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纤维提取物和化妆品组合物以及其在保护、滋养、保湿皮肤中的用途

阅读:576发布:2023-12-31

专利汇可以提供纤维提取物和化妆品组合物以及其在保护、滋养、保湿皮肤中的用途专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种 棉 花 纤维 提取物,以及一种包含作为活性成分的至少一种棉花纤维提取物的 化妆品 组合物,所述棉花纤维提取物在生理学适合的介质中,由单糖、 二糖 、三糖和四糖组成。本发明还涉及一种美容处理方法,所述方法可以保护 角 蛋白基质、加强 皮肤 的皮肤屏障和/或加强对毛发的保护和/或增强角蛋白合成和/或滋养角蛋白基质。本发明还涉及一种制备棉花纤维提取物的方法,以及其在制备根据本发明的化妆品组合物的用途。,下面是纤维提取物和化妆品组合物以及其在保护、滋养、保湿皮肤中的用途专利的具体信息内容。

1.纤维提取物,其特征在于包含一种仅由单糖和/或二糖和/或三糖和/或四糖组成的棉花纤维解产物。
2.根据权利要求1所述的棉花纤维提取物,其中所述单糖和/或二糖和/或三糖和/或四糖是葡萄糖和/或纤维二糖和/或纤维三糖和/或纤维四糖和/或纤维素低聚物。
3.根据权利要求1或2中任一所述的棉花纤维提取物,其另外包含至少一种附加的糖,优选天然来源的。
4.根据权利要求3所述的棉花纤维提取物,其中所述附加的糖是葡萄糖和/或果糖和/或海藻糖和/或蔗糖和/或肌醇。
5.根据权利要求3或4中任一所述的棉花纤维提取物,其包含约2%的棉花纤维水解产物,0.8%的葡萄糖,0.8%的果糖,1.1%的海藻糖,1.7%的蔗糖和0.5%的肌醇。
6.化妆品组合物,其特征在于包含在生理学可接受的介质中的根据权利要求1-5中任一所述的棉花纤维提取物作为活性成分。
7.根据权利要求6所述的组合物,其中所述棉花纤维提取物以相对于组合物总重量的
0.01重量%-20重量%的浓度,并优选以相对于组合物总重量的0.1重量%-10重量%的浓度存在。
8.根据权利要求7所述的组合物,其中所述棉花纤维提取物包含相对于组合物总重量的0.01重量%和5重量%的至少一种附加的糖,所述附加的糖选自葡萄糖和/或果糖和/或海藻糖和/或蔗糖和/或肌醇。
9.根据权利要求6至8中任意之一所述的组合物,其特征在于适合局部施用,并特别为水溶液、水-醇溶液或油基溶液的形式,或为水包油乳液、油包水乳液或多种乳液的形式,或为霜、悬浮液或粉末的形式;所述组合物为或多或少的液体或固体,并具有霜、洗液、乳液、洗发水、精华液、软膏、凝胶、膏、泡沫或条状物的外观。
10.保护蛋白基质,更特别的是保护皮肤和毛发免受各种类型外来侵袭的美容处理方法,其包括:在角蛋白基质表面,更特别的是在皮肤和/或毛发上施用有效量的如权利要求6至9任一所述的化妆品组合物。
11.加强皮肤屏障和/或加强头发保护和/或增加角蛋白合成和/或滋养角蛋白基质,更特别的是皮肤和毛发的美容处理方法,其包括:在皮肤和/或毛发的表面施用有效量的如权利要求6至9任一所述的化妆品组合物。
12.制备如权利要求1或2中任一所述的棉花纤维提取物的方法,包括以下步骤:
a-在纤维素酶的存在下,在渗透水中搅拌分解为粉末的棉花纤维,
b-在约50℃温度下,水解15至24小时的时间,优选为18小时的时间,
c-通过加热至80℃约2小时使纤维素酶失活,
d-过滤所获得的水解产物,任选浓缩或在渗透水中稀释。
