专利汇可以提供一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种 磁性 载体固定化脂肪酶制备 生物 柴油 的方法,该方法利用固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂对反应进行催化,所述固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂由磁性纳米颗粒作为载体采用共价交联的方法对产脂肪酶菌进行固定化制备而成。本发明技术方案工艺简便易行,对设备要求低,涉及的催化剂转酯效率高,并且固定化酶具有酶活高且稳定,便于回收分离,可多次重复使用,同时避免使用强酸强 碱 ,减少对环境的污染。,下面是一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法专利的具体信息内容。
1.一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法,其特征在于:该方法利用固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂对反应进行催化,所述固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂由磁性纳米颗粒作为载体采用共价交联的方法对产脂肪酶菌进行固定化制备而成。
2.根据权利要求1所述的一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法,其特征在于:所述的磁性纳米颗粒按照下述步骤进行制备:
1)Fe3O4@SiO2磁性复合纳米颗粒的制备:称取Fe3O4纳米颗粒放入含有无水乙醇、蒸馏水和氨水混合液的三口烧瓶中,通过超声波处理1h后,保持在30℃恒温下进行机械搅拌
30min,滴加正硅酸乙酯,再机械搅拌反应24h,用磁铁进行磁分离,分别再用蒸馏水和无水乙醇进行充分洗涤,磁分离,真空抽滤干燥至质量不变,得松散的粉末状Fe3O4@SiO2磁性复合纳米颗粒;
2)Fe3O4@SiO2-NH2氨基化磁性纳米颗粒的制备:称取步骤1)中制备的Fe3O4@SiO2磁性复合纳米颗粒放入含有无水乙醇和氨水混合液的三口烧瓶中,通过超声波处理1h后,保持在
30℃恒温下滴加γ-氨丙基三乙氧基硅烷,机械搅拌反应24h,用磁铁进行磁分离,然后分别用蒸馏水和无水乙醇进行充分洗涤,磁分离,真空抽滤干燥至质量不变,得松散的粉末状Fe3O4@SiO2–NH2氨基化磁性纳米颗粒;
3)Fe3O4@SiO2-CHO活化磁性纳米颗粒的制备:再称取步骤2)制备的Fe3O4@SiO2-NH2氨基化磁性纳米颗放入含有戊二醛溶液的三口烧瓶中,通过超声波处理30min后,保持在30℃恒温下机械搅拌12h,用磁铁进行磁分离,再利用磷酸缓冲液充分洗涤,去除多余的戊二醛,真空抽滤干燥至质量不变,得松散的粉末状Fe3O4@SiO2-CHO活化磁性纳米颗粒。
3.根据权利要求1所述的一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法,其特征在于:所述的固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂的制备,具体包括以下步骤:
1)将产脂肪酶在以下条件进行培养:2.845g/L的葡萄糖,1.2%的橄榄油添加量,初始pH为7.2、1.5%的牛肉膏、0.1%的(NH4)2SO4、接种量2.5%和0.15%的K2HPO4.3H2O,保持在
30℃恒温下,发酵48h;
2)将步骤1)中培养好的发酵酶菌液在12000rpm转速下离心10min,收集上清液,将Fe3O4@SiO2-CHO活化磁性纳米颗粒、pH7.0的磷酸缓冲液和发酵酶菌液混合于三角瓶中,通过超声波处理,并在40℃的条件下摇床反应4h进行固定化,然后用磁铁进行磁分离,用磷酸缓冲液充分洗涤,真空抽滤干燥即得到固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂。
4.根据权利要求1所述的一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法,其特征在于:利用磁性固定化酶催化剂制备生物柴油,按照摩尔比4:1-12:1加入醇油,加入占油醇和水总体积的10-15%的水和占油、醇、水和催化剂总质量的2-8%的固定化脂肪酶磁性纳米颗粒催化剂,置于反应温度为30-50℃的摇床中进行反应4h。
5.根据权利要求4所述的一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法,其特征在于:所述油选用橄榄油或者地沟油。
6.根据权利要求4所述的一种磁性载体固定化脂肪酶制备生物柴油的方法,其特征在于:所述醇为甲醇。
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