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一种延缓醉酒的护肝片及其制备方法

阅读:447发布:2022-10-05

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1.一种延缓醉酒的护肝片,其特征在于,包括原料老鸦瓣。
2.根据权利要求1所述延缓醉酒的护肝片,其特征在于,包括下述重量份的原料:老鸦瓣提取物200-400份、胃黏膜保护剂400-500份。
3.根据权利要求2所述延缓醉酒的护肝片,其特征在于,还包括下述原料:乳糖、木糖醇、薄荷香精、香蕉香精、硬脂酸镁;优选地,所述原料的重量份为:乳糖200-300份、木糖醇
100-200份、薄荷香精5-10份、香蕉香精5-10份、硬脂酸镁5-10份。
4.根据权利要求3所述延缓醉酒的护肝片,其特征在于,包括下述重量份的原料:老鸦瓣提取物300份、胃黏膜保护剂450份、乳糖250份、木糖醇150份、薄荷香精8份、香蕉香精8份、硬脂酸镁8份。
5.根据权利要求2所述延缓醉酒的护肝片,其特征在于,所述胃黏膜保护剂为:酸镁、硫糖铝或铋剂。
6.权利要求1-5之一所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备老鸦瓣提取物;
(2)将老鸦瓣提取物、胃黏膜保护剂、乳糖、木糖醇分别粉碎,并混合搅拌均匀,得混合粉末;
(3)向混合粉末中依次加入香蕉香精、薄荷香精,混合搅拌均匀,加入乙醇制软材、制粒、整粒,再加入硬脂酸镁,混合搅拌均匀压片得所述延缓醉酒的护肝片。
7.根据权利要求6所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所得混合粉末的细度为80-120目;步骤(3)中,所加乙醇的浓度为50%-70%。
8.根据权利要求6所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,其特征在于,所述老鸦瓣提取物的制备方法,包括以下步骤:
a、粉碎老鸦瓣,用浓度为80%-90%乙醇回流提取老鸦瓣粉末,待提取完毕,过滤除去滤渣,得滤液;如此重复三次,并合并三次回流提取所得滤液,得总滤液;减压浓缩回收总滤液中的乙醇,得胶质溶液,向胶质水溶液中加入水,混合搅拌均匀,静置,过滤,得滤液和滤渣,用水冲洗滤渣2-3次,得冲洗液和不溶于水的有效成分a,合并冲洗液和滤液得水溶液;
b、调节水溶液的pH值为2,再向水溶液中加入三氯甲烷振摇萃取至三氯甲烷萃取液为无色,用300ml、5%的氢化钠溶液洗涤三氯甲烷萃取液,振摇均匀,静置,分取三氯甲烷混合液,合并酸水层和水层得有效成分b;
c、向三氯甲烷混合液中加入无水硫酸钠,混合搅拌均匀,过滤,得三氯甲烷溶液,蒸馏三氯甲烷溶液得胶状物,向胶状物中加入乙酸乙酯,加热溶解过滤,得不溶物质有效成分c和乙酸乙酯溶液;
d、静置乙酸乙酯溶液,室温结晶,过滤得粗秋水仙碱和母液d;
e、向粗秋水仙碱中加入三氯甲烷,加热溶解过滤,得不溶于三氯甲烷的有效成分e和三氯甲烷溶液;
f、蒸馏三氯甲烷溶液,待除去1/2三氯甲烷时停止加热,剩余三氯甲烷溶液静置过夜,过滤,得含有有效成分f的滤液和结晶秋水仙碱;
g、向结晶秋水仙碱中加入乙酸乙酯,加热溶解,放置结晶,过滤,得秋水仙碱纯品和含有有效成分g的乙酸乙酯溶液;
h、分别对液状的有效成分进行浓缩干燥,合并有效成分并冷冻干燥得所述老鸦瓣提取物。
9.根据权利要求8所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,其特征在于,步骤a中,所加水的量为胶质水溶液重量的3-5倍;步骤b中,使用浓度为10%的硫酸调节水溶液的pH值为2。
10.根据权利要求8所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,其特征在于,步骤c中,所加乙酸乙酯的量为胶状物重量的4-6倍。

