，Z＝S；T＝S，V＝S，W＝O，Z＝O； T＝S，V＝O，W＝S，Z＝O；T＝S，V＝O，W＝O，Z＝S；T＝O，V＝O，W＝S， Z＝S；T＝O，V＝S，W＝O，Z＝S；T＝O，V＝S，W＝S，Z＝O；T＝S，V＝S， W＝S，Z＝O；T＝S，V＝S，W＝O，Z＝S；T＝S，V＝O，W＝S，Z＝S；T＝O， V＝S，W＝S，Z＝S；或T＝S，V＝S，W＝S，Z＝S。在一些实施方案中， R15-R19和R22-R26中的至少一个为羟基。
还进一步地，所公开的化合物包括具有下式的化合物：

其中X、Y各自独立地为氧或硫；W、X和R15-R20如前所述；R27-R33 各自独立地为氢、羟基、酰基、取代的酰基、酰氧基、取代的酰氧基、 烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧基、 取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、氨基、取代的氨基、卤素或硝基， 例如氢、低级烷基、酰氧基、卤素、羟基、氨基或硝基，例如氢、酰 氧基或羟基；R34为氢、烷基或取代的烷基。例如，在更特别的实施方 案中，X或Y为硫，W和Z两者都为氧；X和Y两者都为硫，W和Z 两者都为氧；X和Y两者都为氧，W或Z为硫；X和Y两者都为硫， W或Z为硫；或X或Y为硫，W和Z两者都为硫。或者，下列是可 能的：X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝O， Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝O， Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝O， W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝O， Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝S； X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝S；或X＝S，Y＝S， W＝S，Z＝S。
此外，所公开的化合物包括具有下式的化合物：

其中X和Y各自独立地为氧或硫；W、Z、R15-R20和R34如前所 述，R35为烷基或取代的烷基，R36-R39各自独立地为氢、羟基、酰基、 取代的酰基、酰氧基、取代的酰氧基、烷基、取代的烷基、烯基、取 代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代 的芳基、氨基、取代的氨基、卤素或硝基，例如氢、低级烷基、酰氧 基、卤素、羟基、氨基或硝基，例如氢、酰氧基或羟基。例如，在更 特别的实施方案中，X或Y为硫，W和Z两者都为氧；X和Y两者都 为硫，W和Z两者都为氧；X和Y两者都为氧，W或Z为硫；X和Y 两者都为硫，W或Z为硫；或者X或Y为硫，W和Z两者都为硫。 或者，下列是可能的：X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O， Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O， W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝S， Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝S； X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝O， Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝S；或者X＝S， Y＝S，W＝S，Z＝S。
其他实施方案包括具有下式的化合物：

其中X和Y各自独立地为氧或硫；W、Z和R15-R20如前所述； R40-R45各自独立地为氢、羟基、酰基、取代的酰基、酰氧基、取代的 酰氧基、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、 烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、氨基、取代的氨基、卤 素或硝基，例如氢、低级烷基、酰氧基、卤素、羟基、氨基或硝基， 例如氢、酰氧基或羟基。例如，在更特别的实施方案中，X或Y为硫， W和Z两者都为氧；X和Y两者都为硫，W和Z两者都为氧；X和Y 两者都为氧，W或Z为硫；X和Y两者都为硫，W或Z为硫；或者X 或Y为硫，W和Z两者都为硫。或者，下列是可能的：X＝O，Y＝O， W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝O； X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O， Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O， W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S， Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S； X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝S；或者X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝S。
所公开的化合物还包括具有下式的化合物：

其中X、Y、W和Z独立地为氧或硫，R2-R5和R13-R16如前所述。 例如，在更特别的实施方案中，X或Y为硫，W和Z两者都为氧；X 和Y两者都为硫，W和Z两者都为氧；X和Y两者都为氧，W或Z 为硫；X和Y两者都为硫，W或Z为硫；或者X或Y为硫，W和Z 两者都为硫。或者，下列是可能的：X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝S， Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝S， Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O， W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O， Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝O； X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S， Z＝S；或者X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝S。
本发明还公开了具有下式的沙利度胺类似物化合物：

其中X、Y和Z独立地为氧或硫，R2-R5、R15-R20和R34如前所述。 例如，在更特别的实施方案中，X或Y为硫，Z为氧；X和Y两者都 为硫，Z为氧；X和Y两者都为氧，Z为硫。或者，下列是可能的： X＝O，Y＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，Z＝O；X＝O，Y＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O， Z＝S；X＝S，Y＝S，Z＝O；X＝S，Y＝O，Z＝S；X＝O，Y＝S，Z＝S；或者 X＝S，Y＝S，Z＝S。
本发明还公开了具有下式的沙利度胺类似物化合物：

其中X和Y独立地为氧或硫，R1、R2、R4和R5如前所述。例如， 在特别的实施方案中，R1为

其中W、Z、和R13-R20如前所述。例如，在更特别的实施方案中， X或Y为硫，如果存在W和Z，则W和Z两者都为氧；X和Y两者 都为硫，如果存在W和Z，则W和Z两者都为氧；X和Y两者都为 氧，如果存在W或Z，则W或Z为硫；X和Y两者都为硫，如果存 在W或Z，则W或Z为硫；或者X或Y为硫，如果存在W和Z，则 W和Z两者都为硫。或者，当存在W和Z时，下列是可能的：X＝O， Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O， Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S， W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O， Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O； X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S， Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝S；或者X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝S。在更 特别的实施方案中，化合物具有下式：

其中X、Y独立地为氧或硫，W、Z、R2、R4、R5、和R13-R16如 前所述。例如，在更特别的实施方案中，X或Y为硫，W和Z两者都 为氧；X和Y两者都为硫，W和Z两者都为氧；X和Y两者都为氧， W或Z为硫；X和Y两者都为硫，W或Z为硫；或者X或Y为硫， W和Z两者都为硫。或者，下列是可能的：X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝O； X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝O， W＝S，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝S， Y＝O，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝S； X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝S， Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S， W＝S，Z＝S；或者X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝S。在甚至更特别的实施方案 中，R2、R4、R5、R15和R16中的至少一个为羟基。
本发明还公开了具有下式的化合物：

其中G和D各自独立地为氧或硫，R2-R5如前所述，R46为

其中W、Z和R13-R20如前所述。例如，在更特别的实施方案中， G或D为硫，W和Z两者都为氧；G和D两者都为硫，W和Z两者都 为氧；G和D两者都为氧，W或Z为硫；G和D两者都为硫，W或Z 为硫；或者G或D为硫，W和Z两者都为硫。或者，下列是可能的： G＝O，D＝O，W＝O，Z＝O；G＝S，D＝O，W＝O，Z＝O；G＝O，D＝S， W＝O，Z＝O；G＝O，D＝O，W＝S，Z＝O；G＝O，D＝O，W＝O，Z＝S； G＝S，D＝S，W＝O，Z＝O；G＝S，D＝O，W＝S，Z＝O；G＝S，D＝O，W＝O， Z＝S；G＝O，D＝O，W＝S，Z＝S；G＝O，D＝S，W＝O，Z＝S；G＝O，D＝S， W＝S，Z＝O；G＝S，D＝S，W＝S，Z＝O；G＝S，D＝S，W＝O，Z＝S；G＝S， D＝O，W＝S，Z＝S；G＝O，D＝S，W＝S，Z＝S；或G＝S，D＝S，W＝S， Z＝S。
本发明还公开了调节患者体内TNF-α活性的方法。该方法包括向 患者施用治疗有效量的任何一种或多种上面所公开的化合物，或具有 下式的化合物或其可药用的盐或其立体异构体：

其中X和Y独立地为氧或硫；W、Z、R15-R20如前所述；R47-R52 各自独立地为氢、羟基、酰基、取代的酰基、酰氧基、取代的酰氧基、 烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧基、 取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、氨基、取代的氨基、卤素或硝基， 例如氢、低级烷基、酰氧基、卤素、羟基、氨基或硝基，例如氢、酰 氧基或羟基；
或具有下式的化合物或其可药用的盐或其立体异构体：

其中n＝1-5；X为氧或硫；R2-R5和R15-R19如前所述；
或具有下式的化合物或其可药用的盐或其立体异构体：

其中X和Y各自独立地为氧或硫，n＝1-5，R2-R5如前所述；
或具有下式的化合物或其可药用的盐或其立体异构体：

其中R53和R54独立地为氢、羟基、酰基、取代的酰基、酰氧基、 取代的酰氧基、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代 的炔基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、氨基、取代的 氨基、卤素或硝基，例如氢、低级烷基、酰氧基、卤素、羟基、氨基 或硝基，例如氢、酰氧基或羟基；R55为氢、烷基、或取代的烷基；
或具有下式的化合物或其可药用的盐或其立体异构体：

其中R2-R5如前所述，R56为氢、烷基或取代的烷基。
本发明还预期了关于上述方法的具有所述结构的新型硫取代的类 似物。例如，在更特别的实施方案中，X或Y为硫，如果存在W和Z， 则W和Z两者都为氧；X和Y两者都为硫，如果存在W和Z，则W 和Z两者都为氧；X和Y两者都为氧，如果存在W或Z，则W或Z 为硫；X和Y两者都为硫，如果存在W或Z，则W或Z为硫；或者X 或Y为硫，如果存在W和Z，则W和Z两者都为硫。或者，当存在 W和Z时，下列是可能的：X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O， W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝O； X＝O，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝S，W＝O，Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝S， Z＝O；X＝S，Y＝O，W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S， W＝O，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝O；X＝S， Y＝S，W＝O，Z＝S；X＝S，Y＝O，W＝S，Z＝S；X＝O，Y＝S，W＝S，Z＝S； 或者X＝S，Y＝S，W＝S，Z＝S。
特别公开的化合物和能用于所公开方法中的化合物包括具有下列 结构的一种或多种化合物：


