用于治疗呼吸病的二苯甲基衍生物
阅读：888发布：2021-02-03
专利汇可以提供用于治疗呼吸病的二苯甲基衍生物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及同时为 磷酸 二酯酶4(PDE4) 抑制剂 和毒蕈 碱 M3受体拮抗剂的具有二苯甲基结构式(I)的新化合物、制备这样的化合物的方法、包含它们的组合物及其 治疗 用途 。，下面是用于治疗呼吸病的二苯甲基衍生物专利的具体信息内容。
1.通式(I)的化合物、其吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物以及药学上可接受的盐或溶剂合物
其中
R1各自是氢或选自：卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)卤代烷基、羟基、-SO2NR6R7、-CN、-NR8SO2R9、-NR6R7、-CONR6R7和-NR8COR9，且其中所述(C1-C4)烷基任选地被选自(C3-C7)环烷基、羟基和-NR6R7的一个或多个基团取代，且其中所述(C1-C4)烷氧基任选地被一个或多个卤素或基团(C3-C7)环烷基取代，其中
R6是氢或(C1-C6)烷基；
R7是氢或(C1-C6)烷基；
R8是氢或(C1-C6)烷基；
R9是氢或(C1-C6)烷基；
n是1-3的整数；
R2各自是氢或选自：卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)卤代烷基、羟基、-SO2NR10R11、-CN和-NR12SO2R13，且其中所述(C1-C4)烷基和所述(C1-C4)烷氧基任选地被一个基团(C3-C7)环烷基取代，其中
R10是氢或(C1-C6)烷基；
R11是氢或(C1-C6)烷基；
R12是氢或(C1-C6)烷基；
R13是氢或(C1-C6)烷基；
m是1-3的整数；
R3和R4相同或不同且独立地选自：
H；
-(C3-C7)环烷基羰基；
(C1-C6)烷基，其任选地被一个或多个选自(C3-C7)环烷基或(C5-C7)环烯基的取代基取代；
(C1-C6)卤代烷基；
(C3-C7)环烷基；
(C5-C7)环烯基；
(C2-C6)烯基；和
(C2-C6)炔基；
或R3和R4与居间连接的原子一起形成式(r)的2,2-二氟-1,3-二氧戊环环，其与带有基团–OR3和–OR4的苯基部分稠合，其中星号表示与该苯环共有的碳原子：
R5各自选自：CN、NO2、CF3和卤原子；
k为0或1－3的整数；
L1选自：
价键；
-(CH2)p-；
[3]-(CH2)p-O-[4]；
[3]-(CH2)p-NR10-(CH2)t-[4]；
[3]-(CH2)p-OC(O)-[4]；
[3]-(CH2)p-NR10C(O)-[4]；
[3]-(CH2)p-NR10S(O2)-[4]；和
[3]-(CH2)p-S(O2)-N(R10)-[4]，
其中[3]和[4]分别表示基团L1连接至羰基基团和环W的点，且其中
R10如上所述；
p为1－4的整数；且
t为1－4的整数；
W是选自亚芳基、(C5-C6)亚杂芳基和饱和单环(C3-C7)亚杂环烷基的二价基团；
L2是价键或选自-C(O)-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-和-(CH2)q-的基团，其中q是1或2；
L3不存在或选自邻-、间-、对-亚苯基和二价(C5-C6)亚杂芳基；
L4是选自-(CH2)r-、[1]-(CH2)r-O-[2]、[1]-OC(O)-[2]和[1]-C(O)O-[2]的基团，其中r是1或2，且[1]和[2]分别表示基团L4连接至基团L2和所述苯环的点；
Z选自NH、CH2和O；
A是包含氮的基团，其可以选自：
-基团(a)，其为–(CH2)s-NR16R17，其中s为1－4的整数，且R16和R17独立地是氢或(C1-C4)烷基；和
-基团(b)，其为饱和单环、双环或三环杂环环系，它们任选地被一个或两个基团R18取代，所述基团R18在每次出现时独立地选自(C1-C4)烷基和苄基。
2.权利要求1的由式(IB)表示的化合物、其吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物以及药学上可接受的盐和溶剂合物，
其中R1、R2、R3、R4、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n和Z如上述所定义。
3.根据权利要求1或2的由式(IA)表示的化合物、其氘代衍生物以及药学上可接受的盐或溶剂合物，
其中R1、R2、R3、R4、R5、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n、k和Z如上述所定义。
4.根据权利要求1-3任一项的化合物、其吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物以及药学上可接受的盐或溶剂合物，其中
R4选自(C1-C6)卤代烷基和(C1-C6)烷基,
R3选自(C3-C7)环烷基和(C1-C6)烷基，其任选地被(C3-C7)环烷基取代，且
R1、R2、R5、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n、k和Z如上述所定义。
5.根据权利要求1－4任一项的由式(ID)表示的化合物、其吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物以及药学上可接受的盐或溶剂合物，
其中R1、R2、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n和Z如上述所定义。
6.根据权利要求1－5任一项的由式(I)’表示的化合物、其吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物以及药学上可接受的盐或溶剂合物，其中碳(1)的绝对构型如下所示：
其中R1、R2、R3、R4、R5、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n、k和Z如上述所定义。
7.权利要求1的化合物，选自：
(2S)-1-[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
1-[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-3-[3-[3-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-
1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-3-[3-[3-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-
1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-3-[[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]甲基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-3-[[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氧基苯基]甲基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,
5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
3-甲氧基-5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
6-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]吡啶-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
1-甲基-5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]吡唑-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-乙氧基-苯基]乙基]酯；
5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1R)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
4-[[3-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[2-(3,
5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
3-[[3-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[2-(3,
5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
2-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
(2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-3-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-3-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-3-[1-甲基-5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]吡唑-3-羰基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
(2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基哌啶-4-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基哌啶-4-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
2-[4-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基哌嗪-1-基]乙酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
2-[1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-基]乙酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氨基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯基]氨基甲酰基]苯基]磺酰基哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
(2S)-1-[2-[4-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氧基苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酸[4-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]羰基苯基]甲酯；
5-[[4-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
5-[[4-[(R)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
2-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]噁唑-4-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
及其药学上可接受的盐和溶剂合物。
8.药物组合物，包含如权利要求1-7任一项中所定义的化合物，其与一种或多种药学上可接受的载体混合。
9.根据权利要求8的药物组合物，还包含另一种活性成分。
10.根据权利要求1-7任一项的化合物，用作药剂。
11.根据权利要求1-7任一项的化合物，用于预防和/或治疗特征在于气道阻塞的呼吸道疾病。
12.用于权利要求11中所定义的用途的化合物，其中所述呼吸道疾病选自哮喘和COPD。
13.吸入装置，包含如权利要求8或9中所定义的药物组合物。
14.药盒，包含如权利要求8或9中所定义的药物组合物和可以为单剂量或多剂量干粉吸入器、定量雾化吸入器或雾化器的装置。
用于治疗呼吸病的二苯甲基衍生物
发明领域
[0001] 本发明涉及为磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂和毒蕈碱M3受体拮抗剂的具有二苯甲基结构的新化合物。更具体地，本发明涉及如下所述的式(I)的化合物、制备这样的化合物的方法、包含它们的组合物及其治疗用途。
[0002] 发明背景
[0004] 由于该原因，支气管松弛和炎症应答抑制代表治疗COPD的机理性方法，其可改善例如呼吸困难、哮鸣、胸部紧迫感、咳嗽和粘液分泌这样的症状，改善健康状态并且减轻恶化。
[0005] 目前，针对COPD的药物疗法的选择分成2个一般类别：支气管扩张药(β2-肾上腺素受体激动剂、抗毒蕈碱药和甲基黄嘌呤类)和抗炎药(糖皮质类固醇和选择性磷酸二酯酶-4(PDE4)抑制剂)。
[0006] 支气管扩张药是用于症状缓解的最新主要治疗依据。
[0007] 作为抗胆碱能支气管扩张药，毒蕈碱M3拮抗剂的效能基于如下事实：COPD患者中气流变窄的主要可逆要素是在一些病理性情况中由支气管神经节后迷走神经传出释放至气道平滑肌的乙酰胆碱(ACh)增加。因此，拮抗毒蕈碱受体处的ACh的作用的化合物能够抵抗支气管收缩且由此改善这些患者的肺功能。
[0008] 毒蕈碱拮抗剂阻断ACh在毒蕈碱受体处的作用。目前，存在5种已知的毒蕈碱受体亚型(M1-M5)；人气道平滑肌包含M1、M2和M3受体。M1受体有利于通过副交感神经节的神经传递，且在人气道中的粘膜下腺上微弱地表达。M2受体位于平滑肌纤维上。一些研究已经启示介导例如β激动剂这样的化合物的腺苷酸环化酶活化导致的气道平滑肌松弛抑制的M2的微小作用。此外，在投射到气道平滑肌和产生粘液的细胞的神经节后副交感神经上发现了突触前M2受体。这些突触前M2自体受体提供负反馈机制，当受到刺激时，其抑制ACh进一步释放。已知突触后M3受体介导呼吸道中的平滑肌收缩和粘液分泌，使得它们成为COPD的症状缓解的主要目标。因此，在气道中，毒蕈碱拮抗剂的主要作用是支气管扩张和通过阻断ACh-诱导的在副交感神经系统中的作用减少粘液分泌。
[0009] 由于毒蕈碱受体的分布，所以结合呼吸道外部的毒蕈碱受体的全身可利用的活性剂存在产生不需要的副作用的可能性，例如心动过速、口腔干燥、尿潴留和便秘。然而，口腔干燥是最常见的全身抗胆碱能副作用，其与抗毒蕈碱拮抗剂的应用相关，这是全身阻断M1和M3受体的结果，最可能的严重全身作用是心动过速，这是因阻断心脏M2受体导致的。
[0010] 经批准用于治疗COPD的吸入抗胆碱能抗毒蕈碱药包括异丙托溴铵氧托溴铵 和噻托溴铵 异丙托铵和氧托品是短效活性剂。相反，
噻托溴铵是唯一目前销售用于COPD的长效抗毒蕈碱剂(LAMA)，经证实其适合于每日一次作为干粉施用。几种其它较新的LAMAs新近注册用于治疗COPD，包括阿地溴铵和格隆溴铵或目前处于III期研发中，包括芜地溴铵(umeclidinium)。
噻托溴铵是唯一目前销售用于COPD的长效抗毒蕈碱剂(LAMA)，经证实其适合于每日一次作为干粉施用。几种其它较新的LAMAs新近注册用于治疗COPD，包括阿地溴铵和格隆溴铵或目前处于III期研发中，包括芜地溴铵(umeclidinium)。
[0011] 尽管支气管扩张药可十分有效地改善症状，但是它们无法解决潜在的慢性炎症或气道结构的改变。
[0013] PDE4是在中性粒细胞和T细胞中表达的主要的PDE，这启示PDE4抑制剂有效地控制COPD中的炎症。抑制炎症细胞中的PDE4影响各种特异性应答，例如促炎介体包括细胞因子和活性氧的产生和/或释放，其中在模拟哮喘和COPD以及炎性肠病、特应性皮炎、银屑病和类风湿性关节炎的一些方面的动物模型中充分证明了效能。
[0014] 选择性PDE4抑制剂罗氟司特 是经批准的用于治疗与慢性支气管炎和恶化病史相关的COPD的磷酸二酯酶-4抑制剂。罗氟司特抑制小鼠中的COPD的吸烟模型中的肺部炎症和肺气肿。在COPD患者中，在4周内给予的口服罗氟司特显著地减少了痰中的中性粒细胞数量(达36％)和CXCL8浓度。在临床试验中，在12个月内给予的罗氟司特(500mg，每日1次)将COPD患者的肺功能改善至较小的程度，但在减轻恶化或改善生活质量方面几乎没有影响。更近来，已经证实罗氟司特在具有存在频繁恶化和粘液分泌过多的严重疾病的患者中显著地改善FEV 1(约50ml)和减轻恶化(约15％)。罗氟司特在添加到沙美特罗或噻托溴铵中时提供临床有益性，且由此可以用作具有严重疾病的患者中的额外治疗。
[0015] 然而，迄今为止PDE4抑制剂的临床应用因发生与机理相关的副作用而受阻，所述副作用包括头痛、恶心和呕吐，它们通常限制了最大耐受剂量。这一问题可以通过吸入递送和设计具有潜在的更有利治疗窗的化合物来克服。
[0016] 由于支气管松弛和炎症应答抑制代表治疗COPD的机理性方法，所以毒蕈碱M3拮抗作用与选择性PDE4抑制作用的组合可以产生一类新的药物，其在一种分子中合并了支气管扩张和抗炎特性，这在处置COPD中打开了新的视角。
[0017] 本发明通过提供本发明的化合物解决了上述需求。
[0018] 发明概述
[0019] 本发明涉及作为磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂和毒蕈碱M3受体拮抗剂起作用的化合物、制备所述化合物的方法、包含它们的组合物及其治疗用途。
[0020] 具体地，本发明涉及式(I)的化合物、其在吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物及其药学上可接受的盐或溶剂合物，
[0021]
[0022] 其中
[0023] R1各自是氢或选自：卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)卤代烷基、羟基、-SO2NR6R7、-CN、-NR8SO2R9、-NR6R7、-CONR6R7和-NR8COR9，且其中所述(C1-C4)烷基任选地被选自(C3-C7)环烷基、羟基和-NR6R7的一个或多个基团取代，且其中所述(C1-C4)烷氧基任选地被一个或多个卤素或基团(C3-C7)环烷基取代，其中，
[0024] R6是氢或(C1-C6)烷基；
[0025] R7是氢或(C1-C6)烷基；
[0026] R8是氢或(C1-C6)烷基；
[0027] R9是氢或(C1-C6)烷基；
[0028] n是1-3的整数；
[0029] R2各自是氢或选自：卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)卤代烷基、羟基、-SO2NR10R11、-CN和-NR12SO2R13，且其中所述(C1-C4)烷基和所述(C1-C4)烷氧基任选地被一个基团(C3-C7)环烷基取代，其中
[0030] R10是氢或(C1-C6)烷基；
[0031] R11是氢或(C1-C6)烷基；
[0032] R12是氢或(C1-C6)烷基；
[0033] R13是氢或(C1-C6)烷基；
[0034] m是1-3的整数；
[0035] R3和R4不同或相同且独立地选自：
[0036] H；
[0037] -(C3-C7)环烷基羰基；
[0038] (C1-C6)烷基，其任选地被一个或多个选自(C3-C7)环烷基或(C5-C7)环烯基的取代基取代；
[0039] (C1-C6)卤代烷基；
[0040] (C3-C7)环烷基；
[0041] (C5-C7)环烯基；
[0042] (C2-C6)烯基；和
[0043] (C2-C6)炔基；
[0045]
[0046] R5各自选自：CN、NO2、CF3和卤原子；
[0047] k为0或1－3的整数；
[0048] L1选自：
[0049] 价键；
[0050] -(CH2)p-；
[0051] [3]-(CH2)p-O-[4]；
[0052] [3]-(CH2)p-NR10-(CH2)t-[4]；
[0053] [3]-(CH2)p-OC(O)-[4]；
[0054] [3]-(CH2)p-NR10C(O)-[4]；
[0055] [3]-(CH2)p-NR10S(O2)-[4]；和
[0056] [3]-(CH2)p-S(O2)-N(R10)-[4]，
[0057] 其中[3]和[4]分别表示基团L1连接至羰基基团和环W的点，且其中
[0058] R10如上所述；
[0059] p为1－4的整数；且
[0060] t为1－4的整数；
[0061] W是选自亚芳基、(C5-C6)亚杂芳基和饱和单环(C3-C7)亚杂环烷基的二价基团；
[0062] L2是价键或选自-C(O)-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-和-(CH2)q-的基团，其中q是1或2；
[0063] L3不存在或选自邻-、间-、对-亚苯基和二价(C5-C6)亚杂芳基；
[0064] L4是选自-(CH2)r-、[1]-(CH2)r-O-[2]、[1]-OC(O)-[2]和[1]-C(O)O-[2]的基团，其中r是1或2，且[1]和[2]分别是基团L4连接至基团L2和苯环的点；
[0065] Z选自NH、CH2和O；
[0066] A是含氮的基团，其可以选自：
[0067] -基团(a)，其为–(CH2)s-NR16R17，其中s为1－4的整数，且R16和R17独立地是氢或(C1-C4)烷基；和
[0068] -基团(b)，其为饱和单环、双环或三环环系，它们任选地被一个或两个基团R18取代，所述基团R18在每次出现时独立地选自(C1-C4)烷基和苄基。
[0069] 本发明还包括式(I)的化合物的吡啶环上的相应N-氧化物，其表示为式(IA)[0070]
[0071] 其中R1、R2、R3、R4、R5、A、L1、W、L2、L3、L4,Z、m、n和k如上所述。
[0072] 本发明还包括式(I)的化合物的相应氘代衍生物，其中至少一个氢原子被相应的氘原子取代。
[0073] 本发明还包括其药学上可接受的盐和/或溶剂合物。
[0074] 术语“药学上可接受的盐”是指式(I)的化合物或其在吡啶环上的相应N-氧化物的衍生物，其中母体化合物适当地通过将任意的游离酸或碱性基团(如果存在的话)用通常预作为药学上可接受的任意碱或酸转化成相应的加成盐而被修饰。
[0077] 通过使作为碱起作用的主要化合物与无机酸或有机酸反应成盐得到的那些包含，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、甲磺酸盐、樟脑磺酸盐、草酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐和柠檬酸盐。
[0078] 有机化学领域技术人员可以理解，许多有机化合物可以与它们在其中反应或它们从其中沉淀或结晶的溶剂形成配合物。这些配合物称作“溶剂合物”。本发明化合物的药学上可接受的溶剂合物属于本发明的范围。
[0079] 本发明范围内还包括式(I)化合物的多晶型物和晶型、其吡啶环上的N-氧化物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
[0080] 在本发明任意方面中定义的下文式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)和(I)’的化合物、其相应的吡啶环上的N-氧化物、其对映体、其非对映异构体、其药学上可接受的盐和溶剂合物及其多晶型物或晶型(除外化学方法中所述的中间体化合物)称作“本发明的化合物”。
[0081] 本发明还包含制备本发明化合物的方法。
[0082] 本发明还提供单独的本发明化合物或本发明化合物与一种或多种药学上可接受的载体的组合的药物组合物。