13.根据权利要求1至5中任意之一所述的棉花纤维提取物用于制备化妆品组合物的用途。

说明书全文

纤维提取物和化妆品组合物以及其在保护、滋养、保湿

皮肤中的用途

[0001] 本发明涉及化妆品领域。
[0002] 本发明涉及一种棉花纤维提取物,所述棉花纤维提取物包含一种由单糖、二糖、三糖和四糖组成的棉花纤维解产物,以及一种包含在生理学可接受的介质中的至少一种棉花纤维提取物作为活性剂的化妆品组合物。
[0003] 皮肤是生物体中主要的蛋白基质。其是覆盖着整个机体表面并执行诸如感觉功能、对抗多种外来侵袭的保护功能、免疫、代谢或热调节的多种功能的重要器官。这些功能被启用归功于与各种组织结构相关的复杂结构。
[0004] 皮肤由三个独立的覆盖隔层组成:表皮层、真皮层和皮下组织。表皮层是形成于皮肤外部结构并由此提供保护功能的上皮覆盖层。这种功能由上皮细胞的聚集和抗丝状蛋白(角蛋白)的产生提供。表皮层的特点在于一种在层上与角化细胞从最深层的区域(基底层)到最上层的区域(角质层)的分化增长状态相应的组织。在其往表面迁移的过程中,角化细胞变得扁平,角蛋白,即纤维蛋白族的合成增强。当进化到上层时,角化细胞进一步变得扁平,其细胞核开始退化。富含脂质和胆固醇、饱和游离脂肪酸和神经酰胺的细胞内含物分泌到细胞外间隙,使细胞间的聚集增强,有助于发挥表皮层的屏障作用。
[0005] 因此,角质层对外来侵袭有抵抗能。角蛋白是所有角蛋白基质的必要组成部分,特别是毛细纤维、体毛、指甲和其它皮肤附属物。
[0006] 头或身体上的毛发是一种由充满角蛋白纤维和来自原生质膜的脂质残留物的死细胞组成的毛细结构。每根毛发都由毛囊生成,依次由球状膨胀、毛干和皮脂腺组成。在球状膨胀中,位于外周的角化细胞形成增殖场所。分化过程中,角化细胞向小囊中心移动,以形成发干,并充满角蛋白纤维,使毛发具有很好的抵抗能力。
[0007] 多年来,健康和美容专业人员一直在探寻角蛋白基质,特别是皮肤和毛发的护理方法,以及提高皮肤和毛发对它们在日常经受的外来侵袭和压力的抵抗力的方法。
[0008] 很多被引入化妆品或药物产品的物质已经出现,但仍需要开发用于保护角蛋白基质、加强皮肤屏障和限制外来侵袭影响的新成分。而且,本发明者给自己设定的目标是开发基于植物的化妆品产品,以便满足消费者的期待和对安全日益增加的需求。
[0009] 因此,对于发明者来说,待解决的技术问题是找到一种生理学上可接受的,新的基于植物的产品,该产品不仅能对角蛋白基质提供真正的护理,还能有效保护皮肤和毛发,以使它们不受外来侵袭和压力引起的损伤。
[0010] 发明人成功选择了一种基于植物的天然产物,该产品在适当处理后,当被应用到角蛋白基质时具有显著特性。出乎意料的是,发明人发现包含仅由单糖、二糖、三糖和四糖组成的棉花纤维水解产物的棉花纤维提取物,相比于角蛋白基质,特别是在其保护皮肤和毛发方面,具有显著特性。
[0011] 棉花是覆盖在棉花植株种子上的纤维组(或毛状物)。棉花植物,或棉属,是锦葵科族的双子叶植物。有40至50种已知的多年生或一年生的,木本或草本品种。其中仅有四种为其纤维而种植:陆地棉、海岛棉、草棉和树棉。这四种棉花植株品种产生多个杂交品种,并根据其纤维长度、种子柔毛和苞片形状分类。陆地棉棉花植株线单独供应了全球棉花产量的80-90%。棉花植株的果实是一个包含相当多带有紧密的毛(或纤维)的种子的粗糙的椭圆形荚。利用经过适当处理的这些纤维,发明人开发了根据本发明的新的棉花纤维提取物和化妆品组合物。