还进一步地，本发明公开了调节患者体内血管生成的方法。该方 法包括向患者施用治疗有效量的一种或多种任何所公开的化合物。上 面显示了可用于该方法的化合物例子。在一些实施方案中，当利用抗 血管生成化合物或化合物的抗血管生成浓度时，可以向患有肿瘤的患 者施用治疗有效量的化合物，以实现抗肿瘤效果，例如抑制肿瘤生成 或肿瘤转移。在其他实施方案中，向患有病理性血管生成的患者施用 治疗有效量的化合物。或者，当需要刺激血管生成时，向患者施用血 管生成化合物或化合物的血管生成浓度，以刺激血管生成。
作为血管生成抑制剂，所公开的化合物可用于治疗原发性和转移 性实体瘤，包括：乳腺癌、结肠癌、直肠癌、肺癌、口咽癌、咽下部 癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、胆囊和胆管癌、小肠癌、泌尿道 癌(包括肾癌、膀胱癌和尿路上皮癌)、女性生殖道癌(包括宫颈癌、子 宫癌和卵巢癌，以及绒膜癌和妊娠滋养层病)、男性生殖道癌(包括前列 腺癌、精囊癌、睾丸癌和胚细胞瘤)、内分泌腺癌(包括甲状腺癌、肾上 腺癌、和垂体腺癌)、皮肤癌、以及血管瘤、黑素瘤、肉瘤(包括来自骨 和软组织的瘤以及卡波西肉瘤)和脑瘤、神经瘤、眼肿瘤、和脑膜瘤(包 括星形细胞瘤、胶质瘤、成胶质细胞瘤、成视网膜细胞瘤、神经瘤、 成神经细胞瘤、施万鞘瘤(Schwannomas)、和脑膜瘤)。这些化合物也可 以用于治疗来自造血恶性病如白血病(即绿色瘤、浆细胞瘤、以及蕈样 肉芽肿病和皮肤T-细胞淋巴瘤/白血病的斑块和肿瘤)的实体瘤以及治 疗淋巴瘤(霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤)。此外，当将这些化合物单 独使用或与放射治疗和/或其它化疗药物一起使用时，可以用于防止上 述肿瘤的转移。
所公开的抗血管生成化合物/浓度的其他用途包括治疗和预防自 身免疫病如风湿病、免疫和变性关节炎。这些化合物也可以用于治疗 病理性(即异常、有害或不希望的)血管生成，例如：各种眼病如糖尿病 性视网膜病、早产儿视网膜病、角膜移植排斥、晶状体后纤维组织形 成、新生血管性青光眼、红变、由于黄斑变性所致的视网膜新血管生 成、缺氧、与感染或外科手术相关的眼内血管生成、和眼睛的其它异 常新血管生成病症；皮肤疾病如银屑病；血管疾病如血管瘤、动脉粥 样硬化斑块内的毛细血管增殖；奥斯勒-韦伯(Osler-Webber)综合征；心 肌血管生成；斑块新血管生成；毛细血管扩张；血友病性关节；血管 纤维瘤；和伤口肉芽形成。其他用途包括治疗以过度或异常刺激内皮 细胞为特征的疾病，包括但不限于：肠粘连、克罗恩病、动脉粥样硬 化、硬皮病、和肥厚性瘢痕，例如瘢痕疙瘩。另一个用途是通过抑制 排卵和胎盘的形成而作为节育药。所公开的化合物还可用于治疗以血 管生成为病理学结果的疾病，例如猫抓病(Rochele minalia quintosa)和溃 疡(幽门螺杆菌)。通过在手术前给药，所公开的化合物还可用于减少出 血，尤其用于可切除肿瘤的治疗。
血管生成化合物或所公开化合物的血管生成浓度可以用于治疗各 种病症，它们将受益于刺激血管发生、刺激血管生成、增加血流、和/ 或增加血管供应。可使用所公开的血管生成化合物、或所公开化合物 的血管生成浓度来治疗的病症和疾病的具体例子包括与血管阻塞相关 的任何病症，例如动脉、静脉、或毛细血管系统阻塞。这些病症或疾 病的具体例子包括但不限于：冠状动脉闭塞性疾病、颈动脉闭塞性疾 病、动脉闭塞性疾病、周围动脉疾病、动脉粥样硬化、内膜肌增生(例 如由于血管手术或球囊血管成形术或血管支架植入(stenting))、血栓闭 塞性脉管炎、血栓形成疾病、血管炎等。可以用所公开的血管生成化 合物/浓度防止的病症或疾病的例子包括但不限于：心脏病发作(心肌梗 死)或其它血管性死亡、卒中、与血流减少相关的肢体死亡或损失等。 本发明血管生成刺激的其它治疗用途包括但不一定限于：加速伤口或 溃疡的愈合；改善皮肤移植或再连接肢体的血管生成，以保持它们的 功能和生存能力；改善外科吻合术的愈合(例如在胃肠手术后肠的再连 接部分内)；和改善皮肤或毛发的生长。
还进一步地，本发明提供了用所公开的化合物抑制TNF-α活性的 方法。该方法包括向患者施用治疗有效量的所公开化合物，以实现抑 制TNF-α的效果。具有TNF-α抑制效果的所公开化合物可以用于治疗 许多炎性、感染性、免疫性、和恶性疾病。这些疾病包括但不限于： 脓毒性休克、脓毒症、内毒素性休克、血液动力性休克和脓毒症综合 征、缺血后再灌注损伤、疟疾、分枝杆菌感染、脑膜炎、银屑病和其 它皮肤疾病、充血性心力衰竭、纤维变性疾病、恶病质、移植排斥、 癌症、肿瘤生长、不希望的血管生成、自身免疫病、AIDS中的机会性 感染、类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、其它关节炎病 症、炎性肠病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、多发性硬化、系统性红斑 狼疮、麻疯病中的ENL、辐射损伤、和氧过多性肺泡损伤。此外，化 合物可以用于治疗其它神经变性疾病，如阿尔茨海默病、帕金森病、 头创伤、卒中和ALS所示例的。
可以将所公开的化合物与其它组合物和方法联合用于治疗疾病。 例如，可以常规地将手术、放射或化学治疗与抗血管生成化合物/浓度 联合用于治疗肿瘤，然后任选地另外向患者施用化合物/浓度，以延长 微转移的休眠，稳定并抑制任何残余原发性肿瘤的生长。或者，可以 将血管生成化合物或化合物的血管生成浓度与其它血管生成刺激药联 合使用。例如，热能(以电阻加热、激光能量或两者的形式)在组织中产 生热治疗的刺激区域或袋(至少在最初任选地通过小通道相互连接)，以 引入血液出生生长(blood born growth)和愈合因子，以及围绕热治疗区 域的受激毛细血管生长。当与血管生成组合物/浓度联合使用时，这些 刺激区域使到达以前缺血和/或非功能组织(例如心脏组织)的血流增 加，伴随着氧和营养物的供应增加，最终导致组织中被治疗部分的新 生。在其他实施方案中，具有TNF-α抑制活性的所公开化合物可以与 其它TNF-α抑制药组合，所述其它TNF-α抑制药为例如甾体，例如地 塞米松和泼尼松龙。当用于治疗癌症时，化合物可以与化学治疗药和/ 或放射和/或手术联合使用。
可以与所公开化合物联合使用的其它化学治疗药的例子包括：烷 化剂、抗代谢药、天然产物、激酶抑制剂、激素和它们的拮抗剂、和 其它各种药物。烷化剂的例子包括：氮芥类(例如氮芥、环磷酰胺、美 法仑、乌拉莫司汀、或苯丁酸氮芥)、烷基磺酸盐(例如白消安)、和亚 硝基脲(例如卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、链佐星、或达卡巴嗪)。 抗代谢药的例子包括：叶酸类似物(例如甲氨喋呤)、嘧啶类似物(例如 5-FU或阿糖胞苷)、和嘌呤类似物，例如巯嘌呤或硫鸟嘌呤。天然产物 的例子包括：长春花生物碱(例如长春碱、长春新碱、或长春地辛)、表 鬼臼毒素(例如依托泊苷或替尼泊苷)、抗生素(例如放线菌素D、柔红 霉素、多柔比星、博来霉素、普卡霉素、或丝裂霉素(mytocycin)C)、和 酶(例如L-天冬酰胺酶)。激酶抑制剂的例子包括小分子抑制剂(例如 Iressa、Tarceva、PKI-166、CI-1033、CGP-5923A、EKB-569、TAK165、 GE-572016、CI-1033、SU5416、ZD4190、PTK787/ZK222584、CGP41251、 CEP-5214、ZD6474、BIBF1000、VGA1102、SU6668、SU11248、 CGP-57148、三环喹喔啉、SU4984、SU5406、Gleevec、NSC680410、 PD 166326、PD1173952、CT53518、GTP14564、PKC412、PP1、PD116285、 CGP77675、CGP76030、CEP-701、和CEP2583)、配体调节剂(例如 Bevacizumanb、MV833、可溶性Flt-1和Flk-1、VEGF Trap、GFB 116、 NM3、VEGF 121-白喉毒素轭合物和干扰素-α)、和对于受体的单克隆 抗体(例如Cetuximab、ABX-EGF、Y10、MDX-447、h-R3、EMD 72000、 曲妥单抗、MDX-H210、pertuzumab、IMC-1C11、和MF1)。激素和拮 抗剂的例子包括：肾上腺皮质类固醇(例如泼尼松)、孕酮(例如己酸羟 孕酮、醋酸甲羟孕酮、和醋酸甲地孕酮(magestrol acetate))、雌激素(例 如己烯雌酚和炔雌醇)、抗雌激素(例如他莫昔芬)、和雄激素(例如丙酸 睾酮和氟甲睾酮)。其他药物的例子包括：铂配位络合物(例如顺式-二 胺-二氯铂II，也称为顺铂)、取代的脲(例如羟基脲)、甲基肼衍生物(例 如丙卡巴肼)、疫苗(例如APC8024)、AP22408、B43-染料木黄酮轭合 物、紫杉醇、AG538、和肾上腺皮质类固醇抑制剂(例如米托坦和氨鲁 米特)。此外，所公开的化合物可以与基因疗法组合，例如那些靶向至 VEGF/VEGFR(包括反义寡核苷酸疗法、基于腺病毒的Flt-1基因疗法、 基于逆转录病毒的Flk-1基因疗法、基于逆转录病毒的VHL基因疗法、 和angiozyme)和IGF-1R(包括INX-4437)的方法。可以与所公开的三环 化合物药剂组合使用的最常用化疗药物的例子包括：阿霉素、爱克兰、 Ara-C、BiCNU、白消安、CCNU、卡铂、顺铂、环磷酰胺制剂、柔红 霉素、DTIC、5-FU、氟达拉滨、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、甲 氨喋呤、普卡霉素、丝裂霉素、米托蒽醌、氮芥、泰素、硫酸长春碱 制剂、长春新碱、VP-16、吉西他滨(健择)、曲妥单抗、伊立替康(盐酸 伊立替康和山梨醇注射剂，CPT-11)、克拉屈滨、诺维本、利妥昔单抗 (Rituxan)STI-571、泰索帝、托泊替康(和美新粉针剂)、适罗达(卡培他 汀)、Zevelin和骨化三醇。
所公开的化合物也可以与使用放射性同位素(例如32P、90Y、125I、 131I、和177Lu)的放射疗法、粒子束(例如质子、中子和电子束)和电磁辐 射(例如γ射线、x-射线和使用光敏剂和可见光线或紫外线的光动力学 疗法组合。
此外，所公开的化合物可以与可药用的赋形剂、和任选的缓释基 质如可生物降解的聚合物组合，以形成治疗组合物。因此，本发明还 公开了包括一种或多种上面公开的任何化合物和可药用载体的药物组 合物。组合物可以包括组合物的单位剂型，还可以包括向患者施用组 合物以抑制血管生成的使用说明书，例如施用组合物以实现抗肿瘤效 果或抑制病理性血管生成的使用说明书。在特别的实施方案中，药物 组合物可以包括下列化合物中的一种或多种：1-硫代-3-氧代-2-(2-氧代 -6-硫代哌啶-3-基)异吲哚啉、1，3-二氧代-2-(2，6-二硫代哌啶-3-基)异吲 哚啉、1-硫代-3-氧代-2-(2，6-二硫代哌啶-3-基)异吲哚啉、N-(2，6-二氧代 哌啶-3-基)-2，3-萘二羧酰胺、1，3-二氧代-2-(2，6-二氧代哌啶-3-基)-5-氮杂 异吲哚啉、1，3-二氧代-2-(1-苯乙基-2，6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚啉、2- 乙酸基-N-(2，6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰胺、2-(2-氧代-6-硫代-3-哌啶 基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮、2-(1，3-二氢-1-氧代-3-硫代-2H-异吲哚-2- 基)-戊二酸二甲酯、2-(1，3-二氢-1，3-二硫代-2H-异吲哚-2-基)-戊二酸二 甲酯、2-(1，3-二氢-1-氧代-3-硫代-2H-异吲哚-2-基)-戊二酸、2，3-二氢-3- 硫代-2-(2，6-二氧代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1-酮、2-(2，6-二硫代-3-哌啶 基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮、2，3-二氢-3-硫代-2-(2-氧代-6-硫代-3-哌啶 基)-1H-异吲哚-1-酮、2，3-二氢-3-硫代-2-(2，6-二硫代-3-哌啶基)-1H-异吲 哚-1-酮、2-(3-环己烯基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二硫酮、2-(3-环己烯 基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮、2-(3-环己烯基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二硫 酮、2，3-二氢-3-硫代-2-(3-环己烯基)-1H-异吲哚-1-酮、3-(2，6-二氧代哌 啶-3-基)苯并恶嗪-2，4-二酮、1-(2，6-二氧代-3-亚哌啶基)-3-氧代异吲哚 啉、6-硫代-2-哌啶酮、2，6-哌啶二硫酮、一硫代邻苯二甲酰亚胺、二硫 代邻苯二甲酰亚胺、N-苯乙基邻苯二甲酰亚胺、3-苄基亚氨基-2-苄基 -2，3-二氢异吲哚-1-酮、3-莰基氨基-2，6-哌啶二酮和3-[2′，6′-哌啶二酮-3′- 基]-7-氨基-2H-1，3-苯并恶嗪-2，4(3H)-二酮；和可药用的载体。在更特别 的实施方案中，将所公开的组合物配制用于口服，该口服剂型可以包 括一种或多种任何所公开的化合物，包括那些通过上面的IUPAC名称 具体公开的化合物。通过向患者施用治疗有效量的这些药物组合物， 可以将该药物组合物用于调节患者体内血管生成或TNF-α活性的方法 中。
如下面的实施例所证明的，将沙利度胺类似物硫化以用硫代羰基 取代羰基，这可以为沙利度胺类似物提供增加的TNF-α活性、增加的 血管生成活性或增加的抗血管生成活性。因此，虽然在某些结构中显 示化合物具有羰基，但是应该理解这些化合物的硫化衍生物也是本发 明的一部分。
4.实施例
              实施例1-沙利度胺的改良合成
参考下面的示意图1，叔丁氧基氨基甲酸酯2与碳二亚胺在THF 中反应，得到酰亚胺3。在室温下，用三氟乙酸的CH2Cl2溶液将酰亚 胺3去保护，获得氨基戊二酰亚胺三氟乙酸酯4。无需进一步纯化，在 三乙胺的存在下，使化合物4与邻苯二甲酸酐在回流的THF中反应， 从2中以总收率24％提供沙利度胺1。该方法比以前报道的几种制备沙 利度胺的合成路线要实用和有效得多。