[0083] 在另一个方面，本发明提供本发明化合物作为药剂的用途。
[0084] 在一个方面，本发明提供本发明化合物在制备药剂中的用途。
[0085] 特别地，本发明提供本发明化合物在预防和/或治疗任意疾病中的用途，其中抑制PDE4活性以及毒蕈碱M3受体拮抗作用是期望的。
[0086] 特别地，可以将本发明的化合物单独地施用或与其它活性成分组合施用，以预防和/或治疗特征在于气道阻塞的呼吸道疾病，例如哮喘和COPD。在一个实施方案中，可以为预防和/或治疗COPD施用本发明的化合物。
[0087] 在另一个方面，本发明提供本发明化合物在制备用于预防和/或治疗其中抑制PDE4活性以及毒蕈碱M3受体拮抗作用是期望的任意疾病的药剂中的用途。
[0088] 此外，本发明提供一种预防和/或治疗其中抑制PDE4活性以及毒蕈碱M3受体拮抗作用是期望的任意疾病的方法，所述方法包括给有此治疗需要的患者施用治疗有效量的本发明的化合物。
[0089] 本发明的另一个方面提供适合的吸入装置，其包含本发明化合物的药物组合物，所述装置可以相应地选自单剂量或多剂量干粉吸入器、加压定量吸入器或雾化器，特别是软雾雾化器(soft mist nebulizer)。
[0090] 本发明的另一个方面提供药盒，其包含单独的或与一种或多种活性成分的组合的本发明化合物的药物组合物和装置，所述装置可以是单剂量或多剂量干粉吸入器、定量雾化吸入器或雾化器。
[0091] 定义
[0092] 本文所用的术语“卤原子”包括氟、氯、溴和碘，优选氯。
[0093] 本文所用的术语“(C1-Cx)烷基”，其中x是大于1的整数，是指直链和支链烷基，其中组分碳原子的数目是在1至x的范围内。具体的烷基是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基和叔丁基。
[0094] 类似地，术语“(C1-Cx)亚烷基”是指二价(C1-Cx)烷基基团，其中(C1-Cx)烷基如上述所定义。
[0095] 术语“(C1-Cx)烷氧基”，其中x是大于1的整数，是指直链和支链烷氧基，其中组分碳原子的数目是在1至x的范围内。具体的烷氧基是甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基。
[0096] 表述“(C1-Cx)卤代烷基”是指上面定义的“(C1-Cx)烷基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个卤原子替代，所述卤原子可以彼此相同或不同。
[0097] 因此，所述(C1-C6)卤代烷基的实例可以包括卤代的烷基、多卤代的烷基和其中所有氢原子被卤原子替代的全卤代的烷基，例如三氟甲基或二氟甲基。
[0098] 术语“(C3-Cy)环烷基”，其中y是大于或等于3的整数，是指包含3至y个环碳原子的饱和环状烃基。实例包括：环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
[0099] 表述“(C3-Cy)环烷基羰基”是指(C3-Cy)环烷基CO-基团，其中基团“(C3-Cy)环烷基”具有上述定义的含义。
[0100] 术语“(C2-C6)烯基”是指具有一个或多个双键的、处于顺式或反式构型的、直链或支链、共轭的或不共轭的碳链，其中原子数是在2至6的范围内。
[0101] 术语“(C5-Cz)环烯基”，其中z是大于或等于5的整数，是指包含5至z个环碳原子和一个或多个双键的环状烃基。
[0102] 术语“(C2-C6)炔基”是指具有一个或多个三键的直链或支链碳链，其中原子数是在2至6的范围内。
[0103] 表述“亚芳基”表示具有6-10个环原子的二价单或双环环系，其中至少一个环是芳族的。
[0104] 表述“(C5-C6)亚杂芳基”是指具有5－6个环原子且其中至少一个环原子是杂原子(例如N、NH、S或O)的二价单环环系。
[0105] 适合的亚芳基或(C5-C6)亚杂芳基单环环系的非限制性实例包括，例如在任意适合位置上的亚苯基、噻吩二基、呋喃二基、吡咯二基、吡唑二基、咪唑二基、三唑二基、四唑二基、异噁唑二基、噁唑二基、异噻唑二基、噻唑二基、吡啶二基残基等。
[0106] 适合的亚芳基双环系统的非限制性实例包括在任意适合位置上的萘二基、联苯二基、四氢萘二基残基等。
[0107] 表述“(C3-Cy)亚杂环烷基”是指二价饱和单环(C3-Cy)环烷基基团，其中至少一个环碳原子被杂原子(例如N、NH、S或O)替代。(C3-Cy)亚杂环烷基的非限制性实例表示为：在任意适合位置上的氮杂环丁烷二基、吡咯烷二基、吡唑啉二基、哌嗪二基(piperazinedyl)、哌啶二基、噁唑烷二基、噻唑烷二基、吗啉二基、硫吗啉二基等。
[0108] 本文中使用的表述“杂环环系”是指任选取代的单环、双环或三环环系，其可以是饱和的、部分不饱和的或不饱和的，例如具有5－11个环原子的(C3-C7)杂环烷基或杂芳基，其中至少一个环原子是杂原子(例如N、S或O)。
[0109] “杂环环系”的非限制性实例表示为：吡咯烷基、咪唑烷基、哌嗪基、哌啶基、奎宁环基、8-氮杂双环[3.2.1]辛烷基或去羟基东莨菪碱(scopine)残基，它们均任选地在氮原子上被(C1-Cx)烷基或苄基取代。
[0110] 发明详述
[0111] 本发明涉及一类同时作为磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂和毒蕈碱M3受体拮抗剂起作用的化合物。
[0112] 本发明涉及式(I)的衍生物、其吡啶环上的N-氧化物、氘代衍生物以及药学上可接受的盐或溶剂合物，
[0113]
[0114] 其中R1、R2、R3、R4、R5、A、L1、W、L2、L3、L4、Z、m、n和k如上所述。
[0115] 本领域技术人员显而易见，式(I)的化合物至少包含一个立体中心，即表示为碳原子(1)，且由此作为光学立体异构体存在。
[0116] 本领域技术人员显而易见，本发明的化合物可以具有至少2个立体中心，由此它们可以相应地至少作为4种非对映异构体存在。如果本发明的化合物具有2个以上立体中心，则它们作为2n个非对映异构体存在(其中n这里是指立体中心的数目)。应理解所有这样的异构体及其任意比例的混合物均包括在本发明范围内。
[0117] 在一个优选的实施方案中，本发明涉及式(I)’的化合物，其为如上述所定义的式(I)的化合物，其中碳(1)的绝对构型如下所示：
[0118]
[0120] 在一个优选的实施方案中，对于式(I)的化合物，碳(1)上的绝对构型是(S)。
[0121] 在一个实施方案中，当A是如下所定义的式(i)的基团时，式(I)的化合物可以作为下文报道的至少4种非对映异构体对(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)存在，它们均包含在本发明范围内；每个非对映异构体(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)对由在鉴定为(2)的立体中心上相应的差向异构体混合物构成。
[0122]
[0123] 本领域技术人员显而易见，式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)的化合物还可以作为单一非对映异构体得到，其中将鉴定为(2)的碳原子上的立体中心定义为R或S。
[0124] 在一个实施方案中，式(Ia)的化合物提供为如上述所报道的或作为其单一非对映异构体提供。
[0125] 应当理解，上下文中对式(I)的化合物所述的所有优选的基团或实施方案可以彼此组合并且适用于式(IA)、(IB)、(IC)、(ID)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)和(I)’的化合物，同样可以做必要的修正。
[0126] 在一个优选的实施方案中，本发明提供式(IA)的化合物，其为式(I)的化合物的吡啶环上的N-氧化物、其氘代衍生物和药学上可接受的盐和溶剂合物：
[0127]
[0128] 其中R1、R2、R3、R4、R5、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n、k和Z如上述所定义。
[0129] 在一个优选的实施方案中，k是2且R5是卤原子。在另一个优选的实施方案中，R5是吡啶环的3和5位上的2个氯原子。
[0130] 在一个优选的实施方案中，R4选自(C1-C6)卤代烷基和(C1-C6)烷基，且R3选自(C3-C7)环烷基或(C1-C6)烷基，其任选地被(C3-C7)环烷基取代。
[0131] 在另一个优选的实施方案中，R3和R4与居间连接的原子一起形成与带有基团–OR3和–OR4的苯基部分稠合的式(r)的2,2-二氟-1,3-二氧戊环环，其中星号表示与这类苯环共有的碳原子：
[0132]
[0133] 在另一个优选的实施方案中，R4是(C1-C6)卤代烷基且R3是被(C3-C7)环烷基取代的(C1-C6)烷基。
[0134] 在另一个优选的实施方案中，R3是(C1-C6)烷基且R4是(C1-C6)烷基。
[0135] 优选的一组化合物是式(IB)的化合物，其中4-吡啶基环在3和5位上被2个氯原子取代，
[0136]
[0137] 其中R1、R2、R3、R4、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n和Z如上述对式(I)的化合物所定义；和相应的吡啶环上的N-氧化物、其氘代衍生物和药学上可接受的盐和溶剂合物。
[0138] 另一组优选的化合物如下式(IC)所示：
[0139]
[0140] 其中R1、R2、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n和Z如上述对式(I)的化合物所定义；及其相应的吡啶环上的N-氧化物或药学上可接受的盐。
[0141] 一组更优选的化合物如下式(ID)所示：
[0142]
[0143] 其中R1、R2、A、L1、W、L2、L3、L4、m、n和Z如上述对式(I)的化合物所定义；相应的吡啶环上的N-氧化物及其药学上可接受的盐和溶剂合物。
[0144] 在一个实施方案中，A是式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的基团表示的基团(b)：
[0145]
[0146] 其中
[0147] f＝1、2或3；
[0148] g＝1、2或3。
[0149] 在另一个实施方案中，A是由式(i)的基团表示的基团(b)：
[0150]
[0151] 根据一个优选的实施方案，本发明提供下文报道的化合物：
[0152] (2S)-1-[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0153] 1-[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0154] (2S)-3-[3-[3-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0155] (2S)-3-[3-[3-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0156] (2S)-3-[[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]甲基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0157] (2S)-3-[[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氧基苯基]甲基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0158] 4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0159] 3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0160] 3-甲氧基-5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0161] 6-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]吡啶-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0162] 1-甲基-5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]吡唑-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0163] 5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-[4-(二氟甲氧基)-3-乙氧基-苯基]乙基]酯；
[0164] 5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0165] 5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0166] 5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0167] 5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1R)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0168] 4-[[3-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0169] 3-[[3-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0170] 5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0171] 2-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]乙酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0172] 1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0173] 1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0174] (2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0175] (2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0176] (2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0177] (2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0178] 1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0179] 1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0180] (2S)-3-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0181] (2S)-3-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0182] (2S)-3-[1-甲基-5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]吡唑-3-羰基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0183] (2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0184] (2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0185] (2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0186] (2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0187] 1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0188] 1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0189] 1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0190] 1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0191] 1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基哌啶-4-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0192] 1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基哌啶-4-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0193] 2-[4-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基哌嗪-1-基]乙酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0194] 2-[1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-基]乙酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0195] (2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氨基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0196] (2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯基]氨基甲酰基]苯基]磺酰基哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0197] (2S)-1-[2-[4-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氧基苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯；
[0198] 3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酸[4-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]羰基苯基]甲酯；
[0199] 5-[[4-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0200] 5-[[4-[(R)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯；
[0201] 2-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]噁唑-4-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯。
[0202] 及其药学上可接受的盐和溶剂合物。
[0203] 可以根据下文实验部分、实施例1、5、6、7、19、21、23、29、32、45、46、47、48、50中所述的合成方法的适当调整制备本发明的化合物。
[0204] 可以用于制备本发明化合物且如下所述的方法不应当被视为是对可用于制备本发明化合物的合成方法的范围的限制。
[0205] 所述方法是特别有利的，因为它易于通过本领域技术人员已知的任何适当的变化形式的适当调整，以便得到任意的本发明期望的化合物。这类变化形式包含在本发明范围内。
[0206] 从所有上述描述中，本领域技术人员应当显而易见，任意所述的基团可以直接存在或以任何使得被保护的形式存在。
[0207] 具体地，存在于本发明化合物或其中间体上的可能产生不需要的副反应和副产物的官能团需要适当地被保护，然后进行烷基化、酰化、偶合、氧化或磺酰化。同样，随后对于那些相同的被保护的基团的脱保护可以在完成所述反应后进行。
[0208] 在本发明中，除非另有指示，否则术语“保护基”表示保护基团，其适合于保护所键合的官能团。典型地，保护基用于保护氨基、羟基或羧基官能团。适合的保护基由此可以包括，例如苄基、苄基氧基羰基、叔丁氧羰基、烷基或苄基酯类等，它们是本领域技术人员众所周知的[对于一般性的参考文献，参见T.W.Green；Protective Groups in Organic Synthesis(Wiley,N.Y.1999)]。
[0209] 同样，可以根据常用于有机合成化学的极为众所周知的方法选择性保护和脱保护任意的所述基团，例如，包括羰基、羟基或氨基基团。
[0210] 在一个实施方案中，用于制备式(I)的化合物或其实施方案的方法以中间体化合物的吡啶环上的N-氧化物为原料进行，由此能够制备吡啶环上的N-氧化物形式的式(I)的化合物或其实施方案。
[0211] 可以通过将任意的游离酸性或氨基基团转化成相应的药学上可接受的盐对式(I)的化合物或其吡啶环上的N-氧化物进行任选的成盐。也是在这种情况中，用于使本发明化合物任选成盐的操作条件属于本领域技术人员的一般知识范围。
[0212] 从所有上述描述中，本领域技术人员应当显而易见，用于制备本发明适合的化合物的上述方法、其任意的变化形式的综合可以进行便利地修改，以便例如通过选择适合的缩合剂、溶剂和保护基使反应条件适合于特定的需求，视具体情况而定。
[0213] 本发明也提供了与一种或多种药学上可接受的载体混合的本发明化合物的药物组合物，所述载体例如在Remington’s Pharmaceutical Sciences Handbook,XVII Ed.,Mack Pub.,N.Y.,U.S.A.中描述的那些。
[0214] 本发明的化合物的施用可以根据患者需要来进行，例如，口服施用、经鼻施用、胃肠外施用(皮下、静脉内、肌肉内、胸骨内和通过输注)、吸入施用、直肠施用、阴道施用、表面施用、局部施用、透皮施用和眼施用。可以将各种固体口服剂型用于施用本发明的化合物，包括例如片剂、囊形片、胶囊、囊片、颗粒、锭剂和散装粉末等固体形式。可以将本发明的化合物单独施用，或与本领域已知的各种药学上可接受的载体、稀释剂(例如蔗糖、甘露醇、乳糖、淀粉)和赋形剂组合施用，所述赋形剂包括、但不限于助悬剂、增溶剂、缓冲剂、粘合剂、崩解剂、防腐剂、着色剂、调味剂、润滑剂等。定时释放胶囊、片剂和凝胶剂对于本发明化合物的施用也是有利的。
[0215] 还可以将各种液体口服剂型用于施用本发明的化合物，包括水性和非水性溶液、乳剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。这些剂型还可以包含本领域已知的适宜的惰性稀释剂(如水)以及本领域已知的适宜的赋形剂(如防腐剂、润湿剂、甜味剂、调味剂)以及用于乳化和/或悬浮本发明的化合物的试剂。例如，可以以等渗无菌溶液的形式静脉内注射本发明的化合物。其它制剂也是可能的。
[0216] 通过将化合物与适合的赋形剂例如可可脂、水杨酸盐和聚乙二醇混合，可以制备用于本发明化合物的直肠施用的栓剂。
[0217] 用于阴道施用的制剂可以为乳膏剂、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾剂形式，其除了活性成分之外还包含如本领域已知这样的适合的载体。
[0218] 对于局部施用，药物组合物可以为适合施用至皮肤、眼、耳或鼻的乳膏剂、软膏剂、搽剂、洗剂、乳剂、混悬剂、凝胶、溶液、糊剂、粉剂、喷雾剂和滴剂的形式。局部施用还可以包括通过例如透皮贴剂方式进行的透皮施用。
[0219] 对于治疗呼吸道疾病，根据本发明的化合物优选地通过吸入来施用。