说明书全文

一种延缓醉酒的护肝片及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及药品技术领域,具体涉及一种延缓醉酒的护肝片及其制备方法。

背景技术

[0002] 酒在人们交际应酬及生活中扮演着重要的色。随着人们生活平的提高,酒的消费呈逐年增长趋势,其给社会和人类带来利益的同时,也给人体造成了一定的伤害及引发了各种不良行为。
[0003] 酒精,已被联合国列为一级致癌物。酒精吸收于体内时,在肝脏代谢过程中产生许多有毒性的代谢产物,易导致肝脏的损伤,进而损害人体的其他器官。在美国,酒精性肝硬化是前七位死亡率较高的疾病之一,占肝硬化发病率的80%以上。我国酒精消费日益庞大,酒精中毒尤其急性酒精中毒的人数与日俱增。酒精对人体的损害是多方面的,如肝脏、神经、生殖毒性等。此外,酒后容易引起打架、醉驾等不良社会现象。
[0004] 现有技术中针对饮酒者的解酒方面,研究了大量的关于解酒护肝的技术,尽管如此,现有技术中的解酒保肝技术均存在着众多缺陷,主要集中在:兼顾解酒毒、清热败火、促进肝脏解毒的功能较弱,难以缓解过量饮酒者的头疼、头晕、恶心、呕吐、干渴、上火等等症状,使得肝脏受损程度依然较大。

发明内容

[0005] 本发明的目的是提供一种能在体内快速形成一种保护膜,减缓酒精的吸收,同时发挥对于已经吸收的酒精造成的肝功失衡起到降酶作用的护肝片。
[0006] 一种延缓醉酒的护肝片,其特征在于,包括原料老鸦瓣。
[0007] 进一步地,所述延缓醉酒的护肝片,包括下述重量份的原料:老鸦瓣提取物200-400份、胃黏膜保护剂400-500份。
[0008] 进一步地,所述延缓醉酒的护肝片,还包括下述原料:乳糖、木糖醇、薄荷香精、香蕉香精、硬脂酸镁;优选地,所述原料的重量份为:乳糖200-300份、木糖醇100-200份、薄荷香精5-10份、香蕉香精5-10份、硬脂酸镁5-10份。
[0009] 进一步地,所述延缓醉酒的护肝片,包括下述重量份的原料:老鸦瓣提取物300份、胃黏膜保护剂450份、乳糖250份、木糖醇150份、薄荷香精8份、香蕉香精8份、硬脂酸镁8份。
[0010] 进一步地,所述胃黏膜保护剂为:酸镁、硫糖铝或铋剂。铋剂为构椽酸铋、胶体果胶铋或次水杨酸铋。
[0011] 所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,包括以下步骤:
[0012] (1)制备老鸦瓣提取物;
[0013] (2)将老鸦瓣提取物、胃黏膜保护剂、乳糖、木糖醇分别粉碎,并混合搅拌均匀,得混合粉末;
[0014] (3)向混合粉末中依次加入香蕉香精、薄荷香精,混合搅拌均匀,加入乙醇制软材、制粒、整粒,再加入硬脂酸镁,混合搅拌均匀压片得所述延缓醉酒的护肝片。
[0015] 本发明所述延缓醉酒的护肝片,以脱去秋水仙的老鸦瓣提取物和胃黏膜保护剂为主药,脱去秋水仙碱的老鸦瓣提取物具有保肝降酶的作用,脱去秋水仙碱的老鸦瓣提取物可通过抑制过度化应激,保护内源性抗氧化系统,以及提高ALDH的活性,改善酒精导致的肝损伤,起到保肝降酶的作用;而胃黏膜保护剂可在体内快速形成一种保护膜,缓解酒精的吸收,与老鸦瓣提取物发挥着协同作用。
[0016] 老鸦瓣提取物,老鸦瓣(学名:Tulipa edulis(Miq.)Baker)是百合科、郁金香属的植物别名光慈姑。具有清热解毒、消肿散结的功效,常用来治疗痈疽恶疮、咽痛喉痹、蛇虫咬伤等症状。
[0017] 胃黏膜保护剂是指有预防和治疗胃黏膜损伤,保护胃黏膜,促进组织修复和溃疡愈合作用的药物;可增加胃黏膜血流;增加胃黏膜细胞黏液和碳酸氢盐的分泌;增加胃黏膜细胞前列腺素的合成;增加胃黏膜和黏液中磷脂的含量,从而增加黏液层的疏水性。胃黏膜保护剂种类很多,有的还兼有一定的抗酸作用和杀灭幽螺杆菌的作用。
[0018] 进一步地,步骤(2)中,所得混合粉末的细度为80-120目;步骤(3)中,所加乙醇的浓度为50%-70%。
