一种始兴石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法
专利汇可以提供一种始兴石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种始兴石斛种苗无性克隆快速繁殖方法，主要步骤包括预处理、诱导培养，形成类原球茎，类原球茎增殖，分化培养，生根壮苗和移栽，以及上述过程中使用的类原球茎诱导培养基M1、增殖培养基为M2、分化培养基为M3和生根壮苗培养基M4。本发明通过选取始兴石斛优良单株，然后利用 植物 组织培养技术进行优质种苗的快速大量繁殖，有利于实现始兴石斛种苗的规模化、商品化生产。本发明只需有简单的植物组织培养设备即可进行，能成功地进行始兴石斛无性克隆和快速大量繁殖，具有低成本，高效率的特点。，下面是一种始兴石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法专利的具体信息内容。
1.一种始兴石斛种苗无性克隆快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
一、预处理、诱导培养
选取始兴石斛株系，用水冲洗干净，剪去叶片，在70％酒精中浸泡30秒，再用0.1％升汞溶液消毒5～10分钟，无菌水冲洗4～5次，切取高1～2厘米带节的茎段，接种到类原球茎诱导培养基M1，45天后，茎段在培养基上有腋芽产生，茎段基部切口膨大形成颗粒突起；
二、形成类原球茎
转接至上述培养基M1上，再经过50天培养，形成类原球茎，诱导类原球茎阶段的培养温度为25±2℃，光照度1500～2000Lx，光照12小时/天；
三、类原球茎增殖
将获得的类原球茎繁殖材料转接至增殖培养基M2中，在该培养基上培养45天后，类原球茎增殖倍数可达到8倍以上；经过3代类原球茎增殖培养可获得足够的繁殖材料进行类原球茎分化培养，类原球茎增殖阶段的培养温度为25±2℃，光照度1500～2000Lx，光照12小时/天；
四、分化培养
将获得的类原球茎繁殖材料转接至分化培养基M3中，45天后，类原球茎在培养基上分化形成高3～5厘米不定芽，类原球茎分化阶段的培养温度为27±2℃，光照度2000～
3000Lx，光照12小时/天；
五、生根壮苗
将高3～5厘米的不定芽，转到生根壮苗培养基M4，培养60天时，苗高可达到5～7厘米，根数3～5条，生根率为95％以上，生根壮苗阶段的培养温度为27±2℃，光照度2000～
3000Lx，光照12小时/天；
六、移栽
将生根培养50-70天的试管苗在强光照下炼苗7天后出瓶，移栽时，从培养瓶中取出生根苗，洗净附着的培养基后，用千分之一的高锰酸钾溶液浸泡5分钟，种植基质采用已经发酵好的阔叶林树皮和木屑的混合基质，注意保持适宜湿度和温度，置于阴凉通风处栽培，成活率可达95％以上，25-35天成活后的植株产生新的根系，移入大棚进行正常水、肥、药管理；
上述M1的成分为：花宝1号1～2g/L，蛋白胨0.5～2g/L，椰子汁50～100mL/L，肌醇80～
120mg/L，甘氨酸1.5～2.5mg/L，盐酸硫胺素0.05～0.2mg/L，盐酸吡哆醇0.4～0.8mg/L，烟酸0.4～0.8mg/L，6-苄基嘌呤5.0～8.0mg/L，萘乙酸0.2～2mg/L，蔗糖15～30g/L，琼脂6～
7g/L，pH 5.4-5.6；
上述M2的成分为：花宝1号1～2g/L，蛋白胨0.5～2g/L，土豆泥40～80g/L，肌醇80～
120mg/L，甘氨酸1.5～2.5mg/L，盐酸硫胺素0.05～0.2mg/L，盐酸吡哆醇0.4～0.8mg/L，烟酸0.4～0.8mg/L，6-苄基嘌呤2.0～5.0mg/L，萘乙酸0.2～0.5mg/L，蔗糖15～30g/L，琼脂6～7g/L，pH 5.4-5.6；
上述M3的成分为：花宝1号1～2g/L，蛋白胨0.5～2g/L，土豆泥40～80g/L，活性碳50～
100mg/L，肌醇80～120mg/L，甘氨酸1.5～2.5mg/L，盐酸硫胺素0.05～0.2mg/L，盐酸吡哆醇
0.4～0.8mg/L，烟酸0.4～0.8mg/L，6-苄基嘌呤3.0～6.0mg/L，萘乙酸0.2～0.5mg/L，蔗糖
15～30g/L，琼脂6～7g/L，pH 5.4-5.6；
上述M4的成分为：花宝1号1～2g/L，蛋白胨0.5～2g/L，土豆泥40～80g/L，活性碳500～
1000mg/L，肌醇80～120mg/L，甘氨酸1.5～2.5mg/L，盐酸硫胺素0.05～0.2mg/L，盐酸吡哆醇0.4～0.8mg/L，烟酸0.4～0.8mg/L，萘乙酸0.2～0.5mg/L，蔗糖15～30g/L，琼脂6～7g/L，pH 5.4-5.6。
一种始兴石斛优质种苗无性克隆快速繁殖方法
技术领域
背景技术
发明内容
0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，6-苄基嘌呤2.0～5.0毫克，萘乙酸0.2～0.5mg，蔗糖15～30g，琼脂
6～7g，pH 5.4-5.6。
15～30g，琼脂6～7g，pH 5.4-5.6。
0.2mg，盐酸吡哆醇0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，萘乙酸0.2～0.5mg，蔗糖15～30g，琼脂6～7g，pH 5.4-5.6。
具体实施方式
转接至上述培养基M1上，再经过50天培养，形成类原球茎，诱导类原球茎阶段的培养温度为
25±2℃，光照度1500Lx，光照12小时/天；将获得的类原球茎繁殖材料转接至增殖培养基为M2，在该培养基上培养45天后，类原球茎增殖倍数可达到8倍以上；经过3代类原球茎增殖培养可获得足够的繁殖材料进行类原球茎分化培养，类原球茎增殖阶段的培养温度为25±2℃，光照度2000Lx，光照12小时/天；将获得的类原球茎繁殖材料转接至分化培养基为M3，45天后，类原球茎在培养基上分化形成高3～5厘米不定芽，类原球茎分化阶段的培养温度为
27±2℃，光照度2000Lx，光照12小时/天；将高3～5厘米的不定芽，转到生根壮苗培养基M4，培养60天时，苗高可达到5～7厘米，根数3～5条，生根率为95％以上，生根壮苗阶段的培养温度为27±2℃，光照度3000Lx，光照12小时/天；将生根培养50-70天的试管苗在强光照下炼苗7天后出瓶，移栽时，从培养瓶中取出生根苗，洗净附着的培养基后，用千分之一的高锰酸钾溶液浸泡5min，种植基质采用已经发酵好的阔叶林树皮和木屑的混合基质，注意保持适宜湿度和温度，置于阴凉通风处栽培，成活率可达95％以上，25-35天成活后的植株产生新的根系，移入大棚进行正常水、肥、药管理。
0.5mg，蔗糖15g，琼脂7g，pH 5.4。
0.2mg，蔗糖30g，琼脂6g，pH 5.6。
5毫克，萘乙酸0.4mg，蔗糖25g，琼脂6.5g，pH 5.5。
0.4mg，蔗糖25g，琼脂6.5g，pH 5.5。
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