[0220] 可吸入的制剂包括可吸入的散剂、包含推进剂的定量气雾剂或不含推进剂的可吸入制剂，它们都可以通过适合的装置来递施用，所述适合的装置可以相应地选自干粉吸入器、加压定量吸入器或雾化器。
[0222] 可以将通常无毒且对本发明化合物是化学惰性的稀释剂或载体(例如乳糖)或适于改善可吸收分数(respirable fraction)的任意其它添加剂加入到粉末化的本发明的化合物中。
[0223] 包含推进气体(如氢氟烷烃)的吸入气雾剂可以包含溶液或分散形式的本发明的化合物。推进剂驱动的制剂还可以包含其它成分，例如共溶剂、稳定剂或任选的其它赋形剂。
[0224] 包含本发明化合物的不含推进剂的可吸入制剂可以是在水性、醇性或水醇性介质中的溶液或混悬剂形式，且它们可以通过从现有技术已知的喷射或超声雾化器或通过软薄雾雾化器例如 来递送。
[0225] 本发明的化合物可以作为唯一活性剂来施用，或与其它药物活性成分的组合产品(combination)来施用，所述其它药物活性成分包括目前用于治疗呼吸障碍的那些，例如，β2-激动剂、抗毒蕈碱药、皮质类固醇、丝裂原激活蛋白激酶类(P38MAP激酶)抑制剂、核因子κ-B激酶亚单位β(IKK2)抑制剂、人嗜中性细胞弹性蛋白酶(HNE)抑制剂、磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂、白三烯调节剂、非类固醇抗炎药(NSAIDs)和粘液调节剂。
[0226] 本发明还提供本发明化合物与β2-激动剂的组合，所述β2-激动剂选自卡莫特罗、维兰特罗(vilanterol)(GSK-642444)、茚达特罗、米维特罗、阿福特罗、福莫特罗、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、特布他林、AZD-3199、奥达特罗(BI-1744-CL)、abediterol(LAS-100977)、班布特罗、异丙肾上腺素、丙卡特罗、克仑特罗、瑞普特罗、非诺特罗和ASF-1020及其盐。
[0227] 本发明还提供本发明化合物与皮质类固醇的组合，所述皮质类固醇选自丙酸氟替卡松、糠酸氟替卡松、糠酸莫米松、二丙酸倍氯米松、环索奈德、布地奈德、GSK 685698、GSK 870086。
[0228] 本发明还提供本发明化合物与抗毒蕈碱剂的组合，所述抗毒蕈碱剂选自阿地溴铵、噻托溴铵、异丙托铵、曲司氯铵(trospium)、葡萄糖吡喀和氧托品盐。
[0229] 本发明还提供本发明化合物与PDE4抑制剂的组合，所述PDE4抑制剂选自AN-2728、AN-2898、CBS-3595、apremilast、ELB-353、KF-66490、K-34、LAS-37779、IBFB-211913、AWD-12-281、西潘茶碱、西洛司特、罗氟司特、BAY19-8004和SCH-351591、AN-6415、indus-82010、TPI-PD3、ELB-353、CC-11050、GSK-256066、奥米司特、OX-914、替托司特、MEM-1414和RPL-
554。
554。
[0230] 本发明还提供本发明化合物与P38MAP激酶抑制剂的组合，所述P38MAP激酶抑制剂选自塞马莫德、他美莫德、吡非尼酮、PH-797804、GSK-725、minokine和洛吡莫德及其盐。
[0231] 在一个优选的实施方案中，本发明提供本发明化合物与IKK2抑制剂的组合。
[0232] 本发明还提供本发明化合物与HNE抑制剂的组合，所述HNE抑制剂选自AAT、ADC-7828、Aeriva、TAPI、AE-3763、KRP-109、AX-9657、POL-6014、AER-002、AGTC-0106、respriva、AZD-9668、zemaira、AAT IV、PGX-100、弹力素、SPHD-400、α1抗胰蛋白酶C和吸入的α1抗胰蛋白酶。
[0233] 本发明还提供本发明化合物与白三烯调节剂的组合，所述白三烯调节剂选自孟鲁司特、扎鲁司特和普仑司特。
[0234] 本发明还提供本发明化合物与NSAID的组合，所述NSAID选自布洛芬和酮洛芬。
[0235] 本发明还提供本发明化合物与粘液调节剂的组合，所述粘液调节剂选自INS-37217、地夸磷索、西贝那德、CS-003、他奈坦、DNK-333、MSI-1956和吉非替尼。
[0237] 有利地，可以在例如0.001至1000mg/天、优选0.1至500mg/天的剂量，施用本发明的化合物。
[0238] 当通过吸入途径施用它们时，本发明的化合物的剂量有利地被包含在0.01至20mg/天之间，优选0.1至10mg/天之间。
[0239] 优选地，可以施用单独的或与其它活性成分的组合产品的本发明化合物，用于预防和/或治疗任意阻塞性呼吸疾病例如哮喘、慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病(COPD)。
[0240] 可以施用本发明的化合物用于预防和/或治疗其中需要抑制PDE4或拮抗M3的任何疾病。所述疾病包括：变态反应性疾病状态例如特应性皮炎、荨麻疹、变应性鼻炎、变应性结膜炎、春季结膜炎、嗜酸性粒细胞性肉芽肿、银屑病、炎症性关节炎、类风湿性关节炎、脓毒性休克、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、心肌和脑的再灌注损伤、慢性肾小球肾炎、内毒素性休克、囊性纤维化、动脉再狭窄、动脉粥样硬化、角化病、类风湿性脊柱炎、骨关节炎、热病、糖尿病、尘肺病、毒性和变应性接触性湿疹、特应性湿疹、脂溢性湿疹、单纯苔藓、晒伤、肛门与生殖器区域的瘙痒、斑秃、肥大性疤痕、盘状红斑狼疮、系统性红斑狼疮、毛囊和广泛区域的脓皮病、内源性和外源性的痤疮、红斑痤疮、贝切特病、类过敏性紫癜肾炎、炎性肠病、白血病、多发性硬化、胃肠道疾病、自身免疫疾病等。
[0241] 它们还包括神经病学和精神病学病症，例如阿尔茨海默氏病、多发性硬化、肌侧索硬化(amylolaterosclerosis，ALS)、多系统萎缩(MSA)、精神分裂症、帕金森病、亨廷顿病、皮克病、抑郁症、中风和脊髓损伤。
[0242] 现在将通过下述非限制性实施例进一步描述本发明。实施例
[0243] 缩写
[0244] DCC＝N,N'-二环己基碳二亚胺；HOBt＝羟基苯并三唑；HATU＝(二甲氨基)-N,N-二甲基(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)甲铵六氟磷酸盐；EDC＝1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐；DMAP＝4-二甲氨基吡啶；DMF＝二甲基甲酰胺；DMSO＝二甲亚砜；EtOAc＝乙酸乙酯；RT＝室温；THF＝四氢呋喃；DCM＝二氯甲烷；MeOH＝甲醇；EtOH＝乙醇；LHMDS＝双(三甲基甲硅烷基)氨基锂；m-CPBA＝间-氯过苯甲酸；TFA＝三氟乙酸；LC-MS＝液相色谱/质谱；HPLC＝高压液相色谱；MPLC＝中压液相色谱；SFC＝超临界流体色谱；NMR＝核磁共振
[0245] 一般实验细节
[0246] 分析方法
[0247] 液相色谱法-质谱法
[0248] 方法1
[0249] 使用Waters 2795 Alliance HT HPLC与Waters 2996二极管阵列检测器进行LC-MS，所述Waters 2996二极管阵列检测器偶联使用Phenomenex Luna C18(2)柱(5μm,100x 4.6mm+防护柱)的Micromass ZQ单个四极质谱仪，线性梯度为5-95％乙腈/水(每个流动相中包含0.1％甲酸)，3.5分钟内，保持在95％2.0分钟。
[0250] 方法2
[0251] 使用Waters 2795 Alliance HT HPLC与Waters 2996二极管阵列检测器进行LC-MS，所述Waters 2996二极管阵列检测器偶联使用Waters Xterra MS C18柱(5μm,100x 4.6mm+防护柱)的Micromass ZQ单个四极质谱仪，最初保持在5％乙腈/水(水流动相中包含
10mM碳酸氢铵)0.5分钟，然后在3.5分钟内按照5-95％的线性梯度，然后保持在95％1.5分钟。
10mM碳酸氢铵)0.5分钟，然后在3.5分钟内按照5-95％的线性梯度，然后保持在95％1.5分钟。
[0252] NMR
[0253] 使用在400MHz操作的Bruker仪器，采用在约室温下所述的溶剂进行1H核磁共振(NMR)光谱测定，另有描述的除外。在所有情况中，NMR数据与提出的结构一致。采用指定主要峰的常规缩写以百万分率给出特征性化学位移(δ)：例如s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；dd，双二重峰；dt,双三重峰；m＝多重峰，br＝宽峰。
[0254] 制备型反相HPLC条件
[0255] 通过反相HPLC，采用Waters Fractionlynx制备型HPLC系统(2525泵,2996/2998UV/VIS检测器,2767液体处理器)或等效的HPLC系统例如Gilson Trilution UV定向系统进行制备型HPLC纯化。Waters 2767液体处理器作为自动采样器和级分收集器起作用。
[0256] 用于化合物的制备型纯化的柱是Waters Sunfire OBD Phenomenex Luna Phenyl Hexyl或Waters Xbridge Phenyl 10μm 19×150mm或Waters CSH Phenyl Hexyl 19×150,5μm柱。
[0257] 基于乙腈和甲醇溶剂系统在酸性或碱性条件下选择适合的聚焦的梯度。
[0258] 在酸性/碱性条件下使用的调节剂分别是甲酸或三氟乙酸(0.1％V/V)和碳酸氢铵(10mM)。
[0259] 使用Waters Fractionlynx软件通过在210-400nm监测控制纯化并且在260nm触发阈值采集值，以及，当使用Fractionlynx时，在APi条件下观察到存在目标分子离子。通过LCMS(带有Waters SQD的Waters Acquity系统)分析采集的级分。
[0260] 化合物制备
[0261] 如果未描述原料的制备，则它们是商购的、文献中已知的或易于由本领域技术人员使用标准方法得到。如果描述按照与上述实施例或中间体“类似地”或“相似地”制备化合物，则本领域技术人员应当理解，对于每种特定的反应可以改变反应时间、试剂的当量数和温度，且有必要或期望使用不同的后处理或纯化技术。
[0262] 快速色谱法是指硅胶色谱法并且采用Isolera MPLC系统(由Biotage制造)；预填充的硅胶柱(由Biotage提供)；或采用常规的玻璃柱色谱法进行。
[0263] 在如下方法中，在每种原料后，可以提供化合物编号。提供它仅用于辅助普通化学技术人员。原料不必由所涉及的批号制备。
[0264] 下列实施例中所述的许多化合物由立体化学纯的原料制备，所述原料例如95％对映体过量(ee)。
[0265] 如果指示，则将实施例中的化合物的立体化学归为如下推定：在任意随后的反应条件的至始至终保持原料的拆分的立体中心上的绝对构型。
[0266] 中间体1/A(I-1/A)
[0267] (S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物
[0268]
[0269] 步骤1：(R,S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(I-1/Aa)的制备
[0270] 在氩气气氛中，将3,5-二氯-4-甲基吡啶(54g,331mmol)溶于干THF(480mL)，在-78℃在干冰/丙酮浴中冷却。滴加LHMDS 1N THF溶液(331mL,331mmol)，保持温度在-78°。将该混合物在-78°搅拌1h。此后，滴加3,4-二甲氧基苯甲醛(50g,301mmol)在无水THF(120mL)中的溶液，保持温度在-78℃。当添加完成时，在RT温热该混合物。
[0271] 将该反应体系倾入冰和水(1L)，将该混合物搅拌至形成大量沉淀。过滤固体，溶于乙酸乙酯(500mL)，用Na2SO4干燥，真空蒸发溶剂。使粗产物在CHCl3/己烷中结晶。过滤沉淀，用己烷洗涤，在40℃真空干燥8h，得到55g标题化合物(45％收率)。在40℃真空蒸发母液，溶于乙酸乙酯(200mL)，用200mL水萃取。用Na2SO4干燥有机溶液，在40℃真空蒸发溶剂。使粗产物在CHCl3/己烷中结晶，又得到15g标题产物(70％总收率)。
[0272] 步骤2：(R)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(R,S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)酯(I-1/Ab)的制备
[0273] 将(R,S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(50g,152mmol),(R)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(38.6g,168mmol)、DMAP(20.5g,168mmol)和EDC(43.8g,229mmol)溶于DMF(300mL)，将该反应混合物在RT搅拌2h。此后，加入水(500mL)，将该溶液搅拌至沉淀完全。过滤固体，溶于DCM(500mL)。用HCl 1N水溶液(2x500mL)、饱和NaHCO3水溶液(500mL)洗涤有机溶液，用Na2SO4干燥。真空蒸发溶剂，在EtOH(300mL)中超声处理固体残余物，研磨1h。通过过滤采集得到的沉淀，在40℃真空干燥4h，得到79g(99％收率)标题化合物，为非对映异构体混合物。
[0274] 步骤3：(R)-(2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)酯(I-1/Ac)的制备
[0275] 将(R)-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(R,S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)酯(非对映异构体混合物,79g,146mmol)溶于CHCl3(100mL)，缓慢地加入MeOH(30mL)至持续乳白色，将该混合物保持在RT 2h。通过过滤采集形成的固体，用CHCl3/MeOH(70mL/20mL)溶剂系统重结晶，得到35g期望的化合物(收率88％,ee98％)。手性HPLC分析：Chiralcel OD柱,10μm,250x 4.6mm；流速＝0.8ml/min；洗脱液＝己烷：异丙醇97/3；Rt＝
42.33min；
42.33min；
[0276] 1H NMR(600MHz,氯FORM-d)δppm 8.04(s,2H),7.67(d,J＝8.79Hz,1H),7.58(d,J＝8.52Hz,1H),7.53(m,1H),7.12-7.20(m,3H),6.95(dd,J＝8.24,1.92Hz,1H),6.78-6.88(m,2H),6.14(dd,J＝10.44,4.12Hz,1H),3.95(s,3H),3.88(s,3H),3.78-3.81(m,4H),3.55(dd,J＝13.73,10.44Hz,1H),3.14(dd,J＝13.60,4.26Hz,1H),1.44(d,J＝7.14Hz,3H).[0277] 步骤4：(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(I-1/Ad)的制备
[0278] 将(R)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)酯(30g,56mmol)溶于MeOH，缓慢地加入甲苯。将叔丁醇钾缓慢地加入到该混悬液中。将该混合物在RT搅拌24h。用水(500mL)稀释该反应体系，用CHCl3(500mL)萃取水性混合物。用Na2SO4干燥有机层，真空蒸发溶剂。使残余物从CHCl3(100mL)和己烷(20mL)结晶。浓缩母液，用类似方法重结晶，得到第二批期望的化合物。总计得到16g标题化合物(87％收率)。手性HPLC分析：Chiralcel OD柱,10μm,250x 4.6mm；流速＝0.8ml/min；洗脱液＝己烷：
1
异丙醇95/5；Rt＝58.03min；[α]D＝+10.21(c＝0.506,甲醇)；H NMR(400MHz,丙酮)δppm
8.47(s,2H),6.96-7.15(m,1H),6.87(m,2H),4.93-5.21(m,1H),4.50(d,J＝3.97Hz,1H),
3.78(s,6H),3.44(dd,J＝12.79,8.38Hz,1H),3.22(dd,J＝13.01,5.51Hz,1H).MS/ESI+[MH]+：328.19。
1
异丙醇95/5；Rt＝58.03min；[α]D＝+10.21(c＝0.506,甲醇)；H NMR(400MHz,丙酮)δppm
8.47(s,2H),6.96-7.15(m,1H),6.87(m,2H),4.93-5.21(m,1H),4.50(d,J＝3.97Hz,1H),
3.78(s,6H),3.44(dd,J＝12.79,8.38Hz,1H),3.22(dd,J＝13.01,5.51Hz,1H).MS/ESI+[MH]+：328.19。
[0279] 步骤5：(S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(I-1/A)的制备
[0280] 将(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(4g,12mmol)溶于乙酸乙酯，将m-CPBA加入到该溶液中。将该混合物在RT搅拌5h。通过过滤采集形成的固体，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥，得到1.72g(S)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(41％收率)。手性HPLC分析：Chiralcel OD柱,10μm,250x 4.6mm；流速＝0.8ml/min；洗脱液＝己烷：异丙醇60/40；Rt＝22.16min；[α]D＝+68.91(c＝0.253,甲醇/CHCl3 1：1)；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.15(s,2H),6.99(m,1H),6.79-6.88(m,2H),5.03(dd,J＝8.50,5.32Hz,1H),3.75-3.98(m,6H),3.42(dd,J＝13.57,8.56Hz,1H),3.19(dd,J＝13.51,
5.32Hz,1H),2.06-2.15(m,1H)；MS/ESI+[MH]+：344
5.32Hz,1H),2.06-2.15(m,1H)；MS/ESI+[MH]+：344
[0281] 中间体I-1/B,I-1/C,I-1/D,I-1/E,I-1/F
[0283] 外消旋醇中间体表
[0284]
[0285]
[0286] 中间体1/G(I-1/G)
[0287] (S)-3,5-二氯-4-(2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物
[0288]
[0289] 按照专利申请WO2010/089107中所述的方法可以得到中间体I-1/G。
[0290] 中间体1/H(I-1/H)
[0291] (S)-3,5-二氯-4-(2-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物
[0292]
[0293] 步骤1：(S)-3,5-二氯-4-(2-(4-(二氟甲氧基)-3-羟基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(I-1/I)
[0294] 将(S)-3,5-二氯-4-(2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(5g,11.90mmol)加入到100mL 37％HCl中，在室温搅拌约3min.，得到黄色溶液。
[0295] 再搅拌3min.后，将该溶液倾入NaOH(48g)在水(500mL)中的溶液。
[0296] 向该红色溶液中加入1M HCl至pH 1。过滤棕色固体，用水洗涤，与热EtOH(50mL)一起研磨。在r.t.搅拌1h后，过滤固体，用EtOH洗涤，在40C真空干燥，得到2.4标题化合物。
[0297] 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.84(br.s.,1H),8.54(s,2H),7.03(d,J＝8.38Hz,1H),6.98(t,J＝75.00Hz,1H),6.95(d,J＝1.76Hz,1H),6.74(dd,J＝8.16,1.54Hz,1H),
5.54(br.s.,1H),4.78(t,J＝6.39Hz,1H),3.14(dd,J＝13.23,8.38Hz,1H),2.97(dd,J＝
13.23,5.29Hz,1H)
5.54(br.s.,1H),4.78(t,J＝6.39Hz,1H),3.14(dd,J＝13.23,8.38Hz,1H),2.97(dd,J＝
13.23,5.29Hz,1H)
[0298] MS/ESI+[MH]+：366
[0299] 步骤2：S)-3,5-二氯-4-(2-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(I-1/H)
[0300] 将(S)-3,5-二氯-4-(2-(4-(二氟甲氧基)-3-羟基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(2g,5.46mmol)溶于DMF(16mL)，然后加入K2CO3(2g,14.47mmol)和碘甲烷(1.72g,12.12mmol)，将该混合物在r.t搅拌4h。将该混合物倾入200mL水，过滤，用水洗涤，在40℃真空干燥。得到1.98g带白色的固体。
[0301] 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δppm 8.53(s,2H),7.08-7.13(m,2H),7.01(t,J＝75.00Hz,1H),6.88(dd,J＝7.94,1.76Hz,1H),5.64(d,J＝4.41Hz,1H),4.77-4.94(m,1H),+ +
3.81(s,3H),3.17(d,J＝8.38Hz,1H),3.05(d,J＝5.73Hz,1H)MS/ESI[MH]：380
3.81(s,3H),3.17(d,J＝8.38Hz,1H),3.05(d,J＝5.73Hz,1H)MS/ESI[MH]：380
[0302] 中间体I-1/J,I-1/K,I-1/L,I-1/M,I-1/N
[0303] 按照上述对中间体1/H所述的方法，通过使中间体1/I与适合的烷基化剂反应可以得到下表中报道的中间体I-1/J、I-1/K、I-1/L、I-1/M、I-1/N。
[0304]
[0305]
[0306]
[0307] 中间体1
[0308] 4-((S)-2-(((S)-3-(叔丁氧羰基)噻唑烷-2-羰基)氧基)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(I1)
[0309]
[0310] 将(S)-3,5-二氯-4-(2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(按照专利申请WO2010/089107中所述的方法得到,843mg,2.01mmol)、(S)-3-(叔丁氧羰基)噻唑烷-2-甲酸(749mg,3.21mmol)、DMAP(245mg,2.006mmol)和EDC·HCl(1.154g,6.02mmol)溶于DMF(10ml)。将该反应体系在RT搅拌2h，用水稀释该反应混合物。用水洗涤沉淀，溶于EtOAc，用HCl 1N、饱和Na2CO3水溶液和盐水萃取。用Na2SO4干燥有机相，真空浓缩，得到4-((S)-2-((S)-3-(叔丁氧羰基)噻唑烷-2-羰基氧基)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(1.2g,1.89mmol,94％)。
[0311] MS/ESI+[MH+]＝635.2.
