用作皮质儿茶酚胺能神经传递调节剂的新型氮杂环丁烷衍生物
阅读：531发布：2020-07-04
专利汇可以提供用作皮质儿茶酚胺能神经传递调节剂的新型氮杂环丁烷衍生物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本公开内容涉及某些式I的新型化合物及其在调节 哺乳动物 大脑的脑皮质区中的诸如多巴胺、去甲肾上腺素和血清素等单胺的 水 平、更具体而言在 治疗 中枢神经系统病症方面的功用。，下面是用作皮质儿茶酚胺能神经传递调节剂的新型氮杂环丁烷衍生物专利的具体信息内容。
1.式I的化合物或其药学可接受盐：
其中，
R4是F或CH3，
R5是H或取代有0、1、2或3个F的C1-C4烷基，且
n是0,1,2或3。
2.如权利要求1所述的化合物或其药学可接受盐，其中n是0或1。
3.如权利要求1或2所述的化合物或其药学可接受盐，所述化合物为式II的化合物：
4.如权利要求3所述的化合物或其药学可接受盐，所述化合物选自由式IIa、式IIb、式IIc、式IId、式IIe和式IIf的化合物组成的组：
5.如前述权利要求中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，所述化合物为式II’的化合物：
6.如权利要求1或2所述的化合物或其药学可接受盐，所述化合物为式III的化合物：
7.如权利要求6所述的化合物或其药学可接受盐，所述化合物选自由式IIIa、式IIIb、式IIIc、式IIId和式IIIe的化合物组成的组：
8.如权利要求1所述的化合物或其药学可接受盐，其中n是2或3。
9.如权利要求8所述的化合物或其药学可接受盐，所述化合物是式IVa、式IVb或式IVc的化合物：
10.如权利要求8所述的化合物或其药学可接受盐，所述化合物为式V的化合物：
11.如前述权利要求中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其中R4是F。
12.如权利要求1-4或6-10中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其中R4是CH3。
13.如前述权利要求中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其中R5是H。
14.如权利要求1-4或6-12中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其中R5是取代有
0、1、2或3个F的C1-C4烷基。
15.如权利要求14所述的化合物或其药学可接受盐，其中R5选自由甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基和环丁基组成的组。
16.如权利要求14或15所述的化合物或其药学可接受盐，其中R5选自由甲基、乙基、丙基和正丁基组成的组。
17.如权利要求1-4或6-12中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其中R5选自由氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基和环丁基组成的组。
18.如权利要求17所述的化合物或其药学可接受盐，其中R5选自由氢、甲基、乙基、丙基和正丁基组成的组。
19.如权利要求1所述的化合物或其药学可接受盐，其中：
式I的
选自由以下组成的组：
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基],
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基],
3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基],
3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基],
3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基],
3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基],
3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基],
3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基],
3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基],
3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基],
3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]和
3-[氟(五氟苯基)甲基]
并且
R5选自由氢、甲基、乙基和丙基组成的组。
20.如权利要求1所述的化合物，所述化合物为：
(-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(-)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(+)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷,
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷,
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
1-乙基-3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
1-乙基-3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
1-乙基-3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(五氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
1-乙基-3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-氮杂环丁烷和
3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷，
或前述化合物中任一项的药学可接受盐。
21.如权利要求1所述的化合物，所述化合物为：
(-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(-)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(+)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,和
3-[氟(五氟苯基)甲基]氮杂环丁烷
或前述化合物中任一项的药学可接受盐。
22.如权利要求1所述的化合物，所述化合物为：
(-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(-)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
(+)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,和
3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷
或前述化合物中任一项的药学可接受盐。
23.如权利要求1所述的化合物，所述化合物为：
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷,
3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷,
3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
1-乙基-3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
1-乙基-3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
1-乙基-3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
1-乙基-3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-氮杂环丁烷,和
3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷
或前述化合物中任一项的药学可接受盐。
24.如前述权利要求中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其中式I的化合物是(+)-对映异构体。
25.如权利要求1-23中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其中式I的化合物是(-)-对映异构体。
26.如前述权利要求中任一项所述的化合物，所述化合物是式I的化合物的药学可接受盐。
27.一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-26中任一项所述的化合物或其药学可接受盐以及至少一种药学可接受载体、赋形剂和/或稀释剂。
28.如前述权利要求中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其用作药物。
29.如权利要求1-26中任一项所述的化合物或其药学可接受盐，其用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况。
30.如权利要求29所述应用的化合物，其中所述疾病、病症和/或病况选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍、与神经退行性病症和/或疾病相关的认知障碍、自闭症谱系病症、情感障碍、精神分裂症、焦虑症、注意力缺乏多动症(ADHD)和运动障碍组成的组。
31.如权利要求29或30所述应用的化合物，其中所述疾病、病症和/或病况选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍和精神分裂症组成的组。
32.权利要求1-26中任一项所述的化合物或其药学可接受盐在制备用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况的药物中的应用。
33.如权利要求31所述的应用，其中所述疾病、病症和/或病况选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍、与神经退行性病症和/或疾病相关的认知障碍、自闭症谱系病症、情感障碍、精神分裂症、焦虑症、注意力缺乏多动症(ADHD)和运动障碍组成的组。
34.如权利要求32或33所述的应用，其中所述疾病、病症和/或病况选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍和精神分裂症组成的组。
35.一种用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况的方法，所述方法包括对有需要的患者施用治疗有效量的权利要求1-26中任一项所述的化合物或其药学可接受盐的步骤。
36.如权利要求35所述的方法，其中所述疾病、病症和/或病况选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍、与神经退行性病症和/或疾病相关的认知障碍、自闭症谱系病症、情感障碍、精神分裂症、焦虑症、注意力缺乏多动症(ADHD)和运动障碍组成的组。
37.如权利要求35或36所述的方法，其中所述疾病、病症和/或病况选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍和精神分裂症组成的组。
用作皮质儿茶酚胺能神经传递调节剂的新型氮杂环丁烷衍
技术领域
[0001] 本公开内容涉及新型3-苄基-氮杂环丁烷衍生物，其可用于调节哺乳动物大脑的脑皮质区中的诸如多巴胺、去甲肾上腺素和血清素等单胺的水平，更具体而言用于治疗中枢神经系统病症。本公开内容还涉及这些化合物在治疗方法中的应用和涉及包含本公开内容的化合物的药物组合物。
背景技术
[0002] 脑皮质包括参与诸如思考、感受、记忆和计划等高等功能的几个主区。诸如多巴胺、去甲肾上腺素和血清素等单胺作为哺乳动物皮质功能的神经递质非常重要。上行血清素能和去甲肾上腺素能途径(serotonergic and noradrenergic pathways)激活包括脑皮质在内的几乎所有脑区。CNS的多巴胺能神经元具有更为不同的投射，除了数个特定皮质下途径外，还包括主要激活额叶皮质的中脑皮质途径。激活脑皮质的单胺途径的活性中的原发性或继发性功能障碍会导致皮质多巴胺、去甲肾上腺素和血清素受体的活性的失常，并随后表现为精神性和神经性症状。
[0003] 皮质的单胺调节控制情感、焦虑、动机、认知、注意力、唤醒和清醒的皮质功能的几个方面。因此，儿茶酚胺多巴胺和去甲肾上腺素发挥对额叶皮质区的强力影响，额叶皮质区的健全对于涉及到注意力、行为计划和冲动控制的所谓执行性认知功能至关重要。去甲肾上腺素是调节焦虑和恐惧的环路中的主要部分，因此据信其在诸如恐慌症、泛焦虑症(GAD)和特定的恐怖症等焦虑病症中失调。关于情绪和情感功能，在抑郁症和焦虑症的治疗中有助于特别是去甲肾上腺素和血清素神经传递的化合物的有用性，极大地造成了这些神经递质均参与情感功能的调节的广为接受的观念。
[0004] Hamon等(Prog Neuro-Psychopharm&Bio Psych,2013,45,54–63)公开了具体影响单胺(更准确而言是去甲肾上腺素、多巴胺和血清素)的传递的化合物可成功地用于减轻罹患例如抑郁症、焦虑症和注意力缺乏多动症(ADHD)的患者中的情感、认知或注意力症状。另外，Arnsten(Biol Psych,2011,69(12)；89-99)公开了所有目前的针对ADHD的药物治疗有助于儿茶酚胺传递。此外，Wang(Front Cell Neurosci,2015,9；1-23)公开了对单胺能传递的调节已表明是针对自闭症谱系病症的有希望的原则。
[0005] Trillo等(Neurosci&Biobehav Rev,2013,37；1363–79)公开了在阿尔兹海默症中，上行单胺系统的渐进性退变与认知以及非认知症状关联，而据表明导致提高的单胺传递的药物干预可作为对于阿尔兹海默症的症状性治疗和疾病调节性治疗的策略。
[0006] 此外，已知皮质中的单胺系统直接或间接地参与精神分裂症的核心症状。已提出该病症作为汇集导致皮质微环路失调(其在临床上表现为精神分裂症症状)的皮质突触过程的各种病理性病因而出现(Harrison等，Mol Psych,2005,10；40–68)。该皮质微环路受包括谷氨酸盐、GABA和多巴胺在内的数种神经递质的调节。此外，还提出了对皮质多巴胺传递的药物增强可以恢复该微环路的功能，这提供了用于改进的精神分裂症治疗的有用策略(Abi-Dargham等，Eur Psych,2005,20；15–27)。
[0008] 本公开内容的目的在于提供新型治疗活性化合物，其特别可用于对中枢神经系统的病症的治疗。另一个目的在于提供用于调节哺乳动物大脑(包括人类大脑)中的多巴胺和去甲肾上腺素神经传递的化合物。再一个目的在于提供具有皮质增强剂特质的新型化合物。又一个目的在于提供口服施用后的治疗效果的化合物。另一个目的在于提供具有更为优化的药效学和药代动力学性质(诸如血浆半衰期、生物利用度、溶解性以及体外和体内效力)的化合物。再一个目的在于提供在涉及CNS功能障碍的数种病症的治疗中就效力和/或副作用而言比现有已知化合物更为优异的化合物。
[0009] 本公开内容涉及本文所公开的对脑皮质中的单胺展示出某些效应的化合物以及这些化合物在治疗某些CNS病症中的应用。出人意料的是，据发现本公开内容的化合物不仅在额叶皮质中产生儿茶酚胺水平的区域选择性增加，而且增加了跨脑区(包括额叶皮质)的血清素水平。由于单胺对于涉及认知、注意力和情感的皮质功能的特定调节效应，本文所公开的化合物可以用于治疗由上述功能损害所表征的病症。因此，本文所公开的化合物可以用于治疗认知、情感和焦虑病症。所述化合物还可以用于治疗由在认知损害和精神病中显示的脑皮质功能障碍所表征的精神分裂症症状。
[0010] 本公开内容提供了式I的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐，
[0011]
[0012] 其中，
[0013] R1是F，
[0014] R2是F，
[0015] R3是F，
[0016] R4是F或CH3，
[0017] R5是氢或取代有0、1、2或3个F的C1-C4烷基，且
[0018] n是0、1、2或3。
[0019] 本公开内容还提供了包括治疗有效量的本公开内容的式I的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐以及至少一种药学可接受载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。
[0020] 此外，还提供了作为药物应用的本公开内容的式I的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐。所述药物可以为用于治疗和/或预防疾病、病症和/或病况的药物，其中所述疾病、病症和/或病况响应于对脑皮质中的单胺的调节。
[0021] 此外，还提供了用于治疗和/或预防疾病、病症和/或病况的本文所述的式I的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐，其中所述疾病、病症和/或病况响应于对脑皮质中的单胺的调节。
[0022] 此外，还提供了本文所述的式I的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐在制备用于治疗和/或预防疾病、病症和/或病况的药物中的应用，其中所述疾病、病症和/或病况响应于对脑皮质中的单胺的调节。
[0023] 此外，还提供了用于治疗和/或预防或减轻人的疾病、病症和/或病况的方法，所述疾病、病症和/或病况响应于对脑皮质中的单胺的调节，所述方法包括对有需要的人施用治疗有效量的本公开内容的式I的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐或者本文所公开的化合物的治疗活性代谢物。
[0024] 从下述具体说明和实施例出发，本公开内容的其它方面将对本领域技术人员变得显而易见。
具体实施方式
[0025] 本公开内容将使用以下缩写：
[0026] NA：去甲肾上腺素；NM：去甲变肾上腺素(normetanephrine)；DA：多巴胺；DOPAC：3,4-二羟基苯乙酸；3-MT：3-甲氧基酪胺；5-HT:血清素(5-羟基色胺)；TEA：三乙胺。
[0027] 本公开内容提供了式I的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐，
[0028]
[0029] 其中，
[0030] R1是F，
[0031] R2是F，
[0032] R3是F，
[0033] R4是F或CH3，
[0034] R5是氢或取代有0、1、2或3个F的C1-C4烷基，且
[0035] n是0、1、2或3。
[0036] 由于R1、R2和R3均为F，式I的化合物也可以示为：
[0037]
[0038] 在式I中，n可以具有0或1的值。
[0039] n为0的式I的化合物是苯环上取代有两个F的化合物。因此，提供了式II的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐：
[0040]
[0042]
[0043] 式II的化合物可以选自由式IIa、式IIb、式IIc、式IId、式IIe和式IIf的化合物组成的组(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)和/或其药物可接受盐：
[0044]
[0045]
[0046] 其中，R1、R2、R4和R5可以具有对于式I的化合物所指定的值。
[0047] 由于R1和R2都是F，式IIa、式IIb、式IIc、式IId、式IIe和式IIf的化合物也可以示为：
[0048]
[0049] 在一个实例中，R4可以是F，且R5可以是H，由此提供了式II’的化合物：
[0050]
[0051] 其中R1和R2都是F。
[0052] 由于R1和R2是F，式II’的化合物也可以示为：
[0053]
[0054] 式II’的化合物可以选自由式II’a、式II’b、式II’c、式II’d、式II’e和式II’f的化合物组成的组(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)和/或其药物可接受盐：
[0055]
[0056] n是1的式I的化合物是苯环上取代有3个F的化合物。因此，提供了式III的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐：
[0057]
[0058] 其中，R1、R2、R4和R5可以具有对于式I的化合物所指定的值。由于R1、R2和R3均是F，式III的化合物也可以示为：
[0059]
[0060] 式III的化合物可以选自由式IIIa、式IIIb、式IIIc、式IIId和式IIIe的化合物组成的组(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药物可接受盐：
[0061]
[0062] 其中，R1、R2、R3、R4和R5可以具有对于式I的化合物所指定的值。