[0019] 优选地,所述老鸦瓣提取物的制备方法,包括以下步骤:
[0020] a、粉碎老鸦瓣,用浓度为80%-90%乙醇回流提取老鸦瓣粉末,待提取完毕,过滤除去滤渣,得滤液;如此重复三次,并合并三次回流提取所得滤液,得总滤液;减压浓缩回收总滤液中的乙醇,得胶质水溶液,向胶质水溶液中加入水,混合搅拌均匀,静置,过滤,得滤液和滤渣,用水冲洗滤渣2-3次,得冲洗液和不溶于水的有效成分a,合并冲洗液和滤液得水溶液;
[0021] b、调节水溶液的pH值为2,再向水溶液中加入三氯甲烷振摇萃取至三氯甲烷萃取液为无色,用300ml、5%的氢氧化钠溶液洗涤三氯甲烷萃取液,振摇均匀,静置,分取三氯甲烷混合液,合并酸水层和碱水层得有效成分b;
[0022] c、向三氯甲烷混合液中加入无水硫酸钠,混合搅拌均匀,过滤,得三氯甲烷溶液,蒸馏三氯甲烷溶液得胶状物,向胶状物中加入乙酸乙酯,加热溶解过滤,得不溶物质有效成分c和乙酸乙酯溶液;
[0023] d、静置乙酸乙酯溶液,室温结晶,过滤得粗秋水仙碱和母液d;
[0024] e、向粗秋水仙碱中加入三氯甲烷,加热溶解过滤,得不溶于三氯甲烷的有效成分e和三氯甲烷溶液;
[0025] f、蒸馏三氯甲烷溶液,待除去1/2三氯甲烷时停止加热,剩余三氯甲烷溶液静置过夜,过滤,得含有有效成分f的滤液和结晶秋水仙碱;
[0026] g、向结晶秋水仙碱中加入乙酸乙酯,加热溶解,放置结晶,过滤,得秋水仙碱纯品和含有有效成分g的乙酸乙酯溶液;
[0027] h、分别对液状的有效成分进行浓缩干燥,合并有效成分并冷冻干燥得所述老鸦瓣提取物。合并有效成分后,取少量混合的有效成分,加水溶解,滴加浓硝酸,如溶液为无色,则将混合有效成分进行冷冻干燥;如显蓝色则混合的有效成分加水溶解并重复上述b-g操作步骤,至有效成分加水溶解,滴加浓硝酸为无色为止。
[0028] 进一步地,步骤a中,所加水的量为胶质水溶液重量的3-5倍。
[0029] 进一步地,步骤b中,使用浓度为10%的硫酸调节水溶液的pH值为2。
[0030] 进一步地,步骤c中,所加乙酸乙酯的量为胶状物重量的4-6倍。
[0031] 本发明的有益效果为:本发明所述延缓醉酒的护肝片以脱去秋水仙碱的老鸦瓣提取物和胃黏膜保护剂为主药,通过药物能在体内形成一种保护膜并可改善体内丙酸氨基转移酶(ALT)活性、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、总抗氧化能(TEAC)和乙脱氢酶(ALDH)的活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、总SOD活性、还原性谷胱甘肽(GSH)的含量、丙二醛(MDA)的含量或活性,来减缓酒精吸收的同时抑制酒精导致的过度氧化应激,保护内源性抗氧化系统,以及提高ALDH的活性,从而发挥延缓醉酒,改善酒精性肝损伤的功效。附图说明
[0032] 图1:小鼠肝脏病理切片急性研究正常组图;
[0033] 图2:小鼠肝脏病理切片急性研究模型组图;
[0034] 图3:小鼠肝脏病理切片急性研究低剂量组图;
[0035] 图4:小鼠肝脏病理切片急性研究中剂量组图;
[0036] 图5:小鼠肝脏病理切片急性研究高剂量组图;
[0037] 图6:小鼠肝脏病理切片急性研究阳性药组图;
[0038] 图7:小鼠肝脏病理切片慢性研究正常组图;
[0039] 图8:小鼠肝脏病理切片慢性研究模型组图;
[0040] 图9:小鼠肝脏病理切片慢性研究低剂量组图;
[0041] 图10:小鼠肝脏病理切片慢性研究中剂量组图;
[0042] 图11:小鼠肝脏病理切片慢性研究高剂量组图;
[0043] 图12:小鼠肝脏病理切片慢性研究阳性药组图;
[0044] 图13:小鼠肝脏脂肪变性正常组图;
[0045] 图14:小鼠肝脏脂肪变性模型组图;
[0046] 图15:小鼠肝脏脂肪变性低剂量组图;
[0047] 图16:小鼠肝脏脂肪变性中剂量组图;