[0312] 通过与中间体1类似的方法合成如下中间体：
[0313]
[0314]
[0315] 中间体5
[0316] 3,5-二氯-4-((S)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-((S)-噻唑烷-2-羰基氧基)乙基)吡啶1-氧化物盐酸盐(I5)
[0317]
[0318] 将4-((S)-2-((S)-3-(叔丁氧羰基)噻唑烷-2-羰基氧基)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(4.22g,6.64mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)。加入HCl的乙酸乙酯溶液(50mL,4.2M,210mmol)，将该反应体系在室温搅拌5分钟。
形成白色沉淀，过滤，用乙酸乙酯(2×)和己烷洗涤，真空烘箱干燥，得到3,5-二氯-4-((S)-
2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-((S)-噻唑烷-2-羰基氧基)乙基)吡啶1-氧化物盐酸盐(3.19g,5.6mmol,84％)。
形成白色沉淀，过滤，用乙酸乙酯(2×)和己烷洗涤，真空烘箱干燥，得到3,5-二氯-4-((S)-
2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-((S)-噻唑烷-2-羰基氧基)乙基)吡啶1-氧化物盐酸盐(3.19g,5.6mmol,84％)。
[0319] 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.57(s,2H),7.19(d,J＝7.94Hz,1H),7.12(d,J＝1.76Hz,1H),7.08(t,J＝75.00Hz,1H),6.93-7.00(m,1H),5.89-5.98(m,1H),5.12(s,1H),3.91(d,J＝7.06Hz,2H),3.37-3.47(m,1H),3.10-3.31(m,3H),2.77-2.93(m,2H),1.05-1.36(m,1H),
0.51-0.63(m,2H),0.34(d,J＝4.85Hz,2H).
0.51-0.63(m,2H),0.34(d,J＝4.85Hz,2H).
[0320] MS/ESI+[MH+]＝535.2
[0321] 中间体6
[0322] 步骤1：(3-甲氧基苯基)(苯基)甲酮(I6a)的制备
[0323]
[0324] 向五氯化磷(3763g,18.1mol)在7.5L苯中的混合物中分批加入3-甲氧基苯甲酸(2500g,16.4mol)。将该混合物搅拌50分钟，直到变成均匀。通过TLC控制酰氯形成。完成后，将该混合物冷却至10℃，用铝箔覆盖反应器，分批加入三氯化铝(4820g,36.1mol)(将内部温度保持在最高30℃)。在RT持续搅拌18小时。通过TLC(AcOEt：hex1：9)监测反应。完成后，将该反应混合物倾入冰，用AcOEt(7L)稀释。分离有机层，用AcOEt(2x 10L,1x 6L)萃取水层。用水(5×3L)、饱和碳酸氢钠水溶液(15L)将合并的有机层洗涤至pH～6-7，干燥(硫酸钠)，过滤，减压蒸发溶剂，得到粗油状物。通过真空蒸馏纯化产物(130-139℃,2mbar)，得到标题化合物(2637g,76％)，为淡黄色油状物。
[0325] 1H NMR(600MHz,CDCl3),δ7.80(m,2H),7.57(m,1H),.7.46(m,2H),7.32-7.37(m,3H),7.12(m,1H),3.83(s,3H).
[0326] 步骤2：(3-羟基苯基)(苯基)甲酮(I6b)的制备
[0327]
[0328] 将1458g(6.9mol)(3-甲氧基苯基)(苯基)甲酮溶于2090mL AcOH。向该溶液中加入2320mL(20.6mol)48％HBr，将该混合物在90℃搅拌18小时。通过TLC(AcOEt：hex 1：9)监测反应。反应完成后，将该混合物冷却至RT，在搅拌下倾入冰。过滤沉淀的固体，用水洗涤，干燥，得到标题化合物，为白色固体(1234g,91％)。
[0329] 1H NMR(600MHz,CDCl3),δ7.80(m,2H),7.58(m,1H),7.47(m,2H),7.39(m,1H),7.28-7.34(m,2H),7.11(m,1H),5.59(br s,1H)。
[0330] 步骤3：3-(氨基(苯基)甲基)苯酚(I6c)的制备
[0331]
[0332] 将3-羟基苯基)(苯基)甲酮(400g,2mol)溶于甲醇(4L)。将盐酸羟胺(168g,2.4mol)和乙酸钠(331g,4mol)加入到得到的溶液中。将该混合物回流加热18小时。冷却至RT后，减压蒸发溶剂，然后向残余物中加入水(3L)。用乙酸乙酯(3×3L)萃取产物。用饱和碳酸氢钠水溶液、盐水洗涤合并的有机萃取物，干燥(硫酸钠)，过滤，减压蒸发溶剂。将粗残余物(1085g)不经纯化用于下一步。
[0333] 将粗肟362g,(287g,基于分析1.3mol的纯肟)溶于乙醇(860mL)和25％氨水(3000mL)。向该混合物中加入乙酸铵(52g,0.7mol)，然后分批添加锌粉(440g,6.7mol)，以维持内部不超过40℃。将该混合物不经加热搅拌18小时，然后通过C盐垫过滤。用乙酸乙酯洗涤滤饼。采集滤液，分离形成的各层。用乙酸乙酯(5×5L)萃取水层。用盐水(×2)洗涤合并的有机萃取物，真空除去溶剂。真空干燥产物(35℃,18小时)，得到产物。
[0334] 1H NMR(600MHz,DMSO),δ9.25(brs,1H),7.36(m,2H),7.25(m,2H),7.15(m,1H),7.03(m,1H),6.79(m,2H),6.54(m,1H),4.98(s,1H),2.17(brs,2H).
[0335] 步骤4：(S)-3-(氨基(苯基)甲基)苯酚(S)-扁桃酸盐(I6d)的结晶
[0336]
[0337] 盐形成：将3-(氨基(苯基)甲基)苯酚(1081g,5.4mol)溶于异丙醇(21.62L)，加热至回流。向该混合物中滴加S-扁桃酸(908g,6mol)在异丙醇(2160mL)的溶液。将该混合物回流加热1小时，然后冷却至10℃(历时18小时)。过滤形成的沉淀，用冷异丙醇洗涤，在35℃真空干燥。
[0338] 将得到的盐在95％异丙醇中回流1小时。将该混合物冷却至10℃，历时18小时。过滤固体，用冷异丙醇洗涤，在35℃真空烘箱干燥。重复结晶2次或多次，直到通过手性HPLC分析ee>98％。
[0339] 步骤5：(S)-3-(氨基(苯基)甲基)苯酚盐酸盐(I6e)的制备
[0340]
[0341] 将(S)-3-(氨基(苯基)甲基)苯酚(S)-扁桃酸盐(1027g,2.9mol)混悬于乙酸乙酯。滴加碳酸氢钠(737g,8.8mol)在水(11.05L)中的溶液，将该混合物在RT搅拌18小时。分离该混合物，用乙酸乙酯(5x10L)萃取水层。将合并的有机萃取物合并，减压蒸发溶剂，得到464g(85％)胺，为淡黄色结晶。
[0342] 将所述胺(464g,2.3mol)混悬于甲醇，滴加4M HCl的EtOAc溶液(3500mL,14mol)。将该混合物搅拌18小时，减压蒸发溶剂。将残余物与乙醚(2740mL)一起研磨18小时。过滤该混悬液，用乙醚洗涤滤饼，干燥。
[0343] 1H NMR(600MHz,DMSO),δ9.74(s,1H),9.19(s,3H),7.54(m,2H),7.40(m,2H),7.33(m,1H),7.19(m,1H),7.00(m,1H),6.89(m,1H),6.78(m,1H),5.49(s,1H,CH).
[0344] 步骤6：((S)-(3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸(R)-奎宁环-3-基酯(I6)的制备[0345]
[0346] 在0℃，向搅拌的(R)-3-奎宁醇(2.5g,19.66mmol)在乙腈(200mL)中的溶液中滴加氯甲酸三氯甲酯(3.06mL,25.57mmol)，将该混合物在0℃搅拌1小时。然后将该反应混合物在RT搅拌16hrs，然后真空除去溶剂，得到(R)-氯甲酸奎宁环-3-基酯盐酸盐，为白色固体(4.39g,98％)。
[0347] 向(S)-3-(氨基(苯基)甲基)苯酚盐酸盐(1.0g,5.04mmol)在吡啶(12mL)中的溶液中一次加入(R)-氯甲酸奎宁环-3-基酯盐酸盐(1.32g,5.84mmol)。将该反应混合物缓慢地温热至室温16h，浓缩至干。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-100％1.4N甲醇氨的异己烷溶液洗脱，得到1.3g标题产物，为白色泡沫体。
[0348] LCMS(方法1)：[MH+]＝353，在2.42min.
[0349] 中间体7
[0350] ((3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(I7)
[0351]
[0352] 将3-(氨基(苯基)甲基)苯酚盐酸盐(I6e,29.09g,123.4mmol)在二氯甲烷(450mL)中冷却至0℃，缓慢地加入二异丙基乙胺(65.9mL,370.2mmol)和二碳酸二-叔丁酯(59.2g,271.5mmol)。将该反应体系在0℃搅拌2小时，然后温热至RT，历时16小时。除去溶剂，使残余物通过硅胶垫，用0-20％乙酸乙酯的异-己烷溶液洗脱，得到黑色油状物。向在甲醇(300mL)中的该混合物加入碳酸钾(51g,370.2mmol)，在RT搅拌16小时。过滤该混悬液，减压蒸发滤液，将残余物再溶于乙酸乙酯(370mL)。加入硅胶(73g)，将该混悬液搅拌30分钟，过滤，再用乙酸乙酯洗涤滤饼。将滤液蒸发至干。将深色固体残余物溶于乙酸乙酯(200mL)，加入活性炭，将该混悬液加热回流1小时。通过C盐过滤该混悬液，减压除去溶剂。将深色固体溶于二氯甲烷，加入异-己烷，蒸发溶剂(重复3次)，得到标题化合物，为黄色固体(34.81g,92％)。
[0353] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.36-7.16(m,6H)；6.80(d,J＝7.79Hz,1H)；6.74-6.69(m,2H)；
[0354] 5.83(s,1H)；5.15(s,1H)；1.53-1.30(s,9H)。
[0355] 中间体8
[0356] (S)-((3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(I8)
[0357]
[0358] 在25℃，通过SFC，采用 AD 20μM 250x 110mm柱，应用正庚烷/2-丙醇/二乙胺(60/40/0.1)作为洗脱液与570ml/min的流速纯化外消旋N-((3-羟基苯基)(苯基)甲基)甲酰胺。由54.1g粗物质得到(S)-((3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(Rt＝8.5-8.6min,23.9g,99.2e.e.)。
[0359] 中间体9
[0360] ((3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸(R)-奎宁环-3-基酯(I9)
[0361]
[0362] 根据对中间体6步骤6所述相同的方法由(I6c)制备(R)-((3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯。
[0363] 方案A
[0364]
[0365] 可以使用方案A中的方法得到实施例1-4。
[0366] 实施例1
[0367] (2S)-1-[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯(E1)
[0368]
[0369] 在0℃，向4-((S)-2-(((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-羰基)氧基)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(I2,270mg,0.44mmol)溶于EtOAc(6mL)中的溶液中加入HCl的二噁烷溶液(4N,7.2mL,28.8mmol)。将得到的混合物在0℃搅拌1h，然后添加HCl的二噁烷溶液(4N,2mL,8.0mmol)。将得到的浆料搅拌1h，然后真空除去溶剂。将残余物再溶于DCM(50mL)，用饱和NaHCO3水溶液(20mL)洗涤。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器(frit)，真空除去溶剂，得到油状物，将其不经进一步纯化即刻使用。然后将残余物溶于丙酮(4mL)和THF(4mL)。在室温加入3-氯磺酰基苯甲酸(845mg,3.86mmol)和2M NaOH(3.86mL,7.72mmol)，将得到的混合物搅拌16h。真空浓缩后，用DCM(50mL)稀释残余物，用盐水饱和的1N HCl水溶液将pH调整至2。用MgSO4干燥有机相，真空浓缩。将得到的油状物(195mg)不经进一步纯化直接用于下一步。向羧酸、((S)-(3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸(R)-奎宁环-3-基酯(197mg,0.56mmol)、4-(二甲基氨基)-吡啶(17mg,0.14mmol)在DMF(2.5mL)中的溶液中加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(107mg,0.56mmol)。
[0370] 将得到的混合物在室温搅拌16h，使其在EtOAc(50mL)与水(20mL)之间分配。分离各层，用MgSO4干燥有机层，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1.5mL)，通过HPLC纯化，得到标题化合物，为固体(9mg，2％，3步)。
[0371] 1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.57(s,2H),8.46-8.35(m,2H),8.17-8.11(m,1H),7.92-7.85(m,1H),7.48-7.41(m,2H),7.40-7.29(m,6H),7.28-7.21(m,2H),7.19(d,J＝8.2Hz,
1H),7.15-7.11(m,1H),7.08(t,J＝75Hz,1H),6.98(d,J＝8.3Hz,1H),6.04(dd,J＝9.5,
4.2Hz,1H),5.96-5.89(m,1H),4.62-4.53(m,1H),4.25-4.21(m,1H),3.92(d,J＝6.9Hz,
2H),3.54-3.19(m,7H),2.78-2.54(m,3H),2.07-1.94(m,1H),1.94-1.85(m,1H),1.75-1.64(m,2H),1.64-1.53(m,2H),1.52-1.40(m,1H),1.37-1.26(m,1H),1.26-1.17(m,2H),0.59-
0.51(m,2H),0.36-0.31(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝1035，在3.19min.
1H),7.15-7.11(m,1H),7.08(t,J＝75Hz,1H),6.98(d,J＝8.3Hz,1H),6.04(dd,J＝9.5,
4.2Hz,1H),5.96-5.89(m,1H),4.62-4.53(m,1H),4.25-4.21(m,1H),3.92(d,J＝6.9Hz,
2H),3.54-3.19(m,7H),2.78-2.54(m,3H),2.07-1.94(m,1H),1.94-1.85(m,1H),1.75-1.64(m,2H),1.64-1.53(m,2H),1.52-1.40(m,1H),1.37-1.26(m,1H),1.26-1.17(m,2H),0.59-
0.51(m,2H),0.36-0.31(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝1035，在3.19min.
[0372] 使用与上述实施例1中所述类似的方法由适合的原料制备下文报道的化合物。
[0373]
[0374]
[0375] (接续)
[0376]
[0377]
[0378] 方案B
[0379]
[0380] 可以使用方案B的方法得到实施例5。
[0381] 实施例5
[0382] (2S)-3-[[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]甲基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯甲酸盐(E5)
[0383] 步骤1：4-((S)-2-(((S)-3-(3-羧基苄基)噻唑烷-2-羰基)氧基)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(E5a)的制备
[0384]
[0385] 向搅拌的3,5-二氯-4-((S)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-((S)-噻唑烷-2-羰基氧基)乙基)吡啶1-氧化物盐酸盐(I5,570mg,1.0mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入3-甲酰基苯甲酸(180mg,1.2mmol)，然后加入冰AcOH(0.17mL,3.3mmol)。将该反应混合物在室温搅拌18h。加入三乙酰氧基硼氢化钠(690mg,3.12mmol)，将该反应体系在室温搅拌1.5h。再加入3-甲酰基苯甲酸(180mg,1.2mmol)，将该反应混合物在室温搅拌2天。加入DCM(25mL)和1N HCl(15mL)以使反应停止，使该混合物通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂买得到标题化合物。
[0386] LCMS(方法2)：[MH+]＝669，在3.17min.