[0063] 由于R1、R2和R3均是F，式IIIa、式IIIb、式IIIc、式IIId和式IIIe的化合物也可以示为：
[0064]
[0065]
[0066] 在式I的化合物中，n可以具有2或3的值。
[0067] n为2的式I的化合物是苯环上取代有4个F的化合物。因此，提供了式IVa、式IVb或式IVc的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐：
[0068]
[0069] 其中，R4和R5可以具有对于式I的化合物所指定的值。
[0070] n为3的式I的化合物是苯环上取代有5个F的化合物。因此，提供了式V的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐：
[0071]
[0072] 还提供了其中R4是F的本文公开的化合物。作为另选或者另外地，提供了其中R4是CH3的本文公开的化合物。对于这些R4值的每一种，R5可以是H或取代有0、1、2或3个F的C1-C4烷基。在一个实例中，取代有0、1、2或3个F的C1-C4烷基可以选自由甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基和环丁基组成的组。在另一个实例中，取代有0、1、2或3个F的C1-C4烷基可以选自由甲基、乙基、丙基和正丁基组成的组。R5也可以选自由氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基和环丁基组成的组。此外，R5可以选自由氢、甲基、乙基、丙基和正丁基组成的组。
[0073] 还提供了本文公开的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐，其中：
[0074] 式I的 选自由以下组成的组：
[0075] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基],
[0076] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基],
[0077] 3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基],
[0078] 3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基],
[0079] 3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基],
[0080] 3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基],
[0081] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基],
[0082] 3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基],
[0083] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基],
[0084] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基],
[0085] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]和
[0086] 3-[氟(五氟苯基)甲基]
[0087] 并且
[0088] R5选自由氢、甲基、乙基和丙基组成的组。
[0089] 应该理解，如本文所用，对于式I的化合物的所有援引，例如式II的化合物、式III的化合物、式IVa的化合物、式IVb的化合物、式IVc的化合物、式V的化合物和式VI的化合物，其意图在于包括其所有可能的药学可接受盐、共晶、溶剂化物、水合物、多晶型体、立体异构体和互变异构体。
[0090] 另外，式I的化合物，例如式II的化合物、式III的化合物、式IVa的化合物、式IVb的化合物、式IVc的化合物、式V的化合物和式VI的化合物，可以以前药的形式施用。前药是自身可能几乎没有或没有药物活性，但当将所述化合物施用于患者身体之内或之上时，其转化为具有所需活性的式I的化合物。各种前药是本领域所已知的(例如，Rautio等Nat Rev Drug Discov,2008,7(3)；255-70)。
[0091] 此外，式I的化合物(例如式II的化合物、式III的化合物、式IVa的化合物、式IVb的化合物、式IVc的化合物、式V的化合物和式VI的化合物)的代谢物，即式I的化合物在体内施用后所形成的化合物也包括在本公开内容的范围内。
[0092] 本公开内容提供了选自以下的化合物：
[0093] (-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0094] (+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0095] (-)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0096] (+)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0097] 3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0098] 3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0099] 3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0100] 3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0101] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0102] 3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0103] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0104] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0105] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0106] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0107] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷,
[0108] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0109] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
[0110] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷,
[0111] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0112] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
[0113] 1-乙基-3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0114] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0115] 1-乙基-3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0116] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0117] 1-乙基-3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0118] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0119] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0120] 3-[氟(五氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0121] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
[0122] 1-乙基-3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-氮杂环丁烷,和
[0123] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷
[0124] 或者前述化合物中任一者的药物可接受盐。
[0125] 本公开内容提供了选自以下的化合物：
[0126] (-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0127] (+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0128] (-)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0129] (+)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0130] 3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0131] 3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0132] 3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0133] 3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0134] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0135] 3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0136] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0137] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0138] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0139] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷,
[0140] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,和
[0141] 3-[氟(五氟苯基)甲基]氮杂环丁烷
[0142] 或者前述化合物中任一者的药物可接受盐。
[0143] 在另一个实例中，提供了选自以下的化合物：
[0144] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
[0145] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷,
[0146] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0147] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
[0148] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷,
[0149] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0150] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
[0151] 1-乙基-3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0152] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0153] 1-乙基-3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0154] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0155] 1-乙基-3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0156] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0157] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
[0158] 1-乙基-3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-氮杂环丁烷,和
[0159] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷
[0160] 或者前述化合物中任一者的药物可接受盐。
[0161] 还提供了选自以下的化合物：
[0162] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0163] 3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0164] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0165] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0166] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷,
[0167] 1-乙基-3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0168] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,
[0169] 1-乙基-3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷,
[0170] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷,和
[0171] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷
[0172] 或者前述化合物中任一者的药物可接受盐。
[0173] 根据式II’的具体化合物的实例为：
[0174] (±)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷；
[0175] (±)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷；
[0176] (±)-3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷
[0177] 或者前述化合物中任一者的药物可接受盐。
[0178] 此外，根据式II’的具体化合物的实例为：
[0179] (+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷；
[0180] (-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷；
[0181] (+)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷；
[0182] (-)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷；
[0183] (+)-3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷；
[0184] (-)-3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷；
[0185] 或者前述化合物中任一者的药物可接受盐。
[0186] 还提供了(+)-对映异构体形式的本文公开的化合物。此外，提供了(-)-对映异构体形式的本文公开的化合物。
[0187] 据信本公开内容的化合物拥有令人满意的药物学特质和有前景的生物药学性质，例如毒理学特质、代谢和药代动力学性质、溶解性和渗透性，特别是用于在其口服施用后提供令人满意的生物利用度。
[0188] 本公开内容的化合物与现有技术的化合物相比可以具有优异的性质，例如，增强的效力和/或提高的选择性。这些优点可以在实施时提供相应的有用性质。例如，当作为药物使用时，式I的化合物可以具有比现有技术的化合物更低的每日临床剂量、更长的作用时长和/或改善的副作用特性。
[0189] 单取代化合物
[0190] 本公开内容还涵盖了其中R1为H的化合物，即其中苯环仅带有一个取代基的化合物。因此，提供了式VI的化合物(包括其对映异构体或对映异构体的混合物)或其药学可接受盐：
[0191]
[0192] 其中
[0193] R1是H，
[0194] R2是F，
[0195] R4是F或CH3，且
[0196] R5是氢或取代有0、1、2或3个F的C1-C4烷基。
[0197] 由于R1是H且R2是F，式VI的化合物可以示为：
[0198]
[0199] 例如，当R4是F且R5是H时，提供了式VI’的化合物：
[0200]
[0201] 式VI’的化合物也可以示为：
[0202]
[0203] 式VI的化合物可以选自由式VIa、式VIb和式VIc的化合物组成的组：
[0204]
[0205] 其中，
[0206] R4是F或CH3，且
[0207] R5是H或取代有0、1、2或3个F的C1-C4烷基。
[0208] 在一个实例中，对于式VIa、式VIb和/或式VIc的化合物，R4可以是F且R5可以是H。在一个具体实例中，对于式VIb的化合物，R4可以是F且R5可以是H。
[0209] 药学可接受盐
[0210] 本公开内容的化合物可以以适合于意图施用的任何形式提供。合适的形式包括本文公开的化合物的药物(即，生理学)可接受盐(Paulekuhn GS等，J Med Chem,2007,50；6665-72；和Berge SM等，J Pharm Sci,1977,66；1-19)。如本文所用，当时是盐是可行的时，“药学可接受盐”包括由药学可接受非毒性酸制备的盐，即药学可接受酸加成盐。
[0211] 药学可接受盐的实例包括但不限于：非毒性无机酸和有机酸加成盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硼酸盐、硝酸盐、高氯酸盐、磷酸盐、硫酸盐、甲酸盐、乙酸盐、阿康酸盐、抗坏血酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐、柠檬酸盐、双羟萘酸盐、庚酸盐、富马酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、萘-2-磺酸盐、邻苯二甲酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、山梨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐和甲苯对磺酸盐等。还可以形成酸的半盐(hemisalt)，例如，半硫酸盐。所述盐可以通过本领域公知和描述的程序形成。
[0212] 其它可能不被认为是药学可接受的酸(例如，草酸)，在制备用作获得本公开内容的化合物及其药学可接受酸加成盐时的中间体的盐时可能是有用的。
[0213] 共晶
[0214] 在盐中，在活性药物成分和盐的抗衡离子之间可能发生质子转移。然而，在某些情况下，不存在或仅有部分质子转移，因此固体并非真的盐。所接受的是，质子转移实际上是连续区(continuum)且能随温度改变，因此盐更好地描述为“共晶”的点可能是主观的。本文所用的术语“共晶”是指其中存在一种或多种主体分子(活性药物成分)和一种或多种客体(或共形成物(co-former))分子的多组分系统。客体或共形成物分子被定义为在室温作为固体存在，以便区分共晶与溶剂化物。然而，共晶自身可形成溶剂化物。在共晶中，通常以通过非离子力的相互作用(例如氢键)为主导。
[0215] 溶剂化物
[0216] 此外还应该理解，本公开内容的某些化合物可以以溶剂化形式存在，包括游离化合物的溶剂化物或化合物的盐的溶剂化物，也可以以非溶剂化形式存在。本文使用术语“溶剂化物”来描述包含本公开内容的化合物和一种或多种药学可接受溶剂分子(例如乙醇)的分子复合体。在所述溶剂为水时采用术语“水合物”。因此，溶剂化形式可以包括水合形式，诸如一水合物、二水合物、半水合物、三水合物和四水合物等。
[0217] 多晶型体
[0218] 本公开内容的化合物可以以从完全非晶至完全结晶的固态的连续区而存在。因此，应该理解，所有的多晶型体(例如，不同多晶型体的混合物)都包括在所要求保护的化合物的范围内。
[0219] 异构体
[0220] 本领域技术人员应该认识到，本文公开的化合物可以以不同对映异构体形式存在。本公开内容的化合物包括所有的这些对映异构体、其外消旋混合物以及不同对映异构体的不同比例的混合物。