                         示意图1
按如下制备并分离2，6-二氧代-3-(叔丁氧基羰基氨基)哌啶(3)。将 N-(叔丁氧基羰基)-L-谷氨酰胺(4.92g)和羰基二咪唑(1.70g)的 THF(100mL)溶液回流9h。除去溶剂，将粗产物从热EtOAc中重结晶， 得到化合物3(2.04g，45％)，为白色晶体：mp 214-215℃；1H NMR (DMSO-d6)δ4.22(dd，J＝6.2Hz，J＝11.0Hz，1H)，2.77-2.65(m，1H)， 2，45(m，1H)，1.96-1.87(m，2H)，1.40(s，9H)；MS(CI/CH4)227[M-1]+。
按如下制备并分离2，6-二氧代-3-氨基哌啶三氟乙酸酯(4)。将化合 物3(59mg)悬浮于CH2Cl2(5mL)中。添加CF3COOH(0.5mL)。将反应溶 液在室温下搅拌4h。除去溶剂，得到4(62mg，99％)：1H NMR(DMSO-d6) δ11.42(s，1H)，8.70(br，2H)，4.31(dd，J＝5.4Hz，J＝13Hz)，2.88-2.72 (m，2H)，2.25-2.09(m，2H)。
按如下制备并分离沙利度胺(1)。将4、邻苯二甲酸酐和Et3N在 THF中的混合物回流两天。将反应混合物浓缩，通过柱色谱法(洗脱液 CH2Cl2/EtOAc＝6∶1)纯化，得到沙利度胺(104mg，54％)，为白色晶体。
             实施例2-合成芳族沙利度胺类似物
参考下面的示意图2，在乙酸钠的存在下，将氨基吡啶和邻苯二 甲酸酐在回流的AcOH中缩合，从而获得二甲醚5。在室温下，将5 与HBr在冰AcOH溶液(30％)中放置18h，实现5的选择性醚裂开，以 得到化合物6。通过质谱、1D NMR和2D NMR确定化合物6的结构。 化合物6的分子离子为270amu，证明仅裂开了一个甲醚。2D NOESY 显示，甲氧基上的质子对应H-5，说明2-甲氧基被选择性地裂开，而 6-甲氧基被保留下来。当反应温度升到70℃时，两个甲醚均被 HBr/HOAc溶液(30％)裂开，得到二酚7。

                         示意图2
按如下制备并分离1，3-二氧代-2-(2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-异吲哚 啉(5)。将邻苯二甲酸酐(0.89g，6mmol)、3-氨基-2，6-二甲氧基吡啶一盐 酸盐(95％，1g，5mmol)和乙酸钠(0.49g，6mmol)在冰乙酸(50ml)中的混 合物回流3h。在真空下除去溶剂。将残余物溶于二氯甲烷(200ml)中， 用水(100ml×3)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩得到粗产物。将粗产物用 乙酸乙酯重结晶，得到5(1.345g，90％)，为浅桃红色晶体：mp 182-183 ℃；1H NMR(CDCl3)δ7.96-7.90(m，2H)，7.80-7.76(m，2H)，7.44(d，J＝ 8.1Hz，1H)，6.42(d，J＝8.1Hz，1H，3.95(s，3H)，3.91(s，3H)；13C NMR (DMSO-d6)δ166.5，160.6，156.1，140.1，132.8，129.4，121.4，104.6，99.3， 51.7，51.5；MS(CI/CH4)285[M+1]+。分析：C15H12N2O4的计算值：C， 63.38；H，4.25；N，9.85。检测值：C，63.57；H，4.18；N，9.65。
按如下制备并分离1，3-二氧代-2-(2-羟基-6-甲氧基吡啶-3-基)-异吲 哚啉氢溴酸盐(6)。向烧瓶中添加2，6-二甲氧基-3-苯二酰亚氨基吡啶 (155mg，0.546mmol)和溴化氢的乙酸(30％，6ml)溶液。将混合物在室 温下、在N2中搅拌18h。缓慢添加干醚，直至溶液变得浑浊。沉淀出 白色晶体，过滤，并用醚和乙酸乙酯洗涤，得到6(127mg，67％)，为 白色粉状晶体：mp 250℃；1H NMR(DMSO-d6)δ7.97-7.94(m，2H)， 7.91-7.88(m，2H)，7.64(d，J＝8.2Hz，1H)，6.25(d，J＝8.2Hz，1H)，3.86 (s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)δ167.5，162.1，159.1，142.8，135.4，132.1， 123.7，108.2，96.4，54.8；MS(CI/CH4)270[M]+。
按如下制备并分离1，3-二氧代-2-(2，6-二羟基吡啶-3-基)-异吲哚啉 氢溴酸盐(7)。向烧瓶中添加2，6-二甲氧基-3-苯二酰亚氨基吡啶(150mg， 0.528mmol)和溴化氢的乙酸溶液(30％，6ml)。将混合物在70℃的油浴 中、在N2中搅拌54h。将混合物冷却到室温，添加干醚，倾析出上清 液。然后添加乙酸乙酯，固体被沉淀，过滤，并用乙酸乙酯洗涤，得 到7(126mg，71％)，为白色固体：1H NMR(CD3OD)δ7.83-7.77(m，4H)， 6.37(d，J＝8.1Hz，1H)，6.37(d，J＝8.1Hz，1H)；MS(CI/CH4)256[M]+； C13H8N2O4的HRMS(DEI)m/z计算值256.0484，检测值256.0483。
           实施例3-合成N-取代的沙利度胺类似物
参考下面的示意图3，将N-邻苯二甲酰-DL-谷氨酸酐和苯乙胺的 混合物在177℃的油浴中加热。通过色谱法在硅胶柱上将反应混合物纯 化，得到N-苯乙基沙利度胺(8)和N-苯乙基邻苯苯二甲酰亚胺(9)。

                         示意图3
具体地，按如下制备并分离1，3-二氧代-2-(1-苯乙基-2，6-二氧代哌 啶-3-基)异吲哚啉(8)。将N-邻苯二甲酰-DL-谷氨酸酐(300mg，1.13mmol) 和苯乙胺(139mg，1.13mmol)的混合物在177℃的油浴中搅拌两小时。 将反应混合物冷却，通过柱色谱法纯化，先用石油醚/二氯甲烷(1∶5)作 为洗脱液，得到N-苯乙基邻苯二甲酰亚胺，为浅黄色固体[1H NMR (CDCl3)δ7.78-7.77(m，2H)，7.65-7.62(m 2H)，7.22-7.16(m，5H)，3.83 (t，2H)，2.92(t，2H)]，然后用二氯甲烷作为洗脱液，得到浆状的N-苯乙 基沙利度胺，然后从醚中重结晶，得到白色晶体[(139mg，34％)：mp 122-123℃；1H NMR(CDCl3)δ7.84-7.81(dd，J＝3.1Hz，J＝5.4Hz，2H)， 7.72-7.69(dd，J＝3.1Hz，J＝5.4Hz，2H)，7.20-7.14(m，5H)，4.89(dd，J ＝5.4Hz，J＝12.5Hz，1H)，4.01-3.92(m，2H)，2.90-2.63(m，5H)， 2.06-2.02(m，1H)；分析：C21H18N2O4的计算值：C，69.60；H，5.01； N，7.73。检测值：C，69.40；H，5.13；N，7.74]。
                实施例4-合成氮杂沙利度胺
参考下面的示意图4，从氨基戊二酰亚胺和市售的吡啶-3，4-二羧酸 酐中制备氮杂沙利度胺。使用碳载的氢氧化钯催化剂(10％)，通过氢解 去保护Cbz-氨基戊二酰亚胺，以形成氨基戊二酰亚胺。在三乙胺的存 在下，将吡啶-3，4-二羧酸酐与氨基戊二酰亚胺回流，以获得氮杂沙利 度胺11，从Cbz-氨基戊二酰亚胺中的总收率为17％。

                         示意图4
具体地，按如下制备1，3-二氧代-2-(2，6-二氧代哌啶-3-基)-5-氮杂异 吲哚啉(11)。将Cbz-氨基戊二酰亚胺(302mg)和碳载氢氧化钯(20％)在 2-丙醇(20ml)中的混合物在H2中搅拌一天。将反应混合物滤过塞里塑 料(celite)，用2-丙醇和甲醇洗涤。将合并的滤液浓缩，得到浆状的粗 3-氨基-1，6-二氧代哌啶。向包含3-氨基-1，6-二氧代哌啶的烧瓶中添加 3，4-吡啶二羧酸酐(205mg)、三乙胺(0.16ml)和THF(10ml)。将混合物回 流一天半。在真空下除去溶剂。通过柱色谱法纯化残余物，用CH2Cl2∶ MeOH(10∶1)作为洗脱液，得到氮杂沙利度胺(52mg)，从Cbz-氨基戊二 酰亚胺中的收率为17％，为浅紫色固体：mp 233-235℃，1H NMR(DMSO) δ11.18(s，1H)，9.21(s，1H)，9.17(d，J＝4.8Hz，1H)，7.98(d，J＝4.8Hz， 1H)，5.23(dd，J＝5.4Hz，J＝12.8Hz，1H)，2.96-2.85(m，2H)，2.60-2.51 (m，1H)，2.12-2.07(m，1H)；MS(CI/CH4)m/z 259[M]+；分析： C12H9N2O4的计算值：C，55.60；H，3.50；N，16.21。检测值：C，55.36；H， 3.44；N，15.94。
             实施例5-合成乙酸基沙利度胺类似物

                         示意图5
参考上面的示意图5，按如下制备并分离乙酸基沙利度胺。首先， 通过将3-羟基邻苯二甲酸酐(150mg)、乙酸酐(2mL)、和NaOAc(150mg) 的混合物回流8h，制备3-乙酸基邻苯二甲酸酐。将反应混合物过滤。 将滤液浓缩，用干醚洗涤，得到浅黄色固体(127mg，68％)。1H NMR (DMSO)δ8.25(d，J＝7.9Hz，1H)，8.18(dd，J＝0.9Hz，J＝7.5Hz，1H)， 7.97(dd，J＝0.9Hz，J＝7.9Hz，1H)，2.59(s，3H)。
按如下制备并分离1，3-二氧代-2-(2，6-二氧代哌啶-3-基)-4-乙酸基 异吲哚啉。将3-乙酸基邻苯二甲酸酐(40mg)、氨基戊二酰亚胺三氟乙 酸酯(47mg)、和NaOAc(32mg)在乙酸(2mL)中的混合物回流5h。蒸发 掉溶剂，添加水(10mL)，将所得溶液搅拌几分钟。过滤出固体，从乙 酸乙酯中重结晶，得到1，3-二氧代-2-(2，6-二氧代哌啶-3-基)-4-乙酸基异 吲哚啉，为浅黄色晶体(35mg，66％)：1H NMR(DMSO)δ11.16(s，1H)， 11.07(s，1H)，7.64(t，J＝7.2Hz，1H)，7.22-7.31(m，2H)，5.05(dd，J＝5.4 Hz，J＝12.5Hz，1H)，2.87-2.92(m，2H)，2.48(s，3H)，2.08-2.00(m，2H)。
                实施例6-合成苯并沙利度胺
参考下面的示意图6，在三乙胺的THF溶液的存在下，将1，8-萘 二甲酸酐与胺4加热，得到12。将萘-2，3-二羧酸转化为酐13，它与氨 基戊二酰亚胺三氟乙酸酯4反应，得到苯并沙利度胺14。光谱数据、 包括质谱和NMR、以及燃烧分析与分配给这些产物的结构一致。