[0387] 步骤2：(2S)-3-[[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]羰基苯基]甲基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯甲酸盐(E5)的制备
[0388]
[0389] 将上述得到的羧酸溶于DMF(2.5mL)，加入((S)-(3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸(R)-奎宁环-3-基酯(I6,291mg,0.83mmol)、4-(二甲基氨基)-吡啶(35mg,0.29mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(219mg,1.14mmol)。将得到的混合物在室温搅拌18h。真空除去溶剂，使残余物在EtOAc(50mL)与水(20mL)之间分配。分离各层，用MgSO4干燥有机层，过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1.5mL)，通过HPLC纯化，得到标题化合物(78mg,8％，2步)，为白色固体。
[0390] 1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.43(s,2H),8.35-8.27(m,1H),8.22(s,1H),8.12-8.06(m,2H),7.69(d,J＝7.6Hz,1H),7.61(t,J＝7.6Hz,1H),7.44(t,J＝8.1Hz,1H),7.37-7.28(m,5H),7.28-7.19(m,2H),7.18(d,J＝8.6Hz,1H),7.10(d,J＝2.0Hz,1H),7.08(t,J＝74.8Hz,1H),6.95(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),5.94-5.87(m,2H),4.82(s,1H),4.62-4.54(m,
1H),3.90(d,J＝7.0Hz,2H),3.66(s,2H),3.40-3.27(m,4H),3.22(dd,J＝14.3,4.9Hz,1H),
3.15-3.05(m,2H),3.03-2.96(m,1H),2.94-2.88(m,1H),2.76-2.69(m,2H),2.65-2.54(m,
2H),1.95-1.85(m,1H),1.82-1.71(m,1H),1.63-1.52(m,1H),1.52-1.40(m,1H),1.37-1.27(m,1H),1.24-1.19(m,1H),0.58-0.53(m,2H),0.36-0.32(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝
1003，在3.3min.
1H),3.90(d,J＝7.0Hz,2H),3.66(s,2H),3.40-3.27(m,4H),3.22(dd,J＝14.3,4.9Hz,1H),
3.15-3.05(m,2H),3.03-2.96(m,1H),2.94-2.88(m,1H),2.76-2.69(m,2H),2.65-2.54(m,
2H),1.95-1.85(m,1H),1.82-1.71(m,1H),1.63-1.52(m,1H),1.52-1.40(m,1H),1.37-1.27(m,1H),1.24-1.19(m,1H),0.58-0.53(m,2H),0.36-0.32(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝
1003，在3.3min.
[0391] 中间体10
[0392] (S)-3-(((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)苯甲酸(I10)
[0393]
[0394] 在0℃，向N-[(S)-(3-羟基苯基)-苯基-甲基]氨基甲酸叔丁酯(I8,900mg,3.01mmol)在吡啶(5mL)中的溶液中缓慢地加入三氟甲磺酸酐(1.19mL,4.5mmol)。将该反应混合物在0℃搅拌30min，小心地加入水(5mL)以猝灭过量的三氟甲磺酸酐。加入EtOAc(100mL)和水(40mL)，分离各层，用盐水(40mL)洗涤有机相，用MgSO4干燥。真空浓缩后，将油状物转入含有甲苯(15mL)、Et3N(0.83mL,6.0mmol)和甲酸苯酯(732mg,6.0mmol)的微波小瓶，使N2鼓泡通过该混合物15min。加入Pd(OAc)2(34mg,0.15mmol)和Xantphos(173mg,
0.30mmol)，使N2再通过该混合物5min，然后在120℃在微波照射下加热30min。加入EtOAc(100mL)和水(50mL)，分离各层，用MgSO4干燥有机相。过滤该混合物，真空除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-20％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到相应的苯酯化合物(579mg)。
将该固体溶于THF(5mL)和MeOH(5mL)，在室温加入1N LiOH溶液(2.72mL,2.72mmol)，将该反应混合物搅拌16h。在0℃加入2N HCl以便将pH调整至～2。真空浓缩后，将残余物溶于DCM(50mL)和水(20mL)，通过疏水性玻璃料过滤器分离各层，真空浓缩有机相，得到标题化合物
1
(384mg,39％，3步)，为白色固体。H NMR(400MHz,DMSO)：δ9.31(s,1H),8.08(d,J＝9.6Hz,
1H),7.92(s,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.54(d,J＝7.8Hz,1H),7.44(t,J＝7.7Hz,1H),
7.35-7.29(m,4H),7.27-7.21(m,1H),7.16(t,J＝7.7Hz,1H),6.79-6.73(m,2H),5.90(d,J＝9.2Hz,1H),1.40(s,9H).
0.30mmol)，使N2再通过该混合物5min，然后在120℃在微波照射下加热30min。加入EtOAc(100mL)和水(50mL)，分离各层，用MgSO4干燥有机相。过滤该混合物，真空除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-20％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到相应的苯酯化合物(579mg)。
将该固体溶于THF(5mL)和MeOH(5mL)，在室温加入1N LiOH溶液(2.72mL,2.72mmol)，将该反应混合物搅拌16h。在0℃加入2N HCl以便将pH调整至～2。真空浓缩后，将残余物溶于DCM(50mL)和水(20mL)，通过疏水性玻璃料过滤器分离各层，真空浓缩有机相，得到标题化合物
1
(384mg,39％，3步)，为白色固体。H NMR(400MHz,DMSO)：δ9.31(s,1H),8.08(d,J＝9.6Hz,
1H),7.92(s,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.54(d,J＝7.8Hz,1H),7.44(t,J＝7.7Hz,1H),
7.35-7.29(m,4H),7.27-7.21(m,1H),7.16(t,J＝7.7Hz,1H),6.79-6.73(m,2H),5.90(d,J＝9.2Hz,1H),1.40(s,9H).
[0395] 方案C
[0396]
[0397] 可以使用方案C的方法得到实施例6。
[0398] 实施例6
[0399] (2S)-3-[[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氧基苯基]甲基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯双甲酸盐(E6)
[0400] 步骤1：3,5-二氯-4-((S)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-(((S)-3-(3-羟基苄基)噻唑烷-2-羰基)氧基)乙基)吡啶1-氧化物(E6a)的制备
[0401]
[0402] 向搅拌的3,5-二氯-4-((S)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-((S)-噻唑烷-2-羰基氧基)乙基)吡啶1-氧化物盐酸盐(I5,300mg,0.52mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入3-羟基苯甲醛(172mg,1.2mmol)，然后加入冰AcOH(0.11mL,2.08mmol)。将该反应混合物在室温搅拌18小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(500mg,2.26mmol)，将该反应体系在室温搅拌4h。加入DCM(50mL)和1N HCl(20mL)以使反应停止。分离各层，用1N HCl(2×20mL)洗涤有机层，使其通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂，得到标题化合物。
[0403] LCMS(方法2)：[MH+]＝641，在3.68min.
[0404] 步骤2：(2S)-3-[[3-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氧基苯基]甲基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯双甲酸盐(E6)的制备
[0405]
[0406] 然后将上述得到的苯酚溶于DMF(5mL)，加入(S)-3-(((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)苯甲酸(I10,196mg,0.60mmol)，然后加入4-(二甲基氨基)-吡啶(31mg,0.25mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(192mg,1.0mmol)。将得到的混合物在室温搅拌18h。真空除去溶剂，使残余物在EtOAc(50mL)与饱和NaHCO3水溶液(30mL)之间分配。用盐水(20mL)洗涤有机相，用MgSO4干燥，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(3.0mL)，通过HPLC纯化，得到相应的酯(79mg)，为白色固体。将残余物溶于DCM(2mL)，在0℃加入TFA(1mL)。将该混合物在0℃搅拌1h，然后真空除去溶剂。用DCM(30mL)和饱和NaHCO3水溶液(20mL)稀释残余物，使有机相通过疏水性玻璃料过滤器。真空除去溶剂，将残余物溶于吡啶(1mL)，然后在0℃加入(R)-氯甲酸奎宁环-3-基酯盐酸盐(22mg,0.096mmol,如上述Int 6步骤6所述制备)。将得到的混合物在室温搅拌18h，然后用EtOAc(50mL)和叔(20mL)稀释。分离各层，用MgSO4干燥有机相。过滤该混合物，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1.5mL)，通过HPLC纯化，得到标题化合物(45mg,9％，4步)。
[0407] 1H NMR(400MHz,DMSO，在100℃)：δ8.28(s,2H),8.12(s,2H),8.01(dt,J＝7.8,1.4Hz,1H),7.75(d,J＝8.6Hz,1H),7.66(d,J＝7.8Hz,1H),7.54(t,J＝7.7Hz,1H),7.42(t,J＝8.0Hz,1H),7.37-7.30(m,4H),7.26-7.21(m,3H),7.20-7.17(m,1H),7.14(d,J＝7.9Hz,
1H),7.09(d,J＝2.1Hz,1H),6.95(dd,J＝8.7,0.0Hz,1H),6.94(t,J＝75Hz,1H),5.98(d,J＝8.8Hz,1H),5.97(d,J＝8.9Hz,1H),4.77(s,1H),4.64-4.59(m,1H),3.92(d,J＝6.7Hz,
2H),3.66(s,2H),3.39(dd,J＝14.2,8.8Hz,1H),3.36-3.31(m,1H),3.26(dd,J＝14.1,
5.1Hz,1H),3.23-3.17(m,1H),3.07(dd,J＝14.6,8.1Hz,1H),2.98(dt,J＝15.7,4.7Hz,
1H),2.95-2.87(m,1H),2.70(t,J＝8.1Hz,3H),2.67-2.55(m,1H),2.55-2..51(m,1H),
1.94-1.86(m,1H),1.79-1.68(m,1H),1.64-1.54(m,1H),1.52-1.42(m,1H),1.36-1.24(m,
1H),1.25-1.16(m,1H),0.58-0.53(m,2H),0.35-0.32(m,2H),未观察到NH。LCMS(方法1)：
[MH+]＝1003，在3.35min.
1H),7.09(d,J＝2.1Hz,1H),6.95(dd,J＝8.7,0.0Hz,1H),6.94(t,J＝75Hz,1H),5.98(d,J＝8.8Hz,1H),5.97(d,J＝8.9Hz,1H),4.77(s,1H),4.64-4.59(m,1H),3.92(d,J＝6.7Hz,
2H),3.66(s,2H),3.39(dd,J＝14.2,8.8Hz,1H),3.36-3.31(m,1H),3.26(dd,J＝14.1,
5.1Hz,1H),3.23-3.17(m,1H),3.07(dd,J＝14.6,8.1Hz,1H),2.98(dt,J＝15.7,4.7Hz,
1H),2.95-2.87(m,1H),2.70(t,J＝8.1Hz,3H),2.67-2.55(m,1H),2.55-2..51(m,1H),
1.94-1.86(m,1H),1.79-1.68(m,1H),1.64-1.54(m,1H),1.52-1.42(m,1H),1.36-1.24(m,
1H),1.25-1.16(m,1H),0.58-0.53(m,2H),0.35-0.32(m,2H),未观察到NH。LCMS(方法1)：
[MH+]＝1003，在3.35min.
[0408] 中间体11
[0409] 1-甲基-5-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(I11)
[0410]
[0411] 向冰冷却的5-(羟基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(0.60g,3.51mmol)和三乙胺(1.22mL,8.77mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(0.41mL,5.26mmol)。将该反应混合物在冰浴中搅拌15分钟，然后温热至室温。将该反应混合物在RT搅拌1小时。用DCM稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。用硫酸镁干燥有机相，过滤，真空蒸发溶剂。将粗物质不经进一步纯化用于下一步。
[0412] 中间体12
[0413] (S)-4-((3-(((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)-苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯(I12)[0414]
[0415] 将(S)-((3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(I8,3.20g,10.7mmol)、4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(2.70g,11.8mmol)和碳酸钾(2.20g,16.1mmol)在乙腈(54mL)中的混合物在RT搅拌16h。真空除去该反应混合物，使残余物在乙酸乙酯与水之间分配。再用乙酸乙酯萃取水相，用无水硫酸镁干燥合并的有机萃取物，过滤，真空除去溶剂。使残余物从乙酸乙酯和异-己烷中重结晶，得到(S)-4-((3-(((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)-苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯，为白色固体(3.25g,68％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.04(d,J＝8.2Hz,2H),7.46(d,J＝8.2Hz,2H),7.34-7.20(m,6H),6.90-6.81(m,3H),5.87(s,1H),5.13(s,1H),
5.07(s,2H),3.92(s,3H),1.44(s,9H)。
5.07(s,2H),3.92(s,3H),1.44(s,9H)。
[0416] 中间体13
[0417] (S)-4-((3-(氨基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯(I13)
[0418]
[0419] 向(S)-4-((3-(((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)-苯氧基)-甲基)苯甲酸甲酯(I12,3.21g,7.20mmol)在甲醇(36mL)中的溶液中加入氯化氢的二噁烷溶液(4M,9.0mL,36mmol)。将该反应混合物在RT搅拌16h。真空除去溶剂，得到(S)-4-((3-(氨基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯盐酸盐(2.65g,>95％)。
[0420] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.21(s,2H),8.03(d,J＝8.1Hz,2H),7.64(d,J＝8.1Hz,2H),7.59(d,J＝7.6Hz,2H),7.49-7.34(m,5H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),7.06(dd,J＝8.3,
2.4Hz,1H),5.64(s,1H),5.28(s,2H),3.91(s,3H).
2.4Hz,1H),5.64(s,1H),5.28(s,2H),3.91(s,3H).
[0421] 中间体14
[0422] 4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)-甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯(I14)
[0423]
[0424] 在0℃，向搅拌的(S)-4-((3-(氨基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯盐酸盐(I13,12.0g,31.3mmol)在吡啶(100mL)中的溶液中分批加入氯甲酸(R)-奎宁环-3-基酯(8.50g,37.5mmol,如上述对Int 6步骤6中所述制备)。将该反应体系在0℃搅拌1小时，然后温热至RT 16h。将水加入到该反应混合物中，用乙酸乙酯(×3)萃取该混合物。用盐水洗涤合并的萃取物，用硫酸钠干燥，过滤，真空除去溶剂。通过KP-NH Biotage柱色谱法、使用0-20％甲醇的乙酸乙酯溶液纯化粗物质，得到标题化合物(10.3g,66％)。
[0425] 通过与用于中间体14类似的方法合成下列中间体：
[0426]
[0427]
[0428] 中间体17
[0429] 4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)-甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸(I17)
[0430]
[0431] 向搅拌的4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯(I14,2.27g,4.50mmol)在THF(23mL)中的溶液中加入氢氧化锂水溶液(2.0M,9.0ml,18.0mmol)。将该混合物在RT搅拌16小时。通过添加4M盐酸水溶液将该反应混合物的pH调整至6。然后用10％甲醇的乙酸乙酯溶液(×2)萃取该混合物，合并有机萃取物，真空除去溶剂。然后将残余物溶于乙醇，再减压蒸发，得到标题化合物，为淡黄色固体(1.85g,84％)。
[0432] 1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.41(d,J＝9.4Hz,1H),7.99(d,J＝7.9Hz,2H),7.58(d,J＝8.0Hz,2H),7.42-7.26(m,6H),7.09(s,1H),7.02-6.91(m,2H),5.87(d,J＝9Hz,1H),5.21(s,2H),4.76(s,1H),3.98-2.72(m,6H),2.12-1.54(m,5H).
[0433] 通过与用于中间体17类似的方法合成下列中间体：
[0434]
[0435] (接续)
[0436]
[0437] 方案D
[0438]
[0439] 可以使用方案D中的方法得到实施例7-20
[0440] 实施例7
[0441] 4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(E7)[0442]
[0443] 向搅拌的4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)-苯甲酸(I17,243mg,0.5mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)-乙醇(172mg,0.5mmol)在DMF(5mL)中的溶液，然后加入DMAP(31mg,0.25mmol)和EDC·HCl(192mg,1mmol)。将该混合物在室温搅拌18h，然后真空除去溶剂。使残余物在DCM(15mL)与饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配。用盐水(15mL)洗涤有机相，通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。通过制备型HPLC进行纯化，得到标题化合物，为白色固体(169mg,42％)。1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.58(s,2H),8.27(s,1H),8.02(d,J＝8.1Hz,2H),7.59(d,J＝8.0Hz,2H),7.36-7.19(m,6H),7.10-6.88(m,
6H),6.25(dd,J＝9.5,4.4Hz,1H),5.84(d,J＝9.4Hz,1H),5.20(s,2H),4.64-4.57(m,1H),
3.81(s,3H),3.78(s,3H),3.67(dd,J＝14.7,9.7Hz,1H),3.37(dd,J＝14.1,4.2Hz,1H),
3.14(t,J＝11.7Hz,1H),2.83-2.52(m,5H),1.98-1.90(m,1H),1.88-1.76(m,1H),1.69-
1.57(m,1H),1.57-1.44(m,1H),1.44-1.32(m,1H).LCMS(方法1)：[MH+]＝812，在2.97min.[0444] 通过与实施例7相同的方法，以适合的醇为原料合成下列化合物：
6H),6.25(dd,J＝9.5,4.4Hz,1H),5.84(d,J＝9.4Hz,1H),5.20(s,2H),4.64-4.57(m,1H),
3.81(s,3H),3.78(s,3H),3.67(dd,J＝14.7,9.7Hz,1H),3.37(dd,J＝14.1,4.2Hz,1H),
3.14(t,J＝11.7Hz,1H),2.83-2.52(m,5H),1.98-1.90(m,1H),1.88-1.76(m,1H),1.69-
1.57(m,1H),1.57-1.44(m,1H),1.44-1.32(m,1H).LCMS(方法1)：[MH+]＝812，在2.97min.[0444] 通过与实施例7相同的方法，以适合的醇为原料合成下列化合物：
[0445]
[0446]
[0447]
[0448]
[0449]
[0450]
[0451]
[0452]
[0453]
[0454] 实施例19
[0455] 5-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]噻吩-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐
[0456]
[0457] 向搅拌的5-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)-苯氧基)甲基)噻吩-2-甲酸甲酯(I15,331mg,0.65mmol)在THF(2mL)和甲醇(2mL)中的溶液中加入氢氧化锂水溶液(1M,1.31mL,1.31mmol)。将该混合物在室温搅拌16h。通过添加1M盐酸水溶液将该反应混合物的pH调整至2。真空除去溶剂，得到淡黄色固体(0.480mg)，真空烘箱干燥16h，不经进一步纯化用于下一步。
[0458] 向搅拌的上述得到的残余物(214mg,0.41mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)-乙醇的溶液(100mg,
0.29mmol)，然后加入DMAP(17mg,0.14mmol)和EDC·HCl(111mg,0.58mmol)。将该混合物在室温搅拌18h，然后真空除去溶剂。使残余物在乙酸乙酯(15mL)与饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配，用盐水(15mL)洗涤有机相，使其通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。通过制备型HPLC进行纯化，得到标题化合物，为白色固体(37mg,11％)。
0.29mmol)，然后加入DMAP(17mg,0.14mmol)和EDC·HCl(111mg,0.58mmol)。将该混合物在室温搅拌18h，然后真空除去溶剂。使残余物在乙酸乙酯(15mL)与饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配，用盐水(15mL)洗涤有机相，使其通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。通过制备型HPLC进行纯化，得到标题化合物，为白色固体(37mg,11％)。
[0459] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.46(s,1H),8.10(s,2H),7.66(d,J＝3.8Hz,1H),7.41-7.15(m,6H),7.03-6.83(m,7H),6.22(dd,J＝9.8,4.5Hz,1H),5.91(s,1H),5.63(s,1H),
5.18(s,2H),4.80(s,1H),3.89(d,J＝9.1Hz,6H),3.68(dd,J＝14.0,9.9Hz,1H),3.31(dd,J＝14.1,4.7Hz,1H),3.12-2.65(m,6H),2.17(s,1H),2.00(s,1H),1.77(s,1H),1.65(s,1H),
1.51(s,1H).LCMS(方法1)：[MH+]＝818，在2.90min.