[0221] 外消旋形式可以通过已知方法和技术拆分为光学对映体(optical antipode)。一种分离对映异构化合物(例如对映异构中间体)的方式为：在化合物为手性碱的情形下，通过使用光学活性酸，并通过用用碱处理而释放对映异构的经拆分的盐。另一种将外消旋混合物拆分为光学对映体的方法基于在光学活性基质上的色谱。因此，本公开内容的外消旋化合物可以拆分为其光学对映体，例如通过诸如D-或L-酒石酸盐、扁桃酸盐或樟脑磺酸盐的分级结晶。
[0222] 本文公开的化合物可以通过由本公开内容的化合物与光学活性羧酸(例如，衍生自(+)或(-)苯丙氨酸、(+)或(-)苯基甘氨酸、(+)或(-)樟脑酸的那些)的反应形成非对映异构酰胺或者通过本公开内容的化合物与光学活性的氯甲酸酯的反应来形成非对映异构氨基甲酸酯等等来进行拆分。
[0223] 经标记的化合物
[0224] 本公开内容的化合物可以以其经标记或未经标记的形式使用。在本公开内容的背景下，经标记的化合物有一个或多个原子被原子质量或质量数不同于通常见于自然中的原子质量或质量数的原子所替代。标记将允许对所述化合物更容易的定量检测。
[0225] 本公开内容的经标记的化合物可以在各种诊断方法中用作诊断工具、放射示踪剂或者监控试剂，以及用于体内受体成像。
[0226] 本公开内容的经标记的化合物可以含有至少一个放射性核素作为标记。发射正电子的放射性核素均为可用的候选物。在本公开内容的背景下，放射核素可以选自氢、碳、氮、氟和氧的同位素，例如2H(氘),3H(氚),11C,13C,14C,18O,17O,19F和18F。已知采用更重的同位素的取代(例如用氘(2H)取代一个或多个氢原子)可以在某些情形中提供药学优势，例如增加的代谢稳定性。
[0227] 用于检测本公开内容的经标记的化合物的物理方法可以选自正电子发射断层扫描(PET)、单光子成像计算机断层扫描(SPECT)、磁共振光谱(MRS)、磁共振成像(MRI)和计算机轴X射线断层扫描(CAT)或其组合
[0228] 制备方法
[0229] 本公开内容的化合物可以通过常规的化学合成方法(例如，工作实施例中描述的那些方法)来制备。用于本申请所描述的过程中的起始材料是已知的或者可以通过常规方法从商购化学品容易地制备。
[0230] 此外，本公开内容的一种化合物可以利用常规方法转化为本公开内容的另一种化合物。
[0231] 本文所述的反应的终产物可以通过常规技术(例如，通过提取、结晶、蒸馏、色谱等)来分离。
[0232] 本领域技术人员应该理解，为了以另选的方式(在某些情况下是更为便利的方式)获得本公开内容的化合物，前文提及的各个工艺步骤可以以不同顺序进行，并且/或者各个反应可以在整个路线的不同阶段进行(例如，可以对前文与特定反应关联的不同中间体进行化学转化)。
[0233] 对使用的动物模型的说明
[0234] 哺乳动物大脑的上行多巴胺能投射的末端区中的多巴胺的周转的变化可以通过测定大脑中的生化指标的变化(例如，在纹状体和额前皮质中的如3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)等多巴胺代谢物的浓度的变化)来说明。
[0235] 对DOPAC组织浓度的测定自二十世纪六十年代起已在研究领域很好地得以建立。简言之，雄性Sprague-Dawley大鼠在去头前的60秒被施以测试化合物。快速取出大脑并解剖。纹状体被快速冷冻并随后借助HPLC和电化学检测对于其DOPAC含量进行定量分析。对于每种测试化合物/载剂(vehicle)所用的动物数目为5只/组。
[0236] 微透析技术(参见例如，Collin和Ungerstedt,Microdialysis:user's guide,Carnegie Medicin,Stockholm,1988)是用于测定神经递质的胞外水平的成熟技术(Ungerstedt,J Int Med,1991,230；365-73)。微透析技术用于测定在清醒的自由运动的大鼠的纹状体和额前皮质中本文公开的化合物对单胺递质(NA、DA和5-HT)流出的影响。
[0237] Sesack等(Anatom Substr Glut-Dopamine Inter.Annals of NY AcadSci,2003,1003；36–52)公开了大脑的多巴胺能系统与中枢谷氨酸盐神经传递有强相互作用。为了研究本文公开的化合物对皮质和纹状体NMDA型谷氨酸盐受体相关突触信号传导的潜在影响，在快速施用后评估了Arc mRNA诱导。Arc(Arc/Arg3.1-活性调节细胞骨架相关蛋白/活性调节基因3.1；(Link W等,Proc Natl Acad Sci,USA,1995,92；5734-8and Lyford GL et al.,Neuron,1995,14；433–45)是由突触活性诱导的即刻早期基因(IEG)，其在突触位点的表达和定位受NMDA受体活化特异性地引发并且与神经可塑性极大地相关(Steward和Worley,Neuron,2001,30；227-40,Kawashima等，PNAS,2009,106(1)；316-21，和Bramham等，Exp Brain Res,2010,200；125–40)。
[0238] 还研究了本公开内容的化合物对于初次接受药物(drug-naive)的大鼠的自主活动的影响。将动物在施用药物后立即置于运动计中并记录自主活动60分钟(计数/60分钟±SEM)。结果以相对对照的百分比呈现。
[0239] 生物学活性
[0240] 本文公开的化合物具有对脑皮质中的单胺的调节效果，且所述化合物与其药物组合物均可用于治疗诸如精神障碍等中枢神经系统病症。特别是，本文所公开的化合物及其药物组合物可用于治疗其中皮质单胺能系统因直接或间接原因而功能失调的CNS病症。根据本公开内容的化合物可以用于治疗情感障碍和认知障碍，例如神经退行性和神经进行性病症和/或疾病。此外，具有对多巴胺能的调节效果的化合物可以用于改善罹患运动障碍的患者的运动功能。
[0241] 对脑皮质中的单胺具有调节效果的化合物可以用于改善运动和认知功能以及用于治疗与老化、神经退行性病症和/或疾病(例如，阿尔兹海默症、额颞痴呆、年龄相关认知受损和血管性痴呆)和进行性病症(例如，自闭症谱系病症、ADHD、脑瘫、吉勒图雷特综合症)相关以及脑损伤后的情绪困扰。所述脑损伤可能由创伤性、炎性、感染性、赘生性、血管性、缺氧性或代谢性原因或者通过对外源性化学物质的毒性反应而诱导，其中所述外源性化学物质选自由滥用物质组成的组，根据本公开内容的药物化合物、环境化合物和药物组合物还可以用于通常首次在婴儿期、儿童期或青少年期诊断出的行为障碍以及冲动控制障碍。
[0243] 本公开内容的化合物可以用于治疗物质滥用病症以及由食物误用所表征的病症。本公开内容的化合物还可以用于治疗选自由睡眠障碍、性障碍、饮食障碍、肥胖症、以及由肌紧张增加所表征的病况中的其它疼痛组成的组的病况。
[0244] 神经学指征包括本公开内容的化合物及其药物组合物在改善帕金森症中的心理和运动功能、以及在相关的帕金森病综合征、动作障碍(例如L-DOPA诱导的动作障碍)和肌张力障碍方面的应用。本公开内容的化合物还可以用于减轻不同来源的抽搐和震颤。此外，本公开内容的化合物可以用于减轻由肌紧张增加所表征的病况中的疼痛。
[0245] 本文公开的化合物还可以用于治疗亨廷顿病和其它运动障碍以及药物诱导的运动障碍。不宁腿和相关病症以及发作性睡病也可以用根据本公开内容的化合物治疗。
[0246] 本文公开的化合物据信可用于治疗和/或预防所有形式的精神病，例如精神分裂症和分裂样和双相情感障碍以及药物诱导的精神障碍。也可以治疗医源性和非医源性精神病和幻觉症。
[0247] 药物组合物
[0248] 还提供了包含治疗有效量的本公开内容的化合物或其药学可接受盐和至少一种药学可接受载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。
[0249] 如本文所用，术语“治疗有效量”是指足以在施用了本文公开的化合物的患者中诱导所需治疗效果的所述化合物的量。
[0250] 本公开内容涉及包含本公开内容的化合物的药物组合物及其在治疗CNS病症中的应用。有机酸和无机酸均可用于形成根据本公开内容的化合物的无毒性、药学可接受的酸加成盐。本公开内容的化合物的合适的酸加成盐包括用如上文提及的那些药学可接受盐形成的那些酸加成盐。包含本公开内容的化合物的药物组合物还可以包括用于促进该药物制剂的生产或所述制剂的施用的赋形剂。这些赋形剂是本领域技术人员所公知的，且可以例如为药学可接受佐剂、稀释剂、载体和防腐剂。
[0251] 在临床实践中，根据本公开内容的化合物通常将以包含作为游离碱或作为药学可接受非毒性盐(例如，酸加成盐，例如盐酸盐、乳酸盐、乙酸盐或氨基磺酸盐)的活性成分与药学可接受载体、赋形剂或稀释剂的组合的药物制剂形式口服、经直肠、经鼻或通过注射施用。所述载体、赋形剂或稀释剂可以为固体、半固体或液体制剂。通常，活性物质将构成制剂的0.1重量％至99重量％，更具体地针对注射用制剂为0.5重量％至20重量％而针对适合口服施用的制剂为0.2重量％至50重量％。
[0252] 为了产生用于口服施用的剂量单元形式的含本公开内容化合物的药物制剂，可以将选定的化合物与固体赋形剂混合然后压制成片剂，所述固体赋形剂例如为乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、如土豆淀粉、玉米淀粉或支链淀粉等淀粉、纤维素衍生物、如明胶或聚乙烯吡咯烷酮等粘合剂以及诸如硬脂酸镁、硬脂酸钙、聚乙二醇、蜡、石蜡等润滑剂等等。如果需要包衣片剂，可以将核(如上文所制备)用含有例如阿拉伯胶、明胶、滑石和二氧化钛等的浓缩糖溶液包衣。作为另选，所述片剂可以用溶解于易挥发有机溶剂或有机溶剂混合物中的本领域技术人员已知的聚合物包衣。可以在这些包衣中添加染料以便容易区分含有不同活性物质或不同量的活性化合物的片剂。
[0253] 对于软明胶胶囊的制备，可以将化合物与例如植物油或聚乙二醇共混。硬明胶胶囊可以包含使用了上述片剂用赋形剂(例如，乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉(例如，土豆淀粉、玉米淀粉或支链淀粉)、纤维素衍生物或明胶)的活性物质颗粒。液体或半固体的药物也可以装填在硬明胶胶囊中。
[0254] 下面给出了适合口服施用的速释片剂和胶囊制剂的实例：
[0255]
[0256]
[0257] 用于直肠施用的剂量单元可以为溶液或悬浮液，或者可以制备为包含活性物质与中性脂肪碱的混合物的栓剂的形式或包含活性物质与植物油或石蜡油的共混物的明胶直肠胶囊形式。用于口服施用的液体制剂可以为糖浆或悬浮液的形式，例如含有约0.2重量％至20重量％的本文所述活性物质而余量为乙醇、水、甘油和丙二醇的混合物以及糖的溶液。可选地，所述液体制剂可以包含着色剂、调味剂、糖精和作为增稠剂的羧甲基纤维素或者其它本领域技术人员已知的赋形剂。
[0258] 用于通过注射胃肠外施用的溶液可以制备为活性物质的水溶性药学可接受盐的水溶液，优选浓度为0.5重量％至约10重量％。这些溶液还可含有稳定剂和/或缓冲剂，并且可以便利地以各种剂量单元安瓿提供。向待治疗的患者的应用和施用是本领域普通技术人员所显而易见的。
[0259] 对于鼻内施用或通过吸入的施用，本发明的化合物可以以溶液、干粉或悬浮液的形式递送。施用可以采用合适的推进剂(例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体)通过由患者挤压或泵送的泵喷雾容器进行，或者通过从加压容器或雾化器的气雾剂喷雾递送而进行。本发明的化合物还可以作为与载体物质(例如，糖)组合的细粉粉末或作为微球经由干粉吸入器施用。吸入器、泵喷雾或气雾剂喷雾可以为单次或多次剂量。剂量可通过递送计定量的活性化合物的阀来控制。
[0260] 本公开内容的化合物还可以以控释制剂施用。然后所述化合物在所需的时间段中以维持恒定的药学活性所需的速率释放。这些剂型提供了在预定的时间段中对身体的药物供给，因此比常规的非受控制剂在更长的时间段内维持了治疗范围内的药物水平。所述化合物可以配制为其中靶向释放活性化合物的控释制剂。例如，通过制剂的pH敏感性，化合物的释放可以限于消化系统的特定区域。这类制剂是本领域技术人员所公知的。
[0261] 根据待治疗的病症和患者以及施用途径，组合物可以以不同剂量施用。给药还将取决于吸收性效力与施用频率和途径的关系。这些剂量可以每日施用一次、两次或三次以上。本发明的化合物可以以0.01mg/kg体重/天至500mg/kg体重/天的剂量对受试者施用，但需要根据待治疗的受试者的体重、性别和状况、所治疗的疾病状态以及选定的具体施用途径进行变化。然而，为治疗疾病，在人中采用的最为理想的单次或分次剂量为0.1mg/kg体重/天至10mg/kg体重/天的剂量水平。作为另选，剂量水平为可获得0.1nM至10μM的化合物血清浓度的剂量水平。
[0262] 此外，提供了本文公开的化合物和/或本文例举的具体化合物或其药学可接受盐，其用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况。
[0263] 此外，还提供了本文公开的化合物和/或本文例举的具体化合物或其药学可接受盐在制备用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况的药物中的应用。作为另选或者另外地，所述疾病、病症和/或病况可以如本文其它部分所描述。
[0264] 此外，还提供了用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况的方法，所述方法包括对有需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物和/或本文例举的具体化合物或其药学可接受盐。作为另选或者另外地，所述疾病、病症和/或病况可以如本文其它部分所描述。
[0265] 此外，还提供了本文公开的化合物和/或本文例举的具体化合物或其药学可接受盐在制备用于治疗和/或预防以下疾病、病症和/或病况的药物中的应用，所述疾病、病症和/或病况可以选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍、神经退行性相关认知障碍和/或疾病、自闭症谱系病症、注意力缺乏多动症(ADHD)、情感障碍、抑郁症、精神分裂症、焦虑症和恐慌症组成的组。作为另选或者另外地，所述疾病、病症和/或病况可以如本文其它部分所描述。
[0266] 例如，所述疾病、病症和/或病况可以选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍、与神经退行性病症和/或疾病相关的认知障碍、自闭症谱系病症、注意力缺乏多动症(ADHD)、情感障碍、精神分裂症、焦虑症和运动障碍组成的组。痴呆症的实例包括阿尔兹海默症和额颞痴呆。自闭症谱系病症的实例包括自闭症和阿斯伯格综合征。情感障碍的实例包括重度抑郁症、双相情感障碍和抑郁。焦虑症的实例包括恐慌症、泛焦虑症和社交恐惧症。运动障碍的实例包括帕金森病和亨廷顿病。作为另选或者另外地，所述疾病、病症和/或病况可以如本文其它部分所描述。
[0267] 在另一个实例中，所述疾病、病症和/或病况可以选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍、与神经退行性病症和/或疾病相关的认知障碍、自闭症谱系病症、情感障碍、精神分裂症、焦虑症、注意力缺乏多动症(ADHD)和运动障碍组成的组。在另一个实例中，所述疾病、病症和/或病况选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍和精神分裂症组成的组。
[0268] 在本文中，对疾病、病症和/或病况的治疗可以涉及与所述疾病、病症和/或病况相关的症状的减轻。例如，症状减轻可以包括症状减少或者使症状较不难受。
[0269] 组合疗法
[0270] 本文公开的一种或多种化合物，例如式I、式II、式II’、式III、式IVa、式IVb、式IVc、式V或式VI的化合物，可以与至少一种其它治疗活性剂组合，所述治疗活性剂可用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况。例如，所述疾病、病症和/或病况可以选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍、神经退行性相关认知障碍和/或疾病、自闭症谱系病症、注意力缺乏多动症(ADHD)、情感障碍、抑郁症、精神分裂症、焦虑症和恐慌症组成的组。作为另选或者另外地，所述疾病、病症和/或病况可以如本文其它部分所描述。
[0271] 本文公开的一种或多种化合物与至少一种其它治疗活性剂的组合物可以作为单一组合物提供。作为另选，所述组合可以作为多部分的试剂盒(kit of parts)提供。
[0272] 因此提供了包含以下成分或由其组成的多部分的试剂盒：
[0273] (i)本文公开的化合物，和
[0274] (ii)治疗活性剂，所述治疗活性剂可用于治疗、预防或减轻响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况。
[0275] 所述多部分试剂盒的成分(i)的化合物可以与药学可接受载体、赋形剂和/或稀释剂一同提供。此外，所述多部分试剂盒的成分(ii)的治疗活性剂可以与药学可接受载体、赋形剂和/或稀释剂一同提供。
[0277] 还提供了用作药物的诸如本文公开的单一组合物或多部分试剂盒的组合。
[0278] 此外，提供了诸如本文公开的单一组合物或多部分试剂盒的组合，其用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况。
[0279] 此外，提供了诸如本文公开的单一组合物或多部分试剂盒的组合，其用于制备用于治疗和/或预防响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况的药物。
[0280] 此外，提供了治疗响应于对脑皮质中的单胺的调节的疾病、病症和/或病况的方法，所述方法包括对有需要的患者施用有效量的诸如本文公开的单一组合物或多部分试剂盒的成分的步骤。
[0281] 应该理解，本文公开的多部分试剂盒的成分(i)的化合物和成分(ii)的治疗活性剂可以同时、连续或分别施用。
[0282] 此外，应该理解，在诸如本文公开的单一组合物或多部分试剂盒的组合的背景下，所述疾病、病症和/或病况可以选自由痴呆症、年龄相关性认知障碍、神经退行性相关认知障碍和/或疾病、自闭症谱系病症、注意力缺乏多动症(ADHD)、情感障碍、抑郁症、精神分裂症、焦虑症和恐慌症组成的组。作为另选或者另外地，所述疾病、病症和/或病况可以如本文其它部分所描述。
[0283] 实施例
[0284] 本发明在下文和下文概述的实施例中进一步进行阐释，所述实施例在任何情况下均不限制本发明的范围。
[0285] 使用了以下通用实验程序：
[0286] (i)低分辨质谱在运行于70eV离子化电势的HP 5970A仪器上记录。质量检测器与采用40cm/s He气流的配备有HP-5MS UI GC柱(15m,0.25mm,0.25μm)的HP5700气相色谱接口。
[0287] (ii)NMR实验在Oxford 800magnet,Bruker Avance III HD光谱仪上进行，其具有4通道、5mm TXO冷探针和ASTM 13C S/N 3300。*质子来自富马酸抗衡离子。
[0288] (iii)熔点通过Buchi B-545测定且未经校正。
[0289] (iv)对于快速色谱，采用具有SNAP Cartridge KP-Sil的Biotage Isolera Vers 1.2和异辛烷/乙酸乙酯/甲醇的流动相梯度混合物。
[0290] (v)对映异构体的分离在Nova Prep 200仪器上利用具有流动相(庚烷/2-丙醇/二乙胺,98:2:0.1)的Kromasil 10-Cellucoat进行，用Merck HITACHI UV-detector l-7400(单波长)在255nm-265nm采样。对对映异构纯度的分析通过采用Gynotek单波长紫外检测器的Kromasil 5-cellucoat CT8031柱(4.6*250mm)用Chromeleon v.6.8软件进行定量。旋光度在使用Na589灯(60-80μAmp/5秒积分)的Perkin-Elmer 241Polarimeter上进行测定。
[0293] 实施例1
[0294] (-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷盐酸盐
[0295] 的(-)-对映异构体
[0296] 将(-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(E1)(1.30g,4.32mmol)溶解于二氯甲烷(30ml)并添加三氟乙酸(3ml)，其后将混合物在环境温度搅拌
15h。蒸发溶剂并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/TEA提取。
蒸发溶剂并将粗产物(0.55g,2.73mmol)溶解于5ml乙醇，并添加盐酸的乙醇溶液(1.25M,
3.5ml)。蒸发溶剂并将粗盐(标题化合物)在2-丙醇中重结晶：M.p.149-150℃(HCl).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,3),171(43),153(bp),151(44),145(38).1H NMR(800MHz,MeOD)δppm 3.45-3.56(m,1H)4.00-4.11(m,2H)4.11-4.19(m,1H)4.14(dd,J＝17.12,10.27Hz,1H)
5.95-6.10(m,1H)7.26(d,J＝2.93Hz,1H)7.29-7.37(m,1H).[α]D＝-28.1°(基于浓度10mg/ml测定)。
15h。蒸发溶剂并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/TEA提取。
蒸发溶剂并将粗产物(0.55g,2.73mmol)溶解于5ml乙醇，并添加盐酸的乙醇溶液(1.25M,