[0048] 图17:小鼠肝脏脂肪变性高剂量组图;
[0049] 图18:小鼠肝脏脂肪变性阳性药组图;

具体实施方式

[0050] 实施例1
[0051] 一种延缓醉酒的护肝片,包括下述重量份的原料:老鸦瓣提取物200g、胃黏膜保护剂400g。
[0052] 实施例2
[0053] 一种延缓醉酒的护肝片,包括下述重量份的原料:老鸦瓣提取物200g、胃黏膜保护剂400g、乳糖200g、木糖醇100g、薄荷香精5g、香蕉香精5g、硬脂酸镁5g;
[0054] 所述胃黏膜保护剂为:铝碳酸镁;
[0055] 所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,包括以下步骤:
[0056] (1)制备老鸦瓣提取物;
[0057] 1.1、粉碎老鸦瓣,用浓度为80%乙醇回流提取老鸦瓣粉末,待提取完毕,过滤除去滤渣,得滤液;如此重复三次,并合并三次回流提取所得滤液,得总滤液;减压浓缩回收总滤液中的乙醇,得胶质水溶液,向胶质水溶液中加入水,所加水的量为胶质水溶液重量的3倍,混合搅拌均匀,静置,过滤,得滤液和滤渣,用水冲洗滤渣2-3次,得冲洗液和不溶于水的有效成分a,合并冲洗液和滤液得水溶液;
[0058] 1.2、用浓度为10%的硫酸调节水溶液的pH值为2,再向水溶液中加入三氯甲烷振摇萃取至三氯甲烷萃取液为无色,用300ml、5%的氢氧化钠溶液洗涤三氯甲烷萃取液,振摇均匀,静置,分取三氯甲烷混合液,合并酸水层和碱水层得有效成分b;
[0059] 1.3、向三氯甲烷混合液中加入无水硫酸钠,混合搅拌均匀,过滤,得三氯甲烷溶液,蒸馏三氯甲烷溶液得胶状物,向胶状物中加入乙酸乙酯,所加乙酸乙酯的量为胶状物重量的4倍,加热溶解过滤,得不溶物质有效成分c和乙酸乙酯溶液;
[0060] 1.4、静置乙酸乙酯溶液,室温结晶,过滤得粗秋水仙碱和母液d;
[0061] 1.5、向粗秋水仙碱中加入2倍量的三氯甲烷,加热溶解过滤,得不溶于三氯甲烷的有效成分e和三氯甲烷溶液;
[0062] 1.6、蒸馏三氯甲烷溶液,待除去1/2三氯甲烷时停止加热,剩余三氯甲烷溶液静置过夜,过滤,得含有有效成分f的滤液和结晶秋水仙碱;
[0063] 1.7、向结晶秋水仙碱中加入5倍量的乙酸乙酯,加热溶解,放置结晶,过滤,得秋水仙碱纯品和含有有效成分g的乙酸乙酯溶液;
[0064] 1.8、分别对液状的有效成分进行浓缩干燥,合并有效成分并冷冻干燥得所述老鸦瓣提取物。
[0065] (2)将老鸦瓣提取物、胃黏膜保护剂、乳糖、木糖醇分别粉碎,并混合搅拌均匀,得细度为80目的混合粉末;
[0066] (3)向混合粉末中依次加入香蕉香精、薄荷香精,混合搅拌均匀,加入浓度为50%的乙醇制软材、制粒、整粒,再加入硬脂酸镁,混合搅拌均匀压片得所述延缓醉酒的护肝片。
[0067] 实施例3
[0068] 一种延缓醉酒的护肝片,包括下述重量份的原料:老鸦瓣提取物300g、胃黏膜保护剂450g、乳糖250g、木糖醇150g、薄荷香精8g、香蕉香精8g、硬脂酸镁8g;
[0069] 所述胃黏膜保护剂为:枸橼酸泌钾;
[0070] 所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,包括以下步骤:
[0071] (1)制备老鸦瓣提取物;
[0072] 1.1、粉碎老鸦瓣,用浓度为85%乙醇回流提取老鸦瓣粉末,待提取完毕,过滤除去滤渣,得滤液;如此重复三次,并合并三次回流提取所得滤液,得总滤液;减压浓缩回收总滤液中的乙醇,得胶质水溶液,向胶质水溶液中加入水,所加水的量为胶质水溶液重量的4倍,混合搅拌均匀,静置,过滤,得滤液和滤渣,用水冲洗滤渣2-3次,得冲洗液和不溶于水的有效成分a,合并冲洗液和滤液得水溶液;
[0073] 1.2、用浓度为10%的硫酸调节水溶液的pH值为2,再向水溶液中加入三氯甲烷振摇萃取至三氯甲烷萃取液为无色,用300ml、5%的氢氧化钠溶液洗涤三氯甲烷萃取液,振摇均匀,静置,分取三氯甲烷混合液,合并酸水层和碱水层得有效成分b;