                         示意图6
具体地，按如下制备并分离N-(2，6-二氧代哌啶-3-基)-1，8-萘二甲酰 亚胺(12)。将胺4(0.877mmol)、1，8-萘二甲酸酐(174mg，0.879)和三乙 胺(1.22ml)在THF(10ml)中的混合物回流20h。除去溶剂，将残余物悬 浮在乙酸酐中，回流20分钟。在80℃下添加乙醇(5ml)，搅拌30min。 冷却后，过滤收集产物，用EtOAc洗涤，以得到化合物12(227mg，84％)， 为浅绿色固体：mp＞300℃；1H NMR(DMSO-d6)δ11.03(s，1H)， 8.61-8.47(m，4H)，7.92(dd，J＝7.3Hz，J＝13.5Hz，2H)，5.85(dd，J＝5.4 Hz，J＝11.3Hz，1H)，3.01-2.88(m，1H)，2.73-2.61(m，2H)，2.08-1.99(m， 1H).MS(DEI)m/z 309[M+1]+；HRMS(DEI)m/z计算值：C17H13N2O4309.0875，检测值309.0874；分析：C17H13N2O4计算值：C，66.23；H，3.92； N，9.09。检测值：C，65.97；H，3.99；N，8.91。
按如下制备并分离N-(2，6-二氧代哌啶-3-基)-2，3-萘二羧酰胺(14)。 将2，3-萘二羧酸(199mg，0.875mmol)和乙酸酐(2mL)的混合物回流 30min。将反应混合物冷却，过滤收集固体，得到酸酐13(0.133g，77％)， 为白色固体。向氨基戊二酰亚胺三氟乙酸酯(163mg)和三乙胺(1mL)的 THF(10mL)的溶液中添加酸酐13(133mg)。将混合物回流16h。在真空 中除去溶剂，将残余物溶于EtOAc中，用饱和NaHCO3水溶液和H2O洗涤，干燥并浓缩。通过闪蒸色谱法将残余物纯化，得到化合物14， 为白色固体(146mg，70％)。mp＞300℃；1H NMR(DMSO-d6)δ11.3(s， 1H)，8.60(s，2H)，8.30(dd，J ＝3.3Hz，J＝6.1Hz，2H)，7.82(dd，J＝3.2Hz，J＝6.2Hz，2H)，5.24(dd，J ＝5.6Hz，J＝13.0Hz，1H)，2.99-2.86(m，2H)，2.66-2.57(m，2H)， 2.12-1.99(m，1H).MS(DEI)m/z 308[M]+；HRMS(DEI)m/z计算值 C17H12N2O4308.0797，检测值308.0798；分析：C17H12N2O4·0.25H2O计 算值：C，65.28；H，4.03；N，8.96，检测值：C，65.42；H，3.93；N，8.94。
             实施例7-合成沙利度胺的硫类似物
参考下面的示意图7，使沙利度胺1与Lawesson试剂反应，同时 在苯中、在80℃下搅拌48h，以收率38％获得硫代酰胺15。除了一硫 代沙利度胺外，还获得了痕量的二硫代酰亚胺(dithionimide)16(1.6％)。 但是，当一硫代沙利度胺和Lawesson试剂的反应在80℃至120℃之间 进行时，对于二硫代酰亚胺的制备，证明收率是非常低的(低于2％)。 当将有机碱添加到反应混合物中时，极大地改变了情况。因此，在110 ℃下、在吡啶的存在下，进行一硫代沙利度胺15与Lawesson试剂在 甲苯中的硫化，得到二硫代酰亚胺16(45％)和二硫代酰亚胺17(31％)。 通过质谱、1DNMR和2DNMR鉴定这些硫取代沙利度胺的结构。在110 ℃下，在吗啉的存在下，将沙利度胺与Lawesson试剂加热，得到二硫 代酰亚胺16和三硫代酰亚胺18。

                         示意图7
按如下合成并分离1，3-二氧代-2-(2-氧代-6-硫代哌啶-3-基)异吲哚 啉(15)。在80℃的油浴中，将沙利度胺(170mg，0.658mmol)和Lawesson 试剂(293mg，0.724mmol)在苯(50ml)中的混合物搅拌2天。在真空下除 去溶剂。通过柱色谱法纯化残余物，用CH2Cl2/石油醚(5∶1)作为洗脱液， 得到化合物16(3mg，1.6％)，为红色固体，然后用CH2Cl2为洗脱液， 得到化合物15(68mg，38％)，为黄色固体：mp 225-226℃；1H NMR (DMSO-d6)δ12.83(s，1H)，8.00-7.92(m，4H)，5.32(dd，J＝5.6Hz，J＝ 12.9Hz，1H)，3.28-3.25(m，1H)，2.60-2.54(m，2H)，2.17-2.10(m，1H)； 13C NMR(DMSO-d6)δ208.7(C-6′)，165.3(C-2′)，165.2(C-1 & C-3)， 133.1(C-5 & C-6)，129.3(C-3a，C-7a)，121.7(C-4 & C-7)，46.9(C-3′)， 38.9(C-5′)，21.79(C-4′)；MS(CI/CH4)m/z 274[M]+；分析：C13H10N2O3S的计算值：C，56.92；H，3.67；N，10.21，检测值：C，56.89；H，3.78；N， 10.15。
按如下合成1-硫代-3-氧代-2-(2-氧代-6-硫代哌啶-3-基)异吲哚啉 (16)和1，3-二氧代-2-(2，6-二硫代哌啶-3-基)异吲哚啉(17)。在110℃下， 在N2气氛中，将15(146mg，0.533mmol)、Lawesson试剂(108mg， 0.267mmol)和吡啶(21μl)在甲苯中的混合物搅拌12h。然后，添加更多 的Lawesson试剂(108mg，0.267mmol)和吡啶(21μl)。将反应混合物再 搅拌12h。在真空下除去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物(洗脱液CH2Cl2/ 石油醚＝2∶1、10∶1，然后CH2Cl2/EtOAc＝10∶1)，得到16(30mg，45％) 和17(21mg，31.5％)。还回收了原材料15(83mg)。
化合物16：(黄色固体)：mp 263-265℃；1H NMR(CDCl3)δ 7.78-7.74(m，2H)，7.66-7.63(m，2H)，5.00(dd，J＝4.9Hz，11.9Hz，1H)， 3.43-3.35(m，1H)，2.95-2.84(m，2H)，2.08-2.06(m，1H)；MS(DEI)m/z 290[M]+；HRMS(DEI)m/z C13H10N2O2S2计算值290.0184，检测值 290.0185；分析：C13H10N2O2S2计算值：C，53.77；H，3.47；N，9.65，检 测值：C，53.38；H，3.29；N，9.50。
化合物17：(红色固体)：mp 240-242℃；1H NMR(CDCl3)δ9.44(s， 1H)，8.05-8.02(m，1H)，7.86-7.76(m，3H)，5.75-5.64(m，1H)， 3.57-3.52(m，1H)，3.09-2.99(m，2H)，2.19-2.12(m，1H).13C NMR (DMSO)：208.16，207.98，166.10，165.39，134.32，133.11，132.42，124.30， 122.15，121.11，49.64，21.29；MS(DEI)m/z 291[M+1]+；HRMS(DEI) m/z C13H11N2O2S2计算值291.0262，检测值291.0264；分析： C13H10N2O2S2·0.5H2O的计算值：C，52.15；H，3.70；N，9.36，检测值：C， 52.25；H，3.44；N，9.07。
按如下制备并分离1-硫代-3-氧代-2-(2，6-二硫代哌啶-3-基)异吲哚 啉(18)。在105℃下，在N2气氛中，将沙利度胺(100mg)、Lawesson试 剂(157mg)和吗啉(35μl)在甲苯(10mL)中的混合物搅拌24h。在真空下除 去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物，使用CH2Cl2∶石油醚(1∶1)为洗脱 液，得到化合物18(13mg，11％)，为红色晶体：mp 244℃；1H NMR (CDCl3)δ10.81(s，1H)，8.05-8.01(m，1H)，7.91-7.75(m，3H)，5.92(m， 1H)，3.57-3.52(m，1H)，3.13-2.97(m，2H)，2.18-2.15(m，1H)；MS(DEI) m/z 306[M]+；HRMS(DEI)m/z C13H10N2OS3计算值305.9955，检测值 305.9951；分析：C13H10N2OS2·0.5H2O的计算值：C，49.49；H，3.51；N， 8.88，检测值：C，49.85；H，3.24；N，8.88。然后，用CH2Cl2作为洗脱液， 得到化合物16(31mg，28％)，为黄色晶体。
              实施例8-合成苯并恶嗪-2，4-二酮
参考下面的示意图8，用氯甲酸乙酯处理水杨酸，然后将该反应 混合物在减压下蒸发以除去任何未反应的氯甲酸乙酯。在三乙胺的存 在下，将所得残余物与胺搅拌，得到取代的苯并恶嗪-2，4-二酮。

                         示意图8
按如下制备并分离3-(2，6-二氧代哌啶-3-基)苯并恶嗪-2，4-二酮 (20)。向水杨酸(100mg)和三乙胺(303ml)在氯仿(10mL)中的冷的冰/盐溶 液中添加氯甲酸乙酯(157ml)。将反应混合物暖热至室温，然后，继续 搅拌3h。在真空下除去溶剂，得到粗19。无需进一步纯化，将粗化合 物19溶于CHCl3中，用冰冷却。向冰冷的溶液中添加胺(95mg)。将反 应混合物暖热到环境温度，在室温下搅拌过夜。沉淀出白色固体，过 滤收集，用氯仿洗涤，得到化合物20(79mg，74％)，为白色晶体：mp 264 ℃；1H NMR(DMSO-d6)δ11.18(s，1H)，8.07-7.85(m，2H)，7.50(d，J＝ 8.5Hz)，5.78-5.75(m，0.6H)，5.49-5.47(m，0.4H)，2.90-2.87(m，1H)，2.05 (m，1H)；13C NMR(DMSO-d6)δ173.0(0.6C)，172.9(0.4C)，169.9(0.6C)， 169.6(0.4C)，160.8(0.6C)，159.8(0.4C)，152.5(1C)，148.4(0.4C)，146.5 (0.6C)，137.2(1C)，128.1(0.6C)，127.6(0.4C)，126.1(1C)，116.8(1C)， 114.5(0.4C)，113.9(0.6C)，54.1(0.4C)，51.4(0.6C)，31.0(1C)，21.2(1C). MS(DEI)m/z 274[M]+；HRMS(DEI)m/z C13H10N2O5的计算值 274.0590，检测值274.0582；分析：C13H10N2O5的计算值：C，56.94；H， 3.68；N，10.22，检测值：C，56.51；H，3.77；N，9.95。
实施例9-合成1-(2，6-二氧代-3-亚哌啶基)-3-氧代异吲哚啉
参考下面的示意图9，在Eschenmoser偶联反应中，在Na2CO3的 存在下，将一硫代邻苯二甲酰亚胺(21)和3-溴代戊二酰亚胺(22)搅拌。 因此，通过一硫代邻苯二甲酰亚胺与3-溴代戊二酰亚胺的烷基化，然 后消除硫，形成化合物23。

                         示意图9
具体地，按如下制备并分离1-(2，6-二氧代-3-亚哌啶基)-3-氧代异 吲哚啉(23)。将21(16mg，0.1mmol)、22(19mg，0.1mmol)、和碳酸钾 (100mg)在无水THF中的混合物回流7h。薄层色谱法(TLC)显示原材料 已经消失。添加乙酸乙酯(20ml)和水(10ml)。分离有机层，用Na2SO4干燥，真空浓缩。通过色谱法纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(先2∶1， 然后1∶2)作为洗脱液，得到23(14mg，58％)，为黄色晶体：mp 295℃； 1HNMR(DMSO-d6)：11.05(s，1H)，10.29(s，1H)，8.13(d，J＝7.6Hz，1 H)，7.89(d，J＝7.2Hz，1H)，7.80(m，1H)，7.73(m，1H)，3.20(t， J＝7.0Hz，2H)，2.67(t，J＝7.0Hz，2H).13C NMR(DMSO-d6)：172.6， 169.0，167.3，142.7，136.1，134.3，131.7，130.1，126.4，124.1，104.6，21.2， 11.7.MS(DEI)m/z 242[M]+；HRMS(DEI)m/z C13H10N2O3的计算值 242.0691，检测值242.0687。
                实施例10-水杨酰胺类似物
按下面的示意图10，进行市售乙酰水杨酰与氨基戊二酰亚胺三氟 乙酸酯的反应，得到乙酰水杨酰胺24。