3.5ml)。蒸发溶剂并将粗盐(标题化合物)在2-丙醇中重结晶：M.p.149-150℃(HCl).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,3),171(43),153(bp),151(44),145(38).1H NMR(800MHz,MeOD)δppm 3.45-3.56(m,1H)4.00-4.11(m,2H)4.11-4.19(m,1H)4.14(dd,J＝17.12,10.27Hz,1H)
5.95-6.10(m,1H)7.26(d,J＝2.93Hz,1H)7.29-7.37(m,1H).[α]D＝-28.1°(基于浓度10mg/ml测定)。
[0297] 实施例2
[0298] (+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷盐酸盐
[0299] 的(+)-对映异构体
[0300] 将(+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(E2)(1.00g,3.32mmol)溶解于二氯甲烷(25ml)并添加三氟乙酸(3ml)，其后将混合物在环境温度搅拌
15h。蒸发溶剂并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/TEA提取。
蒸发溶剂并将粗产物(0.5g,2.48mmol)溶解于5ml乙醇，并添加盐酸的乙醇溶液(1.25M,
2.0ml)。蒸发溶剂并将粗盐(标题化合物)在2-丙醇中重结晶:M.p.153-154℃(HCl).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,3),171(43),153(bp),151(44),145(38).1H NMR(800MHz,MeOD)δppm 3.45-3.58(m,1H)4.07-4.16(m,2H)4.11(dd,J＝11.25,4.89Hz,1H)4.16-4.22(m,2H)
5.97-6.11(m,1H)7.26(d,J＝3.42Hz,2H)7.33(td,J＝10.27,7.34Hz,1H).[α]D＝+18.4°(基于浓度10mg/ml测定)。
15h。蒸发溶剂并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/TEA提取。
蒸发溶剂并将粗产物(0.5g,2.48mmol)溶解于5ml乙醇，并添加盐酸的乙醇溶液(1.25M,
2.0ml)。蒸发溶剂并将粗盐(标题化合物)在2-丙醇中重结晶:M.p.153-154℃(HCl).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,3),171(43),153(bp),151(44),145(38).1H NMR(800MHz,MeOD)δppm 3.45-3.58(m,1H)4.07-4.16(m,2H)4.11(dd,J＝11.25,4.89Hz,1H)4.16-4.22(m,2H)
5.97-6.11(m,1H)7.26(d,J＝3.42Hz,2H)7.33(td,J＝10.27,7.34Hz,1H).[α]D＝+18.4°(基于浓度10mg/ml测定)。
[0301] 实施例3
[0302] (-)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷富马酸盐
[0303] 的(-)-对映异构体
[0304] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(E1)(0.38,1.26mmol)溶解于二氯甲烷(25ml)并添加三氟乙酸(3ml)，其后将混合物在环境温度搅拌15h。蒸发溶剂并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/TEA提取。蒸发溶剂并将粗产物(0.20g,1.0mmol)溶解于5ml乙醇并添加富马酸(0.11g,1.0mmol)。蒸发溶剂并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.146-147℃(富马酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,3),171(64),153(bp),151(63),145(43).1H NMR(800MHz,MeOD)δppm 3.41-
3.52(m,1H)4.04(t,J＝10.03Hz,1H)4.11(dd,J＝13.20,7.34Hz,2H)4.17(t,J＝10.03Hz,
1H)5.72-5.86(m,1H)6.67*(s,1.5H)6.92-6.99(m,1H)6.99-7.05(m,2H).[α]D＝-34.4°(基于浓度10mg/ml测定)。
3.52(m,1H)4.04(t,J＝10.03Hz,1H)4.11(dd,J＝13.20,7.34Hz,2H)4.17(t,J＝10.03Hz,
1H)5.72-5.86(m,1H)6.67*(s,1.5H)6.92-6.99(m,1H)6.99-7.05(m,2H).[α]D＝-34.4°(基于浓度10mg/ml测定)。
[0305] 实施例4
[0306] (+)-3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷富马酸盐
[0307] 的(+)-对映异构体将3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(E2)(0.41g,1.36mmol)溶解于二氯甲烷(25ml)并添加三氟乙酸(3ml)，其后将混合物在环境温度搅拌15h。蒸发溶剂并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/TEA提取。蒸发溶剂并将粗产物(0.25g,1.24mmol)溶解于5ml乙醇并添加富马酸(0.16g,1.24mmol)。蒸发溶剂并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.155-156℃(富马酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,3),171(64),153(bp),151(63),145(43).1H NMR(800MHz,MeOD)δppm 3.41-3.52(m,
1H)4.04(t,J＝9.78Hz,1H)4.11(dd,J＝16.14,7.34Hz,2H)4.17(t,J＝10.03Hz,1H)5.71-
5.86(m,1H)6.67*(s,1.5H)6.94-6.98(m,1H)7.00-7.04(m,2H).[α]D＝+28.5°(基于浓度
10mg/ml测定)。
1H)4.04(t,J＝9.78Hz,1H)4.11(dd,J＝16.14,7.34Hz,2H)4.17(t,J＝10.03Hz,1H)5.71-
5.86(m,1H)6.67*(s,1.5H)6.94-6.98(m,1H)7.00-7.04(m,2H).[α]D＝+28.5°(基于浓度
10mg/ml测定)。
[0308] 实施例5
[0309] 3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷盐酸盐
[0310]
[0311] 将3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.66,2.22mmol)溶解于二氯甲烷(25ml)并添加三氟乙酸(5ml)，其后将混合物在环境温度搅拌15h。蒸发溶剂并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/TEA提取。蒸发溶剂并将粗产物(0.41g,2.03mmol)溶解于5ml乙醇并添加盐酸的乙醇溶液(1.25M,3.1ml)。蒸发溶剂并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.109-110℃(HCl).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,2),171(42),153(bp),151(36),145(36).1H NMR(800MHz,MeOD)δppm 3.47(dddd,J＝18.65,16.57,9.05,4.65Hz,1H)4.06-4.11(m,2H)4.11-4.19(m,2H)5.70-5.88(m,1H)7.21(d,J＝7.82Hz,1H)7.28-7.39(m,2H)。
[0312] 实施例6
[0313] 3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0314]
[0315] 将3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-(二苯基甲基)氮杂环丁烷(1.2g,3.27mmol)溶解于二氯甲烷(15ml)并冷却至0℃。添加氯甲酸1-氯乙酯(0.7g,4.9mmol))，其后将混合物在0℃搅拌18h。蒸发溶剂并将粗产品重新溶解于甲醇(20ml)，并在环境温度搅拌3小时。将该甲醇溶液添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/三乙胺提取。蒸发溶剂并将粗产品(0.77g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,1:0至1:1)以得到标题化合物(0.28g,1.38mmol)。将标题化合物溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(0.17g,1.38mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.149℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,2),171(54),153(bp),151(46),145(48).1H NMR(800MHz,DMSO-d6)δppm 3.43(m,1H),3.82(m,1H)4.01-4.09(m,3H),
6.03-6.1(m,1H),7.31-7.38(m,3H)。
6.03-6.1(m,1H),7.31-7.38(m,3H)。
[0316] 实施例7
[0317] 3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0318]
[0319] 将3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.2g,3.98mmol)溶解于二氯甲烷(15ml)并添加三氟乙酸(6ml,78mmol)，将混合物在环境温度搅拌1h。然后将混合物蒸发并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/三乙胺提取。蒸发溶剂并将粗产品(0.82g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,1:0至
1:1)以得到标题化合物(0.74g,3.66mmol)。将标题化合物溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(0.46g,3.66mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.169.4℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,2),171(42),
153(bp),151(31),145(48).1H NMR(800MHz,CD3OD)δppm 3.6(m,1H),3.99(m,1H)4.17(m,
1H),4.26(m,1H),4.34(m,1H),4.5(m,1H),6.06-6.22(dd,1H),7.05(m,2H),7.48(m,1H)。
1:1)以得到标题化合物(0.74g,3.66mmol)。将标题化合物溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(0.46g,3.66mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.169.4℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,2),171(42),
153(bp),151(31),145(48).1H NMR(800MHz,CD3OD)δppm 3.6(m,1H),3.99(m,1H)4.17(m,
1H),4.26(m,1H),4.34(m,1H),4.5(m,1H),6.06-6.22(dd,1H),7.05(m,2H),7.48(m,1H)。
[0320] 实施例8
[0321] 3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0322]
[0323] 将3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.54g,1.79mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)并添加三氟乙酸(4ml,52mmol)，将混合物在环境温度搅拌1h。然后将混合物蒸发并将粗产物添加至SCX-3SPE-柱，用甲醇冲洗并用4:1比例的甲醇/三乙胺提取。蒸发溶剂并将粗产品(0.34g,1.71mmol)溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(0.216g,1.71mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.152.5℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,1),171(41),153(bp),151(34),145(47).1H NMR(800MHz,CD3OD)δppm 3.5(m,1H),4.06(m,1H),4.13(m,1H),4.19(m,
2H),5.94/5.99(dd,1H),7.03(m,2H),7.48(m,1H)。
2H),5.94/5.99(dd,1H),7.03(m,2H),7.48(m,1H)。
[0324] 实施例9
[0325] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0326]
[0327] 将3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.62g,5.09mmol)溶解于二氯甲烷(20ml)并添加三氟乙酸(6ml,78mmol)，将混合物在环境温度搅拌1h。然后将混合物蒸发并将粗产物重新溶解于10％Na2CO3中，将水相用乙酸乙酯提取，并将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发(产量1.09g,5.0mmol)。将粗产品溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(0.63g,5.0mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.138.2℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)219(M+,5),189(33),171(bp),169(40),163(43).1H NMR(800MHz,CD3OD)δppm 3.5(m,1H),4.1(m,2H),4.2(m,2H),6.01/6.07(dd,1H),7.09(m,1H),7.23(m,1H)。
[0328] 实施例10
[0329] 3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0330]
[0331] 将3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.995g,3.12mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)并添加三氟乙酸(4ml,52mmol)，将混合物在环境温度搅拌1h。然后将混合物蒸发并将粗产物重新溶解于10％Na2CO3中，将水相用乙酸乙酯提取，并将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发(产量0.67g,3.06mmol)。将粗产品溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(0.385g,3.06mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.149.6℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)219(M+,2),171(bp),169(24),163(56),145(25).1H NMR(800MHz,DMSO-d6)δppm 3.5(m,1H),3.7(m,
1H),4.01(m,1H),4.13(m,2H),6.12/6.17(dd,1H),7.31(m,2H)。
1H),4.01(m,1H),4.13(m,2H),6.12/6.17(dd,1H),7.31(m,2H)。
[0332] 实施例11
[0333] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0334]
[0335] 将3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.2g,3.77mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)并添加三氟乙酸(4ml,52mmol)，将混合物在环境温度搅拌1h。然后将混合物蒸发并将粗产物重新溶解于10％Na2CO3中，将水相用甲基叔丁基醚提取，并将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发(产量0.67g,3.06mmol)。将粗产品溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(0.385g,3.06mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.157.7℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)219(M+,3),189(27),171(bp),169(29),163(41).1H NMR(800MHz,CD3OD)δppm 3.5(m,1H),4.07(m,
1H),4.14(m,1H),4.20(m,2H),5.96/6.12(dd,1H),7.20(m,1H),7.26(m,1H)。
1H),4.14(m,1H),4.20(m,2H),5.96/6.12(dd,1H),7.20(m,1H),7.26(m,1H)。
[0336] 实施例12
[0337] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0338]
[0339] 将3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.2g,3.77mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)并添加三氟乙酸(4ml,52mmol)，将混合物在环境温度搅拌1h。然后将混合物蒸发并将粗产物重新溶解于10％Na2CO3中，将水相用甲基叔丁基醚提取，并将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发(产量0.64g,2.92mmol)。将粗产品溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(0.37g,2.92mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.123.2℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)219(M+,2),189(24),171(bp),169(30),163(34).1H NMR(800MHz,CD3OD)δppm 3.45(m,1H),4.04-
4.13(m,3H),4.17(m,1H),5.73/5.78(dd,1H),7.20(t,2H)。
4.13(m,3H),4.17(m,1H),5.73/5.78(dd,1H),7.20(t,2H)。
[0340] 实施例13
[0341] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷
[0342]
[0343] 将3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g,3.32mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)并添加三氟乙酸(4ml,52mmol)，将混合物在环境温度搅拌1h。然后将混合物蒸发并将粗产物重新溶解于10％Na2CO3中，将水相用乙酸乙酯提取，并将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发(0.54g,2.69mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,2),171(63),153(bp),151(52),145(40)。
[0344] 实施例14
[0345] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷
[0346]