[0074] 1.3、向三氯甲烷混合液中加入无水硫酸钠,混合搅拌均匀,过滤,得三氯甲烷溶液,蒸馏三氯甲烷溶液得胶状物,向胶状物中加入乙酸乙酯,所加乙酸乙酯的量为胶状物重量的5倍,加热溶解过滤,得不溶物质有效成分c和乙酸乙酯溶液;
[0075] 1.4、静置乙酸乙酯溶液,室温结晶,过滤得粗秋水仙碱和母液d;
[0076] 1.5、向粗秋水仙碱中加入2倍量的三氯甲烷,加热溶解过滤,得不溶于三氯甲烷的有效成分e和三氯甲烷溶液;
[0077] 1.6、蒸馏三氯甲烷溶液,待除去1/2三氯甲烷时停止加热,剩余三氯甲烷溶液静置过夜,过滤,得含有有效成分f的滤液和结晶秋水仙碱;
[0078] 1.7、向结晶秋水仙碱中加入5倍量的乙酸乙酯,加热溶解,放置结晶,过滤,得秋水仙碱纯品和含有有效成分g的乙酸乙酯溶液;
[0079] 1.8、分别对液状的有效成分进行浓缩干燥,合并有效成分并冷冻干燥得所述老鸦瓣提取物。
[0080] (2)将老鸦瓣提取物、胃黏膜保护剂、乳糖、木糖醇分别粉碎,并混合搅拌均匀,得细度为100目的混合粉末;
[0081] (3)向混合粉末中依次加入香蕉香精、薄荷香精,混合搅拌均匀,加入浓度为60%的乙醇制软材、制粒、整粒,再加入硬脂酸镁,混合搅拌均匀压片得所述延缓醉酒的护肝片。
[0082] 实施例4
[0083] 一种延缓醉酒的护肝片,包括下述重量份的原料:老鸦瓣提取物400g、胃黏膜保护剂500g、乳糖300g、木糖醇200g、薄荷香精10g、香蕉香精10g、硬脂酸镁10g;
[0084] 所述胃黏膜保护剂为:硫糖铝;
[0085] 所述延缓醉酒的护肝片的制备方法,包括以下步骤:
[0086] (1)制备老鸦瓣提取物;
[0087] 1.1、粉碎老鸦瓣,用浓度为90%乙醇回流提取老鸦瓣粉末,待提取完毕,过滤除去滤渣,得滤液;如此重复三次,并合并三次回流提取所得滤液,得总滤液;减压浓缩回收总滤液中的乙醇,得胶质水溶液,向胶质水溶液中加入水,所加水的量为胶质水溶液重量的5倍,混合搅拌均匀,静置,过滤,得滤液和滤渣,用水冲洗滤渣2-3次,得冲洗液和不溶于水的有效成分a,合并冲洗液和滤液得水溶液;
[0088] 1.2、用浓度为10%的硫酸调节水溶液的pH值为2,再向水溶液中加入三氯甲烷振摇萃取至三氯甲烷萃取液为无色,用300ml、5%的氢氧化钠溶液洗涤三氯甲烷萃取液,振摇均匀,静置,分取三氯甲烷混合液,合并酸水层和碱水层得有效成分b;
[0089] 1.3、向三氯甲烷混合液中加入无水硫酸钠,混合搅拌均匀,过滤,得三氯甲烷溶液,蒸馏三氯甲烷溶液得胶状物,向胶状物中加入乙酸乙酯,所加乙酸乙酯的量为胶状物重量的6倍,加热溶解过滤,得不溶物质有效成分c和乙酸乙酯溶液;
[0090] 1.4、静置乙酸乙酯溶液,室温结晶,过滤得粗秋水仙碱和母液d;
[0091] 1.5、向粗秋水仙碱中加入2倍量的三氯甲烷,加热溶解过滤,得不溶于三氯甲烷的有效成分e和三氯甲烷溶液;
[0092] 1.6、蒸馏三氯甲烷溶液,待除去1/2三氯甲烷时停止加热,剩余三氯甲烷溶液静置过夜,过滤,得含有有效成分f的滤液和结晶秋水仙碱;
[0093] 1.7、向结晶秋水仙碱中加入5倍量的乙酸乙酯,加热溶解,放置结晶,过滤,得秋水仙碱纯品和含有有效成分g的乙酸乙酯溶液;
[0094] 1.8、分别对液状的有效成分进行浓缩干燥,合并有效成分并冷冻干燥得所述老鸦瓣提取物。
[0095] (2)将老鸦瓣提取物、胃黏膜保护剂、乳糖、木糖醇分别粉碎,并混合搅拌均匀,得细度为120目的混合粉末;
[0096] (3)向混合粉末中依次加入香蕉香精、薄荷香精,混合搅拌均匀,加入浓度为70%的乙醇制软材、制粒、整粒,再加入硬脂酸镁,混合搅拌均匀压片得所述延缓醉酒的护肝片。
[0097] 本发明所述延缓醉酒的护肝片的作用研究:
[0098] 1、本发明所述延缓醉酒的护肝片的急性试验研究