5.18(s,2H),4.80(s,1H),3.89(d,J＝9.1Hz,6H),3.68(dd,J＝14.0,9.9Hz,1H),3.31(dd,J＝14.1,4.7Hz,1H),3.12-2.65(m,6H),2.17(s,1H),2.00(s,1H),1.77(s,1H),1.65(s,1H),
1.51(s,1H).LCMS(方法1)：[MH+]＝818，在2.90min.
[0460] 通过与实施例19类似的方法由中间体16制备下列化合物。
[0461]
[0462] 中间体23
[0463] 1-(4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)-甲基)苯氧基)-甲基)苯甲酰基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯(I23)
[0464]
[0465] 向4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)-甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸(I17,321mg,0.66mmol))在DMF(10mL)中的溶液中加入氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯盐酸盐(200mg,1.32mmol)，然后加入4-(二甲基氨基)-吡啶(81mg,0.66mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(506mg,2.64mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h。再加入4-(二甲基氨基)-吡啶(40mg,0.33mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(250mg,1.32mmol)，将该反应混合物搅拌4h，然后使其在EtOAc(100mL)和水(40mL)之间分配。用MgSO4干燥有机层，过滤，真空除去溶剂。得到浓稠油状残余物(370mg)，不经进一步纯化用于下一步。
[0466] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.02(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝7.9Hz,2H),7.38-7.30(m,2H),7.30-7.20(m,3H),6.91-6.83(m,3H),5.98-5.86(m,1H),5.37-5.24(m,1H),5.05(s,2H),4.76-4.69(m,1H),4.56-4.46(m,1H),4.41(t,J＝9.2Hz,2H),4.48-
4.28(m,1H),3.77(s,3H),3.58-3.42(m,1H),3.32-3.15(m,1H),2.90-2.80(m,2H),2.80-
2.62(m,3H),2.08-1.92(m,1H),1.90-1.70(m,1H),1.70-1.46(m,2H),1.45-1.28(m,1H).LCMS(方法2)：[MH+]＝584，在3.47min.
4.28(m,1H),3.77(s,3H),3.58-3.42(m,1H),3.32-3.15(m,1H),2.90-2.80(m,2H),2.80-
2.62(m,3H),2.08-1.92(m,1H),1.90-1.70(m,1H),1.70-1.46(m,2H),1.45-1.28(m,1H).LCMS(方法2)：[MH+]＝584，在3.47min.
[0467] 通过与中间体23类似的方法合成下列化合物：
[0468]
[0469] 方案E
[0470]
[0471] 可以使用方案E中的方法得到实施例21-32。
[0472] 实施例21
[0473] 1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]氮杂环丁烷-3-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(E21)
[0474]
[0475] 在室温向1-(4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲酰基)氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯(I23,350mg,0.60mmol)在THF(3mL)和MeOH(3mL)中的溶液中加入LiOH水溶液(1N,1.2mL,1.2mmol)。将得到的混合物搅拌16h，然后冷却至0℃，用2N HCl酸化至pH 2。然后真空浓缩得到的混合物，与甲苯共沸至干。然后向所述羧酸在DMF中的溶液(5mL)中加入(S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(248mg,0.72mmol)，然后加入4-(二甲基氨基)-吡啶(37mg,0.30mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(230mg,1.20mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h，使其在EtOAc(50mL)与水(20mL)之间分配。用MgSO4干燥有机层，过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(3.0mL)，通过HPLC纯化，得到标题化合物(14mg,3％，2步内)，为白色固体。
[0476] 1H NMR(400MHz,DMSO，在110℃)：δ8.33(s,2H),7.60-7.55(m,2H),7.53-7.48(m,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,2H),7.32-7.26(m,4H),7.24-7.18(m,2H),7.01(t,J＝2.0Hz,1H),
6.96-6.91(m,3H),6.91-6.86(m,2H),6.06(dd,J＝9.0,4.9Hz,1H),5.81(d,J＝8.8Hz,1H),
5.13(s,2H),4.59(dtd,J＝8.3,3.5,1.3Hz,1H),4.34(t,J＝9.2Hz,2H),4.12(dd,J＝9.2,
5.9Hz,2H),3.77(s,3H),3.76(s,3H),3.59-3.48(m,1H),3.51(dd,J＝14.5,9.0Hz,1H),
3.28(dd,J＝14.2,5.0Hz,1H),3.05(dd,J＝14.8,8.2Hz,1H),2.69(t,J＝8.1Hz,3H),2.67-
2.56(m,2H),1.90-1.85(m,1H),1.76-1.69(m,1H),1.63-1.54(m,1H),1.49-1.43(m,1H),
1.33-1.25(m,1H).LCMS(方法1)：[MH+]＝895，在2.89min.
6.96-6.91(m,3H),6.91-6.86(m,2H),6.06(dd,J＝9.0,4.9Hz,1H),5.81(d,J＝8.8Hz,1H),
5.13(s,2H),4.59(dtd,J＝8.3,3.5,1.3Hz,1H),4.34(t,J＝9.2Hz,2H),4.12(dd,J＝9.2,
5.9Hz,2H),3.77(s,3H),3.76(s,3H),3.59-3.48(m,1H),3.51(dd,J＝14.5,9.0Hz,1H),
3.28(dd,J＝14.2,5.0Hz,1H),3.05(dd,J＝14.8,8.2Hz,1H),2.69(t,J＝8.1Hz,3H),2.67-
2.56(m,2H),1.90-1.85(m,1H),1.76-1.69(m,1H),1.63-1.54(m,1H),1.49-1.43(m,1H),
1.33-1.25(m,1H).LCMS(方法1)：[MH+]＝895，在2.89min.
[0477] 根据上述实施例21中所述类似的方法由适合的原料制备下文报道的化合物。
[0478]
[0479]
[0480] 方案F
[0481]
[0482] 可以使用方案F的方法得到实施例23-32的化合物。
[0483] 实施例23
[0484] (2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯(E23)
[0485]
[0486] 在0℃，向4-((S)-2-(((S)-1-(丁氧羰基)吡咯烷-2-羰基)氧基)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(I2,365mg,0.60mmol)溶于EtOAc(10mL)中的溶液中加入HCl的二噁烷溶液(4N,6mL,20mmol)。将得到的混合物在0℃搅拌1h，然后真空浓缩。将残余物再溶于DCM(50mL)，用饱和NaHCO3(20mL)洗涤。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂，得到油状物，不经进一步纯化即刻使用。在室温向羧酸、3-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸(I18,350mg,0.72mmol)和4-(二甲基氨基)-吡啶(37mg,0.30mmol)在DMF(3.0mL)中的溶液中一次加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(230mg,1.2mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h。然后加入EtOAc(50mL)和水(20mL)，分离各层，用MgSO4干燥有机层，过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(3.0mL)，通过HPLC纯化，得到(2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯基]氨基甲酰基]苯基]-磺酰基哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯，为白色固体(29mg,5％，2步)。
[0487] 1H NMR(400MHz,DMSO，在110℃)：δ8.34(s,2H),7.52-7.45(m,3H),7.40(t,J＝7.6Hz,1H),7.34(d,J＝8.2Hz,1H),7.32-7.26(m,4H),7.24-7.17(m,3H),7.12(d,J＝
8.2Hz,1H),7.04(d,J＝2.1Hz,1H),7.00(t,J＝2.0Hz,1H),6.92(dt,J＝8.8,2.1Hz,1H),
6.92(t,J＝75Hz,1H),6.89(dd,J＝8.3,2.6Hz,1H),6.08-5.93(m,1H),5.80(s,1H),5.10(s,2H),4.59-4.56(m,1H),4.51-4.47(m,1H),3.85(d,J＝6.7Hz,2H),3.49-3.41(m,2H),
3.25(dd,J＝14.1,5.1Hz,1H),3.04(dd,J＝14.8,8.4Hz,1H),2.99-2.87(m,1H),2.71-2.60(m,2H),2.66-2.49(m,3H),2.32-2.28(m,1H),1.90-1.79(m,2H),1.78(m,3H),1.64-1.52(m,1H),1.50-1.39(m,1H),1.32-1.22(m,1H),1.19-1.08(m,1H),0.52-0.47(m,2H),0.27-
0.22(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝985，在3.09min.
8.2Hz,1H),7.04(d,J＝2.1Hz,1H),7.00(t,J＝2.0Hz,1H),6.92(dt,J＝8.8,2.1Hz,1H),
6.92(t,J＝75Hz,1H),6.89(dd,J＝8.3,2.6Hz,1H),6.08-5.93(m,1H),5.80(s,1H),5.10(s,2H),4.59-4.56(m,1H),4.51-4.47(m,1H),3.85(d,J＝6.7Hz,2H),3.49-3.41(m,2H),
3.25(dd,J＝14.1,5.1Hz,1H),3.04(dd,J＝14.8,8.4Hz,1H),2.99-2.87(m,1H),2.71-2.60(m,2H),2.66-2.49(m,3H),2.32-2.28(m,1H),1.90-1.79(m,2H),1.78(m,3H),1.64-1.52(m,1H),1.50-1.39(m,1H),1.32-1.22(m,1H),1.19-1.08(m,1H),0.52-0.47(m,2H),0.27-
0.22(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝985，在3.09min.
[0488]
[0489]
[0490]
[0491]
[0492]
[0493]
[0494]
[0495]
[0496]
[0497] 实施例29
[0498] (2S)-3-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯甲酰基]噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯(E29)
[0499]
[0500] 向搅拌的4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)-氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲酸(I17,61mg,0.125mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入(2S)-噻唑烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯盐酸盐(I5,71mg,0.125mmol)，然后加入DMAP(8mg,0.06mmol)和EDC·HCl(48mg,0.25mmol)。将该混合物在室温搅拌18h，然后真空除去溶剂。使残余物在乙酸乙酯(10mL)与饱和碳酸氢钠溶液(10mL)之间分配。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。通过制备型HPLC进行筹划，得到标题化合物，为白色固体(43mg,34％)。1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.57(s,2H),8.23(d,J＝9.4Hz,1H),7.58-7.42(m,4H),7.37-6.87(m,12H),7.10(t,J＝74.4Hz,1H),6.08-5.97(m,1H),5.84(d,J＝9.1Hz,1H),5.58-5.48(m,
1H),5.16(s,2H),4.60-4.53(m,1H),4.00-3.88(m,1H),3.88(d,J＝7.0Hz,2H),3.83-3.73(m,1H),3.55-2.92(m,5H),2.79-2.31(m,5H),1.93-1.13(m,6H),0.58-0.52(m,2H),0.32-
0.26(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝1003，在3.16min.
1H),5.16(s,2H),4.60-4.53(m,1H),4.00-3.88(m,1H),3.88(d,J＝7.0Hz,2H),3.83-3.73(m,1H),3.55-2.92(m,5H),2.79-2.31(m,5H),1.93-1.13(m,6H),0.58-0.52(m,2H),0.32-
0.26(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝1003，在3.16min.
[0501] 通过类似方法合成下列化合物：
[0502]
[0503]
[0504] 中间体25
[0505] (S)-1-((4-硝基苯基)磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(I25)
[0506]
[0507] 在0℃，向(S)-脯氨酸甲酯盐酸盐(2.5g,15.2mmol)在DCM(20mL)中的溶液中加入吡啶(2.6mL,33mmol)和4-硝基苯磺酰氯(3.06g,13.8mmol)。将得到的混合物在室温搅拌18h，然后用EtOAc(100mL)稀释。用1N HCl(20mL)、盐水(20mL)洗涤有机相，用MgSO4干燥。过滤该混合物，真空除去溶剂，得到粗黄色固体，不经进一步纯化用于下一步。
[0508] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.39-8.35(m,2H),8.10-8.06(m,2H),4.47(dd,J＝8.6,3.7Hz,1H),3.71(s,3H),3.51-3.42(m,2H),2.23-2.08(m,1H),2.09-1.96(m,2H),1.98-
1.84(m,1H).LCMS(方法2)：[MH+]＝315，在3.22min.
1.84(m,1H).LCMS(方法2)：[MH+]＝315，在3.22min.
[0509] 中间体26
[0510] (S)-1-((4-氨基苯基)磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(I26)
[0511]
[0512] 向(S)-1-((4-硝基苯基)磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(642mg,2.0mmol)在EtOAc(10mL)中的溶液中加入SnCl2·2H2O(2.02g,9.0mmol)。将得到的混合物在室温搅拌2d，用EtOAc(50mL)和1N NaOH(10mL)稀释。分离各层，再用EtOAc(2×50mL)萃取水相，盐水(30mL)洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥。过滤该混合物，真空除去溶剂，得到标题化合物，为白色固体(531mg,93％)。
[0513] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.68-7.62(m,2H),6.72-6.66(m,2H),4.26(dd,J＝8.0,4.3Hz,1H),4.15-4.08(m,2H),3.73(s,3H),3.49-3.42(m,1H),3.32-3.24(m,1H),2.08-
1.88(m,3H),1.80-1.69(m,1H).LCMS(方法1)：[MH+]＝285，在3.07min.
1.88(m,3H),1.80-1.69(m,1H).LCMS(方法1)：[MH+]＝285，在3.07min.
[0514] 中间体27
[0515] (S)-1-((4-(3-((S)-((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)苯甲酰氨基)苯基)-磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(I27)
[0516]
[0517] 根据与实施例29中所述相同的方法，由中间体26和中间体10制备(S)-1-((4-(3-((S)-((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)苯甲酰氨基)苯基)-磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯。
[0518] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.41(s,1H),7.85-7.74(m,6H),7.47-7.41(m,2H),7.36-7.24(m,3H),7.20(d,J＝7.4Hz,2H),5.93(s,1H),5.28(s,1H),4.30(dd,J＝7.9,4.1Hz,
1H),3.72(s,3H),3.53-3.45(m,1H),3.35-3.28(m,1H),2.07-1.92(m,3H),1.84-1.72(m,
1H),1.44(s,9H).LCMS(方法2)：[MH+]＝594，在4.15min.
1H),3.72(s,3H),3.53-3.45(m,1H),3.35-3.28(m,1H),2.07-1.92(m,3H),1.84-1.72(m,
1H),1.44(s,9H).LCMS(方法2)：[MH+]＝594，在4.15min.
[0519] 中间体28
[0520] (S)-1-((4-((3-((S)-((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)苯氧基)甲基)苯基)-磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(I28)
[0521]
[0522] 在0℃，向(S)-脯氨酸甲酯盐酸盐(1.6g,9.65mmol)在THF(20mL)中的混合物中加入Et3N(1.34mL,9.65mmol)。将该反应混合物在室温搅拌30min，冷却回0℃，然后向浆料中加入3-溴甲基-苯磺酰氯(2.6g,9.65mmol)和Et3N(1.34mL,9.65mmol)。将得到的混合物在室温搅拌3h，然后用EtOAc(100mL)稀释。用水(2×50mL)、盐水(20mL)洗涤有机相，用MgSO4干燥。真空除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化粗产物，用0-20％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到550mg(S)-1-((3-(溴甲基)苯基)磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯，不经进一步纯化用于下一步。将该残余物溶于丙酮(20mL)，转入微波小瓶。加入(S)-((3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(I8,251mg,1.82mmol)和K2CO3(546mg,1.82mmol)，将该混合物在微波照射下加热至130℃1h。将该混合物在室温搅拌18h，使其在EtOAc(50mL)与水(20mL)之间分配。分离各层，用EtOAc(3×30mL)萃取水相，通过HPLC纯化(30mL)，用MgSO4干燥。过滤该混合物，真空除去溶剂。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-20％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物(636mg,60％)。
[0523] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.88(d,J＝8.2Hz,2H),7.55(d,J＝8.1Hz,2H),7.35-7.21(m,6H),6.92-6.82(m,3H),5.87(s,1H),5.14(s,1H),5.08(s,2H),4.37-4.31(m,1H),
3.70(s,3H),3.52-3.46(m,1H),3.37-3.30(m,1H),2.07-1.94(m,3H),1.85-1.73(m,1H),
1.44(s,9H).LCMS(方法1)：[MH+]＝581，在4.53min.
3.70(s,3H),3.52-3.46(m,1H),3.37-3.30(m,1H),2.07-1.94(m,3H),1.85-1.73(m,1H),
1.44(s,9H).LCMS(方法1)：[MH+]＝581，在4.53min.