                         示意图10
更具体地，按如下制备2-乙酸基-N-(2，6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰 胺(24)。向乙酰水杨酰氯(252mg)和三乙胺(0.58mL)在氯仿(30mL)中的 冰冷溶液中添加3-氨基戊二酰亚胺(glutaride)三氟乙酸酯(207mg)。将反 应物暖热至室温，继续搅拌过夜。除去溶剂，从乙酸乙酯中重结晶， 得到化合物24，为白色晶体(0.36g，98％)：1H NMR(DMSO-d6)δ11.00 (s，1H)，8.73(d，J＝8.3Hz，1H)，7.81(dd，J＝1.6Hz，J＝7.7Hz，1H)， 7.72(m，1H)，7.54(m，1H)，7.38(dd，J＝0.9Hz，J＝8.1Hz，1H)， 4.95-4.82(m，1H)，2.96-2.90(m，1H)，2.43(s，3H)，2.18-2.15(m，2H)。
    实施例11-合成硫代沙利度胺并确定它们的TNF-α抑制活性
设计一系列硫代沙利度胺和类似物，以研究它们在抑制TNF-α方 面的作用。按示意图11所示制备一硫代沙利度胺205(与实施例7中的 化合物15一样)。将叔丁氧基羰基-L-谷氨酰胺202与羰基二咪唑(CDI) 的THF溶液回流，环化，以得到酰亚胺203(Muller等人，“氨基取代 的沙利度胺类似物：TNF-α制备的有效抑制剂”(Amino-substituted Thalidomide analogs：potent inhibitors of TNF-α production)，Bioorg.Med. Chem，Lett.9，1625-1630，1999)。
然后用三氟乙酸的CH2Cl2溶液处理酰亚胺203，以除去保护基， 产生氨基戊二酰亚胺三氟乙酸酯204。无需进一步纯化，在三乙胺的存 在下，使化合物204与邻苯二甲酸酐在回流的THF中反应，以制备沙 利度胺201(与实施例7中的化合物1相同)，由化合物202所得的总收 率为31％。用Lawesson试剂将沙利度胺201硫化(LR，Cava等人， “Lawesson试剂的硫化反应”(Thionation reaction of Lawesson′s Reagents)，Tetrahedron，41，5061-5087，1985，该文献被全文引入本文以 供参考)，以产生单一的新产物，通过质谱和1D & 2D核磁共振波谱法 鉴定其结构为6′-硫代沙利度胺205。从H-5′/C-6′的杂核重键相关(HMBC) 交叉峰确定硫代羰基的位置。

示意图11：试剂：(a)CDI/THF；(b)CF3COOH/CH2Cl2；(c)邻苯
二甲酸酐，Et3N/THF；(d)Lawesson试剂/甲苯。
下面的示意图12显示了3-硫代沙利度胺212的合成。将N-邻苯 二甲酰-L-谷氨酸206酯化，得到二酯207。在110℃，用LR将化合物 207硫化，得到作为主要产物的化合物208。同时，通过色谱法分离作 为次要产物的化合物209。
当氨与硫代酰胺反应时，不能通过用氨或胺环化化合物208来制 备3-硫代沙利度胺212；化合物208与苄胺的反应产生了预料之外的化 合物210。在替代方法中，将化合物208在酸性条件下水解，得到二酸 211。然后在1-羟基苯并三唑(HOBt)和1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳 二亚胺盐酸盐的存在下，使化合物211与三氟乙酰胺反应，以产生3- 硫代沙利度胺212(EDCI，Flaih等人，“环状亚胺的快速合成”(An expeditious synthesis of cyclic imides)，Tetrahedron Lett.40，3697-3698， 1999)。

示意图12：试剂：(a)Lawesson试剂/甲苯；(b)苄胺；(c)HCl/HOAc；
            (d)F3CCONH2，HOBt，EDCI，Et3N/CH2Cl2。
在合成二硫代沙利度胺时，一种方法包括一硫代沙利度胺与LR 在回流下、在甲苯中的反应。在这些条件下，以小于2％的收率获得2′，6′- 二硫代沙利度胺(示意图13a)。收率是如此低，以至于需要改善，通过 改良反应条件来改善收率。据信，LR和羰基部分之间的反应机理是， 高活性的二硫代膦内盐(dithiophosphine ylide)214，而非LR本身，可 能是活性硫化剂(示意图4，Cava等人，“Lawesson试剂的硫化反应” (Thionation reaction of Lawesson′s reagents)，Tetrahedron，41，5061-5087， 1985，该文献被全文引入本文以供参考)。路易斯碱能够增加LR的活 性，因为该碱可以推进不利的平衡，升高内盐214的浓度。当用吡 啶作为硫化的催化剂时，用LR将一硫代沙利度胺205硫化，以产生两 种二硫代沙利度胺：213(与实施例7中化合物16相同)和215(与实施例 7中化合物17相同)，收率分别为45％和31％(示意图13b、c)。在更强 的碱-吗啉的存在下，用LR进一步将二硫代沙利度胺213硫化，得到 三硫代沙利度胺216(与实施例7中化合物18相同)，收率为65％。

示意图13：试剂：(a)Lawesson试剂/甲苯；(b)Lawesson试剂，
          吡啶/甲苯；(c)Lawesson试剂，吗啉/甲苯。

          示意图14.Lawesson试剂的催化机理
在室温下，用LR的THF溶液将戊二酰亚胺217硫化，得到作为 主要产物的化合物218。还将戊二酰亚胺217与LR的甲苯溶液回流， 以产生二硫代戊二酰亚胺219(示意图15)。在加布里埃耳(Gabriel)反应 中，邻苯二甲酰亚胺钾与3-溴环己烯反应得到化合物221。然后，用LR 将化合物221硫化，得到化合物222和223(示意图16)。按与制备化合 物222和223中所用方法类似的方法制备化合物224和225。

示意图15.试剂：(a)Lawesson试剂/THF，室温；(b)Lawesson试 剂，回流/甲苯

示意图16.试剂：(a)3-溴环己烯/DMF；(b)Lawesson试剂/甲苯
下面总结该实施例的硫代沙利度胺化合物的结构。

205：Ra＝O，Rb＝O，Rc＝S                       208：Ra＝S，Rb＝O，Rd＝Me
212：Ra＝S，Rb＝O，Rc＝O                       209：Ra＝S，Rb＝S，Rd＝Me
213：Ra＝O，Rb＝S，Rc＝S                       211：Ra＝S，Rb＝O，Rd＝H
215：Ra＝S，Rb＝O，Rc＝S
216：Ra＝S，Rb＝S，Rc＝S