[0099] 1.1、随机取72只体重和身体健康相当的小鼠,随机分为6组,正常组、模型组、低剂量组(50mg/kg)、中剂量组(100mg/kg)、高剂量组(150mg/kg)、阳性组(硫普罗宁50mg/kg)。造模:每天灌胃二锅头白酒(56度)16mL/kg(约7g/kg体重)一次;ig白酒前3h,ig相应药物或等容积蒸馏水,灌胃体积均为0.2mL/10g体重。于造模第9天禁食12h,第10天给予白酒4h后,
3.5%水合氯醛(0.1mL/10g体重)麻醉;
[0100] 1.1.1、分别取6组小鼠的肝脏右叶:用冷生理盐水冲洗,拭干,将肝脏右叶浸泡在4%多聚甲醛溶液中,用于做病理切片(HE染色观察肝脏组织病理学改变),观察病理切片如图1-6所示;
[0101] 从图1-6可知:正常组小鼠肝组织中肝小叶清晰可见,中央静脉周围肝索和肝血窦呈放射状紧密排列。9天后,模型组出现肝细胞肿胀、细胞核浓缩,肝索和肝血窦排列紊乱,肝血窦扩张,血管充血明显。各剂量下的延缓醉酒的护肝片和阳性药治疗后,肝组织损伤有一定程度减轻,表现为肝小叶和肝索比较清晰,肝血窦扩张减轻;中剂量组、高剂量组和阳性药组的血管充血有明显改善。总体而言,延缓醉酒的护肝片可以减轻酒精对肝组织的损伤。
[0102] 1.1.2、分别抽取6组小鼠的腹主动脉血,并分离血浆,测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量活性,求其平均值;
[0103] 1.1.3、分别取6组小鼠的肝脏左叶:称取肝脏左叶,每0.5g加入4.5ml生理盐水,研磨得10%的肝匀浆;测定肝匀浆中总抗氧化能力(TEAC)和乙醛脱氢酶(ALDH)的活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、总SOD活性、还原性谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)的含量,求平均值,结果如表1所示:
[0104] 表1
[0105]
[0106]
[0107] 从表1可以得出:
[0108] 与正常组相比,模型组小鼠血浆中的ALT和AST的活性均显著升高,而低、中、高剂量组小鼠血浆中的ALT和AST的活性相对于模型组均有所降低,且随着剂量的增多,其活性下降的越明显,且高剂量组所达到的效果优于阳性药组所达到的效果。ALT和AST是肝脏病变程度的重要指标,其活性下降说明该延缓醉酒的护肝片可减轻酒精引起的急性肝损伤。而且相对于阳性药来说,该延缓醉酒的护肝片长期服用无副作用
[0109] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的ALDH的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中ALDH的活性相对于模型组均显著升高,并优于阳性药组。肝脏中的乙醛脱氢酶(ALDH)可将乙醇氧化为乙醛,生成的乙醛作为底物进一步在ALDH催化下转变为无害的乙酸。结果说明延缓醉酒的护肝片可通过增强ALDH的活性,从而增加乙醇的代谢。
[0110] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的MDA的活性显著升高,而低、中、高剂量组小鼠血浆中MDA的活性相对于模型组均降低,MDA是膜脂过氧化最重要的产物之一,它的产生能加剧膜的损伤,因此可通过MDA来判断膜脂过氧化的程度。通过结果显示,可初步判断该延缓醉酒的护肝片能降低脂膜的损伤。
[0111] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的TEAC显著降低,而低、中、高剂量组的小鼠肝脏中的TEAC相对与模型组均增强,说明该延缓醉酒的护肝片可增强由酒精导致的肝脏总抗氧能力下降。