[0524] 通过与中间体28相同的方法合成下列中间体：
[0525]
[0526]
[0527] (接续)
[0528]
[0529]
[0530] (接续)
[0531]
[0532] 中间体35
[0533] (S)-1-((4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)苯氧基)-甲基)苯基)磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(I35)
[0534]
[0535] 在0℃，向(S)-1-((4-((3-((S)-((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)-苯氧基)甲基)苯基)-磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(I28,636mg,1.1mmol)在DCM(10mL)中的混合物中加入TFA(3mL)。将该反应混合物温热至室温，搅拌30min，然后真空浓缩。用DCM(50mL)稀释残余物，用饱和NaHCO3水溶液(50mL)洗涤。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。将残余物(436mg)溶于吡啶(4mL)，将该反应混合物冷却至0℃。加入氯甲酸(R)-奎宁环-3-基酯盐酸盐(207mg,0.92mmol,如上述I6中报道的制备,步骤6)，将得到的混合物在室温搅拌16h。在0℃再加入(R)-氯甲酸奎宁环-3-基酯盐酸盐(104mg,0.46mmol)，将该混合物搅拌
2h，然后用EtOAc(50mL)和水(20mL)稀释。分离各层，用MgSO4干燥有机相。过滤该混合物，真空除去溶剂，得到576mg粗标题产物，为浓稠油状物，不经进一步纯化用于下一步。
2h，然后用EtOAc(50mL)和水(20mL)稀释。分离各层，用MgSO4干燥有机相。过滤该混合物，真空除去溶剂，得到576mg粗标题产物，为浓稠油状物，不经进一步纯化用于下一步。
[0536] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.88(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(d,J＝8.0Hz,2H),7.36-7.21(m,6H),6.88(m,3H),5.95-5.86(m,1H),5.52-5.36(m,1H),5.10(s,2H),4.90(s,1H),
4.36-4.31(m,1H),3.70(s,3H),3.52-3.45(m,1H),3.40-3.30(m,1H),3.21-3.06(m,2H),
3.05-2.91(m,3H),2.34-2.19(m,1H),2.09-1.90(m,2H),1.88-1.68(m,2H).LCMS(方法1)：
[MH+]＝634，在2.86min.
4.36-4.31(m,1H),3.70(s,3H),3.52-3.45(m,1H),3.40-3.30(m,1H),3.21-3.06(m,2H),
3.05-2.91(m,3H),2.34-2.19(m,1H),2.09-1.90(m,2H),1.88-1.68(m,2H).LCMS(方法1)：
[MH+]＝634，在2.86min.
[0537] 使用与中间体35类似的方法合成下列中间体。
[0538]
[0539]
[0540]
[0541] (接续)
[0542]
[0543]
[0544]
[0545] 方案G
[0546]
[0547] 可以使用方案G中的方法得到实施例32-44。
[0548] 实施例32
[0549] (2S)-1-[4-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]苯基]磺酰基吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯甲酸盐(E32)
[0550]
[0551] 在室温向(S)-1-((4-((3-((S)-苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯基)磺酰基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(I35,576mg,0.91mmol)在THF(4mL)和MeOH(4mL)中的溶液中加入LiOH水溶液(1N,1.8mL,1.8mmol)。将得到的混合物搅拌16h，然后冷却至0℃，用2N HCl酸化至pH 2。然后真空浓缩得到的混合物，与甲苯共沸至干。将得到的羧酸再溶于DMF(9.0mL)。然向所述酸在DMF(3mL,0.30mmol)中的溶液中加入(S)-3,5-二氯-4-(2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(151mg,0.36mmol)，然后加入4-(二甲基氨基)-吡啶(18mg,0.15mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(151mg,0.60mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h，使其在EtOAc(50mL)与水(20mL)之间分配。用MgSO4干燥有机层，过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1.5mL)，通过HPLC纯化，得到标题化合物(90mg,29％，2步)，为白色固体。
[0552] 1H NMR(400MHz,DMSO，在110℃)：δ8.62(s,2H),8.27(d,J＝9.7Hz,1H),8.22(s,1H),7.79(d,J＝8.1Hz,2H),7.69(d,J＝8.1Hz,2H),7.34-7.29(m,4H),7.31-7.20(m,2H),
7.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.15(s,1H),7.05(t,J＝75Hz,1H),7.04(bs,1H),6.98(t,J＝
7.6Hz,2H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),6.03(dd,J＝9.7,4.5Hz,1H),5.83(d,J＝9.2Hz,1H),
5.20(s,2H),4.66-4.58(m,1H),4.14(dd,J＝8.7,4.0Hz,1H),3.93(d,J＝7.0Hz,2H),3.47(dd,J＝14.2,9.8Hz,1H),3.39(dt,J＝9.9,6.1Hz,1H),3.27(dd,J＝14.2,4.5Hz,1H),
3.21-3.12(m,2H),2.86-2.76(m,1H),2.76-2.64(m,2H),2.60(d,J＝16.2Hz,1H),2.56-
2.46(m,1H),2.00-1.88(m,2H),1.89-1.76(m,1H),1.71-1.60(m,3H),1.55-1.47(m,2H),
1.45-1.34(m,1H),1.25-1.17(m,1H),0.61-0.53(m,2H),0.36-0.31(m,2H).LCMS(方法1)：
[MH+]＝1021，在3.22min.
7.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.15(s,1H),7.05(t,J＝75Hz,1H),7.04(bs,1H),6.98(t,J＝
7.6Hz,2H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),6.03(dd,J＝9.7,4.5Hz,1H),5.83(d,J＝9.2Hz,1H),
5.20(s,2H),4.66-4.58(m,1H),4.14(dd,J＝8.7,4.0Hz,1H),3.93(d,J＝7.0Hz,2H),3.47(dd,J＝14.2,9.8Hz,1H),3.39(dt,J＝9.9,6.1Hz,1H),3.27(dd,J＝14.2,4.5Hz,1H),
3.21-3.12(m,2H),2.86-2.76(m,1H),2.76-2.64(m,2H),2.60(d,J＝16.2Hz,1H),2.56-
2.46(m,1H),2.00-1.88(m,2H),1.89-1.76(m,1H),1.71-1.60(m,3H),1.55-1.47(m,2H),
1.45-1.34(m,1H),1.25-1.17(m,1H),0.61-0.53(m,2H),0.36-0.31(m,2H).LCMS(方法1)：
[MH+]＝1021，在3.22min.
[0553]
[0554]
[0555]
[0556]
[0557]
[0558]
[0559]
[0560]
[0561]
[0562]
[0563]
[0564]
[0565]
[0566] 中间体43
[0567] (S)-((3-氨基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(I43)
[0568]
[0569] 在室温向(S)-3-(((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)苯甲酸(100mg,0.31mmol)、Et3N(0.17mL,1.24mmol)和苄醇(0.26mL,2.48mmol)在二噁烷(1.5mL)中的溶液中加入二苯基磷酰基叠氮化物(93mg,0.34mmol)。将得到的混合物加热至回流24h，冷却至室温，在EtOAc(30mL)与水(20mL)之间分配。分离各层，用MgSO4干燥有机相。过滤该混合物，真空除去溶剂。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-20％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到相应的化合物N-[(S)-[3-(苄基氧基羰基氨基)苯基]-苯基-甲基]氨基甲酸叔丁酯，为白色固体(125mg)。向所述固体(125mg,0.29mg)在EtOAc(4mL)中的溶液中加入10％Pd/C(140mg)和甲酸铵(200mg,3.07mmol)。将得到的浆料回流2h。然后在室温用C盐过滤该反应混合物，用EtOAc(50mL)洗涤滤饼，真空浓缩滤液。得到的油状物放置固化，得到标题化合物(42mg,45％，2步内)，为白色固体。
[0570] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.35-7.21(m,5H),7.09(t,J＝7.7Hz,1H),6.63(d,J＝7.7Hz,1H),6.56(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),6.53(s,1H),5.80(s,1H),5.16(s,1H),3.49-2.70(m,2H),1.43(s,9H).LCMS(方法1)：[MH+]＝299，在3.45min.
[0571] 方案H
[0572]
[0573] 可以使用方案H的方法得到实施例45的化合物。
[0574] 实施例45
[0575] (2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯基]氨基甲酰基]苯基]磺酰基哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯(E45)
[0576]
[0577] 在0℃，向4-((S)-2-(((S)-1-(叔丁氧羰基)哌啶-2-羰基)氧基)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(I4,88mg,0.14mmol)溶于EtOAc(3mL)中的溶液中加入HCl的二噁烷溶液(4N,1.8mL,7.2mmol)。将得到的混合物温热至室温，搅拌1h，然后真空浓缩。将残余物再溶于DCM(50mL)，用饱和NaHCO3(20mL)洗涤。用疏水性玻璃料过滤器分离各层，浓缩有机相至得到油状物，不经进一步纯化即刻使用。将所述残余物溶于丙酮(1mL)和THF(1mL)。在室温加入3-氯磺酰基苯甲酸(268mg,1.22mmol)和2M NaOH(2.44mL)，将得到的混合物搅拌16h。真空除去溶剂，然后用DCM(50mL)稀释，用盐水饱和的1N HCl水溶液将pH调整至2。用MgSO4干燥有机相，过滤，真空除去溶剂。得到的油状物在放置时固化，不经进一步纯化直接用于下一步。
[0578] 在室温向所述羧酸、(S)-((3-氨基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(I43,42mg,0.14mmol)、4-(二甲基氨基)-吡啶(8mg,0.07mmol)在DMF(1.4mL)中的溶液中一次加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(54mg,0.28mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h。然后加入EtOAc(50mL)和水(20mL)，分离各层，用MgSO4干燥有机层，过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于DCM(2mL)。在0℃加入TFA(1mL)。将该混合物在0℃搅拌1h。真空除去溶剂，将残余物溶于DCM(30mL)和饱和水溶液NaHCO3(20mL)。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂。将残余物溶于吡啶(1mL)，在0℃加入氯甲酸(R)-奎宁环-3-基酯盐酸盐(32mg,0.14mmol)。将得到的混合物在室温搅拌18h，然后用EtOAc(50mL)和水(20mL)稀释。分离各层，用MgSO4干燥有机相。过滤该混合物，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1mL)，通过HPLC纯化2次，得到(2S)-1-[3-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯基]氨基甲酰基]苯基]磺酰基哌啶-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯，为白色固体(8mg,
5％，3步)。
5％，3步)。
[0579] 1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ9.24(s,1H),8.29(s,1H),8.19(d,J＝7.4Hz,1H),8.16(s,2H),7.91(d,J＝7.8Hz,1H),7.78(s,1H),7.71-7.63(m,2H),7.41-7.34(m,4H),7.34-7.28(m,1H),7.15-7.09(m,2H),7.02(d,J＝2.0Hz,1H),6.89(dd,J＝8.2,2.0Hz,2H),6.68(t,J＝75.4Hz,1H),5.96-5.89(m,2H),5.00-4.94(m,1H),4.67(d,J＝5.4Hz,1H),3.90(dd,J＝10.1,7.2Hz,1H),3.85(dd,J＝10.2,7.2Hz,1H),3.78(d,J＝13.0Hz,1H),3.65-3.51(m,
1H),3.46(dd,J＝14.0,8.8Hz,1H),3.37-3.09(m,6H),2.74-2.11(m,8H),1.89-1.65(m,
1H),1.60(d,J＝12.9Hz,2H),1.45-1.28(m,1H),1.28-1.18(m,1H),1.10-0.97(m,1H),
0.66-0.58(m,2H),0.37-0.32(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝1048，在3.23min.
1H),3.46(dd,J＝14.0,8.8Hz,1H),3.37-3.09(m,6H),2.74-2.11(m,8H),1.89-1.65(m,
1H),1.60(d,J＝12.9Hz,2H),1.45-1.28(m,1H),1.28-1.18(m,1H),1.10-0.97(m,1H),
0.66-0.58(m,2H),0.37-0.32(m,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝1048，在3.23min.
[0580] 方案I
[0581]
[0582] 可以使用方案I的方法得到实施例46的化合物。
[0583] 实施例46
[0584] (2S)-1-[2-[4-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氧基苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯三氟乙酸盐(E46)
[0585]
[0586] 在0℃，向4-((S)-2-(((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-羰基)氧基)-2-(3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(I2,222mg,0.36mmol)溶于EtOAc(10mL)中的溶液中加入HCl的二噁烷溶液(4N,12mL,28mmol)。将得到的混合物温热至室温，搅拌16h，真空除去溶剂。将残余物再溶于DCM(50mL)，用饱和NaHCO3水溶液(20mL)洗涤。使有机相通过疏水性玻璃料过滤器，真空除去溶剂，得到油状物，不经进一步纯化即刻使用。
[0587] 向来自上述步骤中的油状物在乙腈中的溶液(2mL)中加入4-(2-溴乙基)-苯酚(101mg,0.50mmol)，然后加入Et3N(0.1mL,0.72mmol)。将该混合物在130℃在微波照射下加热1h。加入EtOAc(100mL)和水(40mL)，分离各层，用盐水(40mL)洗涤有机相，用MgSO4干燥。过滤该混合物，真空除去溶剂。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-20％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到相应的苯酚，为油状物(60mg)。
[0588] 然后将上面得到的所述苯酚溶于DCM(5mL)，加入(S)-3-(((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)苯甲酸(I10,34mg,0.10mmol)，然后加入4-(二甲基氨基)-吡啶(5mg,0.05mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(35mg,1.0mmol)。将得到的混合物在室温搅拌18h。真空除去溶剂，使残余物在EtOAc(50mL)与饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)之间分配。用MgSO4干燥有机层，过滤，真空除去溶剂。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-10％MeOH的DCM溶液洗脱，得到相应的双酯化合物(70mg)。然后将所述油状物再溶于DCM(3mL)，在0℃加入TFA(1mL)。将该混合物在室温搅拌1h，然后真空除去溶剂。用DCM(30mL)和饱和水溶液NaHCO3(20mL)稀释残余物，使分离的有机相通过疏水性玻璃料过滤器。真空除去溶剂，将残余物溶于吡啶(1mL)，在0℃加入氯甲酸(R)-奎宁环-3-基酯盐酸盐(20mg,0.089mmol)。将得到的混合物在室温搅拌18h，然后用EtOAc(50mL)和水(20mL)稀释。分离各层，用MgSO4干燥有机相。过滤该混合物，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1.5mL)，通过HPLC纯化，得到(2S)-1-[2-[4-[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酰基]氧基苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酸[(1S)-1-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)乙基]酯，为白色固体(6mg,2％，5步)。
[0589] 1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ8.08(s,2H),8.00(s,1H),7.98(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝7.8Hz,1H),7.47(t,J＝7.7Hz,1H),7.33-7.25(m,2H),7.27-7.19(m,2H),7.19(d,J＝8.3Hz,2H),7.10(t,J＝8.2Hz,2H),7.05(d,J＝8.3Hz,1H),7.01(d,J＝2.0Hz,1H),6.88(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),6.73-6.67(m,1H),6.67(t,J＝75Hz,1H),5.93-5.86(m,2H),4.90-4.81(m,1H),4.03(t,J＝8.0Hz,1H),3.83-3.77(m,2H),3.74-3.62(m,1H),3.50-3.41(m,
1H),3.47(dd,J＝14.6,8.7Hz,1H),3.40-3.28(m,1H),3.21(dd,J＝14.4,5.5Hz,1H),3.17-
3.09(m,3H),3.09-2.97(m,4H),2.92(t,J＝8.8Hz,3H),2.13-1.95(m,4H),1.95-1.87(m,
2H),1.81-1.67(m,2H),1.21-1.09(m,2H),0.55-0.49(m,2H),0.27-0.22(m,2H).LCMS(方法
1)：[MH+]＝999，在2.73min.
1H),3.47(dd,J＝14.6,8.7Hz,1H),3.40-3.28(m,1H),3.21(dd,J＝14.4,5.5Hz,1H),3.17-
3.09(m,3H),3.09-2.97(m,4H),2.92(t,J＝8.8Hz,3H),2.13-1.95(m,4H),1.95-1.87(m,
2H),1.81-1.67(m,2H),1.21-1.09(m,2H),0.55-0.49(m,2H),0.27-0.22(m,2H).LCMS(方法
1)：[MH+]＝999，在2.73min.
[0590] 中间体44
[0591] (S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-((4-(羟基甲基)苯甲酰基)氧基)乙基)吡啶1-氧化物(I44)
[0592]
[0593] 将(S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基)吡啶1-氧化物(0.688g,2mmol)、4-甲酰基苯甲酸(0.300g,2mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.767g,4mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(0.122g,1mmol)在无水DCM(30mL)中的溶液在RT搅拌21h。使该反应混合物在饱和NaHCO3水溶液(20mL)与DCM(10mL)之间分配，通过相分离器过滤。真空除去溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化粗物质，用1：1DCM：EtOAc洗脱，得到(S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-((4-甲酰基苯甲酰基)氧基)乙基)吡啶1-氧化物，为灰白色固体(0.863g,91％)。
[0594] 向搅拌的(S)-3,5-二氯-4-(2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-((4-甲酰基苯甲酰基)氧基)乙基)吡啶1-氧化物(412mg,0.87mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入3-氨基哒嗪(165mg,1.73mmol)，然后加入冰醋酸(150μL,2.61mmol)。将该反应混合物在室温搅拌30分钟，然后加入NaB(OAc)3H(551mg,2.61mmol)。将该反应混合物在室温搅拌18小时。用DCM(10mL)稀释该反应体系，用水使反应停止。用饱和NaHCO3水溶液洗涤有机相，通过疏水性玻璃料过滤器过滤，蒸发至干。将残余物与DCM(2mL)和CH3CN(5mL)一起研磨。通过过滤采集固体，用DCM洗涤，干燥，得到标题化合物(300mg,72％)，为白色固体。
[0595] LCMS(方法1)：[MH+]＝478，在3.21min.
[0596] 中间体45
[0597] 4-((S)-2-((4-(((3-((S)-((叔丁氧羰基)氨基)(苯基)甲基)-苯甲酰基)氧基)甲基)苯甲酰基)氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)-3,5-二氯吡啶1-氧化物(I45)
[0598]
[0599] 根据与对制备实施例29所述相同的方法由中间体44和中间体10制备中间体45。
[0600] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.12(s,2H),8.04-7.96(m,4H),7.48-7.28(m,8H),7.22-7.19(m,2H),7.02-6.98(m,2H),6.85(d,J＝8.4Hz,1H),6.29(dd,J＝4.4,9.6Hz,1H),5.98-
5.89(brs,1H),5.39(s,2H),3.90(s,3H),3.87(s,3H),3.72(dd,J＝9.6,14.0Hz,1H),3.33(dd,J＝4.4,14.0Hz,1H),1.58(s,9H).LCMS(方法1)：[MH+]＝787，在4.58min.