218：Ra＝S，Rb＝O             222：Ra＝S，Rb＝S               224：Ra＝S，Rb＝S
219：Ra＝S，Rb＝S             223：Ra＝S，Rb＝O               225：Ra＝S，Rb＝O
在人外周血单核细胞(PBMC)中评价这些硫代沙利度胺类似物在 抑制TNF-α分泌中的作用，结果示于表1中。在所有研究中使用新鲜 制备的PBMC。从志愿者身上抽取40ml血，立即与50U/ml肝素钠混 合，用无菌PBS稀释至总体积为50ml。然后将该配制物的20ml样品 在20ml Ficoll-Paque上分层，离心(800g，20min)。收集包含PBMC的 Ficoll/血清界面，用PBS稀释至200ml，然后离心(800g，15min)，制 成小丸状的细胞。其后，将回收的小丸再悬浮于37℃的组织培养基 (RPMI/1mM丙酮酸钠/10％热灭活的FBS/2mM Glutamax)中，放置在冰 上。将回收的细胞计数，吸移(200μl，5×105/ml)到96孔平板内，培育 一小时(37℃，5％CO2)。其后，向重复孔中添加合适浓度的受试化合 物或运载体(10μl DMSO)。在另外培育一小时后，添加10μl脂多糖(LPS) 样品(100ng/ml，在补加的培养基中)或运载体，以分别诱导被刺激和未 被刺激的细胞，将细胞培育过夜。十六小时后，收集上清液，用于分 别通过ELISA测定(Pierce-Endogen人TNF-α微型试剂盒，Rockford，IL) 和使用特异性捕获和检测单克隆抗体M303E和M302B(Pierce-Endogen) 来测定TNF-α水平。在λ＝450nm处读取ELISA平板，从与受试样品同 时运行的六点标准曲线中确定TNF-α水平。通过细胞的MTS测定 (Promega，Madison，WI)，所述细胞为上述测定TNF-α水平提供上清液 样品，从而评价受试药物浓度对PBMC细胞生存力的影响。应该理解， 该方法可以作为筛选测定，用于测试任何所公开的化合物，以容易地 确定它们的TNF-α调节活性，并用于选择它们以用于治疗患者的所公 开方法中。
                     表1.在PBMC中抑制LPS-诱导的TNF-α产生及细胞生存力   化合物  在30μM的抑制％   IC50   (μM)             细胞生存力   在30μM   在3μM   在0.3μM   205   208   209   211   212   213   215   216   218   219   222   223   224   225  31  56  85  20  23  52  61  79  15  75  86  85  95  34   ＞30   20   10   ＞30   ＞30   20   11   6   ＞30   8   15   16   3   ＞30   ＞100   93   57   86   94   69   ＞100   94   ＞100   ＞100   50   57   54   ＞100   90   99   86   93   100   87   87   86   84   98   94   89   83   94   96   96   89   93   94   94   94   90   86   99   96   99   83   94
沙利度胺201在30μM时完全没有活性。需要100μM的浓度才有 显著的活性(IC50～200μM)。一硫代沙利度胺6′-硫代沙利度胺205和3- 硫代沙利度胺212在30μM时仅显示边缘活性，分别抑制31％和23％ 的TNF-α分泌。相反，包括2′，6′-二硫代沙利度胺213和3，6′-二硫代沙 利度胺215在内的二硫代沙利度胺具有更有效的抑制活性，IC50值分别 为20μM和11μM。但是，通过MTS测定来评价细胞生存力，显示213 在更高浓度下会诱导细胞毒性增加。三硫代沙利度胺216能抑制TNF-α 的产生，IC50为6μM，不伴随毒性。沙利度胺201抑制TNF-α合成的 IC50为～200μM，与沙利度胺201相比，三硫代沙利度胺216的活性超 过30倍。因此，用硫代羰基连续取代羰基导致与201相比改善的抑制 活性，而不伴随毒性。在这点上，所合成的硫代沙利度胺具有下列降 低顺序的TNF-α降低效能：三硫代沙利度胺216＞二硫代沙利度胺215 和213＞一硫代沙利度胺205和212＞沙利度胺201。
对比沙利度胺201和硫代沙利度胺的物理性质，显示它们具有类 似的范德华半径和键角，但是C＝S键稍长于C＝O键。虽然不希望受任 何具体理论的限制，但对于硫代沙利度胺效能升高的可能解释是，由 于它们的亲油性增强，且失去了氢键受体能力，这潜在地允许达到更 高的胞内药物水平。令人感兴趣的是，化合物208、209和211是沙利 度胺水解代谢物的硫代类似物。评价它们的TNF-α抑制作用，确定一 硫代类似物208的IC50为20μM，无毒性；脱甲基化(211)降低了效能。 证明二硫代类似物209的有效性比208还要高2倍，但在较低浓度下 会诱导细胞毒性。令人感兴趣的是，发现具有简化的戊二酰亚胺环的 硫代类似物222和223是活性的TNF-α抑制剂，虽然在30μM时有一 些毒性，IC50值(分别为15μM和16μM)大于具有正常戊二酰亚胺环的 212的IC50值(＞30μM)。
在这点上，沙利度胺由两个不同的部分组成：戊二酰亚胺环和邻 苯二甲酰亚胺环。因此合成并评价硫代戊二酰亚胺和硫代邻苯二甲酰 亚胺，以评估这两个部分的硫代类似物对TNF-α水平的影响。在浓度 为30μM时，一硫代戊二酰亚胺218最小地抑制TNF-α的分泌，但二 硫代戊二酰亚胺219发挥了有效的抑制效果，IC50为8μM，无毒性。 令人惊讶地，证明如此简单的结构-二硫代戊二酰亚胺219比沙利度胺 201的活性高25倍。相反，2′，6′-二硫代沙利度胺213，即苯二酰亚氨 基取代的二硫代戊二酰亚胺，比二硫代戊二酰亚胺219的活性更小， 而且在高浓度下会诱导毒性。在30μM的浓度下，一硫代邻苯二甲酰 亚胺225显示出边缘TNF-α活性，无毒性。但是，有趣地，发现二硫 代邻苯二甲酰亚胺224具有很强的活性，IC50为3μM。虽然在30μM时 它伴有毒性，但是它对TNF-α的抑制发生在比有良好耐受的浓度低的 量级。
如上所述，化合物215、216和219能有效抑制TNF-α的分泌， 无毒性。作为结果，进行另外的研究以阐明支持该作用的机理。基因 和蛋白质表达在在不同生理刺激下的转录、转录后、RNA稳定性和翻 译的水平下被控制。近来，已认识到，转录后途径提供了调节真核基 因表达的主要方式。在这点上，已知在转录后水平上调节TNF-α和其 它细胞因子和原癌基因。已经显示，包括四种克隆蛋白质AUF1、HuR、 TTP和HuD在内的多种蛋白质结合到mRNA的区域，该区域包括3′- 未翻译区(UTR)内富含腺苷酸/尿苷酸(AU)的成分(ARE)。这些蛋白质介 导RNA翻转和衰变，并因此介导翻译效能。TNF-αmRNA的稳定性主 要在其3′-UTR处调节，3′-UTR包含非常特殊的ARE。虽然在许多不 同细胞因子和原癌基因RNA中发现了ARE，但它们诱导降解的途径对 于给定的ARE是高度特异性的，这说明了一些细胞特异性。当来自不 同细胞因子的ARE与AUF1复合时，观察到不同的结合亲和力。但是， 显著地，AUF1的最高亲和力是对人TNF-α的，然后是对小鼠TNF-α 的。
为了确定3′-UTR在沙利度胺类似物的作用中的参与，评估它们在 包含TNF-α3′-UTR的细胞中的抑制报道基因活性相对于对照载体的能 力。结果示于图1中。该基于细胞的测定利用源自小鼠巨噬细胞系 RAW264.7的两种稳定转染的细胞系。标有“仅荧光素酶”的一个系表 示没有任何UTR序列的荧光素酶报道基因结构。标有“荧光素酶 +TNF-αUTR”的另一个系表示将人TNF-α的整个3′-UTR直接插入荧 光素酶编码区下游的荧光素酶报道基因结构。以浓度依赖的方式添加 化合物，在培育期(16h，37℃，5％CO2)结束时除去培养基，将细胞溶 解，使用Steady-glo荧光素酶测定试剂(Promega)，按供应商的说明来 测定荧光素酶活性。扣除背景，用+3′-UTR值与-3′-UTR(对照)值的比率 表示来自该测定的数据，用图1中所示的百分比表示。在该方法中， 对具有和没有3′-UTR的两种细胞系显示不同效果的化合物被突出显 示。化合物215、216和219在具有荧光素酶报道基因成分加人TNF-α 的3′-UTR的细胞(小鼠巨噬细胞系，RAW264.7)中的作用相对于在不含 3′-UTR的细胞中的作用示于图1中。化合物215、216和219以剂量依 赖的方式对两种细胞系发挥不同的效果，与它们通过3′-UTR抑制 TNF-α产生的能力一致。所有试剂均在稳定表达3′-UTR的细胞中降低 了荧光素酶报道基因活性。沙利度胺在50μM时缺乏活性。
由于TNF-α蛋白质水平改变，而mRNA水平(数据未显示)没有明 显改变，所以推测通过翻译控制(在转录后水平)调节蛋白质表达。通过 作为目前药物靶的许多关键蛋白质的3′-UTR区域或5′-UTR区域来进 行翻译(蛋白质)控制，这是更重要的。例如，可以通过任一种UTR来 调节β-淀粉状前体蛋白质(APP)的水平，APP对于发展AD是很重要的。 APP mRNA的翻转和翻译由3′-UTR内的29-核苷酸不稳定成分调节， 它位于终止密码子下游200个核苷酸处。该3′-UTR成分作为mRNA去 稳定剂，其功能会由于生长因子的存在而被抑制。相反，包括TNF-α 在内的不同细胞因子和铁能在APP蛋白质的5′-UTR水平处上调其合 成；其中，令人感兴趣地，目前在临床试验中用于AD的抗胆碱酯酶， 即胆碱酯酶抑制药，能降低APP蛋白质水平，同时通过在相同的5′-UTR 成分内的翻译修饰而保持mRNA的稳态水平。另外的例子是人免疫缺 陷病毒1(HIV-1)反式激活转导(tat)蛋白质，它结合反式激活响应区 (TAR)RNA。在Tat结合TAR成分后，它开始与转录机接触，TAR成 分是在所有HIV-1转录的5′端发现的59-残基茎-环RNA。最后，报 道了沙利度胺(201)能通过3′-UTR降低环加氧酶-2(Cox-2)的生物合成， 显示同样包含能调节Cox-2mRNA稳定性的ARE。对类似物215、216 和219的研究确认，沙利度胺(201)能通过3′-UTR调节TNF-α蛋白质的 水平，但5′-UTR是否包含能进行药理学处理的类似成分仍有待确定， 关于对Cox-2的作用也是如此。
总之，所公开的沙利度胺类似物包括如下类似物，在LPS-诱导的 人PBMS中，它是比沙利度胺201更有效的TNF-α产生抑制剂。通过 硫代羰基等排(isosteric)取代连续的羰基，随着被取代部分的数量增加， 导致抑制增加(三硫代沙利度胺216＞二硫代沙利度胺215和213＞一硫 代沙利度胺205和212＞沙利度胺201)。
TNF-α被确认是市场上两种药物-Remicade(Cetocor，Malvern，PA； Schering-Plough，Orange，NJ)和Enbrel(Amgen，Thousand Oaks，CA； Wyeth-Ayerst，Princeton，NJ)的药物靶。但是，这两种药物都是巨大的 大分子，因此需要注射。相反，本文公开的小分子药物提供了不经注 射，例如通过口服，就可有效和安全地抑制TNF-α的方法。
合成和特性细节
常规
用Fisher-John仪器确定熔点，这是未经校正的。在Bruker AC-300 分光计上记录1H NMR、13C NMR和2D NMR。在VG 7070质谱仪和 Agilent Technologies 5973N GC-MS(CI)上记录质谱和高分辨率质谱 (HRMS)。所有精确的质量测定显示小于5ppm的误差。通过Atlantic Microlab，Inc.，Norcross，GA进行元素分析。
3-(叔丁氧基羰基氨基)-2，6-哌啶二酮(203)
将N-(叔丁氧基羰基)-L-谷氨酰胺(4.92g，20mmol)和羰基二咪唑 (3.24g，20mmol)在THF(100mL)中的混合物回流16h。然后，除去溶剂， 将粗产物从热EtOAc中重结晶，得到化合物203(2.04g，45％)，为白色 晶体：mp 214-215℃；1H NMR(DMSO-d6)δ4.22(dd，J＝6.2Hz，J＝11.0 Hz，1H)，2.77-2.65(m，1H)，2，45(m，1H)，1.96-1.87(m，2H)，1.40(s，9H)； MS(CI/CH4)m/z 227[M-1]+。
2-(2-氧代-6-硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(205)
将化合物203(1.14g，5mmol)悬浮于CH2Cl2(100mL)中。向混合物 中添加CF3COOH(10mL)，然后将其在室温下搅拌4h。蒸发溶剂，得到 粗204(1.25g)：1H NMR(DMSO-d6)δ11.42(s，1H)，8.70(br，2H)，4.31 (dd，J＝5.4Hz，J＝13Hz)，2.88-2.72(m，2H)，2.25-2.09(m，2H)。将粗 204(1.25g)和邻苯二甲酸酐(0.89g，6mmol)和Et3N(1.39ml，10mmol)在 THF(150mL)中的混合物回流两天。将反应混合物浓缩，将残余物从乙 酸乙酯中结晶，得到沙利度胺(201)(0.89g，69％)，为白色晶体；mp 276℃(lit.276-279℃)。将沙利度胺201(258mg，1mmol)和Lawesson试 剂(222mg，0.55mmol)在甲苯(50ml)中的混合物在回流下搅拌12h；然 后在真空中除去溶剂。通过柱色谱法纯化所得残余物，使用CH2Cl2作 为洗脱液，得到化合物205(200mg，73％)，为黄色固体：mp 225-226℃； 1H NMR(DMSO-d6)δ12.83(s，1H，NH)，8.00-7.92(m，4H，Ph)，5.32(dd， J＝5.6Hz，J＝12.9Hz，1H，H-3′)，3.28-3.25(m，2H，H-5′)，2.60-2.54(m， 1H，H-4′)，2.17-2.10(m，1H，H-4′)；13C NMR(DMSO-d6)δ208.7(C-6′)， 165.3(C-2′)，165.2(C-1 & C-3)，133.1(C-5 & C-6)，129.3(C-3a，C-7a)， 121.7(C-4 & C-7)，46.9(C-3′)，38.9(C-5′)，21.79(C-4′)；MS(CI/CH4)m/z 274(M+)；分析，(C13H10N2O3S)C，H，N。