[0347] 将3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g,3.32mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)并添加三氟乙酸(4ml,52mmol)，将混合物在环境温度搅拌1h。然后将混合物蒸发并将粗产物重新溶解于10％Na2CO3中，将水相用乙酸乙酯提取，并将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发(660mg,3.3mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)201(M+,2),171(41),153(bp),151(42),145(39)。
[0348] 实施例15
[0349] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷
[0350]
[0351] 将3-[2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(90mg,0.45mmol)溶解于乙腈(4ml)并添加多聚甲醛(37％aq,0.17ml,2.23mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将氰基硼氢化钠(56mg,0.89mmol)以小份添加至混合物中。将最终混合物在环境温度搅拌2小时，然后添加水和饱和NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯提取。将汇集的有机相干燥(Na2CO3)、过滤并蒸发至干(5.1mg)。MS m/z(相对强度,70eV)215(M+,bp),171(62),151(82),145(81),57(49).).1H NMR(800MHz,CDCl3)δppm 2.36(s,3H),3.0(m,1H),3.1(t,1H),3.3(t,1H)3.43(m,2H),5.82/5.88(dd,1H),7.13(m,3H)。
[0352] 实施例16
[0353] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷盐酸盐
[0354]
[0355] 将3-[2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(250mg,1.24mmol)溶解于四氢呋喃(15ml)并添加NEt3(0.52ml,3.73mmol)和碘乙烷(0.15ml,1.86mmol)。将混合物在环境温度搅拌24小时，然后蒸发至干。将粗残余物重新溶解于10％HCl水溶液中并用甲基叔丁基醚提取。然后将水相用10％Na2CO3水溶液碱化并用甲基叔丁基醚提取。将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至70:30)以得到标题化合物(165mg,0.72mmol)。将粗产品溶解于5ml乙醇并添加盐酸的乙醇溶液(1.25M,5ml)。蒸发溶剂并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.130.8℃(HCl).MS m/z(相对强度,70eV)229(M+,35),214(bp),151(29),145(56),57(67).1H NMR(800MHz,CD3OD)δppm 1.24(t,3H),3.33(m,3H),3.53(m,1H),4.03-4.44(m,
3H),6.09(m,1H),7.3(m,2H),7.36(m,1H)。
3H),6.09(m,1H),7.3(m,2H),7.36(m,1H)。
[0356] 实施例17
[0357] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷草酸盐
[0358]
[0359] 将3-[2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(200mg,0.99mmol)溶解于四氢呋喃(8ml)并添加NEt3(0.42ml,2.98mmol)和1-碘丙烷(0.14ml,1.49mmol)。将混合物在环境温度搅拌24小时，然后蒸发至干。将粗残余物重新溶解于10％HCl水溶液中并用甲基叔丁基醚提取。然后将水相用10％Na2CO3水溶液碱化并用甲基叔丁基醚提取。将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至85:15)以得到标题化合物(101mg,0.41mmol)。将纯化的产物溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(52.4mg,0.41mmol)，将混合物蒸发至干并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.137.4℃(草酸盐)MS m/z(相对强度,70eV)243(M+,8),215(14),214(bp),153(11),145(25).1H NMR(800MHz,DMSO-d6)δppm 0.86(t,3H),1.47(m,2H),3.03(t,2H),3.41(m,1H),3.83(t,1H),4.04-4.15(m,3H),6.09/6.15(dd,1H),
7.29(m,2H),7.51(m,1H)。
7.29(m,2H),7.51(m,1H)。
[0360] 实施例18
[0361] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷
[0362]
[0363] 将3-[3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(100mg,0.5mmol)溶解于乙腈(4.5ml)并添加多聚甲醛(37％aq,0.19ml,2.48mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将氰基硼氢化钠(62mg,0.99mmol)以小份添加至混合物中。将最终混合物在环境温度搅拌2小时，然后添加水和饱和NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯提取。将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至75:25)以得到标题化合物(5mg,0.023mmol)MS m/z(相对强度,70eV)215(M+,76),171(67),151(bp),145(82),57(76)。
[0364] 实施例19
[0365] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-乙基氮杂环丁烷草酸盐
[0366]
[0367] 将3-[3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(285mg,1.42mmol)溶解于四氢呋喃(8ml)并添加NEt3(0.59ml,4.25mmol)和碘乙烷(0.17ml,2.12mmol)。将混合物在环境温度搅拌20小时，然后蒸发至干。将粗残余物重新溶解于10％HCl水溶液中并用甲基叔丁基醚提取。然后将水相用10％Na2CO3水溶液碱化并用甲基叔丁基醚提取。将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至70:30)以得到标题化合物(产量117mg,0.51mmol)。将纯化的产物溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(64mg,0.51mmol)，将混合物蒸发至干并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.137.3℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)229(M+,44),214(bp),151(39),145(54),57(87).1H NMR(800MHz,DMSO-d6)δppm 1.05(t,3H),3.09(m,2H),3.33(m,1H),3.89(m,1H),4.0-4.06(m,3H),5.85/5.91(dd,1H),7.17(m,2H),
7.28(m,1H)。
7.28(m,1H)。
[0368] 实施例20
[0369] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷草酸盐
[0370]
[0371] 将3-[3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(150mg,0.74mmol)溶解于四氢呋喃(8ml)并添加NEt3(0.31ml,2.23mmol)和1-碘丙烷(0.11ml,1.11mmol)。将混合物在环境温度搅拌24小时，然后蒸发至干。将粗残余物重新溶解于10％HCl水溶液中并用甲基叔丁基醚提取。然后将水相用10％Na2CO3水溶液碱化并用甲基叔丁基醚提取。将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至95:5)以得到标题化合物(产量85mg,0.35mmol)。将纯化的产物(80mg)溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(41.5mg,0.329mmol)，将混合物蒸发至干并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.156.9℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,
70eV)243(M+,8),215(14),214(bp),145(22),70(11).1H NMR(800MHz,DMSO-d6)δppm 0.87(t,3H),1.47(m,2H),3.0(t,2H),3.3(m,1H),3.9(t,1H),4.01-4.06(m,3H),5.84/5.90(dd,
1H),7.17(m,2H),7.28(m,1H)。
70eV)243(M+,8),215(14),214(bp),145(22),70(11).1H NMR(800MHz,DMSO-d6)δppm 0.87(t,3H),1.47(m,2H),3.0(t,2H),3.3(m,1H),3.9(t,1H),4.01-4.06(m,3H),5.84/5.90(dd,
1H),7.17(m,2H),7.28(m,1H)。
[0372] 实施例21
[0373] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷
[0374]
[0375] 将3-[2,3,5-三氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(135mg,0.61mmol)溶解于乙腈(6ml)并添加多聚甲醛(37％aq,0.23ml,3.08mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将氰基硼氢化钠(77.4mg,1.23mmol)以小份添加至混合物中。将最终混合物在环境温度搅拌2小时，然后添加水和饱和NaHCO3水溶液，并用乙酸乙酯提取。将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至90:10)以得到标题化合物(0.74g,3.66mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)233(M+,bp),171(44),169(67),163(76),57(56).1H NMR(800MHz,CDCl3)δppm 2.35(s,3H),2.95(m,1H),3.10(t,1H),3.26(t,1H),3.40(m,2H),5.81/5.87(dd,1H),6.87-6.93(m,2H)。
[0376] 实施例22
[0377] 1-乙基-3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0378]
[0379] 3-[2,3,5-三氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(250mg,1.14mmol)溶解于四氢呋喃(8ml)并添加NEt3(0.48ml,3.42mmol)和碘乙烷(0.14ml,1.71mmol)。将混合物在环境温度搅拌20小时，然后蒸发至干。将粗残余物重新溶解于10％HCl溶液中并用甲基叔丁基醚提取。然后将水相用10％Na2CO3水溶液碱化并用甲基叔丁基醚提取。将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至80:20)以得到标题化合物(77mg,0.31mmol)。将纯化的产物(77mg)溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(39.3mg,0.31mmol)，将混合物蒸发至干并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.127.1℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)247(M+,26),232(87),169(29),163(61),57(bp).1H NMR(800MHz,DMSO-d6)δppm 1.06(t,
3H),3.10(q,2H),3.39(m,1H),3.83(m,1H),4.04-4.10(m,3H),6.10/6.16(dd,1H),7.25(m,
1H),7.64(m,1H)。
3H),3.10(q,2H),3.39(m,1H),3.83(m,1H),4.04-4.10(m,3H),6.10/6.16(dd,1H),7.25(m,
1H),7.64(m,1H)。
[0380] 实施例23
[0381] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷草酸盐
[0382]
[0383] 将3-[2,3,5-三氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(200mg,0.91mmol)溶解于四氢呋喃(8ml)并添加NEt3(0.38ml,2.74mmol)和1-碘丙烷(0.13ml,1.37mmol)。将混合物在环境温度搅拌24小时，然后蒸发至干。将粗残余物重新溶解于10％HCl水溶液中并用甲基叔丁基醚提取。然后将水相用10％Na2CO3水溶液碱化并用甲基叔丁基醚提取。将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至95:5)以得到标题化合物(75mg,0.29mmol)。将纯化产物(75mg)溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(36.2mg,0.29mmol)，将混合物蒸发至干并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.159℃(草酸盐).MS m/z(相对强度,70eV)261(M+,7),233(14),232(bp),163(22),70(9).1H NMR(800MHz,DMSO-d6)δppm 0.87(t,3H),1.47(m,2H),3.02(t,2H),3.39(m,1H),3.83(t,1H),4.05-4.13(m,3H),6.09/6.15(dd,1H),7.25(m,1H),7.63(m,1H)。
[0384] 实施例24
[0385] 1-乙基-3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷
[0386]
[0387] 将3-[2,3,4-三氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(300mg,1.37mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(10ml)并添加乙醛(0.090ml,1.64mmol)和乙酸(0.078ml,1.37mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将三乙酰氧基硼氢化钠(435mg,2.05mmol)以小份添加至混合物。将最终混合物在环境温度搅拌20小时，然后添加10％NaHCO3水溶液，并用二氯甲烷提取。将汇集的有机相洗涤(盐水)、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干(0.33g)。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至70:30)以得到标题化合物(144mg)。MS m/z(相对强度,70eV)247(M+,20),232(62),163(68),71(24),57(bp)。
[0388] 实施例25
[0389] 3-[氟(2,3,4-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷
[0390]
[0391] 将3-[2,3,4-三氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(90mg,0.41mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(5ml)并添加丙醛(0.036ml,0.49mmol)和乙酸(0.024ml,0.41mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将三乙酰氧基硼氢化钠(130.5mg,0.62mmol)以小份添加至混合物。将最终混合物在环境温度搅拌20小时，然后添加10％NaHCO3水溶液，并用二氯甲烷提取。将汇集的有机相洗涤(盐水)、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干(95mg)。MS m/z(相对强度,70eV)261(M+,54),189(18),171(bp),169(22),163(38)。
[0392] 实施例26
[0393] 1-乙基-3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0394]
[0395] 将3-[3,4,5-三氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(350mg,1.60mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(15ml)并添加乙醛(0.105ml,1.92mmol)和乙酸(0.092ml,1.60mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将三乙酰氧基硼氢化钠(508mg,2.39mmol)以小份添加至混合物。将最终混合物在环境温度搅拌20小时，然后添加10％NaHCO3水溶液，并用二氯甲烷提取。将汇集的有机相洗涤(盐水)、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干(350mg)。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至75:25)以得到标题化合物(208mg)。将纯化产物(195mg)溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(99.5mg,0.79mmol)，将混合物蒸发至干并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：M.p.129.8℃MS m/z(相对强度,70eV)247(M+,40),232(bp),169(29),163(58),57(82)。
[0396] 实施例27
[0397] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷
[0398]
[0399] 将3-[3,4,5-三氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(200mg,0.91mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(10ml)并添加丙醛(0.079ml,1.095mmol)和乙酸(0.052ml,0.91mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将三乙酰氧基硼氢化钠(290mg,1.36mmol)以小份添加至混合物。将最终混合物在环境温度搅拌20小时，然后添加10％NaHCO3水溶液，并用二氯甲烷提取。将汇集的有机相洗涤(盐水)、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干(193mg)。MS m/z(相对强度,70eV)261(M+,61),189(18),171(bp),169(22),163(31)。
[0400] 实施例28
[0401] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]氮杂环丁烷草酸盐
[0402]
[0403] 将3-[(2,3,5,6-四氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.27g,6.73mmol)溶解于二氯甲烷(15ml)并添加三氟乙酸(4ml,52mmol)，并将混合物在环境温度搅拌1小时。然后将混合物蒸发并将粗产物重新溶解于10％Na2CO3中，将水相用乙酸乙酯提取，并将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发(产量1.36g,5.72mmol)。将粗产品(555mg,