5.89(brs,1H),5.39(s,2H),3.90(s,3H),3.87(s,3H),3.72(dd,J＝9.6,14.0Hz,1H),3.33(dd,J＝4.4,14.0Hz,1H),1.58(s,9H).LCMS(方法1)：[MH+]＝787，在4.58min.
[0601] 方案L
[0602]
[0603] 使用方案L中的方法得到实施例47。
[0604] 实施例47
[0605] 3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯甲酸[4-[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙氧基]羰基苯基]甲酯(E47)[0606]
[0607] 根据与对制备中间体35所述相同的方法由中间体45制备实施例47。
[0608] 1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ8.18(s,2H),8.08(d,J＝8.4Hz,2H),7.99-7.97(m,2H),7.60-7.49(m,4H),7.40-7.31(m,5H),7.10-7.05(m,2H),6.95(d,J＝8.0H z,1H),6.68-
6.57(brs,1H),6.25(dd,J＝4.4,9.6Hz,1H),5.98(d,J＝8.0Hz,1H),5.41(s,2H),4.76-
4.74(m,1H),3.84(s,3H),3.82(s,3H),3.71(dd,J＝9.6,14.0Hz,1H),3.38(dd,J＝4.4,
14.0Hz,1H),3.27-3.23(m,1H),2.91-2.73(m,5H),2.15-2.12(m,1H),1.80-1.32(m,4H).LCMS(方法1)：[MH+]＝840，在3.00min.
6.57(brs,1H),6.25(dd,J＝4.4,9.6Hz,1H),5.98(d,J＝8.0Hz,1H),5.41(s,2H),4.76-
4.74(m,1H),3.84(s,3H),3.82(s,3H),3.71(dd,J＝9.6,14.0Hz,1H),3.38(dd,J＝4.4,
14.0Hz,1H),3.27-3.23(m,1H),2.91-2.73(m,5H),2.15-2.12(m,1H),1.80-1.32(m,4H).LCMS(方法1)：[MH+]＝840，在3.00min.
[0609] 中间体46
[0610] 5-((4-苯甲酰基苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(I46)
[0611]
[0612] 在0℃，在氮气气氛中向搅拌的4-羟基二苯甲酮(198.2mg,1.0mmol)在DMF(3mL)的溶液中加入碳酸钾(207mg,1.5mmol)，然后加入5-氯甲基-2-糠酸甲基酯(175mg,1.0mmol)。将该反应体系温热至室温，将该混合物在室温搅拌24h。使该反应混合物在水与乙酸乙酯之间分配。用乙酸乙酯将水相萃取2次，用10％K2CO3水溶液、水、盐水洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤，真空除去溶剂，得到标题化合物(330mg,98.2％)，为黄色油状物。
[0613] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.84-7.74(m,3H),7.59-7.55(m,3H),7.49-7.45(m,1H),7.18-7.17(m,1H),7.03-7.01(m,2H),6.57-6.56(m,1H),5.14(s,2H),3.91(s,3H).LCMS(方法2)：[M-OH+]＝337，在4.05min.
[0614] 中间体47
[0615] 5-((4-(羟基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(I47)
[0616]
[0617] 将5-((4-苯甲酰基苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(330mg,1.0mmol)在甲醇(5mL)和THF(5mL)中的溶液冷却至0℃。一次加入NaBH4(58mg,1.53mmol)，将该反应体系在0℃搅拌2小时。通过添加水(0.75mL)使反应停止。将该混合物搅拌10分钟，真空除去大部分溶剂。使残余物在EtOAc与水之间分配，水相用EtOAc萃取2次，用盐水洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤，真空除去溶剂，得到标题化合物(325mg,96.1％)，为黄色油状物。
[0618] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.38-7.24(m,7H),7.14(d,J＝3.6Hz,1H),6.93-6.89(m,2H),6.50(d,J＝3.6Hz,1H),5.81(d,J＝3.6Hz,1H),5.04(s,2H),3.90(s,3H),2.13(d,J＝
3.6Hz,1H).LCMS(方法2)：[M-OH+]＝321，在4.38min.
3.6Hz,1H).LCMS(方法2)：[M-OH+]＝321，在4.38min.
[0619] 中间体48
[0620] 5-((4-(叠氮基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(I48)
[0621]
[0622] 在氮气气氛中向搅拌的5-((4-(羟基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(325mg,0.96mmol)在甲苯(4.5mL)的溶液中加入二苯基磷酰基叠氮化物(0.25mL,1.15mmol)，然后加入DBU(0.17mL,1.15mmol)。将该反应体系在100℃加热3h。通过添加饱和氯化铵溶液使反应停止。用乙酸乙酯(×2)萃取水相，用盐水洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤，真空除去溶剂。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-25％EtOAc的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(293mg,84％)。
[0623] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.38-7.19(m,8H),7.16-7.15(m,1H),6.95-6.91(m,2H),6.52-6.51(m,1H),5.05(s,2H),3.89(s,3H).LCMS(方法2)：[M-N2+]＝338和[M-N3+]＝321，在4.38min.
[0624] 中间体49
[0625] 5-((4-(氨基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(I49)
[0626]
[0627] 向聚合物支持的三苯膦(633mg,0.89mmol)在THF(3mL)中的混悬液中加入5-((4-(叠氮基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(293mg,0.81mmol)在THF(6.1mL)和H2O(0.12mL)中的溶液。极为缓慢地搅拌该反应体系，在60℃加热18h。加入聚合物支持的三苯膦(300mg)和水(62μL)，在60℃持续加热5h。然后将该反应体系冷却至室温。通过过滤除去树脂，用THF和DCM洗涤2次。用MgSO4干燥合并的有机相，过滤，真空除去溶剂，得到标题化合物(301mg)，不经进一步纯化用于下一步。
[0628] 1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.37-7.19(m,8H),7.15-7.14(m,1H),3.60-6.87(m,2H),6.50-6.49(m,1H),5.03(s,2H),3.91(s,3H),1.59(brs,2H).LCMS(方法1)：[MH+]＝338，在
2.56min.
2.56min.
[0629] 中间体50
[0630] 5-((4-(苯基((((R)-奎宁环-3-基氧基)羰基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(I50)
[0631]
[0632] 在0℃，在氮气气氛中向搅拌的5-((4-(氨基(苯基)甲基)苯氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯(301mg,0.894mmol)在无水吡啶(5mL)的溶液中一次加入氯甲酸(R)-奎宁环-3-基酯盐酸盐(243mg,1.07mmol,如上述I6步骤6中所述制备)。将该反应混合物在室温搅拌3天。通过添加10％K2CO3溶液使反应停止，用乙酸乙酯(3x20mL)萃取，通过HPLC纯化，用MgSO4干燥，过滤，真空除去溶剂。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-10％7N甲醇氨的乙酸乙酯溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(280mg,64％)。
[0633] LCMS(方法1)：[MH+]＝491，在2.75min.
[0634] 方案M
[0635]
[0636] 可以使用方案M中的方法得到实施例48-49。
[0637] 实施例48
[0638] 5-[[4-[苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]呋喃-2-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐(E48)
[0639]
[0640] 根据与对制备实施例32所述相同的方法由中间体50制备实施例E48。
[0641] 1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.55(s,2H),8.24-8.17(m,2H),7.37-7.19(m,8H),7.03-6.94(m,5H),6.78(d,J＝3.5Hz,1H),6.13(dd,J＝9.4,4.5Hz,1H),5.80(d,J＝9.2Hz,1H),
5.11(s,2H),4.63-4.56(m,1H),3.77(s,3H),3.75(s,3H),3.58(dd,J＝14.2,9.5Hz,1H),
3.31(dd,J＝14.1,4.6Hz,1H),3.20-3.10(m,1H),2.85-2.53(m,5H),1.97-1.75(m,2H),
1.68-1.31(m,3H).LCMS(方法1)：[MH+]＝802，在2.84min.
5.11(s,2H),4.63-4.56(m,1H),3.77(s,3H),3.75(s,3H),3.58(dd,J＝14.2,9.5Hz,1H),
3.31(dd,J＝14.1,4.6Hz,1H),3.20-3.10(m,1H),2.85-2.53(m,5H),1.97-1.75(m,2H),
1.68-1.31(m,3H).LCMS(方法1)：[MH+]＝802，在2.84min.
[0642] 通过相同方法制备下列化合物。
[0643]
[0644] 中间体51
[0645] 2-[[3-[(S)-(叔丁氧羰基氨基)-苯基-甲基]苯氧基]甲基]噁唑-4-甲酸甲酯(I51)
[0646]
[0647] 在0℃，在氮气气氛中向搅拌的(S)-((3-羟基苯基)(苯基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(I8,1g,3.34mmol)在DMF(9.4mL)的溶液中加入K2CO3(0.693g,5.01mmol)，然后加入2-(氯甲基)噁唑-4-甲酸甲酯(0.586g,3.34mmol)。在0℃10分钟后，将该反应体系温热至室温，持续搅拌21h。然后使该反应混合物在水(10mL)与乙酸乙酯(10mL)之间分配。用乙酸乙酯(2×20mL)萃取水相，用MgSO4干燥合并的有机相，过滤，然后真空浓缩，得到标题化合物(1.66g)，为灰白色固体。所述残余物不经进一步纯化用于下一步。
[0648] LCMS(方法1)：[MH+]＝439，在4.22min.
[0649] 中间体52
[0650] 2-[[3-[(S)-(叔丁氧羰基氨基)-苯基-甲基]苯氧基]甲基]噁唑-4-甲酸(I52)[0651]
[0652] 向搅拌的2-[[3-[(S)-(叔丁氧羰基氨基)-苯基-甲基]苯氧基]甲基]噁唑-4-甲酸甲酯(0.8g,1.825mmol)在THF(9.2mL)和甲醇(9.2mL)中的溶液中加入一水合氢氧化锂(153.1mg,3.65mmol)在水(3.6mL)中的溶液。将该反应混合物在室温搅拌18h。真空除去大部分溶剂。用水(50mL)稀释残余物，冷却至0℃。滴加2N HCl水溶液(1.82mL)。用乙酸乙酯(3×20mL)萃取该反应混合物，用盐水洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，得到标题化合物，为无色固体(736mg,95％)。
[0653] LCMS(方法2)：[MH+]＝425，在2.54min.
[0654] 中间体53
[0655] 2-[[3-[(S)-(叔丁氧羰基氨基)-苯基-甲基]苯氧基]甲基]噁唑-4-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(I57)
[0656]
[0657] 向搅拌的2-[[3-[(S)-(叔丁氧羰基氨基)-苯基-甲基]苯氧基]甲基]噁唑-4-甲酸(350mg,0.825mmol)在DMF(12.3mL)中的混悬液中加入(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙醇(284mg,0.825mmol)、DMAP(50.4mg,0.412mmol)和EDC盐酸盐(316.2mg,1.65mmol)。将该反应混合物在室温搅拌23h。真空除去大部分DMF，使残余物在乙酸乙酯(30mL)与饱和NaHCO3水溶液(30mL)之间分配。用乙酸乙酯(20mL)将水相萃取2次，用盐水洗涤合并的有机，用MgSO4干燥，过滤，然后真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用0-50％EtOAc的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物(225.6mg,36％)，为无色固体。
[0658] LCMS(方法2)：[MH+]＝750，在3.61min.
[0659] 方案N
[0660]
[0661] 使用方案N的方法可以得到实施例50。
[0662] 实施例50
[0663] 2-[[3-[(S)-苯基-[[(3R)-奎宁环-3-基]氧基羰基氨基]甲基]苯氧基]甲基]噁唑-4-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯甲酸盐(E50)
[0664]
[0665] 向搅拌的2-[[3-[(S)-(叔丁氧羰基氨基)-苯基-甲基]苯氧基]甲基]-噁唑-4-甲酸[(1S)-2-(3,5-二氯-1-氧化-吡啶-1-鎓-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基]酯(I53,214mg,0.285mmol)在DCM(1.5mL)中的溶液中加入一水合对甲苯磺酸(81.2mg,0.42mmol)。
将该反应混合物在室温搅拌18h。用甲醇(2mL)稀释该反应混合物，加载到SCX柱上。然后用甲醇洗涤SCX柱，用2.3N甲醇的氨溶液洗脱产物。真空浓缩包含氨的级分。在0℃在氮气气氛中将所述残余物溶于无水吡啶(0.92mL)，一次加入氯甲酸(R)-奎宁环-3-基酯盐酸盐(48.3mg,0.213mmol,如上述Int6中步骤6所述制备)。将该反应混合物在室温搅拌2天。通过添加10％K2CO3溶液使反应停止，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取，用盐水洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1.5mL)，通过HPLC纯化，得到标题化合物(21.4mg,9.3％，2步内)，为黄色固体。
将该反应混合物在室温搅拌18h。用甲醇(2mL)稀释该反应混合物，加载到SCX柱上。然后用甲醇洗涤SCX柱，用2.3N甲醇的氨溶液洗脱产物。真空浓缩包含氨的级分。在0℃在氮气气氛中将所述残余物溶于无水吡啶(0.92mL)，一次加入氯甲酸(R)-奎宁环-3-基酯盐酸盐(48.3mg,0.213mmol,如上述Int6中步骤6所述制备)。将该反应混合物在室温搅拌2天。通过添加10％K2CO3溶液使反应停止，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取，用盐水洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1.5mL)，通过HPLC纯化，得到标题化合物(21.4mg,9.3％，2步内)，为黄色固体。
[0666] 1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.96(s,1H),8.57(s,2H),8.30-8.23(m,2H),7.37-7.16(m,6H),7.09-6.91(m,6H),6.21(dd,J＝9.2,4.6Hz,1H),5.84(d,J＝9.1Hz,1H),5.29(s,2H),4.65-4.58(m,1H),3.80(s,3H),3.78(s,3H),3.60(dd,J＝15.0,9.3Hz,1H),3.35(dd,J＝14.3,5.6Hz,1H),3.20-3.11(m,1H),2.85-2.58(m,5H),1.98-1.77(m,2H),1.69-1.32(m,
3H).
3H).
[0667] LCMS(方法2)：[MH+]＝803，在3.11min.
[0668] 本发明化合物的药理学活性
[0669] PDE4抑制活性的体外测定
[0670] 可以根据下文报道的方案之一确定本发明化合物PDE4抑制作用的体外测定：
[0671] PDE4B2HTRF测定:
[0672] 使用得自Perkin Elmer的LANCE Ultra cAMP均匀时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)测定法检测PDE4B2活性。本测定法基于铕(Eu)螯合物-标记的cAMP示踪物与样品cAMP之间对用ULightTM染料标记的cAMP-特异性单克隆抗体(mAb)上结合位点的竞争性。测定在384-孔小体积培养板中以10μl体积进行。将人重组PDE4B2(80pM)与3nM cAMP一起在包含1×HBSS、5mM HEPES、3mM MgCl2、0.1％BSA,pH 7.4与或不与试验的化合物的缓冲液中温育2h。通过添加500μM IBMX有效地终止酶反应，所述500μM IBMX存在于合并的终止/检测缓冲液中，该缓冲液包含铕(Eu)螯合物-标记的cAMP示踪物和用ULightTM染料标记的cAMP-特异性单克隆抗体(mAb)。然后将样品再温育1h，然后用EnVision读出器在340nm激发和665nm和615nm发射处读取培养板。使用非线性曲线拟合程序，根据竞争曲线确定IC50值。
[0673] PDE4非细胞(cell free)测定方案
[0674] 在U937人单核细胞上清液细胞裂解物中测定PDE4活性。基本上如在Torphy TJ等人J.Pharmacol.Exp.Ther.1992；263:1195-1205中所述，培养、收获细胞和制备上清液级分。
[0675] 在37℃、5％CO2下，在包含GlutaMAXTM-I培养基的RPMI 1640中培养U937细胞，所述GlutaMAXTM-I培养基补充有10％胎牛血清和100μg/ml Pen-strep(Gibco)。
[0676] 收获细胞，并通过在冷PBS中离心(150×g,8min)洗涤2次。以20×106个细胞/ml的终浓度将洗涤过的细胞再悬浮于冷Krebs-Ringer-Henseleit缓冲液中，并超声处理。在15000×g离心20min以后，合并上清液，分成等分试样，并在-80℃储存。
[0677] 通过测定cAMP从温育混合物中的消失，确定细胞上清液中的PDE4活性。
[0678] 试验化合物的浓度范围为10-12M至10-6M。通过酶热灭活(在100℃保持2.5分钟)来停止反应，并按照提供商的说明书，使用得自PerkinElmer的‘LANCE cAMP Assay’，确定残余的cAMP含量。
[0679] 结果：表示为试验化合物产生cAMP消失的50％抑制的摩尔浓度的平均值±标准差(IC50)。
[0680] 假定在没有抑制剂存在下的cAMP消失为100％且在热灭活样品中的cAMP消失为0％，计算PDE4活性的抑制百分比。
[0681] 当在上述报道的方案之一中测试时，本发明有代表性的化合物展示出低于100nM的IC50。
[0682] M3拮抗作用的体外测定
[0683] 可以根据下文报道的方案之一确定本发明化合物M3拮抗作用的体外测定：
[0684] M3受体放射性配体结合测定:
[0685] 将得自Perkin Elmer的人M3受体膜(15μg/孔)与0.52nM东莨菪碱甲基氯化物[N-甲基-3H]与或不与试验的化合物一起温育，或与饱和浓度的阿托品(5μM)一起温育以测定非特异性结合。测定在96-孔聚丙烯培养板中以250μl体积进行。所用的测定缓冲液是50mM Tris-HCl,154mM NaCl(pH 7.4)。DMSO的最终测定浓度为0.5％(v/v)。密封培养板，在室温在轨道振荡器(慢速)上温育2h。使用过滤平台在用0.5％聚乙烯亚胺(v/v)预处理的96-孔unifilter GF/C滤板上收获膜，用200μl测定缓冲液洗涤4次。干燥培养板，然后添加50μl
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