[0112] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的SOD的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中SOD的活性相对于模型组均升高,说明该延缓醉酒的护肝片可减少乙醇或其代谢产物对肝脏的加强氧化损伤。超氧阴离子自由基是活性氧的一种,具有极强的氧化能力,是生物氧毒害的重要因素之一。SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子,它可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢,尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧,但体内的CAT和GPx会立即将其分解为完全无害的水。由此可以得出延缓醉酒的护肝片可通过增强SOD的活性来降低乙醇或其他代谢物对肝脏的损伤
[0113] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的CAT的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中CAT的活性相对于模型组均升高。酒精进入机体后,经肝脏代谢经肝脏代谢释放出的过氧化氢,其对机体有害,CAT可将过氧化氢分解成对机体无害的H2O和O2。延缓醉酒的护肝片通过提高小鼠肝脏中CAT的活性,减少由酒精引起的过氧化氢对机体的伤害。
[0114] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的GPx的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中GPx的活性相对于模型组均升高。GPx是一种以GSH为底物的重要抗氧化酶,通过保护机体免受H2O2造成的伤害,能降低LPO程度。
[0115] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的GSH的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中GSH的活性相对于模型组均升高;GSH分子特点是具有活性巯基(-SH),可参与机体多种重要的生化反应,保护体内重要酶蛋白巯基不被氧化和灭活。延缓醉酒的护肝片通过提高GSH的含量,维持酒后机体中的生化反应正常进行。
[0116] 通过所述延缓醉酒的护肝片的急性试验研究可得出本发明所述延缓醉酒的护肝片通过抑制过度氧化应激,保护内源性抗氧化系统,以及提高ALDH的活性,从而发挥延缓醉酒、改善酒精性肝损伤的功效。
[0117] 2、本发明所述延缓醉酒的护肝片的慢性试验研究
[0118] 2.1、随机取72只体重和身体健康相当的小鼠,随机分为6组,正常组、模型组、低剂量组(50mg/kg)、中剂量组(100mg/kg)、高剂量组(150mg/kg)、阳性组(硫普罗宁30mg/kg)。造模:用二锅头白酒(56度)5mL/kg灌胃2次/d;同时给予不同剂量药物,1次/d,连续4周。末次给药后,禁食12h,3.5%水合氯醛(0.1mL/10g体重)麻醉。
[0119] 2.1.1、分别取6组小鼠的肝脏右叶:用冷生理盐水冲洗,拭干,将肝脏右叶浸泡在4%多聚甲醛溶液中,用于做病理切片(HE染色HE染色观察肝脏组织病理学改变,油红O染色观察肝脏脂肪变性),观察病理切片如图7-18所示;
[0120] 从图7-12可知:正常组肝组织中肝小叶清晰可见,中央静脉周围肝索和肝血窦呈放射状紧密排列。28天后,模型组肝细胞表现出肝细胞肿胀细胞核浓缩,肝索和肝血窦紊乱不清,血管充血明显。中剂量和高剂量延缓醉酒的护肝片及阳性药治疗后,肝组织损伤减轻,肝小叶、肝索和肝血窦变清晰,充血减轻;低剂量组也可见一定程度的损伤减轻,但不明显。总体而言,延缓醉酒的护肝片对慢性酒精性的肝损伤具有改善作用。