2-(1，3-二氢-1，3-二氧代-2H-异吲哚-2-基)-戊二酸二甲酯(207)
向N-邻苯二甲酰-L-谷氨酸(200mg，0.72mmol)的甲醇(10mL)溶液 中滴加亚硫酰氯(1mL)。将反应混合物回流6h。减压除去溶剂，溶于乙 酸乙酯(100mL)中，然后用饱和Na2CO3水溶液(2×30mL)和水(2×30mL) 洗涤。用Na2SO4干燥乙酸乙酯层，然后蒸发，留下油，通过硅胶色谱 法纯化该油，用CH2Cl2∶EtOAc(1∶1)作为洗脱液，得到油状化合物 7(161mg，73％)：1H NMR(CDCl3)δ7.87-7.84(m，2H)，7.75-7.72(m 2H)， 4.91(dd，J＝5Hz，J＝9Hz，1H)，3.73(s，3H)，3.62(s，3H)，2.67-2.56(m， 1H)，2.51-2.44(m，1H)，2.41-2.35(m，2H)。
2-(1，3-二氢-1-氧代-3-硫代-2H-异吲哚-2-基)-戊二酸二甲酯(208)和 2-(1，3-二氢-1，3-二硫代-2H-异吲哚-2-基)-戊二酸二甲酯(209)
在110℃的油浴中，将化合物207(144mg，0.47mmol)和LR(191mg， 0.47mmol)在甲苯中的混合物搅拌10h。然后蒸发溶剂，通过柱色谱法(硅 胶)纯化残余物，使用CH2Cl2作为洗脱液，获得化合物209(17mg，11％)， 为深红色的油。然后，用CH2Cl2∶EtOAc(10∶1)作为洗脱液，获得极性 更强的组分208(105mg，70％)，为红色油。
化合物208：1H NMR(CDCl3)δ7.98-7.96(m，1H)，7.81-7.70(m， 3H)，5.53(dd，J＝5.1Hz，J＝10Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.59(s，3H)， 2.76-2.56(m，2H)，2.40-2.33(m，2H)；MS(CI/CH4)m/z 321(M+)。
化合物209：1H NMR(CDCl3)δ7.87-7.84(m，2H)，7.73-7.68(m. 2H)，6.09(dd，J＝5Hz，J＝10Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.58(s，3H)， 2.81-2.63(m，2H)，2.40-2.24(m，2H)；MS(DEI)m/z 337(M+)；HRMS (DEI)C15H15NO4S2的计算值337.0442(M+)，检测值337.0449。
2-(1，3-二氢-1-氧代-3-硫代-2H-异吲哚-2-基)-戊二酸(211)
在100℃的油浴中，将化合物208(350mg，1.09mmol)与冰乙酸和 浓HCl的1∶1混合物搅拌2.5h。添加乙酸乙酯(100mL)和冰水(30mL)。 分离乙酸乙酯层，用冰水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将所得的浆用 醚结晶，得到化合物211，为红色晶体(253mg，79％)：mp 157℃；1H NMR (DMSO-d6)δ8.04-7.96(m，1H)，7.91-7.74(m，3H)，5.43(dd，J＝5.1Hz，J ＝9.6Hz，1H)，2.42-2.33(m，2H)，2.30-2.26(m，2H)；MS(DEI)m/z 293 (M+)；HRMS(DEI)C13H11NO5S的计算值293.0358(M+)，检测值 293.0363；分析(C13H11NO5S)H，N；C：计算值，53.24；检测值，53.88。
2，3-二氢-3-硫代-2-(2，6-二氧代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1-酮(212)
将化合物208(81mg，0.276mmol)、三氟乙酰胺(57mg，0.50mmol)、 1-羟基苯并三唑(145mg，1.07mmol)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳 二亚胺盐酸盐(200mg，1.04mmol)和三乙胺(0.21mL，1.51mmol)在 CH2Cl2(1.5mL)中的混合物在环境温度下搅拌3天。添加水(10mL)和 CH2Cl2(10mL)。分离二氯甲烷层，用水洗涤，用Na2SO4干燥，减压蒸 发。通过色谱法纯化，用EtOAc∶CH2Cl2(1∶10)作为洗脱液，得到化合 物212(48mg，63％)，为红色固体：mp 255℃；1H NMR(CDCl3)δ 8.00-7.98(m，1H)，7.80-7.71(m，3H)，5.63(br，1H)，2.98-2.70(m，3H)， 2.18-2.15(m，1H)；MS(CI/CH4)m/z 274(M+)；分析(C13H10N2O3S)C，H， N。
2-(2，6-二硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(213)和2，3-二氢 -3-硫代-2-(2-氧代-6-硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1-酮(215)
在110℃、在N2气氛中，将205(146mg，0.533mmol)、LR(108mg， 0.267mmol)和吡啶(21μl)在甲苯中的混合物搅拌12h。然后，添加额外 的LR(108mg，0.267mmol)和吡啶(21μl)，将反应混合物再搅拌12h。在 真空中除去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物，先后用CH2Cl2∶石油醚 (2∶1，10∶1)、CH2Cl2∶EtOAc(10∶1)作为洗脱液，得到213(30mg，45％)、 215(21mg，31.5％)和原材料205(83mg)。
化合物213(黄色固体)：mp 263-265℃；1H NMR(CDCl3)δ7.78-7.74 (m，2H)，7.66-7.63(m，2H)，5.00(dd，J＝4.9Hz，11.9Hz，1H)， 3.43-3.35(m，1H)，2.95-2.84(m，2H)，2.08·2.06(m，1H)；MS(DEI)m/z 290(M+)；HRMS(DEI)C13H10N2O2S2的计算值290.0184(M+)，检测值 290.0185；分析(C13H10N2O2S2)C，H，N。
化合物215(红色固体)：mp 240-242℃；1H NMR(CDCl3)δ9.44(s，1 H)，8.05-8.02(m，1H)，7.86-7.76(m，3H)，5.75-5.64(m，1H)，3.57-3.52 (m，1H)，3.09-2.99(m，2H)，2.19-2.12(m，1H)。13C NMR(DMSO)： 208.16，207.98，166.10，165.39，134.32，133.11，132.42，124.30，122.15， 121.11，49.64，21.29；MS(DEI)m/z 291(MH+)；HRMS(DEI) C13H11N2O2S2的计算值291.0262(M+)，检测值291.0264；分析 (C13H10N2O2S2·0.5H2O)C，H，N。
2，3-二氢-3-硫代-2-(2，6-二硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1-酮(216)
在N2气氛中，将化合物213(29mg，0.1mmol)、LR(22mg，0.054mmol) 和吗啉(9μl，0.1mmol)在甲苯(10mL)中的混合物在回流下搅拌16h。在 真空中除去溶剂，通过柱色谱法纯化残余物，用CH2Cl2∶石油醚(1∶1)作 为洗脱液，得到化合物216(20mg，65％)，为红色固体：mp 244℃；1H NMR(CDCl3)δ10.81(s，1H)，8.05-8.01(m，1H)，7.91-7.75(m，3H)，5.92 (m，1H)，3.57-3.52(m，1H)，3.13-2.97(m，2H)，2.18-2.15(m，1H)；MS (DEI)m/z 306(M+)；HRMS(DEI)C13H10N2OS3的计算值305.9955(M+)， 检测值305.9951；分析(C13H10N2OS3·0.5H2O)C，H，N。
6-硫代-2-哌啶酮(218)
将戊二酰亚胺(0.45g，4mmol)和LR(0.809g，2mmol)在THF(30mL) 中的混合物在室温下搅拌2天。在真空中蒸发掉溶剂，通过柱色谱法 纯化残余物，使用石油醚∶EtOAc(1∶1)作为洗脱液，得到化合物218， 为黄色固体(0.361g，70％)：mp 135℃；1H NMR(CDCl3)δ2.96(t，J＝5.7 Hz，2H)，2.58(t，J＝5.8Hz，2H)，1.96(m，2H)；MS(CI/CH4)m/z 129 (M+)；分析(C5H7NOS)C，H，N。
2，6-哌啶二硫酮(219)
将戊二酰亚胺(0.34g，3mmol)和LR(1.22g，3mmol)在甲苯(30mL) 中的混合物在回流下搅拌3h。在真空中蒸发掉溶剂，通过柱色谱法纯 化残余物，使用石油醚∶EtOAc(20∶1)作为洗脱液，得到化合物219，为 黄色固体(0.286g，66％)：mp 103℃；1H NMR(CDCl3)δ3.02(t，J＝6.3Hz， 4H)，1.98(t，J＝6.3Hz，2H)；MS(CI/CH4)m/z 145(M+)；分析(C5H7NS2) C，H，N。
2-(3-环己烯基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(221)
在100℃的油浴中，将邻苯二甲酰亚胺钾(1.85g，3mmol)和3-溴环 己烯(1.79g，3mmol)在DMF(15mL)中的混合物搅拌12h。将冷却的反 应混合物倒入到冰水中。过滤收集固体，通过闪式色谱法纯化，以 CH2Cl2作为洗脱液，得到化合物221(1.6g，72％)，为粉红色晶体；mp 114℃；1H NMR(CDCl3)δ7.73-7.69(m，2H)，7.62-7.58(m，2H)，5.85-5.82 (m，1H)，5.47-5.44(m，1H)，4.80-4.78(m，1H)，2.14-2.00(m，3H)， 1.86-1.78(m，2H)，1.64-1.58(m，1H)。
2-(3-环己烯基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二硫酮(222)和2，3-二氢-3-硫代 -2-(3-环己烯基)-1H-异吲哚-1-酮(223)
在N2中，将化合物221(68mg，0.3mmol)和LR(121mg，0.3mmol) 在甲苯中的混合物回流10h。在真空中除去溶剂，通过柱色谱法纯化残 余物，使用石油醚为洗脱液，获得化合物222(37mg，48％)，为暗绿色 固体。然后使用CH2Cl2∶石油醚(1∶1)作为洗脱液，获得极性更强的组分 223(23mg，32％)，为红色固体。
化合物222：mp 93℃；1H NMR(CDCl3)δ7.65-7.60(m，2H)， 7.49-7.42(m，2H)，5.92-5.88(m，1H)，5.66-5.63(m，1H)，5.47-5.43(m， 1H)，2.40-2.35(m，1H)，1.99-1.95(m，2H)，1.75-1.59(m，3H)；MS (CI/CH4)m/z 259(M+)；分析(C14H13NS2)C，H，N。
化合物223：mp 67-68℃；1H NMR(CDCl3)δ7.94-7.91(m，1H)， 7.73-7.64(m，3H)，5.92-5.88(m，1H)，5.60-5.51(m，2H)，2.27-2.10(m， 3H)，1.96-1.76(m，2H)，1.81-1.70(m，1H)；MS(CI/CH4)m/z 243(M+)； 分析(C14H13NOS)C，H，N。
二硫代邻苯二甲酰亚胺(225)
在氮气中，将邻苯二甲酰亚胺(436mg，3.40mmol)和Lawesson试 剂(1.199g，3.40mmol)在甲苯(50ml)中的混合物回流(油浴120℃)5小时。 在真空中除去溶剂，将残余物直接进行色谱分离(硅胶，石油醚∶二氯甲 烷/2∶3)，得到二硫代邻苯二甲酰亚胺，为黑红色针状晶体(240mg， 39.4％)：1HNMR(CDCl3)δ9.80(br，1H)，7.95(d，2H)，7.80(d，2H)；MS (CI/CH4)m/z 179(M+)。
实施例123-[2′，6′-哌啶二酮-3′-基]-7-氨基-2H-1，3-苯并恶嗪
         -2，4(3H)-二酮的合成及其TNF-α抑制活性
如下面示意图17所示制备3-[2′，6′-哌啶二酮-3′-基]-7-氨基-2H-1，3- 苯并恶嗪-2，4(3H)-二酮。