[0012] 基于申请人的知识,现有技术中从未描述在化妆品组合物中采用基于水解棉花纤维的产品。迄今为止,仅棉花种子油和棉花纤维已被用于在化妆品中,例如专利US5666441或专利FR2799647。
[0013] 专利FR2799647公开了包含纤维、至少一种表面活性剂和至少一种蜡的乳液形式的组合物,用于处理、保护、护理、卸妆和/或清洁皮肤、嘴唇和/或毛发。棉花纤维被引用,但没有被例证或优选。优选的纤维是合成的,并具有介于0.1至1.5毫米的长度。
[0014] 用于处理角蛋白基质的基于棉花虫污(honeydew)的组合物也被专利申请WO2004052331公开,所述棉花虫污是由昆虫分泌并在棉花上被发现的物质。其主要包含由昆虫合成的糖和生理学起源的糖,特别是葡萄糖、果糖、蔗糖、海藻糖、松三糖和肌醇。
[0015] 因此,根据第一方面,本发明涉及一种棉花纤维提取物,其包含仅由单糖和/或二糖和/或三糖和/或四糖组成的棉花纤维水解产物。
[0016] 根据本发明的术语“棉花纤维水解产物”是指通过酶反应,特别是纤维素酶对棉花纤维进行水解得到的产物。
[0017] 根据本发明的术语“棉花纤维提取物”是指包含根据下文描述的方法制备的酶促水解棉花纤维提取物的水溶液。
[0018] 根据本发明的术语“糖”是指为包含一个羰基()和多个羟基(-OH)的一系列有机分子的任何水化合物。特别的参照是包含六个碳原子的任何碳水化合物。
[0019] 根据本发明的术语“单糖和/或二糖和/或三糖和/或四糖”是指包含一种糖或结合在一起的两种、三种或四种糖类的任何糖。
[0020] 棉花纤维提取物包含根据下文描述方法的被酶水解的棉花纤维水解产物。
[0021] 在根据本发明的棉花纤维提取物的一个优选实施例中,单糖、二糖、三糖和/或四糖是葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖和纤维素低聚物。
[0022] 在根据本发明的一个特别优选实施例中,棉花纤维提取物另外包含至少一种附加的糖。所述糖优选天然来源的,并优选是葡萄糖和/或果糖和/或海藻糖和/或蔗糖和或肌醇。
[0023] 棉花纤维提取物有利地另外包括下列附加的糖:葡萄糖、果糖、海藻糖、蔗糖和肌醇。
[0024] 甚至更有利地,根据本发明的棉花纤维提取物包含约2%的棉花纤维水解产物、0.8%的葡萄糖、0.8%的果糖、1.1%的海藻糖、1.7%的蔗糖和0.5%的肌醇。
[0025] 根据第二方面,本发明涉及一种化妆品组合物,其在生理学可接受的介质中,包含如下文所述的棉花纤维提取物作为活性成分。
[0026] 术语“生理学可接受的介质”是指与头部或身体的皮肤或毛发相容的介质。
[0027] 根据本发明的化妆品组合物包含一种基于天然植物的产品作为活性成分,即根据下文所述方法的酶水解得到的棉花纤维提取物。发明人出人意料地证明了包含根据本发明的棉花纤维提取物作为活性成分的化妆品组合物,特别有可能保护细胞免受渗透压冲击,以获得保护对抗导致细胞DNA的损伤,特别是当所述细胞受到例如营养丧失的压力时,化妆品组合物有可能保护细胞DNA。因此,发明人证明了化妆品组合物具有对角化细胞和DNA的保护作用,并且特别适合保湿皮肤。
[0028] 根据本发明的化妆品组合物的这些保护特性可以被用于,例如保护皮肤和/或毛发对抗特别是太阳光线作用或另外的物理、化学或生物试剂引起的外来侵袭。这些保护特性还可以被用于抗击皮肤老化。
[0029] 显而易见的是,根据本发明的活性剂可以被单独使用或与其它活性剂联合使用。
[0030] 根据本发明,有可能在根据本发明的化妆品组合物中加入另外的活性剂,特别用于预防和/或处理皮肤老化迹象和/或保护皮肤和/或毛发对抗外来侵袭。