2.34mmol)溶解于10ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(295mg,2.34mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在热甲醇中重结晶：M.p.181.6℃.MS m/z(相对强度,70eV)237(M+,5),217(41),189(bp),181(49),169(46)。
2.34mmol)溶解于10ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(295mg,2.34mmol)，并将混合物蒸发至干，将粗盐(标题化合物)在热甲醇中重结晶：M.p.181.6℃.MS m/z(相对强度,70eV)237(M+,5),217(41),189(bp),181(49),169(46)。
[0404] 实施例29
[0405] 3-[氟(五氟苯基)甲基]氮杂环丁烷
[0406]
[0407] 将3-[(2,3,4,5,6-五氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(3g,8.55mmol)溶解于二氯甲烷(20ml)并添加三氟乙酸(5ml,65mmol)，并将混合物在环境温度搅拌1小时。然后将混合物蒸发并将粗产物重新溶解于10％Na2CO3中，将水相用乙酸乙酯提取，并将汇集的有机相干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发(产量2.1g)。MS m/z(相对强度,70eV)255(M+,3),208(24),207(bp),199(52),187(35)。
[0408] 实施例30
[0409] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-甲基氮杂环丁烷
[0410]
[0411] 将3-[2,3,5,6-四氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(85mg,0.36mmol)溶解于二氯甲烷(4ml)并添加多聚甲醛(37％aq,0.08ml,1.07mmol)和乙酸(0.041ml,0.72mmol)。将混合物在环境温度搅拌15分钟，然后将三乙酰氧基硼氢化钠(227.8mg,1.08mmol)以小份添加至混合物中。将最终混合物在环境温度搅拌1小时，然后添加10％Na2CO3水溶液，并用二氯甲烷提取。将汇集的有机相用盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干(67mg,0.27mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)251(M+,bp),187(38),181(66),169(35),57(60)。
[0412] 实施例31
[0413] 1-乙基-3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-氮杂环丁烷草酸盐
[0414]
[0415] 将3-[2,3,5,6-四氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(300mg,1.265mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(10ml)并添加乙醛(0.09ml,1.65mmol)和乙酸(0.072ml,1.27mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将三乙酰氧基硼氢化钠(402mg,1.9mmol)以小份添加至混合物中。将最终混合物在环境温度搅拌16小时，然后添加10％Na2CO3水溶液，并用二氯甲烷提取。将汇集的有机相洗涤(盐水)、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干(306mg)。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,100:0至80:20)以得到标题化合物(133mg)。将纯化产物(130mg,0.49mmol)溶解于5ml乙醇并添加溶于乙醇(5ml)中的草酸二水合物(61.8mg,0.49mmol)，并将混合物蒸发至干并将粗盐(标题化合物)在甲醇/乙醚中重结晶：
M.p.145.9℃MS m/z(相对强度,70eV)265(M+,30),250(bp),181(39),163(15),57(57)。
M.p.145.9℃MS m/z(相对强度,70eV)265(M+,30),250(bp),181(39),163(15),57(57)。
[0416] 实施例32
[0417] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]-1-丙基氮杂环丁烷。
[0418]
[0419] 将3-[2,3,5,6-四氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷(200mg,0.84mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(10ml)并添加丙醛(0.09ml,1.26mmol)和乙酸(0.048ml,0.84mmol)。将混合物在环境温度搅拌5分钟，然后将三乙酰氧基硼氢化钠(321mg,1.52mmol)以小份添加至混合物中。将最终混合物在环境温度搅拌16小时，然后添加10％Na2CO3水溶液，并用二氯甲烷提取。将汇集的有机相洗涤(盐水)、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干(204mg)。MS m/z(相对强度,
70eV)279(M+,94),217(27),190(29),189(bp),181(35)。
70eV)279(M+,94),217(27),190(29),189(bp),181(35)。
[0420] 将下文所描述的中间体用在上述实施例中。这些中间体可以使用下文所述的反应制备，但也可以使用其它的程序和反应，这也是本领域技术人员可以认识到的。
[0421] 制备1
[0422] 3-[(2,3-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0423] 在氮气下于-78℃向2,3-二氟溴苯(10.0g,51.8mmol)的干燥乙醚(120ml)溶液中逐滴加入正己基锂(2.3M己烷溶液，22.5ml,51.8mmol)。将混合物搅拌10分钟，其后逐滴加入3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(12.2g,49.2mmol)的干燥乙醚(30ml)溶液。将所得混合物在-78℃搅拌0.5h，然后升至环境温度并搅拌1h。添加水(50ml)并将混合物用乙酸乙酯(2x50ml)提取。合并的有机相用盐水洗涤、干燥(MgSO4)、过滤并蒸发至干。粗产物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯/异辛烷，0:1至1:1)以得到标题化合物(6.55g).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,2),244(36),225(29),153(99),57(bp)。
[0424] 制备2
[0425] 3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0426] 将3-[(2,3-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(5.54g,18.5mmol)溶解于二氯甲烷(100ml)并冷却至-78℃。用10分钟逐滴添加Deoxo-Fluor(50％,8.2ml,22.2mmol)，将所得混合物在-78℃搅拌0.5h，然后升至环境温度并搅拌3h。添加水(50ml)并收集有机相。将水相用二氯甲烷(2x 50ml)提取，并将汇集的有机相干燥(MgSO4)、过滤并蒸发。粗产物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯/异辛烷，0:1至1:2)以得到标题化合物(2.8g,9.2mmol).MS m/z(相对强度,70eV)301(M+,2),246(62),153(66),145(34),57(bp)。
[0427] 制备3
[0428] (-)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0429] 将3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.8g,9.3mmol)的对映异构体通过HPLC在Kromasil 10-Cellucoat(庚烷/2-丙醇/二乙胺，98:2:0.1)上分离。(-)-对映异构体(1.0g,3.3mmol).[α]D＝-14.6°(甲醇)。
[0430] 制备4
[0431] (+)-3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0432] 将3-[(2,3-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.8g,9.3mmol)的对映异构体通过HPLC在Kromasil 10-Cellucoat(庚烷/2-丙醇/二乙胺,98:2:0.1)。(+)-对映异构体(1.3g,4.3mmol).[α]D＝+29.6°(甲醇)。
[0433] 制备5
[0434] 3-[(3,5-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0435] 在氮气下向3,5-二氟溴苯(2.0g,10.3mmol)的干燥四氢呋喃(50ml)溶液中添加Mg(0.26g,10.8mmol)和一粒I2，并将混合物温和加热直至开始放热反应。将混合物搅拌2h，其后逐滴添加3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.8g,10.3mmol)的干燥乙醚(20ml)溶液。将所得混合物搅拌0.5h，添加饱和氯化铵水溶液(50ml)并收集有机相。用乙酸乙酯(2x50ml)提取水相，并将合并的有机相用盐水洗涤、干燥(MgSO4)、过滤并蒸发至干。粗产物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯/异辛烷，0:1至1:1)以得到标题化合物(1.92g,
6.42mmol).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,2),244(34),153(54),127(23),57(bp)。
6.42mmol).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,2),244(34),153(54),127(23),57(bp)。
[0436] 制备6
[0437] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0438] 将3-[(3,5-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.92g,6.42mmol)溶解于二氯甲烷(90ml)并冷却至0℃。将溶解于二氯甲烷(10ml)的二乙基氨基三氟化硫(1.72ml,13.02mmol)在10分钟内逐滴添加，并将所得混合物在0℃搅拌0.5h，然后升至环境温度并搅拌0.5h。添加水(50ml)并收集有机相。将水相用二氯甲烷(2x 50ml)提取，并将汇集的有机相干燥(MgSO4)、过滤并蒸发。粗产物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯/异辛烷，0:1至1:3以得到标题化合物(1.04g,3.45mmol).MS m/z(相对强度,70eV)301(M+,1),246(56),165(31),153(40),57(bp)。
[0439] 制备7
[0440] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯,E1
[0441] 将3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.04g,3.45mmol)的对映异构体通过HPLC在Kromasil 10-Cellucoat(庚烷/2-丙醇/二乙胺,98:2:0.1)上分离。
[0442] 制备8
[0443] 3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯,E2
[0444] 将3-[(3,5-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.04g,3.45mmol)的对映异构体通过HPLC在Kromasil 10-Cellucoat(庚烷/2-丙醇/二乙胺,98:2:0.1)上分离。
[0445] 制备9
[0446] 3-[(3,4-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0447] 在氮气下向3,4-二氟溴苯(4.0g,20.7mmol)的干燥乙醚(50ml)溶液中添加Mg(0.50g,20.6mmol)和一粒I2，并将混合物温和加热直至开始放热反应。将混合物搅拌15min，其后逐滴添加3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(3.8g,20.5mmol)的干燥乙醚(20ml)溶液。将所得混合物搅拌15min，添加水(50ml)并收集有机相。水相用甲基叔丁基醚(2x50ml)提取水相。合并的有机相用盐水洗涤、干燥(MgSO4)、过滤并蒸发至干。粗产物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯/异辛烷，0:1至1:1)以得到标题化合物(4.1g,
13.7mmol).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,1),244(24),225(27),153(72),57(bp)。
13.7mmol).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,1),244(24),225(27),153(72),57(bp)。
[0448] 制备10
[0449] 3-[(3,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0450] 将3-[(3,4-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(4.1g,13.7mmol)溶解于二氯甲烷(120ml)并冷却至0℃。将溶解于二氯甲烷(30ml)的二乙基氨基三氟化硫(3.35ml,27.4mmol)在10分钟内逐滴添加，，并将所得混合物在0℃搅拌1h，然后升至环境温度并搅拌0.5h。添加水(50ml)并收集有机相。将水相用二氯甲烷(2x 50ml)提取，并将汇集的有机相干燥(MgSO4)、过滤并蒸发。粗产物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯/异辛烷，0:1至1:3)以得到标题化合物(1.04g,3.45mmol).MS m/z(相对强度,70eV)301(M+,2),246(49),153(54),145(30),57(bp)。
[0451] 制备11
[0452] (2,5-二氟苯基)[1-(二苯基甲基)氮杂环丁烷-3-基]甲醇
[0453] 向异丙基氯化镁氯化锂复合物的四氢呋喃(1.3M,12.5ml,16.3mmol)溶液中添加溶解于干燥四氢呋喃(5ml)的1-溴-2,5-二氟苯(3g,15.5mmol)，并将混合物在氮气下于环境温度搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至-10℃并以一份添加溶解于干燥四氢呋喃(5ml)的1-(二苯基甲基)氮杂环丁烷-3-甲醛(4.1g,16.3mmol)，将温度升至0℃并将混合物搅拌20min然后升至环境温度并额外搅拌30min。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯提取。汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4、过滤并蒸发至干。粗产物(4.76g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,70:30)以得到标题化合物(1.56g,
4.27mmol).MS m/z(相对强度,70eV)365(M+,15),288(72),167(bp),165(34),152(20)。
4.27mmol).MS m/z(相对强度,70eV)365(M+,15),288(72),167(bp),165(34),152(20)。
[0454] 制备12
[0455] 3-[(2,5-二氟苯基)(氟)甲基]-1-(二苯基甲基)氮杂环丁烷
[0456] 在氮气下将(2,5-二氟苯基)[1-(二苯基甲基)氮杂环丁烷-3-基]甲醇(1.55g,4.24mmol)溶解于干燥二氯甲烷(30ml)并冷却至-78℃。将二乙基氨基三氟化硫(DAST,
1.04ml,8.48mmol)以一份添加，并将混合物搅拌10min然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.66g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,80:20)以得到标题化合物(1.22g,3.31mmol).MS m/z(相对强度,
70eV)367(M+,21),291(20),290(bp),167(84),165(34)。
1.04ml,8.48mmol)以一份添加，并将混合物搅拌10min然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.66g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,80:20)以得到标题化合物(1.22g,3.31mmol).MS m/z(相对强度,
70eV)367(M+,21),291(20),290(bp),167(84),165(34)。
[0457] 制备13
[0458] 3-[(2,4-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0459] 向异丙基氯化镁氯化锂复合物的四氢呋喃(1.3M,8.4ml,10.9mmol)溶液中添加溶解于干燥四氢呋喃(5ml)的1-溴-2,4-二氟苯(2.0g,10.4mmol)，并将混合物在氮气下于环境温度搅拌1小时。将反应混合物冷却至-10℃并以一份添加溶解于干燥四氢呋喃(5ml)的3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.17g,11.7mmol)，将温度升至0℃并搅拌20min，然后升至环境温度并额外搅拌30min。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯提取。
汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。粗产物(2.27g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,50:50)以得到标题化合物(0.93g,3.11mmol).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,2),244(17),225(36),153(97),57(bp)。
汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至干。粗产物(2.27g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(乙酸乙酯:甲醇,50:50)以得到标题化合物(0.93g,3.11mmol).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,2),244(17),225(36),153(97),57(bp)。
[0460] 制备14
[0461] 3-[(2,4-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0462] 在氮气下将3-[(2,4-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.92g,3.09mmol)溶解于干燥四氢呋喃(5ml)并冷却至0℃。以一份添加Deoxo-Fluor(50％四氢呋喃溶液,1.59ml,3.7mmol)，将混合物搅拌1小时，然后升至环境温度并额外搅拌2h。将反应混合物冷却至0℃并逐滴添加水以淬灭反应混合物。将最终水溶液用乙酸乙酯提取。汇集的有机相用盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯1:0至9:1)以得到标题化合物(0.54g,1.8mmol).MS m/z(相对强度,70eV)301(M+,2),246(47),153(73),145(33),57(bp)。
[0463] 制备15