[0121] 从图13-18可知:模型组肝细胞发生脂肪变性、可见大小不一的脂肪颗粒。各剂量的延缓醉酒的护肝片及阳性药治疗后,脂肪变性减轻,脂肪颗粒减少。总体而言,延缓醉酒的护肝片可改善慢性酒精性肝细胞脂肪变性。
[0122] 2.1.2、分别抽取6组小鼠的腹主动脉血,并分离血浆,测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,求其平均值;
[0123] 2.1.3、分别取6组小鼠的肝脏左叶:称取肝脏左叶,每0.5g加入4.5ml生理盐水,研磨得10%的肝匀浆;测定肝匀浆中总抗氧化能力(TEAC)和乙醛脱氢酶(ALDH)的活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性、过氧化氢酶(CAT)的活性、总SOD活性、还原性谷胱甘肽(GSH)的含量、丙二醛(MDA)的含量,求平均值,结果如表2所示:
[0124] 表2
[0125]
[0126] 从表2可以得出:
[0127] 与正常组相比,模型组小鼠血浆中的ALT和AST的活性均显著升高,而低、中、高剂量组小鼠血浆中的ALT和AST的活性相对于模型组均有所降低,其活性下降说明该延缓醉酒的护肝片可减轻长期饮酒所引起的慢性肝损伤。
[0128] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的ALDH的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中ALDH的活性相对于模型组均显著升高,说明该延缓醉酒的护肝片长期服用,仍具有促进酒精代谢,保护肝脏的作用。
[0129] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的MDA的活性显著升高,而低、中、高剂量组小鼠血浆中MDA的活性相对于模型组均降低,说明该延缓醉酒的护肝片可减轻酒精导致的过度氧化应激。
[0130] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的TEAC显著降低,而低、中、高剂量组的小鼠肝脏中的TEAC相对与模型组均增强,说明该延缓醉酒的护肝片可增强由酒精导致的肝脏总抗氧能力下降。
[0131] 正常组相比,模型组小鼠肝脏中的SOD的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中SOD的活性相对于模型组均升高,说明该延缓醉酒的护肝片针对长期饮酒者,也可减少乙醇或其代谢产物对肝脏的加强氧化损伤。
[0132] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的CAT的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中CAT的活性相对于模型组均升高。
[0133] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的GPx的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中GPx的活性相对于模型组均升高。
[0134] 与正常组相比,模型组小鼠肝脏中的GSH的活性显著降低,而低、中、高剂量组小鼠血浆中GSH的呼吸相对于模型组均升高;
[0135] 通过延缓醉酒的护肝片的慢性试验研究,说明本发明所述延缓醉酒的护肝片针对长期饮酒者同样具有延缓醉酒速度,保护肝脏的作用。
[0136] 本发明不局限于上述最佳实施方式,任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品,但不论在其细节上作任何变化,凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案,均落在本发明的保护范围之内。
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