[0031] 因此,根据本发明适合使用的化妆品组合物可另外包含至少一种其他的活性剂,以在预防和改善皮肤老化迹象领域增强根据本发明的棉花纤维提取物的作用,或用于扩大根据本发明的化妆品组合物的特性范围。
[0032] 我们可以以非限制性的方式列举以下化妆品领域中的成分种类:再生、抗衰老、抗皱、舒缓、抗氧化、愈合、再脂质化、滋养、抗自由基、抗糖基化、保湿、抗菌、抗真菌去角质、肌肉松弛、脱屑、紧致的试剂,皮肤大分子合成或能量代谢或微循环或指甲生长或毛发生长刺激剂,表皮分化或色素沉着调节剂,金属蛋白酶抑制剂或阳光过滤剂。
[0033] 在一个更特别的实施例中,除了根据本发明的棉花纤维提取物,根据本发明的化妆品组合物还包含,
[0034] -至少一种细胞色素c的活化化合物和/或,
[0035] -至少一种保湿化合物,例如水通道蛋白活化化合物和/或,
[0036] -至少一种去乙酰化酶活化化合物和/或,
[0037] -至少一种增加细胞粘附的化合物和/或,
[0038] -至少一种增加基质蛋白,例如胶原蛋白,纤连蛋白,层粘连蛋白,糖胺聚糖生成的化合物和/或,
[0039] -至少一种蛋白酶体活性调节化合物和/或,
[0040] -至少一种昼夜节律调节化合物和/或,
[0041] -至少一种HSP蛋白调节化合物和/或,
[0042] -至少一种增加细胞能量的化合物和/或,
[0043] -至少一种皮肤色素沉着调节化合物和/或,
[0044] -至少一种辅酶Q10活化化合物和/或,
[0045] -至少一种增强屏障功能的化合物,例如谷酰胺转胺酶或HMG-CoA还原酶活化化合物,和/或,
[0046] -至少一种线粒体保护化合物。
[0047] 以上所述化合物可以是天然来源,例如植物肽提取物,或合成来源,例如肽。
[0048] 与其功能无关,组合物中另外的与根据本发明的活性剂或活性物质相关的活性剂或活性物质可以具有非常不同的化学结构。我们可以以非限制性方式列举,肽、维生素C及其衍生物,B族维生素、DHEA(双氢表雄甾酮)、植物甾醇、水杨酸及其衍生物、类视黄醇、类黄酮、糖胺、唑类、金属盐、尿囊素、植物来源的肽提取物或聚合物
[0049] 此外,根据本发明的化妆品组合物可另外包含至少一种增强毛发健康的化合物。
[0050] 我们可以特别列举,维生素、其它的植物肽提取物、米诺地尔、烟酸酯、微量元素、抗炎剂、视黄酸或其衍生物、视黄醇、5α-还原酶抑制剂或源自化学合成的肽化合物。以维生素为例,涉及的可以由维生素A、E、B5、B6、C、H或PP构成,以微量元素为例,涉及的可以由锌、、镁或硅构成。
[0051] 根据本发明一个有利的实施例,棉花纤维提取物在化妆品组合物中以相对于组合物总重量的0.01重量%-20重量%的浓度,并优选以相对于组合物总重量的0.1重量%-10重量%的浓度存在。
[0052] 根据本发明一个特别有利的实施例,根据本发明的化妆品组合物还包含以相对于组合物总重量的0.01重量%和5重量%的至少一种附加的糖,例如葡萄糖和/或果糖和/或海藻糖和/或蔗糖和/或肌醇。
[0053] 根据本发明的术语“至少一种附加的糖”是指除单糖和/或二糖和/或三糖和/或四糖之外,活性剂包含向酶水解棉花纤维最初获得的组合物中加入的糖。这些糖优选葡萄糖和/或果糖和/或海藻糖和/或蔗糖和/或肌醇。
[0054] 在本发明一个另外更有利的实施例中,根据本发明的化妆品组合物包含约2%的棉花纤维提取物、0.8%的葡萄糖、0.8%的果糖、1.1%的海藻糖、1.7%的蔗糖和0.5%的肌醇。