[0464] 3-[(2,6-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0465] 向异丙基氯化镁氯化锂复合物的四氢呋喃(1.3M,6.3ml,8.16mmol)溶液中添加溶解于干燥四氢呋喃(3ml)的1-溴-2,6-二氟苯(1.5g,7.77mmol)，并将混合物在氮气下于环境温度搅拌1小时。将反应混合物冷却至-10℃并以一份添加溶解于干燥四氢呋喃(5ml)的3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.5g,8.16mmol)，将温度升至0℃并搅拌20min，然后升至环境温度并额外搅拌30min。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯提取。
汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4、过滤并蒸发至干。粗产物(2.47g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯100:0至65:35)以得到标题化合物(2.05g,
6.85mmol).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,2),225(37),154(21),153(bp),57(76)。
汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4、过滤并蒸发至干。粗产物(2.47g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯100:0至65:35)以得到标题化合物(2.05g,
6.85mmol).MS m/z(相对强度,70eV)299(M+,2),225(37),154(21),153(bp),57(76)。
[0466] 制备16
[0467] 3-[(2,6-二氟苯基)(氟)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0468] 在氮气下将3-[(2,6-二氟苯基)(羟基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.0g,6.81mmol)溶解于干燥二氯甲烷(15ml)并冷却至-78℃。将二乙基氨基三氟化硫(DAST,
1.8ml,13.6mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。
将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.74g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(1.22g,4.03mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)301(M+,2),246(54),153(87),145(37),57(100)。
1.8ml,13.6mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。
将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.74g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(1.22g,4.03mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)301(M+,2),246(54),153(87),145(37),57(100)。
[0469] 制备17
[0470] 3-[羟基(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0471] 向异丙基氯化镁氯化锂复合物的四氢呋喃(1.3M,5.6ml,7.3mmol)溶液中添加溶解于干燥四氢呋喃(2ml)的1-溴-2,3,5-三氟苯(1.5g,6.97mmol)，并将混合物在氮气下于环境温度搅拌2.5小时。将反应混合物冷却至-10℃并以一份添加溶解于干燥四氢呋喃(3ml)的3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.4g,7.31mmol)，将温度升至0℃并搅拌20min，然后升至环境温度并额外搅拌30min。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯提取。汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4、过滤并蒸发至干。粗产物(2.56g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至80:20)以得到标题化合物(1.02g,3.2mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)317(M+,2),262(33),199(14),171(60),57(bp)。
[0472] 制备18
[0473] 3-[氟(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0474] 在氮气下将3-[羟基(2,3,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.53g,4.82mmol)溶解于干燥二氯甲烷(25ml)并冷却至-78℃。将二乙基氨基三氟化硫(DAST,
1.27ml,9.64mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.39g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(0.98g,3.06mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)319(M+,2),264(52),171(60),163(31),57(bp)。
1.27ml,9.64mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.39g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(0.98g,3.06mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)319(M+,2),264(52),171(60),163(31),57(bp)。
[0475] 制备19
[0476] 3-[羟基(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0477] 向异丙基氯化镁氯化锂复合物的四氢呋喃(1.3M,5.68ml,7.4mmol)溶液中添加溶解于干燥四氢呋喃(3ml)的1-溴-3,4,5-三氟苯(1.5g,7.04mmol)，并将混合物在氮气下于环境温度搅拌2.5小时。将反应混合物冷却至-10℃并以一份添加溶解于干燥四氢呋喃(3ml)的3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.41g,7.4mmol)，将温度升至0℃并搅拌20min，然后升至环境温度并额外搅拌30min。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯提取。汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4、过滤并蒸发至干。粗产物(2.41g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至65:35)以得到标题化合物(1.89g,5.95mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)317(M+,2),262(29),171(52),145(16),57(bp)。
[0478] 制备20
[0479] 3-[氟(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0480] 在氮气下将3-[羟基(3,4,5-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.59g,5.01mmol)溶解于干燥二氯甲烷(15ml)并冷却至-78℃。将二乙基氨基三氟化硫(DAST,
1.32ml,10.02mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.6g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(1.2g,3.77mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)319(M+,1),264(33),171(34),163(21),57(bp)。
1.32ml,10.02mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.6g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(1.2g,3.77mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)319(M+,1),264(33),171(34),163(21),57(bp)。
[0481] 制备21
[0482] 3-[羟基(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0483] 向异丙基氯化镁氯化锂复合物的四氢呋喃(1.3M,5.74ml,7.46mmol)溶液中添加溶解于干燥四氢呋喃(2ml)的1-溴-2,4,6-三氟苯(1.5g,7.10mmol)，并将混合物在氮气下于环境温度搅拌3小时。将反应混合物冷却至-10℃并以一份添加溶解于干燥四氢呋喃(5ml)的3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.38g,7.24mmol)，将温度升至0℃并搅拌20min，然后升至环境温度并额外搅拌30min。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯提取。汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4、过滤并蒸发至干。粗产物(1.6g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至75:25)以得到标题化合物(1.46g,4.6mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)317(M+,2),262(20),243(28),171(bp),57(90)。
[0484] 制备22
[0485] 3-[氟(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0486] 在氮气下将3-[羟基(2,4,6-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.45g,4.57mmol)溶解于干燥二氯甲烷(15ml)并冷却至-78℃。将二乙基氨基三氟化硫(DAST,
1.21ml,9.14mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.31g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(1.0g,3.13mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)319(M+,1),264(41),171(76),163(36),57(bp)。
1.21ml,9.14mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.31g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(1.0g,3.13mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)319(M+,1),264(41),171(76),163(36),57(bp)。
[0487] 制备23
[0488] 3-[羟基(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0489] 向异丙基氯化镁氯化锂复合物的四氢呋喃(1.3M,5.68ml,7.4mmol)溶液中添加溶解于干燥四氢呋喃(3ml)的1-溴-2,3,4-三氟苯(1.5g,7.04mmol)，并将混合物在氮气下于环境温度搅拌2.5小时。将反应混合物冷却至-10℃并以一份添加溶解于干燥四氢呋喃(3ml)的3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.41g,7.4mmol)，将温度升至0℃并搅拌20min，然后升至环境温度并额外搅拌30min。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯提取。汇集的有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4、过滤并蒸发至干。将粗产品进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至70:30)以得到标题化合物(2.0g,
6.3mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)317(M+,2),262(29),243(18),171(81),57(bp)。
6.3mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)317(M+,2),262(29),243(18),171(81),57(bp)。
[0490] 制备24
[0491] 3-[氟(2,3,4,-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0492] 在氮气下将3-[羟基(2,3,4-三氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.0g,6.3mmol)溶解于干燥二氯甲烷(25ml)并冷却至-78℃。将二乙基氨基三氟化硫(DAST,
1.66ml,12.6mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.55g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(1.2g,3.8mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)319(M+,2),264(45),171(55),163(27),57(bp)。
1.66ml,12.6mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(1.55g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(1.2g,3.8mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)319(M+,2),264(45),171(55),163(27),57(bp)。
[0493] 制备25
[0494] 3-[羟基(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0495] 在氮气气氛下将1-溴-2,3,5,6-四氟苯(1.59ml,12.71mmol)溶解于干燥乙醚(30ml)。然后添加镁(350mg,14.41mmol)和数颗I2。添加1,2-二溴乙烷(0.011ml,0.13mmol)并将最终混合物在室温搅拌1小时。逐滴添加溶解于干燥乙醚(20ml)的3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.55g,13.34mmol)以及15ml干燥四氢呋喃，并将最终混合物在室温搅拌1小时。通过添加饱和氯化铵溶液将反应混合物淬灭并用乙酸乙酯提取。汇集的有机相用盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(4.58g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至70:30)以得到标题化合物(2.8g,8.35mmol).MS m/z(相对强度,70eV)335(M+,1),280(36),217(17),189(67),57(bp)。
[0496] 制备26
[0497] 3-[氟(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0498] 在氮气下将3-[羟基(2,3,5,6-四氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.79g,8.36mmol)溶解于干燥二氯甲烷(30ml)并冷却至-78℃。将二乙基氨基三氟化硫(DAST,2.2ml,16.6mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(2.72g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(2.28g,6.76mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)337(M+,1),282(44),189(35),181(23),57(bp)。
[0499] 制备27
[0500] 3-[羟基(2,3,4,5,6-五氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0501] 在氮气气氛下将1-溴-2,3,4,5,6-五氟苯(1.98ml,12.03mmol)溶解于干燥乙醚(30ml)。然后添加镁(321mg,13.23mmol)和数颗I2。添加1,2-二溴乙烷(0.0104ml,0.121mmol)并将最终混合物在室温搅拌1小时。逐滴添加溶解于干燥乙醚(20ml)的3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.41g,12.63mmol)，并将最终混合物在室温搅拌1小时。通过添加饱和氯化铵溶液将反应混合物淬灭并用乙酸乙酯提取。汇集的有机相用盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(4.12g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至65:35)以得到标题化合物(3.38g,9.58mmol)。MS m/z(相对强度,
70eV)353(M+,1),298(33),235(14),207(65),57(bp)。
70eV)353(M+,1),298(33),235(14),207(65),57(bp)。
[0502] 制备28
[0503] 3-[氟(2,3,4,5,6-五氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0504] 在氮气下将3-[羟基(2,3,4,5,6-五氟苯基)甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(3.38g,9.57mmol)溶解于干燥二氯甲烷(30ml)并冷却至-78℃。将二乙基氨基三氟化硫(DAST,2.52ml,19.14mmol)以一份添加并将混合物搅拌10min，然后升至环境温度并额外搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并用二氯甲烷提取。汇集的有机相用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)、过滤并最终蒸发至干。粗产物(3.48g)进一步通过快速柱色谱在硅胶上纯化(异辛烷:乙酸乙酯,100:0至85:15)以得到标题化合物(3.05g,8.58mmol)。MS m/z(相对强度,70eV)355(M+,1),300(37),207(33),199(24),57(bp)。
[0505] 以下测试用于评估本文公开的化合物。
[0506] 体内测试：行为
[0507] 利用与Omnitech Digiscan分析仪和配备有数字接口板(NB DIO-24,National Instruments,美国)的Apple Macintosh计算机相连的8个Digiscan活动监视器(RXYZM(16)TAO,Omnitech Electronics,Columbus,OH,美国)检测行为活动。每个活动监视器由配备有光束传感器的方形金属框(W x L＝40cm x 40cm)组成。在行为活动测定期间，将大鼠置于透明丙烯酸酯笼(WxLxH,40x40x30cm)中，后者置于所述活动监视器内。每个活动监视器配备有三排红外光束传感器，每排由16个传感器组成。两排沿笼地板的前端和侧面成90°角放置，而第三排则安置在地板之上10cm以测定垂直活动。光束传感器间隔开2.5cm。每个活动监视器装配在含有弱室光(weak house light)和风扇的相同声光衰减箱中。
[0508] 计算机软件使用面向对象编程(LabVIEWTM,National instruments,Austin,TX,美国)编写。