                         示意图17
如下制备4-(叔丁氧基羰基酰氨基)水杨酸(226)。在0℃下，向4- 氨基水杨酸(306mg，2mmol)和二碳酸二叔丁酯(655mg，3mmol)在H2O中的混合物中添加NaOH(2N，在H2O中)。将该反应混合物暖热至室 温，然后搅拌5小时。滴加2N HCl，直到混合物被中和。然后用EtOAc萃取反应混合物，干燥，蒸发，得到产物(336mg，66％)，为暗灰色固 体：1HNMR(DMSO-d6)δ11.50(s，1H)，7.65(d，1H)，6.23(d，1H)，6.07 (s，1H)，1.70(s，9H)。
如下制备2-[(乙氧基羰基)氧]-4-(叔丁氧基羰基酰氨基)-苯甲酸酐 和碳酸氢乙酯(227)。将4-叔丁氧基羰基酰氨基水杨酸(226)(101mg， 0.399mmol)的THF(10ml)溶液在丙酮中用干冰冷却。添加 Et3N(0.166ml)，然后在30min时间内滴加氯甲酸乙酯(108mg， 1.135mmol)。将反应混合物在相同温度下搅拌5小时，然后暖热至室温。 然后，将反应混合物继续搅拌过夜。蒸发溶剂后，将残余物在水和乙 醚之间分配。用盐水洗涤醚溶液，用Na2SO4干燥，蒸发溶剂，得到产 物(111mg，70％)，为黄色的胶：1HNMR(CDCl3)δ7.75(d，1H)，6.48(d， 1H)，6.38(s，1H)，4.38(m，4H)，1.35(m，6H)。
如下制备3-[2′，6′-哌啶二酮-3′-基]-7-氨基-2H-1，3-苯并恶嗪 -2，4(3H)-二酮(228)。将化合物227(32.8mg，0.0826mmol)、氨基戊二酰 亚胺(20mg，0.0826mmol)和Et3N(25.0mg，0.248mmol，在2ml THF中) 的混合物在室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，得到残余物，在EtOAc和饱 和NaHCO3水溶液的混合物中搅拌残余物。过滤收集所沉淀的白色固 体作为产物：1HNMR(DMSO-d6)δ11.3(br，1H)，7.85(d，1H)，6.80(d， 1H)，6.60(s，1H)，3.15(t，2H)，2.15(t，2H)。
在上面实施例11中所述的TNF-α测定中评价化合物228，显示它 对TNF-α具有有效的抑制作用，所具有的EC50为0.4μM。
                实施例13-血管生成调节活性
血管生成是从已经存在的血管中形成新的血管。血管生成在实体 瘤形成和转移中很重要，是伤口愈合过程的一部分。在不合适的解剖 学位置如视网膜或角膜中，有时会发生病理性血管生成，以响应疾病 和损伤。抑制血管生成能避免不合适的血管生成病症的进展。
例如，肿瘤形成需要血管网络为继续生长保持营养物和氧的供应。 其中血管生成很重要的肿瘤包括大多数实体瘤和良性肿瘤，例如听神 经瘤、纤维神经瘤、沙眼、和化脓性肉芽肿。抑制血管生成能中断这 些肿瘤的生长和由于肿瘤存在所致的伤害。
在肿瘤微血管密度和转移发生之间有直接的相关性。肿瘤细胞本 身能产生因子，该因子能刺激内皮细胞增殖和新毛细血管生长。血管 生成在肿瘤转移的两个阶段内很重要。其中血管生成刺激很重要的第 一个阶段是在原发性肿瘤的血管生成中，它允许肿瘤细胞进入血流， 在整个身体内循环。在肿瘤细胞离开原发位置、进入二次转移位置后， 血管生成必须在转移能生长和扩散前发生。因此，抑制血管生成能导 致减少或消除肿瘤转移，可能包含原发位置的新肿瘤生长。这些观察 导致研究抗血管生成药作为各种癌症的可能治疗选择。
在鼠主动脉环微血管生长测定中，评价代表性化合物的血管生成 调节活性。简要地，用250μl Matrigel(Becton-Dickinson，Bedford，MA) 涂布十二孔组织培养平板，使之在37℃和5％CO2中胶凝30min。从 8-周至10-周大的雄性Sprague Dawley鼠中切取胸主动脉。在小心地除 去纤维脂肪性组织后，将主动脉切成1mm长的横断面，放在用Matrigel 涂布的孔上，用另外的250μl Matrigel盖住。在放置第二层Matrigel后， 用EGM-II盖住环，在37℃和5％CO2中培育过夜。EGM-II由内皮细 胞基础培养基(EBM-II；Clonetics，San Diego，CA)加内皮细胞生长因子 组成，内皮细胞生长因子作为EGM-II Bulletkit(Clonetics)提供。随后将 培养基换成补充了2％胎牛血清、0.25μg/ml两性霉素B、和10μg/ml 庆大霉素的EBM-II。每天用运载体(0.5％DMSO)、羧基酰氨基三唑 (CAI，12μg/ml)、沙利度胺或沙利度胺类似物(0.1-20μg/ml)处理主动脉 环，处理4天，在第5天用×2.5物镜照相。用已知的抗血管生成药CAI 以高于临床可实现的浓度作为阳性对照。用来自四只不同大鼠的主动 脉将实验重复四次。用Adobe PhotoShop测定以平方象素报告的血管生 成发芽面积。该方法的其他细节公开在Luzzio等人，J.Med Chem.；46： 3793-9，2003中，该文献被引入本文以供参考。应该理解，该方法可以 用作测定，以快速选择具有所需血管生成或抗血管生成效果的化合物， 例如，用于治疗患者的所公开方法中。
在图2-11中显示了几种化合物的血管生成测定结果的柱状图。为 了方便，在这些图中还提供了所测定化合物的结构。
图2显示了1，3-二氧代-2-(2-羟基-6-甲氧基吡啶-3-基)-异吲哚啉氢 溴酸盐在几种浓度下的血管生成调节活性。在所有受试浓度下，该化 合物在大鼠主动脉环测定中都具有抗血管生成活性。
图3显示了2-(3-环己烯基)-H-异吲哚-1，3(2H)-二硫酮在几种浓度 下的血管生成调节活性。该化合物在较高浓度下具有抗血管生成活性， 在较低浓度下具有血管生成活性。
图4显示了1-(2，6-二硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮在几 种浓度下的血管生成调节活性。该化合物在所有受试浓度下都具有抗 血管生成活性。
图5显示了3-莰基氨基-2，6-哌啶二酮在几种浓度下的血管生成调 节活性。该化合物在所有受试浓度下都具有有效的血管生成活性，使 得该化合物有希望用于治疗希望增加血管生成的病症，例如作为伤口 愈合的帮助。
图6显示了二硫代邻苯二甲酰亚胺在几种浓度下的血管生成调节 活性。该化合物在所有受试浓度下都具有血管生成活性。
图7显示了2-(1，3-二氢-1-氧代-3-硫代-2H-异吲哚-2-基)-戊二酸在 几种浓度下的血管生成调节活性。该化合物在所有受试浓度下都具有 血管生成活性。
图8显示了2-(2-氧代-6-硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 在几种浓度下的血管生成调节活性。该化合物在较高浓度下显示抗血 管生成活性，在较低浓度下显示一些血管生成活性。
图9显示了2，3-二氢-3-硫代-2-(2，6-二硫代-3-哌啶基)-1H-异吲哚 -1-酮在几种浓度下的血管生成调节活性。该化合物在较高浓度下具有 有效的抗血管生成活性，在较低浓度下具有血管生成活性。
图10显示了2-乙酸基-N-(2，6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰胺在几种浓 度下的血管生成调节活性。有所有受试浓度下，该化合物均具有有效 的血管生成活性。
图11显示1，3-二氧代-2-(2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-异吲哚啉在几种 浓度下的血管生成调节活性。该化合物在所有受试浓度下均具有血管 生成活性。
总之，所公开的化合物具有如下范围的血管生成调节活性：从有 效抑制血管生成(抗血管生成活性)到有效刺激血管生成(血管生成活 性)。一些化合物以剂量依赖的方式具有血管生成和抗血管生成活性。 具有血管生成活性的那些化合物(或其特定浓度)可用于治疗其中希望 增加血管生成的病症或疾病(例如伤口愈合)，而具有抗血管生成活性的 那些化合物(或其特定浓度)可用于治疗其中希望降低血管生成的病症 或疾病(例如癌症、糖尿病性视网膜病或角膜新血管生成)。本领域的普 通技术人员可以使用上述测定法(或其它已知的血管生成/抗血管生成 活性测定法)容易地确定用于刺激或抑制血管生成的所公开化合物的治 疗有效量，以适合给定患者的病症。
           实施例14合成3-莰基氨基-2，6-哌啶二酮
将(+)-莰基氯化物(19mg，00868mmol)、氨基戊二酰亚胺(21mg， 0.0868mmol)和Et3N(24μl)在CHCl3(1ml)中的混合物在室温下搅拌16小 时。用CHCl3稀释溶液，用饱和NaHCO3水溶液洗涤，用Na2SO4干燥， 浓缩并通过色谱法(硅胶，CH2Cl2∶EtOAc＝10∶1)纯化，得到产物(16mg， 60.0％收率)，为无色凝胶：13CNMR(CDCl3)δ172.6，169.4，168.6，165.5， 90.3，58.3，53.3，48.2，47.6，29.2，28.2，26.9，22.7，14.6，7.6；MS(CI/CH4) m/z 308(M+)。该化合物在实施例13的测定中具有血管生成活性。
     实施例15合成3-苄基亚氨基-2-苄基-2，3-二氢异吲哚-1-酮
在50℃的油浴中，将2-(1，3-二氢-1-氧代-3-硫代-2H-异吲哚-2-基)- 戊二酸二甲酯(实施例11的化合物208，100mg，0.311mmol)和苄胺的 溶液搅拌5小时。将反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配。有机层用 水洗涤，干燥，浓缩。通过色谱法纯化(硅胶，CH2Cl2)残余物，得到产 物，为白色晶体(60mg，59.0％)：1HNMR(CDCl3)δ7.10-7.90(m，10H)， 5.18(s，2H)，4.95(s，2H)；13C NMR(CDCl3)δ167.8，151.3，140.6，138.2， 133.5，133.3，132.1，130.4，130.1，129.1，128.8，128.7，128.5，128.4，127.9， 127.6，127.5，127.2，126.0，124.1，53.9，42.5；FAB-MS m/z 327(MH+)。该 化合物在实施例13的测定中具有血管生成活性。
                      实施例16-硫化
虽然显示在许多所公开化合物的结构中没有亚硫酰基，但是应理 解，在所公开化合物的结构中显示的任何羰基都可以转化为硫代羰基， 该硫代衍生物也是本发明的一部分。可以通过任何已知的方法实施硫 化。硫化的具体方法包括在HMPA中使用五硫化二磷、硫化氢、O，O- 二乙基二硫代膦酸、三硫化二硼、二硫化硅和元素硫。但是，特别方 便的硫化方法是使用2，4-双(对甲氧基苯基)-1，3-二硫代 diphosphetane-2，4-二硫化物及其衍生物(通常为“Lawesson试剂”)。这 些试剂描述于Cava和Levinson的“Lawesson试剂的硫化反应” (Thionation Reactions of Lawesson′s reagents)，Tetrahedron，41： 5061-5087，1985中，该文献被引入本文以供参考。
                   实施例17药物组合物
所公开的药物组合物可以是如下形式：片剂、胶囊、粉末、颗粒、 锭剂、液体或凝胶制剂，例如口服、局部、或无菌的肠胃外溶液或混 悬剂(例如滴眼剂或滴耳剂、咽喉或鼻喷雾等)、透皮贴剂，和本领域已 知的其它形式。
可以在适于治疗给定病症的任何方法中全身或局部地施用药物组 合物，所述方法包括：口服、肠胃外、直肠、鼻、口腔、阴道、局部、 眼、通过吸入喷雾、或通过植入贮库。用于本文时，术语“肠胃外” 包括但不限于：皮下、静脉内、肌内、胸骨内、滑膜内、鞘内、肝内、 病灶内、和颅内给药，例如通过注射或输注。对于中枢神经系统的治 疗，当通过外周或心室内给药时，药物组合物可以容易地渗透血-脑屏 障。
可药用的载体包括但不限于：离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、 卵磷脂、血清蛋白(如人血清清蛋白)、缓冲剂(例如磷酸盐)、甘氨酸、 山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或 电解质如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶 态二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙 二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚 物、聚乙二醇和羊毛脂。
用于口服的片剂和胶囊可以是适于单位剂量出现的形式，可以包 含常规的可药用赋形剂。这些可药用赋形剂的例子包括：粘合剂，如 糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、和聚乙烯吡咯烷酮；填充 剂，如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇、或甘氨酸；压片润滑 剂，如硬脂酸镁、滑石、聚乙二醇、或二氧化硅；崩解剂，如马铃薯 淀粉；和分散剂或润湿剂，如十二烷基硫酸钠。口服液体制剂可以是 例如水性或油性混悬浮剂、溶液、乳剂、糖浆或酏剂的形式，或者可 以作为干产物存在，在使用前与水或其它合适的运载体重组。
也可以在无菌的水性或油质介质中在肠胃外施用药物组合物。可 以将组合物溶解或悬浮在无毒的可肠胃外使用的稀释剂或溶剂中，例 如作为在1，3-丁二醇中的溶液。通常使用的运载体和溶剂包括：水、生 理盐水、Hank氏溶液、林格氏液、和无菌的固定油，包括合成的单甘 油酯或二甘油酯等。对于局部应用，可以在合适的水性或非水运载体 内，将药物配制到溶液、混悬剂、乳膏、洗剂、或软膏剂中。添加剂 也可以包括，例如：缓冲剂，如偏亚硫酸氢钠或依地酸二钠；防腐剂， 如杀菌剂和杀真菌剂，包括乙酸苯汞或硝酸苯汞、苯扎氯铵或氯己定， 和增稠剂，如羟丙甲纤维素。
所包括的剂量单位取决于，例如：所治疗的病症、配方的性质、 病症的性质、所要求药物组合物的实施方案、给药模式、和患者的条 件和体重。剂量水平典型地足以在作用位置实现组织浓度，该浓度至 少与在体外、体内、或在组织培养中显示活性的浓度相同。例如，约 0.1μg/kg体重/天至约1000mg/kg体重/天的剂量、例如约1μg/kg体重/ 天至约1000μg/kg体重/天的剂量、例如约5μg/kg体重/天至约500μg/kg 体重/天的剂量可用于治疗特定的病症。
化合物可以以源自无机或有机酸和碱的可药用盐的形式使用，所 述盐包括但不限于：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲 酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺 酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富 马酸盐、糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸 盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺 酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸 盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸 盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、和十一酸酯。碱的盐包括但不限于：铵 盐、碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)、与有 机碱的盐(例如二环己胺盐、N-甲基-D-葡糖胺)、和与氨基酸的盐(例如 精氨酸、赖氨酸等)。可以用如下试剂将含碱性氮的基团季铵化，例如： C1-8烷基卤(例如甲基氯、乙基氯、丙基氯和丁基氯，甲基溴、乙基溴、 丙基溴和丁基溴，甲基碘、乙基碘、丙基碘和丁基碘)、二烷基硫酸盐(例 如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸盐)、长链卤化物(例如癸基氯、 十二烷基氯、十四烷基氯和十八烷基氯，癸基溴、十二烷基溴、十四 烷基溴和十八烷基溴，癸基碘、十二烷基碘、十四烷基碘和十八烷基 碘)、芳烷基卤(例如苄基溴和苯乙基溴)等。因此可以制备水溶性或油 溶性或分散性的产物。
可以在试剂盒中包括药物组合物，该试剂盒伴有用于预定用途的 说明书，例如药物管理机构如美国的食品药物管理局所要求的说明书。
根据已有的本发明的许多可行实施方案，应意识到，所述实施方 案仅仅是本发明的例子，不应该被当作对本发明范围的限制。相反， 本发明的范围由下面的权利要求书限定。因此，申请人要求在这些权 利要求书的范围和精神内的全部内容作为本发明。
相关申请的交叉参考
本申请要求提交于2003年9月17日的美国临时专利申请 60/504,724的利益，该申请被引入本文以供参考。