[0055] 根据本发明的化妆品组合物旨在角蛋白基质的护理。
[0056] 在本发明中,“角蛋白基质”的意思是指主要由角蛋白构成的任何基质。这些基质通常为例如皮肤、毛发、睫毛、眉毛或指甲或皮肤的附属物。术语护理角蛋白基质是指目的为保持或恢复基质正常功能的任何功能,或用于保护或提高其外观的任何手段。因此,护理包括保湿、舒缓、对抗各种侵袭的保护,特别是防晒、抗击和防止老化迹象,特别是皮肤老化的迹象。
[0057] 术语“皮肤老化迹象”是指老化引起的外在表观的任何改变,例如皱纹和细纹、干瘪的皮肤,柔软的皮肤,变薄的皮肤,缺乏皮肤柔软和/或色泽,无光泽和暗哑的皮肤,还指通过外在表观的改变而非系统地导致的皮肤的任何内在改变,例如,暴露于紫外线的任何内在皮肤损伤。
[0058] 对于清洁和/或清洗毛发和/或皮肤,使用实质上基于常用表面活性剂,特别是阴离子、非阴离子和/或两性型的,但更特别是阴离子型的洗涤剂洗液(例如洗发水和其它皂类)是常规的。应用这些组合物以保湿角蛋白基质,并摩擦产生的泡沫在用水漂洗后,可清除最初存在的各种类型的污垢。这些组合物可具有良好的清洁能力,但是鉴于此类清洁处理相对刺激的性质,其保留的与之相关联的美容特性相对弱。事实上,从长远看,这种处理可导致毛发纤维和/或皮肤或多或少的明显损伤,特别是关系到其内部或表面包含的蛋白逐步消除。因此,为了提高上述洗涤剂组合物的美容特性,一种解决方法是引入补充美容剂,实质上旨在修复或限制由毛发纤维和皮肤经受的,由各种处理或侵袭引入的危害或不利影响,即保护。这种美容剂可以是,例如根据本发明的一种棉花纤维提取物或根据本发明的一种化妆品组合物。
[0059] 根据本发明的化妆品组合物的旨于提高其使用者角蛋白基质的表观和质量
[0060] 根据本发明的化妆品组合物的剂型为适于皮肤局部施用和适于毛发施用的。它涵盖了全部化妆品形式。因此,这些组合物应包含生理学可接受的介质,即与头部或身体上的皮肤或毛发相容。这些组合物可以特别以水溶液、水-醇溶液或油基溶液的形式;水包油、油包水乳液或多重乳液的形式存在;其还可以以适合施用于皮肤、粘膜、嘴唇和/或毛发的霜剂、悬浮剂或粉末的形式存在。这些组合物可以是或多或少的流体,并具有霜剂、洗液、乳液、精华液、软膏、洗发水、凝胶、膏或泡沫的外观。其还可以为固体形式,例如条状物或以气雾剂的形式施用于皮肤。它们可以被作为皮肤护理和/或化妆产品使用。
[0061] 这些组合物另外包含在应用设想领域中常规使用的任何添加剂,以及其制剂需要的辅助剂,例如溶剂增稠剂、稀释剂、抗氧化剂着色剂、阳光过滤剂、自助美黑剂、色素、填料、防腐剂、香料、味吸收剂、化妆试剂、精油、维生素、必需脂肪酸、表面活性剂、成膜聚合物等。在任何情况下,本领域技术人员将确保选择这些辅助剂及其比例,以便不破坏根据本发明的化妆品组合物探索的有利性质。这些辅助剂可以是,例如采用占组合物总重量0.01-20%的浓度。
[0062] 当根据本发明的化妆品组合物是乳液时,相对组合物总重量,脂肪相可占5-80重量%,并优选占5-50重量%。组合物中使用的乳化剂和共乳化剂可选自讨论的领域中常规使用的那些。例如,它们使用的比例范围可占组合物总重量的0.3-30重量%。显而易见的,本领域技术人员会谨慎选择任何活性或非活性补充化合物和/或其量,使得混合物的有利性质不会或基本不会被设想的添加物破坏。
[0063] 根据本发明的组合物,可特别作为化妆品组合物施用于皮肤,粘膜和/或半粘膜,也可作为化妆品组合物施用于头和/或身体上的毛发。另外,设想施用在面部和身体的皮肤化妆组合物领域也是可能的,例如口红、粉底、润色乳霜、下眼睑遮瑕棒、防晒霜或人工美黑组合物。