[0509] 代表着每个时间的动物的位置(重力的水平中心以及垂直活动)的来自每个活动监视器的行为数据以25Hz采样频率记录并使用定制编写的LABViewTM应用收集。将来自每个记录节段的数据存储并针对移动距离进行分析。每个行为记录节段从注射测试化合物后大约5分钟开始持续60分钟。
[0510] 在未经预先处理的Sprague-Dawley大鼠中测试了本文公开的化合物对自发运动活动的效果(基于给药后0至60分钟的累计移动距离)，剂量至多为33μmol/kg(s.c.)。
[0511] 未出现显著效果，这表明受测化合物对于感觉运动能力没有明显影响(表1)。
[0512] 表1：本文公开的化合物对于初次接受药物(drug-naive)的大鼠的影响
[0513]实施例 11μmol/kg 33μmol/kg
实施例1 61％ 91％
实施例2 152％ 159％*
实施例3 68％ 46％
实施例1 61％ 91％
实施例2 152％ 159％*
实施例3 68％ 46％
[0514] 将动物在施用药物后即刻置于运动计中并记录自发运动活动60分钟(计数/60min)。结果以相对对照的百分比平均值呈现。统计显著性利用学生T检验(双尾(2tailed))来评估。*表示p<0.05,n＝5。
[0515] 体内测试：神经化学
[0516] 在行为活动测试结束后，将大鼠去头并将其大脑快速取出并置于冰冷的培养皿上。将大脑解剖为右部和左部，将右部用HPLC进行神经化学物质分析，并对左部进行基因表达分析。将每只大鼠的边缘前脑、limbic纹状体、额前皮质、海马体和剩余半球部分解剖并冷冻。随后就每个大脑部分的单胺及其代谢物的含量进行分析。
[0517] 通过HPLC分离和电化学检测对脑组织匀浆中的单胺递质物质(NA(去甲肾上腺素)、DA(多巴胺)、5-HT(血清素))以及一种对应酸(DOPAC(3,4-二羟基苯乙酸))进行定量。
[0518] 分析方法基于针对胺和酸的两种色谱分离。两种色谱系统共享公共自动注射器，该公共自动注射器具有10-口阀和两个用于在两个系统同时注射的样品环。两个系统配备有反相柱(Luna C18(2),dp 3μm,50*2mm i.d.,Phenomenex)，且电化学检测在玻璃碳电极(MF-1000,Bioanalytical Systems,Inc.)上于两个电势完成。柱流出物经T-连接通入检测池或废物出口。这通过封闭废物或检测器出口的两个螺线管阀完成。通过避免色谱前端到达检测器，可以实现更好的检测条件。用于酸系统的水性流动相(0.4ml/min)含有柠檬酸14mM、柠檬酸钠10mM、甲醇15％(v/v)和EDTA 0.1mM。相对于Ag/AgCl参比电极的检测电势为
0.45V和0.60V。用于胺系统的水性离子配对流动相(0.5ml/min)含有柠檬酸5mM、柠檬酸钠
10mM、甲醇9％(v/v)、MeCN 10.5％v/v)、癸烷磺酸0.45mM和EDTA 0.1mM。相对于Ag/AgCl参比电极的检测电势为0.45V和0.60V。
0.45V和0.60V。用于胺系统的水性离子配对流动相(0.5ml/min)含有柠檬酸5mM、柠檬酸钠
10mM、甲醇9％(v/v)、MeCN 10.5％v/v)、癸烷磺酸0.45mM和EDTA 0.1mM。相对于Ag/AgCl参比电极的检测电势为0.45V和0.60V。
[0519] 本文公开的化合物显示增加DOPAC水平且对额前皮质有区域性偏好(表2)。
[0520] 表2：在对大鼠皮下施用(33μmol/kg)后对两个不同脑区中的DOPAC组织水平的影响
[0521]
[0522] 在将动物处死前65分钟分别在皮下(s.c.)施用实施例1、实施例3和实施例6的每种化合物。DOPAC结果以相对对照的百分比平均值±SEM(平均值的标准误差)显示。统计显著性利用学生T检验(双尾)相对对照来评估。*表示p<0.05,**p<0.01,***p<0.001,n＝5。
[0523] 体内测试：口服生物利用度
[0524] 在植入动脉和静脉导管后48小时进行实验。测试化合物以12.5μmol/kg口服或使用静脉导管以5μmol/kg静脉内施用，每组n＝3。然后在施用测试化合物后六小时内的0、3、9、27、60、120、180、240、300和360分钟取动脉血样品。对每只大鼠以口服施用后的AUC(曲线下面积)与静脉施用后获得的AUC之比计算口服生物利用度。参数AUC根据下述进行计算：
[0525] AUC：从时间零点至最后测试浓度(Clast)的血浆浓度-时间曲线下的面积，通过log/线性梯形法计算。
[0526] 借助液相色谱-质谱(LC-MS)(Hewlett-Packard 1100MSD Series)测定测试化合物的水平。LC-MS模块包括四元泵系统、真空除气器、恒温自动进样器、恒温柱区室、二极管阵列检测器和API-ES喷雾室。数据处理用HP ChemStation rev.A.06.03.系统进行。仪器设定：MSD模式：选定离子监测(SIM)MSD极性:Positiv气体温度:350℃干燥气:13,0l/min雾化气:50psig毛细管电压:5000V裂解器电压:70V
[0527] 分析柱:ACE EXCEL 3C18-PFP(3.0*100mm,3.0μm)，于20℃。流动相为乙酸(0.03％)(溶剂A)和乙腈(溶剂B)。流动相的流速为0.5ml/min。洗脱从5％溶剂B开始然后在7分钟线性增加至70％。
[0528] 提取程序：
[0529] 将100μl血浆样品与含内标的400μl CAN混合。在混合后，将样品在4℃，14000rpm离心10分钟。将上清液转移至其它试管并在氮气流下蒸发。然后将残余物溶于150μl 0.1％HAc、离心并转移至100μl玻璃管以用于LC-MS分析(注入10μl)。监测选择性离子(MH+)。通过向空白血浆样品中添加适当量的测试化合物而制备了1pmol至500pmol范围内的标准曲线。
[0530] 体外测试：在大鼠肝脏微粒体中的代谢稳定性
[0531] 汇集的雄性大鼠肝脏微粒体(RLM)(20mg/ml)购自BD Bioscience(#452501)。
[0532] 汇集的雄性犬肝脏微粒体(DLM)(20mg/ml)购自BD Bioscience(#452601)。
[0533] 汇集的人肝脏微粒体(HLM)(20mg/ml)购自BD Bioscience(#452161)。
[0534] 将1μL的0.2mM或1mM测试物质稀释在水中，并将10μl 20mg/mL大鼠肝脏微粒体与149μl 37℃缓冲液1混合，并通过添加40μL 4.1mg/mL NADPH开始反应。在加热块(LAB-LINE,MULTI-BLOK加热器，或lab4you,TS-100Thermo振摇器，700rpm)中于37℃温育15或60分钟后，通过添加100μl纯乙腈停止反应。然后通过于4℃在10.000g离心10分钟(Heraeus,Biofuge fresco)后排出颗粒以移除蛋白沉淀。测试化合物利用具有使用0.03％甲酸和乙腈作为流动相(梯度)的Zorbax SB-C18柱(2.1*150mm,5μm)或者使用0.03％乙酸和乙腈作为流动相(梯度)的ACE EXCEL 3C18-PFP(3.0*100mm,3.0μm)的HPLC-MS(Hewlett-Packard
1100MSD Series)进行分析。将15分钟周转(turnover)计算为15分钟后消除的测试化合物的分数，以0分钟水平的百分比表达，即100*[0min时测试化合物浓度-15min时浓度]/0min时浓度。与肝微粒体一起温育的规程参见Crespi CL和Stresser DM,J Pharm Tox Meth,
2000,44；325-31，和Renwick AB等，Xenobiotica,2001,31(4)；187-204。
1100MSD Series)进行分析。将15分钟周转(turnover)计算为15分钟后消除的测试化合物的分数，以0分钟水平的百分比表达，即100*[0min时测试化合物浓度-15min时浓度]/0min时浓度。与肝微粒体一起温育的规程参见Crespi CL和Stresser DM,J Pharm Tox Meth,
2000,44；325-31，和Renwick AB等，Xenobiotica,2001,31(4)；187-204。
[0535] 微透析
[0536] 在整个实验中使用体重为280g至320g的雄性Sprague-Dawley大鼠。实验前动物分组安置，每笼最多5只动物，可自由获取水和食物。在手术和用于实验之前将动物安置至少一周。
[0537] 将具有AN69聚丙烯腈/甲基磺酸钠共聚物(HOSPAL；o.d/i.d.310/220μm:透析膜(Gambro,Lund,瑞典)的I形探针(Santiago和Westerink,N-S Arch Pharmacol,1990,342；407-14)的改进版本(Waters等，J Neural Transm Gen Sect,1994,98(1)；39-55)用于微透析实验。在背侧纹状体中，使用透析膜暴露长度为3mm的探针，而在额前皮质中，对应长度为
2.5mm。在将大鼠安放在Kopf立体定位仪中的同时在吸入异氟醚麻醉下对其进行手术。根据Paxinos和Watson(New York,Academic Press,1986；图8和图14)。坐标相对于前卤计算；背侧纹状体AP+1.0,ML±2.6,DV 6.2；Pf皮质,AP+3.2,ML±1.2,DV-4,0 8°。将透析探针定位在于立体定位引导下的钻孔中，并用phosphatine牙科粘固剂(DAB Dental)粘固。
2.5mm。在将大鼠安放在Kopf立体定位仪中的同时在吸入异氟醚麻醉下对其进行手术。根据Paxinos和Watson(New York,Academic Press,1986；图8和图14)。坐标相对于前卤计算；背侧纹状体AP+1.0,ML±2.6,DV 6.2；Pf皮质,AP+3.2,ML±1.2,DV-4,0 8°。将透析探针定位在于立体定位引导下的钻孔中，并用phosphatine牙科粘固剂(DAB Dental)粘固。
[0538] 在透析实验前48h将大鼠单独安置于笼中，以使其从手术恢复并将在下述实验中药物与麻醉剂相互作用的风险最小化。在该时期，大鼠可自由获取食物和水。在实验当天，将大鼠经旋转环(swivel)连接至微灌注泵并置于其可在限定区域中自由移动的笼中。灌注介质为含有以下物质的林格氏溶液(以mmol/l计):NaCl；140,CaCl2；1.2,KCl；3.0,MgCl2；1.0(Moghaddam和Bunney.Neurochem.,1989,53；652-4)。将泵设定为灌注速度为2μl/min，且每20分钟收集40μl体积样品。
[0539] 在开始采样前将大鼠灌注至少40分钟。收集每20分钟的5个级分，且将后3个用于基线的建立。在收集基线级分后，开始对透析实验的药物激发。将测试化合物以5ml/kg体积通过注射(s.c.)施用，用0.9％NaCl(生理盐水)作为载剂。
[0540] 分析方法基于针对胺和酸的两种色谱分离。两种色谱系统共享公共自动注射器，该公共自动注射器具有10-口阀和两个用于在两个系统同时注射的样品环。
[0541] 通过柱切换配置下的反向分离，酸通过反向色谱进行分离，同时胺通过反向离子配对色谱进行分离。使用三个长度不同的分离柱(Luna C18(2),dp 3μm,2mm i.d.,Phenomenex)。电化学检测在玻璃碳电极(MF-1000,Bioanalytical Systems,Inc.)上完成。
[0542] 用于酸系统的水性流动相(0.6ml/min)含有柠檬酸40mM、磷酸氢二钾10mM、甲醇8-11％(v/v)和EDTA 0.1mM。柱长度为30mm且相对于Ag/AgCl参比电极的检测电势为0.74V。
[0543] 用于胺系统的水性离子配对流动相(0.4ml/min)含有柠檬酸5mM、柠檬酸钠10mM、丙酮9％(v/v)、四氢呋喃3％(v/v)、十二烷磺酸0.025mM和EDTA 0.1mM。柱长度为50mm且前序柱为20mm。相对于Ag/AgCl参比电极的检测电势为0.45V和0.65V。用于偶联反向分离的流动相与离子配对流动相相同，不同之处在于未添加十二烷磺酸。
[0544] 在实验后，将大鼠从灌注泵脱离，用兽用戊巴比妥致死并去头。将大鼠大脑快速取出并在-20℃储存约30分钟，其后进行后续探针定位检测。瑞典Gothenburg的动物伦理委员会批准了在这些实验中应用的程序。
[0545] 数据分析：仅将来自具有正确定位的透析探针(由对脑组织的尸检目视检查验证)的大鼠的结果包括在统计分析中。对于每个分析物和区域的给药前(pre-drug)基线值通过对在施用测试化合物前即刻收集的三个连续级分测定的水平进行平均来计算。然后将在给药后每个时间点的单胺透析物含量计算为基线水平的百分比。其后将来自所有大鼠的数据针对每个时间点进行平均。在本文呈现的表格中，显示出在给药后观察到的最大增量(即，给药前基线的平均百分比的最大值)。表中也给出了用于针对每个分析物和区域计算平均百分比的大鼠数目。
[0546] 利用体内脑微透析，本文公开的化合物据显示增加多巴胺和去甲肾上腺素的胞外水平，且具有对额前皮质(FC)相对纹状体(Stri)的区域偏好。在某些情况下，血清素也跨脑区增加(表3)。
[0547] 表3：在16.7*和50μmol/kg s.c.相对于基线值的最大效应(相对对照的百分比±[0548]
[0549] SEM)
[0550]
[0551] an＝1,bn＝2,cn＝3,dn＝4,en＝7；**nd＝无数据
[0552] m-RNA分析
[0553] 在注射药物后60分钟通过去头将动物杀死，并将大脑解剖为4个不同区域：边缘系统(含有伏隔核、嗅结节的大部分、腹侧苍白球)、纹状体、额前皮质、海马体和剩余皮质。
[0554] 通过异硫氰酸胍法制备总RNA(Chomczynski P和Sacchi N,Anal Biochem,1987,162(1)；156-9)。将RNA颗粒溶解于无RNA酶的水中并在-80℃储存。样品浓度通过NanoDrop ND1000(Saveen Werner)以光谱方式确定。r-RNA品质指标数和完整性数用Experion(Bio-rad)测定。
[0555] 通过使用SuperScript III试剂盒(Invitrogen)进行两步逆转录。将1μg总RNA用5μl 2XRT Reaction Mix,1μl RT Enzyme Mix(用经DEPC处理的水将总体积调节至10μl)逆转录。添加1U大肠杆菌RNA酶H。将c-DNA稀释40倍并于-20℃储存。
[0556] 在三重PCR反应中将三个序列(一个关注的基因和两个参照基因)一起扩增。对于实时PCR测定：在含有10μl PerfeCta Multiplex qPCR Supermix(Quanta,VWR)、3.5μl无RNA酶水、0.15μM的每种引物和0.1μM的每种探针的20μl反应混合物中扩增5μl c-DNA反应。实时PCR在CFX96(Bio-rad)上利用以下设定对所有基因进行测定：在95℃3分钟预温育，其后进行在95℃变性15s、退火并在60℃延伸1分钟的40次循环。
[0557] 参照基因为HPRT和亲环蛋白。
[0558] 本文公开的化合物显示增加Arc mRNA水平，且对额前皮质具有区域性偏好(表3)。
[0559] 表4：在对大鼠皮下施用(33μmol/kg)后对两个不同脑区中的Arc组织水平的效果[0560]
[0561] 在将动物处死前65分钟分别皮下(s.c.)施用实施例1和实施例3的化合物。结果以相对对照的百分比平均值±SEM表示。统计显著性利用学生t检验(双尾)相对于对照进行评估。*表示p<0.05,**p<0.01,n＝5。
[0563] 用于测定arc的引物和探针序列如下:
[0564] 活性调节基因(Arc)(登录号U19866)
[0565] 正义:5’-GGA GTT CAA GAA GGA GTT TC-3’(SEQ ID NO:1)
[0566] 反义5’-CCA CAT ACA GTG TCT GGT A-3’(SEQ ID NO:2)
[0567] 探针:CCG CTT ACG CCA GAG GAA CT(SEQ ID NO:3)
[0568] 染料:5'FAM淬灭剂:3'BHQ1
[0569] 产物尺寸:149
[0570] 次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)(登录号AF001282)
[0571] 正义:5’-AGG GAT TTG AAT CAT GTT TG-3’(SEQ ID NO:4)
[0572] 反义5’-CTG CTA GTT CTT TAC TGG C-3’(SEQ ID NO:5)
[0573] 探针:TGT AGA TTC AAC TTG CCG CTG TC(SEQ ID NO:6)
[0574] 染料:5'HEX淬灭剂:3'BHQ1
[0575] 产物尺寸:121
[0576] 亲环蛋白A(环式)(登录号M19533)
[0577] 正义：5’-CTG GAC CAA ACA CAA ATG-3’(SEQ ID NO:7)
[0578] 反义5’-ATG CCT TCT TTC ACC TTC-3’(SEQ ID NO:8)
[0579] 探针：TTG CCA TCC AGC CAC TCA GT(SEQ ID NO:9)
[0580] 染料:5'德克萨斯红淬灭剂:3'BHQ2
[0581] 产物尺寸:100
[0582] 用于测定bdnf、cfos、gad、glud、penk的引物和探针序列如下:
[0583] 脑源性神经营养因子(bdnf)(登录号NM_012513)
[0584] 正义：5’-AAA TTA CCT GGA TGC CGC AAA C-3’(SEQ ID NO:10)
[0585] 反义5’-TGT GAC CCA CTC GCT AAT ACT G-3’(SEQ ID NO:11)
[0586] 探针：CAC ACA CGC TCA GCT CCC CAC GG(SEQ ID NO:12)
[0587] 染料：5'FAM淬灭剂：3'BHQ1
[0588] 产物尺寸：106
[0589] 褐鼠原癌基因(c-fos)(登录号DQ089699)
[0590] 正义：5’-CAG AGC ATC GGC AGA AGG-3’(ref N Zoric)(SEQ ID NO:13)[0591] 反义5’-AGT TGA TCT GTC TCC GCT TGG-3’(SEQ ID NO:14)
[0592] 探针：TCT GTC AGC TCC CTC CTC CGA TTC CG(SEQ ID NO:15)
[0593] 染料：5'FAM淬灭剂：3'BHQ1
[0594] 产物尺寸：155
[0595] 谷氨酸脱羧酶(GAD 67)(登录号34445)
[0596] 正义：5’-CTG TTT ATG GAG CGT TTG ATC C-3’(SEQ ID NO:16)
[0597] 反义:5’-GAC TGA GAC TGA CCT TTC TAT G-3’(SEQ ID NO:17)
[0598] 探针：GAC TGA ATT GGC CCT TTC TAT G(SEQ ID NO:18)
[0599] 染料：5'FAM淬灭剂：3'BHQ1
[0600] 产物尺寸：153
[0601] 谷氨酸盐脱氢酶(glud)(登录号NM_012570)
[0602] 正义：5’-AGC CTC TCC TTC CCC ATC C-3’(SEQ ID NO:19)
[0603] 反义5’-CGC CTT CAC CTC ATC CAC AC-3’(SEQ ID NO:20)
[0604] 探针：AGC ACA GCC AGC ACC GCA CGC(SEQ ID NO:21)
[0605] 染料：5'FAM淬灭剂：3'BHQ1
[0606] 产物尺寸：141
[0607] 前脑啡肽原(penk)(登录号NM_017139.1)
[0608] 正义：5’-CAT GTG CTG CTT GTG CTG T-3’(SEQ ID NO:22)
[0609] 反义5’-CAG TTG GGT TCA CGG GTT T-3’(SEQ ID NO:23)
[0610] 探针：TGC CCT CGT GGT CTG GAT AAC TGC(SEQ ID NO:24)
[0611] 染料：5'FAM淬灭剂：3'BHQ1
[0612] 产物尺寸：228
[0613] 次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)(登录号AF001282)
[0614] 正义：5’-GGC CAG ACT TTG TTG GAT TTG-3’(SEQ ID NO:25)
[0615] 反义5’-CCG CTG TCT TTT AGG CTT TG-3’(SEQ ID NO:26)
[0616] 探针：TTT CCA CTT TCG CTG ATG ACA CAA ACA T(SEQ ID NO:27)
[0617] 染料：5'HEX淬灭剂：3'BHQ1
[0618] 产物尺寸：144
[0619] 亲环蛋白A(cyclo)(登录号M19533)
[0620] 正义：5’-GTC TCT TTT CGC CGC TTG CT-3’(SEQ ID NO:28)
[0621] 反义5’-TCT GCT GTC TTT GGA ACT TTG TCT G-3’(SEQ ID NO:29)
[0622] 探针：ATG GTC AAC CCC ACC GTG TTC TTC GAC A(SEQ ID NO:30)
[0623] 染料：5'德克萨斯红淬灭剂：3'BHQ2
[0624] 产物尺寸：127
[0625] 正确的PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳(2％)确认。PCR产物用来自Qiagen(Valencia,CA,美国)的PCR纯化试剂盒纯化。所有基因在德国MWG测序。所关注的基因的量采用两个参照基因HPRT和亲环蛋白A利用公式delta-delta CT归一化。
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