[0064] 根据本发明的组合物可用于大量的化妆品领域,特别是用于处理、保护、护理、卸妆和/或皮肤、嘴唇和/或毛发的清洁,以及皮肤、嘴唇、睫毛和/或身体的化妆。
[0065] 根据本发明的化妆品组合物还可由包含皂类或清洁面皂的固体制剂组成。
[0066] 化妆品组合物还可以以包含压力推进剂的气雾剂组合物形式包装。组合物还可以用于口腔,例如牙膏。
[0067] 根据本发明的化妆品组合物可旨在角蛋白基质上形成防护过滤层。
[0068] 本发明的第三方面涉及保护角蛋白基质,更特别的是保护皮肤和毛发,对抗各种类型外来侵袭的美容处理方法,所述方法由在角蛋白基质表面,更特别的是在皮肤和/或毛发上施用有效量的根据本发明的化妆品组合物组成。
[0069] 本发明还涉及一种加强皮肤屏障和/或加强头发保护和/或增加角蛋白合成和/或滋养角蛋白基质,特别是皮肤和毛发的美容处理方法,所述方法由在皮肤和/或毛发的表面施用有效量的根据本发明的化妆品组合物组成。
[0070] 本发明的第四方面涉及一种制备棉花纤维提取物的方法,包括以下步骤:
[0071] a-在纤维素酶的存在下,在渗透水中搅拌分解为粉末的棉花纤维;
[0072] b-在约50℃温度下,水解进行15至24小时的时间,以获得棉花纤维水解产物;
[0073] c-通过加热至80℃约2小时使纤维素酶失活;
[0074] d-过滤所获得的水解产物,任选浓缩或在渗透水和甘油中稀释。
[0075] 根据本发明一个特别实施例,水解步骤b进行大约18小时的时间。
[0076] 根据制备根据本发明的棉花纤维提取物的方法,以下文描述的步骤进行:
[0077] -棉花纤维(棉属,优选陆地棉、草棉,更优先陆地棉)被分解为粉末。可替换地,可以使用用14%苏打溶液预处理至少12小时后的粗纤维。
[0078] -在水(最少10%,最多20%)存在的情况下,将比例为10-20重量%的纤维搅拌,然后通过纤维素酶进行酶水解;
[0079] -随后通过加热使酶失活。
[0080] -混合物被过滤,浓缩或稀释,以获得浓度在20至50g/kg之间的糖,例如单糖和/或二糖和/或三糖和/或四糖,并且更特别葡萄糖和/或纤维二糖和/或纤维三糖和/或纤维四糖和/或纤维素低聚物。
[0081] -加入约30重量%的甘油。
[0082] -将混合物在孔隙率降低至0.2μm的过滤板上过滤,并在低温下经巴氏灭菌。
[0083] 在根据本发明一个特别实施例中,在过滤步骤前,可以以下文列出的比例加入一种或多种植物来源的纯糖(糖类):
[0084] 葡萄糖 0.5-1.5%
[0085] 果糖 0.5-1.5%
[0086] 海藻糖 1.0-1.5%
[0087] 蔗糖 1.5-2.5%
[0088] 肌醇 0.3-0.7%
[0089] 任选地用糖进行补充,最终的棉花纤维提取物中总糖浓度在55至75g/kg之间。
[0090] 本发明第五方面涉及根据上述的制备方法获得的棉花纤维提取物在制备根据本发明的化妆品组合物中的用途。
[0091] 将用以下实施例来阐明本发明,其不应限制本发明的范围。
[0092] 实施例1-制备棉花纤维提取物的方法
[0093] 在至多100kg渗透水中,在1.15kg纤维素酶类型的酶,即( CL)的存在下,将分解为粉末的14.3kg棉花纤维(陆地棉种)进行搅拌。
[0094] 在50℃下保持该混合物18小时的同时进行水解。随后通过加热至80℃2小时使酶失活,并将混合物过滤(标准过滤步骤,优选bell过滤器)。
[0095] 在这个阶段,所述提取物仅包含糖,其总糖浓度为40g/kg。采用糖-苯酚法进行总糖分析。
[0096] 随后将所述提取物过滤并稀释,以获得20g/kg的最终总糖浓度。
[0097] 薄层色谱分析证明提取物包含单糖、二糖、三糖和四糖,且更特别地是葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖和纤维素低聚物。
[0098] 提取物在渗透水和30%甘油的混合物中被稀释,以获得20g/kg的总糖浓度。
[0099] 将混合物在孔隙率降低至0.2μm的过滤板上过滤,并在低温下经巴氏灭菌。
[0100] 添加如下所示的糖:
[0101] 葡萄糖 (0.8%)
[0102] 果糖 (0.8%)
[0103] 海藻糖 (1.1%)
[0104] 蔗糖 (1.7%)
[0105] 肌醇 (0.5%)
[0106] 提取物的最终总糖浓度为60g/kg。
[0107] 实施例2-棉纤维提取物对角蛋白合成的功效验证
[0108] 在放置于培养基24小时的人体皮肤切片上进行试验。采用免疫荧光标记法,在这些皮肤切片上研究角蛋白表达。
[0109] 在磷酸缓冲盐(PBS)缓冲液中稀释实施例1中制备的棉花纤维提取物,以获得0.5%的最终浓度,然后将稀释液以两次施用的速率施用于皮肤切片。通过与未采用根据本发明的棉花纤维提取物处理的皮肤切片对比,评估提取物的功效。
[0110] 施用后,将皮肤样本培养24小时,随后制备为石蜡包含物。然后采用抗角蛋白抗体进行免疫标记。通过免疫荧光法检测角蛋白的量。
[0111] 研究表明,与未经处理的切片相比,用棉花纤维提取物处理的皮肤切片上的角蛋白荧光具有显著提高。这些结果显示了角蛋白合成的明显提高。
[0112] 实施例3-棉花纤维提取物对角化细胞保护的功效验证
[0113] 本研究在LabtecksTM处于对数生长期的HaCaT人角化细胞上进行。将角化细胞接种在96孔板上。
[0114] 在0.5%提取物的存在下预处理细胞2小时。应用的对照条件由未经根据本发明的提取物处理的细胞组成。然后,用PBS替换包含或不包含提取物的培养介质3小时时间段。
[0115] 采用MTT试验进行细胞活性测试。作为一般惯例,通过测量细胞活性,MTT试剂被用于评估产品相对于细胞培养基的细胞毒性。
[0116] 在包含0.1mg/ml的MTT(3-[4,5-二甲噻唑-2-基]-2,5-二苯基溴化四唑)的溶液中培养角化细胞。该化合物被活细胞吸收并被线粒体酶(琥珀酸脱氢酶)代谢成紫蓝色化合物甲臜,所述甲臜以不溶于水性介质的紫色晶体形式存在。
[0117] 所述甲臜晶体溶于DMSO中,它们给出与样品中存在的活细胞数成比例的光密度(O.D.)。然后对每个研究的样品进行光密度测量(在540nm读取O.D.)。然后,O.D.与酶活度和活细胞数直接成比例。
[0118] 结果表明,在PBS中培养的细胞,即完全丧失营养物质,受到非常强烈的压力,并在迅速改变。
[0119] 类似的,这些测量表明,基于使用的提取物浓度,与未经处理的细胞相比,用所述提取物处理的细胞的活性提高了15%-30%。因此,这些结果明确地表明,根据本发明的棉花纤维提取物具有显著的细胞保护潜能。
[0120] 实施例4-棉花纤维提取物对抗渗透压冲击的保护功效验证
[0121] 本研究在LabtecksTM处于对数生长期的HaCaT人角化细胞上进行。然后,在0.5%的棉花纤维提取物的存在下,将细胞处理1小时。然后去除培养基,角化细胞在高渗培养基中培养1小时(即包含DMEM和500mM的氯化钠)。
[0122] 然后为了研究细胞活性,进行MTT试验(如上所述)。
[0123] 这个试验结果表明,当所述细胞受到渗透压冲击时,细胞活性减少一半。此外,结果表明,与对照细胞(即未经提取物处理但受到渗透压冲击的)相比,用棉花纤维提取物进行预处理提高了32%的角化细胞活性。
[0124] 实施例5-棉花纤维提取物对DNA保护的功效验证
[0125] 进行与实施例3相同的试验:细胞受到营养丧失导致的压力(“食物饥饿”)。
[0126] 受到压力后,进行彗星电泳法以评估与未经提取物处理的细胞相比,用棉花纤维提取物处理的细胞的DNA损伤。
[0127] 彗星电泳法或“单细胞凝胶电泳”是用于观察单个细胞上单链或双链DNA断裂的快速琼脂糖微凝胶电泳技术。
[0128] 处理后,将细胞限制于琼脂糖凝胶中,在包含洗涤剂的高盐度缓冲液中裂解。然后,DNA在浴中变性,随后经过短暂的电泳,然后用碘化丙啶检测。改变的细胞DNA以近似于彗星的形状,与断裂数量成正比地向阳极拉伸。彗星的“尾部”可发现高度降解的DNA。未受损伤的细胞仍保持圆形,DNA在彗星“头部”保持聚集。
[0129] 采用软件测定DNA降解比例来评价DNA的损伤。
[0130] 结果表明,受到营养丧失的细胞受到了压力,其DNA被降解。此外,结果表明,与对照细胞(即未经提取物处理但受到压力的细胞)相比,棉花纤维提取物处理过的细胞DNA的保护提高了45%。因此,棉花纤维提取物对DNA保护作用显著。
[0131] 实施例6-志愿者保湿试验(临床试验)
[0132] 本研究在8位年龄为21-39岁的志愿者中进行,双次并对照。
[0133] 局部施用根据实施例1的棉花纤维提取物,1.5%在标准化妆品制剂中,以获得化妆品组合物。由一位专业人员完成一次单独施用。
[0134] 在0和3小时的时间进行评估。
[0135] 采用非介入技术,使用VivascopeTM观察皮肤。
[0136] 定量评价的标准是角质层的厚度和颗粒层的厚度。
[0137] 结果:观察到在施用了包含棉花纤维提取物的化妆品组合物3个小时以后,角质层厚度明显下降。
[0138]
[0139] 结论:角质层厚度的下降是皮肤良好保湿和健康外现的特征。因此,根据本发明的组合物可能获得良好的皮肤保湿。
[0140] 实施例7-志愿者保湿试验(二期临床试验协议)
[0141] 本研究在8位年龄为21-39岁的志愿者中进行,双次并对照。
[0142] 局部施用根据实施例1的棉花纤维提取物,1.5%在标准化妆品制剂中,以获得化妆品组合物。由一位专业人员完成一次单独施用。
[0143] 在0和3小时的时间进行评估。
[0144] 所用评估方法为Comeometer CM825。
[0145] 结果如图1曲线所示。
[0146] 结果:
[0147]
[0148] sem=标准误差
[0149] 结论:施用棉花纤维提取物3小时后,皮肤保湿显著提高。因此,根据本发明的组合物可能获得良好的皮肤保湿。
[0150] 实施例8-组合物制备
[0151] 1-组合物1
[0152]
[0153]
[0154] 2-水包油乳液
[0155] 油相:
[0156]
[0157] 水相:
[0158]
[0159] 3-凝胶
[0160]
[0161] 4-洗液
[0162]
[0163]
[0164] 5-洗发水
[0165]
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